專利名稱：一種主治關(guān)節(jié)炎的中成藥及制備和質(zhì)量控制方法
技術(shù)領(lǐng)域：
本發(fā)明涉及一種由植物為原料的主治關(guān)節(jié)炎的醫(yī)藥配制品及制備和質(zhì)量控制方法；具體涉及“追風(fēng)透骨丸”和“追風(fēng)透骨片”制備方法及質(zhì)量控制方法的改進(jìn)。
背景技術(shù)：
收載于中華人民共和國衛(wèi)生部藥品標(biāo)準(zhǔn)中藥成方制劑第十八冊和第十一冊的治療關(guān)節(jié)炎的中成藥“追風(fēng)透骨丸”和“追風(fēng)透骨片”，它是由制川烏、白芷、制草烏、制香附、甘草、炒白術(shù)、制沒藥、麻黃、川芎、制乳香、秦艽、地龍、當(dāng)歸、茯苓、赤小豆、羌活、天麻、赤芍、細(xì)辛、防風(fēng)、制天南星、桂枝、甘松、朱砂24味中藥材制成，具有通經(jīng)活絡(luò)，祛風(fēng)鎮(zhèn)痛之功效，用于治療風(fēng)寒濕痹，肢節(jié)疼痛，肢體麻木等癥，臨床療效顯著。
“追風(fēng)透骨丸”的原劑型為水蜜丸，采用傳統(tǒng)制丸工藝，藥材未經(jīng)提取而直接以粉末入藥，在制劑過程中加入大量的蜜糖制丸，再用朱砂包衣制成。長期以來存在吸收不完全、服用量大、攜帶不方便、易吸潮霉變、含糖量高，不適合糖尿病人服用等缺點(diǎn)。另外，產(chǎn)品采用朱砂包衣，朱砂含汞量高，長期服用可引起體內(nèi)汞的蓄積，人體有汞蓄積中毒的危險；“追風(fēng)透骨片”中仍含有朱砂，它是將朱砂粉碎成極細(xì)粉入藥，細(xì)辛提取揮發(fā)油入藥，其余22味是用水提物入藥制成的片劑，現(xiàn)有資料顯示，細(xì)辛揮發(fā)油有毒，不宜提取入藥。
據(jù)文獻(xiàn)“謝偉，陸滿文.細(xì)辛揮發(fā)油的化學(xué)與藥理作用.寧夏醫(yī)學(xué)雜志，1995，17(2)121-124”和文獻(xiàn)“柯銘清.中草藥有效成分理化與藥理特性.湖南科學(xué)技術(shù)出版社.1982108”報(bào)道細(xì)辛入藥的主要品種有遼細(xì)辛和華細(xì)辛，其中以遼細(xì)辛的來源豐富、產(chǎn)量大。細(xì)辛揮發(fā)油的主要成分為甲基丁香酚和黃樟醚。其揮發(fā)油毒性遼細(xì)辛油對蛙、小鼠、家兔等均先呈奮，隨后轉(zhuǎn)入抑制，隨意運(yùn)動及呼吸減慢，反射消失，最后因呼駁麻痹而死亡。遼細(xì)辛油的小鼠ipLD50為1.02±0.04ml/kg。未成年大鼠ip遼細(xì)辛油18日，于末次給藥后24小時及1周斷頭處死。其生化學(xué)檢查及病理切片檢查結(jié)果與對照組之間無明顯差異。華細(xì)辛油的小鼠ip MLD為200mg/kg，LD50為247mg/kg。
黃樟醚具有使動物呼吸中樞麻痹及致癌作用。飼料中混入1％黃樟醚2年后，可使28％大鼠發(fā)生肝癌。
因此，為了提高藥物的療效，降低藥物的毒性，有必要改進(jìn)原追風(fēng)透骨丸和原追風(fēng)透骨片的處方和制備方法。

發(fā)明內(nèi)容
本發(fā)明的目的是為了克服上述不足，提供一種療效確切、安全可靠、服用量小、攜帶方便的追風(fēng)透骨丸和追風(fēng)透骨片換代產(chǎn)品，包括膠囊、片劑、濃縮丸等劑型，本發(fā)明的另一個目的是提供該產(chǎn)品的制備方法和質(zhì)量控制方法。
為達(dá)到本發(fā)明的目的，所采用的技術(shù)方案是一種主治關(guān)節(jié)炎的中成藥，是由下列重量百分比藥材量制成，將白芷、麻黃、川芎、當(dāng)歸、羌活、防風(fēng)、桂枝、甘松8味用超臨界CO2萃取法提取脂溶性提取物A；然后將這8味藥材提取脂溶性部位后的藥渣B，加制川烏、制草烏、制香附、甘草、炒白術(shù)、秦艽、地龍、茯苓、天麻、細(xì)辛、制天南星11味藥材一起用40～80％的乙醇溶液提取，所得的醇提物濃縮至稠膏為C；制沒藥、制乳香、赤小豆、赤芍4味藥材粉碎成細(xì)粉，與稠膏C混合均勻，干燥、粉碎后得干膏粉D；干膏粉D和脂溶性提取物A混勻，得藥物E，按常規(guī)的中藥制劑工藝制成口服制劑，用高效液相色譜法測定，1g藥物E干品中含赤芍以芍藥苷(C23H23O11)計(jì)不得少于1.0mg。
