專利名稱：一種復方抗病毒噴霧劑及其制備方法
技術領域：
本發(fā)明涉及一種復方抗病毒噴霧劑及其制備方法。用于預防和治療禽類病毒感染。
背景技術：
禽流感是由禽流感病毒引起的一種急性傳染病，也能感染人類，感染后的癥狀主要表現(xiàn)為高熱、咳嗽、流涕、肌痛等，多數(shù)伴有嚴重的肺炎，嚴重者心、腎等多種臟器衰竭導致死亡，病死率很高。此病可通過消化道、呼吸道等多種途徑傳播，人員和車輛往來是傳播本病的重要因素。
一些國家高致病性禽流感疫情呈明顯擴大態(tài)勢，形勢十分復雜。世界衛(wèi)生組織(WHO)等國際組織日前發(fā)出警告，禽流感疫情有大規(guī)模暴發(fā)的危險，呼吁各國提高警惕，做好應對準備。在候鳥遷徙季節(jié)，全球有三條候鳥遷徙路線經(jīng)過中國，帶毒遷徙候鳥與家禽接觸，容易引發(fā)新的疫情。我國部分地區(qū)家禽飼養(yǎng)方式相對落后，活禽流通和跨區(qū)域調(diào)運頻繁，防控工作還存在一些薄弱環(huán)節(jié)。中國高致病性禽流感防控任務相當艱巨。
1997年香港的禽流感引發(fā)了一次規(guī)模不小的流感，在這次流感流行過程中有6人死亡。香港政府當機立斷銷毀了包括雞在內(nèi)的全部家禽。這次香港流感與1918年發(fā)生的流感大流行相隔近80年，經(jīng)科學家研究，盡管兩次流感流行間隔久遠，但卻有相似之處流感病毒發(fā)生的基因變異重組出一種人體免疫系統(tǒng)沒有接觸過的流感病毒新變種，然后流感從動物身上轉移到人身上。
對禽流感的治療，目前尚缺乏理想的特效藥物。中國衛(wèi)生部印發(fā)的人禽流感診療方案中，主要采用奧司他韋(Oseltamivir，達菲)、金剛烷胺(Amantadine)和金剛乙胺(Rimantadine)等抗病毒藥物，輔以解熱祛痰止咳等對癥治療及中醫(yī)藥辨證治療。
我們采用純中藥提取物莪術油與貫葉連翹的提取物組成復方制劑，可以為禽流感的預防和治療提供較好的方法。莪術油中含有莪術醇，對呼吸道合胞病毒(RSV)有直接抑制作用，對流感病毒A1型和A3型有直接滅活作用。貫葉連翹為雙子葉植物藥藤黃科植物貫葉連翹的全草或帶根全草，其中含有的金絲桃素(Hypericin)和偽金絲桃素(pesudohypericin)具有很強的抗病毒作用，在體外試驗中，能強烈地抑制各種逆轉錄病毒(retrolirus)。這兩種藥物合用能提高療效，同時安全性也較好。

發(fā)明內(nèi)容
本發(fā)明旨在提供一種抗病毒噴霧劑及其制備方法。該噴霧劑既可抑制或殺滅體表、物品及空氣中的病毒、細菌等病原微生物，又可經(jīng)禽類嘴部噴入以預防和治療病毒性感染疾病。
具體技術方案如下由莪術油和貫葉連翹提取物組成的復方噴霧劑，該組方具有顯著的抗病毒抗菌作用，其具體特征如下
將姜科植物莪術提取出的揮發(fā)油精制成有效部位一莪術油，藤黃科植物貫葉連翹HypericumPerforatum的帶花全草提取物按一定的比例配制成固體或液體或無菌藥物制劑。
