專利名稱：一種治療潰瘍性結(jié)腸炎的口服結(jié)腸靶向制劑及其制備方法
技術(shù)領(lǐng)域：
本發(fā)明涉及一種治療潰瘍性結(jié)腸炎的口服結(jié)腸靶向制劑，具體地說，是以中藥材為原料制備的藥物及其制備方法和用途，屬中藥領(lǐng)域。
背景技術(shù)：
潰瘍性結(jié)腸炎是一種原發(fā)的，非特異性結(jié)腸慢性疾病。結(jié)腸鏡下可見僅侵犯結(jié)腸的粘膜和粘膜下層，并有糜爛和淺表潰瘍。
目前，西醫(yī)治療潰瘍性結(jié)腸炎主要有以下幾類藥物磺胺類、抗生素類、滅滴靈、激素治療、口服皮質(zhì)激素、局部給藥、免疫抑制劑；上述西藥通過長期藥效試驗(yàn)及臨床試驗(yàn)均證明具有可靠的治療效果，但是，大多毒性大，副作用多，比如磺胺類口服后常有惡心嘔吐、頭痛、全身不適，或引起白細(xì)胞減少、關(guān)節(jié)痛、皮疹、蛋白尿等；抗生素口服易導(dǎo)致胃腸道刺激癥狀；靜脈用藥毒副作用大；免疫抑制劑對(duì)骨髓造血功能影響大，在用藥過程中應(yīng)定期復(fù)查骨髓象；外用洗劑用藥的體位限制，患者使用不方便。
中醫(yī)理論將潰瘍性結(jié)腸炎分屬瀉泄、痢疾、便血、腸風(fēng)、臟毒等范疇。其致病原因有臟腑虛弱、感受外邪、飲食所傷及情志失調(diào)等，其基本病機(jī)為脾胃氣虛、濕熱之邪蘊(yùn)結(jié)于大腸，致熱毒痢疾、腹痛里急后重、下痢膿血。與西藥相比，中醫(yī)藥治療本病具有辨證靈活、治法多樣、療效可觀、毒副作用少等優(yōu)點(diǎn)，且更能針對(duì)潰瘍性結(jié)腸炎的病因。
目前，已有美洲大蠊提取物制劑康復(fù)新液單獨(dú)使用或與其它藥物聯(lián)合使用治療潰瘍性結(jié)腸炎的相關(guān)報(bào)道用康復(fù)新液保留灌腸治療潰瘍性結(jié)腸炎，共21例，顯效13例，有效7例，部分緩解1例，顯效率62.5％(康復(fù)新液保留灌腸治療潰瘍性結(jié)腸炎21例呂文，梅琴娜等中國中西醫(yī)結(jié)合消化雜志2003，11(2).-107-108)；中藥內(nèi)服加康復(fù)新治療慢性非特異性潰瘍性結(jié)腸炎120例，顯效92例，有效28例，總有效率100％，治愈病例中隨訪21例，停藥1年以上均無復(fù)發(fā)(中藥內(nèi)服加康復(fù)新液灌腸治療慢性非特異性潰瘍性結(jié)腸炎120例王萌董華英吉林中醫(yī)藥2003，23(12).-24-24)?？祻?fù)新液有通利血脈、養(yǎng)陰生肌、消炎消腫、改善局部微循環(huán)、促進(jìn)血管再生、促進(jìn)壞死組織脫落、促進(jìn)肉芽組織增生和上皮生長等作用，常用于治療潰瘍、燒傷等，可內(nèi)服、外洗、外敷。結(jié)腸途徑治療主要機(jī)理是利用結(jié)腸黏膜、腸腺潛在功能，排除腸腔和腸黏膜上的細(xì)菌及其產(chǎn)生的毒素、有毒物質(zhì)，局部灌腸易于吸收對(duì)機(jī)體有用物質(zhì)，達(dá)到治療作用。目前多采用口服或灌腸或兩者皆用給藥，康復(fù)新液中由于所含主要成分為氨基酸類，在胃腸道上段易溶、易分解，穩(wěn)定性差，無法口服以高濃度分散于作用部位，最大限度地發(fā)揮療效；雖然灌腸給藥能夠較好解決以上問題，但藥物在結(jié)腸分布不均勻，個(gè)體差異大，而且使用不方便，患者不易接受，且該法未被法定國家藥品標(biāo)準(zhǔn)收載。從上述報(bào)道可知，本發(fā)明提取物僅有外用治療的報(bào)道，沒有口服治療潰瘍性結(jié)腸炎的報(bào)道。
