專利名稱：：用于遞送治療劑的疏水核載體組合物及其制備和使用方法用于遞送治療劑的疏水核載體組合物及其制備和-使用方法相關申請信息根據(jù)35USC第119(e)節(jié)，本申請要求享有由在2005年12月19曰提交的美國專利申請11/311，895轉變而來的美國臨時申請60/813,629的優(yōu)先權。政府許可權在此所述的工作在國立老年化醫(yī)學研究院(theNationalInstituteonAging)資助的5R43DK069727-01的政府支持下實施。美國政府在此處提供的主題中可以享有部分權利。
背景技術：
：新藥、制劑以及其他用于施用生理活性肽、蛋白質、有機藥物、其它治療劑和材料的系統(tǒng)的開發(fā)受到實現(xiàn)所需生理效果這一需求的推動。至于肽和蛋白質，它們中的很多都被認為在胃腸道中不穩(wěn)定，因此需要加以穩(wěn)定化或保護或經(jīng)系統(tǒng)循環(huán)遞送。另外，具有低分子量的肽和蛋白質都因腎臟將其從系統(tǒng)循環(huán)中有效清除而傾向于具有短生物半衰期。例如，一部分這樣的肽和蛋白質也可由于被單核細胞/巨噬細胞識別或由于補體成分的調理作用而經(jīng)網(wǎng)狀內皮才聶取^皮清除。許多肽和蛋白質也可能由于蛋白質水解(肽鍵斷裂)而在體內失去活性?？梢允褂盟幬镞f送系統(tǒng)來部分避免這些不希望的效果。有幾種藥物遞送策略可用于肽及蛋白質的體內遞送。首先，可以采用通過泵進行的連續(xù)系統(tǒng)藥物輸注。這一策略的有效性已在臨床實踐中得到證實，但對于需要高度移動性的門診病人來說可行性不高，并且具有相關的生活質量以及潛在的靜脈輸液線感染方面的缺點。第二，肽和蛋白質可包含在可植入泵中，該泵由具有允許藥物(例如)以所需釋放速率擴散的膜的膠嚢組成。由于這些膠嚢容量有限，肽和蛋白質常常應用在濃縮制劑中，由于聚集導致溶解性下降以及可能的比活性下降。多數(shù)情況下，藥物通常被釋放到細胞外空間中并散布在淋巴中。肽或蛋白質的總濃度可能會受到局部淋巴結活性及植入部位淋巴結排出效率的影響。另外可能還會有潛在的針對膠嚢材料的宿主反應，但一般來說這種副作用并不常見。第三，藥物釋放系統(tǒng)可以膠嚢化或者包含在可降解藥物遞送介質或載體例如聚合基質、顆?；蚰?脂質體)中而成為生物可降解的。這些遞送系統(tǒng)通常是可植入的或者可注射的?？芍踩胨幬镞f送系統(tǒng)通常置于表皮下，在此處系統(tǒng)成分通常由于周圍細胞的生物活性(例如，由于釋放的酶降解將這些植入物保持在一起的化學鍵)而緩慢降解。Bogdanov等人的美國專利號5,871,710(在此引用作為參考)公開了一種生物相容性的接枝共聚加成物，其包含聚合載體、與該聚合載體相連的保護鏈、與載體相連或與載體和保護《連相連的才艮道基團、以及用于診斷的可逆相連的Pt(II)。然而，Bogdanov等人并未披露適用于多種治療劑并且具有調節(jié)釋放速率的設置的治療劑遞送組合物。Bolotin的美國專利號7，138，105(在此引用作為參考)公開了一種生物相容性的接枝共聚物，其包含兩側為兩個金屬結合分子的金屬橋，其中一個金屬結合分子為治療劑的一部分或與治療劑共價連接。該金屬橋連接載體和能夠結合金屬的治療劑。仍需要一種適用于多種治療劑并且釋放速率易于控制的持續(xù)釋放治療劑遞送系統(tǒng)。本申請公開了一種由能夠與治療劑可逆結合的疏水核組成的生物相容性組合物，其中可以改變該核的疏水性程度來控制可逆結合的治療劑的釋放速率。
發(fā)明內容本發(fā)明的一個目的是提供一種持續(xù)釋放治療劑遞送系統(tǒng)，其安全、生物相容、易于由已知化學方法和化合物制備、適合多種治療劑，并且可以通過改變遞送系統(tǒng)物理性質的簡單^/L制容易地調節(jié)其釋放速率。本發(fā)明的另一個目的是持續(xù)釋放遞送系統(tǒng)包括用于將治療劑有效遞送至所需部位的靶向部分。本發(fā)明的另一個目的是提供一種治療疾病的方法，包括給有此需要的患者以控制方式和安全、有效、易于調節(jié)的釋放速率遞送治療劑。本發(fā)明的另一個目的是提供一種為了遞送藥物而增溶低溶解度分子的方法。本發(fā)明基于以下事實可以容易地調節(jié)本發(fā)明的載體系統(tǒng)和治療劑之間的疏水相互作用以控制治療劑一或者更廣義地，"負載分子"一的釋放?？梢酝ㄟ^控制載體的疏水性質制備具有高負載能力和可調節(jié)的釋放速率的安全的、無免疫原性的載體。本發(fā)明部分涉及新藥物遞送系統(tǒng)或者顯像劑，及其制備和使用方法。本發(fā)明主要涉及一種疏水核載體組合物，其含有與載體共價連接的疏水基團和通過疏水相互作用與疏水基團結合的目標活性劑(負載分子)。在一個實施方案中，本發(fā)明涉及一種生物相容性疏水核載體組合物，其包含(i)包含骨架的聚合載體，其中該載體是聚賴氨酸、聚天冬氨酸、聚谷氨酸、聚絲氨酸、聚蘇氨酸、聚半胱氨酸、聚甘油、聚乙烯亞胺、天然糖類、胺化多糖、胺化寡糖、聚酰胺胺(polyamidoamine)、聚丙烯酸、多元醇、磺化多糖、磺化寡糖、羧化多糖、羧化寡糖、氨基羧化多糖、氨基羧化寡糖、羧曱基化多糖或羧曱基化寡糖；和(ii)多個能夠結合負載分子并且與聚合載體共價連接的疏水基團，其中每個疏水基團獨立于載體的分子量具有小于1，000道爾頓的分子量，其中該疏水基團是直鏈烷基、支鏈烷基、苯基、萘基、膽固醇、維生素D和/或維生素E。在另一個實施方案中，本發(fā)明涉及一種生物相容性疏水核載體組合物，其包含(i)包含骨架的載體；(ii)多個能夠結合負載分子的疏水基團，其中每個疏水基團與載體共價連接，并且每個疏水基團獨立于聚合載體的重量具有小于大約1,000道爾頓的分子量；和(iii)多個聚合保護側鏈，其中每個保護側鏈與載體共價連接，并且每個保護側鏈獨立于載體的重量具有大約400-20,000道爾頓的分子量。在進一步的實施方案中，上述組合物進一步包含第二組具有共價連接的保護側鏈的疏水基團，其中該疏水基團具有第一和第二末端，第一末端與載體共價連接，第二末端與保護側鏈共價連接；該第二組的疏水基團獨立于載體和保護側鏈的重量具有小于1，000道爾頓的分子量；并且與疏水基團連接的保護側鏈獨立于疏水基團的重量具有400-20，000道爾頓的分子量。在另一個實施方案中，本發(fā)明涉及一種生物相容性疏水核載體組合物，其包含(i)包含骨架的載體；(ii)多個能夠結合負載分子的疏水基團，其中每個疏水基團與載體共價連接，并且每個疏水基團獨立于骨架的重量具有小于大約1,000道爾頓的分子量；和(iii)第二組多個具有共價連接的保護側鏈的疏水基團，其中該疏水基團具有第一和第二末端，第一末端與載體共價連接，第二末端與保護側鏈共價連接；該疏水基團獨立于載體和保護側鏈的重量具有小于1，OOO道爾頓的分子量；并且與疏水基團連接的保護側鏈獨立于疏水基團的重量具有400-20，000道爾頓的分子量。在另一個實施方案中，本發(fā)明涉及一種生物相容性疏水核載體組合物，其包含(i)包含骨架的載體；和(ii)多個具有共價連接的保護側鏈的疏水基團，其中該疏水基團具有第一和第二末端；第一末端與載體共價連接，第二末端與保護側鏈共價連接；該疏水基團獨立于載體和保護側鏈的重量具有150-1000道爾頓的分子量；并且，保護側鏈獨立于載體和疏水基團的重量具有大約400-20,000道爾頓的分子量。在進一步的實施方案中，本發(fā)明涉及任一種上述組合物，其中疏水基團包括烷基。在進一步的實施方案中，烷基包括支鏈烷基。在進一步的實施方案中，烷基包含雙鍵。在進一步的實施方案中，烷基包-OC(CH2)nCH2S-、-HNC(CH2)nCO-、-OCH2(CH2)nCH2--OCH2(CH2)nCH20-括乙基或丙基。在進一步的實施方案中，烷基是丁基、戊基或己基。在進一步的實施方案中，烷基是CH3(CH2)nCH2-、CH3(CH2)nCH2NH-、CH3(CH2)nCO-、CH3(CH2)nCH20-、CH3(CH2)nCH2S-、-OC(CH2)nCH2-、—OC(CH2)nCH2NH-、-OC(CH2)nCO-、-OC(GH2)nCH20-、-HNC(CH2)nCH2-、-HNC(CH2)nCH2NH-、-HNC(CH2)nCH20-、-HNC(CH2)nCH2S-、-OCH2(CH2)nCH2NH-、-OCH2(CH2)nCO-、或-OCH2(CH2)。CH2S-基團;其中"n"為4-34(含)。在進一步的實施方案中，本發(fā)明涉及上述具有與保護側鏈共價連接的疏水鏈的組合物，其中具有共價連接的保護側鏈的疏水鏈獨立地選自-(CH2)4NHCO(CH2)nOC-A-OR3、-(CH2)4NHCO(CH2)nNHCO(CH2)yCO-A-OR3、-CH2OOC(CH2)nOC-A-OR3、-CH2OOC(CH2)nNHCO(CH2)yCO-A-OR3、-CH(CH3)OOC(CH2)nOC-A-OR3、-CH(CH3)OOC(CH2)nNHCO(CH2)yCO-A-OR3、-CH2COOC(CH2)nCO-A-OR3、-CH2COOC(CH2)nNHCO(CH2)yCO-A-OR3、-CH2CONH(CH2)nNHCOCH2CH2-A-OR3、-CH2CONH(CH2)nNHCO(CH2)yCO-A-OR3、-(CH2)2COOC(CH2)nCO-A-OR3、-(CH2)2COOC(CH2)nNHCO(CH2)yCO-A-OR3、-(CH2)2CONH(CH2)nNHCOCH2CH2-A-OR3、-(CH2)2CONH(CH2)nNHCO(CH2)yCO-A-OR3、-(C6H4)OCO(CH2)nCO-A-OR3和-(C6H4)OCO(CH2)nNHCO(CH2)yCO-A-OR3,其中n為2-22;y為2-6;R3為H、(CH2)pCH3或(CH2)pCOOH,其中p為0-7;并且A為[OCH2CH2]x或[OCHCH3CH2]x，其中x為17-250，或總共17-250個單位的[OCH2CH2]和[OCHCH3CH2]的各種組合。在另一個實施方案中，疏水基團包含芳香環(huán)化合物。在進一步的實施方案中，芳香環(huán)是苯基。在進一步的實施方案中，芳香環(huán)是萘基。在進一步的實施方案中，芳香環(huán)化合物是膽固醇。在進一步的實施方案中，芳香環(huán)化合物是熒光素(fluorescien),焚光素中的羧基作為定向分子起作用。在另一個實施方案中，本發(fā)明涉及任一種上述具有保護鏈的組合物，其中保護側鏈包括選自聚乙二醇、聚丙二醇、聚乙二醇和聚丙二醇的共聚物、曱氧基聚乙二醇、曱氧基聚丙二醇、或甲氧基聚乙二醇和甲氧基聚丙二醇的共聚物中的任一種。在進一步的實施方案中，保護側鏈包括聚乙二醇和聚氨基酸、多糖、聚酰胺胺、聚乙烯胺或多核苷酸之一的嵌段共聚物。在進一步的實施方案中，保護側鏈包括包含二羧酸單酯的聚乙二醇的共聚物。在進一步的實施方案中，保護側鏈包括唾液酸鏈。在進一步的實施方案中，保護側鏈的分子量為500-20，000道爾頓。在進一步的實施方案中，保護側鏈包括其單酯化衍生物，優(yōu)選曱氧基聚乙二醇-酯、曱氧基聚丙二醇-酯、或甲氧基聚乙二醇和曱氧基聚丙二醇-酯的共聚物。在進一步的實施方案中，保護側鏈包括聚乙二醇單胺、甲氧基聚乙二醇單胺、聚丙二醇單胺、曱氧基聚丙二醇單胺、聚乙二醇肼、甲氧基聚乙二醇肼、聚丙二醇肼、曱氧基聚丙二醇肼、聚乙二醇咪唑、甲氧基聚乙二醇咪唑、聚丙二醇咪唑、甲氧基聚丙二醇咪唑、聚乙二醇二酸、曱氧基聚乙二醇二酸、聚丙二醇二酸、甲氧基聚丙二醇二酸中的任一種，其中末端胺、肼、咪唑或酸用來連接到載體、疏水基團或靶向分子上。在進一步的實施方案中，保護側鏈包括聚(乙二醇)與一種或幾種由聚氨基酸、聚丙交酯乙交酯共聚物、多糖、聚酰胺胺、聚乙烯亞胺或多核苷酸代表的聚合物(參見聚合載體)的曱氧基聚(乙二醇)咪唑嵌段共聚物，其中這些嵌段優(yōu)選地交替存在，得到優(yōu)選直鏈的嵌段共聚物。在進一步的實施方案中，保護側鏈優(yōu)選地通過單鍵與載體或疏水基團連接。在另一個實施方案中，本發(fā)明涉及任一種具有保護鏈和載體的上述組合物，其中載體包括選自下組的任一種固體支持體、納米顆粒和微粒。在進一步的實施方案中，載體包括嵌段共聚物。在進一步的實施方案中，載體包括聚合載體。在進一步的實施方案中，聚合載體選自聚氨基酸、聚乙烯亞胺、天然糖類、胺化多糖、胺化寡糖、聚酰胺胺、聚丙烯酸、多元醇、磺化多糖、磺化寡糖、羧化多糖、羧化寡糖、氨基羧化多糖、氨基羧化寡糖、羧甲基化多糖和羧曱基化寡糖。在進一步的實施方案中，聚合載體是具有2-560個氨基酸單位的聚氨基酸。在進一步的實施方案中，聚合載體是分子量為1，000-100，000道爾頓的聚氨基酸。在進一步的實施方案中，聚合載體是由單一種類氨基酸組成的聚氨基酸。在進一步的實施方案中，聚合載體是由至少兩種不同種類的氨基酸組成的聚氨基酸。在進一步的實施方案中，聚合載體是一種聚氨基酸并且其中該聚氨基酸是嵌段共聚物。在進一步的實施方案中，聚合載體是一種聚氨基酸并且其中該聚氨基酸包括通過可切割的鍵連接的聚氨基酸片段。在進一步的實施方案中，可切割的鍵是S-S鍵。在進一步的實施方案中，聚合載體是選自聚-L-賴氨酸、聚-D-賴氨酸、聚-a,(3-(2-氨基乙基)-D,L天冬酰胺、聚-L-天冬氨酸、聚-D-天冬氨酸、聚-L-谷氨酸、聚-D-谷氨酸、聚-L-絲氨酸、聚-D-絲氨酸、聚-L-蘇氨酸、聚-D-蘇氨酸、聚-L-酪氨酸或聚-D-酪氨酸的聚氨基酸。在進一步的實施方案中，聚合載體是一種聚氨基酸并且該聚氨基酸是非蛋白質的。在另一個實施方案中，本發(fā)明涉及任一種上述組合物，其進一步包含與保護鏈、疏水基團或載體共價連接的靶向分子。在進一步的實施方案中，本發(fā)明涉及任一種上述具有靶向分子的組合物，其中該靶向分子選自抗體、抗體片段、嵌合抗體、酶、酶的準底物(quasisubstrate)、凝集素、糖配體、肽、蛋白質、受體配體、細胞表面結合蛋白、細胞表面結合肽、細胞表面結合化合物、胞外基質結合肽、胞外基質結合蛋白、胞外基質結合化合物。在另一個實施方案中，本發(fā)明涉及任一種上述組合物，其進一步包含與載體共價連接的定向分子。在進一步的實施方案中，本發(fā)明涉及上述任一種含有定向分子的組合物，其中該定向分子包括肽、硫酸部分、-黃酸部分、磷酸部分、膦酸部分、雙膦酸部分、羧基部分、氨基部分、賴氨酸和精氨酸中的任一種。在進一步的實施方案中，本發(fā)明涉及任一種上述具有定向分子的組合物，其中該定向分子包括可以在聚合骨架和負載分子之間形成橋的金屬離子。在另一個實施方案中，本發(fā)明涉及上述任一種組合物，其進一步包含負載分子，其中該負載分子是可以可逆地結合上述任何組合物的任何分子。在進一步的實施方案中，本發(fā)明涉及任一種上述組合物，其進一步包含與疏水基團、耙向分子、定向分子和/或保護側鏈可解離連接的負載分子的任意組合。在進一步的實施方案中，負載分子是一種顯像劑。在進一步的實施方案中，負載分子是一種治療劑。在進一步的實施方案中，該治療劑是細胞因子、淋巴因子、激素、激素激動劑、激素拮抗劑、抗生素、止痛劑、毒素、光毒素、細胞抑制劑、細胞毒性劑、精神藥物、甾體抗炎藥、非甾體抗炎藥、免疫抑制劑、抗細菌藥、抗病毒藥、抗真菌藥、螯合劑、維生素、蛋白酶抑制劑、殺蟲劑、氨基糖苷、多粘菌素、ACE抑制劑、肽、蛋白質、抗體、抗體片段、重組肽、從植物中分離的肽、從真菌中分離的肽、從動物中分離的肽、從細菌中分離的肽、從病毒中分離的肽、從培養(yǎng)的細胞中分離的肽、合成肽、擬肽化合物、有機化合物、合成有機化合物、從植物中分離的有機化合物、從真菌中分離的有機化合物、從動物中分離的有機化合物、從細菌中分離的有機化合物、從病毒中分離的有機化合物、從培養(yǎng)的細胞中分離的有機化合物、有機金屬化合物、脫氧核糖核酸、核糖核酸、寡核苷酸、核酸衍生物、寡糖、碳水化合物、脂質、光敏性有機化合物和蛋白聚糖。在另一個實施方案中，本發(fā)明涉及任一種上述具有負載分子的組合物，其中負載分子是選自下組的治療劑胰高血糖素樣肽、胰高血糖素樣肽衍生物、依澤那太(exenatide)、胰高血糖素樣肽-1、胰高血糖素樣肽-2、瘦蛋白片段、腸抑胃肽(GIP)、表皮生長因子(EGF)受體配體、EGF、轉化生長因子oc(TGF-a)、P細胞生長因子(Betacellulin)、胃泌素/縮膽嚢素受體配體、胃泌素、縮膽嚢素、溶葡萄球菌素、干擾素、干擾素y、干擾素(3、干擾素oc、白介素-1、白介素-2、白介素-4、白介素-6、白介素-8、白介素-10、白介素-12、腫瘤壞死因子、肺瘤壞死因子a、肺瘤壞死因子p、auristatin、乳鏈菌肽、胰島素、胰島素樣生長因子、生長激素、生長激素釋放激素(GHRH)、神經(jīng)生長因子、腦源性神經(jīng)營養(yǎng)因子、酶、內皮抑制素、制管張素、血小板反應素(trombospondin)、尿激酶、鏈激酶、凝血因子VII、凝血因子VIII、粒細胞-巨噬細胞集落刺激因子(GM-CSF)、粒細胞集落刺激因子(G-CSF)、血小板生成素(thrombopoedin)、降鉤素、曱狀旁腺素(PTH)及其片段、促紅細胞生成素、心房鈉尿肽、單克隆抗體、單克隆抗體片段、促生長素抑制素、蛋白酶抑制劑、促腎上腺皮質激素、促性腺激素釋放激素、催產(chǎn)素、促黃體生成激素釋放激素、促卵泡激素、葡糖腦苷脂酶、血小板生成素(thrombopoiedin)、非格司亭(filgrastin)、前列腺素、依前列醇、前列環(huán)素、環(huán)孢菌素、血管升壓素、特利加壓素(terlipressin)、去氨加壓素、色甘酸鈉(色甘酸鈉或二鈉)、血管活性腸肽(VIP)、萬古霉素、抗微生物劑、多粘菌素b、抗真菌藥、抗病毒藥、恩夫韋地(Enfuvirtide)、多柔比星、依托泊苷、芬太尼、氯胺酮和維生素類。在進一步的實施方案中，治療劑是胰高血糖素樣肽-1。在進一步的實施方案中，治療劑是胰高血糖素樣肽-2。在進一步的實施方案中，治療劑是溶葡萄球菌素。在進一步的實施方案中，治療劑是干擾素。在進一步的實施方案中，治療劑是干擾素a。在進一步的實施方案中，治療劑是千擾素(3。在進一步的實施方案中，治療劑是干擾素Y。在進一步的實施方案中，治療劑是乳鏈菌肽。在進一步的實施方案中，治療劑是表皮生長因子(EGF)受體配體。在進一步的實施方案中，治療劑是EGF。在進一步的實施方案中，治療劑是轉化生長因子a(TGF-a)。在進一步的實施方案中，治療劑是(3細胞生長因子。在進一步的實施方案中，治療劑是胃泌素/縮膽嚢素受體配體。在進一步的實施方案中，治療劑是胃泌素。在進一步的實施方案中，治療劑是縮膽嚢素。在另一實施方案中，本發(fā)明涉及一種治療患者的胰島素不足型糖尿病的方法，包括(i)施用治療有效量的上述具有負載分子的疏水核載體組合物，其中負載分子是GLP-1、EGF受體配體、EGF、TGF-a、(3細胞生長因子、胃泌素/縮膽嚢素受體配體、胃泌素或縮膽嚢素，和任選地(ii)施用治療有效量的質子泵抑制劑。在進一步的實施方案中，質子泵抑制劑是奧美拉唑。在另一實施方案中，本發(fā)明涉及一種治療患者的胰島素不足型糖尿病的方法，包括(i)施用治療有效量的上述具有負載分子的疏水核載體組合物，其中負載分子是GLP-l,(ii)施用治療有效量的上述具有負載分子的疏水核載體組合物，其中負載分子是胃泌素/縮膽嚢素受體配體、胃泌素或縮膽嚢素，和任選地(iii)施用治療有效量的質子泵抑制劑。在進一步的實施方案中，質子泵抑制劑是奧美拉唑。在另一實施方案中，本發(fā)明涉及一種治療患者的胰島素不足型糖尿病的方法，包括(i)施用治療有效量的上述具有負載分子的疏水核載體組合物，其中負載分子是EGF受體配體、EGF、TGF-a或P細胞生長因子，(ii)施用治療有效量的上述具有負載分子的疏水核載體組合物，其中負載分子是胃泌素/縮膽嚢素受體配體、胃泌素或縮膽嚢素，和任選地(iii)施用治療有效量的質子泵抑制劑。在進一步的實施方案中，質子泵抑制劑是奧美拉唑。在另一實施方案中，本發(fā)明涉及一種治療患者的感染的方法，包括給有此需要的患者施用治療有效量的上述任一種疏水核載體組合物，其中負載分子是溶葡萄球菌素?；谝韵碌拿枋?、附圖和權利要求書，本發(fā)明的這些實施方案、其它實施方案及其特征和特性將是顯然的。圖l顯示了本發(fā)明疏水核組合物的一個實施方案的示意圖A)保護側鏈；B)聚合核(黑色)；C)疏水鏈(灰色)；和D)在較接近載體的基底處保護側鏈之間的間距至少為9nm,因為有360度的分布，所示核的每6個聚合殘基有1個保護側鏈。小圓圏表示負載分子。例如水合白蛋白(直徑^7.2nm);水合生長激素(直徑=3nm);小球過濾直徑<4nm;(3-2巨球蛋白(直徑=3.2nm)、肌紅蛋白(直徑=3.9nm);血紅蛋白(直徑=6.5nm);丫球蛋白(直徑=11.1nm);和本-周氏蛋白(Bence-Jonesprotein)(直徑=5.5nm)。圖2顯示了在制備本發(fā)明組合物中有用的用于形成酰胺鍵的各種化學反應的圖示；R!可以是烷基-羧基或芳香基-羧基，R2可以是聚賴氨酸或聚賴氨酸-PEG;或者R!可以是PEG-羧基，R2可以是聚賴氨酸、烷基-聚賴氨酸或芳香基-聚賴氨酸；或者&可以是聚谷氨酸或聚天冬氨酸，R2可以是PEG-胺、烷基-胺或芳香-胺；或者R,可以是聚谷氨酸-PEG或聚天冬氨酸-PEG,R2可以是烷基-胺或芳香-胺。EDC是DCC的水溶性形式；兩者都可以用于進行反應。圖3顯示了合成本發(fā)明組合物的方案圖。圖4顯示了可以用來向含氨基的載體上添加PEG保護基、其類似物或書f生物的一些化學反應。圖5顯示可以用來向含氨基的載體上添加醛PEG衍生物的一些化學反應。為兩步縮合-還原反應(a和b)。圖6顯示可以用來向含羥基的載體上添加PEG保護基、其類似物或衍生物的一些化學反應。圖7顯示可以用來向含羥基的載體上添加烷基疏水基團的一些化學反應。圖8顯示可以用來向含羥基的載體上添加芳香族疏水基團的一些化學反應。圖9顯示一些s氨基與各種濃度的MPEG反應后每mg產(chǎn)物中的聚賴氨酸(PL)中游離s氨基的圖。y-軸是每mg產(chǎn)物(PLPEG)中的游離s氨基的量，x-軸是反應之前的反應物(PEG和PL)比。圖10顯示與PLPEG-III-C12和PLPEG-III孵育后游離GLP-1的HPLC描跡圖;A)總GLP-l為180iug在0.5mlPBS中。這是通過100kDa濾器的50plGLP-1注射劑?？捎糜诮Y合載體的GLP-1總量為144B)不結合450叫PLPEG載體的50ialGLP-1注射劑。未結合的GLP-1通過IOOkDa濾器。未結合的GLP-1總量為55嗎。不含C12的PLPEG的總容量為89叫或者其重量的20%;C)為不結合450嗎C12-PLPEG載體的50ialGLP-1注射劑。未結合的GLP-l應當通過100kDa濾器。未結合的GLP-1總量為0叫。450pgC12-PLPEG的總容量至少為144pg(均可以獲得)。該描跡圖證實疏水核載體中疏水部分的存在增強了負載分子(在這種情況下為GLP-1)與載體的結合。圖ll顯示包含載體、疏水基團、具有(B)以及不具有(A)負載分子的本發(fā)明疏水核組合物的兩個實施方案的圖示。圖12顯示包含載體、疏水基團、定向分子、具有(B)以及不具有(A)負載分子的本發(fā)明疏水核組合物的兩個實施方案的圖示。圖13顯示包含載體、保護鏈、疏水基團、具有(B)以及不具有(A)負載分子的本發(fā)明疏水核組合物的兩個實施方案的圖示，其中獨立于保護基，疏水基團與載體鍵合。該組合物核中疏水部分的密度不象載體上的所有部位都被疏水基團占據(jù)時那樣高。圖14顯示包含載體、保護鏈、疏水基團、定向分子、具有(B)以及不具有(A)負載分子的本發(fā)明疏水核組合物的兩個實施方案的圖示，其中獨立于保護基，疏水基團與載體直接鍵合。該組合物核中疏水基團的密度不象載體上的所有部位都被疏水部分占據(jù)時那樣高。圖15顯示包含載體、保護鏈、靶向分子、疏水基團、具有(B)以及不具有(A)負載分子的本發(fā)明疏水核組合物的兩個實施方案的圖示，其中獨立于保護基，疏水基團與載體鍵合。載體上疏水基團的密度不象核中的所有部位都被疏水基團占據(jù)時那樣高。圖16顯示包含載體、保護鏈、靶向分子、疏水基團、定向分子、案的圖示，其、中獨立于保護基，疏水基團與載體鍵合。載體上:水基團的密度不象載體上的所有部位都被疏水部分占據(jù)時那樣高。圖17顯示本發(fā)明疏水核組合物的兩個實施方案的圖示，其包含載體、與載體直接鍵合的保護鏈、具有共價連接的保護鏈的疏水基團、沒有共價連接的保護鏈的疏水基團，具有(A)以及不具有(B)負載分子。圖18顯示本發(fā)明疏水核組合物的兩個實施方案的圖示，其包含載體、與載體直接鍵合的保護鏈、具有共價連接的保護鏈的疏水基團、疏水基團、定向分子，具有(A)以及不具有(B)負載分子。圖19顯示本發(fā)明疏水核組合物的兩個實施方案的圖示，其包含載體、與載體直接鍵合的保護鏈、具有共價連接的保護鏈的疏水基團、靶向分子、沒有共價連接的保護鏈的疏水基團，具有(A)以及不具有(B)負載分子。圖20顯示本發(fā)明疏水核組合物的兩個實施方案的圖示，其包含載體、與載體直接鍵合的保護鏈、具有共價連接的保護鏈的疏水基團、靶向分子、沒有共價連接的保護鏈的疏水基團、定向分子，具有(A)以及不具有(B)負載分子。圖21顯示本發(fā)明疏水核組合物的兩個實施方案的圖示，其包含載體、具有共價連接的保護鏈的疏水基團、沒有共價連接的保護鏈的疏水基團，具有(A)以及不具有(B)負載分子。圖22顯示本發(fā)明疏水核組合物的兩個實施方案的圖示，其包含載體、具有共價連接的保護側鏈的疏水基團、沒有共價連接的保護鏈的疏水基團、定向分子，具有(A)以及不具有(B)負載分子。圖23顯示本發(fā)明疏水核組合物的兩個實施方案的圖示，其包含載體、具有共價連接的保護鏈的疏水基團、靶向分子、沒有共價連接的保護鏈的疏水基團，具有(A)以及不具有(B)負載分子。圖24顯示本發(fā)明疏水核組合物的兩個實施方案的圖示，其包含載體、具有共價連接的保護鏈的疏水基團、靶向分子、沒有共價連接的保護鏈的疏水基團、定向分子，具有(A)以及不具有(B)負栽分子。圖25顯示本發(fā)明疏水核組合物的兩個實施方案的圖示，其包含載體、具有共價連接的保護鏈的疏水基團，具有(A)以及不具有(B)負載分子。圖26顯示本發(fā)明疏水核組合物的兩個實施方案的圖示，其包含載體、具有共價連接的保護鏈的疏水基團、定向分子，具有(A)以及不具有(B)負載分子。圖27顯示本發(fā)明疏水核組合物的兩個實施方案的圖示，其包含載體、靶向分子、具有共價連接的保護鏈的疏水基團，具有(A)以及不具有(B)負載分子。圖28顯示本發(fā)明疏水核組合物的兩個實施方案的圖示，其包含載體、靶向分子、具有共價連接的保護鏈的疏水基團、定向分子，具有(A)以及不具有(B)負載分子。圖29顯示本發(fā)明疏水核組合物的兩個實施方案的圖示，其包含載體、保護鏈，其中該保護鏈提供疏水性并且與載體直接鍵合，具有(A)以及不具有(B)負載分子。圖30是假定的血液中的游離負載分子，其自然半衰期為20分鐘。不使用載體的游離負載分子的濃度具有顯著波動。使用載體時，游離負載分子將保持治療濃度。疏水載體的nM濃度降低，半衰期為20小時。A)不使用疏水載體每天3次注射5mg/kg產(chǎn)生的負載分子水平，該負載分子的血液半衰期為20分鐘；B)載有負載分子的疏水載體的半衰期為20小時；C)疏水載體保持的游離負載分子的治療水平。圖31顯示每mgPLPEG(聚賴氨酸-聚乙二醇共聚物)的氨基量和聚賴氨酸的％氨基飽和度之間的理論和實際關系。其作為PLPEG組合物的二次確認是非常有用的。該PEG化過程在合成過程中是完全可再現(xiàn)和可調節(jié)的，這是通過繼續(xù)反應直到在反應過程中使用TNBS氨基測定作為反饋指導達到所需％PEG化。產(chǎn)率大約為原材料的50-60%(5-6g)。理論預測值用下列方程計算X=[100x(C-Y)]/5YC+C];其中X為Q/。飽和度；Y為通過TNBS測定的每克PLPEG的mmolNH2;C為通過TNBS測定的每克PL(聚賴氨酸)的mmolNH2。該方程中SYC中的5表示使用的PEG的大小，在此情況下為5kDa，因而是5YC。如果使用10kDaPEG,則為10YC。這是有用的，因為一旦生成PLPEG產(chǎn)物，即可以通過對終產(chǎn)物的單一TNBS試驗測定聚賴氨酸的氨基的百分飽和度，來確定Y,并可以由Y計算X。圖32.這是反應產(chǎn)物通過IOOkDaMWCO膜(AmershamBiosciences,Needham,MA)純化之前和之后的凝月交過濾色譜圖，顯示所有未反應的PEG都已凈皮除去。使用的柱是UltrahydrogelLinear(0.78x30cm,Waters),以0.6ml/minPBS的流速洗脫。使用折射率4全測儀檢測該物質。圖A是清除未反應的5kDaPEG之前的20PLPEG5-55(20kDa聚賴氨酸，其中55%的氨基與5kDa分子量的PEG琥珀酸酯反應)。