1、該復方抗病毒噴霧劑，其特征在于，配方(重量份)為莪術油0.1～10％貫葉連翹提前物0.1～10％助溶劑A 1～5％助溶劑B 1～5％抑菌劑0.01～0.5％蒸餾水加至100％2、如權利要求書1所說的噴霧劑，其特征在于所述的助溶劑A和B選自脂肪酸山梨坦(SPan)類物質(zhì)、聚山梨酯(Tween)類物質(zhì)、聚氧乙烯脂肪酸酯類物質(zhì)、聚氧乙烯脂肪醇醚(Brij)類物質(zhì)、聚氧乙烯一聚氧丙烯共聚物、十二烷基硫酸鈉、或溴化十六烷基三甲基溴化胺、或其混合物。
3、如權利要求書1所說的噴霧劑，其特征在于所述的抑菌劑選自尼泊金酯類(甲酯、丙酯)、新潔而滅、氯芐乙胺、苯甲醇、三氯叔丁醇、硫柳汞等。
4、一種復方抗病毒噴霧劑的制備方法，其特征在于，按以下步驟進行制備(1)稱取權利要求1所述量的莪術油，加助溶劑A混合均勻，為溶液1；(2)稱取權利要求1所述量的貫葉連翹提前物，加助溶劑B混合均勻，為溶液2；(3)將溶液2在攪拌下加到溶液1中，并混合均勻；(4)將少量蒸餾水溶解后的抑菌劑加入到上述混合液中，攪拌均勻；(5)加蒸餾水至約全量，進行中間體檢測，并調(diào)節(jié)pH值和含量至產(chǎn)品合格；(6)在1萬級凈化條件下藥液先過濾機粗濾，再用超濾器精濾，然后分裝在帶有噴霧器的容器內(nèi)；(7)檢驗將分裝后的成品進行產(chǎn)品檢驗，然后入庫。
本發(fā)明的積極效果該藥物制劑灌裝在微型噴霧器中以噴霧的形式使用。(1)用于環(huán)境空氣消毒滅菌，可以短時間內(nèi)有效殺滅各種病毒、病菌，對人體無毒、無害、無色染、無腐蝕，噴霧后不需漂洗，也不會產(chǎn)生耐藥性，使用方法獨特，攜帶使用非常簡單，可為人們隨時隨地提供潔凈的生活和工作環(huán)境，遠離病毒和病菌的侵害；(2)又可經(jīng)禽類嘴部噴入以預防和治療病毒性感染疾病。
實施例1處方莪術油0.3％貫葉連翹提前物0.25％
吐溫802.5％乙醇 2.5％尼泊金丙酯0.02％蒸餾水加至100％配制方法(1)稱取處方量莪術油，加吐溫80混合均勻，為溶液1；(2)稱取處量的貫葉連翹提前物，加處方量乙醇溶解，為溶液2；(3)將溶液2在攪拌下加到溶液1中，并混合均勻；(4)將少量蒸餾水溶解后的尼泊金丙酯加入到上述混合液中，攪拌均勻；(5)加蒸餾水至約全量的95％，進行中間體檢測，并調(diào)節(jié)pH值和含量至產(chǎn)品合格；(6)在1萬級凈化條件下藥液先過濾機粗濾，再用超濾器精濾，然后分裝在帶有噴霧器的容器內(nèi)；(7)檢驗將分裝后的成品進行產(chǎn)品檢驗，然后入庫。
實施例2處方莪術油1％貫葉連翹提前物0.5％乙醇 5％硫柳汞0.01％蒸餾水加至100％配制方法(1)稱取處量的貫葉連翹提前物，加處方量一半的乙醇溶解，為溶液1；(2)稱取處方量莪術油，加處方量一半的乙醇攪拌均勻，為溶液2；(3)將溶液2在攪拌下加到溶液1中，并混合均勻；(4)將少量蒸餾水溶解后的硫柳汞加入到上述混合液中，攪拌均勻；(5)加蒸餾水至約全量的95％，進行中間體檢測，并調(diào)節(jié)pH值和含量至產(chǎn)品合格；(6)在1萬級凈化條件下藥液先過濾機粗濾，再用超濾器精濾，然后分裝在帶有噴霧器的容器內(nèi)；(7)檢驗將分裝后的成品進行產(chǎn)品檢驗，然后入庫。