以下是康復(fù)新液用于其它病癥治療的報(bào)導(dǎo)1、康復(fù)新液在尖銳濕疣術(shù)后創(chuàng)面的臨床應(yīng)用 姚春海，李淑文 華西藥學(xué)雜志 2004，19(2).-160-1602、康復(fù)新液治療II度燒傷療效觀察 楊新蕾，張新合 中華中西醫(yī)學(xué)雜志 2004，2(1).-49-503、康復(fù)新液與清熱解毒口服液治療小兒手足口病58例 鄧穎 中國中西醫(yī)結(jié)合雜志 2004，24(2).-164-1644、“康復(fù)新液”治療褥瘡30例的臨床觀察 席小燕，易紅梅等 四川醫(yī)學(xué) 2004，25(2).-249-2495、康復(fù)新液治療糜爛型胃炎112例療效分析 武和平，李萍，鄭昱 上海中醫(yī)藥雜志 2004，38(2).-28-296、康復(fù)新液治療鼻咽癌放療后口腔反應(yīng) 朱效勤 中華現(xiàn)代中兩醫(yī)雜志 2003，1(11).-964-9647、康復(fù)新液含漱治療化療性口腔炎27例 陳旭烽，朱月嬌，李潔 中國藥業(yè) 2003，12(12).-72-728、康復(fù)新液治療糜爛性胃炎60例療效觀察 彭陣雨 醫(yī)學(xué)臨床研究 2003，20(10).-788-7909、痔瘡術(shù)后康復(fù)新液創(chuàng)面換藥療效觀察 金建媚，丁云龍 現(xiàn)代中西醫(yī)結(jié)合雜志 2003，12(18).-1984-198410、康復(fù)新液在惡性血液病病人口腔潰瘍中的應(yīng)用 鐘慧芬 中國基層醫(yī)藥 2003，10(3).-275-27511、康復(fù)新液聯(lián)合法莫替丁治療消化性潰瘍82例 關(guān)云艷，劉萬里等 中國中西醫(yī)結(jié)合消化雜志2003，11(2).-83-8412、康復(fù)新液在放療后皮膚粘膜損傷護(hù)理中的應(yīng)用 姚秀琴，趙海劍等 南方護(hù)理學(xué)報(bào) 2002.9(6)-6-613、康復(fù)新液治療褥瘡10例 林少顏 美國中華臨床醫(yī)學(xué)雜志 2002，4(4).-303-30314、中藥康復(fù)新液與西藥短期化療聯(lián)合治療肺結(jié)核的休會(huì) 肖潔 湖南中醫(yī)藥導(dǎo)報(bào) 2002，8(7).-401-401.40615、超短波合康復(fù)新液治療糖尿病皮膚潰瘍 查天文，聶梅 中國民間療法 2002，10(5).-52-5316、康復(fù)新液治療消化性潰瘍近期療效觀察 梅堅(jiān) 河北醫(yī)學(xué) 2002，8(3).-255-25517、康復(fù)新外治小腸外瘺1例 周瑞堂 中醫(yī)外治雜志 2002，11(2).-54-5418、口服康復(fù)新液治療消化道潰瘍的臨床觀察 譚琳 成都醫(yī)藥 2002，28(2).-89-8919、康復(fù)新液抗實(shí)驗(yàn)性胃潰瘍作用的研究 林青，曹東等 中成藥2001，23(2).-122-124雖然已有使用美洲大蠊提取物治療潰瘍性結(jié)腸炎的報(bào)道，但目前尚無該藥物制備口服結(jié)腸靶向制劑用于治療潰瘍性結(jié)腸炎的相關(guān)報(bào)道。

發(fā)明內(nèi)容
針對(duì)以上問題，本發(fā)明的目的就是提供一種治療潰瘍性結(jié)腸炎的口服結(jié)腸靶向制劑，它是一種新的劑型。
本發(fā)明的另一目的是提供該治療潰瘍性結(jié)腸炎的口服結(jié)腸靶向制劑所用靶向包衣輔料及制劑制備方法。
美洲大蠊為蜚蠊科大蠊屬動(dòng)物美洲大蠊的全蟲；性味咸、寒，具有破瘀，化積，消腫，利尿，解毒的功效。
