專利名稱：水蛭素鼻腔給藥制劑及其用途的制作方法
技術(shù)領(lǐng)域：
本發(fā)明涉及一種抗凝抗栓多肽藥物-水蛭素的給藥新途徑，具體涉及水蛭素通過鼻黏膜給藥的制劑及其用途。
背景技術(shù)：
當(dāng)今心血管疾病已成為危害人類健康的頭號(hào)大敵，其中血栓病是嚴(yán)重危害人類生命的疾病，多年來人們一直在致力于尋找和研制治療血栓病的有效藥物。至今，已有尿激酶、鏈激酶，組織型纖溶酶原激活劑以及尿激酶原等溶栓藥物。與此同時(shí)人們也一直在尋找效果更好的抗栓藥物。水蛭素就是一種新近開發(fā)的抗栓藥物(Doutremepuich C.，Deharo E.，Guyot，M.，etal.Thrombos.Res.54435-445，1989.)。水蛭自古以來就是防栓抗凝逐瘀之良藥，首載于《神農(nóng)本草經(jīng)》，后在《本草綱目》和《中國動(dòng)物藥》等專著中均有收載。早在1884年就發(fā)現(xiàn)了水蛭素，但直到1950年以后才從醫(yī)用水蛭的唾液腺分離到具有生物活性的水蛭素，對(duì)于水蛭素的藥理學(xué)，包括抗凝作用，對(duì)血小板、各種細(xì)胞的影響，抗血栓效果及動(dòng)力學(xué)、毒性等，都進(jìn)行了全面、深入的研究。它的醫(yī)用價(jià)值被普遍重視。水蛭素是水蛭的唾液腺分泌的一種酸性多肽，由65或66個(gè)氨基酸組成，分子量約為7000Da，是迄今為止所發(fā)現(xiàn)的最強(qiáng)的凝血酶特異抑制劑，它能高效抗凝血、抗血栓形成及阻止凝血酶進(jìn)一步活化凝血因子和血小板聚集等反應(yīng)造成的淤血現(xiàn)象，對(duì)多種血栓性疾病具有良好的療效(Walenga J.M.，Pifarre R.andFareed J.Drugs of the Future.15(3)267-280，1990.，Markwardt F.，F(xiàn)ink G.，Kaiser B.，et al.Pharmazie.43202-207，1988.)。由于天然水蛭素提取制備困難、花費(fèi)高，使它的研究和應(yīng)用受到限制。直到近些年來通過基因工程技術(shù)獲得較大量的重組水蛭素，才使其開發(fā)研究得到了迅速的發(fā)展，開始了大規(guī)模的臨床應(yīng)用和藥理學(xué)研究。實(shí)驗(yàn)結(jié)果表明，重組水蛭素和天然水蛭素的藥理活性基本是一致的(Markwardt F.Thromb.Res.741-23，1994.)。效果明顯優(yōu)于臨床上最常使用的肝素等，而又無肝素誘導(dǎo)的血小板減小癥和血栓復(fù)形成，腎衰等后遺癥(Doutremepuich C.，Deharo E.，Guyot，M.，et al.Thrombos.Res.54435-445，1989.)。