處方制川烏 5.21％ 白芷 5.21％ 制草烏5.21％制香附 5.21％ 甘草 5.21％ 炒白術(shù)2.60％制沒藥 1.05％ 麻黃 5.21％ 川芎 5.21％制乳香 2.60％ 秦艽 2.60％ 地龍 5.21％當(dāng)歸2.60％ 茯苓 10.42％赤小豆5.21％羌活5.21％ 天麻 2.60％ 赤芍 5.21％細(xì)辛5.21％ 防風(fēng) 2.60％ 制天南星 5.21％桂枝2.60％ 甘松 2.60％為了服用攜帶方便和適合于臨床使用，所述的口服制劑可以是膠囊劑、片劑、濃縮丸。
為達(dá)到本發(fā)明的另一個目的，提供該產(chǎn)品的制備方法，按如下步驟制備
步驟一取處方量的白芷、麻黃、川芎、當(dāng)歸、羌活、防風(fēng)、桂枝、甘松，置超臨界萃取設(shè)備中，用CO2流體作為萃取介質(zhì)，萃取條件為萃取壓力為24～30MPa，萃取溫度為40～60℃，解析壓力為5～7MPa，解析溫度為30～50℃，萃取時間為1～3小時，從解析釜得到脂溶性提取物A，從萃取釜得到藥渣B；步驟二將步驟一得到的藥渣B，與處方量的藥材制川烏、制草烏、制香附、甘草、炒白術(shù)、秦艽、地龍、茯苓、天麻、細(xì)辛、制天南星，用40～80％的乙醇溶液提取1～3次，每次0.5～3小時，合并提取醇溶液，濾過，濃縮得稠膏C；步驟三取處方量的藥材制沒藥、制乳香、赤小豆、赤芍，粉碎成細(xì)粉，與稠膏C混合均勻，干燥、粉碎后得干膏粉D；步驟四取干膏粉D與脂溶性提取物A混勻，得藥物E；步驟五取藥物E，按常規(guī)的中藥制劑工藝制成口服制劑。
其口服制劑可采用常規(guī)的中藥制劑工藝制備，如取藥物E，加入藥用輔料，經(jīng)制?；虿唤?jīng)制粒直接灌裝膠囊，制成膠囊劑；或取藥物E，加入藥用輔料，經(jīng)制粒，壓制成片劑；或取藥物E，加入藥用輔料，用塑制法或泛制法制成濃縮丸。
本發(fā)明的產(chǎn)品及其制備方法是發(fā)明者采用正交試驗(yàn)法，通過藥效學(xué)篩選獲取的，試驗(yàn)如下1、確定提取條件的正交試驗(yàn)取處方量的藥材制川烏、制草烏、制香附、甘草、炒白術(shù)、秦艽、地龍、茯苓、天麻、細(xì)辛、制天南星等11味，與超臨界萃取后的藥渣B混合，采用正交試驗(yàn)法，以鎮(zhèn)痛、抗炎藥效學(xué)指標(biāo)篩選提取溶劑、溶劑用量、提取時間、提取次數(shù)及粉碎度。正交表選取L16(4)5表，因素水平見表1。
表1 提取因素水平表

2供試品的制備按處方比例稱取藥材，桂枝25g、白芷50g、麻黃50g、川芎50g、當(dāng)歸25g、羌活50g、防風(fēng)25g、甘松25g，粉碎成粗粉，經(jīng)CO2超臨界萃取，萃取條件為萃取壓力26Mpa，萃取溫度40℃，解析壓力6Mpa，解析溫度30℃，萃取時間為3小時。另稱取制川烏50g、制草烏50g、制香附50g、甘草50g、炒白術(shù)25g、秦艽25g、地龍50g、茯苓100g、天麻25g、細(xì)辛50g、制天南星50g，按下表7中16組條件粉碎成不同細(xì)度，與超臨界提取后的藥渣B混合，按下表7中16組不同條件分別提取，濾過，合并濾液，靜置12小時，取上清液，60℃減壓回收乙醇并濃縮至稠膏狀，備用。制沒藥10g、制乳香25g、赤小豆50g、赤芍50g粉碎成細(xì)粉，加入上述稠膏中，混勻，60℃下減壓干燥，粉碎成細(xì)粉。超臨界萃取物用適量乙醇溶解，噴入上述干膏粉中，混勻，即得16組供試品。
3正交試驗(yàn)各組供試品的藥效學(xué)試驗(yàn)所篩選藥物是臨床用于治療關(guān)節(jié)炎的有效方藥，根據(jù)其適應(yīng)癥我們選擇了鎮(zhèn)痛的2個指標(biāo)①對醋酸所致小鼠扭體反應(yīng)的影響②對小鼠熱板法所致疼痛作用的影響；以及抗炎的3個指標(biāo)①對尿酸鈉(MSU)誘發(fā)大鼠足腫脹的影響②對大鼠棉球肉芽腫的影響③對二甲苯所致小鼠耳腫脹試驗(yàn)的影響。通過上述5個指標(biāo)對正交試驗(yàn)各組樣品進(jìn)行了藥效學(xué)試驗(yàn)。
