專利名稱：治療急慢性肝炎的復(fù)方丹梔制劑的質(zhì)量控制方法
技術(shù)領(lǐng)域：
本發(fā)明涉及一種藥物制劑的質(zhì)量控制方法，特別是涉及治療急慢性肝炎的復(fù)方丹梔制劑的質(zhì)量控制方法，屬于對(duì)藥品進(jìn)行質(zhì)量控制的技術(shù)領(lǐng)域。
背景技術(shù)：
臨床常見的甲型、乙型、丙型、戊型肝炎均為全身性傳染病，主要分為急性肝炎(有黃疸型及無黃疸型)、慢性肝炎(慢性遷延性型、慢性活動(dòng)性型)，也表現(xiàn)為有黃疸或無黃疸。屬于中醫(yī)“黃疸”、“脅痛”、“郁癥”、“集聚”等病范疇。中醫(yī)認(rèn)為，本病多因感受濕熱、疫癘或飲食失當(dāng)所引起，而濕熱蘊(yùn)結(jié)在肝炎整個(gè)過程中占有重要地位。其主要表現(xiàn)為面目發(fā)黃，小便黃如濃茶，惡心、厭食，胃脘及右肋悶痛等，于中醫(yī)中屬雜病類。無論急慢性肝炎及有無黃疸，均可見食欲不振、脘悶惡心、脅痛腹脹、肢體因重乏力或風(fēng)黃疸，也可見舌紅苔膩、脈弦、弦滑等濕熱蘊(yùn)結(jié)證。
因此，提供一種療效確切、安全方便、副作用小的治療急慢性肝炎的藥物顯得十分重要。本申請(qǐng)人已向國家知識(shí)產(chǎn)權(quán)局申請(qǐng)的專利(200610200369.2)，提供了一種治療急慢性肝炎的復(fù)方丹梔制劑及其制備方法，對(duì)濕熱蘊(yùn)結(jié)之實(shí)證肝炎有很好的療效。但藥品如果沒有嚴(yán)格的質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)，得到的產(chǎn)品質(zhì)量可靠性不高，其結(jié)果必然是治療效果不明顯；所以為提高藥物的治療作用，減少藥物副作用，制定一個(gè)嚴(yán)格可靠的質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)成為保證藥品質(zhì)量的基本要求。隨著現(xiàn)代儀器分析技術(shù)的發(fā)展，高效液相色譜法，氣相色譜法等分析方法在藥品的質(zhì)量控制中得到了越來越廣泛的應(yīng)用，保證了藥物質(zhì)量的可控性，從而確保了用藥的安全。

發(fā)明內(nèi)容
本發(fā)明的目的在于提供一種治療急慢性肝炎的復(fù)方丹梔制劑的質(zhì)量控制方法，所述制劑包括片劑、分散片、膠囊劑、軟膠囊劑、顆粒劑、散劑、微丸劑、滴丸劑和口服液體制劑等。本發(fā)明根據(jù)復(fù)方丹梔制劑中各藥味所表現(xiàn)出的薄層色譜特征，制定了薄層色譜鑒別方法；參考中國藥典建立了高效液相色譜法測(cè)定制劑中梔子苷的含量；并根據(jù)多次測(cè)定梔子苷含量的結(jié)果確定了制劑中梔子苷含量的合理范圍。
本發(fā)明所述的復(fù)方丹梔制劑是由苦參90～160份、梔子2～3份、黃柏100～200份、丹參100～200份、水飛薊素100～200份再配以適當(dāng)輔料制成的。其制備方法為取苦參、梔子、黃柏、丹參加水煎煮三次，第一次1.5小時(shí)，第二、三次各1小時(shí)，合并煎液，濾過，濾液濃縮至25℃相對(duì)密度為1.12～1.15的清膏，加入水飛薊素及適量輔料，按常規(guī)方法制成不同的制劑。
本發(fā)明所述質(zhì)量控制方法主要包括性狀、鑒別、檢查以及含量測(cè)定項(xiàng)目中的部分或全部；其中鑒別包括對(duì)制劑中黃柏、丹參、苦參和水飛薊素的薄層色譜鑒別；含量測(cè)定是對(duì)制劑中梔子所含梔子苷的含量測(cè)定。
其中，黃柏的鑒別方法是以鹽酸小檗堿對(duì)照品為對(duì)照，以正丁醇∶醋酸∶水＝1～5∶0.5～1.5∶0.5～1.5為展開劑的薄層色譜法。
丹參的鑒別方法是以原兒茶醛對(duì)照品為對(duì)照，以甲酸乙酯∶甲苯∶甲酸＝2～6∶5～10∶0.5～1.5為展開劑的薄層色譜法。
苦參的鑒別方法是以苦參堿對(duì)照品為對(duì)照，以丙酮∶甲苯∶醋酸乙酯∶濃氨試液＝1～5∶1～5∶0.5～1.5∶0.05～0.2為展開劑的薄層色譜法。
水飛薊素的鑒別方法是以水飛薊素對(duì)照品為對(duì)照，以醋酸乙酯∶甲醇∶水＝10～20∶1～3∶0.05～0.2為展開劑的薄層色譜法。
具體的鑒別方法包括以下項(xiàng)目的部分或全部(1)取本制劑1～3g，研細(xì)，加甲醇2～8ml，超聲處理20～60分鐘，濾過，濾液作為供試品溶液；另取鹽酸小檗堿對(duì)照品，加甲醇制成每1ml含0.5～2.0mg的溶液，作為對(duì)照品溶液；照中國藥典2005年版一部附錄VI B薄層色譜法試驗(yàn)，吸取上述供試品溶液5～10μ1、對(duì)照品溶液0.5～1.5μl，分別點(diǎn)于同一硅膠GF254薄層板上，以正丁醇∶醋酸∶水＝1～5∶0.5～1.5∶0.5～1.5為展開劑，展開，取出，晾干；置365nm紫外光燈下檢視，供試品色譜中，在與對(duì)照品色譜相應(yīng)的位置上，顯相同顏色的熒光斑點(diǎn)；(2)取本制劑1～3g，研細(xì)，加甲醇2～8ml，超聲處理20～60分鐘，濾過，濾液作為供試品溶液；取原兒茶醛對(duì)照品，加甲醇制成每1ml含0.5～1.5mg的溶液，作為對(duì)照品溶液；照中國藥典2005年版一部附錄VI B薄層色譜法試驗(yàn)，吸取上述供試品溶液5～15μl、對(duì)照品溶液1～3μl，分別點(diǎn)于同一硅膠G薄層板上，以甲酸乙酯∶甲苯∶甲酸＝2～6∶5～10∶0.5～1.5為展開劑，展開，取出，晾干；噴以二硝基苯肼試液，供試品色譜中，在與對(duì)照品色譜相應(yīng)的位置上，顯相同顏色的斑點(diǎn)；(3)取本制劑1～3g，研細(xì)，加甲醇2～8ml，超聲處理20～60分鐘，濾過，濾液作為供試品溶液；取苦參堿對(duì)照品，加甲醇制成每1ml含0.1～0.3mg的溶液，作為對(duì)照品溶液；照中國藥典2005年版一部附錄VI B薄層色譜法試驗(yàn)，吸取上述供試品溶液5～15μl、對(duì)照品溶液1～3μl，分別點(diǎn)于同一硅膠G薄層板上，以丙酮∶甲苯∶醋酸乙酯∶濃氨試液＝1～5∶1～5∶0.5～1.5∶0.05～0.2為展開劑，展開，取出，晾干，噴以稀碘化鉍鉀試液，供試品色譜中，在與對(duì)照品色譜相應(yīng)的位置上，顯相同顏色的斑點(diǎn)；
(4)取本制劑1～5g，研細(xì)，加甲醇10～30ml，超聲處理20～60分鐘，濾過，濾液濃縮至2～8ml，作為供試品溶液；另取水飛薊素對(duì)照品，加甲醇制成每1ml含0.2～0.8mg的溶液，作為對(duì)照品溶液；照中國藥典2005年版一部附錄VI B薄層色譜法試驗(yàn)，吸取上述供試品溶液5～15μl、對(duì)照品溶液2～8μl，分別點(diǎn)于同一硅膠GF254薄層板上，以醋酸乙酯∶甲醇∶水＝10～20∶1～3∶0.05～0.2為展開劑，展開，取出，晾干，置254nm紫外光燈下檢視；供試品色譜中，在與對(duì)照品色譜相應(yīng)的位置上，顯相同顏色的斑點(diǎn)。
梔子中梔子苷的含量測(cè)定方法是以梔子苷對(duì)照品為對(duì)照，以0.01～0.03mol/L磷酸氫二鈉溶液∶乙腈＝50～100∶8～15為流動(dòng)相的高效液相色譜法。
具體的含量測(cè)定方法為色譜條件與系統(tǒng)適用性試驗(yàn)用十八烷基硅烷鍵合硅膠為填充劑；0.01～0.03mol/L磷酸氫二鈉溶液∶乙腈＝50～100∶8～15為流動(dòng)相，檢測(cè)波長(zhǎng)230～250nm，理論塔板數(shù)以梔子苷峰計(jì)算應(yīng)不低于2000；對(duì)照品溶液的制備精密稱取在80～120℃干燥1～3小時(shí)的梔子苷對(duì)照品適量，加甲醇制成每1ml含0.05～0.2mg的溶液，即得；供試品溶液的制備取本制劑或其內(nèi)容物，研細(xì)，取0.2～0.8g，精密稱定，置具塞錐形瓶中，精密加入甲醇10～50ml，稱定重量，超聲處理20～60分鐘，放冷，再稱定重量，用甲醇補(bǔ)足減失的重量，濾過，取續(xù)濾液，用0.45μm微孔濾膜濾過，取濾液，即得；測(cè)定法分別精密吸取對(duì)照品溶液與供試品溶液各5～15μl，注入液相色譜儀，測(cè)定，即得；各制劑以相當(dāng)每日服用生藥量的成品量為單位量，每單位量含梔子苷C17H14O10不得少于30mg。