同時(shí)水蛭素又無明顯毒性和抗原性，在合理劑量內(nèi)，沒有引起出血的危險(xiǎn)，臨床上主要用于治療肝素誘導(dǎo)的血小板減少癥，不穩(wěn)定性心絞痛(USA)、急性心肌梗死(AMI)、血管成形術(shù)、彌散性血管內(nèi)凝血(DIC)；治療外科手術(shù)后靜脈血栓，促進(jìn)顯微外科手術(shù)傷口的愈合；預(yù)防動(dòng)脈血栓，尤其是心臟手術(shù)后，防止冠脈旁路的血栓形成；預(yù)防動(dòng)、靜脈管內(nèi)溶解血栓后或血管再造后形成血栓；改善體外血液循環(huán)，尤其在血液透析操作中等。無論是水蛭素還是重組水蛭素都表現(xiàn)出穩(wěn)定的化學(xué)性質(zhì)，其活性不受高溫、pH或一些變性劑的影響，只有在高溫和強(qiáng)堿性條件(pH 13)同時(shí)作用時(shí)，水蛭素活性逐漸喪失(Chang J.Y.J.Bio.Chem.26610839-10843，1991.)。水蛭素為親水性的多肽，其在水中具有很好的溶解性。目前，重組水蛭素的注射劑已在德國、瑞士和美國獲準(zhǔn)上市，用于治療肝素誘發(fā)的血小板減少癥、髖關(guān)節(jié)和膝關(guān)節(jié)置換手術(shù)后的病人的深部靜脈血栓、不穩(wěn)定心絞痛及接收了冠狀動(dòng)脈血管形成術(shù)的病人的抗凝血(Markwartd F.Biomed.Prog.319-23，1990.)。目前，國內(nèi)也有數(shù)家單位向國家食品藥品監(jiān)督管理局提出重組水蛭素原料藥和注射劑的申請(qǐng)，其中有4家單位在2003年獲得了臨床批準(zhǔn)。水蛭素正在成為防治血栓類疾病的新一類藥物，具有很大的社會(huì)效益和經(jīng)濟(jì)效益。由于水蛭素與其他多肽蛋白類藥物一樣，其固有的親水大分子和易受胃腸道酶降解的特性，使得水蛭素目前主要以注射劑的方式給藥，但注射給藥在體內(nèi)壽命短，維持藥效時(shí)間僅1個(gè)多小時(shí)，難以適應(yīng)大多數(shù)慢性高凝狀態(tài)患者長期抗凝預(yù)防和治療的需要。同時(shí)頻繁的注射給藥，也給患者造成了巨大的身心痛苦。因此，尋找水蛭素非注射給藥方法，設(shè)法延長其在體內(nèi)的作用時(shí)間，減少給藥次數(shù)，提高生物利用度，已成為制約水蛭素應(yīng)用的一個(gè)重要問題，同時(shí)其非注射給藥的研究也開始受到人們的重視，目前已有報(bào)道重組水蛭素胃腸道吸收的研究(Yang X.Y.，Wang X.T.，Zhang X.N.et al.J.Pharm.Exp.Thera.308(2)774-779，2004.)和重組水蛭素口服給藥的專利申請(qǐng)(Han Y.M.，Lu Y.F.and Wang Z.H.Chin J Hematol20483-484.1999)。
研究表明當(dāng)分子量超過1000時(shí)，藥物通過黏膜的吸收會(huì)迅速減少，尤其對(duì)于親水性化合物。像多肽蛋白類藥物僅用簡單溶液進(jìn)行黏膜給藥(如口服、鼻腔及直腸等)時(shí)，吸收很差，通常生物利用度僅達(dá)1％。因此注射是這類藥物的主要給藥方式。近年來隨著生物技術(shù)的發(fā)展，越來越多的生化藥物(如蛋白多肽類藥物)用于治療各種疾病，而給藥方式成為制約這些藥物應(yīng)用的瓶頸。因此研究開發(fā)有效的非注射途徑給藥越來越受到人們的重視。鼻腔、口腔、口服、直腸、陰道等透粘膜吸收給藥途徑得到了廣泛的研究。