3.1試驗(yàn)材料與劑量3.1.1藥品與試劑追風(fēng)透骨丸為陽性對照藥品；冰醋酸，0.6％醋酸(由冰醋酸配成)；消炎痛，25mg/片；戊巴比妥鈉；肝素鈉注射液；0.9％氯化鈉注射液，500ml/瓶；尿酸(Lancaster)25g/瓶，Morecambe.England，Batch10057758；注射用青霉素鈉，80萬單位/只。
3.1.2動物Wistar大鼠，體重140±30g，昆明種小鼠，體重20±2g，3.1.3劑量的選擇原追風(fēng)透骨丸及原追風(fēng)透骨片的人臨床劑量為4g生藥量/次，2次/日。正交試驗(yàn)各組樣品以得膏量與投料藥材量作相應(yīng)換算，與原制劑服用生藥量相等。選擇大劑量組進(jìn)行實(shí)驗(yàn)，小鼠中劑量相當(dāng)于人臨床劑量的9.01倍，常用按10倍計(jì)算；大鼠中劑量，相當(dāng)于人臨床劑量的6.25倍，常用按7.5倍計(jì)算。在此基礎(chǔ)之上，大劑量小鼠提高至20倍，大鼠提高至15倍。一天兩次的劑量作一次給藥。
3.2方法與結(jié)果3.2.1鎮(zhèn)痛試驗(yàn)(1)對醋酸所致小鼠扭體反應(yīng)的影響取小白鼠，按體重隨機(jī)分18組，每組10只，篩選藥物1、2、3、4、5、6、7、8、9、10、11、12、13、14、15、16劑量分別為0.76、1.16、1.28、1.48、1.00、1.00、1.00、0.88、0.96、1.00、0.79、0.75、0.92、0.88、0.92、0.88g/kg(即g干膏/kg動物，以下相同)；17組為生理鹽水對照組。各組均等容積0.4ml/只灌胃給藥7天，末次給藥30min后，各鼠分別腹腔注射0.6％HAC0.2ml/只，觀察各鼠產(chǎn)生扭體潛伏期、15min內(nèi)扭體次數(shù)及產(chǎn)生扭體反應(yīng)的小鼠數(shù)，計(jì)算鎮(zhèn)痛百分率。結(jié)果見表2。
鎮(zhèn)痛百分率(％)＝(NS對照組扭體數(shù)-給藥組扭體數(shù))/NS對照組扭體數(shù)×100％表2 對醋酸所致小鼠扭體反應(yīng)的影響(x±s，n＝10)

注與生理鹽水對照組比*P＜0.05，**P＜0.01由表可知，篩選藥物7、12、15組能減少扭體次數(shù)，延長產(chǎn)生疼痛反應(yīng)的潛伏期，與陰性對照組比有顯著性差異(P＜0.05)。
(2)對小鼠熱板法所致疼痛作用的影響①取雌性小鼠在22℃室溫條件下，開啟熱板式鎮(zhèn)痛實(shí)驗(yàn)儀，將溫度定于(55±0.5)℃，預(yù)熱10min，然后每次投入1只小鼠記錄小鼠自投入至出現(xiàn)痛反應(yīng)(舔后足)的時間，共測2次，每次間隔5min，求平均值(以平均值不超過30s為合格)。
②篩選合格小鼠190只，分18組，篩選藥物1、2、3、4、5、6、7、8、9、10、11、12、13、14、15、16(0.76、1.16、1.28、1.48、1.00、1.00、1.00、0.88、0.96、1.00、0.79、0.75、0.92、0.88、0.92、0.88g/kg)，17組為生理鹽水對照組。各組均等容積0.4ml/只灌胃給藥，給藥后30、45、60、90、120min同前測定痛反應(yīng)時間2次，求平均值。若小鼠60s仍無痛反應(yīng)，則停止測試，按60s計(jì)算，實(shí)驗(yàn)結(jié)束后按不同時間所測得之痛閾平均值，計(jì)算痛閾提高百分率。結(jié)果見表3。
痛閾提高百分率＝(用藥后平均痛閾值-用藥前平均痛閾值)/用藥前平均痛閾值×100％表3 對小鼠熱板法所致疼痛作用的影響(x±s，n＝10)


注與生理鹽水對照組比*P＜0.05，料P＜0.01由以上熱板實(shí)驗(yàn)結(jié)果可知，篩選藥物2、12組鎮(zhèn)痛作用均于給藥后120min出現(xiàn)，小鼠疼痛反應(yīng)時間及痛閾提高百分率與生理鹽水組比有顯著性差異(P＜0.05)。