圖B是單獨的5kDaPEG。圖C是純化后的20PLPEG5-55。圖33.這些是對應于已知Stokes半徑的蛋白質的各種載體的Stokes半徑。它們在UltrahydrogelLinear柱(0.78cm直徑x30cm長度)上使用流速為0.6ml/min的含15。/。乙腈的PBS作為流動相進行分析。20PL-PEG5-55(20kDa聚賴氨酸，其中55%的氨基與5kDa分子量的PEG琥珀酸酯反應)、40PL-PEG5-30(40kDa聚賴氨酸，其中30%的氨基與5kDa分子量的PEG琥珀酸酯反應)、40PL-PEG5-51(40kDa聚賴氨酸，其中51%的氨基與5kDa分子量的PEG琥珀酸酯反應)和40PL-PEG5-27(40kDa聚賴氨酸，其中27%的氨基與5kDa分子量的PEG琥珀酸酯反應)大于腎小球濾過的截止值，該截止值大于4nm(40埃)的直徑(或者20埃的半徑)。具有已知Stokes半徑的蛋白質用作參照物，包括曱狀腺球蛋白(669kDa;85.5埃stokes半徑)、過氧化氫酶(248kDa;52.2埃stokes半徑)和BSA(67kDa;35.5埃stokes半徑)。圖34.顯示疏水載體在各種條件下的負載效率(11=6)。y-軸是不結合載體的量。在該圖中，10mgPGC-HC24(20PLPEG5-55C24;其為20kDa聚賴氨酸，其中55%的氨基與5kDa分子量的PEG琥珀酸酯反應并且其余的氨基與二十四烷酸或C24反應)在x-軸所示的不同條件下負載0.6mgGLPl。負載后，所有樣品加至lmlPBS(pH7.4)并通過100kDa分子截止值的纖維素濾膜過濾器(Millipore，Bedford,MA)過濾，各種濾液中的游離GLP-1用反相HPLC定量。經(jīng)不含載體的對照樣品測定，過濾器不結合GLP-1(未顯示)。顯示最高負載的條件是70%丙酮然后干燥。這種特定的負載過程(使用丙酮)預期也適用于其它蛋白質，而其它過程，特別是水負載，可能隨蛋白質不同而不同。該過程利用了溶劑暴露蛋白質的疏水部分和載體的疏水部分的能力。對于10-30kDa的大蛋白質，減少有機溶劑的量可以使變性的風險最小化。圖35.顯示基于C18的PGC-HC(C18-20PLPEG5-55;其為20kDa的聚賴氨酸，其中55%的氨基與5kDa分子量的PEG琥珀酸酯反應，其余的氨基與硬脂酸或C18反應)在4-5個部位以納摩爾范圍的Kd(249nM)結合肽(例如GLP-1)。其它部位具有較低的親和力，兩個部位的Kd為2.7uM，另外兩個部位的Kd為33uM。在該實驗中，10mg載體負載(如圖34所示，丙酮法)不同量的GLP1。將每種負載的載體溶解在lmlPBS中，并使之平衡2小時。每種含有游離的和結合的GLP1的溶液通過100kDa分子截止值的過濾器過濾，每種含有游離GLP1的濾液通過反相HPLC定量。用70%的乙腈從每種溶液中釋》文結合的GLP1，并類似地通過HPLC定量。圖36.顯示基于C24的PGC-HC(C24-20PLPEG5-55;其為20kDa的聚賴氨酸，其中55%的氨基與5kDa分子量的PEG琥珀酸酯反應，其余的氨基與二十四烷酸或C24反應)在3-4個部位以納摩爾范圍的Kd(77nM)結合肽(例如GLP-l)。其它部位具有較低的親和力，兩個部位的Kd為2uM。其它較低親和力的部位未進行分析。在該實-瞼中，10mg載體負載(如圖34所示，丙酮法)不同量的GLP1。將每種負載的載體溶解在lmlPBS中，并使之平衡2小時。每種含有游離的和結合的GLP1的溶液通過100kDa分子截止值的過濾器過濾，每種含有游離GLP1的濾液通過反相HPLC定量。用70%的乙腈從每種溶液中釋放結合的GLPl,并類似地通過HPLC定量。圖37.該圖顯示GLP-l向C18-PL-PEG5-55上的負載(該疏水核載體是20kDa的聚賴氨酸，其中55%的氨基與5kDa分子量的PEG琥珀酸酯反應，其余的氨基與硬脂酸或C18反應)。該圖顯示當使用圖34所示的丙酮法使IOmg疏水核載體負載不同量的GLP-l(x-軸)時，結合的(灰色條)和游離的(透明條)的GLP-1的量。將每種負載的載體溶解在lmlPBS中，并使之平衡2小時。每種含有游離的和結合的GLP1的溶液通過100kDa分子截止值的再生纖維素濾膜過濾器(Millipore,Bedford,MA)過濾。用70%的乙腈釋放含有游離和結合的GLP1的濾液，然后進行類似的過濾，并通過反相HPLC定量(r^9)?？梢钥闯觯撦d能力為4-5%，(0.4-0.5mg/10mg載體)，代表每個載體4-5個部位。應當注意，在1.0mg負載時只有2/3的蛋白質被負載。負載才是高到容量以上可能是由于其它Kd為3.7uM和33uM的低親和力部位。這些圖38.該圖顯示在載體用PBS千次平衡后保持與載體結合的GLP-l的量。通過在復合物穿過大小排阻柱(0.78x30cm)后監(jiān)測GLP-l-結合的載體的量檢測GLPl-Hydrophoboc載體(C18-20PLPEG555)復合物的溶液穩(wěn)定性。使用圖34所示的丙酮法將總共2mgGLP-1加載到不同量的C18-載體上。含有復合的(結合的)和游離的GLP-1的溶液通過大小排阻層析法洗脫0=5)并在220nm監(jiān)測。游離的GLP-1達到總體積(Vt)，而載體達到空隙容積(Vo)。單獨的載體用作定量與載體結合的GLP-1面積的空白，以BioSep2000^主(0.78x30cm;Phenomenex)的Vo表示。應當注意，高標準差是由于高空白而不是負載差異性。這基本上顯示該復合物是穩(wěn)定的，通過穩(wěn)定性測試證實Kd為249nM。圖39.顯示在存在和不存在PGC-HC18載體(該疏水核載體為20kDa的聚賴氨酸，其中55。/。的氨基與5kDa分子量的PEG琥珀酸酯反應，并且其余氨基與硬脂酸或C18反應)或者20PLPEG5-55(該載體為20kDa的聚賴氨酸，其中55%的氨基與5kDa分子量的PEG琥珀酸酯反應，并且其余氨基不反應)的條件下，在磷酸鹽緩沖液中用DPP4消化GLP1的體外消化液的樣品色譜圖。完整GLP1為早期洗脫峰(指向右側的箭頭)。GLP1的降解產(chǎn)物(除去組氨酸殘基，較低電荷，在pH2的層析條件下)在稍后的時間洗脫(指向左側的箭頭)。在PGC-HC18載體的存在下，DPP4對GLP1的降解明顯延遲。對照(單獨的GLP1)和具有20PLPEG5-55的GLP1都降解到相似的程度。該分析進行多次，結果非常明確。HPLC分析使用來自Phenomenex的MercurySynergyMax-RP(0.4x2cm),以1.5ml/min的流速洗脫，梯度為25-50。/。乙腈/水/0.1。/QTFA，時間為5分鐘，洗脫液在220nm監(jiān)測。具有以及不具有載體的GLP1溶液與1.25mU/mlDPP4孵育24小時，在HPLC分析之前加入DPP4抑制劑終止消化。圖40.用GLP1和疏水核載體(PGC-HC18;該疏水核載體為20kDa的聚賴氨酸，其中55。/。的氨基與5kDa分子量的PEG琥珀酸酯反應，其余氨基與硬脂酸或Cl8反應)中所含的GLP1誘導的鈣流入。顯示了GLP1(20nM)和GLPl制劑(3.3ug/mlPGC-HC18;含有20nMGLP1)在INS細胞中誘導的《丐流入。細胞負載Fura-2(Molecularprobes)，在加入PBS(磷酸鹽緩沖液)、GLP-1、C18制劑(3.3ug/mlPGC-HC18;含有20nMGLP1)和C18載體(3.3ug/mlPGC-HC18)之前(l-9秒)和之后(11-60秒)隨時間測定細胞內焚光?？梢奝GC-HC18配制的GLP1(C18-制劑)在該體外試驗中具有生物活性(n=5)。圖41.配制的GLP1導致葡萄糖刺激的胰島素釋放增強。顯示了在不同濃度的GLP1和配制的GLP1(PGC-HC18,含有2。/。重量的GLPl)存在下葡萄糖刺激的INS細胞釋放的胰島素水平。該制劑中使用的PGC-HC18是20kDa的聚賴氨酸，其中55%的氨基與5kDa分子量的PEG琥珀酸酯反應，其余氨基與硬脂酸或C18反應。將胰島素瘤細胞或INS細胞(50,000)接種到96孔板中，使之在常規(guī)培養(yǎng)基(含有l(wèi)l.lmM葡萄糖)中附著過夜，培養(yǎng)基中的葡萄糖經(jīng)一夜降至5.5mM。次曰，用含有11,1mM葡萄糖和不同濃度的配制和未配制的GLP1(x-軸)的不含血清的培養(yǎng)基誘導胰島素釋放。用LINCOElisa試劑盒測定在15分鐘內釋放的胰島素(11=3)。圖42.靜脈內施用GLP1和配制的GLP1(PGC-HC18，含有2%重量的GLP1)后，血液中總GLP1的時間依賴性減少。該制劑中使用的PGC-HC18為20kDa的聚賴氨酸，其中55%的氨基與5kDa分子量的PEG琥珀酸酯反應，其余氨基與硬脂酸或C18反應。單獨施用的GLP1的清除半衰期僅數(shù)分鐘，而配制的GLP1的半衰期至少為6小時。給雌性Balb/c小鼠靜脈注射2mg單獨的GLP-l或2mg在PGC-HCl8制劑中的GLP-1。在給定時間點采集末梢血。用Linco的Elisa試劑盒(LINCOResearch,St.Charles,MO)測定總GLPl(PGC-HC18結合的和未結合的)。圖43.皮下(s.c.)施用GLPl和配制的GLPl(PGC-HC18,含有2%重量的GLP1)后，血液中總GLP1的時間依賴性減少。該制劑中使用的PGC-HC18為20kDa的聚賴氨酸，其中55%的氨基與5kDa分子量的PEG琥珀酸酯反應，其余氨基與硬脂酸或C18反應。單獨施用的GLP1的清除半衰期僅數(shù)分鐘，而配制的GLP1的半衰期至少為24小時。給雌性Balb/c小鼠皮下注射2mg單獨的GLP-l或2mg在PGC-HC制劑中的GLP-1。在給定時間點采集末梢血。用Linco的Elisa試劑盒(LINCOResearch,St.Charles,MO)測定總GLPl(載體結合的和未結合的)。圖44.皮下(s.c.)施用GLPl和配制的GLPl(PGC-HC18,含有2%重量的GLP1)后，血液中總GLP1的時間依賴性減少。該制劑中使用的PGC-HC18為20kDa的聚賴氨酸，其中55%的氨基與5kDa分子量的PEG琥珀酸酯反應，其余氨基與硬脂酸或C18反應。單獨施用的GLP1的清除半衰期僅數(shù)分鐘，而配制的GLP1的半衰期至少為20小時。給預先插管的雄性SpragueDawley大鼠皮下注射1ug單獨的GLP-l或lug在PGC-HC制劑中的GLP-l。通過頸靜脈插管采血，在分析前將血清保存在-80。C下。用Linco的Elisa試劑盒(LINCOResearch,St.CharlesM0)測定總GLP1(PGC-HC18結合的和未結合的)。圖45.顯示從用60mg/kg鏈脲霉素誘導糖尿病后13天開始的4周治療期間，15次葡萄糖采樣的平均總量。在治療前，每2天測定一次血液葡萄糖水平，共6天，為300-600mg/dl。隨機化后，各組的平均血糖水平為421-433mg/dl。大鼠每2天皮下治療一次。對照組接受鹽水，載體對照僅接受PGC-HC18(1mg,在PBS中)，GLP-l組接受20ugGLP-l,PGC畫HC18/GLP-1組接受負載20ugGLP-1的1mgPGC-HC18。該制劑中使用的PGC-HC18為20kDa的聚賴氨酸，其中55%的氨基與5kDa分子量的PEG琥珀酸酯反應，其余氨基與硬脂酸或C18反應。一只GLP-1動物在2周時間點時由于伴有嚴重體重減輕的嚴重糖尿病而需要處死。將每2天測定的非空腹糖水平加在一起，得到每只動物的曲線下面積(AUC),平均得到每只動物的循環(huán)變異性。在用配制的GLP-1-治療的動物和對照或僅用PGC-HC治療的動物之間具有顯著性差異(*PO.Ol)。圖46.顯示從用60mg/kg鏈脲霉素誘導糖尿病后第13天開始的4周治療期結束時鏈脲霉素糖尿病大鼠的平均體重(+/-標準差；n=4)。所有動物在鏈脲霉素治療前的初始體重為240-260克。對照組4妄受鹽水，載體對照僅接受PGC-HC18(1mg，在PBS中)，GLP-l組接受20ugGLP畫l,PGC-HC18/GLP-l組接受負載20ugGLP-l的lmgPGC-HC18。該制劑中使用的PGC-HC18為20kDa的聚賴氨酸，其中55%的氨基與5kDa分子量的PEG琥珀酸酯反應，其余氨基與硬脂酸或C18反應。用PBS或單獨的載體治療的鏈脲霉素糖尿病大鼠比用制劑治療的動物具有顯著更多的體重減輕(P〈0.01)。用不含載體的單獨GLP1治療的動物組顯示比GLP-1制劑治療的大鼠更大的反應差異性。圖47.該圖來源于從用60mg/kg鏈脲霉素誘導糖尿病后第13天開始的4周治療期結束時鏈脲霉素糖尿病大鼠的大鼠胰臟的組織切片(+/-標準差；n=4)。大鼠胰臟用抗-BrdU-抗體和蘇木精染色，并且以250倍放大倍數(shù)照像。定位胰島，計數(shù)每個胰島中BrDU陽性核的數(shù)目。對照組接受鹽水(A),載體對照僅接受PGC-HC18(1mg,在PBS中)(B)，GLP-l組接受20ugGLP-l(C),PGC-HC18/GLP-1組接受負載20ugGLP-1的1mgPGC-HC18(D)。該制劑中使用的PGC-HC18為20kDa的聚賴氨酸，其中55%的氨基與5kDa分子量的PEG琥珀酸酯反應，其余氨基與硬脂酸或C18反應。抗-BrdU-抗體染色顯示與PBS或空載體治療的大鼠(A和B)相比，在GLP-1和GLP-1/PGC-HC18制劑治療的大鼠的胰島(C和D)中發(fā)生顯著更多的細胞分裂。另夕卜，在GLP-1/PGC-HC18制劑治療的大鼠的外分泌組織中具有更多的BrdU陽性細胞(數(shù)據(jù)未顯示)，這可能表示來自導管祖細胞的胰島細胞的再生。圖48.顯示PGC-HC18在6-7個部位結合有機化合物(例如多柔比星)，Kd為315uM。PGC-HC18為20kDa的聚賴氨酸，其中55%的氨基與5kDa分子量的PEG琥珀酸酯反應，其余的氨基與硬脂酸或C18反應。多柔比星是一種抗癌藥。在該實驗中，使8mg疏水核載體(如圖34所示，丙酮法)負載不同量的多柔比星。將每種負載的載體溶解在1mlPBS中，使之平衡2小時。每種含有游離的和結合的多柔比星的溶液通過IOOkDa分子截止值過濾器過濾，每種含有游離多柔比星的濾液通過反相HPLC定量。由在負載過程中使用的多柔比星總量減去通過HPLC測定的游離多柔比星量，確定結合的多柔比星量。圖49顯示多柔比星加載至PGC-HC18的結果。PGC-HC18是20kDa的聚賴氨酸，其中55%的氨基與5kDa分子量的PEG琥珀酸酯反應，其佘氨基與硬脂酸或C18反應。多柔比星是一種抗癌藥。該圖顯示了當使用圖34所示的丙酮法使8mg0011(:18負載不同量的多柔比星^-軸)時，與PGC-HC18結合的和游離的多柔比星的量。負載后，將每種負載的載體溶解在lmlPBS中，使之平衡2小時。PGC-HC18結合的和游離的多柔比星的混合物通過再生的纖維素濾膜過濾器過濾分離。代表游離多柔比星的濾液通過反相HPLC定量(n二3)。由在負載過程中使用的多柔比星總量減去通過HPLC測定的游離多柔比星量，確定結合的多柔比星量。發(fā)明詳述定義為了方便起見，在進一步描述本發(fā)明之前，在此匯總了在說明書、實施例和所附權利要求書中使用的特定術語。這些定義應當根據(jù)公開內容以及本領域技術人員的理解。除非另外定義，此處使用的所有技術和科學術語具有與本領域技術人員通常理解的相同的含義。"一種，，和"一個"是指一種(一個)或一種(一個)以上(即至少一種/一個)所述對象。例如，"一種元件，，是指一種或一種以上的元件。本文使用的術語"和/或"應當理解為一種、兩種或其任意組合。例如，"A和/或B"包括"A"或"B"或者"A和B"。此處所述的任何濃度范圍、百分比范圍、比例范圍或整數(shù)范圍應理解為包括所述范圍內的任意整數(shù)值，并且適當時，包括其分數(shù)(如整數(shù)的1/10和1/100),除非另外說明。本文使用的"大約"或"基本由組成"的意思是所述數(shù)值或范圍的±15%，除非另外說明?？蛇x方式(例如"或")的使用應當理解為備選方案的一個、兩個或者任意組合。在此使用的術語"疏水基團"是指為非極性的分子或幾種分子或化學部分，它們?yōu)樨撦d分子提供進行相互作用的疏水環(huán)境，以避免周圍的水環(huán)境。疏水吸引是大分子折疊、底物與酶結合以及限定細胞邊界及其內部區(qū)室的膜的形成中的主要驅動力。非極性分子在水中被驅動在一起，主要不是因為在不存在水時它們彼此具有高親和力，而是因為在存在水時它們被水排斥，因為水與其本身強烈地鍵合。疏水基團可以是在并入載體后不具有陽性或陰性電荷的烴鏈和/或環(huán)化合物，并且能夠通過不涉及電荷相互作用的相互作用與分子結合。應當理解某些分子可隨著pH的改變而得到或失去電荷，并且本發(fā)明包括不含電荷的或者在與治療劑或負載分子結合期間為疏水性的組合物。還應當理解，疏水基團計為獨立于聚合載體的實體，因此，例如當聚合載體是聚氨基酸時，聚氨基酸上的天然R基不計為疏水基團。然而，可以將R基衍生化以添加疏水基團。例如，可以通過丁胺R基的酰胺化將疏水基團添加到聚賴氨酸載體上。有時，疏水基團可以在分子的一個末端含有設計為定向分子的氨基或羧基，該定向分子應當被認為是獨立于疏水基團的(例如具有羧基的熒光素分子)。術語"定向分子"在本文中是指幫助負載分子與本發(fā)明的疏水核團相互作用的任意分子結構。定向分子與聚合載體骨架正常連接。在大多數(shù)情況中，除了定向作用以外，定向分子還增強或者加強了負載分子與載體的結合。定向分子可以選自肽、硫酸、磺酸、磷酸、膦酸、雙膦酸、賴氨酸和精氨酸。定向分子也可以包含可以在聚合骨架和負載分子之間形成橋的金屬離子。定向分子也可以是共價錨定到聚合載體上的氨基或羧基部分。本文使用的術語"衍生物"或"類似物"是指其核心結構與母體化合物相同或非常相似，但是具有化學或物理修飾如不同的或另外的基團的化合物；該術語包括可以與其它原子或分子連接的母體化合物的共聚物。該術語也包括與母體肽至少有50%序列同一性的肽。該術語也包括與母體肽相比連接有另外的基團如脂肪酸和/或另外的氨基酸聚合物。該術語也包括與母鏈相比連接有另外的基團的分支或非分支的烷基鏈。術語"靶向部分"、"靶向分子"或"靶向基團"是指幫助組合物構建體在特定靶區(qū)定位、進入靶細胞和/或與靶受體結合的任意分子結構。例如，脂質(包括陽離子、中性和甾體脂質、病毒體和脂質體)、抗體、凝集素、配體、糖、甾類、激素、營養(yǎng)素、肽和蛋白質可以作為耙向部分。"耙標"是耙向構建體或疏水核組合物所結合的部位。靶標可以在體內或在體外。在某些實施方案中，靶標可以是腫瘤(例如腦、肺(小細胞和非小細胞)、卵巢、前列腺、乳腺和結腸的腫瘤以及其它癌和肉瘤)。在其它實施方案中，靶標可以是感染(例如細菌、病毒(例如HIV、皰滲、肝炎)和病原真菌n叚絲酵母屬的種))部位。在另外一些實施方案中，靶標可以是指靶向部分所結合的分子結構，例如半抗原表位、受體、dsDNA片段、碳水化合物或酶。另外，靶標也可以是一種類型的組織，例如神經(jīng)元組織、腸組織、胰腺組織等。在此使用的術語"負載分子，，包括可以裝載到本發(fā)明疏水核組合物中的任何分子，包括診斷劑和治療劑。在此使用的術語"治療劑"是指任何在受試者體內局部或全身作用的為生物、生理或藥理學活性物質的化學部分。治療劑也被稱為"藥物，，，其實例包括胰高血糖素樣肽、胰高血糖素樣肽衍生物、依澤那太、胰高血糖素樣肽-1、胰高血糖素樣肽-2、痩蛋白片段、腸抑胃肽(GIP)、表皮生長因子(EGF)受體配體、EGF、轉化生長因子a(TGF-oc)、(3細胞生長因子、胃泌素/縮膽嚢素受體配體、胃泌素、縮膽嚢素、溶葡萄球菌素、干擾素、干擾素Y、干擾素(3、干擾素a、白介素-1、白介素-2、白介素-4、白介素-6、白介素-8、白介素-10、白介素-12、auristatin、乳鏈菌肽、胰島素、胰島素樣生長因子l、生長激素、生長激素釋放激素(GHRH)、神經(jīng)生長因子、腦源性神經(jīng)營養(yǎng)因子、酶、內皮抑制素、制管張素、血小板反應素、尿激酶、鏈激酶、凝血因子VII、凝血因子VIII、粒細胞-巨噬細胞集落刺激因子(GM-CSF)、粒細胞集落刺激因子(G-CSF)、血小板生成素、降鈣素、甲狀旁腺素(PTH)及其片段、促紅細胞生成素、心房鈉尿肽、單克隆抗體、單克隆抗體片段、促生長素抑制素、蛋白酶抑制劑、促腎上腺皮質激素、促性腺激素釋放激素、催產(chǎn)素、促黃體生成激素釋放激素、促卵泡激素、葡糖腦苷脂酶、血小板生成素、非格司亭、前列腺素、依前列醇、前列環(huán)素、環(huán)孢菌素、血管升壓素、特利加壓素、去氨加壓素、色甘酸鈉(色甘酸鈉或二鈉)、血管活性腸肽(VIP)、萬古霉素、抗微生物劑、多粘菌素b、抗真菌藥、抗病毒藥、恩夫韋地、多柔比星、依托泊苷、芬太尼、氯胺酮和維生素。也被稱為"藥物"的治療劑的其它例子在公知的文件中描述，如MerckIndex,theMerckmanualofdiagnosisandtherapy,thePhysiciansDeskReference,和ThePharmacologicalBasisofTherapeutics,它們包括但不限于蛋白質、肽、藥物；維生素；礦物質補充劑；用于治療、預防、診斷、治愈或緩解疾病的物質；影響身體結構或功能的物質；或前藥，它們在置于生理環(huán)境中后變?yōu)榫哂猩锘钚曰蚧钚愿??？梢允褂迷谑┯糜谑茉囌吆竽軌驈慕M合物中釋放到相鄰組織或體液內的各種形式的治療劑。實例包括甾類和甾類的酯類(例如雌激素、孕酮、睪酮、雄酮、膽固醇、炔諾酮、地高辛配基、膽酸、脫氧膽酸和鵝脫氧膽酸)、含硼化合物(例如碳硼烷)、化療核苷酸類、藥物(例如抗生素、抗病毒藥物、抗真菌藥物)、烯二炔類(例如卡奇霉素、埃斯波霉素、蒽環(huán)類抗生素(dynemicin)、新制癌菌素發(fā)色團和可達菌素(kedarcidin)發(fā)色團)、重金屬絡合物(例如順柏)、激素拮抗劑(例如他莫昔芬)、非特異性(非抗體)蛋白質(例如糖寡聚體)、寡核苷酸(例如與靶核酸序列(例如mRNA序列)結合的反義寡核苷酸)、siRNA、肽、蛋白質、抗體、光動力劑(例如若丹明123)、放射性核素(例如I-131、Re-186、Re-188、Y-90、Bi-212、At-211、Sr-89、Ho-166、Sm國153、Cu習67和Cu-64)、毒素(例如篦麻毒素)和基于轉錄的藥物。在此使用的術語"治療有效量"是指將對患者提供治療益處的組合物的量。在特定實施方案中，該術語是指當加載到本發(fā)明疏水載體組合物上并且給患者施用時以適用于任何藥物治療的合理利益/風險比產(chǎn)生一定所需效果的治療劑的量。在某些實施方案中，該術語是指消除、減少或保持(例如阻止擴散)腫瘤或特定治療方案的其它靶標所需的或足以產(chǎn)生上述效果的量。有效量可以隨如下因素改變所治療的疾病或病癥、施用的具體構建體、受試者的大小和/或疾病或病癥的嚴重程度。本領域技術人員不需要過多的實驗憑經(jīng)驗就可以確定具體化合物的治療有效量。在特定實施方案中，該術語是指使用此處所述組合物所需的或足夠的量。在胰島素不足型糖尿病的治療中，治療有效量是具有相應負載分子的本發(fā)明組合物將改善葡萄糖內穩(wěn)態(tài)或者使患者血液葡萄糖水平正常化和/或在胰臟中再生(3-胰島細胞的量。|3-胰島細胞的再生可以通過監(jiān)測血液葡萄糖水平、血液中的血紅蛋白Alc水平、C-肽水平或胰島素水平間接測定。術語"診斷劑"是任何可用于對患者進行診斷或成像的化學部分。例如，診斷劑包括含有放射性同位素如銦或锝的顯像劑；含有碘、锝或釓的造影劑；酶，如辣根過氧化物酶、GFP、44性磷酸酶或(3-半乳糖苷酶；熒光物，如熒光素、若丹明和銪衍生物；發(fā)光物，如N-甲基吖口定鎗(methylacrydium)衍生物等。此處使用的術語"烷基"是指4-36個碳原子(包含)的支鏈或直鏈烴，并且可以在載體周圍提供非極性或疏水環(huán)境。本文使用的烷基也包括為4-36個碳原子的支鏈或直鏈烴的分子的一部分，該部分兩端的旁邊可以是含氮或氧的部分，作為連接到載體和/或保護基上的工具。此處使用的術語"低級環(huán)烷基"是指4-6個碳原子(包含)的環(huán)烴。此處使用的術語"可解離連接"、"可逆連接"和"結合"是指非共價鍵。術語本發(fā)明的"載體，，可以是任何能夠支持疏水基團因此又可以與負載分子相互作用的物質。它們是具有多個可修飾的官能團的物質。載體的非限制性例子包括聚合物和共聚物、微粒、納米顆粒和固體表面。^L粒包括直徑為100nm或更大的顆粒，而納米顆粒是直徑小于100nm的顆粒。在一個方面，載體是生物相容性的。此處使用的術語"聚合載體"是指由幾個連接的化學部分組成的分子，這些化學部分可以相同也可以不同，并且作為疏水基團和/或保護《連的連纟妻部位。此處使用的術語"非蛋白質聚氨基酸"是指不是由生物體自然形成而是由人工重組改造產(chǎn)生的聚氨基酸。其非限制性例子有聚-(L和/或D)-賴氨酸、聚-(L和/或D)-谷氨酸、聚-(L和/或D)-谷氨酸、聚-(L和/或D)-天冬氨酸、聚-(L和/或D)-絲氨酸、聚-(L和/或D)-蘇氨酸、聚-(L和/或D)-酪氨酸和聚-(L和/或D)-精氨酸。此處使用的術語"保護側鏈"是指由于水與鏈的廣泛連接或結合而保護載體分子、疏水基團和負載分子避免接觸其它大分子的分子。由于這種與水分子的廣泛結合，保護鏈也提高了組合物的水溶性。這也意味著保護鏈給組合物提供了親水性。術語"保護側鏈"與術語"親水鏈"、"保護基"和"保護鏈"可以互換使用。此處使用的術語"胺化"是指包括鍵合氨基的分子。引言本發(fā)明部分涉及一種組合物，其包含(i)載體，(H)與載體共價連接的疏水基團，(iii)與載體或疏水基團共價連接的保護側鏈，和(iv)與疏水基團結合的負載分子。在進一步的實施方案中，載體可以任選地含有與載體或保護側鏈共價連接的靶向分子。在進一步的實施方案中，載體可以任選含有與載體共價連接的定向分子。本發(fā)明的載體組合物包括直鏈或支鏈結構或其偶聯(lián)物的聚合物和共聚物、微團、乳液和固體表面，其中聚合物可以在超分子結構中自組織。載體包括包含共價結合的疏水基團的聚合骨架，其中該基團包括烴鏈或芳香化合物。載體的疏水部分和負載分子在含水或主要含水的介質如生物液體中彼此相互作用。疏水基團可以包含一種以上的與載體共價連接的烴分子和/或芳香分子。保護基也可以加強負載分子與含有疏水基團的載體的結合。在存在或不存在有機溶劑的條件下，負載分子與疏水基團結合。在一個優(yōu)選實施方案中，疏水部分包括烴鏈，例如但不限于CH3(CH2)xCO-和C6H5(CH2)xCO-，其中x為0-34?？呻妗⒓状?、乙醇和丙醇。需要較大量的有機溶劑來從載體上洗脫負載分子指示緊密的結合。所需的有機溶劑越多，結合越緊密。本發(fā)明的一個實施方案是具有含有苯環(huán)的疏水基團的載體。為特定負載分子選擇與載體連接的疏水基團可根據(jù)負載分子的疏水性決定。例如，球狀蛋白質在水環(huán)境中為球形，因為球形構象在熱力學上更穩(wěn)定。這種穩(wěn)定性由水驅動，以保持蛋白質的疏水部分遠離暴露于水的球體的表面。當球狀蛋白質暴露于包含疏水基團的載體時，球狀蛋白質構象將改變，從而允許球狀蛋白質的核心與疏水部分相互作用。球體越大，蛋白質具有的疏水性越強。在水環(huán)境中伸長的蛋白質具有比球狀蛋白質更低的疏水性。負載分子與疏水載體的結合意味著在用至少100倍重量當量的水性溶劑洗滌后被載體保持的能力。如果需要與負載分子強結合的載體，可以使用較大的和較多的疏水基團修飾載體。負載分子與包含疏水基團的載體的高親和力結合將在任意給定時間保持低水平的游離負載分子(即藥物或治療劑)，并且提供保護的負載分子貯庫(即，載體結合的負載分子將是貯庫)。這將降低治療劑的給藥頻率。這也有益于療效需要低濃度同時在高濃度時具有毒性的治療劑。本發(fā)明還提供一種制備和使用用于特定治療化合物的疏水核載體的方法。在一個實施例中，本發(fā)明組合物包含聚合程度為2-10,000的線性聚氨基酸骨架載體，載體上共價連接有分子量為300-20,000Da的甲氧基聚乙二醇(mPEG)保護鏈和疏水基團，其中鏈和疏水基團獨立地與骨架連接。在另一個實施例中，載體的聚合程度為20-l,000。在另一個實施例中，載體的聚合程度為50-300。本發(fā)明的疏水基團可以包括芳香化合物和脂肪族基團，也可以包含氮和/或氧，在與載體連接之前可以具有電荷。然而，在這些基團與載體骨架聚合物共價連接后，電荷消失，從而使它們成為疏水性的。這些疏水核載體-保護基組合物將結合具有一定疏水性的負載分子。以純化狀態(tài)添加的負載分子將與載體的疏水部分結合，以提供用于藥物遞送組合物的制劑。疏水核載體-保護基復合物與負載分子的這種添加或混合可以在水性溶液中進行，任選地隨后凍干?