在可能的多肽蛋白非注射給藥途徑中，鼻黏膜給藥具有獨(dú)特的優(yōu)勢，其除了具有給藥方便、易于被患者接受的特點(diǎn)外，鼻黏膜下血管豐富，藥物可直接通過鼻黏膜吸收進(jìn)入體循環(huán)，避免口服給藥時(shí)的首過作用，并且吸收速度快，因此受到廣泛的關(guān)注。鼻黏膜給藥也是少數(shù)為國內(nèi)外官方認(rèn)可的多肽藥物非注射給藥途徑之一，像胰島素、降鈣素和加壓素等多肽藥物的鼻腔給藥制劑已經(jīng)在國內(nèi)外上市供應(yīng)。從目前研究和藥物開發(fā)的形勢看，鼻腔給藥最有可能成為注射給藥的替代給藥途徑。而有關(guān)水蛭素鼻腔給藥的研究國內(nèi)外至今尚未見諸任何報(bào)道。因此水蛭素鼻腔給藥制劑的研制將為水蛭素的應(yīng)用開辟更加廣闊的前景。
然而，由于鼻黏膜對(duì)于多肽藥物吸收存在的一些固有障礙，要想獲得這些藥物足夠的生物利用度，鼻腔給藥仍然面臨巨大的挑戰(zhàn)。這些障礙主要是鼻黏膜對(duì)于親水性大分子的滲透性較差，使其很難透過鼻黏膜進(jìn)入血液循環(huán)；此外鼻黏膜內(nèi)纖毛的快速擺動(dòng)對(duì)藥物造成的清除作用，不利于藥物在鼻腔內(nèi)的保留。目前使用吸收促進(jìn)劑是提高多肽類藥物鼻黏膜吸收的主要方法，然而吸收促進(jìn)劑大多具有纖毛毒性作用，易對(duì)鼻黏膜成損害。因此尋找高效低毒的吸收促進(jìn)劑，或增加水蛭素在鼻腔中的停留時(shí)間，是鼻腔給藥制劑研制的關(guān)鍵。
本發(fā)明的目的是為了克服水蛭素黏膜吸收障礙，提高生物利用度，減小鼻黏膜毒性，提供一種用于治療和預(yù)防血栓引起的心腦血管疾病的有效鼻黏膜給藥新制劑及其制備方法，以及該制劑的應(yīng)用。

發(fā)明內(nèi)容
本發(fā)明采用吸收促進(jìn)劑或具有生物黏附特性的殼聚糖(同時(shí)也是吸收促進(jìn)劑)與吸收促進(jìn)劑合用，可增加藥物在鼻黏膜部位的滲透性和/或停留時(shí)間，提高藥物的生物利用度，同時(shí)可保證對(duì)鼻黏膜不產(chǎn)生明顯的刺激性和毒性作用。
本發(fā)明的目的是通過如下技術(shù)方案實(shí)現(xiàn)的本發(fā)明的制劑配方組成為水蛭素50～500mg吸收促進(jìn)劑5～100mg防腐劑0.1～4mgpH調(diào)節(jié)劑 適量調(diào)pH至4.5～6.0水或生理鹽水 加至1ml以上述配方，或進(jìn)一步加入其他常規(guī)比例的常規(guī)輔料，制備成水蛭素鼻腔給藥制劑，可以為滴劑、凝膠劑、噴霧劑或軟膏劑。
上述制劑所采用的防腐劑為苯扎溴胺或苯甲酸鈉，或?qū)⒘u苯甲酯與羥苯丙酯或羥苯乙酯與羥苯丙酯合用，其在制劑中的濃度為0.01～0.4％(w/v)。