本發(fā)明所述質(zhì)量控制方法包括性狀其外觀或內(nèi)容物為淺棕色至棕褐色；鑒別(1)取本制劑1～3g，研細(xì)，加甲醇2～8ml，超聲處理20～60分鐘，濾過，濾液作為供試品溶液；另取鹽酸小檗堿對(duì)照品，加甲醇制成每1ml含0.5～2.0mg的溶液，作為對(duì)照品溶液；照中國藥典2005年版一部附錄VI B薄層色譜法試驗(yàn)，吸取上述供試品溶液5～10μl、對(duì)照品溶液0.5～1.5μl，分別點(diǎn)于同一硅膠GF254薄層板上，以正丁醇∶醋酸∶水＝1～5∶0.5～1.5∶0.5～1.5為展開劑，展開，取出，晾干；置365nm紫外光燈下檢視，供試品色譜中，在與對(duì)照品色譜相應(yīng)的位置上，顯相同顏色的熒光斑點(diǎn)；(2)取本制劑1～3g，研細(xì)，加甲醇2～8ml，超聲處理20～60分鐘，濾過，濾液作為供試品溶液；取原兒茶醛對(duì)照品，加甲醇制成每1ml含0.5～1.5mg的溶液，作為對(duì)照品溶液；照中國藥典2005年版一部附錄VI B薄層色譜法試驗(yàn)，吸取上述供試品溶液5～15μl、對(duì)照品溶液1～3μl，分別點(diǎn)于同一硅膠G薄層板上，以甲酸乙酯∶甲苯∶甲酸＝2～6∶5～10∶0.5～1.5為展開劑，展開，取出，晾干；噴以二硝基苯肼試液，供試品色譜中，在與對(duì)照品色譜相應(yīng)的位置上，顯相同顏色的斑點(diǎn)；(3)取本制劑1～3g，研細(xì)，加甲醇2～8ml，超聲處理20～60分鐘，濾過，濾液作為供試品溶液；取苦參堿對(duì)照品，加甲醇制成每lml含0.1～0.3mg的溶液，作為對(duì)照品溶液；照中國藥典2005年版一部附錄VI B薄層色譜法試驗(yàn)，吸取上述供試品溶液5～15μl、對(duì)照品溶液1～3μl，分別點(diǎn)于同一硅膠G薄層板上，以丙酮∶甲苯∶醋酸乙酯∶濃氨試液＝1～5∶1～5∶0.5～1.5∶0.05～0.2為展開劑，展開，取出，晾干，噴以稀碘化鉍鉀試液，供試品色譜中，在與對(duì)照品色譜相應(yīng)的位置上，顯相同顏色的斑點(diǎn)；(4)取本制劑1～5g，研細(xì)，加甲醇10～30ml，超聲處理20～60分鐘，濾過，濾液濃縮至2～8ml，作為供試品溶液；另取水飛薊素對(duì)照品，加甲醇制成每1ml含0.2～0.8mg的溶液，作為對(duì)照品溶液；照中國藥典2005年版一部附錄VI B薄層色譜法試驗(yàn)，吸取上述供試品溶液5～15μl、對(duì)照品溶液2～8μl，分別點(diǎn)于同一硅膠GF254薄層板上，以醋酸乙酯∶甲醇∶水＝10～20∶1～3∶0.05～0.2為展開劑，展開，取出，晾干，置254nm紫外光燈下檢視；供試品色譜中，在與對(duì)照品色譜相應(yīng)的位置上，顯相同顏色的斑點(diǎn)；檢查應(yīng)符合中國藥典各制劑項(xiàng)下有關(guān)的各項(xiàng)規(guī)定；含量測(cè)定色譜條件與系統(tǒng)適用性試驗(yàn)用十八烷基硅烷鍵合硅膠為填充劑0.01～0.03mol/L磷酸氫二鈉溶液∶乙腈＝50～100∶8～15為流動(dòng)相，檢測(cè)波長(zhǎng)230～250nm，理論塔板數(shù)以梔子苷峰計(jì)算應(yīng)不低于2000；對(duì)照品溶液的制備精密稱取在80～120℃干燥1～3小時(shí)的梔子苷對(duì)照品適量，加甲醇制成每1ml含0.05～0.2mg的溶液，即得；供試品溶液的制備取本制劑或其內(nèi)容物，研細(xì)，取0.2～0.8g，精密稱定，置具塞錐形瓶中，精密加入甲醇10～50ml，稱定重量，超聲處理20～60分鐘，放冷，再稱定重量，用甲醇補(bǔ)足減失的重量，濾過，取續(xù)濾液，用0.45μm微孔濾膜濾過，取濾液，即得；測(cè)定法分別精密吸取對(duì)照品溶液與供試品溶液各5～15μl，注入液相色譜儀，測(cè)定，即得；各制劑以相當(dāng)每日服用生藥量的成品量為單位量，每單位量含梔子苷C17H14O10不得少于30mg。
為了確保本發(fā)明質(zhì)量控制方法科學(xué)、合理、可行，申請(qǐng)人進(jìn)行了以下試驗(yàn)研究和方法學(xué)考察一、鑒別考察配制方法一本制劑1～3g、加甲醇2～18ml、超聲20～60分鐘、對(duì)照品鹽酸小檗堿0.5～2.0mg/ml取樣量對(duì)照品0.5～1.5μl、供試品5～10μl展開劑正丁醇-醋酸-水(1～5∶0.5～1.5∶0.5～1-5)測(cè)定波長(zhǎng)365nm檢驗(yàn)結(jié)果薄層板上，在與對(duì)照藥材色譜相應(yīng)的位置上，顯相同顏色的熒光斑點(diǎn)。
綜合評(píng)價(jià)符合規(guī)定配制方法二本制劑0.1～0.9g、加甲醇0.5～1.9ml、超聲10～19分鐘、對(duì)照品鹽酸小檗堿0.1～0.4mg/ml取樣量對(duì)照品0.1～0.4μl、供試品1～4μl展開劑正丁醇-醋酸-水(0.5～0.9∶0.1～0.4∶0.1～0.4)測(cè)定波長(zhǎng)365nm檢驗(yàn)結(jié)果薄層板上，供試品在對(duì)照藥材色譜相應(yīng)的位置上，跑出斑點(diǎn)不明顯，且各組分分離不明顯。
綜合評(píng)價(jià)不符合規(guī)定因此，本發(fā)明薄層鑒別選用配制方法一。
二、含量測(cè)定高效液相色譜法考察配制方法一對(duì)照品溶液0.5～1.5mg/ml供試品溶液取本制劑0.5～4ml，置25ml量瓶中取樣5～20μl流動(dòng)相0.01～0.03mol/L磷酸氫二鈉-乙腈(50～100∶8～15)測(cè)定波長(zhǎng)200nm～229nm結(jié)果吸光度響應(yīng)值不明顯綜合評(píng)價(jià)不符合規(guī)定配制方法二對(duì)照品溶液0.5～1.5mg/ml
供試品溶液取本制劑0.5～4ml，置25ml量瓶中取樣5～20μl流動(dòng)相0.01～0.03mol/L磷酸氫二鈉-乙腈(50～100∶8～15)測(cè)定波長(zhǎng)230nm～250nm結(jié)果吸光度響應(yīng)值明顯綜合評(píng)價(jià)符合規(guī)定配制方法三對(duì)照品溶液0.5～1.5mg/ml供試品溶液取本制劑0.5～4ml，置25ml量瓶中取樣5～20μl流動(dòng)相0.01～0.03mol/L磷酸氫二鈉-乙腈(50～100∶8～15)測(cè)定波長(zhǎng)251nm～270nm結(jié)果吸光度響應(yīng)值不明顯綜合評(píng)價(jià)不符合規(guī)定因此，本發(fā)明含量測(cè)定高效液相色譜法選用配制方法二。
三、含量測(cè)定的方法學(xué)考察1、儀器與試藥儀器高效液相色譜儀島津LC-10A、SPD-10A檢測(cè)器、Class-vp色譜工作站。
柱子大連依利特色譜柱(柱號(hào)2105219)試藥甲醇(HPLC級(jí))，乙腈(色譜純)對(duì)照品梔子苷對(duì)照品為中國藥品生物制品檢定所提供(供含量測(cè)定用)。
2、色譜條件0.02mol/L磷酸氫二鈉溶液-乙腈(88∶12)為流動(dòng)相，檢測(cè)波長(zhǎng)240nm，在本實(shí)驗(yàn)選定的條件下，按梔子苷峰計(jì)算，理論塔板(N)為2400以上，樣品中梔子與其它組分分離度符合要求，陰性樣品圖譜在梔子苷峰位置處無假陽性峰。