；蛘?，這種混合可以在有機溶劑和水的混合物中進行。所述有機溶劑優(yōu)選地可與水混溶。混合后，混合物可以通過蒸發(fā)或凍干干燥(圖34)。干燥的混合物通過溶解于水、緩沖液或藥物可接受的給藥用稀釋劑或賦形劑中成為備用制劑。一旦進入血液或任何生理液體中，組合物中的負載分子就將基于負載分子和疏水核載體的平衡結合常數(shù)或解離常數(shù)釋放。游離負載分子的濃度將會保持，只要在載體中存在負載分子貯庫。保護基將會非常顯著地緩和預期的血液蛋白質釋放加速。另外，根據(jù)載體中疏水部分的數(shù)目和大小，從疏水核載體上釋放蛋白質可以是緩慢的或快速的。負載分子與疏水基團的結合通過選擇疏水基團來控制。通常，脂肪族碳鏈越長，結合越強。負載分子對于細胞上靶受體的親和力也可以用作選擇疏水基團的指標。理想地，負載分子對于載體中疏水基團的親和力應低于負載分子對于其生物靶標的親和力。在溶液中，在游離負載分子和結合的負載分子之間存在平衡。將設計具有疏水基團的載體，使其具有等于所需治療濃度的游離負載分子。疏水核載體提供允許活性分子的穩(wěn)定性、溶解性和分布顯著提高的藥物遞送系統(tǒng)。疏水核載體組合物還可包含共價連接的靶向分子，以利于載體在體外和體內向耙組織和器官和細胞的定位。另外，疏水核載體組合物還可包含共價連接的定向分子，以利于疏水核內負載分子更好地組織化。具有特定蛋白酶敏感末端的負載分子(例如胰高血糖素樣肽具有二肽基肽酶IV(DPP-IV)敏感性的N-末端)需要定向。蛋白酶敏感性的末端可以通過沿載體放置定向分子而靠近載體核。該定向分子可以是Bolotin的專利(美國專利號7，138，105)所述的金屬離子橋，該專利在此引入作為參考。另外，含有負載分子的疏水載體組合物可以進一步含有包圍整個含有負載分子的疏水載體組合物的半透膜，用于皮下或口服給藥。半透膜可以由具有大小足以使負載分子通過半透膜的孔的聚合物片組成。本發(fā)明的另外一個目的是提供一種制備和使用其治療各種疾病的方法。具有負載分子的疏水核載體組合物可以具有最大可達幾萬億kDa的大小，從而形成擴展的凝膠樣組合物的結構，尤其適用于口服、皮下和局部給藥。也可以制備較小的疏水核載體組合物以形成凝膠。這可以通過制備親水保護鏈與疏水基團的重量比為17及以下的疏水核組合物來實現(xiàn)。例如，當含有聚合載體的組合物中MPEG(保護鏈)與C18脂肪酸(形成疏水核)的重量比為10時將形成凝膠。也可以將含有負載分子的疏水載體組合物制備成片樣結構。這可以通過使用具有可修飾官能團如氨基、羧基或羥基的片狀載體來進行，疏水基團、保護基和/或定向分子可以在該官能團處連接。這種含有負載分子例如凝血因子的疏水核載體片可以在緊急情況下和戰(zhàn)場上用作治療傷口的繃帶。當負載分子是抗感染藥時，該組合物可以用于治療感染。載體本發(fā)明的載體可以是任何能夠支持疏水基團，因此可以與負載分子相互作用的物質。本發(fā)明的載體必須具有多個可衍生的或可修飾的用于連接疏水基團和/或保護鏈的官能團。載體的非限制性實例包括聚合物和共聚物、微粒、納米顆粒和固體表面。在一個方面，載體是生物相容的。果合我沐和共炎裁體在某些實施方案中，本發(fā)明組合物的聚合載體或共聚載體，例如包括任一通式所示的重復元件的載體，具有大約500至大約1,000,000道爾頓或更高的分子量，或者大約5，000、10,000、20，000、30，000、40，000或50,000道爾頓，更特別地至少大約100,000道爾頓，甚至更特別地至少大約250，000道爾頓，或者甚至至少500,000道爾頓。數(shù)均分子量(Mw)也可以在寬范圍內改變，但是通常落在大約500至大約200,000道爾頓，或者至少大約500至大約100，000道爾頓，或者甚至大約500至大約50，000道爾頓的范圍內。在一個實施方案中，Mw在大約8,000至45，000道爾頓之間不等。在本發(fā)明聚合物的特定樣品中，可能存在寬范圍的分子量。例如，樣品內的分子可能具有相差2、5、10、20、50、IOO倍或以上的分子量，或者平均分子量相差2、5、10、20、50、IO(H咅或以上。一種測定分子量的方法是凝膠滲透色譜法("GPC")，也被稱為凝膠過濾色語法("GFC")，例如混合床柱、CH2Cl2溶劑、光散射檢測器和離線dn/dc。其它方法是本領域中公知的。在某些實施方案中，聚合物在40。C氯仿中的固有粘度通常從大約0.01至大約2.0dL/g不等，或者大約0.01至大約1.0dL/g，偶爾大約O.Ol至大約0.5dL/g。在一個實施方案中，載體可以由聚氨基酸組成，優(yōu)選由非蛋白質聚氨基酸、聚乙烯亞胺、天然糖類、胺化和羧化多糖、胺化和羧化寡糖、磺化多糖、磺化寡糖、氨基羧化多糖、氨基羧化寡糖、羧曱基化多糖、羧曱基化寡糖、聚酰胺胺、聚丙烯酸、多元醇、聚乙烯醇和聚的氨基、羧基、羥基、磺酸或硫醇基團，這基本上改變了它們的性質，并且使其同時為可溶的和疏水的。載體可以由含有可修飾官能團例如但不限于多石威、多元醇或多酸的聚合物組成，例如聚賴氨酸、聚絲氨酸、聚蘇氨酸、聚甘油、聚酪氨酸、聚天冬氨酸或聚谷氨酸，或羧化的聚賴氨酸。這些沿骨架的反應性或帶電荷的官能團是有用的，因為它們能夠與保護基或疏水基或其衍生物或類似物形成化學鍵。這些官能團也可以用小疏水基團加帽，以除去任何電荷及使載體骨架具有疏水性。聚氨基酸可以是單一種類的或者至少兩種不同種類的氨基酸的聚合物，或者可以是嵌段共聚物。聚氨基酸可以包括但不限于通過可切割的鍵例如s-s鍵連接的聚氨基酸片段。特別是，聚氨基酸可以是聚-(L和/或D)-賴氨酸、聚-(L和/或D)-谷氨酸、聚-(L和/或D)-谷氨酸、聚-(L和/或D)-天冬氨酸、聚-(L和/或D)-絲氨酸、聚-(L和/或D)-蘇氨酸、聚-(L和/或D)-酪氨酸、聚-(L和/或D)-精氨酸或聚-ot,(3-(2-氨基乙基)-(L和/或D)-天冬酰胺。所有這些聚合物都具有可用于連接疏水基團、保護基或定向分子的氨基、羧基、羥基或硫醇基，使它們同時為可溶的和疏水性的。疏水核載體組合物的聚氨基酸載體優(yōu)選具有5-560個氨基酸單位，分子量為500-100,000道爾頓，優(yōu)選是非蛋白質的。胺化多糖或寡糖載體的例子包括但不限于聚葡糖胺(殼聚糖)和聚半乳糖胺。羧化多糖或寡糖載體的例子包括但不限于聚葡萄糖醛酸和聚半乳糖醛酸。聚合載體的其他例子包括羧化或羧曱基化的直鏈聚-L-賴氨酸(PL)或聚-D-賴氨酸；羧化或羧甲基化的聚a,(3-(2-氨基乙基)-D，L-天冬酰胺；聚-L-天冬氨酸；聚-L-谷氨酸、組氨酸與帶正電荷或負電荷的氨基酸的共聚物、羧化聚乙烯亞胺，即與碳酸衍生物反應的聚乙烯亞胺；天然糖類或帶有羧基的其化學衍生產(chǎn)物，例如半乳糖醛酸、葡糖醛酸、甘露糖醛酸、透明質酸、果膠酸、神經(jīng)氨酸、海藻酸、角叉菜膠；氧化的葡聚糖；胺化的例如含有連接的氨基的直鏈或支鏈多糖或寡糖；聚羧化的、羧曱基化的、硫酸化的或磷酸化的多糖或寡糖，例如與碳酸、二碳酸、硫酸、氨基硫酸、磷酸衍生物反應的，導致與羧基、氨基羧基、羧甲基、硫酸基、氨基或磷酸基連接。這些寡糖可以通過化學改變例如葡聚糖、甘露聚糖、木聚糖、支鏈淀粉、纖維素、殼聚糖、瓊脂糖、巖藻多糖、半乳聚糖、阿拉伯聚糖、果聚糖、鞣質(tan)、巖藻聚糖、殼多糖、石耳素、果聚糖或果膠而獲得。另夕卜，這些多糖或寡糖可以是單糖如葡萄糖、半乳糖、甘露糖、半乳糖、脫氧葡萄糖、核糖、脫氧核糖、阿拉伯糖、巖藻糖、木糖、木酮糖、核酮糖、聚酰胺胺的直鏈或支鏈異聚物或同聚物；聚丙烯酸；多元醇，例如聚乙烯醇、聚木糖醇，羧基或氨基與之化學連接。聚氨基酸的分子量優(yōu)選大于500小于100,000。具有窄分子量(MW)分布的聚氨基酸優(yōu)于具有寬MW分布的聚氨基酸。聚氨基酸通過化學合成或重組技術如遺傳工程技術制備。在另一個實施方案中，作為載體的聚合物可以是在遠端具有疏水基團組成負載分子或活性劑結合部位的聚(乙二醇)(PEG)。該實施方案可以概要地表示如下PEG-疏水基團-負載分子?；蛘撸琍EG可以沿其骨架官能化，使疏水部分突出于骨架，這將允許負載分子與突出的疏水部分結合。這種官能化也可以允許有突出的保護鏈。在另一個實施方案中，作為載體的聚合物可以是通式為HO-PEG-[-CH2CH(OH)CH20-]n-PEG-OH的具有聚(乙二醇)的聚甘油，其中PEG表示聚(乙二醇)，n是3-1000的整數(shù)。6,509,323;6,492,560;6,468,532;6,521,736;6,348,069;5,871，710;和6，051，549'在此引入作為參考。載體的另一個例子可以是支架(Stent)表面，以形成藥物洗脫支架。/",在和微在可以用作本發(fā)明載體的納米顆粒和微粒的例子包括質量密度小于1.0g/cm3、或者小于大約0.4g/cm3的多孔顆粒。多孔結構例如允許向肺中深入遞送較大直徑的、例如平均直徑大于5微米的治療性氣霧劑。這些多孔顆?？梢孕揎棡楹心軌蚪Y合負載分子的疏水基團。多孔顆粒通常是生物可降解的和生物相容性的，任選地能夠以可控的藥物遞送速率生物降解。多孔顆?？捎扇魏文軌蛐纬少|量密度小于約0.4g/cmS的多孔顆粒的材料制得。無機和有機材料均可使用。例如，可以使用陶資。顆粒可由任何能夠形成密度小于約0.4g/cmS的多孔顆粒的生物相容的及優(yōu)選生物可降解的聚合物、共聚物或混合物制得。可以使用表面侵蝕的聚合物形成多孔顆粒。例如，可以使用聚酸酐，如聚[(對羧基苯氧基)己烷酐]("PCPH")。生物可降解的聚酸酐例如在美國專利4,857，311中描述。在另一實施方案中，可以使用骨架溶蝕(bulkeroding)聚合物，如那些基于聚酯的聚合物，包括聚(羥酸)。例如，聚乙醇酸("PGA")或聚乳酸("PLA")或其共聚物可用于形成多孔顆粒，其中聚酯已引入了帶電荷的或可功能化的或可修飾的基團，如下面所述的氨基酸。這些可功能化基團可修飾為含有能結合負載分子的疏水基團。其他聚合物包括聚酰胺、聚碳酸酯、聚烷烯如聚乙烯、聚丙烯、聚乙二醇、聚氧化乙烯、聚對苯二甲酸乙二酯、聚乙烯基化合物如聚乙烯醇、聚乙烯醚、丙烯酸和曱基丙烯酸的聚合物、纖維素、多糖類、以及肽或蛋白質、或其能形成質量密度小于約0.4g/cm3的多孔顆粒的共聚物或混合物。多聚物可以選擇為或修飾為具備適當?shù)捏w內穩(wěn)定性和降解速率以用于不同的可控藥物遞送應用。作為另一個實例，多孔顆粒可以由功能化的聚酯接枝共聚物形成，如Hrkach等人，Macromolecules,28:4736-4739(1995);和Hrkach等,"Poly(L-Lacticacid-co畫aminoacid)GraftCopolymers:AClassofFunctionalBiodegradableBiomaterials"inHydrogelandBiodegradablePolymersforBioapplications,ACSSymposiumSeriesNo.627,RaphaelM.Ottenbrite等人，Eds.，AmericanChemicalSociety,Chapter8，pp.93-101,1996中所述，其內容在此引用作為參考。功能化的接枝共聚物是聚酯如聚乙醇酸或聚乳酸的共聚物，和另外一種包含可功能化或離子化基團的聚合物，如聚氨基酸。在另一個實施方案中，使用梳樣接枝共聚物，其包含引入氨基酸的直鏈聚酯骨架，和從聚酯骨架的氨基酸基團延伸的聚(氨基酸)側鏈。聚酯可以是a-羥酸如乳酸、乙醇酸、羥基丁酸和戊酸或其衍生物或組合物的聚合物。發(fā)現(xiàn)在聚合物中包含可離子化側鏈如聚賴氨酸能夠使用本領域公知的制備微粒的技術，如溶劑蒸發(fā)，形成高度多孔的顆粒。其他的可離子化基團，如氨基或羧基，也可以共價或非共價地引入至聚合物中從而增強多孔性。例如，可以將聚苯胺引入至聚合物中。這些基團可以進一步修飾，從而包含能結合負載分子的疏水基團。可以用來形成多孔聚合顆粒的聚酯接枝共聚物的一個例子是接枝共聚物聚(乳酸-共聚-賴氨酸-接枝-賴氨酸)("PLALLys")，它具有由聚(乳酸-共聚-Z-L-賴氨酸)(PLAL)組成的聚酯骨架和接枝賴氨酸鏈。PLAL-Lys是一種梳樣接枝共聚物，例如具有98mol%乳酸和2mol%賴氨酸的骨架組成，和從骨架的賴氨酸部位延伸出的聚(賴氨酸)側鏈。聚(乳酸)共聚物的應用是有利的，因為它生物降解為能被機體處理的乳酸和賴氨酸。存在的骨架賴氨酸基團可以作為聚(氨基酸)側《連延長的起始位點。在合成時，可以制備接枝共聚物，以優(yōu)化多孔顆粒的不同特性，包括i)將要遞送的藥物質和共聚物之間的疏水相互作用，以提供藥物的穩(wěn)定化以及遞送后活性的保持；ii)聚合物的降解速率，因而，藥物釋放速率i普；iii)通過化學修飾的表面特性和靶向能力；和iv)顆粒多孔性。至于其他適合本發(fā)明的納米顆粒和微粒的例子，參見美國專利6，447,753和6,274，175。萄#龍持參在某些實施方案中，本發(fā)明使用的載體可以是固體支持物，如聚合物珠或樹脂，例如Wang樹脂。支持物可以是具備一定剛度的固體，如硅、塑料等。固體也可以是柔性材料，如塑料或其他合成材料(如尼龍)、由天然聚合物(如纖維素或絲)或其衍生物(如硝酸纖維)等制成的材料。在某些實施方案中，支持物是多孔材料，它可以是剛性的或者柔性的、多網(wǎng)格的纖維，包括織物，等等。在某些實施方案中，固體支持物是珠或球，它們可以是多孔的。載體可由柔性的半固體聚合物制成。柔性是反復彎曲并可回復原狀的特性。由柔性聚合物制成的載體適合放置于將會遇到相鄰器官或體壁運動的解剖部位。組織移動可以使柔性載體充分變形而不會導致組織損傷。柔性對于從原位置移走時防止損傷是特別有利的。這種柔韋刃性載體可適用于保護脈管，如頸部的頸動脈，或用于覆蓋頸部更加精細的結構，如也可能會被局部運動影響的頸靜脈。類似地，柔性載體也可以用于保護在頸淋巴清掃術時暴露出的神經(jīng)，如脊髓副神經(jīng)，其中載體的柔性可使其在遇到運動時彎曲或變形而不是損傷或侵蝕進神經(jīng)。以上述方式使用本發(fā)明的載體可以允許進行更小范圍的切開，而在外科保護對于功能重要的結構。載體可設計為適合植入特定解剖區(qū)域的三維結構。載體可被制為薄膜、網(wǎng)狀、片狀、管狀或其他任何適合特定解剖區(qū)域尺寸和功能需求的形狀。聚合物的物理特征也可通過使用本領域技術人員熟悉的方法修飾化學成分及其交聯(lián)的方式加以調節(jié)，以達到所需程度的柔性。一種產(chǎn)生具有反應部位的固體支持物的方法是直接衍生化固體支持物，使其可與化合物偶聯(lián)。用來實施該方法的化學方法與用來衍生可控孔度玻璃(cpg)珠及聚合物珠的方法相同或類似。通常，該方法的第一步是在支持物上產(chǎn)生羥基(如果載體中不含的話)或氨基。如果已存在或已產(chǎn)生羥基，通常將其轉化為氨基，例如通過將羥基與Y-氨丙基三乙氧基硅烷反應。可以使用酸肝、環(huán)酸酐、活化酯、與聚合烯化氧的反應和本領域公知的其它方法將疏水基團加到氨基上。一種提高固體支持物載體的反應性表面積的方法是產(chǎn)生一氧化硅的柱狀結構，例如通過SiO的熱蒸發(fā)。另外一種這樣的方法是向反應中插入織物，如非織造玻璃或塑料(優(yōu)選玻璃纖維或聚丙烯纖維)織物和血漿處理織物以產(chǎn)生反應部位。再另外一種方法使用旋壓玻璃，通過熱氧化由硅-倍半氧烷(sil-sesquioxane)梯形聚合物結構產(chǎn)生幾乎化學計量的SiO薄膜。溶膠-凝膠法由有機金屬原料產(chǎn)生玻璃樣組合物，方法是首先在混合醇中形成聚合有機金屬結構，然后小心干燥和烘烤。當溶膠-凝膠系統(tǒng)在高于臨界溫度和溶液壓力的條件下干燥時，產(chǎn)生氣溶膠。氣溶膠具有類似于玻璃的化學組成(例如SiO),但是具有具有極多孔的微結構。它們的密度相對較低，在某些情況下只有約1-3%的固體組成，其余為空氣。蔬#差欲及與我#^遂^用于連接疏水基團和保護基的化學連接的類型取決于復合物的所需生物半衰期和與復合物相關的治療劑。如需要較長的半衰期，則優(yōu)選用醚鍵或酰胺鍵，而酯鍵則用于在生物液體或組織中半衰期較短的載體。這兩種化學鍵可共用于實現(xiàn)特定負載分子所需的穩(wěn)定性。S-S鍵也可用于實現(xiàn)用于特定目的的所需半衰期?；瘜W連接可包含沿載體或骨架暴露的修飾的氨基。修飾的氨基是包含來源于脂肪酸的烷基?；騺碓从诜枷阃榛岬姆枷阃榛；氖杷倩鶊F的酰胺連接，其通式為[CxHyOz],其中x為2-36;y為3-71;z為l-4。優(yōu)選z二l，這是與氨基的酰胺鍵的最低要求。然而起始分子在酰胺鍵形成之前可以是z大于1。疏水官能團可包含具有兩個末端的疏水烷基，其通式為[-OC(CH2)xCO-]或[-OC(CH2)xCN-]，其中x為2-36，并且可以進一步包含與疏水基團的另一末端共價連接的保護基、其類似物或衍生物。在這種情況下，氨基的修飾可以是完全的，而沒有剩余游離氨基，或者修飾可以是部分修飾，修飾程度可以是50-100%,更優(yōu)選90-100%。此外，剩余的氨基可以進一步修飾，以含有沒有保護基的疏水部分。得到的組合物也是本發(fā)明的一種實施方案。本發(fā)明的的另一目的在于提供一種將疏水基團連接至沿其長度具有氨基的載體上的方法?？赏ㄟ^酰胺鍵形成完成這一修飾。作為一個實例，而不是限制本發(fā)明的范圍，使用含有碳二亞胺的試劑，如l-乙基-3-(3-二曱基氨基丙基)-碳二亞胺或二環(huán)己基碳二亞胺，可以將含羧基的疏水分子連接至載體的氨基上。碳二亞胺試劑含有由通式N二ON組成的官能團。在這一偶聯(lián)反應過程中，被活化的羧基(O-?；愲?中間體)可任選地通過使用N-羥基琥珀酰亞胺形成N-羥基琥珀酰亞胺酯而穩(wěn)定化。這一相對穩(wěn)定的中間體可與載體如聚賴氨酸或殼聚糖的氨基反應，從而形成氨基-?；I或酰胺鍵。另外一種連接疏水基團的方式是將載體的氨基與脂肪酸酐反應。例如，載體氨基與棕櫚酸酸酐的反應形成含16個碳原子的長鏈疏水基團。任何脂肪酸酸酐可以用此方式使用。本發(fā)明的另一目的在于提供一種將疏水基團連接至沿其長度具有羧基的載體上的方法。可通過酰胺鍵形成完成這一修飾。作為一個實例，而不是限制本發(fā)明的范圍，可以活化載體的羧基，以與疏水基團的氨基官能團反應。這種活化可以使用含有碳二亞胺的試劑實現(xiàn)，如1-乙基-3-(3-二甲基氨基丙基)-碳二亞胺或二環(huán)己基碳二亞胺。碳二亞胺試劑含有由通式N二C二N組成的官能團。在活化過程中，羧基形成O-酰基異脲-中間體，后者任選地可用N-羥基琥珀酰亞胺穩(wěn)定化，以形成N-羥基琥珀酰亞胺酯。這一相對穩(wěn)定的中間體可與疏水基團的氨基反應。如果疏水基團或分子不含氨基，可以非常容易地向該分子中引入氨基，化學方法是本領域技術人員公知的。本發(fā)明的另一目的是提供一種將疏水基團連接至沿其長度具有羥基的載體上的方法。脂肪酸的酰基囟、羧基芳香烴與或者二羧酸烷基的合成將有助于羥基的修飾。?；u的合成可通過羧酸部分與二氯亞砜(S0C12)或其他本領域技術人員公知的試劑的反應來完成。生成的?；湛膳c聚氨基酸如聚絲氨酸、聚蘇氨酸和聚酪氨酸的殘基中存在的醇官能團反應。該反應將導致酯鍵形成，從而將疏水基團或分子與載體連接。通過沿載體長度形成酯鍵連接疏水基團的另外一種方式是將載體羥基與脂肪酸酸酐反應。例如，載體羥基與棕櫚酸酸酐的反應可生成含16個碳原子的長鏈疏水基團。任何脂肪酸酸酐可以用此方式使用。本發(fā)明還涉及一種疏水核載體組合物，其包含聚合載體或具有保護鏈的聚合載體，進一步包含沿聚合物暴露的修飾的羧基。聚合載體中羧基的修飾是包含含氮烴鏈或脂肪酸酯(或酰胺)或含氮芳香烴(可具有酯或酰胺鍵)的疏水官能團的酰胺共價連接，其通式為[NwCxHyOz],其中w為l-6;x為2-36;y為3-74;z為0-10,其中在與載體或骨架連接后，得到的部分沒有電荷，并且是非極性的，因此是疏水性的。本發(fā)明還涉及一種疏水核載體組合物，其包含具有沿載體或骨架暴露的修飾羧基的聚合載體，其中聚合載體中羧基的修飾是包含具有兩端疏水烷基的疏水官能團的酰胺共價連接，其通式為[-NC(CH2)xCN-]或[-NC(CH2)xCO-]，其中x為2-36，并且進一步包含與疏水基團的另一末端共價連接的保護基、其類似物或衍生物。在此情況中，沿載體的氨基的修飾可以是完全修飾，其中沒有剩余游離氨基，或者可以是部分修飾，修飾程度可以是50-100%，更優(yōu)選90-100%。此外，剩余的氨基可以進一步修飾為含有不含保護基的疏水部分。得到的組合物也是本發(fā)明的一個實施方案。本發(fā)明還涉及一種疏水核載體組合物，其包含聚合載體或具有保護鏈的聚合載體，沿聚合物進一步包含修飾的羥基。羥基的修飾是包含來源于脂肪酸的烷基?；騺碓从诜枷阃榛岬姆枷阃榛；鶡N的疏水官能團的醚或酯共價連接，其通式為[CxHyOz],其中x為2-36;y為3-74;z為l-10,其中在與載體或骨架連接后，得到的部分沒有電荷，并且是非極性的，因此是疏水性的。本發(fā)明還涉及一種包含沿載體或骨架具有修飾羥基的聚合載體的疏水核載體組合物，其中聚合載體中羥基的修飾是包含兩端疏水烷基的疏水官能團的酯共價連接，其通式為[-OC(CH2)xCO-]或[-OC(CH2)xCN-]，其中x為2-36,進一步包含與疏水基團的另一末端共價連接的保護基、其類似物或衍生物。在這種情況下，沿載體的羥基的修飾可以是完全，其中沒有剩余游離羥基，或者可以是部分修飾，修飾程度可以是50-100%，更優(yōu)選90-100Q/。。此外，可以進一步修飾剩余的羥基，使之含有沒有保護基的疏水部分。得到的組合物也是一種本發(fā)明的實施方案。本發(fā)明還涉及一種組合物，其包含聚合載體或具有保護鏈的聚合載體，其進一步包含沿載體或骨架暴露的修飾的氨基。聚合載體中氨基的修飾是包含?；舅峄蝓；枷銦N的疏水官能團的酰胺共價連接，其通式為[NwCxHyOz],其中w為0-6;x為2-36;y為3-74;z為1-10。本發(fā)明還涉及一種組合物，其包含聚合載體或具有保護鏈的聚合載體，其進一步包含沿聚合物暴露的修飾的羧基。聚合載體中羧基的修飾是包含含氮烴鏈或脂肪酸酯(或酰胺)或含氮芳香烴(可以具有酯或酰胺鍵)的疏水官能團的酰胺共價連接，其通式為[NwCxHyOz]，其中w為l-6;x為2-36;y為3-74;z為0-10,其中在與載體或骨架連4妾后，得到的部分沒有電荷。作為疏水基團包含的是維生素E、維生素A、維生素D、維生素K和它們的類似物或書f生物。本發(fā)明還涉及一種組合物，其包含聚合載體或具有保護鏈的聚合載體，進一步包含沿聚合物的修飾的羥基。羥基的修飾是包含?；舅峄蝓；枷銦N的疏水官能團的酯共價連接，其通式為[CxHyOz]，其中x為2-36;y為3-74;z為l-10,其中在與載體或骨架連接后，得到的部分沒有電荷。本發(fā)明還涉及一種組合物，其包含具有保護鏈的聚合載體，進一步包含沿聚合物暴露的未修飾的氨基，其中疏水性主要由保護鏈提供。本發(fā)明還涉及一種組合物，其包含具有保護鏈的聚合載體，進一步包含沿聚合物暴露的未修飾的羧基，其中疏水性主要由保護鏈提供。本發(fā)明還涉及一種組合物，其包含具有保護鏈的聚合載體，進一步包含沿聚合物暴露的未修飾的羥基，其中疏水性主要由保護鏈提供。用于連接疏水基和保護基的化學連接的類型取決于所需的復合物的生物半衰期和與該復合物有關的治療劑。如果需要有較長的半衰期，優(yōu)選酰胺鍵，而酯鍵可用于需要較短半衰期或在生物液體或組織中的穩(wěn)定性的載體。兩種化學鍵的混合物可以用于實現(xiàn)將要遞送的特定治療劑的所需穩(wěn)定性。S-S鍵可以用于實現(xiàn)有益于其預期治療和診斷用途的載體的所需性質。負載分子本發(fā)明還包括包含負載分子的疏水核組合物，其中負載分子是以下物質之一治療劑或診斷劑。治療劑負載分子包括細胞因子、淋巴因子、激素、激素激動劑、激素拮抗劑、抗生素、止痛劑、毒素、光毒素、細胞抑制劑、細胞毒性劑、精神藥物、甾體抗炎藥、非甾體抗炎藥、免疫抑制劑、抗細菌劑、抗病毒藥、抗真菌藥、螯合劑、維生素、蛋白酶抑制劑、殺蟲劑、氨基糖苷類、多粘菌素、ACE抑制劑。這些負載分子可以是蛋白質、抗體、抗體片段、肽、重組肽、從植物中分離的肽、從真菌中分離的肽、從動物中分離的肽、從細菌中分離的肽、從病毒中分離的肽、從培養(yǎng)的細胞中分離的肽、合成肽、擬肽、有機化合物、合成有機化合物、從植物中分離的有機化合物、從真菌中分離的有機化合物、從動物中分離的有機化合物、從細菌中分離的有機化合物、從病毒中分離的有機化合物、從培養(yǎng)的細胞中分離的有機化合物、有機金屬化合物、脫氧核糖核酸、核糖核酸、寡核苷酸、其他核酸、寡糖、碳水化合物；脂質；光敏性有機化合物和蛋白聚糖。治療劑負載分子的非限制性例子有胰高血糖素樣肽、胰高血糖素樣肽衍生物、依澤那太、胰高血糖素樣肽-1、胰高血糖素樣肽-2、瘦蛋白片段、腸抑胃肽(GIP)、表皮生長因子(EGF)受體配體、EGF、轉化生長因子oc(TGF-a)、P細胞生長因子、胃泌素/縮膽嚢素受體配體、胃泌素、縮膽嚢素、溶葡萄球菌素、干擾素、干擾素y、干擾素P(例如干擾素-(31、干擾素-(32)、干擾素a(例如干擾素a-2a或干擾素a-2b)、白介素—1、白介素-2、白介素-4、白介素-6、白介素-8、白介素-10、白介素-12、腫瘤壞死因子、腫瘤壞死因子a、腫瘤壞死因子卩、auristatin、乳鏈菌肽、胰島素、胰島素樣生長因子、胰島素樣生長因子l、生長激素、人生長激素、生長激素釋放激素(GHRH)、神經(jīng)生長因子、腦源性神經(jīng)營養(yǎng)因子、酶、內皮抑制素、制管張素、血小板反應素、尿激酶、鏈激酶、凝血因子VII、凝血因子VIII、粒細胞-巨噬細胞集落刺激因子(GM-CSF)、粒細胞集落刺激因子(G-CSF)、血小板生成素、降鈣素、曱狀旁腺素(PTH)及其片段、促紅細胞生成素、心房鈉尿肽、單克隆抗體、單克隆抗體片段、促生長素抑制素、蛋白酶抑制劑、促腎上腺皮質激素、促性腺激素釋放激素、催產(chǎn)素、促黃體生成激素釋放激素、促卵泡激素、葡糖腦苷脂酶、血小板生成素、非格司亭、前列腺素、依前列醇、前列環(huán)素、環(huán)孢菌素、血管升壓素、特利加壓素、去氨加壓素、色甘酸鈉(色甘酸鈉或二鈉)、血管活性腸肽(VIP)、萬古霉素、抗孩吏生物劑、多粘菌素b、抗真菌藥、抗病毒藥、Fuzeon(恩夫韋地)、多柔比星、依托泊苷、芬太尼、氯胺酮、維生素、達托霉素、齊考諾肽、特立帕肽、Hematide、組織因子途徑抑制劑(TFPI)、去鐵胺(DFO)、催產(chǎn)素、環(huán)孢菌素、Hematide、組織因子途徑抑制劑(TFPI)、Integrilin(依替巴肽,)。負載分子也可以是磺胺，如磺胺、磺胺曱噁唑和磺胺醋酰；曱氧千啶，特別是與磺胺甲噁唑聯(lián)用；喹啉，如諾氟沙星和環(huán)丙沙星；(3-內酰胺化合物，包括青霉素，如青霉素G、青霉素V、氨千青霉素、阿莫西林、亞胺培南、氨曲南和哌拉西林；頭孢菌素，如頭孢菌素C、頭孢噻吩、頭孢西丁和頭孢他啶；(3內酰胺酶抑制劑，如克拉維酸；氨基糖苷，如慶大霉素、阿米卡星、妥布霉素、新霉素、卡那霉素和奈替米星；四環(huán)素，如金霉素和多西環(huán)素；氯霉素；大環(huán)內酯，如紅霉素；或混合抗生素，如克林霉素、多粘菌素和桿菌肽；多烯抗生素，如兩性霉素B、制霉菌素和哈霉素；氟胞嘧啶；咪唑或三唑，如酮康唑、咪康唑、伊曲康唑和氟康唑；用于真菌病如曲霉菌病、念珠菌病或組織胞漿菌病的灰黃霉素；抗病毒藥，如用于病毒病的齊多夫定、阿昔洛韋、更昔洛韋、阿糖腺苷、碘苷、曲氟尿苷和利巴韋林；阿司匹林、保泰松、非那西丁、醋氨酚、布洛芬、吲哚美辛、舒林酸、吡羅昔康、雙氯芬酸；用于炎性疾病如關節(jié)炎的金和甾體抗炎藥；ACE抑制劑，如用于治療心律不齊的卡托普利、依那普利、賴諾普利、奎尼丁、普魯卡因胺、利多卡因、恩卡尼、普萘洛爾、艾司洛爾、溴芐銨、維拉帕米(verapimil)和地爾硫卓；用于治療低脂蛋白血癥的洛代他汀、立普妥、氯貝丁酯、考來烯胺、普羅布考和煙酸；有機硝酸酯，如亞硝酸戊酯、硝酸甘油和二硝酸異山梨酯；鈣通道阻斷劑，如地爾硫卓、硝苯地平和維拉帕米；(3腎上腺素能拮抗劑，如用于心血管疾病的普萘洛爾；利尿劑，如噻嗪化物；例如，苯并噻二嗪或袢利尿劑，如呋塞米；交感神經(jīng)阻滯藥，如甲基多巴、可樂定、胍那芐(gimabenz)、脈乙口定(guanaethidine)和利血平；血管擴張劑，^口肼屈漆(hydalazine)和米諾地爾；蒽環(huán)類抗生素，如多柔比星、柔紅霉素和伊達比星；共價DNA結合化合物、共價DNA結合化合物和鉑類化合物，如順鉑和卡鉑；葉酸拮抗劑，如氨甲喋呤和三曱曲沙；抗代謝物和嘧咬拮抗劑，如氟尿嘧啶、5-氟尿嘧。定和氟脫氧尿苷；抗代謝物和。票呤拮抗劑，如巰。