上述制劑中吸收促進(jìn)劑，選自以下種類中的一或多種，其種類及在制劑中的重量體積百分含量分別為殼聚糖(CS)為0.5～1.5％；吐溫-80(Tween80)為2～7％(w/v)；羥丙基-β-環(huán)糊精(HP-β-CD)2～10％(w/v)；甘草酸單銨鹽0.5～2％(GMA，w/v)。在制備過程中直接溶于水或生理鹽水，或先溶于少量丙二醇中再溶于水或生理鹽水中。
上述除殼聚糖外的吸收促進(jìn)劑可以和0.25～1.0％重量體積百分比用量的殼聚糖以下列重量體積百分比合用吐溫-80(Tween80)為2～7％(w/v)；羥丙基-β-環(huán)糊精(HP-β-CD)2～10％(w/v)；甘草酸單銨鹽0.5～2％(GMA，w/v)。
上述制劑所采用的水蛭素為天然水蛭素或通過基因工程制備的重組水蛭素。
本發(fā)明制劑的制備工藝為將配方量的防腐劑加入適量水或生理鹽水中，攪拌(或加熱)使之溶解后，依次加入吸收促進(jìn)劑(必要時(shí)先用丙二醇溶解)、水蛭素?cái)嚢枋怪耆芙夂?，加入剩余部分水或生理鹽水，用醋酸調(diào)pH至4.5～6.0，即得。此法可用于滴鼻劑或噴鼻劑的制備；若再加入常規(guī)比例的常規(guī)輔料可制成軟膏劑或凝膠劑。
本發(fā)明的水蛭素鼻腔給藥制劑通過鼻腔給藥后用于預(yù)防和/或治療各種血栓性疾病的應(yīng)用。
本發(fā)明所采用的各種配比的配方系經(jīng)優(yōu)選得出。各配方經(jīng)動(dòng)物鼻腔給藥后體內(nèi)生物利用度試驗(yàn)、藥效試驗(yàn)、黏膜刺激性和纖毛毒性實(shí)驗(yàn)證明，所選配方與對(duì)照組比較均可明顯提高水蛭素在大鼠體內(nèi)生物利用度(P＜0.05)；可明顯延長正常大鼠的凝血時(shí)間(P＜0.05)；可使彌散性血管內(nèi)凝血的模型(DIC)家兔的凝血時(shí)間縮短接近正常值，與模型組比較具有顯著性差異(P＜0.05)；并且對(duì)黏膜的刺激性和纖毛毒性與空白對(duì)照比較無顯著性差異，表明刺激性和纖毛毒性較小。以下動(dòng)物試驗(yàn)用以說明上述有效性和安全性大鼠體內(nèi)吸收試驗(yàn)本發(fā)明提供的水蛭素各配方經(jīng)鼻黏膜給藥后大鼠體內(nèi)生物利用度試驗(yàn)如下(試驗(yàn)中采用的水蛭素為重組水蛭素-2，rHV-2)不同濃度殼聚糖(0.5％、1％、1.5％；w/v，pH 5.0)、吐溫-80(2％，5％，7％；w/v)、羥丙基-β-環(huán)糊精(2％，5％，10％；w/v)、甘草酸單銨鹽(GMA，0.5％，1％，2％；w/v)等與rHV-2組成的配方，可使rHV-2經(jīng)鼻給藥后大鼠體內(nèi)的血藥濃度-時(shí)間曲線下的面積(AUC)和相對(duì)生物利用度(Fr，與皮下注射比較)與生理鹽水對(duì)照組比較獲得明顯提高(P＜0.05，見表1)。
表1 各種rHV2配方對(duì)rHV-2經(jīng)鼻給藥后大鼠體內(nèi)AUC和相對(duì)生物利用度的影響