抗雞源H5-AIV病毒實驗1材料與方法
1.1 材料1.1.1 試驗用病毒 AIV病毒株A/Chicken/Guangdong/1/2004(簡稱雞源H5-AIV)由華南農(nóng)業(yè)大學獸醫(yī)學院禽病教研室分離、純化保存。
1.1.2 試驗用藥物及來源 貫葉連翹提取物溶液的濃度為20μg/mL、200μg/mL、500μg/mL；莪術油溶液的濃度為20μg/mL、200μg/mL、500μg/mL；樣品①為按照實施例1處方和工藝制備；樣品②為按照實施例2處方和工藝制備。
1.1.3 試驗用雞胚 為10天齡低免疫雞胚，由佛山市墟崗黃畜牧有限公司提供；1.1.4 HA試驗用紅細胞 為0.5％的雞紅細胞，自行配制；1.1.5 試驗用酸堿 0.1N NaOH，0.1N HCl。
1.2 方法1.2.1 0.5％的雞紅細胞的制備由成年公雞的翅靜脈或心臟采血，放入滅菌試管(按每毫升血加入3.8％滅菌檸檬酸鈉0.2mL做抗凝劑)內(nèi)，迅速混勻。然后將血液注入離心管中，經(jīng)3000轉/分鐘，離心10～15min，用吸管吸去上清液和紅細胞上層的白細胞薄膜，將沉淀的紅細胞加稀釋液(生理鹽水)洗滌，再用離心機3000轉/min離心10～15min棄去上清液，再加稀釋液洗滌，如此反復洗滌三次，將最后一次離心后的的紅細胞泥，按0.5％的稀釋度加入稀釋液(0.5mL紅細胞加99.5mL生理鹽水)。
1.2.2 禽流感病毒雞胚半數(shù)感染量(EID50)的測定將病毒原液用滅菌生理鹽水按10-3～10-10稀釋，接種10天齡雞胚，每個稀釋度接種8枚胚(雞源H5-AIV采用了每個稀釋度7枚胚的方法)，0.2mL/胚，37℃孵育，24小時內(nèi)死亡的雞胚棄去。測定24小時后死亡胚的HA效價，大于4孔為陽性。按Reed-Muench兩氏法計算EID50。
1.2.3 藥物pH值的調(diào)整用0.1N NaOH，0.1N HCl將抗禽流感病毒中藥的pH值調(diào)為6～8之間。
1.2.4 藥物對雞胚的半數(shù)中毒劑量的測定倍比稀釋藥物，設5個度，5胚/組，0.2mL/胚，96小時，另設空白對照組。對胚不致死、不影響胚體正常發(fā)育者判為安全。按Reed-Muench兩氏法計算半數(shù)中毒劑量，如用藥物原液組胚體均正常發(fā)育，可視原液濃度為半數(shù)中毒劑量。
1.2.5 藥物對禽流感病毒的抑制作用接種50個EID50(0.2mL)的病毒+最大安全劑量的藥物(0.2mL)，5枚/組；37℃，72小時，24小時內(nèi)死亡的胚棄去。72h凍胚(24h后死亡的胚則立即凍胚)，測HA效價，大于4孔為陽性。另設病毒陽性對照組。
2結果與分析2.1 禽流感病毒雞胚半數(shù)感染量(EID50)的測定 結果如表3.1表3.1 禽流感病毒雞胚半數(shù)感染量(EID50)


*為HA陽性胚數(shù)/接種胚數(shù)2.2 藥物對雞胚的半數(shù)中毒劑量的測定 結果如表3.2表3.2 半數(shù)中毒劑量的測定

*為正常發(fā)育胚數(shù)/接胚總數(shù)2.3 藥物對禽流感病毒的抑制作用結果2.3.1 藥物對雞源H5-AIV的抑制作用結果 結果如表3.3表3.3 藥物對雞源H5-AIV的抑制作用結果