票呤、6-巰嘌呤和硫鳥嘌呤；抗代謝物和糖修飾類似物，如阿糖胞苷和氟達拉濱；抗代謝物和核糖核苷酸還原酶抑制劑，如羥基脲；共價DNA結合化合物和氮芥化合物，如環(huán)磷酰胺和異環(huán)磷酰胺；共價DNA結合化合物和烷磺酸酯，如白消安(busulfane);亞硝基脲，如卡莫司??；共價DNA結合化合物和曱基化劑，如丙卡巴肼；共價DNA結合化合物和氮丙啶，如絲裂霉素；非共價DNA結合化合物；共價DNA結合化合物，如米托蒽醌和博來霉素；染色質功能抑制劑和拓樸異構酶抑制劑，如依托泊苷、替尼泊苷、喜樹堿和托泊替康；染色質功能抑制劑和微管抑制劑，如長春花生物堿類，包括長春新堿、長春堿、長春地辛(vindisine)和紫杉醇、泰素帝或其它紫杉垸；影響內分泌功能的化合物，如潑尼松、潑尼松龍、他莫昔芬、亮丙瑞林、炔雌醇，抗體，如赫賽?。换?，如p-53基因、pl6基因、MIT基因和E-鈣粘蛋白基因，集落刺激因子，如粒細胞集落刺激因子(G-CSF)、巨噬細胞集落刺激因子(M-CSF)和粒細胞巨噬細胞集落刺激因子(GM-CSF);用于治療癌癥的全反式視黃酸或其它類視黃醇；免疫抑制劑，如環(huán)孢菌素、免疫球蛋白、柳氮磺胺吡啶(sulfasazine)、甲氧沙林和沙利度胺halidoimide);用于胰島素不足型糖尿病的胰島素和胰高血糖素；用于治療骨質疏+〉癥、高鈣血癥和佩吉特病的降鈣素和阿屈膦酸鈉；嗎啡和相關阿片類藥物；哌^弄啶或同類物；美沙酮或同類物；阿片類拮抗劑如烯丙嗎啡；中心活性鎮(zhèn)咳藥，如右美沙芬(dexthromethrophan);用于疼痛控制的四氬大麻酚或屈大麻酚、利多卡因和布比卡因(bupivicaine);氯丙嗪、丙氯拉嗪；大麻素，如四氫大麻酚、苯丁酮類如氟哌利多；苯曱酰胺，如用于治療惡心和嘔吐的甲氧氯普胺；作為抗凝血藥、抗溶栓藥或抗血小板藥的肝素、香豆素、鏈激酶、組織纖溶酶原激活物因子(t-PA);用于治療炎性腸病的肝素、柳氮磺吡啶、煙堿和腎上腺皮質類固醇和肺瘤壞死因子-a;用于治療吸煙成癮的煙堿；用于激素治療的生長激素、生長激素釋放激素(GHRH)、促黃體激素、促皮質素和生長素；和用于總體預防的腎上腺素。負載分子可以進一步包括曱基黃嘌呤，如茶堿；色甘酸鈉；(3-腎上腺素能激動劑，如沙丁胺醇和特布他林(tetrabutaline);抗膽^威能生物堿，如阿托品和異丙托溴銨；腎上腺皮質類固醇，如用于哞喘或炎性疾病的強的松、倍氯米松和地塞米松；以上列出的用于在肺病(以上所列的具體疾病，包括肺病)患者中抗細菌和抗真菌感染的抗細菌藥和抗真菌藥，特別是包括使用氨基糖苷類(例如阿米卡星、妥布霉素和慶大霉素)、多粘菌素類(例如多粘菌素E、粘菌素)、羧西林(carboxycillin)(替卡西林)和單環(huán)(3-內酰胺類，其用于治療例如嚢性纖維化患者中的革蘭氏陰性抗細菌感染、用于治療肺結核患者中的革蘭氏陰性感染、用于治療慢性支氣管炎和支氣管擴張癥患者中的革蘭氏陰性感染、用于治療總體免疫減弱患者中的革蘭氏陰性感染；使用噴他脒治療卡氏肺嚢蟲(Pneumocytiscarinii)感染的患者(例如HIV/AIDS患者)；使用多?？股厝鐑尚悦顾谺、制霉菌素和哈霉素；氟胞嘧。定；咪哇或三峻，如S同康哇、咪康唑、伊曲康唑和氟康唑；灰黃霉素，其用于治療真菌感染如曲霉菌病、念珠菌病和組織胞漿菌病，特別是起源于或傳播到肺的那些疾??；使用皮質類固醇和以上列出的其它甾體以及非甾體抗炎藥治療肺病(以上所列的具體疾病，包括肺病)患者中的抗炎性病癥；DNase、阿米洛利、CFTRcDNA,用于治療嚢性纖維化；用于治療肺氣腫的a-1-抗胰蛋白酶和a-1-抗胰蛋白酶cDNA;氨基糖香，如阿米卡星、妥布霉素或慶大霉素、異煙肼、乙胺丁醇、利福平及其類似物，用于治療肺結核或分枝桿菌感染；用于治療呼吸道合胞病毒的利巴韋林；使用以上列出的用于肺癌的抗癌藥，特別是順鉑、卡鉑和紫杉烷類，如紫杉醇和紫杉烷類、喜樹堿、伊立替康和其它喜樹堿類、赫賽汀、p-53基因。適合在本發(fā)明中用作負載分子的生物活性治療劑包括本身不通過(或者只通過給藥劑量的一部分)胃腸粘膜和/或對胃腸道中的酸和酶的化學和/或酶切敏感的化合物；或者它們的任意組合。其中包括蛋白質、多肽、肽、激素、多糖特別是粘多糖和它們的混合物。在進一步的實施方案中，本發(fā)明涉及上述組合物，其中一種以上的負載分子與聚合載體的疏水基團結合。在進一步的實施方案中，本發(fā)明涉及上述組合物，其中負載分子是診斷劑。其中包括熒光分子、順磁分子和放射性分子。本發(fā)明的另外一個目的是提供一種向本發(fā)明的疏水核載體組合物中裝載負載分子的方法，包括將足量的負載分子和疏水核載體在適當?shù)娜軇┲谢旌希⑶胰芜x地將負載分子和疏水核載體共凍干。負載分子的足量可以隨負載分子變化，但是優(yōu)選為疏水核載體重量的1-400%。本發(fā)明的目的是提供一種使用本發(fā)明所述的組合物以及適當?shù)倪x自PDR或PhysicianDeskReference(MedicalEconomicsCompany,Inc.Montvale,NJ于2001出版)所述的負載分子治療"TheMerkManualofDiagnosisandTherapy"(Merck&Co.,Inc，Rahway，NJ的一個部門，MerckLaboratories,于1992出版)中所述的各種疾病的方法。MerkManualofDiagnosisandTherapy和PDR在此引入作為參考。負載分子對于特定疾病的適用性可以通過參考'TheMerkManualofDiagnosisandTherapy"或PDR確定。保護鏈或基團本發(fā)明的疏水核載體組合物及其制備及使用方法可以得到由保護鏈提供的大量期望的結果和特征，一種或多種保護鏈(如果存在的話)可以存在于本發(fā)明的任何特定實施方案中。組合物的保護鏈優(yōu)選是氧化乙烯的聚合物(聚(乙二醇)，即PEG或聚(乙二醇)的單甲氧基醚即MPEG)。保護鏈是有用的，因為l)它確保了組合物的溶解性，同時保持高藥物有效負載，例如GLP-l,在觀察到溶解度降低之前，至少30%重量負載在載體中；2)保護鏈有助于形成空間障礙，這可以阻止負載分子(肽、蛋白質和其他治療劑)與體內的其它大分子、酶和細胞結合或相互作用；3)保護鏈提供具有長循環(huán)時間或體內生物半衰期的負載分子(肽和蛋白質和藥物)(例如，減少腎臟中的腎小球濾過、減少腎臟和肝臟攝取、減少巨噬細胞攝取，等等)，以及產(chǎn)生循環(huán)儲備；4)保護鏈降低了載體或其負載分子如肽或蛋白質藥物的不希望的免疫原性；5)腫瘤血管的異常通透性通過將負載分子或抗腫瘤化合物遞送至腫瘤，有助于具有負載分子的載體在炎癥部位的積累，特別可用于治療腫瘤；6)保護鏈也可以提供額外的結合強度；和7M呆護鏈可以提供與表面的結合，例如通過與粘膜相互作用提供與粘膜表面的結合。疏水核載體組合物的保護鏈可以是，例如，聚乙二醇，曱氧基聚乙二醇，曱氧基聚丙二醇，聚乙二醇、曱氧基聚乙二醇或甲氧基聚丙二醇的共聚物，或其衍生物。另外，保護鏈可以是聚乙二醇和聚氨基酸、多糖、聚酰胺胺、聚乙烯胺或多核苷酸中的任一種的嵌段共聚物。保護鏈也可以是包括二羧酸單酯的聚乙二醇的共聚物。保護鏈也可以是唾液酸鏈。保護鏈優(yōu)選地具有500-10,000道爾頓的分子量。在另夕l、一個相關方面，疏水核載體組合物包括保護鏈，該保護l連為聚乙二醇、聚丙二醇、聚乙二醇和聚丙二醇的共聚物；或其烷氧基衍生物，優(yōu)選曱氧基聚乙二醇、甲氧基聚丙二醇、或甲氧基聚乙二醇和甲氧基聚丙二醇的共聚物；保護鏈可以是聚乙二醇單胺、曱氧基聚乙二醇單胺、甲氧基聚乙二醇肼、曱氧基聚乙二醇咪唑、或聚乙二醇二酸；保護鏈是聚乙二醇和聚氨基酸、多糖、烷氧基化多糖、聚酰胺胺、聚乙二胺或多核苷酸的嵌段共聚物；保護鏈可以是含有二羧酸單酯的聚乙二醇的共聚物；保護鏈的分子量為500-10，000道爾頓。保護鏈的其它實例包括聚(乙二醇)和一種或幾種由聚氨基酸、聚丙交酯乙交酯共聚物、多糖、聚酰胺胺、聚乙烯亞胺或多核苷酸代表的聚合物的曱氧基聚(乙二醇)咪唑嵌段共聚物(見聚合載體)，其中這些嵌段優(yōu)選地交替存在，得到優(yōu)選直鏈的嵌段共聚物。保護鏈的總分子量優(yōu)選大于300，但是優(yōu)選不超過10，000。保護鏈與聚合載體優(yōu)選通過單鍵連接。用于連接保護鏈的載體的氨基的修飾本發(fā)明還涉及一種疏水核載體組合物，其包含聚合載體或具有疏水基團或分子的聚合載體，其進一步包含沿聚合物暴露的修飾的氨基。沿聚合栽體的氨基修飾的非限制性例子是包含?；蹠跹趸叶嫉谋Ｗo鏈的酰胺連接。并非意在限制本發(fā)明范圍的保護鏈的一個例子是?；鵓EG、其類似物或書1"生物，可以由以下通式表示-CO(CH2)nCOOCH2CH2-A畫OR3或國COCH2-A-OR3，其中n為2-22;A為[OCH2CH2]x或[OCH2CH2]x或[OCHCH3CH2]x,其中x為17-250,或總共17-250個單位的[OCH2CH2]、[OCH2CH2]和/或[OCHCH3CH2]的各種組合，R3為H、(CH2)pCH3或(CH2)pCOOH,p為0畫7。本發(fā)明還涉及一種包含聚合載體或具有疏水基團的聚合載體的疏水核載體組合物，其沿聚合物具有修飾的氨基。在進一步的實施方案中，本發(fā)明涉及上述組合物，其中載體包含保護側鏈。在進一步的實施方案中，保護側鏈包含聚(乙二醇)。在進一步的實施方案中，保護側鏈包含烷氧基聚(乙二醇)。在進一步的實施方案中，保護側鏈包含甲氧基聚(乙二醇)(MPEG)。在進一步的實施方案中，保護側《連包含多唾液酸。在進一步的實施方案中，保護側鏈包含聚(丙烯酰胺)。在進一步的實施方案中，保護側鏈包含聚(乙烯吡咯烷酮)。它們可以使用上述任何化學鍵與聚合載體連接。本發(fā)明的另外一個目的是提供一種將保護鏈與載體連接的方法。這種修飾可以通過酰胺鍵形成來進行。作為并非意在限制本發(fā)明范圍的一個例子，可以使用含碳二亞胺的試劑如1-乙基-3-(3-二曱基氨基丙基)-碳二亞胺或二環(huán)己基碳二亞胺將含羧基的保護分子與載體的氨基連接。碳二亞胺試劑含有由通式N^C二N組成的官能團。在偶聯(lián)反應過程中，活化的羧基O-酰基異脲中間體可以通過用N-羥基琥珀酰亞胺形成N-羥基琥珀酰亞胺酯來穩(wěn)定化。這種相對穩(wěn)定的中間體可以與載體如聚賴氨酸或殼聚糖的氨基反應，以形成氨基-酰基鍵或酰胺鍵。通過將含醛的保護基與沿載體的氨基反應也可以實現(xiàn)類似的結果。醛可以與載體如聚賴氨酸或殼聚糖的氨基反應，以形成氨基-?；I或酰胺鍵。用于連接保護鏈的載體的羧基的修飾本發(fā)明還涉及一種疏水核載體組合物，其包含聚合載體或具有疏水基團或分子的聚合載體，其進一步包含沿聚合物暴露的修飾的羧基。聚合載體中羧基的修飾是包含氨基聚曱氧基乙二醇的含氨基保護鏈的酰胺共價連接。作為并非意在限制本發(fā)明范圍的一個例子，保護鏈可以是由以下通式表示的氨基PEG:-NH(CH2)nNHCOCH2-A-OR3、-NH(CH2)nNHCO(CH2)nCOOCH2CH2-A-OR3，其中n為2-22;A為[OCH2CH2]x或[OCH2CH2]x或[OCHCH3CH2]x,其中x為17-250，或者總共17-250個單位的[OCH2CH2]、[OCH2CH2]和/或[OCHCH3CH2]的各種組合，R3為H、(CH2)pCH3或(CH2)pCOOH，p為0-7。本發(fā)明還涉及一種疏水核載體組合物，其包含聚合載體或具有疏水基團的聚合載體，其沿聚合物具有修飾的羧基。在進一步的實施方案中，本發(fā)明涉及上述組合物，其中載體包含保護側鏈。在進一步的實施方案中，保護側鏈包含聚(乙二醇)。在進一步的實施方案中，保護側鏈包含烷氧基聚(乙二醇)。在進一步的實施方案中，保護側鏈包含曱氧基聚(乙二醇)(MPEG)。在進一步的實施方案中，保護側《連包含多唾液酸。在進一步的實施方案中，保護側鏈包含聚(丙烯酰胺)。在進一步的實施方案中，保護側鏈包含聚(乙烯吡咯烷酮)。它們可以使用上述任何化學鍵與聚合載體連接。本發(fā)明的另外一個目的是提供一種將保護鏈與載體連接的方法。這些修飾可以通過酰胺鍵形成來進行。作為并非意在限制本發(fā)明范圍的一個例子，可以將載體的羧基活化，以與保護分子的氨基官能團反應。這種活化可以使用含碳二亞胺的試劑如l-乙基-3-(3-二曱基氨基丙基)-碳二亞胺或二環(huán)己基碳二亞胺實現(xiàn)。碳二亞胺試劑含有由通式N二ON組成的官能團。在活化過程中，羧基形成O-?；愲逯虚g體，其可以用N-羥基琥珀酰亞胺穩(wěn)定化，以形成N-羥基琥珀酰亞胺酯。這種相對穩(wěn)定的中間體可以與保護分子的氨基反應。如果需要引入載體中的保護基或分子不具有氨基，可以非常容易地向該分子中引入氨基，并且該過程是本領域技術人員公知的。用于連接保護鏈的載體的羥基的修飾本發(fā)明還涉及一種疏水核載體組合物，其包含聚合載體或具有疏水基團或分子的聚合載體，進一步沿聚合物包含修飾的羥基。羥基的修飾包括含有酰基聚甲氧基乙二醇的保護基或分子的酯連接。作為并非限制本發(fā)明范圍的一個例子，保護基可以是具有由-CO代表的?；螋驶腜EG，并且連接到載體的羥基的O上，生成酯。酰基PEG或其衍生物可以由以下通式表示-CO(CH2)nNHCOCH2-A-OR3、-COCH2CH2畫A畫OR3或-COCH2畫A-OR3，其中n為2-22;A為[OCH2CH2〗x或[OCH2CH2]x或[OCHCH3CH2]x，其中x是17-250,或者總共17-250個單位的[OCH2CH2]、[OCH2CH2]和/或[OCHCH3CH2]的各種組合，R3是H、(CH2)pCH3或(CH2)pCOOH，p是0誦7。本發(fā)明還涉及一種疏水核載體組合物，其包含聚合載體或具有疏水基團的聚合載體，沒聚合物具有修飾的羥基。在進一步的實施方案中，本發(fā)明還涉及上述組合物，其中載體包含保護側鏈。在進一步的實施方案中，保護側鏈包括聚(乙二醇)。在進一步的實施方案中，保護側鏈包括烷氧基聚(乙二醇)。在進一步的實施方案中，保護側鏈包括甲氧基聚(乙二醇)(MPEG)。在進一步的實施方案中，保護側鏈包括多唾液酸。在進一步的實施方案中，保護側鏈包括聚(丙烯酰胺)。在進一步的實施方案中，保護側鏈包括聚(乙烯吡咯烷酮)。它們可以利用上述任意化學鍵連接到聚合載體上。本發(fā)明的另一方面是提供將保護鏈連接到載體上的方法。保護分子的酰卣的合成可以促進羥基的修飾。酰卣的合成可以通過將保護分子的羧酸部分與二氯亞石風(SOCl2)或其它本領域技術人員所知的試劑反應來進行。產(chǎn)生的酰囟對于醇，包括聚氨基酸的絲氨酸、蘇氨酸和酪氨酸殘基，具有反應性。該反應將導致酯鍵形成，基本上將保護基或分子連接到載體上。PEG-環(huán)氧化物、PEG-異氰酸酯、PEG-PNC(PEG-硝基苯基羧酸酯)是PEG類似物，可以用來修飾羥基，分別在保護基與載體之間生成醚、酯和氨基曱酸酯連接。定向分子本發(fā)明的再另一方面是提供一種疏水核載體，其包含與載體或與載體和保護基共價連接的疏水基團、通過疏水相互作用與疏水分子結合的負載分子、和與載體共價連接并且結合負載分子的定向分子，以將該負載分子定向或定位于疏水基團內。定向分子可以是識別負載分子的受體或肽，或者可以是Bolotin(pub.NO.:US200310224974Al)描述的含有金屬離子橋的復合物，在此引入作為參考。金屬離子橋包括具有與金屬離子配位的第一金屬結合域的載體。金屬離子進一步通過第二金屬結合域與負載分子配位。定向分子也可以是共價錨定到聚合載體上的氨基或羧基部分。定向分子也可以是帶正電荷或正負電荷的，如含有硫酸、磺酸、磷酸、膦酸、或雙膦酸的分子，或含氮^f匕合物如賴氨酸、精氨酸、組氨酸(提到少數(shù)非限制性的實例)。靶向分子本發(fā)明的再另一個目的是提供一種藥物組合物，其包含與載體或者與載體和保護基共價連接的疏水基團、通過疏水相互作用與疏水分子結合的負載分子、和利于將該藥物組合物定位到目標組織的靶向分子。靶向基團可以與聚合載體或保護鏈或這兩者連接。靶向基團可以是抗體、抗體片段、嵌合抗體，其中抗體是多克隆或單克隆抗體；肽；酶；酶的準底物；凝集素；或者與組合物、酶、凝集素、糖配體或肽片段可分離或不可分離地連接的凝集素的糖配體。耙向部分的作用是將本發(fā)明組合物置于密切接近患者體內的目標處。這樣，設想本發(fā)明可以任選地使用靶向劑或分子。耙向部分的例子包括(i)趨化性蛋白質和肽，包括單核細月包趨化蛋白1(MCP-I)、N-甲酰-曱硫氨酰-亮氨酰-苯丙氨酸；(ii)集落刺激因子，包括GM-CSF、CSF-1,和它們的受體和抗體；和血小板因子4;(iii)生長因子，包括TGF-fl和VEGF;(v)粘附細胞表面糖蛋白，包括E-選擇蛋白、VCAM-l和VCAMlfl;(iv)碳水化合物，包括llC-脫氧-D-葡萄糖和IsF-2-氟脫氧-D-葡萄糖；(vi)血管炎性應答的成分，包括C1、Clq、Clr、Cls、C2、C3、C3a、C3b、C4、C4C2、C4C2C3b、C5a、C5b和C5a;(vii)白介素，包括IL-1、IL-la、IL-IO、IL-2、IL-3、IL-6、IL刁和IL-8;(viii)干擾素，包括干擾素a和干擾素y;(ix)胂瘤壞死因子TNF-a;和(x)脂質，包括脂質體、聚乙二醇包被的脂質體、膽固醇、膽固醇的酯，脂蛋白，包括LDL、HDL、氧化的LDL，和脂質受體。疏水核載體組合物具有負載分子的疏水核載體組合物的一個實施方案在圖1中顯示。該圖示不是限制本發(fā)明的范圍，而是顯示本發(fā)明的某些重要特征。疏水核載體組合物的成分和負載分子的大小標度根據(jù)組合物中存在的化學鍵的長度來估計。在該圖示中，負載分子將被吸附到組合物的疏水部分內，并且將被從載體發(fā)出的直鏈保護鏈保護。保護鏈可以獨立地與載體連接，或者可以連接到疏水分子的末端。對于前者，保護鏈可以通過多種方法與載體連接，優(yōu)選通過酰胺鍵或酯鍵。對于后者，保護鏈可以連接到疏水基團，優(yōu)選疏水基團的末端部分。疏水基團進一步優(yōu)選通過酰胺或酯鍵連接到載體上。負載分子與疏水核載體的疏水部分通過疏水相互作用可逆地結合，這種相互作用在水環(huán)境中可以加強。負載分子向疏水核載體上的負載可以通過簡單地以疏水核載體與負載分子大約為1:0.1至1:10(重量重量)的比例混合負載分子和疏水核載體來實現(xiàn)。這種混合優(yōu)選地在水或磷酸鹽緩沖液中進行，取決于負載分子的性質，然后任選地進行凍千。其他賦形劑可以任選地添加到復合物中以調節(jié)pH、張力和粘度。疏水核載體-負載分子復合物可以以已知含量按份凍干，用于給需要治療的患者施用復合物中的特定負載分子。凍干的復合物可以用鹽水或水重配，用于給患者施用，以治療疾病，例如胰島素不足型糖尿病、血管疾病、心臟疾病、中風、血管中凝血、癌癥、肝癌、腎癌、結腸癌、胰腺癌、肺癌、內分泌&，癌、垂體瘤、軟組織腫瘤、舌癌、骨癌、白血病、黑素瘤、'淋巴瘤、何杰金氏淋巴瘤、非何杰金氏淋巴瘤、肝炎、曱型肝炎、乙型肝炎、非甲非乙型肝炎、丙型肝炎、阿爾茨海默病、帕金森病、神經(jīng)紊亂、精神分裂癥、雙相型障礙、內分泌紊亂、高血壓、低血壓、凝血因子缺乏、寄生蟲病、真菌感染、細菌感染、葡萄球菌感染、桿菌感染、壞死性感染、壞疽、中毒、細菌毒素中毒和毒液中毒?？梢杂帽景l(fā)明的疏水核載體-負載分子復合物治療的疾病包括在"TheMerkManualofDiagnosisandTherapy"(Merck&Co.,Inc，Rahway，NJ的一個吾卩門，MerckLaboratories,于1992出版)中所述的各種疾病，其中適當負載分子的選擇按照PDR或PhysicianDeskReference(MedicalEconomicsCompany,Inc.Montvale，NJ于2001年出版)所述。"MerkManualofDiagnosisandTherapy"和"PDR"的內容在此引入作為參考。負載分子對于特定疾病的適用性可以通過參考"TheMerkManualofDiagnosisandTherapy"或PDR確定。負載分子對疏水核載體的親和力可以通過改變疏水鏈的長度、調節(jié)芳香基的大小、調節(jié)疏水鏈的數(shù)目、或者調節(jié)芳香基的數(shù)目來進行調節(jié)。本發(fā)明的疏水核載體可以每個疏水基團都具有保護鏈，每0.3nm產(chǎn)生一個疏水基團。如果存在較少的保護基(每兩個或多個疏水基團一個保護基)，則每個疏水基團之間的距離可以達到0.15nm,這是非常高的。由于每個疏水基團可以具有2-36個碳原子(包含)，決定負載分子與疏水核載體結合的碳載量在需要時可能非常高。可以通過提高與載體連接的疏水基團的密度來設計高親和力疏水核載體。將長鏈疏水基團置于聚合載體上所有可以利用的位點可以獲得最大值，并且由于沒有保護基的位點，保護基將與疏水基團的末端連接。這可以通過將以下任一種分子的一個末端與載體連接并且將另一末端與任一胺化PEG衍生物或類似物連接來實現(xiàn)丁二酸(HOOC(CH2)2COOH)、戊二酸(HOOC(CH2)3COOH)、己二酸(HOOC(CH2)4COOH)、庚二酸(HOOC(CH2)5COOH)、辛二酸(HOOC(CH2)6COOH)、壬二酸(HOOC(CH2)7COOH)、癸二酸(HOOC(CH2)8COOH)、十一二酸(HOOC(CH2)9COOH)、十二二酸(HOOC(CH2)1()COOH)、十三二酸(HOOC(CH2)nCOOH)、十四二酸(HOOC(CH2)12COOH)、(HOOC(CH2)13COOH)、(HOOC(CH2)14COOH)、(HOOC(CH2)15COOH)、(HOOC(CH2)16COOH)、(HOOC(CH2)17COOH)、(HOOC(CH2)18COOH)、(HOOC(CH2)19COOH)、(HOOC(CH如COOH)、(HOOC(CH2)21COOH)、或(HOOC(CH2)22COOH)、(HOOC(CH2)23COOH)、(HOOC(CH2)24COOH)、(HOOC(CH2)25COOH)、(HOOC(CH2)26COOH)、(HOOC(CH2)27COOH)、(HOOC(CH2)28COOH)、(HOOC(CH2)29COOH)、(HOOC(CH2)30COOH)、(HOOC(CH2)31COOH)、(HOOC(CH2)32COOH)、(HOOC(CH2)33COOH)或(HOOC(CH2)34COOH)。這可以使用圖2所示的反應進行。在聚氨基的修飾過程中應當使用過量的二酸，以防止二酸的兩個末端與聚氨基載體反應。在添加胺化PEG、其類似物或衍生物之前應當除去未反應的二酸。在二羧酸疏水分子的兩個末端，應當形成酰胺鍵，其中一個末端與載體連接，另一個末端與保護基連接。使用二氨基烷作為疏水基團，如H2N(CH2)xNH2，其中x為4-36,可以實現(xiàn)類似的過程。可以使用圖2中的反應將二氨基烷與含有羧基的載體連接?；蛘?，異雙功能疏水部分，如HOOC(CH2)xNH2，其中x為4-36,可以用來避免疏水基團兩個末端與載體的可能的副反應。如果使用試劑，聚谷氨酸或聚天冬氨酸載體可以以預活化的形式使用。含羧基的載體的預活化可以如圖2所示進行。在與異雙功能疏水基團(如HOOC(CH2)xNH2，其中x為4-36)反應之前，過量的活化試劑可以通過過濾或凝膠色鐠法除去。用于除去活化劑的膜過濾和凝膠過濾色譜法是本領域技術人員公知的。上述任何異雙功能疏水部分都可以添加到預活化的載體上，以允許在氨基和載體如聚谷氨酸或聚天冬氨酸的羧基之間形成酰胺鍵。然后可以再次過濾反應混合物，以除去過量的異雙功能疏水部分。然后可以活化(以類似于載體活化的方式)連接的疏水部分的羧基，并且一旦活化，就可以添加含氨基的保護基類似物或衍生物，以允許酰胺鍵形成。得到的產(chǎn)物在載體周圍具有高密度的疏水基團。較長的疏水鏈在載體周圍提供極高的疏水基團密度和體積。通過將部分與載體連接，這可以增加沿載體的可修飾官能團(如氨基或羧基)的數(shù)目，并且進行與上述相同的過程，可以進一步提高密度。此外，可以使用分支的疏水分子修飾載體，使得載體中的每個可修飾官能團連接有兩個疏水鏈。如果對于所需負載分子的親和力太高，則可以使用較短的疏水鏈，并且可以降低密度。使用較短的疏水基團和降低密度將降低疏水核載體對負載分子的親和力。優(yōu)選的疏水基團是來源于脂肪酸的直鏈，因為它們是無毒的，并且在體內容易代謝。它們也沒有免疫原性。通過沿載體長度形成酰胺鍵連接疏水基團的另外一種方法是4吏載體氨基與脂肪酸酐反應。例如，載體氨基與棕櫚酸酐的反應形成含有16個碳的長鏈疏水基團。任何脂肪酸酐可以以這種方式使用。如果希望低親和力的疏水核載體，可以通過獨立于疏水基團連4妾保護基進一步降低疏水基團的密度。使用這種方法，由疏水基團群集的沿載體的位點數(shù)可以是從10%至80%(包含)不等，而疏水基團的長度可以是從2個碳到14個碳(包含)不等。長期以來需要具有如防止降解、緩慢釋放及在任意給定時間控制游離量等性質的藥物或治療藥物遞送系統(tǒng)。游離藥物量通過載體與負載分子的解離常數(shù)定義的結合平衡來確定。可以確定特定負載分子和具有確定組成的載體之間的解離常數(shù)。疏水核載體和負載分子之間解離常數(shù)的確定為了確定分子量大于100kDa的疏水核載體的解離常數(shù)，將IOO份的疏水核載體(lmg/ml，在磷酸鹽緩沖液PBS中；50mM磷酸鹽，150mMNaCl，pH7.4)—式三份置于10個管中。作為對照，一式三4分制備另一組不含疏水核載體但是含有IOOidlPBS的10個管。將一式三4分的100iul溶解在磷酸鹽緩沖液中的1000nM、500nM、100nM、50nM、10nM、5nM、1nM、0.5nM、0.1nM和OnM負載分子溶液置于包4舌對照的所有管中。渦旋混合，并且在37。C下孵育溶液1小時，然后凍干。在200)al去離子蒸餾水中重配干燥的樣品，通過100kDa截止值的膜(來自Millipore，Bedford,MA)離心過濾所有溶液。通過過濾器的負載分子代表溶液中游離負載分子的濃度。不含疏水核載體的對照管代表可以結合的負載分子的總量。結合的負載分子量可以通過從接受相同濃度負載分子但是不含疏水核載體的相應對照中減去游離量來計算。將y-軸的結合的/游離負載分子對x-軸的結合的負載分子(nM)作圖。Y軸上的結合/游離和結合(nM)x-軸的圖的斜率為-l/Kd,其中Kd是解離常數(shù)。通過過濾器的負載分子的定量通過如Elisa(酶聯(lián)免疫吸附測定)、HPLC或HPLC/MS的手段進行。游離負載分子濃度的保持游離負載分子隨時間的濃度可以由游離負載分子和與疏水核載體結合的負載分子之間的平衡常數(shù)來預測。這可以在等滲鹽水溶液中確定。平衡常數(shù)可以通過改變載體內疏水部分的大小和含量和保護基的大小和含量進行調節(jié)。疏水部分的大小和含量越小，在任意給定時間的游離負載分子濃度越高，直到負載分子貯庫被消耗。疏水部分的大小和含量越大，在任意給定時間的游離負載分子濃度越低，直到負載分子貯庫被消耗。在后一種情況中，貯庫消耗的時間較長，負載分子的釋放將延長。如果優(yōu)選的有效量(例如大約O.OOOOlmg/kg/小時物結合，這種釋放性質可以導致延長的遞送(高于3至大約4，000小時或者大約10至大約1500小時)。應當注意，疏水核載體和負載分子將彼此具有親和力，這可以用親和常數(shù)(Ka)或解離常數(shù)(Kd)來定義。這種親和力可以通過改變載體內疏水部分的大小和含量來調節(jié)。由于Kd或Ka代表平衡常數(shù)，它們定義了任意給定時間的游離負載分子的量。如果游離負載分子的濃度由于體內應用而降低，將從載體自動釋放負載分子以恢復平衡。釋放速率將由游離負載分子的應用速度確定。載體的總容量也將確定在耗盡負載分子釋放之前載體可以保持特定濃度的游離負載分子或治療劑的時間長度。多種因素可以影響負載分子對疏水核載體的Kd，因而影響其釋放速率。其中包括載體中的疏水部分的密度、疏水部分大小、載體中的保護部分的密度、載體中的保護鏈的大小、疏水核載體總大小、疏水性載體-負載分子復合物周圍的環(huán)境、細胞和身體器官對游離負載分子的利用或清除速率。周圍環(huán)境條件包括溫度、可由離子強度確定的溶劑極性、蛋白質和有機分子濃度、重量摩爾滲透壓濃度。蛋白質和有機分子也可以置換載體中的負載分子，這依賴于保護鏈密度和置換蛋白質或分子的疏水性。為了進一步說明，通過調節(jié)聚合物骨架或側鏈的疏水性而同時仍然保持預期用于任何這種聚合物的足夠的生物可降解性，可以獲得寬范圍的解離速率。這種結果可以通過改變聚合物的疏水基團和保護基而實現(xiàn)。一種本領域普遍接受的測定水環(huán)境中的任何負載分子或其它物質的平衡常數(shù)的方案包括使負載分子或其它物質在PBS溶液(50mMP04,150mMNaCl,pH7.4)中37。C解離。對于本發(fā)明，術語"PBS方案"在此用來指這種方案。在某些例子中，可以通過將它們進行這種方案來比較本發(fā)明不同疏水核載體保持的游離負載分子濃度。