3、線性關(guān)系考察精密吸取梔子苷對(duì)照品溶液(0.102mg/ml)各4、8、12、16、20μl，注入色譜儀，以進(jìn)樣量(Xμg)對(duì)峰面積(YmAU.s)回歸計(jì)算。
表1 梔子苷標(biāo)準(zhǔn)曲線數(shù)據(jù)

線性方程y＝14425.49x-191.4，r＝0.9999，結(jié)果表明梔子苷在0.408μg～2.04μg范圍內(nèi)具有良好線性關(guān)系。
4、精密度試驗(yàn)取梔子苷對(duì)照品溶液10μl，各進(jìn)樣5次，記錄色譜圖，結(jié)果見表2，相對(duì)標(biāo)準(zhǔn)偏差(RSD)為0.37％?？煽闯鼍芏攘己?。
表2 精密度試驗(yàn)

5、重復(fù)性試驗(yàn)按擬定的含量測(cè)定方法，取同一批號(hào)(批號(hào)20040201)樣品各5份約0.5g精密稱定，置具塞錐形瓶中，精密加入甲醇25ml，稱定重量，超聲處理40分鐘，放冷，再稱定重量，用甲醇補(bǔ)足減失的重量，濾過，取續(xù)濾液，用微孔濾膜(0.45μm)濾過，取續(xù)濾液，即得。每次進(jìn)樣量為10μl，測(cè)得峰面積值并計(jì)算含量，結(jié)果見表3。梔子苷平均含量為2.13mg，RSD為1.28％；結(jié)果表明重復(fù)性良好。
表3 重復(fù)性試驗(yàn)(批號(hào)20040201)

6、回收率試驗(yàn)(1)梔子苷精密稱取與重復(fù)性實(shí)驗(yàn)同一批號(hào)(批號(hào)20040201)的樣品各9份，約0.5g，分別加入梔子苷對(duì)照品溶液(0.102mg/ml)2ml、2.5ml、3ml，依法處理，進(jìn)樣，記錄色譜，計(jì)算回收率，結(jié)果見表4。
表4 梔子苷加樣回收試驗(yàn)

7.樣品含量測(cè)定本測(cè)定采用法定的外標(biāo)法(《中國藥典》2005年版一部附錄VI D)計(jì)算含量。
表5 以顆粒劑為例每方丹梔10批樣品含量測(cè)定


經(jīng)過對(duì)10批樣品的含量進(jìn)行測(cè)定(表5)，結(jié)果表明本含量測(cè)定法具有回收率好，精密度、重現(xiàn)性高，樣品處理簡(jiǎn)便，分析快速的優(yōu)點(diǎn)，符合《中國藥典》2005年版一部附錄VID高效液相色譜法的各項(xiàng)規(guī)定。
測(cè)得10批樣品每克制劑的梔子苷標(biāo)示含量其平均值為1.98mg，故暫定每10g制劑含梔子苷應(yīng)不低于15mg。
其它制劑含量測(cè)定結(jié)果為

與現(xiàn)有技術(shù)相比，本發(fā)明質(zhì)量控制方法專屬性強(qiáng)，精密度高，重現(xiàn)性好，回收率高，樣品處理簡(jiǎn)便，分析速度快，測(cè)量結(jié)果準(zhǔn)確，達(dá)到了有效控制藥物質(zhì)量的目的，從而確保藥物的療效。
具體實(shí)施例方式實(shí)施例1膠囊劑的質(zhì)量控制性狀其內(nèi)容物為淺棕色至棕褐色。
鑒別(1)取本制劑1g，研細(xì)，加甲醇2ml，超聲處理20分鐘，濾過，濾液作為供試品溶液。另取鹽酸小檗堿對(duì)照品，加甲醇制成每1ml含2.0mg的溶液，作為對(duì)照品溶液。照薄層色譜法(中國藥典2005年版一部附錄VI B)試驗(yàn)，吸取上述供試品溶液10μl、對(duì)照品溶液0.5μl，分別點(diǎn)于同一硅膠GF254薄層板上，以正丁醇-醋酸-水(2∶1∶0.5)為展開劑，展開，取出，晾干；置紫外光燈(365nm)下檢視，供試品色譜中，在與對(duì)照品色譜相應(yīng)的位置上，顯相同顏色的熒光斑點(diǎn)。
(2)取本制劑1g，研細(xì)，加甲醇2ml，超聲處理60分鐘，濾過，濾液作為供試品溶液。取原兒茶醛對(duì)照品，加甲醇制成每1ml含0.5mg的溶液，作為對(duì)照品溶液。照薄層色譜法(中國藥典2005年版一部附錄VI B)試驗(yàn)，吸取上述供試品溶液10μl、對(duì)照品溶液2μl，分別點(diǎn)于同一硅膠G薄層板上，以甲酸乙酯-甲苯-甲酸(2∶6∶1)為展開劑，展開，取出，晾干；噴以二硝基苯肼試液，供試品色譜中，在與對(duì)照品色譜相應(yīng)的位置上，顯相同顏色的斑點(diǎn)。
(3)取本制劑2g，研細(xì)，加甲醇2ml，超聲處理60分鐘，濾過，濾液作為供試品溶液。取苦參堿對(duì)照品，加甲醇制成每1ml含0.2mg的溶液，作為對(duì)照品溶液。照薄層色譜法(中國藥典2005年版一部附錄VI B)試驗(yàn)，吸取上述供試品溶液8μl、對(duì)照品溶液2μl，分別點(diǎn)于同一硅膠G薄層板上，以丙酮-甲苯-醋酸乙酯-濃氨試液(3∶2∶1∶0.1)為展開劑，展開，取出，晾干，噴以稀碘化鉍鉀試液，供試品色譜中，在與對(duì)照品色譜相應(yīng)的位置上，顯相同顏色的斑點(diǎn)。
(4)取本制劑2g，研細(xì)，加甲醇20ml，超聲處理30分鐘，濾過，濾液濃縮至2ml，作為供試品溶液。另取水飛薊素對(duì)照品，加甲醇制成每1ml含0.5mg的溶液，作為對(duì)照品溶液。照薄層色譜法(中國藥典2005年版一部附錄VI B)試驗(yàn)，吸取上述供試品溶液10μl、對(duì)照品溶液6μl，分別點(diǎn)于同一硅膠GF254薄層版上，以醋酸乙酯-甲醇-水(10∶2∶0.05)為展開劑，展開，取出，晾干，置紫外光燈(254nm)下檢視。供試品色譜中，在與對(duì)照品色譜相應(yīng)的位置上，顯相同顏色的斑點(diǎn)。
檢查應(yīng)符合膠囊劑項(xiàng)下有關(guān)的各項(xiàng)規(guī)定(中國藥典2005年版一部附錄IL)。
含量測(cè)定色譜條件與系統(tǒng)適用性試驗(yàn)用十八烷基硅烷鍵合硅膠為填充劑，以0.01mol/L磷酸氫二鈉-乙腈(70∶10)為流動(dòng)相，檢測(cè)波長(zhǎng)240nm，理論塔板數(shù)以梔子苷峰計(jì)算不低于2000。
對(duì)照品溶液的制備精密稱取在90℃干燥1小時(shí)的梔子苷對(duì)照品適量，加甲醇制成每1ml含0.05mg的溶液，即得。
供試品溶液的制備取本制劑內(nèi)容物0.6g，精密稱定，置具塞錐形瓶中，精密加入甲醇30ml，稱定重量，超聲處理20分鐘，放冷，再稱定重量，用甲醇補(bǔ)足減失的重量，濾過，取續(xù)濾液，用微孔濾膜(0.45μm)濾過，取濾液，即得。
測(cè)定法分別精密吸取對(duì)照品溶液與供試品溶液各5μl注入液相色譜儀，測(cè)定，即得。
本制劑每粒含梔子以梔子苷(C17H14O10)計(jì)，不得少于2mg。
實(shí)施例2片劑的質(zhì)量控制性狀本制劑為棕色片。
鑒別(1)取本制劑3g，研細(xì)，加甲醇8ml，超聲處理60分鐘，濾過，濾液作為供試品溶液。另取鹽酸小檗堿對(duì)照品，加甲醇制成每1ml含1.5mg的溶液，作為對(duì)照品溶液。照薄層色譜法(中國藥典2005年版一部附錄VI B)試驗(yàn)，吸取上述供試品溶液7μl、對(duì)照品溶液1.0μl，分別點(diǎn)于同一硅膠G薄層板上，以正丁醇-醋酸-水(4∶0.8∶1)為展開劑，展開，取出，晾干；置紫外光燈(365nm)下檢視，供試品色譜中，在與對(duì)照品色譜相應(yīng)的位置上，顯相同顏色的熒光斑點(diǎn)。
(2)取本制劑2g，研細(xì)，加甲醇3ml，超聲處理40分鐘，濾過，濾液作為供試品溶液。取原兒茶醛對(duì)照品，加甲醇制成每1ml含1.0mg的溶液，作為對(duì)照品溶液。照薄層色譜法(中國藥典2005年版一部附錄VI B)試驗(yàn)，吸取上述供試品溶液15μl、對(duì)照品溶液3μl，分別點(diǎn)于同一硅膠G薄層板上，以甲酸乙酯-甲苯-甲酸(6∶10∶1.5)為展開劑，展開，取出，晾干；噴以二硝基苯肼試液，供試品色譜中，在與對(duì)照品色譜相應(yīng)的位置上，顯相同顏色的斑點(diǎn)。