注AUC和相對(duì)生物利用度數(shù)據(jù)由體內(nèi)試驗(yàn)結(jié)果經(jīng)梯形法計(jì)算得出，為平均值±標(biāo)準(zhǔn)偏差，(n＝5～6)Fr％為與皮下注射比較的相對(duì)生物利用度P＜0.05與生理鹽水組比較具有顯著性差異**P＜0.01與生理鹽水組比較具有極顯著性差異SC皮下注射rHV2水蛭素-2CS殼聚糖試驗(yàn)所用溶劑均為生理鹽水纖毛毒性試驗(yàn)采用在體蟾蜍上腭模型法觀察各配方及rHV-2對(duì)蟾蜍上腭纖毛持續(xù)運(yùn)動(dòng)時(shí)間的影響，計(jì)算給藥組相對(duì)于生理鹽水組的纖毛持續(xù)運(yùn)動(dòng)百分率，并以十二烷基硫酸鈉作為陽性對(duì)照組。結(jié)果rHV-2及各受試配方對(duì)纖毛持續(xù)運(yùn)動(dòng)狀況的影響見表2。
表2 水蛭素、吸收促進(jìn)劑和防腐劑對(duì)纖毛運(yùn)動(dòng)的影響(n＝5)


注數(shù)據(jù)為平均值±標(biāo)準(zhǔn)偏差(n＝5)rHV2重組水蛭素-2CS殼聚糖HP-β-CD羥丙基-β-環(huán)糊精GMA甘草酸單銨鹽SDS十二烷基硫酸鈉試驗(yàn)所用溶劑均為生理鹽水表2結(jié)果表明各試驗(yàn)組的纖毛相對(duì)持續(xù)運(yùn)動(dòng)百分率均在90％以上，經(jīng)統(tǒng)計(jì)處理，與PBS組比較均無顯著性差異(P＞0.05)。表明各配方的纖毛毒性作用較小。
刺激性試驗(yàn)1水蛭素各配方單次給藥對(duì)家兔眼睛的刺激性采用家兔眼黏膜刺激性試驗(yàn)法家兔左眼給藥，右眼對(duì)照，分別于給藥后1h、2h、3h、4h、24h、48h、72h檢查眼膜有無角膜充血、水腫、潰瘍和混濁等。結(jié)果水蛭素各配方組(同大鼠體內(nèi)生物利用度試驗(yàn))給藥后左右眼觀察無明顯差異，說明對(duì)眼黏膜無明顯刺激性。
2水蛭素各配方多次給藥對(duì)家兔眼睛的刺激性采用家兔眼黏膜刺激性試驗(yàn)法家兔左眼給藥，另一只眼睛不做處理，作為對(duì)照。每天給藥3次，連續(xù)10d，于每天給藥前觀察兔眼反應(yīng)情況，停藥后再連續(xù)觀察7d。結(jié)果水蛭素及各配方組(同大鼠體內(nèi)生物利用度試驗(yàn))給藥后左右眼觀察無明顯差異，說明對(duì)眼黏膜無明顯刺激性。
藥效試驗(yàn)1測定水蛭素各配方經(jīng)鼻給藥后對(duì)正常大鼠部分凝血活酶時(shí)間(APTT)、凝血酶原時(shí)間(PT)及凝血酶時(shí)間(TT)的影響
用不同配方配制的rHV-2溶液，經(jīng)鼻給予大鼠25μl(6.0mg.kg-1)，1h后取血，分別測定部分凝血活酶時(shí)間(APTT)、凝血酶原時(shí)間(PT)及凝血酶時(shí)間(TT)的變化。結(jié)果各組均較水蛭素鹽水對(duì)照組的凝血時(shí)間均明顯延長(P＜0.05)。(見表3)。
表3 水蛭素各種配方對(duì)水蛭素經(jīng)鼻給藥后對(duì)正常大鼠凝血時(shí)間的影響(n＝5～6)

注*P＜0.05與生理鹽水組比較具有顯著性差異rHV2重組水蛭素-2CS殼聚糖HP-β-CD羥丙基-β-環(huán)糊精GMA甘草酸單銨鹽rHV2給藥劑量為6mg/kg試驗(yàn)所用溶劑均為生理鹽水.