在特定情況中，可能必須以相同方式處理幾種不同的疏水核載體，以允許對不同疏水核載體進4亍直接的和相對精確的比較。這種比較可以表明，任一種疏水核載體可以比另一種疏水核載體保持濃度為大約2nM或更低至大約1000nM或更高(包含)的活性劑。此外，比較可能揭示大約3、5、7、10、25、50、100、250、500或750nM的濃度差。本發(fā)明和Kd方案可能涉及甚至更高的游離負載分子濃度差。在某些實施方案中，平衡常數(shù)可以表示單相或雙相系統(tǒng)(或兩部位系統(tǒng)，具有兩個Kd)。在某些情況下，負載分子的釋放可以表征為最初增加的釋放速率或高游離負載分子濃度，它們可以釋放大約5%至大約50%或更多的負載分子，直到具有高Kd的部位用盡，或者大約10、15、20、25、30或40%，然后是低Kd部位引起的更低的游離負載分子濃度?；钚詣┑尼尫潘俾室部梢杂妹刻烀縨g載體釋放的這些物質的量來表征。例如，在某些實施方案中，當載體是一種聚合物時，釋放速率可以從每天每mg聚合系統(tǒng)大約lng或以下至大約5000ng/天/mg或以上的負載分子不等?；蛘?，釋放速率也可以是大約IO、25、50、75、100、125、150、175、200、250、300、350、400、450、500、600、700、800或卯0ng/天/mg。在另外的實施方案中，活性劑的釋放速率可以是20,000ng/天/mg或甚至更高。在某些情況中，用這種釋放速率方案表征的活性劑可以包括治療劑、抗原、診斷劑、耙向部分和其它物質。另一方面，負載分子的釋放速率可以表示為疏水核載體中負載分子的半衰期。除了涉及體外測定釋放速率的方案的實施方案以外，本發(fā)明也涉及體內方案，在某些情況下可以利用該方案在體內測定從載體釋放活試驗。組合物的合成本發(fā)明組合物可以用以下任一種方法合成(圖3)。提供了使用聚-L-賴氨酸作為聚合載體、使用MPEG作為保護鏈和使用疏水基團合成疏水核載體組合物的一個例子。這種合成組合物特別適合作為用于有機藥物、肽/蛋白質治療劑或者造影劑的疏水核載體。方案l:組合物可以分兩個階段制備，首先將聚氨基酸與活化的MPEG類似物反應，然后將該反應混合物與活化的疏水性化合物反應。當使用聚-L-賴氨酸作為聚合載體時優(yōu)選該過程(圖3)。聚-L-賴氨酸的s-氨基與羧化MPEG的活化衍生物例如酰氯、酸酐、混合酸酐、氮烯、異硫氰酸酯類和咪唑，和活化酯，例如羥基琥珀酰亞胺、羥基;黃基琥珀酰亞胺、對硝基苯、苯并三唑反應。存在其它的連接PEG、它們的類似物或它們的衍生物與沿聚合載體的氨基的方法，如圖4和圖5所示，其中R代表載體。疏水分子以活化形式如酸肝、混合酸酐或異硫氰酸酯或以非活化形式與其余的氨基進行反應。如果疏水分子為非活化形式，它可以在琥珀酰亞胺或磺基琥珀酰亞胺和碳二亞胺的存在下活化，以獲得活化酯，然后與其余的氨基進行反應。反應之前可以對聚氨基酸骨架或MPEG鏈進行額外的化學修飾，這不限于導致至少一個化學鍵形成或消除的反應。存在其它的連接疏水基團、它們的類似物或它們的衍生物與沿聚合載體的氨基的方法。這些方法在圖4和圖5中顯示，不同之處是在該情況下，PEG或mPEG將是疏水基團，而R仍然是載體。以化學方法將保護鏈和疏水基團連接到聚合載體上的順序可以顛倒，即首先將疏水基團連接到聚合載體上，然后連接保護鏈，但是優(yōu)選使用疏水基團作為單功能活化類似物，即一個活化疏水基團分子只與聚合載體形成一個共價鍵。方案2:也可以使用標準肽合成方法用修飾的氨基酸前體如MPEG-氨基酸和疏水-氨基酸合成組合物。在這種情況下，疏水基團和PEG可以以可控的方式交替存在。方案3'.PEG-聚氨基酸的寡聚物可以與疏水基團-聚氨基酸的寡聚物偶聯(lián)，形成嵌段共聚物。所有這些方案都將生成具有高度可預測的分子量分布的可預測的組合物。交聯(lián)。MPEG鏈阻止了副產(chǎn)物的形成，因為它們產(chǎn)生對抗試劑交聯(lián)的空間障礙。因此，可以控制高分子量產(chǎn)物的生成，這使得該合成步驟是可預測的。結果，獲得具有窄分子量分布的均質制劑。當使用羧化載體如羧化糖類或在其側鏈上具有羧基的聚氨基酸如聚天冬氨酸或聚谷氨酸時，優(yōu)選在碳二亞胺和磺基琥珀酰亞胺的存在下活化該聚合載體，然后在pH7-9下同時或按順序與胺化的保護鏈和胺化的疏水基團如MPEG單胺反應(圖2)。當使用幾基化載體如聚絲氨酸或聚蘇氨酸或任何在其側鏈上具有羥基的聚合物時，優(yōu)選如圖6所示活化保護基如PEG。類似地，疏水基團如烷基和芳香基也優(yōu)選如圖7和圖8所示活化。聚合載體優(yōu)選含有肽鍵。相同的鍵參與疏水分子與氨基酸側鏈的反應性基團的偶聯(lián)。因此該組合物可能被多種動物非特異性肽酶生物降解。為了幫助體內清除聚合載體、保護鏈和疏水基團，聚合載體、保護鏈或疏水基團的成分應當通過半穩(wěn)定的鍵如S-S鍵連接在一起。少量被捕獲的組合物可以通過降解為較小的片段而從體內除去。然而，多種活化的PEG衍生物可以用于制備組合物，使其處于從實際上不可降解的到不穩(wěn)定的范圍內。然而，不穩(wěn)定的組合物不是理想的，因為分離MPEG將導致負載分子組合物在網(wǎng)狀內皮系統(tǒng)中更廣泛的積累。本發(fā)明的保護鏈不激活補體的C3成分。C3是血液中的補體途徑的一種成分，它在激活后將導致膜攻擊復合物(MAC)的形成，MAC通過在細胞膜上穿孔而破壞細胞。這些途徑的完整說明在TheMerkmanualofdiagnosisandtherapy中描述，其在此引入作為參考。這是聚乙二醇保護鏈及其衍生物相對于已知試劑例如葡聚糖的明顯優(yōu)點，已知葡聚糖激活補體C3成分。類似地，該組合物的疏水脂肪酸成分沒有免疫活性，因為脂肪酸以脂肪酸本身和/或甘油三酯的形式在生物系統(tǒng)中普遍存在，并且是一種本領域技術人員公知的正常的能量來源，通過檸檬酸循環(huán)或三羧酸循環(huán)提供能量。保護鏈阻止了大量負載分子對于受體細胞例如腎小球吞噬細胞的暴露，如果濃度足夠高，則這些細胞能夠識別它們。然而，特定負載分子的高親和力受體可識別低濃度的負載分子。保護鏈也形成空間障礙，這阻止了較大的血清蛋白質取代負載分子從而提高其釋放。本發(fā)明的組合物也通過阻止肝臟和脾臟中負載分子的快速積累而防止了可能由高濃度游離負載分子產(chǎn)生的毒性。如果沒有負載分子，則預期本發(fā)明的疏水核載體組合物沒有急性毒素，因為已知PEG是無毒的，并且脂肪酸均正常存在于生物組織和液體中。疏水核組合物對患者的施用含有負載分子的疏水核載體組合物可以與藥物賦形劑或稀釋劑一起給患者施用。合適的藥物賦形劑或稀釋劑的非限制性例子包括淀粉、葡萄糖、乳糖、蔗糖、明膠、麥芽、稻米、面粉、白堊、硅膠、碳酸鎂、硬脂酸鎂、硬脂酸鈉、單硬脂酸甘油酯、滑石粉、氯化鈉、脫脂奶粉、甘油、丙二醇、水、乙醇、緩沖水、磷酸鹽緩沖液等。這些組合物可以采用溶液、懸浮液、片劑、丸劑、膠嚢、粉末、緩釋制劑等的形式。在另外一個優(yōu)選實施方案中，任何形式的疏水核組合物可以進一步用合適的賦形劑和稀釋劑配制，包括乳糖、右旋糖、蔗糖、山梨醇、甘露醇、淀粉、阿拉伯膠、磷酸鈣、藻酸鹽、黃蓍膠、明膠、硅酸鈣、微晶纖維素、聚乙烯吡咯烷酮、纖維素、水糖漿、曱基纖維素、羥苯酸曱酯和丙酯、滑石粉、硬脂酸鎂和礦物油。制劑可以另外包含潤滑劑、濕潤劑、乳化劑和懸浮劑、防腐劑、甜味劑或調味劑。本發(fā)明的組合物可以配制，以在給患者施用后使負載分子或活性成分從載體上更持續(xù)或延遲地釋放。該組合物優(yōu)選以單位劑量形式配制，每一劑量含有大約1至大約1000mg的疏水核組合物，該疏水核組合物含有l(wèi)pg至500mg的負載分子或活性成分。然而，應當理解施用的治療劑量將由醫(yī)生根據(jù)相關情況來確定，包括所治療的臨床病癥和選擇的給藥途徑。因此，上述劑量范圍絕非限制本發(fā)明的范圍。術語"單位劑量形式，，是指適合作為用于人類患者和其它哺乳動物的單一劑量的物理上分散的單位，每個單位含有經(jīng)計算產(chǎn)生所需療效的預定量的活性物質，與合適的藥物稀釋劑或賦形劑組合。其可以與藥物可接受的稀釋劑或賦形劑一起以單位劑量形式給人、寵物、家畜或其它動物給藥。給藥可以是局部、腸胃外、靜脈內、動脈內、皮下、肌肉內、顱內、眼眶內、眼睛、心室內、嚢內、脊柱內、腦池內、腹膜內、鼻內、氣霧劑、通過栓劑或口服給藥。用于口服應用的制劑包括含有與非毒性藥物可接受的賦形劑混合的活性成分的片劑。這些賦形劑可以是，例如，惰性稀釋劑或填充劑(例如蔗糖和山梨醇)、潤滑劑、助流劑和抗粘合劑(例如硬脂酸鎂、硬脂酸鋅、硬脂酸、二氧化硅、氫化植物油或滑石粉)。本發(fā)明的活性治療制劑可以作為例如將在等滲、水性或鹽水緩沖液中重配的凍干形式提供，用于腸胃外、皮下、真皮內、肌肉內或靜脈內給藥。本發(fā)明的組合物也可以作為用于經(jīng)孔，例如口服、經(jīng)鼻、舌下給藥的液體制劑例如懸浮液、糖漿或酏劑給需要治療劑的患者施用。本發(fā)明的組合物也可以制備為用于口服給藥，如膠嚢、片劑、丸劑等，以及可咀嚼的固體制劑。本發(fā)明的組合物也可以制備為用于經(jīng)皮給藥的乳膏劑，如液體、粘稠液體、糊劑或粉末。此處公開的組合物設計為用于遞送活性劑，特別是在口服、鼻內、舌下、十二指腸內、皮下、口腔、結腸內、直腸、陰道、粘膜、肺、透皮、皮內、腸胃外、靜脈內、肌肉內和眼系統(tǒng)中，以及能夠穿過血-腦障礙。與本發(fā)明疏水核載體組合物結合的活性劑的給藥導致該活性劑的生物利用度比活性劑單獨給藥時提高，如圖30中的假定情況所示。本發(fā)明的一個實施方案是預期具有20小時半衰期并且在血管通透性提高的部位積累的疏水載體。這基于以前的研究的聚(乙二醇)保護的具有類似大小的納米載體。該實施方案理想地延長身體對具有極短生物半衰期的負載分子的暴露，如圖30所示。因此，這導致生物利用度提南°本發(fā)明的目的是提供一種使用本發(fā)明所述的組合物以及適當?shù)倪x自PDR或PhysicianDeskReference(MedicalEconomicsCompany,Inc.Montvale,NJ于2001出版)所述的負載分子治療"TheMerkManualofDiagnosisandTherapy"(Merck&Co.,Inc,Rahway,NJ的一個部門，MerckLaboratories,于1992出版)中所述的各種疾病的方法。MerkManualofDiagnosisandThempy和PDR在此引入作為參考。負載分子對于特定疾病的適用性可以通過參考'TheMerkManualofDiagnosisandTherapy"或PDR確定。本發(fā)明優(yōu)選的組合物本發(fā)明也提供了具有以下通式的聚氨基酸載體的組合物〇〇[-C-NH-(jH-]]k其中的基團可以以任何順序連接，例如，疏水基團Ri單元可以在出現(xiàn)保護鏈R2單元之前在鏈中重復數(shù)次，反之亦然，其中k為50-560;疏水基團&選自但不限于a)具有通過酰胺鍵連接的疏水分子的修飾的賴氨酸R基團，例如但不限于-(CH2)4NHCO(CH2)nCH3,-(CH2)4NHCO(C6H4)(CH2)nCH3，-(CH2)4NHCO(CH2)n(C6H5)，或-(CH2)4NHCO[CxHyOz],其中n為0-24;x為6-36;y為5-73;z為0-10;b)具有通過酰胺鍵連接的疏水分子的修飾的天冬氨酸R基團，例如但不限于-CH2CONH(CH2)nNHOC(CH2)nCH3,-CH2CONH(CH2)nNHOC(C6H4)(CH2)nCH3,-CH2CONH(CH2)nNHOC(CH2)n(C6H5),-CH2CONH(CH2)nOP02OCH2CH[OOC(CH2)n(CHCH)(CH2)nCH3]CH〇〇C(CH2)n(CHCH)(CH2)nCH3,-CH2CONHCH[CH2OH]CHOHCHCH(CH2)nCH3,或-CH2CONH[CxHyOz],其中n為0-24;x為6-36;y為5-73;z為0-10;c)具有通過酰胺4建連接的疏水分子的修飾的谷氨酸R基團，例如但不限于-(CH2)2CONH(CH2)nNHOC(CH2)nCH3,-(CH2)2CONH(CH2)nNHOC(C6H4)(CH2)nCH3,-(CH2)2ONH(CH2)nNHOC(CH2)n(C6H5),-(CH2)2CONH(CH2)nOP02OCH2CH[OOC(CH2)n(CHCH)(CH2)nCH3]CHOOC(CH2)n(CHCH)(CH2)nCH3，-(CH2)2CONHCH[CH2OH]CHOHCHCH(CH2)nCH3，或-(CH2)2CONH[CxHyOz]，其中n為0-24;x為6-36;y為5-73;z為0-10;d)具有通過酯鍵連接的疏水分子的修飾的絲氨酸R基團，例如但不限于-CH2OOC(CH2)nCH3，-CH2OOC(C6H4)(CH2)nCH3,-CH2OOC(CH2)n(C6H5),-CH2OOC[CxHyOz],其中n為0-24;x為6-36;y為5-73;z為0-10;e)具有通過酯鍵連接的疏水分子的修飾的蘇氨酸R基團，例如但不限于-CH2[CH3]OOC(CH2)nCH3，-CH2[CH3]OOC(C6H4)(CH2)nCH3,-CH2[CH3〗OOC(CH2)n(C6H5)，-CH2[CH3]OOC[CxHyOz]，其中n為0-24;x為6-36;y為5-73;z為0-10;或f)具有通過酯鍵連接的疏水分子的修飾的酪氨酸R基團，例如但不限于-(C6H4)OOC(CH2)nCH3，-(C6H4)OOC(C6H4)(CH2)nCH3，-(C6H4)OOC(CH2)n(C6H5)，或-(C6H4)OOC[CxHyOz]，其中n為0-24;x為6-36;y為5-73;z為0-10。保護基R2選自但不限于a)具有通過酰胺鍵連接的保護基的修飾的賴氨酸R基團，例如但不限于-(CH2)4NHCO(CH2)nOC-A-OR3，或-(CH2)4NHCOCH2-A-OR3,其中n為2-22;R3為H、(CH2)pCH3或(CH2)pCOOH，p為0-7;且A為[OCH2CH2]x或[OCH2CH2]x或[OCHCH3CH2]x,其中x為17-250，或者總共17-250個單位的[OCH2CH2]、[OCH2CH2]和/或[OCHCH3CH2]的各種組合；b)具有通過酯鍵連接的保護基的修飾的絲氨酸R基團，例如但不限于-CH2OOC(CH2)nOC-A-OR3，-CH2OOCCH2-A-OR3，或-CH2OOCCH2CH2-A-OR3,其中n為2-22;R3為H、(CH2)pCH3或(CH2)pCOOH,p為0-7;且A為[OCH2CH2]x或[OCH2CH2]x或[OCHCH3CH2]x其中x為17-250，或者總共17-250個單位的[OCH2CH2]、[OCH2CH2]和/或[OCHCH3CH2]的各種組合；c)具有通過酯鍵連接的保護基的修飾的蘇氨酸R基團，例如但不限于-CH(CH3)OOC(CH2)nOC-A-OR3，-CH(CH3)OOCCH2-A-OR3，或-CH(CH3)OOCCH2CH2-A-OR3，其中n為2-22;R3為H、(CH2)pCH3或(CH2)pCOOH,p為0畫7;且A為[OCH2CH2]x或[OCH2CH2]x或[OCHCH3CH2]x，其中x為17-250，或者總共17-250個單位的[OCH2CH2]、[OCH2CH2]和/或[OCHCH3CH2]的各種組合；d)具有通過酯鍵連接的保護基的修飾的天冬氨酸R基團，例如但不限于-CH2COOC(CH2)nCO-A-OR3，其中n為2-22;R3為H、(CH2)pCH3或(CH2)pCOOH,p為0-7;且A為[OCH2CH2]x或[OCH2CH2]x或[OCHCH3CH2]x，其中x為17-250，或者總共17-250個單位的[OCH2CH2]、[OCH2CH2]和/或[OCHCH3CH2]的各種組合；e)具有通過酰胺鍵連接的保護基的修飾的天冬氨酸R基團，例如但不限于-CH2CONH(CH2)nNHCOCH2CH2-A-OR3，-CH2CONH(CH2)nNHCOCH2-A-OR3,或-CH2CONH(CH2)nNHCO(CH2)yCO-A-OR3:)其中n為2-22;R3為H、(CH2)pCH3或(CH2)pCOOH,p為0-7;y為2-6;且A為[OCH2CH2]x或[OCH2CH2]x或[OCHCH3CH2]x，其中x為17-250,或者總共17-250個單位的[OCH2CH2]、[OCH2CH2]和/或[OCHCH3CH2]的各種組合；f)具有通過酯鍵連接的保護基的修飾的谷氨酸R基團，例如但不限于-(CH2)2COOC(CH2)nCO-A-OR3，其中n為2-22;R3為H、(CH2)pCH3或(CH2)pCOOH,p為0-7;且A為[OCH2CH2]x或[OCH2CH2〗x或[OCHCH3CH2]x，其中x為17-250，或者總共17-250個單位的[OCH2CH2]、[OCH2CH2]和/或[OCHCH3CH2]的各種組合；g)具有通過酰胺鍵連接的保護基的修飾的谷氨酸R基團，例如但不限于-(CH2)2CONH(CH2)nNHCOCH2CH2-A-OR3，-(CH2)2CONH(CH2)nNHCOCH2-A-OR3,或-(CH2)2CONH(CH2)nNHCO(CH2)yCO-A-OR3,其中n為2-22;R3為H、(CH2)pCH3或(CH2)pCOOH，p為0-7;y為2-6;且A為[OCH2CH2]x或[OCH2CH2]x或[OCHCH3CH2]x,其中x為17-250，或者總共17-250個單位的[OCH2CH2]、[OCH2CH2]和/或[OCHCH3CH2]的各種組合；或者h)具有通過酯鍵連接的保護基的修飾的酪氨酸R基團，例如但不限于-(C6H4)OCO(CH2)nCO-A-OR3，-(C6H4)OOCCH2CH2-A-OR3，-(C6H4)OOCCH2-A-OR3，或-(C6H4)OCO(CH2)nNHCO(CH2)yCO-A-OR3,其中n為2-22;Ro為H、(CH2)pCH3或(CH2)pCOOH,p為0-7;y為2-6;且A為[OCH2CH2]x或[OCH2CH2]x或[OCHCH3CH2]x,其中x為17-250，或者總共17-250個單位的[OCH2CH2]、[OCH2CH2]和/或[OCHCH3CH2]的各種組合。本發(fā)明的另一個目的是組合物可以只含有R2，沒有或者只有極少的R,,特別是在R2含有顯著量的位于載體和保護基旁邊的疏水基團時。本發(fā)明的主題也提供一種具有以下通式的聚氨基酸載體的組合物<formula>formulaseeoriginaldocumentpage75</formula>其中R2表示疏水基團和保護基的組合，選自但不限于:-(CH2)4NHCO(CH2)nOC-A-OR3，-(CH2)4NHCO(CH2)nNHCO(CH2)yCO-A-OR3,-CH2OOC(CH2)nOC-A-OR3，-CH2OOC(CH2)nNHCO(CH2)yCO-A-OR3,-CH(CH3)OOC(CH2)nOC-A-OR3，-CH(CH3)OOC(CH2)nNHCO(CH2)yCO-A-OR3，-CH2COOC(CH2)nCO-A-OR3,-CH2COOC(CH2)nNHCO(CH2)yCO-A-OR3,-CH2CONH(CH2)nNHCOCH2CH2-A-OR3,-CH2CONH(CH2)nNHCO(CH2)yCO-A-OR3，-(CH2)2COOC(CH2)nCO-A-OR3，-(CH2)2COOC(CH2)nNHCO(CH2)yCO-A-OR3,-(CH2)2CONH(CH2)nNHCOCH2CH2-A-OR3，-(CH2)2CONH(CH2)nNHCO(CH2)yCO-A-OR3,-(C6H4)OCO(CH2)nCO-A-OR3,或-(C6H4)OCO(CH2)nNHCO(CH2)yCO-A-OR3,其中n為2-22;R3為H、(CH2)pCH3或(CH2)pCOOH,p為0-7;y為2-6;且A為[OCH2CH2]x或[OCH2CH2]x或[OCHCH3CH2]x,其中x為17-250,或者總共17-250個單位的[OCH2CH2]、[OCH2CH2]和/或[OCHCH3CH2]的各種組合。非免疫原性使用對疏水核具有高結合親和力的負載分子，防止細胞表面暴露于高濃度的負載分子，使得在任意特定時刻只有納摩爾到皮摩爾濃度的游離負載分子。另外，PEG保護基將保護濃縮的結合負載分子不與細胞表面接觸。這將防止在相當高的游離抗原濃度(微克至毫克/ml)時發(fā)生免疫應答的刺激。由于PEG保護，疏水核載體與能夠識別調理素的細胞，例如抗原呈遞吞噬細胞，或免疫活性抗原呈遞吞噬細胞，或免疫活性血細胞，例如靜息B細胞之間沒有結合。結果，對負載分子本身的免疫應答可能較少，并且可以避免產(chǎn)生針對負載分子的宿主抗體。這允許必要時重復使用該組合物。長血液半衰期和缺乏免疫原性的組合是本發(fā)明的一個重要特征。已經(jīng)證明本發(fā)明的組合物對于GLP-1具有高的驚人的容量，例如可達至少30%重量。在另外一個使用溶葡萄球菌素的實驗中，已經(jīng)證明本發(fā)明的組合物具有600%重量的驚人的容量。劑量本發(fā)明的任意化合物的劑量隨患者的癥狀、年齡和體重、所要治療或預防的疾病的性質和嚴重性、給藥途徑、添加劑形式而不同。任何本發(fā)明的制劑可以作為單劑量或分開的劑量給藥。本發(fā)明化合物的劑量可以通過本領域技術人員所知的或者此處所述的技術容易地確定。本發(fā)明也涉及一種以上所述化合物以及其它治療劑的混合物。在特定實施方案中，所述化合物的劑量通常在大約O.Olng至大約10g/kg體重的范圍內，特別是在大約lng至大約O.lg/kg的范圍內，更優(yōu)選在大約100ng至大約10mg/kg的范圍內。.可能需要確定本發(fā)明的任何具體化合物的有效劑量或含量以及對制劑給藥時間安排的可能的影響。這可以通過此處所述的使用一組或多組動物(優(yōu)選每組至少5只動物)的常規(guī)實驗進行，或者適當時在人體試驗中進行。任何化合物和治療或預防方法的有效性可以如下評價施用添加劑，通過測定一個或多個與目標腫瘤有關的指標評價給藥的效果，并且將這些指標的治療后數(shù)值與相同指標在治療前的數(shù)值進行比較。將在特定患者中產(chǎn)生最有效治療的任何具體化合物的精確給藥時間和給藥量將取決于特定化合物的活性、藥代動力學和生物利用度、患者的生理條件(包括年齡、性別、疾病類型和階段、總體身體狀況、對特定藥物劑量和類型的反應性)、給藥途徑等。此處所述的指導可以用來優(yōu)化治療，例如確定最佳給藥時間和/或給藥量，這僅需要常規(guī)實驗，包括監(jiān)測受試者和調整劑量和/或時間安排。治療受試者時，可以通過在24小時期間內在預定的時間測定一個或多個相關指標來監(jiān)測患者的健康。治療，包括給藥和制劑的添加劑、含量和時間，可以根據(jù)監(jiān)測結果進行優(yōu)化?？梢酝ㄟ^測定相同的參數(shù)定期重新評價患者，以確定改善程度，第一次重新評價通常在從治療開始四周結束時進行，隨后的重新評價在治療期間每4-8周進行一次，然后每三個月進行一次。治療可以持續(xù)數(shù)月或者數(shù)年，最少一個月是對于人類治療的典型長度。根據(jù)這些重新評價可以對給藥量以及可能對給藥時間進行調節(jié)。治療可以用低于化合物最佳劑量的較小劑量開始。之后，可以以較小的增幅提高劑量，直到達到最佳治療效果。聯(lián)合應用數(shù)種本發(fā)明的化合物或者其它化療劑可以減少任何單個成分的所需劑量，因為不同化合物效果的發(fā)生和持續(xù)時間可能是互補的。在這樣的聯(lián)合治療中，不同的活性劑可以一起遞送或者分開遞送，同時或者在一天內不同的時間遞送。所述化合物的毒性和療效可以用標準藥物方法在細胞培養(yǎng)或實驗動物中確定，例如測定LD50和EDso。優(yōu)選顯示高治療指數(shù)的組合物。盡管可以使用顯示毒副作用的化合物，但是應當小心設計將化合物靶向到所需部位的遞送系統(tǒng)，以減少副作用。從細胞培養(yǎng)試驗和動物研究中獲得的數(shù)據(jù)可以在配制用于人體的劑量范圍中使用。任何添加劑或其中任何成分的劑量優(yōu)選在包括EDso的循環(huán)濃度的范圍內，具有較低毒性或沒有毒性。劑量可以在該范圍內因使用的劑型和使用的給藥途徑而不同。對于本發(fā)明的藥物，開始時可以從細胞培養(yǎng)試驗估計治療有效劑量。劑量可以在動物模型中配制，以達到包括在細胞培養(yǎng)中測定的IC50(即達到癥狀半數(shù)最大抑制時的受試化合物的濃度)的循環(huán)血漿濃度范圍。這些信息可以用來更精確地確定在人體中有用的劑量。例如，通過高液液相色譜法(HPLC)可以測定血漿中的水平。制劑如本領域公知的，本發(fā)明的疏水核載體組合物可以通過各種手段施用，這取決于它們的預期用途。例如，如果本發(fā)明的組合物口服給藥，則可以配制為片劑、膠嚢、顆粒、粉末或糖漿?；蛘?，本發(fā)明的制劑可以作為注射劑(靜脈內、肌肉內或皮下)、滴注制劑或栓劑腸胃外給藥。對于經(jīng)眼睛粘膜途徑的應用，本發(fā)明的組合物可以配制為滴眼劑或眼膏劑。這些制劑可以利用常規(guī)手段制備，并且需要時，該組合物可以與任何常規(guī)添加劑如賦形劑、粘合劑、崩解劑、潤滑劑、矯正劑、增溶劑、助懸浮劑、乳化劑或包衣劑混合。在本發(fā)明的制劑中，在配制的試劑中可以存在濕潤劑、乳化劑和潤滑劑，如十二烷基硫酸鈉和硬脂酸鎂，以及著色劑、釋放劑、包衣劑、甜味劑、調味劑和芳香劑、防腐劑和抗氧化劑。本發(fā)明的疏水載體組合物可以適合口服、經(jīng)鼻、局部(包括口腔和舌下)、直腸、陰道、氣霧劑和/或腸胃外給藥。疏水載體組合物的制劑可以方^J也以單位劑量形式存在，并且可以用藥學領域公知的任何方法制備?？梢耘c其它賦形劑相組合產(chǎn)生單劑量的組合物的量隨所治療的患者、具體給藥方式而不同。制備這些疏水載體-負載分子制劑的方法包括以下步驟使本發(fā)明的疏水載體與負載分子和任選的一種或多種輔助成分結合。通常，通過使負載分子與疏水載體或細碎的固體疏水載體或此兩者均勻且緊密地結合，然后必要時使產(chǎn)物成形，以此制備制劑。適合口服給藥的制劑可以是膠嚢、扁膠嚢、丸劑、片劑、錠劑(使用香味基質，通常是蔗糖和阿拉伯膠或黃蓍膠)、粉末、顆?；蜃鳛樵谒曰蚍撬后w中的溶液或懸液、或作為水包油型或油包水型乳劑、或作為酏劑或糖漿劑、或作為軟錠劑(使用惰性基質，如明膠和甘油，或蔗糖和阿拉伯膠)的形式，每種含有預定量的所述組合物作為活性成分。本發(fā)明組合物也可以作為丸劑、藥糖劑或糊劑給藥。在用于口服的固體劑型(膠嚢、片劑、丸劑、錠劑、粉末、顆粒等)中，所述疏水載體-負載分子組合物與一種或多種藥物可接受的載體如檸檬酸鈉或磷酸二4丐和/或以下任一種物質混合(1)填充劑或膨脹劑，如淀粉、乳糖、蔗糖、葡萄糖、甘露醇和/或硅酸；(2)粘合劑，例如，羧曱基纖維素、藻酸鹽、明膠、聚乙烯吡咯烷酮、蔗糖和/或阿拉伯膠；(3)保濕劑，如甘油；(4)崩解劑，如瓊脂-瓊脂、碳酸鈣、馬鈴薯或木薯淀粉、海藻酸、某些硅酸鹽和碳酸鈉；(5)溶液阻滯劑，如石蠟；(6)吸收促進劑，如季銨化合物；(7)濕潤劑，例如乙酰醇和單硬脂酸甘油酯；(8)吸收劑，如高嶺土和皂粘土；(9)潤滑劑，如滑石粉、硬脂酸鈣、硬脂酸鎂、固體聚乙二醇、十二烷基硫酸鈉和它們的混合物；和(IO)著色劑。對于膠嚢、片劑和丸劑，疏水載體-負載分子組合物也可以包含緩沖劑。也可以使用相似類型的固體組合物作為軟和硬填充明膠膠囊中的填充劑，使用賦形劑如乳糖或奶糖(milksugar)以及高分子量聚乙二醇等。片劑可以通過任選與一種或多種輔助成分壓縮或成型來制備。壓縮片劑可以用粘合劑(例如明膠或羥丙甲基纖維素)、潤滑劑、惰性稀釋劑、防腐劑、崩解劑(例如淀粉乙醇酸鈉或交聯(lián)的羧甲基纖維素鈉)、表面活性劑或分散劑來制備。成型的片劑可以通過用適當?shù)臋C器將用惰性液體稀釋劑濕潤的所述混合物模塑而制成。片劑和其它固體劑型如錠劑、膠嚢、丸劑和顆粒任選地可以刻痕，或者制備為具有包衣和外殼，如腸衣和制藥領域^^知的其它包衣。用于口服給藥的液體劑型包括藥物接受的乳劑、微乳劑、溶液、懸浮液、糖劑和酏劑。液體劑量疏水載體-負載分子制劑可以含有本領域中常用的惰性稀釋劑，如水或其它溶劑、增溶劑和乳化劑，如乙醇、異丙醇、碳酸乙酯、乙酸乙酯、苯甲醇、苯甲酸千酯、丙二醇、1,3-丁二醇、油(特別是棉籽油、花生油、玉米油、胚油、橄欖油、蓖麻油和芝麻油)、甘油、四氫糠醇、聚乙二醇和山梨聚糖的脂肪酸酯，和它們的混合物。疏水載體-負載分子制劑的懸浮劑型可以含有懸浮劑，例如，乙氧基化異硬脂醇、聚氧乙烯山梨糖醇和山梨聚糖酯、微晶纖維素、氧氫氧化鋁(aluminummetahyd腦ide)、急粘土、瓊脂-瓊脂和黃蓍膠，和它們的混合物。