2.3.5 所有試驗中藥及復方對雞源H5-AIV毒株的抑制作用的結果 根據(jù)表3-3的結果，用“+”表示10枚胚中的尿囊液均HA效價均為0，用“-”表示表示10枚胚中的尿囊液均HA效價均大于4孔，用“±”表示10枚胚中部分胚的尿囊液HA效價為0，“/”表示沒用做相應的試驗。表3.4為所有試驗中草藥對雞源H5-AIV毒株的抑制作用的結果。
表3.4 所有試驗中藥及復方對雞源H5-AIV毒株的抑制作用的結果

權利要求
1.一種復方抗病毒噴霧劑，其特征在于，配方(重量份)為莪術油 0.1～10％貫葉連翹提前物 0.1～10％助溶劑A 1～5％助溶劑B 1～5％抑菌劑 0.01～0.5％蒸餾水 加至100％
2.如權利要求書1所說的噴霧劑，其特征在于所述的助溶劑A和B選自脂肪酸山梨坦(SPan)類物質(zhì)、聚山梨酯(Tween)類物質(zhì)、聚氧乙烯脂肪酸酯類物質(zhì)、聚氧乙烯脂肪醇醚(Brij)類物質(zhì)、聚氧乙烯一聚氧丙烯共聚物、十二烷基硫酸鈉、或溴化十六烷基三甲基溴化胺、或其混合物。
3.如權利要求書1所說的噴霧劑，其特征在于所述的抑菌劑選自尼泊金酯類(甲酯、丙酯)、新潔而滅、氯芐乙胺、苯甲醇、三氯叔丁醇、硫柳汞等。
4.一種復方抗病毒噴霧劑的制備方法，其特征在于，按以下步驟進行制備(1)稱取權利要求1所述量的莪術油，加助溶劑A混合均勻，為溶液1；(2)稱取權利要求1所述量的貫葉連翹提前物，加助溶劑B混合均勻，為溶液2；(3)將溶液2在攪拌下加到溶液1中，并混合均勻；(4)將少量蒸餾水溶解后的抑菌劑加入到上述混合液中，攪拌均勻；(5)加蒸餾水至約全量的90％，進行中間體檢測，并調(diào)節(jié)pH值和含量至產(chǎn)品合格；(6)在1萬級凈化條件下藥液先過濾機粗濾，再用超濾器精濾，然后分裝在帶有噴霧器的容器內(nèi)；(7)檢驗將分裝后的成品進行產(chǎn)品檢驗，然后入庫。
全文摘要
一種中藥抗病毒噴霧劑，本發(fā)明是由莪術油和貫葉連翹提取物組成的復方噴霧劑，該組方具有顯著的抗病毒抗菌作用，其特征是將姜科植物莪術提取出的揮發(fā)油精制成有效部位——莪術油，藤黃科植物貫葉連翹Hypericum Peroratum的帶花全草提取物按一定的比例配制成固體或液體或無菌藥物制劑，使用時將該藥物制劑灌裝在微型噴霧器中以噴霧的形式使用。用于環(huán)境空氣消毒滅菌，可以短時間內(nèi)有效殺滅各種病毒、病菌，對人體無毒、無害、無色染、無腐蝕，噴霧后不需漂洗，也不會產(chǎn)生耐藥性，使用方法獨特，攜帶使用非常簡單，可為人們隨時隨地提供潔凈的生活和工作環(huán)境，遠離病毒和病菌的侵害。又可經(jīng)禽類嘴部噴入以預防和治療病毒性感染疾病。
文檔編號A61P31/12GK1961679SQ20051010093
公開日2007年5月16日 申請日期2005年11月8日 優(yōu)先權日2005年11月8日
發(fā)明者黃亞東, 姚崇舜, 李校堃, 項琪, 趙文 申請人:廣州暨南大學醫(yī)藥生物技術研究開發(fā)中心