(3)取本制劑3g，研細(xì)，加甲醇8ml，超聲處理40分鐘，濾過，濾液作為供試品溶液。取苦參堿對(duì)照品，加甲醇制成每1ml含0.3mg的溶液，作為對(duì)照品溶液。照薄層色譜法(中國藥典2005年版一部附錄VI B)試驗(yàn)，吸取上述供試品溶液10μl、對(duì)照品溶液3μl，分別點(diǎn)于同一硅膠G薄層板上，以丙酮-甲苯-醋酸乙酯-濃氨試液(3∶3∶0.5∶0.2)為展開劑，展開，取出，晾干，噴以稀碘化鉍鉀試液，供試品色譜中，在與對(duì)照品色譜相應(yīng)的位置上，顯相同顏色的斑點(diǎn)。
(4)取本制劑1g，研細(xì)，加甲醇30ml，超聲處理60分鐘，濾過，濾液濃縮至8ml，作為供試品溶液。另取水飛薊素對(duì)照品，加甲醇制成每1ml含0.8mg的溶液，作為對(duì)照品溶液。照薄層色譜法(中國藥典2005年版一部附錄VI B)試驗(yàn)，吸取上述供試品溶液15μl、對(duì)照品溶液8μl，分別點(diǎn)于同一硅膠GF254薄層板上，以醋酸乙酯-甲醇-水(10∶2∶0.2)為展開劑，展開，取出，晾干，置紫外光燈(254nm)下檢視。供試品色譜中，在與對(duì)照品色譜相應(yīng)的位置上，顯相同顏色的斑點(diǎn)。
檢查應(yīng)符合片劑項(xiàng)下有關(guān)的各項(xiàng)規(guī)定(中國藥典2005年版一部附錄I D)。
含量測(cè)定色譜條件與系統(tǒng)適用性試驗(yàn)用十八烷基硅烷鍵合硅膠為填充劑，以0.03mol/L磷酸氫二鈉-乙腈(75∶8)為流動(dòng)相，檢測(cè)波長(zhǎng)230nm，理論塔板數(shù)以梔子苷峰計(jì)算不低于2000。
對(duì)照品溶液的制備精密稱取在105℃干燥2小時(shí)的梔子苷對(duì)照品適量，加甲醇制成每1ml含0.1mg的溶液，即得。
供試品溶液的制備取本制劑研細(xì)，取0.8g，精密稱定，置具塞錐形瓶中，精密加入甲醇50ml，稱定重量，超聲處理40分鐘，放冷，再稱定重量，用甲醇補(bǔ)足減失的重量，濾過，取續(xù)濾液，用微孔濾膜(0.45μm)濾過，取濾液，即得。
測(cè)定法分別精密吸取對(duì)照品溶液與供試品溶液各15μl注入液相色譜儀，測(cè)定，即得。
本制劑每片含梔子以梔子苷(C17H14O10)計(jì)，不得少于1.0mg。
實(shí)施例3分散片的質(zhì)量控制性狀本制劑為棕色片。
鑒別(1)取本制劑2g，研細(xì)，加甲醇6ml，超聲處理40分鐘，濾過，濾液作為供試品溶液。另取鹽酸小檗堿對(duì)照品，加甲醇制成每1ml含1.0mg的溶液，作為對(duì)照品溶液。照薄層色譜法(中國藥典2005年版一部附錄VI B)試驗(yàn)，吸取上述供試品溶液5μl、對(duì)照品溶液1.5μl，分別點(diǎn)于同一硅膠G薄層板上，以正丁醇-醋酸-水(5∶1.5∶1.5)為展開劑，展開，取出，晾干；置紫外光燈(365nm)下檢視，供試品色譜中，在與對(duì)照品色譜相應(yīng)的位置上，顯相同顏色的熒光斑點(diǎn)。
(2)取本制劑3g，研細(xì)，加甲醇8ml，超聲處理20分鐘，濾過，濾液作為供試品溶液。取原兒茶醛對(duì)照品，加甲醇制成每1ml含1.5mg的溶液，作為對(duì)照品溶液。照薄層色譜法(中國藥典2005年版一部附錄VI B)試驗(yàn)，吸取上述供試品溶液5μl、對(duì)照品溶液1μl，分別點(diǎn)于同一硅膠G薄層板上，以甲酸乙酯-甲苯-甲酸(5∶8∶1)為展開劑，展開，取出，晾干；噴以二硝基苯肼試液，供試品色譜中，在與對(duì)照品色譜相應(yīng)的位置上，顯相同顏色的斑點(diǎn)。
(3)取本制劑1g，研細(xì)，加甲醇6ml，超聲處理20分鐘，濾過，濾液作為供試品溶液。取苦參堿對(duì)照品，加甲醇制成每1ml含0.1mg的溶液，作為對(duì)照品溶液。照薄層色譜法(中國藥典2005年版一部附錄VI B)試驗(yàn)，吸取上述供試品溶液5μl、對(duì)照品溶液1μl，分別點(diǎn)于同一硅膠G薄層板上，以丙酮-甲苯-醋酸乙酯-濃氨試液(5∶5∶1.5∶0.2)為展開劑，展開，取出，晾干，噴以稀碘化鉍鉀試液，供試品色譜中，在與對(duì)照品色譜相應(yīng)的位置上，顯相同顏色的斑點(diǎn)。
(4)取本制劑3g，研細(xì)，加甲醇10ml，超聲處理20分鐘，濾過，濾液濃縮至6ml，作為供試品溶液。另取水飛薊素對(duì)照品，加甲醇制成每1ml含0.2mg的溶液，作為對(duì)照品溶液。照薄層色譜法(中國藥典2005年版一部附錄VI B)試驗(yàn)，吸取上述供試品溶液5μl、對(duì)照品溶液2μl，分別點(diǎn)于同一硅膠GF254薄層版上，以醋酸乙酯-甲醇-水(10∶1∶0.05)為展開劑，展開，取出，晾干，置紫外光燈(254nm)下檢視。供試品色譜中，在與對(duì)照品色譜相應(yīng)的位置上，顯相同顏色的斑點(diǎn)。
檢查應(yīng)符合片劑項(xiàng)下有關(guān)的各項(xiàng)規(guī)定(中國藥典2005年版一部附錄ID)。
含量測(cè)定色譜條件與系統(tǒng)適用性試驗(yàn)用十八烷基硅烷鍵合硅膠為填充劑，以0.02mol/L磷酸氫二鈉-乙腈(80∶9)為流動(dòng)相，檢測(cè)波長(zhǎng)250nm，理論塔板數(shù)以梔子苷峰計(jì)算不低于2000。
對(duì)照品溶液的制備精密稱取在100℃干燥3小時(shí)的梔子苷對(duì)照品適量，加甲醇制成每1ml含0.2mg的溶液，即得。
供試品溶液的制備取本制劑研細(xì)，取0.2g，精密稱定，置具塞錐形瓶中，精密加入甲醇10ml，稱定重量，超聲處理60分鐘，放冷，再稱定重量，用甲醇補(bǔ)足減失的重量，濾過，取續(xù)濾液，用微孔濾膜(0.45μm)濾過，取濾液，即得。
測(cè)定法分別精密吸取對(duì)照品溶液與供試品溶液各10μl注入液相色譜儀，測(cè)定，即得。
本制劑每片含梔子以梔子苷(C17H14O10)計(jì)，不得少于1.0mg。
實(shí)施例4軟膠囊劑的質(zhì)量控制性狀其內(nèi)容物為淺棕色至棕褐色。
鑒別(1)取本制劑3g，研細(xì)，加甲醇4ml，超聲處理60分鐘，濾過，濾液作為供試品溶液。另取鹽酸小檗堿對(duì)照品，加甲醇制成每1ml含0.5mg的溶液，作為對(duì)照品溶液。照薄層色譜法(中國藥典2005年版一部附錄VI B)試驗(yàn)，吸取上述供試品溶液8μl、對(duì)照品溶液1.5μl，分別點(diǎn)于同一硅膠G薄層板上，以正丁醇-醋酸-水(5∶1.5∶0.5)為展開劑，展開，取出，晾干；置紫外光燈(365nm)下檢視，供試品色譜中，在與對(duì)照品色譜相應(yīng)的位置上，顯相同顏色的熒光斑點(diǎn)。
(2)取本制劑3g，研細(xì)，加甲醇5ml，超聲處理60分鐘，濾過，濾液作為供試品溶液。取原兒茶醛對(duì)照品，加甲醇制成每1ml含1.5mg的溶液，作為對(duì)照品溶液。照薄層色譜法(中國藥典2005年版一部附錄VI B)試驗(yàn)，吸取上述供試品溶液10μl、對(duì)照品溶液2μl，分別點(diǎn)于同一硅膠G薄層板上，以甲酸乙酯-甲苯-甲酸(2∶10∶0.5)為展開劑，展開，取出，晾干；噴以二硝基苯肼試液，供試品色譜中，在與對(duì)照品色譜相應(yīng)的位置上，顯相同顏色的斑點(diǎn)。
(3)取本制劑3g，研細(xì)，加甲醇2ml，超聲處理30分鐘，濾過，濾液作為供試品溶液。取苦參堿對(duì)照品，加甲醇制成每1ml含0.2mg的溶液，作為對(duì)照品溶液。照薄層色譜法(中國藥典2005年版一部附錄VI B)試驗(yàn)，吸取上述供試品溶液15μl、對(duì)照品溶液1μl，分別點(diǎn)于同一硅膠G薄層板上，以丙酮-甲苯-醋酸乙酯-濃氨試液(1∶5∶0.5∶0.2)為展開劑，展開，取出，晾干，噴以稀碘化鉍鉀試液，供試品色譜中，在與對(duì)照品色譜相應(yīng)的位置上，顯相同顏色的斑點(diǎn)。