3.3.2.2藥物抗炎作用試驗(yàn)(1)對尿酸鈉(MSU)誘發(fā)大鼠足腫脹的影響微晶型尿酸鈉(MSU)的制備取8g尿酸置于1600ml沸水中，調(diào)pH至7.4，再加熱至95℃，室溫冷卻并輕輕攪拌，過濾，得到微晶尿酸鈉，高溫(200℃)滅菌。用前以無菌生理鹽水配成100mg/ml的混懸液。
取雄性大鼠190只，按體重隨機(jī)分18組，每組10只，篩選藥物1、2、3、4、5、6、7、8、9、10、11、12、13、14、15、16(0.57、0.87、0.96、1.11、0.75、0.75、0.75、0.66、0.72、0.75、0.59、0.56、0.69、0.66、0.69、0.66g/kg)，17組為生理鹽水對照組。各組等容積3m1/只，均為致炎前灌胃給藥7天。末次給藥1小時后致炎，無菌操作，給大鼠右后足跖皮下注射MSU(100mg/ml)、0.1ml/只，采用大鼠足爪容積測定法測定致炎前和致炎后不同時間(每小時1次，連續(xù)5～6次)大鼠足爪容積變化，以致炎前、后足爪容積的差值作為腫脹度，計(jì)算各腫脹度及腫脹抑制率，并作t檢驗(yàn)。結(jié)果見表4。
腫脹率(％)＝(致炎后足跖容積-致炎前足跖容積)/致炎前足跖容積×100％腫脹抑制率(％)＝(對照組平均腫脹率-給藥組平均腫脹率)/對照組平均腫脹率×100％
表4對MSU誘導(dǎo)大鼠足腫脹的影響(x±s，n＝10)

注與生理鹽水對照組比*P＜0.05，**P＜0.01由以上結(jié)果可知，篩選藥物2、12組在致炎后3h即出現(xiàn)作用，11組4h出現(xiàn)作用，足腫脹度明顯減小，腫脹抑制率也明顯升高，與對照組比有非常顯著性差異(P＜0.05)，特別是12組3h時出現(xiàn)作用，作用維持至4h仍較明顯(P＜0.05)，說明篩選藥物2、11、12可對抗MSU引起的炎癥反應(yīng)。
(2)對大鼠棉球肉芽腫的影響取雄性大鼠190只，按體重隨機(jī)分19組，每組10只，篩選藥物1、2、3、4、5、6、7、8、9、10、11、12、13、14、15、16(0.57、0.87、0.96、1.11、0.75、0.75、0.75、0.66、0.72、0.75、0.59、0.56、0.69、0.66、0.69、0.66g/kg)，17組為生理鹽水對照組。各組均等容積灌胃給藥3ml/只。乙醚淺麻醉，無菌操作，將兩個脫脂棉球分別植入大鼠兩側(cè)腋窩皮下，棉球形狀應(yīng)和植入部位一樣。
大鼠術(shù)前灌胃給藥3天，術(shù)后再連續(xù)給藥7天，第8天脫臼處死大鼠，取出棉球，置60℃烤箱烤至恒重，減去棉球原重量，即為肉芽腫重量，肉芽腫重量以g表示，比較各組肉芽腫重量，并計(jì)算抑制率，結(jié)果見表5。
腫脹率＝(致炎后足跖容積-致炎前足跖容積)/致炎前足跖容積×100％腫脹抑制率＝(對照組平均腫脹率-給藥組平均腫脹率)/對照組平均腫脹率×100％表5對大鼠棉球肉芽腫的影響(x±s，n＝10)

注與生理鹽水對照組比*P＜0.05，**P＜0.01由以上結(jié)果可知，篩選藥物12(P＜0.05)、15(P＜0.01)能明顯抑制肉芽腫生長，與陰性對照組比有顯著性差異。
(3)對二甲苯所致小鼠耳腫脹試驗(yàn)的影響取昆明種小白鼠190只，按體重隨機(jī)分19組，每組10只，篩選藥物1、2、3、4、5、6、7、8、9、10、11、12、13、14、15、16劑量分別為0.76、1.16、1.28、1.48、1.00、1.00、1.00、0.88、0.96、1.00、0.79、0.75、0.92、0.88、0.92、0.88g/kg；17組為生理鹽水對照組。各組均等容積(0.4ml/只)灌胃給藥7天，末次給藥0.5小時后，將二甲苯涂于小鼠右耳前后兩面，50ul/只，2h后將小鼠頸椎脫臼處死，沿耳廓基線剪下兩耳，用9mm打孔器分別在同一部位打下圓耳片，稱重，計(jì)算腫脹抑制率。結(jié)果見表6。