用于經(jīng)直腸或陰道給藥的疏水載體-負載分子制劑可以是栓劑，可以通過將負載分子與一種或多種合適的疏水載體和包含例如可可脂、聚乙二醇、栓劑蠟或水楊酸酯的其它賦形劑混合而制備，它在室溫下是固體，但是在體溫下為液體，因此在體腔中融化，并且釋放出具有負載分子的疏水載體。適用于經(jīng)陰道給藥的制劑也包括含有本領域公知合適的賦形劑的陰道栓劑、棉塞、乳膏、凝膠、糊劑、泡沫或噴霧制劑。用于所述組合物經(jīng)皮給藥的疏水載體-負載分子劑量制劑包括粉末、噴霧劑、軟膏、糊劑、乳膏、洗劑、凝膠、溶液、貼劑和吸入劑?；钚猿煞挚梢栽跓o菌條件下與藥物可接受的載體以及可能需要的任何防腐劑、緩沖液或拋射劑混合。軟膏、糊劑、乳膏和凝膠除了所述組合物以外還可含有賦形劑，如動物和植物脂肪、油、蠟類、石蠟、淀粉、黃蓍膠、纖維素衍生物、聚乙二醇、硅氧烷、膨潤土、硅酸、滑石粉和氧化鋅或其混合物。本發(fā)明的疏水載體-負載分子組合物也可以是嬰兒濕巾(babywipes)的形式。粉末和噴劑除了所述組合物以外還可含有賦形劑如乳糖、滑石粉、硅酸、氫氧化鋁、硅酸鈣和聚酰胺粉末，或這些物質的混合物。噴劑另外還可含有常用拋射劑，如氯氟烴和揮發(fā)性非取代的烴，例如丁烷和丙》克。本發(fā)明的疏水載體-負載分子組合物可以通過氣霧劑方式給藥。這通過制備含有化合物的水性氣霧劑、脂質體制劑或固體顆粒來實現(xiàn)。使用非水(例如碳氟化合物拋射劑)懸浮液?？梢允褂贸晣婌F器，因為它們使可導致所述組合物中所含化合物降解的試劑所受到的剪切最小化。通常，水性氣霧劑通過將所述組合物的水溶液或懸液與常規(guī)藥物可接受的載體和穩(wěn)定劑一起配制而制備。載體和穩(wěn)定劑根據(jù)具體組合物的需要而變化，但是一般包括非離子型表面活性劑(吐溫、Pluronics或聚乙二醇)、無害的蛋白質樣血清白蛋白、山梨聚糖酯、油酸、卵磷脂、氨基酸如甘氨酸、緩沖液、鹽、糖或糖醇。通常由等滲溶液制備氣霧劑。適合腸胃外給藥的本發(fā)明的藥物組合物包括與一種或多種藥物可接受的無菌等滲水溶液或非水溶液、分散液、懸浮劑或乳劑或者在使用前可以重配為無菌注射液或分散液的無菌粉末組合的組合物，它可以含有抗氧化劑、緩沖液、抑菌劑、使制劑與預期接受者的血液等滲的溶質、或懸浮劑或增稠劑?？梢栽诒景l(fā)明藥物組合物中使用的適當?shù)乃院头撬d體的例子包括水、乙醇、多元醇(如甘油、丙二醇、聚乙二醇等)和它們的適當?shù)幕旌衔?、植物油如橄欖油，和可注射的有機酯，如油酸乙酯。例如，通過使用包衣材料如卵磷脂，在分散液的情況中通過保持所需的顆粒大小，以及使用表面活性劑，可以保持適當?shù)牧鲃有浴?吏用疏水核載體組合物治療疾病胰島素不足型糖尿病是一種機體不產(chǎn)生胰島素或不能正確利用胰島素的疾病，胰島素是一種調節(jié)血糖的激素。在北美，胰島素不足型糖尿病是排在第三位的最常見的疾病和排在第四位的主要死亡原因，在美國估計影響到1820萬人(人口的6.3%)。美國每年花在胰島素不足型糖尿病上的經(jīng)濟費用估計多達1000億美元，因此該疾病成為一個重要的臨床和公共健康問題(綜述見Ettaro,L.等人，Ow/-o/-/〃"e^J/"6eto騰〃/加.Pharmacoeconomics，2004.22(3):p.149-64)。糖尿病有兩種主要的類型1型或T1D，(占糖尿病患者中的5-10%),其中免疫系統(tǒng)攻擊胰臟的產(chǎn)胰島素(3細胞，和2型或T2D,其中個體發(fā)展對胰島素的抗性。未接受治療的糖尿病患者受到多種并發(fā)癥的影響，包括眼、腎臟、神經(jīng)和心血管疾病。胰島素不足型糖尿病治療的目的是調節(jié)血糖水平并且預防高血糖癥。盡管可以通過生活方式的改變和口服抗高血糖藥控制2型糖尿病中的高血糖，然而，T1D的唯一的標準治療是通過注射胰島素嚴格控制血液葡萄糖水平，具有嚴重低血糖事件相關的風險。最近證明了產(chǎn)胰島素胰島細胞的移植在逆轉I型患者的胰島素不足型糖尿病中非常有效。然而這種治療的成功取決于有效的免疫抑制，以防止移植的胰島被患者的異體和自身免疫應答排斥(Shapiro,A.M.,S.A.Nanji和J.R.Lakey，C7/m'ca//y朋^/aw/vcw^re"fawd/o麗niy/o/erawce.ImmunolRev，2003.196:p.219-36),盡管已經(jīng)報道了對移植物的持續(xù)耐受。如果沒有發(fā)現(xiàn)替代方法，預期這種移植方法將成為臨床治療標準，盡管慢性免疫抑制方案可見毒性。最近發(fā)現(xiàn)在糖尿病動物中可以用肽激素胰高血糖素樣肽l(GLP-l)使胰島纟田月包再生(Drucker,D丄，五w/za""'"g/"crW"ac"o"/orZ/zef簡f厳w/。/妙e2DiabetesCare,2003.26(10):p.2929-40:Perry,T.和N.H.Greig，T7zeg7wcago"畫"A;epep"tfesvac/ow6/e畫edgedA簡戸"csmWTrendsPharmacolSci，2003.24(7):p.377-83),這提出了一種新的令人興奮的治療方法的可能性，該方法不需要移植胰島并且避免了相關的并發(fā)癥。GLP-1在體內具有非常短的半衰期，需要使用具有長半衰期的潛在免疫原性類似物評價其功效。實際上，當前正在NIH-資助的I期臨床試驗中評價GLP-1類似物(依澤那太)與用于逆轉T1D的免疫抑制劑的聯(lián)合應用。然而，38%的接受依澤那太的2型糖尿病患者產(chǎn)生針對這種GLP-1類似物的抗體，該抗體潛在限制了該激素在未來的有效性。本發(fā)明使天然GLP-1的循環(huán)半衰期從大約5分鐘延長到驚人的超過24小時(圖44)，提供了在不開發(fā)中和抗體的情況下進行胰島再生研究的可能性。本發(fā)明推動了用于再生p細胞和/或治療胰島素不足型糖尿病的長效天然GLP-1的開發(fā)。'GLP-1(7-36酰胺)是一種提高胰島素分泌的強腸激素。進食引起的釋放的GLP-1刺激胰島(3細胞分泌胰島素，抑制激素胰高血糖素的釋放(其作為胰島素拮抗劑起作用)并且延遲了胃排空。通過與胰島細胞上的GLP-1受體相互作用，GLP-1導致信號反應級聯(lián)，導致含胰島素顆粒的胞吐作用以嚴格依賴于葡萄糖的方式增強(葡萄糖濃度>4.5mM時)。另夕卜，GLP-1強烈增強了胰島素生物合成的所有步驟，包括胰島素基因的轉錄(Ahren，B.等人,/wpravedg7wcoye/o/erawce//w油V化cre&ow6少/w/z/^Wowo/(i/pe/"辦//ep^/<xse/wmz'ce.EurJPharmacol,2000.404(1-2):p.239-45)。(3細胞功能必需的其它基因(葡糖激酶和Glut-2)的摔爭錄也因GLP-1治療而增強(Ahren,B.等人，/w/ravedg/"coye脂ce.EurJPharmacol,2000.404(1-2):p.239-45)。由于GLP-1的這些作用，對能夠用功能性P細胞刺激2型糖尿病患者中胰島素釋放的作為潛在治療劑的該肽具有濃厚的興趣。然而，由于血流中的二肽基肽酶4(DPP4)在Ala2位進行N-末端切割，GLP-1的活性被快速抑制。這種酶切使GLP-1的半衰期限制為2-6分鐘，這被認為是其治療潛力的嚴重限制。正在開發(fā)大量GLP-1類似物以對抗DPP4的作用(表l)，但是其中沒有一個使用天然GLP-1和本發(fā)明中的載體系統(tǒng)。其中一些已經(jīng)在糖尿病動物模型(Xu,G.等人，Exe"c/z'"W扁/ato6c^/z6由-ce〃re///ca"cw朋t/weogewe^，resw/d"g/wcreasec/6由-ce〃moss""<iimprovedglucosetoleranceindiabeticrats.Diabetcs,1999.48(12):p.2270-6)以及人體(Drucker,D.J.,Enhancingincretinactionforthetreatmentoftype2diabetes.DiabetesCare,2003.26(10):p.2929-40)中證實使空腹和餐后血液葡萄糖正?；?。最大的進展是，extendin4或依澤那太(人GLP-1的一種爬行動物類似物)現(xiàn)在已被批準用于2型糖尿病。然而，這些非天然肽的長期全身給藥的效果還不清楚。持續(xù)給藥的副作用似乎導致胃腸和心血管副作用(Nielsen,Ｌ．Ｌ．和A.D.Baron,Pharmacologyofexenatide(syntheticexendin-4)forthetreatmentoftype2diaetes.CurrOpinInvestingDrugs,2003.4(4):p.401-5)，并且必須小心控制以防止發(fā)生血糖過低。此外，現(xiàn)在證明非天然GLP-l類似物如依澤那太的給藥導致在38%的所治療的2型糖尿病患者中產(chǎn)生抗體。盡管已經(jīng)表明產(chǎn)生的抗體是非中和抗體，也許是由于對C末端而不是對N-末端敏感，但是隨著時間推移也可能將開發(fā)出N-末端中和抗體。西他列汀(Sitagliptin)(7-[(3R)-3-氨基-l-氧代-4-(2,4,5-三氟苯基)丁基]-5，6,7,8-四氫-3-(三氟曱基)-l,2,4-三唑[4,3-a]吡嗪磷酸鹽(l:l)單水合物)是一種DPP-4抑制劑，它被認為通過減慢包括GLP-1在內的腸降血糖素激素的失活在2型糖尿病患者中發(fā)揮作用。西他列汀提高了活性完整激素的濃度，由此提高并延長了這些激素的作用。腸降血糖素激素，包括胰高血糖素樣肽-1(GLP-1)和葡萄糖依賴性促胰島素多肽(GIP)，由腸全天釋放，其水平由于進食而升高。這些激素被酶DPP-4快速滅活。腸降血糖素是與葡萄糖內穩(wěn)態(tài)的生理調節(jié)有關的內源系統(tǒng)的一部分。當血液葡萄糖濃度正?；蛘呱邥r，GLP-1和GIP通過涉及環(huán)AMP的細胞內信號途徑提高了胰島素的合成和從胰島(3細胞的釋放。GLP-l也降低胰島a細胞的胰高血糖素分泌，導致肝葡萄糖生成減少。通過提高和延長活性腸降血糖素水平，西他列汀以依賴于葡萄糖的方式提高了胰島素釋放并且降低了循環(huán)中的胰高血糖素水平。證明西他列汀對于DPP-4具有選擇性，并且在接近治療劑量的濃度時在體外不抑制DPP-8或DPP-9的活性。表l.天然GLP-1限制導致開發(fā)GLP-1類似物<table>tableseeoriginaldocumentpage85</column></row><table>作為具有長半衰期的GLP-1類似物的替代物，DPP4的小分子抑制劑處于開發(fā)中，它具有可口服使用的優(yōu)點。然而，由于DPP4在切割對于免疫功能重要的其它分子中的重要性，這些抑制劑具有其它副作用的可能(Wiedeman,P.E.和J.M.Trevillyan,D^ep/z't^/pe/7"dase赫"仏CurrOpinInvestigDrugs,2003.4(4):p.412-20)。GLP-1不僅提高f3細胞的增殖(Buteau,J.等人，G7wcago"-//&3-A;z'"ase/"creases^ywsc一^ow/a"or/7awcrea/7'ct/wocfew"/Diabetologia,1999.42(7):p.856-64)及阻止其凋亡(Urusova，LA.等人,z'w雄/"owo/pawcm^z'ck/efce〃apopto57、.TrendsEndocrinolMetab，2004.15(1):p.27-33)而且刺激其新生、誘導從胰管祖細胞分化新(3纟田月包(Bulotta，A.等人，Cw//w^dp"wc廠ea"'cce〃swwofergoce〃g/固，-/,'A:e/e,UJMolE油crinol，2002.29(3):p.347-60)的發(fā)現(xiàn)使人們對這種肽可能治愈T1D產(chǎn)生了興趣。實際上，在缺乏GLP-1受體的小鼠中觀察到GLP-1在胰島產(chǎn)生中的重要性，該小鼠具有含有較少(3細胞的胰島和異常葡萄糖耐受(Scrocchi,L,A.等人，/(ie油yc""owo/j9ep"We/(TZ/尸畫/)ac/7owwew^/々rDiabetes,1998.47(4):p.632-9)。GLP-1和其它GLP-1受體的激動劑引起的胰島細胞的再生和胰腺(3細胞量的增加在動物模型中已經(jīng)得到證明(Xu,G.等人,五xe"(i/w-4Wmw/atoZo/ZzZ由-ce〃rep//ca"'cw"<ifo/e謂cez>rah.Diabetes,1999.48(12):p.2270-6)，進一步已經(jīng)證明GLP-1減弱了胰島素不足型糖尿病在部分胰切除術后的進展(Xu,G.等人,Exe"W"-4Wmw/她sZc^/6加-ce〃"eoge"e57、mw/h"g/"crease^/Z)由-ce〃mowcmc/z'柳/ravedg/wcoseto/wa"ceDiabetes,1999.48(12):p.2270-6)。因jt匕，GLP-1治療可能使T1D中被破壞的胰島再生。遺憾的是，不應用本發(fā)明，作為藥物的天然GLP-1作為商品不能存活。本發(fā)明能夠提供人們長期尋求的許多益處。本發(fā)明包括將GLP-1配制到四種載體的至少兩種中，其解離常數(shù)為77和249nM(圖35和36)。這些Kd遠低于DPP4對于GLP-l的Km，因此阻止了GLP-1的降解。這種保護加上有效大小的增加，阻止了腎臟清除，使我們的天然GLP-1制劑的循環(huán)半衰期延長到驚人的程度(圖42-44)并且降低了鏈脲霉素誘導的糖尿病大鼠中的葡萄糖水平(圖45)。與FDA批準的或接近批準的GLP-l類似物相比，我們的長效GLP-1制劑的半衰期大大高于使用蛋白酶抗性GLP-1類似物(FDA批準的依澤那太；11/2=4小時，每天給藥兩次)或非蛋白酶抗性利拉魯肽(Liraglutide)(與白蛋白結合的脂肪酸連接的GLP-l;tl/2=10小時，計劃每天給藥一次)所達到的半衰期。重要的是注意到我們的AAGLP-1不可能引起在用依澤那太(Byetta)治療的患者中所見的抗體形成。另外，由于配制的天然GLP-1具有長循環(huán)半衰期，預期給藥頻率較低。盡管長效依澤那太(Byetta-LAR)仍在開發(fā)中，但是我們的方法不同于Byetta-LAR。Byetta-LAR使用在皮膚下溶解并且緩慢釋放游離GLP-1類似物的聚合物(隨時間降解的聚乳酸)。我們的制劑是在皮下注射，我們對血液中結合的和游離的GLP-1的測定證明載體以及GLP-l在血液中循環(huán)，總GLP-l的87.5o/。與血液中的循環(huán)載體結合，其余12.5%是游離的。這恰好證明了本發(fā)明的有用性，而非限制本發(fā)明的范圍。本發(fā)明另一實施方案涉及一種治療患者的胰島素不足型糖尿病的方法，包括給有此需要的患者施用治療有效量的上述任一種疏水核載體組合物，其中負載分子是GLP-1。在另一個實施方案中，本發(fā)明涉及一種治療患者的胰島素不足型糖尿病的方法，包括給有此需要的患者施用治療有效量的上述任一種疏水核載體組合物；該組合物包含聚氨基酸載體，與所述聚氨基酸載體共價連接的甲氧基聚乙二醇保護鏈，與所述聚氨基酸載體共價連接的疏水脂肪酸鏈，與所述疏水脂肪酸鏈可逆結合的負載分子，其中負載分子是GLP-1。天然f^^^^i^GF^i^^ii'GLP-/:^/"^/^^;胃泌素和EGF受體配體的轉基因過量表達刺激了成年小鼠的胰島新生，顯著增力口了月夷島纟田月包質量(Wang，T.C.等人，尸awcre""cgost〃'"W/ww/a^y/s/WP"cm"wce〃義JClinInvest,1993.92(3):p.1349-56)。EGF受體酉己體^口EGF、TGF-a和(3細胞生長因子增加了產(chǎn)生胰島素的[3-胰島細胞的新生和增殖(Suarez-Pinzon,W丄，等人,Co勵/wWcwf/zerapyw"/z印油簡a/gro"H^/z/"c/orgos^"'w/wcreoyes6efa畫ce〃mos^a"c/reversesZ^/erg7_ycem/a7VODw/ce.Diabetes,2005.54(9):p.2596-601，Song,S.Y.等人，五x/a腦.owo/尸t/x7-expms^/wg印"/ze/^wgnM^/z/""ora///za.Gastroenterology,1999.117(6):p.1416-26,Krakowski,M丄.等人,rnmsgew/co/ep/(ie削a/grow/7z/""ormorp/zo/og/ca/c/zawges.JEndocrinol,1999.162(2):p.167-75,Cras畫Meneur，C等人，/ac/or/"creasespn9/z/era/7.owa/Wdz,rew//a/7'ow.Diabetes,2001.50(7):p.1571-9,Huotari,M.A.,J.Palgi禾口T.Otonkoski,(7row/Ay^C6>r-we<i/"/eJce〃5vz^fe油yc油'owo/S由ce〃油7〃wove/6由畫ce〃w〃og饑Endocrinology,1998.139(4):p.1494-9，Yamamoto,K.等人，化/ec"vea〃oxawDiabetes,2000.49(12):p.2021-7)。另夕卜，通過系統(tǒng)施用EGF和胃泌素藥物治療慢性鏈脲霉素誘導的糖尿病大鼠導致葡萄糖的正?；推咸烟悄褪艿母纳?Brand,S丄等人，PharmacolToxicol，2002.91(6):p.414-20)。組織學分析顯示f3-細胞量隨BrdU標記增多而增多，指示新生。重要的是，證據(jù)表明生長因子如EGF也引起對新再生的(3-細胞的免疫耐受的誘導(Suarez-Pinzon，W丄.等人，Cow^/w油'ow/7zerapyw"/z，Vfe削a/grcwf/z/acorgos^Ww/"creasesZefa-ce〃mos^"wdrevisesA'"6Wc7V(9Z)m/ce.Diabetes,2005.54(9):p.2596-601)。為了克服天然胃泌素和天然EGF具有短生物半衰期的限制(其半衰期均為幾分鐘(Hansen,C.P.等人，^/zarwacoA/we/Zcsaw<iorga"me/aZo/z^mo/cflr6ox戸脂V/a/W，dg(yc/we-ex/e"t/edAmJPhysiol,1996.271(1Pt1):p.G156-63，Lev-Ran，A.等人，O一o/鵬'證少epidermalgrowthfactorinhumans:excrectionofendogenousEGFandinfused[131I]-humanEGFandkidneyhistochemistry.ClinExpPharmacolPhysiol，1992.19(10》p.667-73,Senekowitsch-Schmidtke,R.等人,Invivoevaluationofepidermalgrowthfactor(EGF)receptordensityonhumantumorxenograftsusingradiolabeledEGFandanti-(EGFreceptor)mAB425.CancerImmunolImmunother，1996.42(2):p.108-14,Feng,J.等人，Tissuedistributionandplasmaclearanceofheparin-bindingEGF-likegrowthfactor(HB_EGF)inadultandnewbornrats.Peptides,2005)),使用EGF和胃泌素的類似物，每天通過腹膜內注射給藥兩次(美國專利#6,992,060,Suarez-pinzon，W.L.等人,Combinationtherapywithepidermalgrowthfactorandgastrinincreasesbeta-cellandreverseshyperglycemiaindiabeticNODmice.Diabetes,2005.54(9):p.2596-601)。另外，本領域中的一個實例教導不使用天然胃泌素和天然EGF。本發(fā)明另一實施方案涉及一種治療患者的胰島素不足型糖尿病的方法，包括給有此需要的患者施用治療有效量的上述任一種疏水核載體組合物，其中負載分子是EGF,和；上述任一種疏水核載體組合物，其中負載分子是胃泌素。本發(fā)明另一實施方案涉及一種治療患者的胰島素不足型糖尿病的方法，包括給有此需要的患者施用治療有效量的上述任一種疏水核載體組合物，其中負載分子是GLP-1，和；上述任一種疏水核載體組合物，其中負載分子是胃泌素。奧美拉唑不可逆地抑制胃中的質子泵，直到發(fā)生新泵的合成(于W.B.,D.P.Blakeman和J.P.Davis，Irreversibleinactivationofratgastric(H+-K+)-ATPaseinvivobyomeprazole.Z.BiochemBiophysResCommun,1985.126(1):p.78-82,Keeling,D.J.等人,Studiesonthemechanismofactionofomeprazole.BiochemPharmacol,1985.34(16):p.2967-73)。長久以來已知質子泵抑制導致高胃泌素血癥，其中血清胃泌素水平可以從15pg/ml升高至200pg/ml以上(Lamberts,R.等人，Long-term拜由/纖Digestion,1988.39(2):p.126-35),在已經(jīng)具有高水平胃泌素的疾病中(佐林格-埃利森綜合征)，奧美拉唑可以使其進一步提高至700pg/ml(Cadranel，J.F.等人，/Zo"g-^環(huán)ej^caqyo/owe/razo/e20/We他w"/severeZo〃/"ger-五〃/sows"(irawe/.GastroenterolClinBiol,1989.13(8-9):p.654-62)。奧美拉唑已經(jīng)應用了超過20年，其用于治療胃食管返流病(GERD)和其它消化性疾病的安全性已經(jīng)經(jīng)過長時間的檢驗(LDs。>4g/Kg)。其它質子泵抑制劑如H2受體阻斷劑也用于相同的適應癥(Schentag,J丄和T.F.Goss,戸？/e她w"/zgos^c^o//7"gea/re/7wxAmJHospPharm,1993.50(4Suppl1):p.S7-10)。用奧美拉唑治療應當使胃泌素水平升高至正常水平的至少3倍，在大多數(shù)情況下升高10倍(Halter,F.等人，垃》"o/頻W/w/z/ZWcwcw//zegrowf/z/鎖'e/a/ce〃&ScandJGastroenterolSuppl,1986.125:p.9-13，Hakanson,R.等人，￡V/cfewce//zafRegulP印t，1990.28(1):p,107-18，VanNieuwenhove,Y.等人,Gcr血"幼'mw/她s—/7^//"/ce〃/7ra/z/erahowZ/zeoeso/7/2"g^o/VirchowsArch，1998.432(4):p.371-5，Koop，H.，M.Klein和R.Arnold,iSerwmgos/"'w/eve/s/o"g-^簡oweprazo/e^rea^膨w/.AlimentPharmacolTher，1990.4(2):p.131-8,Larson,G.M.，H.W.Sullivan和P.Rayford，Owe"/7nafzo/e-/"dwce<i/z_ypergos/r/wem/a:ro/egos^n'c"c/d"yJSurgRes，1986.40(5):p.504-9，Larson,G.M.，H.W.Sullivan和P丄.Rayford,We/(3/7'ora/7/pq/"o腳/razo/e-zWwc"ed/z，erga""'w，/"/op/f.Surgery,1986.100(2):p.175-80,Creutzfeldt，W.和R.Lamberts,Zs1/zy/e廠gaw/n'wem/adawgenwsmawScandJGastroenterolSuppl,1991.180:p.179-91),這種升高持續(xù)存在(Klinkenberg-Knol,E.C.，T7zero/eq/"oweprazo/ez>awt//7Wv>ew/7'ow0/re/7wxtfoe"".Hepatogastroenterology，1992.39Suppl1:p.27-30)。盡管存在其它奧美拉唑衍生物，奧美拉唑的使用已經(jīng)得到長期檢驗，并且導致的血清胃泌素升高非常一致。奧美拉唑及其衍生物仍然是比較新一代質子泵抑制劑的黃金標準，質子泵抑制劑有效性的證據(jù)是血清胃泌素水平的升高(Yu,K.S.等人,尸/z"rwacoh力e"ca/(ip/2arwaco(i7w"Wceva/wa"owo/awove//ra詢p訓//w緣/tor，17//555,/zea/勿w/w"/ee/^.JClinPharmacol,2004.44(1):p.73-82)。本發(fā)明的另外一個實施方案涉及與本發(fā)明疏水核載體組合物配制的天然GLP-1或天然EGF與質子泵抑制劑聯(lián)合應用，通過誘導P-胰島細胞再生升高血液中的胃泌素水平，以治療胰島素不足型糖尿病。本發(fā)明另一實施方案涉及一種治療患者的胰島素不足型糖尿病的方法，包括給有此需要的患者施用治療有效量的上述任一種疏水核載體組合物，其中負載分子是GLP-1，以及進一步給患者施用質子泵抑制劑。在進一步的實施方案中，質子泵抑制劑可以是奧美拉唑。在進一步的實施方案中，奧美拉唑以低于4g/Kg患者體重，但是優(yōu)選低于500mg/kg患者體重，甚至更優(yōu)選低于100mg/Kg患者體重的劑量給藥。本發(fā)明另一實施方案涉及一種治療患者的胰島素不足型糖尿病的方法，包括給有此需要的患者施用治療有效量的上述任一種疏水核載體組合物，其中負載分子是表皮生長因子(EGF)受體配體。本發(fā)明另一實施方案涉及一種治療患者的胰島素不足型糖尿病的方法，包括給有此需要的患者施用治療有效量的上述任一種疏水核載體組合物，其中負載分子是表皮生長因子(EGF)受體配體，以及進一步給患者施用質子泵抑制劑。在進一步的實施方案中，質子泵抑制劑可以是奧美拉唑。在進一步的實施方案中，奧美拉唑以低于4g/Kg患者體重，但是優(yōu)選低于500mg/kg患者體重，甚至更優(yōu)選低于100mg/Kg患者體重的劑量給藥。本發(fā)明另一實施方案涉及一種治療患者的胰島素不足型糖尿病的方法，包括給有此需要的患者施用治療有效量的上述任一種疏水核載體組合物，其中負載分子是EGF。本發(fā)明另一實施方案涉及一種治療患者的胰島素不足型糖尿病的方法，包括給有此需要的患者施用治療有效量的上述任一種疏水核載體組合物，其中負載分子是GLP-1，以及；上述任一種疏水核載體組合物，其中負載分子是胃泌素。本發(fā)明另一實施方案涉及一種治療患者的胰島素不足型糖尿病的方法，包括給有此需要的患者施用治療有效量的上述任一種疏水核載體組合物，其中負載分子是EGF,以及進一步給患者施用質子泵抑制劑。在進一步的實施方案中，質子泵抑制劑可以是奧美拉唑。在進一步的實施方案中，奧美拉唑以低于4g/Kg患者體重，但是優(yōu)選低于500mg/kg患者體重，甚至更優(yōu)選低于100mg/Kg患者體重的劑量給藥。本發(fā)明另一實施方案涉及一種治療患者的胰島素不足型糖尿病的方法，包括給有此需要的患者施用治療有效量的上述任一種疏水核載體組合物，其中負載分子是TGF-ot。本發(fā)明另一實施方案涉及一種治療患者的胰島素不足型糖尿病的方法，包括給有此需要的患者施用治療有效量的上述任一種疏水核載體組合物，其中負載分子是TGF-a,以及進一步給患者施用質子泵抑制劑。在進一步的實施方案中，質子泵抑制劑可以是奧美拉唑。在進一步的實施方案中，奧美拉唑以低于4g/Kg患者體重，但是優(yōu)選低于500mg/kg患者體重，甚至更優(yōu)選低于100mg/Kg患者體重的劑量給藥。本發(fā)明另一實施方案涉及一種治療患者的胰島素不足型糖尿病方法，包括給有此需要的患者施用治療有效量的上述任一種疏水核載體組合物，其中負載分子是(3細胞生長因子。本發(fā)明另一實施方案涉及一種治療患者的胰島素不足型糖尿病的方法，包括給有此需要的患者施用治療有效量的上述任一種疏水核載體組合物，其中負載分子是P細胞生長因子，以及進一步給患者施用質子泵抑制劑。在進一步的實施方案中，質子泵抑制劑可以是奧美拉唑。在進一步的實施方案中，奧美拉唑以低于4g/Kg患者體重，但是優(yōu)選低于500mg/kg患者體重，甚至更優(yōu)選低于100mg/Kg患者體重的劑量給藥。