專利名稱：胸腺素口服腸溶微球及制備方法
技術領域：
本發(fā)明屬醫(yī)藥技術領域，涉及胸腺素口服腸溶微球及其制備方法。
背景技術：
動物胸腺中有多種多肽類激素，總稱為胸腺激素。已由小牛胸腺分離精制的胸腺激素有胸腺素(Thymosin)、胸腺體液因子(Thymus humoral factor)、胸腺增生素(Thymopoietin)和胸腺因子(Thymic factor)等多種。臨床上研究最為廣泛的是胸腺素，目前國外臨床試用的主要是由小牛胸腺素純化而得的胸腺素組分5(胸腺素F5，Thymosin fraction 5)，它含12種主要的多肽和20余種次要的肽素，分子量1000～15000。我國生產的豬胸腺素(豬胸腺素F5)系由豬胸腺提取的含8～9種不同等電點的蛋白質組分的混合物，分子量為9000～68000不等，低分子量組分占70％～80％。
胸腺素可使由骨髓產生的干細胞轉變成T細胞，因而有增強細胞免疫功能的作用，對體液免疫的影響甚微。動物試驗表明，它能使去胸腺小鼠部分或接近全部地恢復免疫排異和移植物抗宿主反應，能使萎縮的淋巴組織復生，淋巴細胞增殖，使幼淋巴細胞成熟，變?yōu)橛忻庖吖δ艿牧馨图毎Ｐ叵偎責o明顯的種屬特異性。胸腺素已試用于胸腺發(fā)育不全綜合征、運動失調性毛細血管擴張癥、慢性皮膚粘膜真菌病等免疫缺陷病。對胸腺發(fā)育不全癥患兒可長期應用作替代性治療。用于腫瘤病人，可見大部分患者T細胞數(shù)增多，也見有臨床癥狀改善。對全身性紅斑狼瘡、類風濕性關節(jié)炎等自身免疫性疾病有一定療效。
目前國內外臨床使用的胸腺素制劑主要有注射及口服兩種給藥途徑[1-4]。注射制劑包括注射液和凍干劑。口服制劑為腸溶片和腸溶膠囊。兩者相比口服給藥更具有用藥方便、安全、患者易接受等優(yōu)點，尤其適應長期頻繁用藥患者的需要。由于微球制劑可有效提高多肽蛋白質藥物口服生物利用度，近年也有關于口服胸腺素腸溶微球制劑的研究報道[5]。其胸腺素微球以鄰苯二甲酸醋酸纖維素(CAP)為成球材料，丙酮為溶劑，氯仿為非溶劑，采用溶劑-非溶劑法制備。我們采用改良的油包油乳化溶劑揮發(fā)法，以丙烯酸樹脂II號或III號為成球材料制備得到胸腺素腸溶微球。

發(fā)明內容
本發(fā)明的目的是提供一種胸腺素口服腸溶微球，主要由主藥胸腺素和腸溶基質組成，其特征是每毫克微球中含主藥胸腺素3～30微克(載藥量3～30μg/mg)，腸溶基質為丙烯酸樹脂II號或丙烯酸樹脂III號。
本發(fā)明的另一個目的是提供這種胸腺素口服腸溶微球的制備方法。為了得到具有高包埋率的胸腺素腸溶微球，本發(fā)明采取如下措施內油相由胸腺素水溶液與丙烯酸樹脂乙醇溶液通過機械攪拌獲得，胸腺素水溶液濃度為1-50mg/ml，丙烯酸樹脂乙醇溶液濃度為1.5％-7.5％，外油相采用液體石蠟，內加司盤80和卵磷脂作為復合乳化劑，其中卵磷脂的重量體積比為0.25-1.0％，司盤80的重量體積比為0.15-1.0％，制備時，將外油相置于攪拌容器中，在室溫和每分鐘500轉中速攪拌下緩緩加入內油相，形成油包油乳液，該乳液在室溫下磁力攪拌揮發(fā)內油相溶劑，待微球硬化后，離心分離，用石油醚洗滌，真空干燥即得。
本發(fā)明的技術特點是用一種獨特的復合乳化劑通過油包油乳化溶劑揮發(fā)法制備了胸腺素口服腸溶微球，整個制備方法操作簡便，重現(xiàn)性好，避免有毒有機溶劑的使用。采用本方法制得的微球形態(tài)圓整，大小均勻，粒徑為15-70μm，控制微球制備條件(胸腺素水溶液濃度、丙烯酸樹脂類型、丙烯酸樹脂乙醇液濃度、復合乳化劑用量等)，可使胸腺素微球包埋率達到90％以上，藥物在人工胃液中釋放小于10％，在pH7.2的緩沖液中釋放大于90％，可實現(xiàn)胸腺素的腸定向釋放。