腫脹度＝(右耳片重量-左耳片重量)/左耳片重量×100％腫脹率＝(對照組平均腫脹度-給藥組平均腫脹度)/對照組平均腫脹度×100％腫脹抑制率＝(對照組平均腫脹率-給藥組平均腫脹率)/對照組平均腫脹率×100％表6 對二甲苯致小鼠耳腫脹度的影響(x±s，n＝10)

注與生理鹽水對照組比*P＜0.05，**P＜0.01
由以上結(jié)果可知，篩選藥物2、10組能明顯抑制二甲苯所致小鼠耳腫脹、提高腫脹抑制率，與生理鹽水組比有顯著性差異(P＜0.05，P＜0.01)。
4藥效學(xué)試驗(yàn)結(jié)果分析根據(jù)以上5種指標(biāo)的藥效學(xué)試驗(yàn)數(shù)據(jù)，采用綜合評價法對正交試驗(yàn)各組結(jié)果進(jìn)行統(tǒng)計(jì)分析。各指標(biāo)的權(quán)重系數(shù)均取0.2，總分為100分，所得5種指標(biāo)得分相加，得各組綜合評分，結(jié)果見表7。計(jì)算公式如下(1)鎮(zhèn)痛指標(biāo)扭體鎮(zhèn)痛百分率評分＝(20/最大鎮(zhèn)痛百分率)×各組鎮(zhèn)痛百分率2h痛閾提高百分率評分＝(20/最大鎮(zhèn)痛提高百分率)×各組痛閾提高百分率(2)抗炎指標(biāo)(3種指標(biāo)計(jì)算方法相同，其中MSU模型取3h結(jié)果)腫脹抑制率評分＝(20/最大腫脹抑制率)×各組腫脹抑制率表7 提取正交試驗(yàn)結(jié)果
從極差R的大小可知，各因素對藥效結(jié)果的影響程度依次為A＞C＞E＞B＞D。根據(jù)K值的大小進(jìn)行直觀分析，確定最佳工藝為A3B4C2D1E2，即藥材粉碎成通過φ0.6cm篩網(wǎng)的粗粒(D1)，與超臨界提取后的藥渣混合后，加7倍量(C2)60％乙醇(A3)提取2次(E2)，每次2小時(B4)。
5本發(fā)明的產(chǎn)品與原追風(fēng)透骨丸、原追風(fēng)透骨片的藥效學(xué)比較為了考察優(yōu)選工藝的合理性與重復(fù)性，根據(jù)優(yōu)選工藝制備了三批產(chǎn)品(藥物E)，分別進(jìn)行了上述5種指標(biāo)的藥效學(xué)試驗(yàn)，并與原追風(fēng)透骨丸及追風(fēng)透骨片進(jìn)行了藥效學(xué)比較，結(jié)果見表8。
表8本發(fā)明的產(chǎn)品與原追風(fēng)透骨丸、原追風(fēng)透骨片的藥效學(xué)比較結(jié)果

注與生理鹽水對照組比較*P＜0.05；**P＜0.01將三批產(chǎn)品藥效結(jié)果的平均值與正交試驗(yàn)各組試驗(yàn)比較可知，扭體鎮(zhèn)痛百分率、MSU 3h腫脹抑制率、肉芽腫脹抑制率均優(yōu)于正交試驗(yàn)各組結(jié)果，熱板2h痛閾提高百分率在各組結(jié)果中列第二，二甲苯耳腫脹抑制率處于中上水平。與原追風(fēng)透骨丸和原追風(fēng)透骨片組比較，本發(fā)明產(chǎn)品的各項(xiàng)指標(biāo)均優(yōu)于該二組結(jié)果。
結(jié)果表明1、本發(fā)明的制備方法合理，產(chǎn)品的鎮(zhèn)痛、抗炎作用優(yōu)于原工藝制備的追風(fēng)透骨丸。
2、采用乙醇溶液提取優(yōu)于水提，治療效果優(yōu)于追風(fēng)透骨片；3、采用60％乙醇溶液提取效果最佳。
本發(fā)明的另一個目的是提供該產(chǎn)品的質(zhì)量控制方法采用高效液相色譜法測定，1g藥物E干品中含赤芍以芍藥苷(C23H23O11)計(jì)不得少于1.0mg。其色譜條件用十八烷基硅烷鍵合硅膠為填充劑，體積濃度為15～30％的甲醇水溶液為流動相，檢測波長為230nm，理論板數(shù)按芍藥苷峰計(jì)算應(yīng)不低于1500；對照品溶液的制備精密稱定芍藥苷對照品，加乙醇或甲醇溶液制成每1ml含0.06mg的溶液，即得；供試品溶液的制備取本品1g，精密稱定，置具塞錐形瓶中，精密加入乙醇或甲醇溶液50ml，密塞，稱定重量，超聲處理，放冷，再稱定重量，用乙醇或甲醇溶液補(bǔ)足減失的重量，搖勻，濾過，取續(xù)濾液，即得；測定法分別精密吸取對照品溶液與供試品溶液各20μl，注入液相色譜儀，測定，即得。