(4)取本制劑5g，研細(xì)，加甲醇30ml，超聲處理50分鐘，濾過，濾液濃縮至5ml，作為供試品溶液。另取水飛薊素對(duì)照品，加甲醇制成每1ml含0.6mg的溶液，作為對(duì)照品溶液。照薄層色譜法(中國藥典2005年版一部附錄VI B)試驗(yàn)，吸取上述供試品溶液10μl、對(duì)照品溶液4μl，分別點(diǎn)于同一硅膠GF254薄層版上，以醋酸乙酯-甲醇-水(20∶l∶0.2)為展開劑，展開，取出，晾干，置紫外光燈(254nm)下檢視。供試品色譜中，在與對(duì)照品色譜相應(yīng)的位置上，顯相同顏色的斑點(diǎn)。
檢查應(yīng)符合膠囊劑項(xiàng)下有關(guān)的各項(xiàng)規(guī)定(中國藥典2005年版一部附錄I L)。
含量測(cè)定色譜條件與系統(tǒng)適用性試驗(yàn)用十八烷基硅烷鍵合硅膠為填充劑，以0.02mol/L磷酸氫二鈉-乙腈(50∶15)為流動(dòng)相，檢測(cè)波長(zhǎng)244nm，理論塔板數(shù)以梔子苷峰計(jì)算不低于2000。
對(duì)照品溶液的制備精密稱取在80℃干燥3小時(shí)的梔子苷對(duì)照品適量，加甲醇制成每1ml含0.05mg的溶液，即得。
供試品溶液的制備取本制劑內(nèi)容物0.4g，精密稱定，置具塞錐形瓶中，精密加入甲醇40ml，稱定重量，超聲處理50分鐘，放冷，再稱定重量，用甲醇補(bǔ)足減失的重量，濾過，取續(xù)濾液，用微孔濾膜(0.45μm)濾過，取濾液，即得。
測(cè)定法分別精密吸取對(duì)照品溶液與供試品溶液各5μl注入液相色譜儀，測(cè)定，即得。
本制劑每粒含梔子以梔子苷(C17H14O10)計(jì)，不得少于2mg。
實(shí)施例5顆粒劑的質(zhì)量控制性狀本品為棕色顆粒。
鑒別(1)取本制劑2g，研細(xì)，加甲醇5ml，超聲處理40分鐘，濾過，濾液作為供試品溶液。另取鹽酸小檗堿對(duì)照品，加甲醇制成每1ml含1.0mg的溶液，作為對(duì)照品溶液。照薄層色譜法(中國藥典2005年版一部附錄VI B)試驗(yàn)，吸取上述供試品溶液6μl、對(duì)照品溶液0.5μl，分別點(diǎn)于同一硅膠G薄層板上，以正丁醇-醋酸-水(1∶1.5∶0.5)為展開劑，展開，取出，晾干；置紫外光燈(365nm)下檢視，供試品色譜中，在與對(duì)照品色譜相應(yīng)的位置上，顯相同顏色的熒光斑點(diǎn)。
(2)取本制劑2g，研細(xì)，加甲醇6ml，超聲處理30分鐘，濾過，濾液作為供試品溶液。取原兒茶醛對(duì)照品，加甲醇制成每1ml含1.0mg的溶液，作為對(duì)照品溶液。照薄層色譜法(中國藥典2005年版一部附錄VI B)試驗(yàn)，吸取上述供試品溶液15μl、對(duì)照品溶液1μl，分別點(diǎn)于同一硅膠G薄層板上，以甲酸乙酯-甲苯-甲酸(6∶5∶1.5)為展開劑，展開，取出，晾干；噴以二硝基苯肼試液，供試品色譜中，在與對(duì)照品色譜相應(yīng)的位置上，顯相同顏色的斑點(diǎn)。
(3)取本制劑1g，研細(xì)，加甲醇4ml，超聲處理20分鐘，濾過，濾液作為供試品溶液。取苦參堿對(duì)照品，加甲醇制成每1ml含0.3mg的溶液，作為對(duì)照品溶液。照薄層色譜法(中國藥典2005年版一部附錄VI B)試驗(yàn)，吸取上述供試品溶液15μl、對(duì)照品溶液3μl，分別點(diǎn)于同一硅膠G薄層板上，以丙酮-甲苯-醋酸乙酯-濃氨試液(5∶1∶1.5∶0.05)為展開劑，展開，取出，晾干，噴以稀碘化鉍鉀試液，供試品色譜中，在與對(duì)照品色譜相應(yīng)的位置上，顯相同顏色的斑點(diǎn)。
(4)取本制劑3g，研細(xì)，加甲醇20ml，超聲處理40分鐘，濾過，濾液濃縮至4ml，作為供試品溶液。另取水飛薊素對(duì)照品，加甲醇制成每1ml含0.7mg的溶液，作為對(duì)照品溶液。照薄層色譜法(中國藥典2005年版一部附錄VI B)試驗(yàn)，吸取上述供試品溶液15μl、對(duì)照品溶液8μl，分別點(diǎn)于同一硅膠GF254薄層版上，以醋酸乙酯-甲醇-水(10∶3∶0.05)為展開劑，展開，取出，晾干，置紫外光燈(254nm)下檢視。供試品色譜中，在與對(duì)照品色譜相應(yīng)的位置上，顯相同顏色的斑點(diǎn)。
檢查應(yīng)符合顆粒劑項(xiàng)下有關(guān)的各項(xiàng)規(guī)定(中國藥典2005年版一部附錄IC)。
含量測(cè)定色譜條件與系統(tǒng)適用性試驗(yàn)用十八烷基硅烷鍵合硅膠為填充劑，以0.03mol/L磷酸氫二鈉-乙腈(100∶8)為流動(dòng)相，檢測(cè)波長(zhǎng)240nm，理論塔板數(shù)以梔子苷峰計(jì)算不低于2000。
對(duì)照品溶液的制備精密稱取在120℃干燥1小時(shí)的梔子苷對(duì)照品適量，加甲醇制成每1ml含0.2mg的溶液，即得。
供試品溶液的制備取本制劑研細(xì)，取0.2g，精密稱定，置具塞錐形瓶中，精密加入甲醇40ml，稱定重量，超聲處理20分鐘，放冷，再稱定重量，用甲醇補(bǔ)足減失的重量，濾過，取續(xù)濾液，用微孔濾膜(0.45μm)濾過，取濾液，即得。
測(cè)定法分別精密吸取對(duì)照品溶液與供試品溶液各8μl注入液相色譜儀，測(cè)定，即得。
本制劑每袋含梔子以梔子苷(C17H14O10)計(jì)，不得少于10mg。
實(shí)施例6散劑的質(zhì)量控制性狀本制劑為棕色細(xì)顆粒。
鑒別(1)取本制劑1g，研細(xì)，加甲醇3ml，超聲處理50分鐘，濾過，濾液作為供試品溶液。另取鹽酸小檗堿對(duì)照品，加甲醇制成每1ml含2.0mg的溶液，作為對(duì)照品溶液。照薄層色譜法(中國藥典2005年版一部附錄VI B)試驗(yàn)，吸取上述供試品溶液10μ1、對(duì)照品溶液1.0μl，分別點(diǎn)于同一硅膠G薄層板上，以正丁醇-醋酸-水(5∶0.5∶1.5)為展開劑，展開，取出，晾干；置紫外光燈(365nm)下檢視，供試品色譜中，在與對(duì)照品色譜相應(yīng)的位置上，顯相同顏色的熒光斑點(diǎn)。
(2)取本制劑1g，研細(xì)，加甲醇8ml，超聲處理50分鐘，濾過，濾液作為供試品溶液。取原兒茶醛對(duì)照品，加甲醇制成每1ml含0.5mg的溶液，作為對(duì)照品溶液。照薄層色譜法(中國藥典2005年版一部附錄VI B)試驗(yàn)，吸取上述供試品溶液5μl、對(duì)照品溶液3μl，分別點(diǎn)于同一硅膠G薄層板上，以甲酸乙酯-甲苯-甲酸(2∶5∶0.5)為展開劑，展開，取出，晾干；噴以二硝基苯肼試液，供試品色譜中，在與對(duì)照品色譜相應(yīng)的位置上，顯相同顏色的斑點(diǎn)。
(3)取本制劑2g，研細(xì)，加甲醇8ml，超聲處理50分鐘，濾過，濾液作為供試品溶液。取苦參堿對(duì)照品，加甲醇制成每1ml含0.1mg的溶液，作為對(duì)照品溶液。照薄層色譜法(中國藥典2005年版一部附錄VI B)試驗(yàn)，吸取上述供試品溶液10μl、對(duì)照品溶液2μl，分別點(diǎn)于同一硅膠G薄層板上，以丙酮-甲苯-醋酸乙酯-濃氨試液(3∶3∶1∶0.1)為展開劑，展開，取出，晾干，噴以稀碘化鉍鉀試液，供試品色譜中，在與對(duì)照品色譜相應(yīng)的位置上，顯相同顏色的斑點(diǎn)。
(4)取本制劑5g，研細(xì)，加甲醇30ml，超聲處理20分鐘，濾過，濾液濃縮至2ml，作為供試品溶液。另取水飛薊素對(duì)照品，加甲醇制成每1ml含0.4mg的溶液，作為對(duì)照品溶液。照薄層色譜法(中國藥典2005年版-部附錄VI B)試驗(yàn)，吸取上述供試品溶液5μl、對(duì)照品溶液5μl，分別點(diǎn)于同一硅膠GF254薄層版上，以醋酸乙酯-甲醇-水(20∶3∶0.2)為展開劑，展開，取出，晾干，置紫外光燈(254nm)下檢視。供試品色譜中，在與對(duì)照品色譜相應(yīng)的位置上，顯相同顏色的斑點(diǎn)。