具體實施例方式
下面結合實施例作進一步詳細說明。
實施例1內油相用胸腺素水溶液與丙烯酸樹脂II號乙醇溶液通過機械攪拌獲得。胸腺素水溶液濃度為6mg/ml，與3％丙烯酸樹脂II號乙醇溶液以1∶20的比例通過機械攪拌混合均勻。外油相為50ml液體石蠟，內加0.25％卵磷脂和0.35％司盤80為乳化劑。將外油相置于燒瓶中，室溫下以攪拌速度為500轉/分鐘緩緩加入內油相，形成油包油乳液。該乳液在室溫下電磁攪拌揮發(fā)內油相溶劑，待微球硬化后，離心分離，用石油醚洗滌，真空干燥。所得微球的胸腺素的包埋率為86.1％，載藥量為10μg/mg。人工胃液中2h釋藥37.5％，pH7.2的緩沖液中4h釋藥達94.6％。
實施例2內油相用胸腺素水溶液與丙烯酸樹脂II號乙醇溶液通過機械攪拌獲得。胸腺素水溶液濃度為18mg/ml，與3％丙烯酸樹脂II號乙醇溶液以1∶60的比例通過機械攪拌混合均勻。外油相為50ml液體石蠟，內加0.25％卵磷脂和0.35％司盤80為乳化劑。其余同實施例1。所得微球的胸腺素的包埋率為83.4％，載藥量為20μg/mg。人工胃液中2h釋藥36.8％，pH7.2的緩沖液中4h釋藥92％。
實施例3內油相用胸腺素水溶液與丙烯酸樹脂II號乙醇溶液通過機械攪拌獲得。胸腺素水溶液濃度為36mg/ml，與6％丙烯酸樹脂II號以1∶20的比例通過機械攪拌混合均勻。外油相為50ml液體石蠟，內加0.5％卵磷脂和0.5％司盤80為乳化劑。其余同實施例1。所得微球的胸腺素的包埋率為60.9％，載藥量為17μg/mg。人工胃液中2h釋藥30.5％，pH7.2的緩沖液中4h釋藥達85％。
實施例4內油相用胸腺素水溶液與丙烯酸樹脂II號乙醇溶液通過機械攪拌獲得。胸腺素水溶液濃度為18mg/ml，與6％丙烯酸樹脂II號以1∶60的比例通過機械攪拌混合均勻。外油相為50ml液體石蠟，內加0.25％卵磷脂和0.35％司盤80為乳化劑。其余同實施例1。所得微球的胸腺素的包埋率為86.9％，載藥量為13μg/mg。人工胃液中2h釋藥40.2％，pH7.2的緩沖液中4h釋藥達95％。
實施例5內油相用胸腺素水溶液與丙烯酸樹脂II號乙醇溶液通過機械攪拌獲得。胸腺素水溶液濃度為6mg/ml，與6％丙烯酸樹脂II號以1∶20的比例通過機械攪拌混合均勻。外油相為50ml液體石蠟，內加0.5％卵磷脂和0.5％司盤80為乳化劑。其余同實施例1。所得微球的胸腺素的包埋率為81.9％，載藥量為4μg/mg。人工胃液中2h釋藥9.3％，pH7.2的緩沖液中4h釋藥達86.7％。
實施例6內油相用胸腺素水溶液與丙烯酸樹脂II號乙醇溶液通過機械攪拌獲得。胸腺素水溶液濃度為6mg/ml，與6％丙烯酸樹脂II號乙醇溶液以1∶40的比例通過機械攪拌混合均勻。外油相為50ml液體石蠟，內加0.25％卵磷脂和0.35％司盤80為乳化劑。其余同實施例1。所得微球的胸腺素的包埋率為90.2％，載藥量為5μg/mg。人工胃液中2h釋藥6.5％，pH7.2的緩沖液中4h釋藥達88.4％。
實施例7內油相用胸腺素水溶液與丙烯酸樹脂III號乙醇溶液通過機械攪拌獲得。胸腺素水溶液濃度為6mg/ml，與6％丙烯酸樹脂III號以1∶20的比例通過機械攪拌混合均勻。外油相為50ml液體石蠟，內加0.5％卵磷脂和0.5％司盤80為乳化劑。其余同實施例1。所得微球的胸腺素的包埋率為91.9％，載藥量為4.5μg/mg。人工胃液中2h釋藥8.5％，pH7.2的緩沖液中4h釋藥達87.2％。