本發(fā)明的有益效果1、本發(fā)明的制備方法合理，產(chǎn)品的鎮(zhèn)痛、抗炎作用優(yōu)于原工藝制備的追風(fēng)透骨丸和追風(fēng)透骨片。
2、產(chǎn)品中無朱砂和細(xì)辛的揮發(fā)油成分，避免了汞蓄積中毒的危險及細(xì)辛揮發(fā)油的毒性，保證了臨床用藥的安全性，因此臨床安全性高于原追風(fēng)透骨丸及原追風(fēng)透骨片。
3、由于在制劑過程中不加蜜糖，糖尿病人服用不會導(dǎo)致血糖增高，因此較原追風(fēng)透骨丸擴(kuò)大了適用人群。
4、原追風(fēng)透骨丸服用劑量為每次6g、每日2次，按新工藝制備的膠囊、片劑、濃縮丸的每次服用劑量為1.2～2g，每日服用次數(shù)不變，因此服用量可減至原制劑的1/3～1/5，患者的治療的依從性大為提高。
5、本發(fā)明中增加了芍藥苷的含量測定，芍藥苷為本品處方中赤芍的主要有效成分，具有解熱、鎮(zhèn)痛、抗炎、抗?jié)兊人幚碜饔?，與本品的療效密切相關(guān)。因此增加該成分的含量測定有利于控制本品的質(zhì)量，從而較原追風(fēng)透骨丸和原追風(fēng)透骨片提高了產(chǎn)品的質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)。


圖1為制備本發(fā)明產(chǎn)品的工藝流程簡圖。
下面通過實(shí)施例進(jìn)一步闡述本發(fā)明的技術(shù)方案。
具體實(shí)施例方式
實(shí)施例1(見圖1)稱取白芷2832g、麻黃2832g、川芎2832g、當(dāng)歸1416g、羌活2832g、防風(fēng)1416g、桂枝1416g、甘松1416g，采用CO2超臨界萃取，萃取條件為萃取壓力為24MPa，萃取溫度為40℃，解析壓力為5MPa，解析溫度為30℃，萃取時間為3小時。得692g脂溶性提取物A及藥渣B15.87kg備用；稱取制川烏2832g、制草烏2832g、制香附2832g、甘草2832g、炒白術(shù)1416g、秦艽1416g、地龍2832g、茯苓5660g、天麻1416、細(xì)辛2832g、制天南星2832g，與超臨界萃取所余藥渣B混合，采用60％乙醇溶液提取，乙醇用量為藥材量的7倍，提取時間為2小時，提取2次，提取液濾過，減壓濃縮至稠膏C，相對密度為1.26(50℃)；稱取制沒藥568g、制乳香1416g、赤小豆2832g、赤芍2832g粉碎成細(xì)粉，與上述稠膏C混合，干燥，粉碎后得干膏粉D，干膏粉D和脂溶性提取物A混勻，得藥物E15.24kg，照高效液相色譜法(中國藥典2000年版一部附錄VID)測定芍藥苷的含量色譜條件用十八烷基硅烷鍵合硅膠為填充劑；21％甲醇水溶液為流動相；檢測波長為230nm。理論板數(shù)按芍藥苷峰計(jì)算為2020；對照品溶液的制備取經(jīng)五氧化二磷減壓干燥器中干燥36小時的芍藥苷對照品，精密稱定，加稀乙醇制成每1ml含0.06mg的溶液，即得；供試品溶液的制備精密稱取本品1.0324g，置具塞錐形瓶中，精密加入稀乙醇50ml，密塞，稱定重量，超聲處理，放冷，再稱定重量，用稀乙醇補(bǔ)足減失的重量，搖勻，濾過，取續(xù)濾液，即得；測定法分別精密吸取對照品溶液與供試品溶液各20μl，注入液相色譜儀，測定，得藥物E的芍藥苷平均含量為1.18mg/g。
實(shí)施例2稱取白芷283.2g、麻黃283.2g、川芎283.2g、當(dāng)歸141.6g、羌活283.2g、防風(fēng)141.6g、桂枝141.6g、甘松141.6g，采用CO2超臨界萃取，萃取條件為萃取壓力為30MPa，萃取溫度為60℃，解析壓力為7MPa，解析溫度為50℃，萃取時間為1小時。