檢查應(yīng)符合散劑項(xiàng)下有關(guān)的各項(xiàng)規(guī)定(中國藥典2005年版一部附錄IB)。
含量測(cè)定色譜條件與系統(tǒng)適用性試驗(yàn)用十八烷基硅烷鍵合硅膠為填充劑，以0.01mol/L磷酸氫二鈉-乙腈(60∶8)為流動(dòng)相，檢測(cè)波長(zhǎng)230nm，理論塔板數(shù)以梔子苷峰計(jì)算不低于2000。
對(duì)照品溶液的制備精密稱取在110℃干燥2小時(shí)的梔子苷對(duì)照品適量，加甲醇制成每1ml含0.1mg的溶液，即得。
供試品溶液的制備取本制劑0.3g，精密稱定，置具塞錐形瓶中，精密加入甲醇20ml，稱定重量，超聲處理30分鐘，放冷，再稱定重量，用甲醇補(bǔ)足減失的重量，濾過，取續(xù)濾液，用微孔濾膜(0.45μm)濾過，取濾液，即得。
測(cè)定法分別精密吸取對(duì)照品溶液與供試品溶液各10μl注入液相色譜儀，測(cè)定，即得。
本制劑每袋含梔子以梔子苷(C17H14O10)計(jì)，不得少于5mg。
實(shí)施例7微丸劑的質(zhì)量控制性狀本制劑為棕色微丸。
鑒別(1)取本制劑3g，研細(xì)，加甲醇7ml，超聲處理50分鐘，濾過，濾液作為供試品溶液。另取鹽酸小檗堿對(duì)照品，加甲醇制成每1ml含1.0mg的溶液，作為對(duì)照品溶液。照薄層色譜法(中國藥典2005年版一部附錄VI B)試驗(yàn)，吸取上述供試品溶液9μl、對(duì)照品溶液0.5μl，分別點(diǎn)于同一硅膠G薄層板上，以正丁醇-醋酸-水(1∶1.5∶1.5)為展開劑，展開，取出，晾干；置紫外光燈(365nm)下檢視，供試品色譜中，在與對(duì)照品色譜相應(yīng)的位置上，顯相同顏色的熒光斑點(diǎn)。
(2)取本制劑1g，研細(xì)，加甲醇4ml，超聲處理40分鐘，濾過，濾液作為供試品溶液。取原兒茶醛對(duì)照品，加甲醇制成每1ml含0.5mg的溶液，作為對(duì)照品溶液。照薄層色譜法(中國藥典2005年版一部附錄VI B)試驗(yàn)，吸取上述供試品溶液12μl、對(duì)照品溶液2μl，分別點(diǎn)于同一硅膠G薄層板上，以甲酸乙酯-甲苯-甲酸(4∶5∶1.5)為展開劑，展開，取出，晾干；噴以二硝基苯肼試液，供試品色譜中，在與對(duì)照品色譜相應(yīng)的位置上，顯相同顏色的斑點(diǎn)。
(3)取本制劑2g，研細(xì)，加甲醇5ml，超聲處理40分鐘，濾過，濾液作為供試品溶液。取苦參堿對(duì)照品，加甲醇制成每1ml含0.3mg的溶液，作為對(duì)照品溶液。照薄層色譜法(中國藥典2005年版一部附錄VI B)試驗(yàn)，吸取上述供試品溶液12μl、對(duì)照品溶液3μl，分別點(diǎn)于同一硅膠G薄層板上，以丙酮-甲苯-醋酸乙酯-濃氨試液(4∶4∶1.5∶0.2)為展開劑，展開，取出，晾干，噴以稀碘化鉍鉀試液，供試品色譜中，在與對(duì)照品色譜相應(yīng)的位置上，顯相同顏色的斑點(diǎn)。
(4)取本制劑2g，研細(xì)，加甲醇10ml，超聲處理30分鐘，濾過，濾液濃縮至3ml，作為供試品溶液。另取水飛薊素對(duì)照品，加甲醇制成每1ml含0.3mg的溶液，作為對(duì)照品溶液。照薄層色譜法(中國藥典2005年版一部附錄VI B)試驗(yàn)，吸取上述供試品溶液12μl、對(duì)照品溶液3μl，分別點(diǎn)于同一硅膠GF254薄層版上，以醋酸乙酯-甲醇-水(15∶2∶0.1)為展開劑，展開，取出，晾干，置紫外光燈(254nm)下檢視。供試品色譜中，在與對(duì)照品色譜相應(yīng)的位置上，顯相同顏色的斑點(diǎn)。
檢查應(yīng)符合丸劑項(xiàng)下有關(guān)的各項(xiàng)規(guī)定(中國藥典2005年版一部附錄IA)。
含量測(cè)定色譜條件與系統(tǒng)適用性試驗(yàn)用十八烷基硅烷鍵合硅膠為填充劑，以0.03mol/L磷酸氫二鈉-乙腈(100∶15)為流動(dòng)相，檢測(cè)波長(zhǎng)245nm，理論塔板數(shù)以梔子苷峰計(jì)算不低于2000。
對(duì)照品溶液的制備精密稱取在110℃干燥3小時(shí)的梔子苷對(duì)照品適量，加甲醇制成每1ml含0.2mg的溶液，即得。
供試品溶液的制備取本制劑內(nèi)容物0.5g，精密稱定，置具塞錐形瓶中，精密加入甲醇50ml，稱定重量，超聲處理30分鐘，放冷，再稱定重量，用甲醇補(bǔ)足減失的重量，濾過，取續(xù)濾液，用微孔濾膜(0.45μm)濾過，取濾液，即得。
測(cè)定法分別精密吸取對(duì)照品溶液與供試品溶液各12μl注入液相色譜儀，測(cè)定，即得。
本制劑每袋含梔子以梔子苷(C17H14O10)計(jì)，不得少于5mg。
實(shí)施例8滴丸劑的質(zhì)量控制性狀本制劑為棕色滴丸。
鑒別(1)取本制劑1g，研細(xì)，加甲醇4ml，超聲處理30分鐘，濾過，濾液作為供試品溶液。另取鹽酸小檗堿對(duì)照品，加甲醇制成每1ml含2.0mg的溶液，作為對(duì)照品溶液。照薄層色譜法(中國藥典2005年版一部附錄VI B)試驗(yàn)，吸取上述供試品溶液5μl、對(duì)照品溶液1.5μl，分別點(diǎn)于同一硅膠G薄層板上，以正丁醇-醋酸-水(5∶1∶1)為展開劑，展開，取出，晾干；置紫外光燈(365nm)下檢視，供試品色譜中，在與對(duì)照品色譜相應(yīng)的位置上，顯相同顏色的熒光斑點(diǎn)。
(2)取本制劑3g，研細(xì)，加甲醇7ml，超聲處理50分鐘，濾過，濾液作為供試品溶液。取原兒茶醛對(duì)照品，加甲醇制成每1ml含1.0mg的溶液，作為對(duì)照品溶液。照薄層色譜法(中國藥典2005年版一部附錄VI B)試驗(yàn)，吸取上述供試品溶液8μl、對(duì)照品溶液1μl，分別點(diǎn)于同一硅膠G薄層板上，以甲酸乙酯-甲苯-甲酸(3∶6∶1)為展開劑，展開，取出，晾干；噴以二硝基苯肼試液，供試品色譜中，在與對(duì)照品色譜相應(yīng)的位置上，顯相同顏色的斑點(diǎn)。
(3)取本制劑1g，研細(xì)，加甲醇3ml，超聲處理50分鐘，濾過，濾液作為供試品溶液。取苦參堿對(duì)照品，加甲醇制成每1ml含0.1mg的溶液，作為對(duì)照品溶液。照薄層色譜法(中國藥典2005年版一部附錄VI B)試驗(yàn)，吸取上述供試品溶液5μl、對(duì)照品溶液1μl，分別點(diǎn)于同一硅膠G薄層板上，以丙酮-甲苯-醋酸乙酯-濃氨試液(5∶5∶0.5∶0.1)為展開劑，展開，取出，晾干，噴以稀碘化鉍鉀試液，供試品色譜中，在與對(duì)照品色譜相應(yīng)的位置上，顯相同顏色的斑點(diǎn)。
(4)取本制劑4g，研細(xì)，加甲醇20ml，超聲處理40分鐘，濾過，濾液濃縮至7ml，作為供試品溶液。另取水飛薊素對(duì)照品，加甲醇制成每1ml含0.5mg的溶液，作為對(duì)照品溶液。照薄層色譜法(中國藥典2005年版一部附錄VI B)試驗(yàn)，吸取上述供試品溶液8μl、對(duì)照品溶液3μl，分別點(diǎn)于同一硅膠GF254薄層版上，以醋酸乙酯一甲醇一水(18∶2∶0.2)為展開劑，展開，取出，晾干，置紫外光燈(254nm)下檢視。供試品色譜中，在與對(duì)照品色譜相應(yīng)的位置上，顯相同顏色的斑點(diǎn)。
檢查應(yīng)符合滴丸劑項(xiàng)下有關(guān)的各項(xiàng)規(guī)定(中國藥典2005年版一部附錄IK)。