2測定水蛭素各配方經(jīng)鼻給藥后對(duì)彌散性血管內(nèi)凝血模型(DIC)家兔凝血時(shí)間的影響采用細(xì)菌內(nèi)毒素(LPS)間隔24h靜脈注射(2.5μg/kg，5μg/kg)造成家兔DIC模型，鼻腔給予重組水蛭素鼻腔給藥制劑(2mg.kg-1)，給藥后3h靜脈取血，測定APTT值的變化。(結(jié)果見表4)。
表4 水蛭素各種配方經(jīng)鼻給藥后對(duì)DIC家兔凝血時(shí)間的影響(n＝5)

注*P＜0.05與正常對(duì)照(0.9％NaCl)組比較具有顯著性差異▲p＜0.05與模型對(duì)照組比較具有顯著性差異rHV2重組水蛭素-2rHV2給藥劑量為2mg/kg試驗(yàn)所用溶劑均為生理鹽水CS殼聚糖GMA甘草酸單銨鹽HP-β-CD羥丙基-β-環(huán)糊精結(jié)果表明各試驗(yàn)組較模型組的凝血時(shí)間明顯縮短，接近正常值。說明各試驗(yàn)組具有較好的抗凝血和抗血栓形成作用。
本發(fā)明提供的水蛭素鼻腔給藥制劑主要用于預(yù)防和治療各種血栓性疾病的應(yīng)用。
劑量本品1ml含水蛭素50～500mg，每日1～3次，單側(cè)或雙側(cè)鼻粘膜給藥，使用量根據(jù)給藥目的的不同而異。
包裝本品包裝為滴鼻劑、噴鼻劑或軟膏劑的專用小瓶。
具體實(shí)施例方式
實(shí)施例1水蛭素200mg殼聚糖5mg苯扎溴胺 0.35mg醋酸 適量調(diào)pH4.5-5.5水加至1ml工藝將配方量殼聚糖加入適量水或生理鹽水中，滴加醋酸使完全溶解，依次加入苯扎溴胺、水蛭素?cái)嚢枋怪耆芙夂?，加入剩余部分生理鹽水，用醋酸或NaOH調(diào)pH至規(guī)定值，即得。
以此工藝可以制成滴劑或噴霧劑；再加入適量常規(guī)輔料如聚乙稀醇(PVA)或卡波普，以適當(dāng)比例相混合可制成凝膠劑或軟膏劑。
實(shí)施例2水蛭素500mg殼聚糖10mg苯甲酸鈉 1.5mg醋酸 適量調(diào)pH4.5～5.5水加至1ml制備工藝與實(shí)施例1相同。
實(shí)施例3水蛭素300mg殼聚糖5mg吐溫-80 20mg苯扎溴銨 0.35mg醋酸 適量調(diào)pH5.0水加至1ml工藝將配方量殼聚糖加入適量水或生理鹽水中，滴加醋酸使完全溶解，依次加入苯扎溴胺、吐溫-80、水蛭素?cái)嚢枋怪耆芙夂螅尤胧Ｓ嗖糠稚睇}水，用醋酸或NaOH調(diào)pH至規(guī)定值，即得。
以此工藝可以制成滴劑或噴霧劑；再加入適量常規(guī)輔料如聚乙稀醇(PVA)或卡波普，以適當(dāng)比例相混合可制成凝膠劑或軟膏劑。
實(shí)施例4水蛭素200mg殼聚糖10mg吐溫-80 50mg苯甲酸鈉 2mg醋酸 適量調(diào)pH4.5～5.5水加至1ml制備工藝與實(shí)施例3相同。
實(shí)施例5水蛭素50mg殼聚糖25mg吐溫-80 50mg苯甲酸鈉 2mg醋酸 適量調(diào)pH4.5～5.5水加至1ml制備工藝與實(shí)施例3相同。
實(shí)施例6水蛭素100mg殼聚糖5mg吐溫-80 70mg苯甲酸鈉 2mg醋酸 適量調(diào)pH4.5～5.5水加至1ml制備工藝與實(shí)施例3相同。