本發(fā)明另一實施方案涉及一種治療患者的胰島素不足型糖尿病的方法，包括給有此需要的患者施用治療有效量的上述任一種疏水核載體組合物，其中負載分子是胃泌素/縮膽嚢素受體配體。本發(fā)明另一實施方案涉及一種治療患者的胰島素不足型糖尿病的方法，包括給有此需要的患者施用治療有效量的上述任一種疏水核載體組合物，其中負載分子是胃泌素。本發(fā)明另一實施方案涉及一種治療患者的胰島素不足型糖尿病的方法，包括給有此需要的患者施用治療有效量的上述任一種疏水核載體組合物，其中負載分子是胃泌素，以及進一步給患者施用質子泵抑制劑。在進一步的實施方案中，質子泵抑制劑可以是奧美拉唑。在進一步的實施方案中，奧美拉唑以低于4g/Kg患者體重，但是優(yōu)選低于500mg/kg患者體重，甚至更優(yōu)選低于1OOmg/Kg患者體重的劑量給藥。含有胃泌素的疏水核載體組合物和奧美拉唑的聯(lián)用將減少所需的含有胃泌素的疏水核載體組合物的劑量。本發(fā)明另一實施方案涉及一種治療患者的胰島素不足型糖尿病的方法，包括給有此需要的患者施用治療有效量的上述任一種疏水核載體組合物，其中負載分子是縮膽嚢素。本發(fā)明另一實施方案涉及一種治療患者的胰島素不足型糖尿病的方法，包括給有此需要的患者施用治療有效量的上述任一種疏水核載體組合物，其中負載分子是縮膽嚢素，以及進一步給患者施用質子泵抑制劑。在進一步的實施方案中，質子泵抑制劑可以是奧美拉唑。在進一步的實施方案中，奧美拉唑以低于4g/Kg患者體重，但是優(yōu)選低于5OOmg/kg患者體重，甚至更優(yōu)選低于1OOmg/Kg患者體重的劑量給藥。含有縮膽嚢素的疏水核載體組合物和奧美拉唑的聯(lián)用將減少所需的含有縮膽嚢素的疏水核載體組合物的劑量。本發(fā)明的目的是提供一種使用本發(fā)明所述的組合物以及適當?shù)倪x自PDR或PhysicianDeskReference(MedicalEconomicsCompany,Inc.Montvale,NJ于2001出版)所述的負載分子治療"TheMerkManualofDiagnosisandTherapy"(Merck&Co.,Inc，Rahway，NJ的一個部門，MerckLaboratories,于1992出版)中所述的各種疾病的方法。MerkManualofDiagnosisandTherapy和PDR在此引入作為參考。負載分子對于特定疾病的適用性可以通過參考"TheMerkManualofDiagnosisandTherapy"或PDR確定。實施例合成方法扭A述本發(fā)明的疏水核載體包括中心載體鏈、疏水基團、保護基和任選的靶定基團。每個基團連接在一起，疏水基團能夠與負載分子如藥物、治療劑或診斷劑形成可逆連接。疏水核載體和負載分子之間的可逆連接包括疏水相互作用。由含有氨基、羧基或羥基的聚合載體合成疏水核載體負載分子復合物通常包括三個合成步驟1)用保護鏈共價修飾骨架載體；2)用疏水基團例如棕櫚酸修飾步驟l)的產(chǎn)物；和3)將步驟2)的產(chǎn)物與負載分子一起孵育，例如與GLP-1—起孵育，以實現(xiàn)疏水核載體-GLP-l復合物的形成。實施例l脂肪酸和芳香烷基羧酸的N-羥基琥珀酰胺酯的制備脂肪酸和芳香羧酸的N-羥基琥珀酰胺酯可促進本發(fā)明疏水核載體的合成，因為這些酯可沿載體與氨基容易地反應。下述方法來自Lapidot等人[Lapidot,Y.,Rappoport,S.和Wolman，Y.(1967)J.LipidRes"8，142]:(i)通過將3.45g(30nmol)的N-羥基琥珀酰亞胺溶解在30ml乙酸乙酯中制成230mM溶液，并在250ml帶塞玻璃錐形瓶中在分子篩球上干燥；(ii)向上述溶液中加入30nmol所需脂肪酸；(iii)制備在10ml乙酸乙酯中含有30mmol(6.18g)二環(huán)己基碳二亞胺的溶液，并將其加入至脂肪酸溶液中；(iv)使反應在室溫下進行過夜；(v)使用吸捕器(suctiontap)過濾除去沉淀的二環(huán)己基碳二亞胺；(vi)在旋轉蒸發(fā)器上將濾液蒸發(fā)至干，并通過從乙醇中重結晶將其純化；和(vii)通過TLOf企測純度，使用以下溶劑系統(tǒng)(a)氯仿，(b)石油(沸點40-60)-二乙醚，8:2;(viii)通過噴射在0.1MNaOH中的10%羥胺，2分鐘后噴射在1.2MHCl中的5。/。FeCl3,對N-羥基琥珀酰亞胺和酯(紅色)染色?？色@得89-90%的收率。其它活化的脂肪酸和芳香烷基羧酸以脂肪酸酐、脂肪酰卣、芳香基-烷基-羧基-酐或芳香基-烷基-?；?卣(如-酰基-Cl和-?；?Br)的形式作為商品獲得(例如來自Sigma-AldrichChem.Co.，Stlouis，MO)。例如，硬脂酸酐將自發(fā)地與載體的氨基反應，形成酰胺鍵，連接硬脂酸酐的CH3(CH2),6CO-，并且釋放硬脂酸酐的其它部分為硬脂酸。用堿性緩沖液中和硬脂酸產(chǎn)物將幫助使反應完成。類似的反應可以用苯曱酸酐進行，以將疏水苯基連接到載體上。類似地，烷基-酰基-卣或T基-烷基-?；?卣將與氨基反應，或者，當加熱時，也與羥基反應。這允許將疏水基團加到載體上。實施例2MPEG-聚-L-賴氨酸(5000;40,000;73%)(PLPEG-I)的合成。試劑MPEG-琥珀酰亞胺基-琥珀酸酯和聚賴氨酸可從市場上購得，并且它們的合成在本領域中眾所周知。將聚-L-賴氨酸(200mg;氫溴酸聚賴氨酸；SigmachemicalCo.;DPvis:264;MWvis:55,200;DPmalls:190;MWmalls:39，800;TNBS測定含0.7mmol氨基,Sparado等人.AnalBiochem96:317，1979)溶解在10ml0.1M碳酸鹽緩沖液pH8.35中，加入1150mgMPEG-琥珀酰亞胺基-琥珀酸酯，渦旋，并在室溫下孵育過夜。第二天，取等份，使用三硝基苯磺酸將剩余氨基的量進行定量(Sparado等人.AnalBiochem96:317,1979)。結果表明，73%的氨基已與MPEG偶合。為了將潛在干擾下一反應(加入疏水基團)的聚賴氨酸的羧基端進行封端，加入600i^l乙二胺和100mgEDC混合，并在室溫下孵育l小時。所得溶液(200ml)通過截止值為100kDa的過濾薄(AmershamBiosciencesCorp,Westborough,MA)過濾洗滌,期間換水5次。將所得PLPEG復合物凍干，稱重，得到860mg的產(chǎn)量。基于被MPEG衍生化的氨基數(shù)目估計所得產(chǎn)物的分子量為730kDa。每mg終產(chǎn)物中的游離氨基的量為0.43|Limol/mg(圖9)。應當注意的是，如果所使用的MPEG-琥珀酰亞胺基-琥珀酸酯摻雜有游離琥珀酸酯(這非常常見)，PEG的量將少于根據(jù)氨基分析預期的值，并且將與每mg終產(chǎn)物中的氨基量不相符。實施例3MPEG-聚-L國賴氨酸(5000;40,000;55%)(PLPEG-II)的合成。試劑MPEG-琥珀酰亞胺基-琥珀酸酯和聚賴氨酸可從市場上購得，并且它們的合成在本領域中眾所周知。將聚-L-賴氨酸(200mg;氬溴酸聚賴氨酸；SigmachemicalCo.;DPvis:264;MWvis:55,200;DPmalls:190;MWmalls:39，800;TNBS測定含0.7mmol氨基，Sparado等人.AnalBiochem96:317,1979)溶解在10ml0.1M碳酸鹽緩沖液pH8.35中，加入900mgMPEG-琥珀酰亞胺基-琥珀酸酯，渦旋，并在室溫下孵育過夜。第二天，取等份，使用三硝基苯磺酸將剩余氨基的量進行定量(Sparado等人.AnalBiochem96:317,1979)。結果表明，55%的氨基已與MPEG偶合。為了將潛在干擾下一反應(加入疏水基團)的聚賴氨酸的羧基端進行封端，加入600ial乙二胺和100mgEDC混合，并在室溫下孵育l小時。所得溶液(200ml)通過截止值為IOOkDa的過濾薄(AmershamBiosciencesCorp,Westborough，MA)過濾洗滌,期間換水5次。將所得PLPEG復合物凍干，稱重，得到860mg的產(chǎn)量。基于被MPEG衍生化的氨基數(shù)目估計所得產(chǎn)物的分子量為560kDa。每mg終產(chǎn)物中的游離氨基的量為0.795nmol/mg(圖9)。應當注意的是，如果所使用的MPEG-琥珀酰亞胺基-琥珀酸酯摻雜有游離琥珀酰亞胺基-琥珀酸酯(這非常常見)，PEG的量將少于根據(jù)氨基分析預期的值，并且將與每mg終產(chǎn)物中的氨基量不相符。實施例4MPEG-聚-L-賴氨酸(5000;40,000;22%)(PLPEG-III)的合成。試劑MPEG-琥珀酰亞胺基-琥珀酸酯和聚賴氨酸可從市場上購得，并且它們的合成在本領域中眾所周知。將聚-L-賴氨酸(200mg;氫溴酸聚賴氨酸；SigmachemicalCo.;DPvis:264;MWvis:55,200;DPmalls:190;MWmalls:39,800;TNBS測定含0.7mmol氨基，Sparado等人.AnalBiochem96:317,1979)溶解在10ml0.1M碳酸鹽緩沖液pH8.35中，加入600mgMPEG-琥珀酰亞胺基-琥珀酸酯，渦旋，并在室溫下孵育過夜。第二天，取等份，使用三硝基苯磺酸將剩余氨基的量進行定量(Sparado等人.AnalBiochem96:317,1979)。結果表明，22%的氨基已與MPEG偶合。為了將潛在干擾下一反應(加入疏水基團)的聚賴氨酸的羧基端進行封端，加入600pl乙二胺和100mgEDC混合，并在室溫下孵育l小時。所得溶液(200ml)通過截止值為IOOkDa的過濾薄(AmershamBiosciencesCorp，Westborough,MA)過濾洗滌，期間換水5次。將所得PLPEG復合物凍干，稱重，得到320mg的產(chǎn)量?；诒籑PEG衍生化的氨基數(shù)目估計所得產(chǎn)物的分子量為250kDa。每mg終產(chǎn)物中的游離氨基的量為1.14pmol/mg(圖9)。應當注意的是，如果所使用的MPEG-琥珀酰亞胺基-琥珀酸酯摻雜有游離琥珀酰亞胺基-琥珀酸酯，PEG的量將少于根據(jù)氨基分析預期的值，并且將與每mg終產(chǎn)物中的氨基量不相符。實施例5MPEG-聚-L-賴氨酸(5000;40,000;9%)(PLPEG-IV)的合成。試劑MPEG-琥珀酰亞胺基-琥珀酸酯和聚賴氨酸可從市場上購得，并且它們的合成在本領域中眾所周知。將聚-L-賴氨酸(200mg;氫溴酸聚賴氨酸；SigmachemicalCo.;DPvis:264;MWvis:55,200;DPmalls:190;MWmalls:39，800;TNBS測定含0.7mmol氨基，Sparado等人.AnalBiochem96:317,1979)溶解在10ml0.1M碳酸鹽緩沖液pH8.35中，加入300mgMPEG-琥珀酰亞胺基-琥珀酸酯，渦旋，并在室溫下孵育過夜。第二天，取等份，使用三硝基苯磺酸(TNBS)將剩余氨基的量進行定量(Sparado等人.AnalBiochem96:317,1979)。結果表明，9。/。的氨基已與MPEG偶合。為了將潛在干擾下一反應(加入疏水基團)的聚賴氨酸的羧基端進行封端，加入600(al乙二胺和100mgEDC混合,并在室溫下孵育1小時。所得溶液(200ml)通過截止值為100kDa的過濾薄(AmershamBiosciencesCorp，Westborough,MA)過濾洗滌，期間換水5次。將所得PLPEG復合物凍干，稱重，得到300mg的產(chǎn)量?；诒籑PEG衍生化的氨基數(shù)目估計所得產(chǎn)物的分子量為125kDa。每mg終產(chǎn)物中的游離氨基的量為1.5|umol/mg(圖9)。應當注意的是，如果所使用的MPEG-琥珀酰亞胺基-琥珀酸酯摻雜有游離琥珀酰亞胺基-琥珀酸酯，PEG的量將少于根據(jù)氨基分析預期的值，并且將與每mg終產(chǎn)物中的氨基量不相符。實施例6MPEG-聚-L-賴氨酸-C12(PLPEG-III-C12)的合成。PLPEG-III-C12是含有連接到剩余賴氨酸的s氨基上的CH3(CH2;h()CO-疏水基團的疏水核載體。將20mg實施例4得到的PLPEG-III溶解至2mlO.lM碳酸鹽緩沖液pH8.35中。用2ml30%乙腈水溶解50mg月桂酸鈉鹽(AcrosOrganics，NJ.),并向該溶液中加入25mgNHSS(N-羥基琥珀酰亞胺硫酸鹽；Pierce，Rockfor，IL),之后再加入100mgEDC(l-乙基-3-[3-二曱基氨丙基]碳二亞胺鹽酸鹽；Pierce，Rockfor,IL)。再將該溶液滴加至2mlPLPEG-III溶液中，于室溫下孵育。第二天，取等份，使用三硝基苯磺酸(NBS)將剩余氨基的量進行定量(Sparado等人.AnalBiochem96:317,1979)。結果表明，已沒有游離氨基。將溶液通過2ml經(jīng)50o/。乙腈/水平衡的陰離子交換樹脂(Mono-Q，Bio-Rad,Hercules,CA)除去剩余的可溶性脂肪酸和NHSS。然后將洗脫液在20ml經(jīng)50。/o乙腈/水平衡的Superdex200(AmershamBiosciencesCorp，Westborough，MA)上脫鹽，將含有PLPEG-III-C12的空體積凍干，稱重，得到12mg的產(chǎn)量。實施例7MPEG-聚-L-賴氨酸-C18(PLPEG-III-C18)的合成。PLPEG-III-C18是含有連接到剩余賴氨酸的s氨基上的CH"CH2;h6CO-疏水基團的疏水核載體。將20mg實施例4得到的PLPEG-III力口至2mlO.lM碳酸鹽緩沖液pH8.35中。用2ml乙腈溶解50mg月桂酸鈉鹽(Fisher,Houston,TX),并向該溶液中加入25mgNHSS(N-羥基硫代琥珀酰亞胺；Pierce,Rockfor,IL),之后再加入lOOmgEDC(l-乙基-3-[3-二曱基氨丙基]碳二亞胺鹽酸鹽；Pierce,Rockfor,IL)。再將該溶液滴加至2mlPLPEG-III溶液中，于室溫下孵育。第二天，取等份，使用三硝基苯磺酸(TNBS)將剩余氨基的量進行定量(Sparado等人.AnalBiochem96:317,1979)。結果表明，已沒有游離氨基。將溶液通過2ml經(jīng)50o/。乙腈/水平衡的陰離子交換樹脂(Mono-Q，Bio-Rad，Hercules,CA)除去剩余的可溶性脂肪酸和NHSS。然后將洗脫液在20ml經(jīng)50。/。乙腈/水平衡的Superdex200(AmershamBiosciencesCorp，Westborough，MA)上脫鹽，將含有PLPEG-III-C18的空體積凍干，稱重，得到18mg的產(chǎn)量。實施例8MPEG-聚-L-賴氨酸-C8(PLPEG-III-C8)的合成。PLPEG-III-C8是含有連接到剩余賴氨酸的s氨基上的CH3(CH2)6CO-疏水基團的疏水核載體。將20mg實施例4得到的PLPEG畫III加至2ml0.1M碳酸鹽緩沖液pH8.35中。用2ml30%乙腈:水溶解50mg月桂酸鈉鹽(SigmachemicalCo.StLouis,MO)，并向該溶液中加入25mgNHSS(N-羥基琥珀酰亞胺硫酸鹽；Pierce,Rockfor,IL)，之后再加入100mgEDC(1-乙基-3-[3-二甲基氨丙基]碳二亞胺鹽酸鹽；Pierce,Rockfor，IL)。再將該溶液滴加至2mlPLPEG-III溶液中，于室溫下孵育。第二天，取等份，使用三硝基苯磺酸(NBS)將剩余氨基的量進行定量(Sparado等人.AnalBiochem96:317,1979)。結果表明，已沒有游離氨基。將溶液通過2ml經(jīng)50。/。乙腈/水平衡的陰離子交換樹脂(Mono-Q，Bio-Rad,Hercules,CA)除去剩余的可溶性脂肪酸和NHSS。然后將洗脫液在20ml經(jīng)50o/。乙腈/水平衡的Superdex200(AmershamBiosciencesCorp，Westborough，MA)上脫鹽，對尋含有PLPEG-III-C8的空體積凍干，稱重，得到8mg的產(chǎn)量。實施例9MPEG-聚-L-賴氨酸-C12(PLPEG-II-C12)的合成。PLPEG-II-C12是含有連接到剩余賴氨酸的s氨基上的CH3(CH2^oCO-疏水基團的疏水核載體。將40mg實施例3得到的PLPEG-II力口至4ml0.1M碳酸鹽緩沖液pH8.35中。在2ml30%乙腈水中溶解50mg月桂酸鈉鹽(AcrosOrganics,NJ.),并向該溶液中加入25mgNHSS(N-羥基琥珀酰亞胺硫酸鹽；Pierce,Rockfor，IL)，之后再加入100mgEDC(l-乙基-3-[3-二曱基氨丙基]碳二亞胺鹽酸鹽；Pierce,Rockfor，IL)。再將該溶液滴加至4mlPLPEG-III溶液中，于室溫下孵育。第二天，取等份，使用三硝基苯磺酸(NBS)將剩余氨基的量進行定量(Sparado等人.AnalBiochem96:317,1979)。結果表明，已沒有游離氨基。將溶液通過2ml經(jīng)50。/。乙腈水平tf的陰離子交換樹脂(Mono-Q,Bio-Rad,Hercules,CA)除去剩余的可溶性脂肪酸和NHSS。然后將洗脫液在20ml經(jīng)50。/。乙腈/水平衡的Superdex200(AmershamBiosciencesCorp，Westborough,MA)上脫鹽，將含有PLPEG-II隱C12的空體積凍干，稱重，得到25mg的產(chǎn)量。實施例10GLP-1與PLPEG-II-C12的結合一式三份準備6個聚丙烯微量離心管。將實施例9獲得的PLPEG-II-C12貯存液(5mg/ml)的等份(90pl)置于聚丙烯微量離心管1和2中。將PLPEG-II貯存液(5mg/ml)的等份置于聚丙烯微量離心管3和4中。管3和4含有無C12脂肪酸衍生化的PLPEG-H。然而應當指出，它們在與C4等同的保護基底部含有琥珀酸酯衍生物。向管2、4和6中力口入60jul等份GLP-l(3mg/ml;7畫36酰胺化的人GLP畫1，PolypeptideLab.GmbH,德國)。再向所有管中加入50pl等份1.5MNaCl/0.5MPO4緩沖液，pH7.35。加水使所有管的內容物升至0.5ml，得到50mM石癢酸鹽/150mMNaC1/pH7.35的最終緩沖液和NaCl濃度?；旌喜龈稍撊芤骸４稳?，用水將所有溶液補充至0.5ml，離心通過IOOkDa截止膜(來自Millipore,Bedford,MA)。通過濾膜的GLP-1是游離GLP-1在溶液中的溶度。不含PLPEG-II-C12或PLPEG-II的對照管(管6)是可用于結合的GLP-1的總量。管6的對照是管5，管5只含緩沖液。結合的負載分子的量可以通過從接受相同濃度的負載分子但是不含疏水核載體的相應對照中減去游離負載分子的量來計算。通過濾膜的負載分子的定量用HPLC進行(見圖IO)。結果表明不含C12脂肪酸修飾的PLPEG-I1能夠結合相當于其重量20。/。的GLP-l。然而，含有C12脂肪酸修飾的PLPEG-II顯示所有可利用的GLP-1都結合。這表明PLPEG-E-C12可以結合相當于其重量至少32%的GLP-1。游離GLP-1的量無法利用常規(guī)HPLC-UV檢測法檢測到，表明游離GLP-l的量低于lOnM。該條件下游離GLP-1的準確含量可以利用用于GLP-1的Elisa試劑盒(Linco，St.Charles，MO)來確定。實施例ll20PLPEG5-55的合成和質量保證為了確定每mgPLPEG(聚賴氨酸-聚乙二醇共聚物)的氨基量和聚賴氨酸的氨基百分飽和度之間的理論和實際關系，研究了一個方程式來基于每mg終PLPEG產(chǎn)物表達的通過TNBS反應測定的氨基預測聚賴氨酸的飽和度。這只在反應中使用的PEG相對于任何含羧基化合物的純度為95-100%時才是有用的。該方程式作為PLPEG組合物的次要確認非常有用。理論預測值用以下方程式計算X=[100x(C-Y)]/5YC+C];其中X是百分飽和度；Y是通過TNBS測定的每克PLPEG的mmolNH2;C是通過TNBS測定的每克PL(聚賴氨酸)的NH2的mmol數(shù)。方程式中5YC中的5表示使用的PEG的大小，在此情況下為5kDa，因此為5YC。如果使用10kDaPEG,則為10YC。這是有用的，因為一旦生成PLPEG產(chǎn)物，就可以通過對終產(chǎn)物的單一TNBS試驗測定聚賴氨酸的氨基的百分飽和度，來確定Y,由Y可以計算X。如下所述，通過用高純度MPEG-琥珀酸酯合成PLPEG,對實驗數(shù)據(jù)檢驗該方程式。將1克20PL(此時1克具有1.7mmolNH2)溶解在100ml200mMHEPES中。通過添加250mgNHSS，然后將500mgEDC溶解在水中，在一個單獨的容器上活化在25ml10mMMESpH二4.7中的5gMPEG琥珀酸酯。活化進行18-20分鐘。將活化的MPEG琥珀酸酯添加到20PL溶液中，并反應4小時。4小時后，如上所述活化并添加另外5gMPEG琥賴酸S旨，在攪拌下孵育過夜。次日，測定氨基，發(fā)3見為0.77mmol,表明氨基的飽和度為55%。在通過IOOkDa分子截止濾過濾器超濾洗滌之前(圖32A)和之后(圖32C),通過大小排阻層析分析一小部分樣品，并測定共聚物的直徑(圖33)。將洗滌的樣品凍干(8克；命名為20PLPEG5-55),每mg干燥終產(chǎn)物的氨基量通過TNBS試驗測定(Sparado等人.AnalBiochem96:317，1979)。使用上述方程式，證實PEG百分飽和度為55。/。(圖31)。又進行了幾次合成，將理^侖j直與實驗值進行比較(圖31)。實施例12C18-20PLPEG5-55(PGC扁HC18)的合成將8g20PLPEG5-55(1.6mmolNH2)溶解在含有TEA(200Mw=101;2mmol)的143mlDCM中。通過添加DCC(Mw=206;0.47ml=0.618g=3.0mmol)并且孵育2小時，用5.7mlDMF中的230mgNHS(Mw=115;2mmol)活化并穩(wěn)定化硬脂酸或C18(570mg;Mw=285;2mmol)(溶液變?yōu)椴蝗苄缘?，因為生成了不溶性的NHS活化的FA和尿素)。將活化的C18添加到20PLPEG5-55溶液中使之反應。2小時后重復該過程并且使之在攪拌下孵育一個周末?？傮w積為160ml(PLPEG為50mg/ml)，將40jLil反應混合物稀釋到lml水中，并測定150pl等份的氨基(2mg/ml;0.002|amol-NH2/mg)。用1號Whatman濾紙過濾掉不溶性的尿素。通過旋轉蒸發(fā)濃縮濾液，并通過IOOkDa分子截止過濾器經(jīng)超濾，用4L70%乙醇洗滌過夜，然后用1L水洗滌。樣品通過0.2pm過濾器過濾除菌，并且凍干(6.7g)。實施例13C24-20PLPEG5-55的合成將3g20PLPEG5-55(0.6mmolNH2)溶解在60mlDCM中，加入100|alTEA。通過添加DCC(Mw-206;0.47ml=0.618g=3.0mmol)并且孵育2小時，用2.7mlDMF中的NHS(86mg;Mw-115;0.75mmol)活化并穩(wěn)定化二十四烷酸或C24(Mw二368.6;276mg;0.75mmo1)(不溶性的尿素沉淀出來，因為生成了NHS活化的FA和尿素)。將活化的C24添加到20PLPEG5-55溶液中使之反應。2小時后重復該過程并且使之在攪拌下孵育過夜。結束時總體積為70ml。將23jLil反應混合物稀釋到lml水中，并測定1501^1等份的氨基(lmg/ml)，發(fā)現(xiàn)含有8^M,這只是略高于6(iM的水空白。用1號Whatman濾紙過濾掉不溶性的尿素。通過旋轉蒸發(fā)濃縮濾液，并通過100kDa分子截止過濾器經(jīng)超濾，用4L70%乙醇洗滌過夜，然后用1L水洗滌。樣品通過0.2inm過濾器過濾除菌，并且凍干(1.9g)。實施例14GLP1向C18-PLPEG5-55(PGC-HC18)上的加載將GLP1(200叫)溶解在500pl70。/。丙酮/水(v/v)中，并轉移到干燥瓶中的10mg載體中。含有200pgGLPl的載體在弱真空下蒸發(fā)，通過控制施加真空的程度，小心不要冷凍或者劇烈煮沸樣品。當溶液干燥時，將瓶密封供以后使用。瓶中的肽樣品在4。C時數(shù)月內非常穩(wěn)定。迄今我們還未見GLP1在該條件下降解。該加載過程是基于圖34所示的使用PGC-HC24獲得的以下結果發(fā)展的。一旦干燥就給樣品加蓋，并保存于冰箱中或4。C下，直到使用。加載的載體通常在PBS中重配用于注射。所有這些都在無菌條件下進行?；蛘?，終產(chǎn)物可以在重配后通過0.5pm過濾器過濾。然后可以將過濾的產(chǎn)物凍干。可以使用丙酮以外的溶劑，如乙腈、甲醇或乙醇。這些溶劑的目的是部分溶解脂肪酸，并且使肽更加緊密。在千燥過程中，由于揮發(fā)性溶劑消失，肽將更接近脂肪酸，并且將與它結合。注意到所有這些溶劑的沸點都低于水。(丙酮沸點二57。C;乙腈沸點二80。C;曱醇沸點二65。C;乙醇沸點=78。C)。負載比取決于肽和所需的血液濃度，但是通常相對于載體重量為2-20%。對于GLP1肽，只有4-5。/。在高親和力部位(nM)處結合，而其余6。/。在低親和力部位(j^VI)處結合。由于我們希望保持低GLP1血液濃度，因此我們只使用高親和力部位，因此通常加載載體重量的2%。實施例15PGC-HC18和GLP1之間解離常數(shù)(Kd)的確定PGC-HC18是一種由20kDa聚賴氨酸組成的疏水核載體，其中55%的氨基與分子量為5kDa的PEG-琥珀酸酯反應，而其余的氨基則與硬脂酸或C18反應。將多個分別含有5mg載體的試管與0.50、0.40、0.30、0.25、0.20、0.15、O.lmg的GLPl相混合，一式三^分。在每個小瓶中與載體相混合的GLP-1的量分別代表載體重量的2、3、4、5、6、8、10%。也準備了不含載體的空白試管并在之后的步驟中進行類似處理。凍干這些樣品，向每個小瓶中加入100jil70。/。的丙酮，并使樣品蒸發(fā)至干。將樣品在500plPBS(pH7.3)中重配，并通過以10000xg離心12分鐘使用IOOMWCO再生纖維素過濾器(Millipore，Bedford,MA)濾除結合的GLP1。含有游離GLP-1的濾液通過反相HPLC定量。過濾器中剩余的物質用100pl70%乙腈通過上述離心洗滌三次，每個樣品釋^L的GLP1(結合的部分)通過反相HPLC定量。計算結合的/游離的值，并對結合的值作圖(圖35)。結合的GLP-1相對于游離GLP-1的相對含量顯示在圖37中。線性區(qū)的回歸線的斜率代表-l/Kd,由它計算Kd(圖35)。發(fā)現(xiàn)每個載體有三個不同的Kd。為249nM的Kd是較高親和力的部位，估計具有該親和力的部位數(shù)為4-5個/載體。第二個Kd為3.7pM,是中親和力，代表2個部位/載體。第三個Kd為33iliM,是最低親和力，代表另外2個部位/載體。后兩個親和力不是與GLP-1遞送非常相關的^M立，因為它們具有較接近DPP4酶(GLP-l降解酶)對于GLP-l的Km(300pM)的親和力。實施例16PGC-HC24和GLP1之間解離常數(shù)(Kd)的確定PGC-HC24是一種由20kDa聚賴氨酸組成的疏水核載體，其中55%的氨基與分子量為5kDa的PEG-琥珀酸酯反應，而其余的氨基則與二十四酸或C24反應。將多個分別含有5mg載體的試管與0.50、0.40、0.30、0.25、0.20、0.15、O.lmg的GLPl相混合，一式三4分。與載體相混合的GLP-1的量分別代表載體重量的2、3、4、5、6、8、10%。也準備了不含載體的空白試管并在之后的步驟中進行類似處理。凍干這些樣品，向每個管中加入IOO|il70%的丙酮，并使樣品蒸發(fā)至千。將樣品在500plPBS(pH7.3)中重配，并通過以10000xg離心12分鐘使用100MWCO再生纖維素過濾器(Millipore,Bedford,MA)濾除結合的GLP1。含有游離GLP-1的濾液通過反相HPLC定量。過濾器中剩余的物質用100fal70%乙腈通過上述離心洗滌三次，每個樣品釋放的GLP1(結合的部分)通過反相HPLC定量。計算結合的/游離的值，并對結合的值作圖(圖36)。線性區(qū)的回歸線的斜率代表-l/Kd,由它計算Kd。發(fā)現(xiàn)每個載體有三個不同的Kd。為77nM的Kd是較高親和力的部位，估計這些部位的數(shù)目為3-4個。第二個Kd為2pM，是中親和力，代表2個部位。后一個親和力不是非常相關的部位，因為它較接近DPP4酶(GLP-1降解酶)對于GLP-l的Km(300pM)。