含量測(cè)定色譜條件與系統(tǒng)適用性試驗(yàn)用十八烷基硅烷鍵合硅膠為填充劑，以0.02mol/L磷酸氫二鈉-乙腈(90∶10)為流動(dòng)相，檢測(cè)波長(zhǎng)230nm，理論塔板數(shù)以梔子苷峰計(jì)算不低于2000。
對(duì)照品溶液的制備精密稱取在120℃干燥1小時(shí)的梔子苷對(duì)照品適量，加甲醇制成每1ml含0.1mg的溶液，即得。
供試品溶液的制備取本制劑內(nèi)容物0.7g，精密稱定，置具塞錐形瓶中，精密加入甲醇30ml，稱定重量，超聲處理60分鐘，放冷，再稱定重量，用甲醇補(bǔ)足減失的重量，濾過，取續(xù)濾液，用微孔濾膜(0.45μm)濾過，取濾液，即得。
測(cè)定法分別精密吸取對(duì)照品溶液與供試品溶液各15μl注入液相色譜儀，測(cè)定，即得。
本制劑每粒含梔子以梔子苷(C17H14O10)計(jì)，不得少于0.15mg。
實(shí)施例9口服液體制劑的質(zhì)量控制性狀本制劑為淺棕色至棕褐色液體。
鑒別(1)取本制劑2ml，研細(xì)，加甲醇6ml，超聲處理30分鐘，濾過，濾液作為供試品溶液。另取鹽酸小檗堿對(duì)照品，加甲醇制成每1ml含0.5mg的溶液，作為對(duì)照品溶液。照薄層色譜法(中國藥典2005年版一部附錄VI B)試驗(yàn)，吸取上述供試品溶液8μl、對(duì)照品溶液1.0μl，分別點(diǎn)于同一硅膠G薄層板上，以正丁醇-醋酸-水(3∶0.5∶1)為展開劑，展開，取出，晾干；置紫外光燈(365nm)下檢視，供試品色譜中，在與對(duì)照品色譜相應(yīng)的位置上，顯相同顏色的熒光斑點(diǎn)。
(2)取本制劑2ml，加甲醇6ml，超聲處理20分鐘，濾過，濾液作為供試品溶液。取原兒茶醛對(duì)照品，加甲醇制成每1ml含1.5mg的溶液，作為對(duì)照品溶液。照薄層色譜法(中國藥典2005年版一部附錄VI B)試驗(yàn)，吸取上述供試品溶液10μl、對(duì)照品溶液3μl，分別點(diǎn)于同一硅膠G薄層板上，以甲酸乙酯-甲苯-甲酸(4∶8∶1)為展開劑，展開，取出，晾干；噴以二硝基苯肼試液，供試品色譜中，在與對(duì)照品色譜相應(yīng)的位置上，顯相同顏色的斑點(diǎn)。
(3)取本制劑3ml，加甲醇7ml，超聲處理60分鐘，濾過，濾液作為供試品溶液。取苦參堿對(duì)照品，加甲醇制成每1ml含0.2mg的溶液，作為對(duì)照品溶液。照薄層色譜法(中國藥典2005年版一部附錄VI B)試驗(yàn)，吸取上述供試品溶液10μl、對(duì)照品溶液2μl，分別點(diǎn)于同一硅膠G薄層板上，以丙酮-甲苯-醋酸乙酯-濃氨試液(3∶4∶1∶0.2)為展開劑，展開，取出，晾干，噴以稀碘化鉍鉀試液，供試品色譜中，在與對(duì)照品色譜相應(yīng)的位置上，顯相同顏色的斑點(diǎn)。
(4)取本制劑4ml，加甲醇10ml，超聲處理50分鐘，濾過，濾液濃縮至6ml，作為供試品溶液。另取水飛薊素對(duì)照品，加甲醇制成每1ml含0.6mg的溶液，作為對(duì)照品溶液。照薄層色譜法(中國藥典2005年版一部附錄VI B)試驗(yàn)，吸取上述供試品溶液10μl、對(duì)照品溶液7μl，分別點(diǎn)于同一硅膠GF254薄層版上，以醋酸乙酯-甲醇-水(12∶1∶0.1)為展開劑，展開，取出，晾干，置紫外光燈(254nm)下檢視。供試品色譜中，在與對(duì)照品色譜相應(yīng)的位置上，顯相同顏色的斑點(diǎn)。
檢查應(yīng)符合糖漿劑項(xiàng)下有關(guān)的各項(xiàng)規(guī)定(中國藥典2005年版一部附錄IH)。
含量測(cè)定色譜條件與系統(tǒng)適用性試驗(yàn)用十八烷基硅烷鍵合硅膠為填充劑，以0.01mol/L磷酸氫二鈉-乙腈(60∶15)為流動(dòng)相，檢測(cè)波長(zhǎng)243nm，理論塔板數(shù)以梔子苷峰計(jì)算不低于2000。
對(duì)照品溶液的制備精密稱取在80℃干燥2小時(shí)的梔子苷對(duì)照品適量，加甲醇制成每1ml含0.05mg的溶液，即得。
供試品溶液的制備取本制劑0.4g，精密稱定，置具塞錐形瓶中，精密加入甲醇20ml，稱定重量，超聲處理50分鐘，放冷，再稱定重量，用甲醇補(bǔ)足減失的重量，濾過，取續(xù)濾液，用微孔濾膜(0.45μm)濾過，取濾液，即得。
測(cè)定法分別精密吸取對(duì)照品溶液與供試品溶液各10μl注入液相色譜儀，測(cè)定，即得。
本制劑每瓶含梔子以梔子苷(C17H14O10)計(jì)，不得少于5mg。
權(quán)利要求
1.治療急慢性肝炎的復(fù)方丹梔制劑的質(zhì)量控制方法，所述制劑包括片劑、分散片、膠囊劑、軟膠囊劑、顆粒劑、散劑、微丸劑、滴丸劑和口服液體制劑等，其特征在于所述質(zhì)量控制方法主要包括性狀、鑒別、檢查以及含量測(cè)定項(xiàng)目中的部分或全部；其中鑒別包括對(duì)制劑中黃柏、丹參、苦參和水飛薊素的薄層色譜鑒別；含量測(cè)定是對(duì)制劑中梔子所含梔子苷的含量測(cè)定。
2.按照權(quán)利要求1所述治療急慢性肝炎的復(fù)方丹梔制劑的質(zhì)量控制方法，其特征在于黃柏的鑒別方法是以鹽酸小檗堿對(duì)照品為對(duì)照，以正丁醇∶醋酸∶水＝1～5∶0.5～1.5∶0.5～1.5為展開劑的薄層色譜法。
3.按照權(quán)利要求1所述治療急慢性肝炎的復(fù)方丹梔制劑的質(zhì)量控制方法，其特征在于丹參的鑒別方法是以原兒茶醛對(duì)照品為對(duì)照，以甲酸乙酯∶甲苯∶甲酸＝2～6∶5～10∶0.5～1.5為展開劑的薄層色譜法。
4.按照權(quán)利要求1所述治療急慢性肝炎的復(fù)方丹梔制劑的質(zhì)量控制方法，其特征在于苦參的鑒別方法是以苦參堿對(duì)照品為對(duì)照，以丙酮∶甲苯∶醋酸乙酯∶濃氨試液＝1～5∶1～5∶0.5～1.5∶0.05～0.2為展開劑的薄層色譜法。
5.按照權(quán)利要求1所述治療急慢性肝炎的復(fù)方丹梔制劑的質(zhì)量控制方法，其特征在于水飛薊素的鑒別方法是以水飛薊素對(duì)照品為對(duì)照，以醋酸乙酯∶甲醇∶水＝10～20∶1～3∶0.05～0.2為展開劑的薄層色譜法。
6.按照權(quán)利要求1、2、3、4或5所述治療急慢性肝炎的復(fù)方丹梔制劑的質(zhì)量控制方法，其特征在于具體的鑒別方法包括以下項(xiàng)目的部分或全部(1)取本制劑1～3g，研細(xì)，加甲醇2～8ml，超聲處理20～60分鐘，濾過，濾液作為供試品溶液；另取鹽酸小檗堿對(duì)照品，加甲醇制成每1ml含0.5～2.0mg的溶液，作為對(duì)照品溶液；照中國藥典2005年版一部附錄VI B薄層色譜法試驗(yàn)，吸取上述供試品溶液5～10μl、對(duì)照品溶液0.5～1.5μl，分別點(diǎn)于同一硅膠GF254薄層板上，以正丁醇∶醋酸∶水＝1～5∶0.5～1.5∶0.5～1.5為展開劑，展開，取出，晾干；置365nm紫外光燈下檢視，供試品色譜中，在與對(duì)照品色譜相應(yīng)的位置上，顯相同顏色的熒光斑點(diǎn)；(2)取本制劑1～3g，研細(xì)，加甲醇2～8ml，超聲處理20～60分鐘，濾過，濾液作為供試品溶液；取原兒茶醛對(duì)照品，加甲醇制成每1ml含0.5～1.5mg的溶液，作為對(duì)照品溶液；照中國藥典2005年版一部附錄VI B薄層色譜法試驗(yàn)，吸取上述供試品溶液5～15μl、對(duì)照品溶液1～3μl，分別點(diǎn)于同一硅膠G薄層板上，以甲酸乙酯∶甲苯∶甲酸＝2～6∶5～10∶0.5～1.5為展開劑，展開，取出，晾干；噴以二硝基苯肼試液，供試品色譜中，在與對(duì)照品色譜相應(yīng)的位置上，顯相同顏色的斑點(diǎn)；(3)取本制劑1～3g，研細(xì)，加甲醇2～8ml，超聲處理20～60分鐘，濾過，濾液作為供試品溶液；取苦參堿對(duì)照品，加甲醇制成每1ml含0.1～0.3mg的溶液，作為對(duì)照品溶液；照中國藥典2005年版一部附錄VI B薄層色譜法試驗(yàn)，吸取上述供試品溶液5～15μl、對(duì)照品溶液1～3μl，分別點(diǎn)于同一硅膠G薄層板上，以丙酮∶甲苯∶醋酸乙酯∶濃氨試液＝1～5∶1～5∶0.5～1.5∶0.05～0.2為展開劑，展開，取出，晾干，噴以稀碘化鉍鉀試液，供試品色譜中，在與對(duì)照品色譜相應(yīng)的位置上，顯相同顏色的斑點(diǎn)；(4)取本制劑1～5g，研細(xì)，加甲醇10～30ml，超聲處理20～60分鐘，濾過，濾液濃縮至2～8ml，作為供試品溶液；另取水飛薊素對(duì)照品，加甲醇制成每1ml含0.2～0.8mg的溶液，作為對(duì)照品溶液；照中國藥典2005年版一部附錄VI B薄層色譜法試驗(yàn)，吸取上述供試品溶液5～15μl、對(duì)照品溶液2～8μl，分別點(diǎn)于同一硅膠GF254薄層板上，以醋酸乙酯∶甲醇∶水＝10～20∶1～3∶0.05～0.2為展開劑，展開，取出，晾干，置254nm紫外光燈下檢視；供試品色譜中，在與對(duì)照品色譜相應(yīng)的位置上，顯相同顏色的斑點(diǎn)。