實(shí)施例7水蛭素300mg甘草酸單銨鹽 10mg苯扎溴銨 0.3mg醋酸 適量調(diào)pH5.0～6.0生理鹽水 加至1ml工藝將處方量苯扎溴胺加入適量生理鹽水中，使完全溶解，依次加入甘草酸單銨鹽、水蛭素?cái)嚢枋怪耆芙夂螅尤胧Ｓ嗖糠稚睇}水，用醋酸調(diào)pH至規(guī)定值，即得。
以此工藝可以制成滴劑或噴霧劑；再加入適量常規(guī)輔料如聚稀醇(PVA)或卡波普，以適當(dāng)比例相混合可制成凝膠劑或軟膏劑。
實(shí)施例8水蛭素300mg甘草酸單銨鹽 20mg苯扎溴銨 0.3mg醋酸 適量調(diào)pH5.0～6.0生理鹽水 加至1ml制備工藝與實(shí)施例7相同。
實(shí)施例9水蛭素300mg殼聚糖5mg甘草酸單銨鹽 10mg苯扎溴銨 0.3mg醋酸 適量調(diào)pH4.5～5.5水加至1ml制備工藝與實(shí)施例3相同。
實(shí)施例10水蛭素200mg殼聚糖10mg甘草酸單銨鹽 5mg苯甲酸鈉 2mg醋酸 適量調(diào)pH4.5～5.5水加至1ml制備工藝與實(shí)施例3相同。
實(shí)施例11水蛭素200mg殼聚糖5mg羥丙基-β-環(huán)糊精 20mg苯扎溴銨 0.3mg
醋酸適量調(diào)pH4.5～5.5水 加至1ml制備工藝與實(shí)施例3相同。
實(shí)施例12水蛭素 200mg殼聚糖 10mg羥丙基-β-環(huán)糊精70mg苯扎溴銨0.3mg醋酸適量調(diào)pH4～6水 加至1ml制備工藝與實(shí)施例3相同。
實(shí)施例13水蛭素 300mg羥丙基-β-環(huán)糊精20mg苯扎溴銨0.3mg醋酸適量調(diào)pH5.0～6.0生理鹽水加至1ml制備工藝與實(shí)施例7相同。
實(shí)施例14水蛭素 100mg羥丙基-β-環(huán)糊精70mg苯扎溴銨0.3mg醋酸適量調(diào)pH5.0～6.0水或生理鹽水加至1ml制備工藝與實(shí)施例7相同。
實(shí)施例15水蛭素 500mg殼聚糖 5mg吐溫-80 50mg羥苯甲酯1.3mg羥苯丙酯0.2mg
醋酸適量調(diào)pH4.5～5.5水 加至1ml工藝將處方量殼聚糖加入適量生理鹽水中，滴加醋酸、攪拌使完全溶解，另取羥苯甲酯和羥苯乙酯加熱使完全溶解，放冷后，依次加入殼聚糖溶液、吐溫-80、水蛭素?cái)嚢枋怪耆芙猓尤胧Ｓ嗖糠稚睇}水，用醋酸或NaOH調(diào)pH至規(guī)定值，即得。
以此工藝可以制成滴劑或噴霧劑；再加入適量常規(guī)輔料如聚乙稀醇(PVA)或卡波普，以適當(dāng)比例相混合可制成凝膠劑或軟膏劑。
實(shí)施例16水蛭素 200mg吐溫-80 50mg羥苯乙酯1.5mg羥苯丙酯1.5mg醋酸適量調(diào)pH5.0～6.0水 加至1ml工藝將處方量羥苯乙酯和羥苯丙酯加入適量生理鹽水中，加熱使完全溶解，放冷后，依次加入吐溫-80、水蛭素?cái)嚢枋怪耆芙?，加入剩余部分生理鹽水，用醋酸或NaOH調(diào)pH至規(guī)定值，即得。
以此工藝可以制成滴劑或噴霧劑；再加入適量常規(guī)輔料如聚乙稀醇(PVA)或卡波普，以適當(dāng)比例相混合可制成凝膠劑或軟膏劑。
實(shí)施例17水蛭素 300mg羥丙基-β-環(huán)糊精50mg羥苯甲酯1.3mg羥苯丙酯0.2mg醋酸適量調(diào)pH5.0～6.0水 加至1ml制備工藝與實(shí)施例15相同。