實施例17GLP1-疏水核載體(PGC-HC18)復合物的溶液穩(wěn)定性測試。PGC-HC18是一種由20kDa聚賴氨酸組成的疏水核載體，其中55%的氨基與分子量為5kDa的PEG-琥珀酸酯反應，而其余的氨基則與硬脂酸或C18反應。凝膠滲透色譜法基于分子大小洗脫分子。PGC-HC18分子大小為大約300kDa，而GLPl大小為3kDa。當PGC-HC18在凝膠滲透柱(BioSep2000柱；0.78x30cm;Phenomenex)中單獨洗脫時，它達到接近空隙容積(Vo)，而單獨的GLP1在較晚時達到更接近柱的總體積或Vt。當PGC-HC18和GLP-1之間的非共價復合物通過凝膠滲透柱洗脫時，復合物將在該柱的每個理論板處經(jīng)歷平衡，相互作用的強度將反映為在用PBS(pH7.4)進行千次平衡后多少GLP-1仍與PGC-HC18結合。這用作除Kd以外的復合物穩(wěn)定性的二次確^人。GLP-1-疏水核載體(C18-20PLPEG555)復合物的溶液穩(wěn)定性通過監(jiān)測復合物通過大小排阻柱(0.78x30cm)后與載體結合的GLP-l量來檢測。使用圖34所示的丙酮法，將每樣總共2mgGLP-1加載到不同量的C18-載體上。含有復合的(結合的)或游離的GLP-1的溶液通過大小排阻色語法洗脫(n二5)，并且在220nm處監(jiān)測。游離的GLP-1達到總體積(Vt),而載體達到空隙容積(Vo)。單獨的載體用作定量與載體結合的GLP畫1面禾口、的空白，其達到BioSep2000斗主(0.78x30cm;Phenomenex)的Vo。該復合物是穩(wěn)定的，并且249nM的Kd與該穩(wěn)定性試驗的結果相符(圖38)。實施例18PGC-HC18阻止GLP-1被DPP4快速降解。PGC-HC18是一種20kDa的聚賴氨酸，其中55%的氨基與分子量為5kDa的PEG-琥珀酸酯反應，而其余的氨基則與硬脂酸或C18反應。為了確定PGC-HC18是否阻止GLP-1被DPP-4快速降解，溶于磷酸鹽緩沖液(PBS;pH7.4)中的GLP-1(lmg/ml)在存在或不存在PGC-HC18(10mg/ml)或不含C18脂肪酸或PGC的對照載體的條件下用DPP4(1.25mU/ml;SigmaChem.Co.StLuoisMo)消化。PGC是一種20kDa的聚賴氨酸，其中55%的氨基與5kDa分子量的PEG琥珀酸酯反應，而其余的氨基不反應。孵育24小時后，加入DPP4抑制劑終止消化，然后對每種溶液IOinl等份進行HPLC分析(圖39)。HPLC(WatersCo.Milford，MA)分才斤采用來自Phenomenex的MercurySynergyMax-RP(0.4x2cm),以1.5ml/min的流速洗脫，梯度為25%乙腈/水/0.1%TFA至500/。乙腈/水/0.1%TFA，時間為5分鐘，洗脫液在220nm監(jiān)測。在PBS中用DPP4體外消化GLP1的消化液的色譜圖顯示完整GLP1為早期洗脫峰(指向右側的箭頭，圖39)。GLP1的降解產(chǎn)物(除去組氨酸殘基，較低電荷，在pH2的層析條件下)在稍后的時間洗脫(指向左側的箭頭)。其它峰是DPP4峰(和蛋白質酶抑制劑，3-4分鐘的峰)。在PGC-HC18載體的存在下，DPP4對GLP1的降解明顯延遲，而單獨的GLP1和具有PGC(不含脂肪酸的載體)的GLP1都降解到相似的程度。該分析進行多次，結果非常明確。實施例19GLP-1-PGC-HC18復合物具有足夠的游離GLP-1與細胞受體結合并刺激Ca流入。通過與胰島細胞上GLP-1受體的相互作用，GLP-1導致信號反應級聯(lián)，包括細胞內Ca"濃度增加，導致含胰島素顆粒的胞吐作用以嚴格依賴于葡萄糖的方式增強(葡萄糖濃度>4.5mM時)。由于GLP-1對載體的親和力(Kd249nM)低于GLP-1對其受體的親和力(Kd1nM),我們預測，在受體存在的情形下，反應平衡將會向有利于釋放游離GLP-1的方向移動。我們通過評價其刺激鈣離子流入的能力測試了配制的GLP-1活化培養(yǎng)的胰島細胞上GLP-1受體的能力。將大鼠的胰島瘤細胞(INS-1細胞)接種在96孔板上，密度為每孔200,000個細胞，使之在37。C/5。/。〇02/100%相對濕度下在200iul含有RPMI、10%胎牛血清(FBS)、ll.lmM葡萄糖、10mMHEPES(pH7.4)、lmM丙酮酸鈉和50iuM2-巰基乙醇的培養(yǎng)基中附著過夜。次日，將培養(yǎng)基替換為20iu1含有2。/()FBS、11.1mM葡萄糖和0.5iug/mlFura2(MolecularProbes,Eugine,OR)的磷酸鹽緩沖液(PBS)。30分鐘后，使用Chemeleon(BioScan,WashingtonD.C)監(jiān)測含有2。/。FBS和ll.lmM葡萄糖的180)alPBS以及孔的背景熒光(激發(fā)340nm;發(fā)射510nm)。IO秒鐘后，將20iul含有及不含300nMGLP1的PBS、含有150nMPGC-HC18的300nMGLP1或150nMPGC-HC18分別注入孔中(n=5),監(jiān)測各孔的熒光60秒(激發(fā)340nm;發(fā)射510訓)。如圖40所示，PGC-HC18配制的GLP-1在INS-1胰島細胞中刺激4丐流入，證實了其釋放足夠GLP-1以結合并活化GLP-1受體的能力。實施例20GLP-1-PGC-HC18復合物具有足夠的游離GLP-1用以結合細月包受體并增強由葡萄糖刺激的胰島素分泌。為了進一步確認配制的GLP-1的活性，測試了GLP-1以及配制的GLP-1對由于GLP-1受體活化而發(fā)生的葡萄糖刺激的胰島素釋放增強的效果。將大鼠的胰島瘤細胞(INS-1細胞)接種在96孔板上，密度為每孔50，000個細胞，使之在37。C/5。/。(302/100%相對濕度下在100fil含有RPMI、10。/o胎牛血清(FBS)、ll.lmM葡萄糖、10mMHEPES(pH7.4)、lmM丙酮酸鈉和50pM2-巰基乙醇的培養(yǎng)基中附著過夜。次日，加入另外IOO1^1l不含葡萄糖的培養(yǎng)基，使總葡萄糖濃度為5.5mM。將細胞進一步孵育過夜。通過將培養(yǎng)基替換為20nl含有葡萄糖(11.1mM)和不同含量GLP1(0、0.33、1、3nM)、PGC-HC18(0、0.17、0.33、1nM)以及在PGC國HC18(0、0.17、0.33、1nM)中的GLP-1(0、0.33、1、3nM)的無血清培養(yǎng)基，誘導葡萄糖刺激的胰島素釋放。使用的PGC-HC18與使用的GLP-1為0.5摩爾當量。30分鐘后，收集上清液，用來自Linco的ELISA試劑盒(LincoResearch,StCharles,MO.)測定細胞釋放的胰島素量。結果表明GLP-1制劑類似于游離GLP-1，增強了INS細胞中的胰島素分泌，證實了該制劑的活性(圖41)。類似于游離GLP-1,GLP-1制劑也增強了胰島素的合成，如對GLP-1和GLP-1制劑刺激的INS-1細胞的提取物所進行的檢測所見。實施例21PGC-HC延長GLP-1的生物半衰期。對于該體內方案，使用重約25g的雌性Balb/c小鼠(退出的種鼠CharlesRiver)。在使用前使動物禁食(16小時)，以避免將干擾GLP-1分析的脂血癥。在采血時在異氟烷麻醉下斷頭處死每組七只小鼠。在沒有給藥的1=-1時間點時，殺死七只小鼠來確定各組的基線。在1=0時給小鼠注射50pmol未配制的GLP-l或在lOOinl鹽水中的25pmolPGC-HC18制劑中的50pmo1GLP-1。注射液通過側尾靜脈注射濃注給藥。也通過在靠近尾根處背側皮下給藥進行相同實驗。這對于確定使用兩種不同給藥途徑的GLP-1制劑的藥代動力學的改變是至關重要的。這使我們能夠證實皮膚組織給藥進一步延長了配制的GLP-1在血液中的半衰期。每組七只小鼠在給藥后的不同時間點斷頭處死，將血樣收集在含有按照使用說明使用的DPP4抑制劑(LincoResearch,StCharles,MO)的微量離心管中。用Linco的GLP-lELISA試劑盒(LincoResearch,StCharles,MO.)測定血清中的總GLP-1。為了測定血液中游離GLP-1的量與載體結合的GLP-1進行比較，將稀釋的血清通過IOOkDa分子量截止值的再生纖維素過濾器(Millipore,Bedford,MA)過濾，并用上述Linco測定確定濾液中的游離GLP-1。圖42和43顯示PGC-HC18延長了GLP-1的體內半衰期，并且皮下給藥進一步延長了GLP-1的半衰期。另外，如圖43所示，皮下給藥允許從皮膚釋放PGC-HC載體，此處的游離GLP1遠低于血清中的總GLP-1(注意y-軸為對照標度)。在大鼠中進行類似的實驗。簡要地說，對于該體內方案，使用預先植入頸靜脈插管的重350-370g的雄性SpmgueDawley(HSD)大鼠。使用前使動物禁食(16小時)，以避免將干擾GLP-l分析的脂血癥。在GLP-1(50nmol)或PGC:GLP-l制劑給藥前，在t二-lmin時采集血樣(250iul)。在t二0min時,1ml含有GLP-1(50nmol)的碌酸鹽緩沖液或在PGC-HC18(25nmol)中的GLP-1(50nmol)通過側尾靜脈注射濃注給藥。在不同時間點從插管的頸靜脈中采集血樣。在96d、時結束時，通過腹膜內注射過量的戊巴比妥(200mg/kg)處死動物。該實驗的結果證實用PGC-HC18配制的GLP-1比未配制的GLP-1具有更長的半衰期(圖44)。實施例22在PGC-HC18中配制的GLP-1治療糖尿病的應用。簡要來說，對于該體內方案，將12周齡的雄性Sprague-Dawley(HSD)大鼠(Harlan,Indianapolis,IN)飼養(yǎng)于23±1。C、12:12-h光:暗循環(huán)中，并且使其隨意獲取食物和水(飲食LM-485，Teklad，Madison,WI)。所有大鼠都在實驗開始前稱重，發(fā)現(xiàn)全都在240-260克范圍內。通過側尾靜脈注射在200)al50mM檸檬酸鈉緩沖液pH4.5中的鏈脲霉素(STZ;100mg/kg)在20只大鼠中誘導糖尿病。從第2天開始每天通過剪斷尾尖采血(5pl)監(jiān)測非空腹血糖水平，使用血糖儀(AscensiaElite,BayerCo.Mishawaka,IN)矛口^式纟氏條(BayerCo.Mishawaka,IN)測定血糖水平。IO天后，基于340-380mg/dl的平均非空腹血液葡萄糖水平，選擇95%的(3細胞群被破壞的動物(19只)進行^f究。這些動物分為四組STZ治療組(n二4),STZ治療后不含GLP-1的單獨PGC-HC18治療組(n=5),STZ治療后GLP-l治療組(n二5),以及STZ治療后PGC-HC18制劑中的GLP-1治療組(11=5)。糖尿病誘導后的后續(xù)治療每2天皮下進行一次(星期一、星期三、星期五)，共4周。該治療劑量包括磷酸鹽緩沖液、GLP-1(20fig)、PGC-HC18(lmg)中的GLP-1(20pg)、PGC-HC18(lmg)。GLP-1、PGC曙HC18、和PGC畫HC18制劑中的GLP-1在lml磷酸鹽水中重配，并且每2天通過皮下注射到背側肩部皮膚內給藥一次(星期一、星期三、星期五)，共4周，然后采集尾血進行葡萄糖測定。在最后一次注射或治療和采血結束時，對大鼠稱重，以確定糖尿病的嚴重程度(相對于實驗開始時的總重量減輕)，因為它們在開始時全都具有大致相同的重量。然后使大鼠禁食16小時，于次日進行腹膜內葡萄糖耐量試驗。對于葡萄糖耐量試驗而言，禁食是必需的。將大鼠麻醉，然后腹膜內注射2ml葡萄糖(l.Omg/g體重)和5'-溴—2'-脫氧尿香(BrdU)(50mg/kg體重)作為胰島細胞新生標記物。在葡萄糖/BrdU注射后-2、0、2、5、10、20、30和60分鐘從尾靜脈采集血液(250pl)進行胰島素和葡萄糖測定。在60分鐘結束時，在異氟烷麻醉下通過切斷下腔靜脈i文血處死動物，之后收集胰臟進行免疫組化分析。取胰臟進行BrdU摻入、凋亡、胰島素的免疫組化分析和(3細胞群測定。用PGC-HC18配制的GLP-1治療的大鼠比對照組具有較低的平均累積葡萄糖水平，表示在PGCHC18中配制的GLP-1對減輕這些大鼠中糖尿病的嚴重程度具有積極影響(圖45)。另外，與對照組相比，用PGC-HC18配制的GLP-1治療防止了與糖尿病有關的嚴重體重減輕(圖46)。對這些動物的胰臟進行BrDU染色，以確定胰島中分裂細胞的數(shù)目(圖47)。實施例23一種非肽有機化合物與PGC-HC18結合。多柔比星是一種用于治療多種人類癌癥的非肽有機化合物。為了證實PGC-HC能力的廣泛性，向PGC-HC18中加載多柔比星，并測定解離常數(shù)(Kd)。多柔比星的最初HPLC分析顯示它在比GLP-1低的多的有機溶劑濃度時被洗脫，因而預期對于PGC-HC18結合而言，它具有比GLP-l更高的Kd。對于該實驗，使用0.006、0.012、0.018、0.024、0.030、0.036mg的多柔比星(Mw二580)與2mgC-18載體結合。將15mg載體溶解于1.5ml水中，每個管中加入每200pl等份，并干燥。將1.5mg多柔比星溶解于0.75ml水中(2mg/ml)。向每份干燥載體和無載體的空白試管中分別加入O、3(0.006mg或0.30/0)、6(0.012mg或0.6Q/0)、9(0.018mg或0.90/0)、12(0.024mg或1.20/0)、15|ul(0,030mg或1.5%)和18^U(0.036mg或1.8。/o)的多柔比星。該試管用50%叔丁醇補至72|111,然后蒸發(fā)千燥。將干燥樣品溶解于250|iUPBS(pH7.3)中，并在平衡2小時后，每個樣品通過以10000xg離心12分鐘使用100MWCO再生纖維素過濾器(Millipore,Bedford,MA)過濾。濾液中的多柔比星(游離的或未結合的多柔比星)使用HPLC(Waters2975,具有二極管陣列檢測器，Milford,MA)定量。HPLC分析4吏用來自Phenomenex的MercurySynergyMax-RP(0.4x2cm)，以1.5ml/min的流速洗脫，梯度為25-50%含0.1%TFA的乙腈水溶液，時間為5分鐘，洗脫液在220nm監(jiān)測。從多柔比星總量中減去游離多柔比星的量，獲得結合多柔比星的量(圖48)。用于過濾的再生纖維素過濾器不會結合顯著量的多柔比星而干擾分析。計算結合/游離值，并對結合值作圖(圖49)。線性區(qū)的回歸線的斜率表示-l/Kd,由它計算Kd。發(fā)現(xiàn)多柔比星以315pM的Kd與PGC-HC18相互作用。盡管為了理解清楚起見，已經(jīng)通過舉例說明和實施例詳細描述了本發(fā)明，但是本領域技術人員應當容易地確定，可以在不背離所附權利要求書的精神和范圍的情況下進行某些變化和修改。參考引用此處引用的所有專利和出版物都引入本文作為參考。等同方案本領域技術人員應當認識到或者僅使用常規(guī)實驗就能夠確定此處所述的本發(fā)明具體實施方案的許多等同方案。這些等同方案也包括在所附的權利要求書中。權利要求1.一種組合物，其包含(i)載體；(ii)多個第一疏水基團，其中第一疏水基團與載體共價連接，能夠結合負載分子，并且獨立于載體重量具有小于大約1,000道爾頓的分子量；和(iii)多個第一保護側鏈，其中每個第一保護側鏈與載體共價連接，并且獨立于載體重量具有大約400至20,000道爾頓的分子量。2.權利要求l的組合物，其中所述第一保護側鏈是聚乙二醇、聚丙二醇、聚乙二醇和聚丙二醇的共聚物、多糖、或它們的烷氧基衍生物。3.權利要求2的組合物，其中所述烷氧基衍生物是曱氧基聚乙二醇、曱氧基聚丙二醇、曱氧基化的聚乙二醇和聚丙二醇的共聚物、或乙氧基化的多糖。4.權利要求l的組合物，其中所述第一保護側鏈是甲氧基聚乙二醇。5.權利要求l的組合物，其進一步包含與疏水基團可解離連接的負載分子。6，權利要求5的組合物，其中所述負載分子是治療劑。7.權利要求6的組合物，其中所述治療劑選自胰高血糖素樣肽、胰高血糖素樣肽衍生物、依澤那太、胰高血糖素樣肽-1、胰高血糖素樣肽-2、瘦蛋白片段、腸抑胃肽(GIP)、表皮生長因子(EGF)受體配體、EGF、轉化生長因子a(TGF-oc)、(3細胞生長因子、胃泌素/縮膽嚢素受體配體、胃泌素、縮膽嚢素、溶葡萄球菌素、干擾素、干擾素Y、干擾素(3、干擾素a、白介素-1、白介素-2、白介素-4、白介素-6、白介素-8、白介素-10、白介素-12、腫瘤壞死因子、腫瘤壞死因子oc、腫瘤壞死因子P、auristatin、乳鏈菌肽、胰島素、胰島素樣生長因子、生長激素、神經(jīng)生長因子、腦源性神經(jīng)營養(yǎng)因子、酶、內皮抑制素、制管張素、血小板反應素、尿激酶、鏈激酶、凝血因子VII、凝血因子VIII、粒細胞-巨噬細胞集落刺激因子(GM-CSF)、粒細胞集落刺激因子(G-CSF)、血小板生成素、降鈣素、甲狀旁腺素(PTH)及其片段、促紅細胞生成素、心房鈉尿肽、單克隆抗體、單克隆抗體片段、促生長素抑制素、蛋白酶抑制劑、促腎上腺皮質激素、促性腺激素釋放激素、催產(chǎn)素、促黃體生成激素釋放激素、促卵泡激素、葡糖腦苷脂酶、血小板生成素、非格司亭、前列腺素、依前列醇、前列環(huán)素、環(huán)孢菌素、血管升壓素、特利加壓素、去氨加壓素、色甘酸鈉(色甘酸鈉或二鈉)、血管活性腸肽(VIP)、萬古霉素、抗微生物劑、多粘菌素b、抗真菌藥、抗病毒藥、恩夫韋地、多柔比星、依托泊苷、芬太尼、氯胺酮和維生素類。8.權利要求6的組合物，其中所述治療劑是胰高血糖素樣肽、表皮生長因子(EGF)受體配體、EGF、轉化生長因子ct(TGF-ot)、(3細月包生長因子、胃泌素/縮膽嚢素受體配體、胃泌素、縮膽嚢素、前列腺素、干擾素、因子VIII、特利加壓素、腸抑胃肽(GIP)、血管活性腸肽(VIP)或乳鏈菌肽。9.權利要求6的組合物，其中所述治療劑是胰高血糖素樣肽l。10.權利要求6的組合物，其中所述治療劑是表皮生長因子(EGF)受體配體。11.權利要求6的組合物，其中所述治療劑是表皮生長因子(EGF)。12.權利要求6的組合物，其中所述治療劑是轉化生長因子a(TGF-a)。13.權利要求6的組合物，其中所述治療劑是(3細胞生長因子。14.權利要求6的組合物，其中所述治療劑是胃泌素/縮膽嚢素受15.權利要求6的組合物，其中所述治療劑是胃泌素。16.權利要求6的組合物，其中所述治療劑是縮膽嚢素。17.權利要求l的組合物，其進一步包含與載體共價連接的定向分子。18.權利要求17的組合物，其中所述定向分子選自肽、硫酸、磺酸、磷酸、膦酸、雙膦酸、羧酸、金屬結合部分、氨基、賴氨酸和精氨酸。19.權利要求17的組合物，其進一步包含與疏水基團和/或定向分子可解離連接的負載分子。20.權利要求l的組合物，其進一步包含與保護側鏈共價連接的靶向分子。21.權利要求20的組合物，其中所述靶向分子選自抗體、抗體片段、嵌合抗體、凝集素、受體配體、蛋白質、酶、肽、糖類、酶的準底物、細胞表面結合化合物和胞外基質結合化合物。22.權利要求20的組合物，其進一步包含與疏水基團可解離連接的負載分子。23.權利要求20的組合物，其進一步包含與載體共價連接的定向分子。24.權利要求23的組合物，其進一步包含與疏水基團和/或定向分子可解離連接的負載分子。25.權利要求l的組合物，其進一步包含第二保護側鏈和多個第二疏水基團，其中該第二疏水基團具有與載體共價連接的第一末端和與第二保護側鏈共價連接的第二末端；其中該第二疏水基團獨立于載體和保護側鏈的重量具有小于l,OOO道爾頓的分子量；和其中與疏水基團共價連接的第二保護側鏈獨立于疏水基團的重量具有400-20,000道爾頓的分子量。26.權利要求25的組合物，其進一步包含與疏水基團可解離連接的負載分子。27.權利要求25的組合物，其進一步包含與載體共價連接的定向分子。28.權利要求27的組合物，其進一步包含與疏水基團和/或定向分子可解離連接的負載分子。29.權利要求25的組合物，其進一步包含與保護側鏈共價連接的靶向分子。30.權利要求29的組合物，其進一步包含與疏水基團可解離連接的負載分子。31.權利要求29的組合物，其進一步包含與載體共價連接的定向分子。32.權利要求31的組合物，其進一步包含與疏水基團和/或定向分子可解離連接的負載分子。33.—種組合物，其包含(i)載體；和(ii)多個具有共價連接的保護側鏈的第一疏水基團，其中所述第一疏水基團具有與載體共價連接的第一末端和與保護側鏈共價連接的第二末端；其中所述第一疏水基團獨立于載體和保護側鏈的重量具有150-1000道爾頓的分子量；和其中所述保護側鏈獨立于載體和疏水基團的重量具有大約400-20，000道爾頓的分子量。34.權利要求33的組合物，其中所述保護側鏈是聚乙二醇、聚丙二醇、聚乙二醇和聚丙二醇的共聚物、或它們的烷氧基衍生物。35.權利要求34的組合物，其中所述烷氧基衍生物是甲氧基聚乙二醇、甲氧基聚丙二醇、或甲氧基化的聚乙二醇和聚丙二醇的共聚物。36.權利要求33的組合物，其中所述保護側鏈是曱氧基聚乙二醇。37.權利要求33的組合物，其進一步包含與疏水基團可解離連接的負載分子。38.權利要求37的組合物，其中所述負載分子是治療劑。39.權利要求38的組合物，其中所述治療劑選自胰高血糖素樣肽、胰高血糖素樣肽衍生物、依澤那太、胰高血糖素樣肽-1、胰高血糖素樣肽-2、瘦蛋白片段、腸抑胃肽(GIP)、表皮生長因子(EGF)受體配體、EGF、轉化生長因子oc(TGF-a)、p細胞生長因子、胃泌素/縮膽嚢素受體配體、胃泌素、縮膽嚢素、溶葡萄球菌素、干擾素、干擾素Y、干擾素(3、干擾素ot、白介素-1、白介素-2、白介素-4、白介素-6、白介素-8、白介素-10、白介素-12、腫瘤壞死因子、腫瘤壞死因子oc、肺瘤壞死因子P、auristatin、乳鏈菌肽、胰島素、胰島素樣生長因子、生長激素、神經(jīng)生長因子、腦源性神經(jīng)營養(yǎng)因子、酶、內皮抑制素、制管張素、血小板反應素、尿激酶、鏈激酶、凝血因子VII、凝血因子VIII、粒細胞-巨噬細胞集落刺激因子(GM-CSF)、粒細胞集落刺激因子(G-CSF)、血小板生成素、降鈣素、甲狀旁腺素(PTH)及其片段、促紅細胞生成素、心房鈉尿肽、單克隆抗體、單克隆抗體片段、促生長素抑制素、蛋白酶抑制劑、促腎上腺皮質激素、促性腺激素釋放激素、催產(chǎn)素、促黃體生成激素釋放激素、促卯泡激素、葡糖腦苷脂酶、血小板生成素、非格司亭、前列腺素、依前列醇、前列環(huán)素、環(huán)孢菌素、血管升壓素、特利加壓素、去氨加壓素、色甘酸鈉(色甘酸鈉或二鈉)、血管活性腸肽(VIP)、萬古霉素、抗微生物劑、多粘菌素b、抗真菌藥、抗病毒藥、恩夫韋地、多柔比星、依托泊苷、芬太尼、氯胺酮和維生素類。40.權利要求38的組合物，其中所述治療劑是胰高血糖素樣肽、表皮生長因子(EGF)受體配體、EGF、轉化生長因子oc(TGF-ot)、(3細胞生長因子、胃泌素/縮膽嚢素受體配體、胃泌素、縮膽嚢素、前列腺素、干擾素、因子vni、特利加壓素、腸抑胃肽(GiP)、血管活性腸肽(VIP)或乳鏈菌肽。41.權利要求38的組合物，其中所述治療劑是胰高血糖素樣肽l。42.權利要求38的組合物，其中所述治療劑是表皮生長因子(EGF)受體配體。43.權利要求38的組合物，其中所述治療劑是表皮生長因子(EGF)。44.權利要求38的組合物，其中所述治療劑是轉化生長因子ot(TGF-a)。45.權利要求38的組合物，其中所述治療劑是P細胞生長因子。46.權利要求38的組合物，其中所述治療劑是胃泌素/縮膽嚢素受47.權利要求38的組合物，其中所述治療劑是胃泌素。48.權利要求38的組合物，其中所述治療劑是縮膽嚢素。49.權利要求33的組合物，其進一步包含與載體共價連接的定向分子。50.權利要求49的組合物，其中所述定向分子選自肽、硫酸、磺酸、磷酸、膦酸、雙膦酸、羧酸、金屬結合部分、氨基、賴氨酸和精氨酸。51.權利要求49的組合物，其進一步包含與疏水基團和/或定向分子可解離連接的負載分子。52.權利要求33的組合物，其進一步包含與保護側鏈共價連接的靶向分子。53.權利要求52的組合物，其中所述靶向分子選自抗體、抗體片段、嵌合抗體、酶、肽、酶的準底物、凝集素、受體、和凝集素的糖配體。54.權利要求52的組合物，其進一步包含與疏水基團可解離連接的負載分子。55.權利要求52的組合物，其進一步包含與載體共價連接的定向分子。56.權利要求55的組合物，其進一步包含與疏水基團和/或定向分子可解離連接的負載分子。57.權利要求33的組合物，其進一步包含多個第二疏水基團，其中該第二疏水基團與載體共價連接，并且獨立于載體重量具有小于1,000道爾頓的分子量。58.權利要求57的組合物，其進一步包含與疏水基團可解離連接的負載分子。59.權利要求57的組合物，其進一步包含與載體共價連接的定向分子。60.權利要求59的組合物，其進一步包含與疏水基團和/或定向分子可解離連接的負載分子。61.權利要求57的組合物，其進一步包含與保護側鏈共價連接的靶向分子。62.權利要求61的組合物，其進一步包含與疏水基團可解離連接的負載分子。63.權利要求61的組合物，其進一步包含與載體共價連接的定向分子。64.權利要求63的組合物，其進一步包含與疏水基團和/或定向分子可解離連接的負載分子。65.—種組合物，其包含(i)聚合載體，選自聚賴氨酸、聚天冬氨酸、聚谷氨酸、聚絲氨酸、聚蘇氨酸、聚半胱氨酸、聚甘油、聚乙烯亞胺、天然糖類、胺化多糖、胺化寡糖、聚酰胺胺、聚丙烯酸、多元醇、磺化多糖、磺化寡糖、羧化多糖、羧化寡糖、氨基羧化多糖、氨基羧化寡糖、羧曱基化多糖和羧曱基化寡糖；和(ii)多個能夠結合負載分子并且與載體共價連接的疏水基團，其中每個疏水基團獨立于載體重量具有小于1,000道爾頓的分子量，并且其中每個疏水基團獨立地選自直鏈烷基、支鏈烷基、苯基、萘基、膽固醇、維生素D和維生素E。66.權利要求65的組合物，其進一步包含與疏水基團可解離連接的負載分子。67.權利要求66的組合物，其中所述負載分子是治療劑。68.權利要求65的組合物，其進一步包含與載體共價連接的定向分子。69.權利要求68的組合物，其中所述定向分子選自肽、硫酸、磺酸、磷酸、膦酸、雙膦酸、羧酸、金屬結合部分、氨基、賴氨酸和精氨酸。70.權利要求68的組合物，其進一步包含與疏水基團和/或定向分子可解離連接的負載分子。71.權利要求70的組合物，其中所述負載分子是治療劑。72.權利要求65的組合物，其進一步包含與載體或疏水基團共價連接的靶向分子。73.權利要求72的組合物，其中所述耙向分子選自抗體、抗體片段、嵌合抗體、酶、肽、受體、酶的準底物、凝集素、和凝集素的糖配體。74.權利要求72的組合物，其進一步包含與疏水基團可解離連接的負載分子。75.權利要求74的組合物，其中所述負載分子是治療劑。76.權利要求72的組合物，其進一步包含與載體共價連接的定向分子。77.權利要求76的組合物，其進一步包含與疏水基團和/或定向分子可解離連接的負載分子。78.權利要求77的組合物，其中所述負載分子是治療劑。79.—種治療哺乳動物的糖尿病的方法，包括施用選自一又利要求9-16和41-48的組合物的第一組合物。80.權利要求79的方法，進一步包括施用選自權利要求14-16和46-48的組合物的第二組合物，其中所述第一組合物選自權利要求9的組合物和權利要求41的組合物。81.權利要求80的方法，進一步包括施用作為第三組合物的質子泵抑制劑。82.權利要求79的方法，進一步包括施用作為第二組合物的質子泵抑制劑。83.權利要求82的方法，其中所述質子泵抑制劑是奧美拉唑。84.權利要求82的方法，進一步包括施用作為第三組合物的DPP4抑制劑。85.權利要求79的方法，進一步包括施用作為第二組合物的DPP4抑制劑。86.權利要求79的方法，進一步包括施用選自權利要求14-16和46-48的組合物的第二組合物，其中所述第一組合物是根據(jù)權利要求10-13和42-45中任一項所述的組合物。87.權利要求86的方法，進一步包括施用作為第三組合物的質子泵抑制劑。88.權利要求87的方法，其中所述質子泵抑制劑是奧美拉唑。89.權利要求79的方法，進一步包括施用作為第二組合物的質子泵抑制劑，其中所述第一組合物是根據(jù)權利要求10-13和42-45中任一項所述的組合物。90.權利要求89的方法，其中所述質子泵抑制劑是奧美拉唑。全文摘要本發(fā)明部分涉及一種生物相容性疏水核載體，其包含一個載體和多個與該聚合載體共價連接的疏水基團。該疏水基團能夠可解離地連接負載分子如治療劑。該疏水核載體也可以包含保護側鏈、定向分子和靶向分子。文檔編號A61K47/32GK101365490SQ200680052127公開日2009年2月11日申請日期2006年12月19日優(yōu)先權日2005年12月19日發(fā)明者E·M·博洛廷,G·M·卡斯蒂洛申請人:藥明公司