7.按照權(quán)利要求1所述治療急慢性肝炎的復(fù)方丹梔制劑的質(zhì)量控制方法，其特征在于梔子中梔子苷的含量測(cè)定方法是以梔子苷對(duì)照品為對(duì)照，以0.01～0.03mol/L磷酸氫二鈉溶液∶乙腈＝50～100∶8～15為流動(dòng)相的高效液相色譜法。
8.按照權(quán)利要求1或7所述治療急慢性肝炎的復(fù)方丹梔制劑的質(zhì)量控制方法，其特征在于具體的含量測(cè)定方法為色譜條件與系統(tǒng)適用性試驗(yàn)用十八烷基硅烷鍵合硅膠為填充劑；0.01～0.03mol/L磷酸氫二鈉溶液∶乙腈＝50～100∶8～15為流動(dòng)相，檢測(cè)波長(zhǎng)230～250nm，理論塔板數(shù)以梔子苷峰計(jì)算應(yīng)不低于2000；對(duì)照品溶液的制備精密稱取在80～120℃干燥1～3小時(shí)的梔子苷對(duì)照品適量，加甲醇制成每1ml含0.05～0.2mg的溶液，即得；供試品溶液的制備取本制劑或其內(nèi)容物，研細(xì)，取0.2～0.8g，精密稱定，置具塞錐形瓶中，精密加入甲醇10～50ml，稱定重量，超聲處理20～60分鐘，放冷，再稱定重量，用甲醇補(bǔ)足減失的重量，濾過，取續(xù)濾液，用0.45μm微孔濾膜濾過，取濾液，即得；測(cè)定法分別精密吸取對(duì)照品溶液與供試品溶液各5～15μl，注入液相色譜儀，測(cè)定，即得；各制劑以相當(dāng)每日服用生藥量的成品量為單位量，每單位量含梔子苷C17H14O10不得少于30mg。
9.按照權(quán)利要求1所述治療急慢性肝炎的復(fù)方丹梔制劑的質(zhì)量控制方法，其特征在于所述質(zhì)量控制方法包括性狀其外觀或內(nèi)容物為淺棕色至棕褐色；鑒別(1)取本制劑1～3g，研細(xì)，加甲醇2～8ml，超聲處理20～60分鐘，濾過，濾液作為供試品溶液；另取鹽酸小檗堿對(duì)照品，加甲醇制成每1ml含0.5～2.0mg的溶液，作為對(duì)照品溶液；照中國藥典2005年版一部附錄VI B薄層色譜法試驗(yàn)，吸取上述供試品溶液5～10μl、對(duì)照品溶液0.5～1.5μl，分別點(diǎn)于同一硅膠GF254薄層板上，以正丁醇∶醋酸∶水＝1～5∶0.5～1.5∶0.5～1.5為展開劑，展開，取出，晾干；置365nm紫外光燈下檢視，供試品色譜中，在與對(duì)照品色譜相應(yīng)的位置上，顯相同顏色的熒光斑點(diǎn)；(2)取本制劑1～3g，研細(xì)，加甲醇2～8ml，超聲處理20～60分鐘，濾過，濾液作為供試品溶液；取原兒茶醛對(duì)照品，加甲醇制成每1ml含0.5～1.5mg的溶液，作為對(duì)照品溶液；照中國藥典2005年版一部附錄VI B薄層色譜法試驗(yàn)，吸取上述供試品溶液5～15μl、對(duì)照品溶液1～3μl，分別點(diǎn)于同一硅膠G薄層板上，以甲酸乙酯∶甲苯∶甲酸＝2～6∶5～10∶0.5～1.5為展開劑，展開，取出，晾干；噴以二硝基苯肼試液，供試品色譜中，在與對(duì)照品色譜相應(yīng)的位置上，顯相同顏色的斑點(diǎn)；(3)取本制劑1～3g，研細(xì)，加甲醇2～8ml，超聲處理20～60分鐘，濾過，濾液作為供試品溶液；取苦參堿對(duì)照品，加甲醇制成每1ml含0.1～0.3mg的溶液，作為對(duì)照品溶液；照中國藥典2005年版一部附錄VI B薄層色譜法試驗(yàn)，吸取上述供試品溶液5～15μl、對(duì)照品溶液1～3μl，分別點(diǎn)于同一硅膠G薄層板上，以丙酮∶甲苯∶醋酸乙酯∶濃氨試液＝1～5∶1～5∶0.5～1.5∶0.05～0.2為展開劑，展開，取出，晾干，噴以稀碘化鉍鉀試液，供試品色譜中，在與對(duì)照品色譜相應(yīng)的位置上，顯相同顏色的斑點(diǎn)；(4)取本制劑1～5g，研細(xì)，加甲醇10～30ml，超聲處理20～60分鐘，濾過，濾液濃縮至2～8ml，作為供試品溶液；另取水飛薊素對(duì)照品，加甲醇制成每1ml含0.2～0.8mg的溶液，作為對(duì)照品溶液；照中國藥典2005年版一部附錄VI B薄層色譜法試驗(yàn)，吸取上述供試品溶液5～15μl、對(duì)照品溶液2～8μl，分別點(diǎn)于同一硅膠GF254薄層板上，以醋酸乙酯∶甲醇∶水＝10～20∶1～3∶0.05～0.2為展開劑，展開，取出，晾干，置254nm紫外光燈下檢視；供試品色譜中，在與對(duì)照品色譜相應(yīng)的位置上，顯相同顏色的斑點(diǎn)；檢查應(yīng)符合中國藥典2005年版一部附錄I各制劑項(xiàng)下有關(guān)的各項(xiàng)規(guī)定；含量測(cè)定色譜條件與系統(tǒng)適用性試驗(yàn)用十八烷基硅烷鍵合硅膠為填充劑；0.01～0.03mol/L磷酸氫二鈉溶液∶乙腈＝50～100∶8～15為流動(dòng)相，檢測(cè)波長(zhǎng)230～250nm，理論塔板數(shù)以梔子苷峰計(jì)算應(yīng)不低于2000；對(duì)照品溶液的制備精密稱取在80～120℃干燥1～3小時(shí)的梔子苷對(duì)照品適量，加甲醇制成每1ml含0.05～0.2mg的溶液，即得；供試品溶液的制備取本制劑或其內(nèi)容物，研細(xì)，取0.2～0.8g，精密稱定，置具塞錐形瓶中，精密加入甲醇10～50ml，稱定重量，超聲處理20～60分鐘，放冷，再稱定重量，用甲醇補(bǔ)足減失的重量，濾過，取續(xù)濾液，用0.45μm微孔濾膜濾過，取濾液，即得；測(cè)定法分別精密吸取對(duì)照品溶液與供試品溶液各5～15μl，注入液相色譜儀，測(cè)定，即得；各制劑以相當(dāng)每日服用生藥量的成品量為單位量，每單位量含梔子苷C17H14O10不得少于30mg。
全文摘要
本發(fā)明提供了一種治療急慢性肝炎的復(fù)方丹梔制劑的質(zhì)量控制方法，所述質(zhì)量控制方法主要包括性狀、鑒別、檢查以及含量測(cè)定項(xiàng)目中的部分或全部；其中鑒別包括對(duì)制劑中黃柏、丹參、苦參和水飛薊素的薄層色譜鑒別；含量測(cè)定是對(duì)制劑中梔子所含梔子苷的含量測(cè)定。與現(xiàn)有技術(shù)相比，本發(fā)明質(zhì)量控制方法專屬性強(qiáng)，精密度高，重現(xiàn)性好，回收率高，樣品處理簡(jiǎn)便，分析速度快，測(cè)量結(jié)果準(zhǔn)確，達(dá)到了有效控制藥物質(zhì)量的目的，從而確保藥物的療效。
文檔編號(hào)A61P1/16GK1883604SQ200610200558
公開日2006年12月27日 申請(qǐng)日期2006年6月13日 優(yōu)先權(quán)日2006年6月13日
發(fā)明者張芝庭, 郭宗華, 雷蕾, 王媛媛 申請(qǐng)人:貴州神奇集團(tuán)控股有限公司