實施例8內油相用胸腺素水溶液與丙烯酸樹脂III號乙醇溶液通過機械攪拌獲得。胸腺素水溶液濃度為36mg/ml，與3％丙烯酸樹脂III號以1∶20的比例通過機械攪拌混合均勻。外油相為50ml液體石蠟，內加0.5％卵磷脂和0.5％司盤80為乳化劑。其余同實施例1。所得微球的胸腺素的包埋率為56.9％，載藥量為30μg/mg。人工胃液中2h釋藥42.1％，pH7.2的緩沖液中4h釋藥達92.5％。
無需進一步詳細闡述，相信采用前面所公開的內容，本領域技術人員可最大限度地應用。因此，前面的優(yōu)選具體實施方案應被理解為僅是舉例說明，而非以任何方式限制本發(fā)明的范圍。
本發(fā)明涉及的部分參考文獻1.李惠雄.胸腺口服劑型和臨床實驗.中國藥學雜志.1991.26(4)1932.何樹莊，郝曉敏，袁淑華，等.胸腺肽片劑與注射劑的免疫作用比較.哈爾濱醫(yī)科大學學報.1994，28(4)295-2973.錢林法，王偉祖，劉樺，等.口服胸腺肽結腸溶制劑的藥效學研究I.對環(huán)孢素A免疫抑制BALB/C小鼠的免疫功能的影響.中國生化藥物雜志.1999.20(2)79-814.錢林法，許德義，朱全芽，等.胸腺肽結腸控釋膠囊制劑及胸腺肽提取分離方法發(fā)明專利申請公開說明書申請?zhí)?01123535.張海松，陳陽述，胡軍高，等.口服胸腺肽微球的研究.中國藥房.1999.10(2)58-59
權利要求
1.胸腺素口服腸溶微球，主要由主藥胸腺素和腸溶基質組成，其特征是每毫克微球中含主藥胸腺素3～30微克。
2.根據(jù)權利要求1所述的胸腺素口服腸溶微球，其特征是腸溶基質為丙烯酸樹脂II號或丙烯酸樹脂III號。
3.胸腺素的口服腸溶微球的制備方法，其特征是通過以下步驟實現(xiàn)(1)內油相由藥物胸腺素水溶液與丙烯酸樹脂乙醇溶液通過機械攪拌獲得，胸腺素水溶液濃度為1～50mg/ml，丙烯酸樹脂乙醇溶液濃度為1.5％～7.5％；(2)外油相選用液體石蠟，加入復合乳化劑；(3)將外油相置于攪拌容器中，在室溫和每分鐘500轉中速攪拌下緩緩加入內油相，形成油包油乳液，該乳液在室溫下磁力攪拌揮發(fā)內油相溶劑，待微球硬化后，離心分離，用石油醚洗滌，真空干燥即得。
4.根據(jù)權利要求3所述的胸腺素口服腸溶微球的制備方法，其特征是步驟(1)中丙烯酸樹脂乙醇選自丙烯酸樹脂II號乙醇溶液或丙烯酸樹脂III號乙醇溶液中任一種。
5.根據(jù)權利要求3所述的胸腺素口服腸溶微球的制備方法，其特征是步驟(2)中所說的復合乳化劑由司盤80和卵磷脂組成，其中卵磷脂的重量體積比為0.25～1.0％，司盤80的重量體積比為0.15～1.0％。
6.根據(jù)權利要求3所述的胸腺素口服腸溶微球的制備方法，其特征是步驟(2)中所說的外油相選用液體石蠟。
全文摘要
本發(fā)明公開了一種水溶性多肽蛋白類藥物胸腺素口服腸溶微球及制備方法。該方法采用油包油乳化溶劑揮發(fā)技術，采用內油相和外油相，并加入混合乳化劑。制備時將外油相置于攪拌容器中，中速攪拌下加入內油相，然后在室溫下磁力攪拌揮發(fā)內油相溶劑，待微球硬化后，離心分離，用石油醚洗滌，真空干燥。本發(fā)明可使胸腺素的包埋率提高到60－95％，在人工胃液中釋放藥物小于10％，在人工腸液中釋放藥物90％以上，可實現(xiàn)胸腺素的腸定向釋放。
文檔編號A61P19/02GK1679923SQ20051004901
公開日2005年10月12日 申請日期2005年2月1日 優(yōu)先權日2005年2月1日
發(fā)明者邱利焱, 楊巨飛 申請人:浙江大學