得63.1g脂溶性提取物A及藥渣B 1.54kg備用；稱取制川烏283.2g、制草烏283.2g、制香附283.2g、甘草283.2g、炒白術(shù)141.6g、秦艽141.6g、地龍283.2g、茯苓566.0g、天麻141.6、細(xì)辛283.2g、制天南星283.2g，與超臨界萃取所余藥渣B混合，采用40％乙醇溶液提取，乙醇用量為藥材量的8倍，提取時間為0.5小時，提取3次，提取液濾過，減壓濃縮至稠膏C，相對密度為1.26(50℃)；稱取制沒藥56.8g、制乳香141.6g、赤小豆283.2g、赤芍283.2g粉碎成細(xì)粉，與上述稠膏C混合，干燥，粉碎后得干膏粉D，干膏粉D和脂溶性提取物A混勻，得藥物E1.48kg，照高效液相色譜法(中國藥典2000年版一部附錄VID)測定芍藥苷的含量色譜條件用十八烷基硅烷鍵合硅膠為填充劑；30％甲醇水溶液為流動相；檢測波長為230nm。理論板數(shù)按芍藥苷峰計(jì)算為2250；對照品溶液的制備取經(jīng)五氧化二磷減壓干燥器中干燥36小時的芍藥苷對照品，精密稱定，加稀乙醇制成每1ml含0.06mg的溶液，即得；供試品溶液的制備精密稱取本品1.0235g，置具塞錐形瓶中，精密加入稀乙醇50ml，密塞，稱定重量，超聲處理，放冷，再稱定重量，用稀乙醇補(bǔ)足減失的重量，搖勻，濾過，取續(xù)濾液，即得；測定法分別精密吸取對照品溶液與供試品溶液各20μl，注入液相色譜儀，測定，得藥物E的芍藥苷平均含量為1.25mg/g。
實(shí)施例3稱取白芷1416g、麻黃1416g、川芎1416g、當(dāng)歸708g、羌活1416g、防風(fēng)708g、桂枝708g、甘松708g，采用CO2超臨界萃取，萃取條件為萃取壓力為27MPa，萃取溫度為50℃，解析壓力為6MPa，解析溫度為40℃，萃取時間為2小時。得352g脂溶性提取物A及藥渣B 7.95kg備用；稱取制川烏1416g、制草烏1416g、制香附1416g、甘草1416g、炒白術(shù)708g、秦艽708g、地龍1416g、茯苓2830g、天麻708、細(xì)辛1416g、制天南星1416g，與超臨界萃取所余藥渣B混合，采用80％乙醇溶液提取，乙醇用量為藥材量的5倍，提取時間為3小時，提取1次，提取液濾過，減壓濃縮至稠膏C，相對密度為1.26(50℃)；稱取制沒藥284g、制乳香708g、赤小豆1416g、赤芍1416g粉碎成細(xì)粉，與上述稠膏C混合，干燥，粉碎后得干膏粉D，干膏粉D和脂溶性提取物A混勻，得藥物E 7.50kg，照高效液相色譜法(中國藥典2000年版一部附錄VID)測定芍藥苷的含量色譜條件用十八烷基硅烷鍵合硅膠為填充劑；25％甲醇水溶液為流動相；檢測波長為230nm。理論板數(shù)按芍藥苷峰計(jì)算為2340；對照品溶液的制備取經(jīng)五氧化二磷減壓干燥器中干燥36小時的芍藥苷對照品，精密稱定，加稀乙醇制成每1ml含0.06mg的溶液，即得；
供試品溶液的制備精密稱取本品1.0013g，置具塞錐形瓶中，精密加入稀乙醇50ml，密塞，稱定重量，超聲處理，放冷，再稱定重量，用稀乙醇補(bǔ)足減失的重量，搖勻，濾過，取續(xù)濾液，即得；測定法分別精密吸取對照品溶液與供試品溶液各20μl，注入液相色譜儀，測定，得藥物E的芍藥苷平均含量為1.12mg/g。
實(shí)施例4將實(shí)施例1所述的藥物E，經(jīng)以下工藝制成不同制劑(1)膠囊劑取3.81kg藥物E，加入微粉硅膠390g，混勻，制粒，灌裝膠囊，制成10000粒，每粒裝0.42g，測得芍藥苷為0.41mg/粒。
(2)濃縮丸(塑制法)取3.81kg藥物E，加入適量微粉硅膠300g、羧甲基淀粉鈉100g，混勻，采用塑制法，以乙醇溶液制軟材，壓丸條，干燥，包衣，制成45000丸，每丸重0.1g，測得芍藥苷含量為1.03mg/g。
(3)濃縮丸(泛制法)取3.81kg藥物E，加入適量微粉硅膠300g、羧甲基淀粉鈉100g，混勻，以水或乙醇溶液泛丸，干燥，包衣，制成45000丸，每丸重0.1g，測得芍藥苷含量為1.06mg/g。
(4)取3.81kg藥物E，加入適量微粉硅膠400g、羧甲基淀粉鈉150g，混勻，制粒，壓片，包衣，制成10000片。每片重0.45g，測得芍藥苷含量為0.43mg/粒。
權(quán)利要求