實(shí)施例18水蛭素 300mg甘草酸單銨鹽10mg羥苯甲酯1.3mg
羥苯丙酯0.2mg醋酸適量調(diào)pH5.0～6.0生理鹽水加至1ml制備工藝與實(shí)施例16相同。
權(quán)利要求
1一種水蛭素鼻腔給藥制劑，其特征在于其中包括以下重量體積百分比的組分水蛭素5～50％(w/v)吸收促進(jìn)劑0.5～10％(w/v)防腐劑0.01～0.4％(w/v)pH調(diào)節(jié)劑 適量，調(diào)至pH4.5～6.0水或生理鹽水 加至規(guī)定量防腐劑為苯扎溴銨或苯甲酸鈉，或?qū)⒘u苯甲酯與羥苯丙酯或羥苯乙酯與羥苯丙酯合用。
2根據(jù)權(quán)利要求1所述的制劑，其特征在于吸收促進(jìn)劑為以下種類中的一或多種，其種類及重量體積百分比含量分別為殼聚糖0.25～1.5％(w/v)羥丙基-β-環(huán)糊精 2～10％(w/v)吐溫-80 2～7％(w/v)甘草酸單銨鹽 0.5～2％(w/v)
3根據(jù)權(quán)利要求2所述的制劑，其特征在于除殼聚糖外的吸收促進(jìn)劑按權(quán)利要求2所述各自的重量體積百分比與0.25～1.0％重量體積百分比的殼聚糖合用。
4根據(jù)權(quán)利要求1，2或3所述的制劑，其特征在于水蛭素為天然水蛭素或通過基因重組技術(shù)制備的重組水蛭素。
5根據(jù)權(quán)利要求1，2或3所述制劑，其特征在于是通過以下方法制備的將處方量的防腐劑加入適量水或生理鹽水中，攪拌(或加熱)使之溶解后，依次加入吸收促進(jìn)劑(必要時(shí)先用丙二醇溶解)、水蛭素?cái)嚢枋怪耆芙夂?，加入剩余部分水或生理鹽水，用醋酸調(diào)pH至規(guī)定值，即得。
6.根據(jù)權(quán)利要求5所述制劑，其特征在于制成滴鼻劑或噴鼻劑。
7.根據(jù)權(quán)利要求5所述制劑，其特征在于再加入常規(guī)比例的常規(guī)輔料制成軟膏劑或凝膠劑。
8.根據(jù)權(quán)利要求1，2或3所述制劑在制備預(yù)防和/或治療各種血栓性疾病的藥物的用途。
全文摘要
本發(fā)明涉及一種抗凝抗栓多肽藥物——水蛭素的給藥新途徑，具體涉及水蛭素通過鼻腔給藥的制劑及其用途。本發(fā)明制劑配方組成為水蛭素、吸收促進(jìn)劑、防腐劑、pH調(diào)節(jié)劑，水或生理鹽水等。以上述配方組成制備的水蛭素鼻腔給藥制劑，可以為滴劑、噴霧劑、凝膠劑或軟膏劑。本發(fā)明制劑的制備工藝為將配方量的防腐劑加入適量水或生理鹽水中，攪拌(或加熱)使之溶解后，依次加入吸收促進(jìn)劑(必要時(shí)先用丙二醇溶解)、水蛭素?cái)嚢枋怪耆芙?，加入剩余部分水或生理鹽水，用醋酸調(diào)pH至4～6，即得。此法可用于滴鼻劑或噴鼻劑的制備；若再加入常規(guī)比例的常規(guī)輔料可制成軟膏劑或凝膠劑。本發(fā)明的制劑主要用于預(yù)防和/或治療各種血栓性疾病的應(yīng)用。
文檔編號(hào)A61K9/72GK1872337SQ20051007340
公開日2006年12月6日 申請(qǐng)日期2005年5月30日 優(yōu)先權(quán)日2005年5月30日
發(fā)明者張玉杰, 張強(qiáng) 申請(qǐng)人:北京中醫(yī)藥大學(xué), 北京大學(xué)醫(yī)學(xué)部