1.一種主治關(guān)節(jié)炎的中成藥，含有藥材白芷、麻黃、川芎、當(dāng)歸、羌活、防風(fēng)、桂枝、甘松、制川烏、制草烏、制香附、甘草、炒白術(shù)、秦艽、地龍、茯苓、天麻、細(xì)辛、制天南星、制沒藥、制乳香、赤小豆、赤芍23味的成分，其特征在于由下列重量百分比的藥材制備而成，處方制川烏5.21％白芷5.21％ 制草烏 5.21％制香附5.21％甘草5.21％ 炒白術(shù) 2.60％制沒藥1.05％麻黃5.21％ 川芎5.21％制乳香2.60％秦艽2.60％ 地龍5.21％當(dāng)歸 2.60％茯苓10.42％赤小豆 5.21％羌活 5.21％天麻2.60％ 赤芍5.21％細(xì)辛 5.21％防風(fēng)2.60％ 制天南星5.21％桂枝 2.60％甘松2.60％將白芷、麻黃、川芎、當(dāng)歸、羌活、防風(fēng)、桂枝、甘松8味藥材用超臨界CO2萃取法提取脂溶性提取物A；然后將這8味藥材提取脂溶性部位后的藥渣B，加制川烏、制草烏、制香附、甘草、炒白術(shù)、秦艽、地龍、茯苓、天麻、細(xì)辛、制天南星11味藥材一起用40～80％的乙醇溶液提取，所得的醇提液濃縮至稠膏為C；制沒藥、制乳香、赤小豆、赤芍4味藥材粉碎成細(xì)粉，與稠膏C混合均勻，干燥、粉碎后得干膏粉D；干膏粉D和脂溶性提取物A混勻，得藥物E，按常規(guī)的中藥制劑工藝制成口服制劑，用高效液相色譜法測定，1g藥物E干品中含赤芍以芍藥苷計(jì)不得少于1.0mg。
2.如權(quán)利要求所述的中成藥，其特征在于所述的口服制劑是膠囊劑、片劑、濃縮丸。
3.一種制備權(quán)利要求1所述的中成藥的方法，其特征在于按如下步驟制備步驟一取處方量的白芷、麻黃、川芎、當(dāng)歸、羌活、防風(fēng)、桂枝、甘松，置超臨界萃取設(shè)備中，用CO2流體作為萃取介質(zhì)，萃取條件為萃取壓力為24～30MPa，萃取溫度為40～60℃，解析壓力為5～7MPa，解析溫度為30～50℃，萃取時間為1～3小時，從解析釜得到脂溶性提取物A，從萃取釜得到藥渣B；步驟二將步驟一得到的藥渣B，與處方量的藥材制川烏、制草烏、制香附、甘草、炒白術(shù)、秦艽、地龍、茯苓、天麻、細(xì)辛、制天南星，用40～80％的乙醇溶液提取1～3次，每次0.5～3小時，合并提取醇溶液，濾過，濃縮得稠膏C；步驟三取處方量的藥材制沒藥、制乳香、赤小豆、赤芍，粉碎成細(xì)粉，與稠膏C混合均勻，干燥、粉碎后得干膏粉D；步驟四取干膏粉D與脂溶性提取物A混勻，得藥物E；步驟五取藥物E，按常規(guī)的中藥制劑工藝制成口服制劑。
4.如按權(quán)利要求3所述的中成藥的制備方法，其特征在于所述的步驟五取藥物E，加入藥用輔料，經(jīng)制?；虿唤?jīng)制粒直接灌裝膠囊，制成膠囊劑；或取藥物E，加入藥用輔料，經(jīng)制粒，壓制成片劑；或取藥物E，加入藥用輔料，用塑制法或泛制法制成濃縮丸。
5.如權(quán)利要求1所述的藥物E的質(zhì)量控制方法，其特征在于高效液相色譜法的色譜條件用十八烷基硅烷鍵合硅膠為填充劑，用體積濃度為15～30％的甲醇水溶液作流動相，檢測波長為230nm，理論板數(shù)按芍藥苷峰計(jì)算應(yīng)不低于1500；對照品溶液的制備精密稱定芍藥苷對照品，加乙醇或甲醇溶液制成每1ml含0.06mg的溶液，即得；供試品溶液的制備取本品1g，精密稱定，置具塞錐形瓶中，精密加入乙醇或甲醇溶液50ml，密塞，稱定重量，超聲處理，放冷，再稱定重量，用乙醇或甲醇溶液補(bǔ)足減失的重量，搖勻，濾過，取續(xù)濾液，即得；測定法分別精密吸取對照品溶液與供試品溶液各20μl，注入液相色譜儀，測定，即得。
全文摘要
一種主治關(guān)節(jié)炎的中成藥及制備和質(zhì)量控制方法，具體涉及“追風(fēng)透骨丸”和“追風(fēng)透骨片”制備方法及質(zhì)量控制方法的改進(jìn)。采用白芷等8味用超臨界CO
文檔編號A61K9/20GK1733004SQ20051003665
公開日2006年2月15日 申請日期2005年8月23日 優(yōu)先權(quán)日2005年8月23日
發(fā)明者嚴(yán)志標(biāo), 彭紅英, 王巖, 林偉雄, 陳彥 申請人:廣州敬修堂(藥業(yè))股份有限公司