本發(fā)明提供一種治療潰瘍性結(jié)腸炎的口服結(jié)腸靶向制劑，它是由美洲大蠊(Peripleneta americana(Linnaeus))的提取物與藥學(xué)上可接受的結(jié)腸靶向制劑的輔料混合制成的口服結(jié)腸靶向制劑。所述的藥學(xué)上可接受的結(jié)腸靶向制劑的輔料是丙烯酸樹脂III或EUDRAGIT S100、檸檬酸三乙酯、果膠、羥丙基甲基纖維素(HPMC)中的任意一種或幾種的混合物.。這些結(jié)腸靶向輔料的原理是丙烯酸樹脂III或EUDRAGIT S100不溶于pH值較小的胃及小腸液中，而是溶于pH值較大的結(jié)腸液中，故考慮用一定量丙烯酸樹脂III或EUDRAGIT S100并加入一定量增塑劑檸檬酸三乙酯對(duì)制劑進(jìn)行包衣，制備pH依賴口服結(jié)腸靶向制劑；果膠在胃、腸由于相應(yīng)的酶的缺乏不能被降解，但可被結(jié)腸所特有的果膠酶分解，與HPMC按一定比例混合后，可改善果膠的親水性，兩者聯(lián)用對(duì)制劑進(jìn)行包衣，可制備酶依賴口服結(jié)腸靶向制劑。
具體地，所述的藥學(xué)上可接受的口服結(jié)腸靶向制劑的輔料分別是丙烯酸樹脂III或EUDRAGIT S100、檸檬酸三乙酯，果膠與HPMC，其中混合使用中HPMC的含量為10％~90％，丙烯酸樹脂III或EUDRAGIT S100、檸檬酸三乙酯混合使用的比值范圍是20∶1～2∶1。
所述的口服結(jié)腸靶向制劑是口服結(jié)腸靶向片劑、口服結(jié)腸靶向膠囊、口服結(jié)腸靶向丸劑，具體地是口服結(jié)腸靶向膠囊。
所述治療潰瘍性結(jié)腸炎的口服結(jié)腸靶向制劑，含有18種氨基酸，以原藥材重量為基準(zhǔn)，總氨基酸含量不低于接。
本發(fā)明還提供該治療潰瘍性結(jié)腸炎的口服結(jié)腸靶向制劑的制備方法，它包含以下步驟a、制備含有美洲大蠊(Peripleneta americana(Linnaeus))提取物的半成品b、將a步驟所得半成品與藥學(xué)上可接受的輔料或輔助性成分制備成口服結(jié)腸靶向制劑。
其中a的具體步驟是i、取美洲大蠊加乙醇回流提取，過濾，濾液備用ii、將i步驟得到的濾液脫脂，濃縮成浸膏，干燥，得半成品步驟i中所用的乙醇濃度為70％～90％。
其中本發(fā)明口服結(jié)腸靶向膠囊pH依賴制劑具體制備方法為取半成品粉末，加入等量淀粉及少量滑石粉和羧甲基纖維素鈉混勻，按泛丸工藝制備微丸，得本發(fā)明藥物素丸；配制含丙烯酸樹脂III或EUDRAGIT S100與檸檬酸三乙酯乙醇包衣液，使微丸增重18％，40℃烘干，微丸分裝膠囊，即得本發(fā)明藥物結(jié)腸靶向pH依賴膠囊。
本發(fā)明口服結(jié)腸靶向膠囊酶依賴制劑具體制備方法為取半成品浸膏，加入等量淀粉及少量滑石粉和羧甲基纖維素鈉混勻，按泛丸工藝制備微丸，得本發(fā)明藥物素丸；將含HPMC25％的果膠與HPMC混合包衣輔料，配制成5％的水包衣液；噴入包衣液進(jìn)行包衣，使微丸增重110％，40℃烘干，微丸分裝膠囊，即得本發(fā)明藥物結(jié)腸靶向酶依賴膠囊。
本發(fā)明還提供了該制劑組合物在制備治療潰瘍性結(jié)腸炎的藥物中的用途。
本發(fā)明制劑具有通利血脈、養(yǎng)陰生肌、消炎消腫、改善局部微循環(huán)、促進(jìn)血管再生、促進(jìn)壞死組織脫落、促進(jìn)肉芽組織增生和上皮生長等作用，治療主要機(jī)理是利用結(jié)腸黏膜、腸腺潛在功能，排除腸腔和腸黏膜上的細(xì)菌及其產(chǎn)生的毒素、有毒物質(zhì)，局部灌腸易于吸收對(duì)機(jī)體有用物質(zhì)，達(dá)到治療作用。
本發(fā)明口服結(jié)腸靶向制劑具有劑型新穎、藥物直接定位于靶區(qū)(結(jié)腸)，使靶區(qū)藥物濃度高于其它正常組織，降低全身副作用，且服用方便、服用量更小、物質(zhì)基礎(chǔ)明確、療效更為顯著。
顯然，根據(jù)本發(fā)明的上述內(nèi)容，按照本領(lǐng)域的普通技術(shù)知識(shí)和慣用手段，在不脫離本發(fā)明上述基本技術(shù)思想前提下，還可以做出其它多種形式的修改、替換或變更。
以下通過實(shí)施例形式的具體實(shí)施方式
，對(duì)本發(fā)明的上述內(nèi)容再作進(jìn)一步的詳細(xì)說明。但不應(yīng)將此理解為本發(fā)明上述主題的范圍僅限于以下的實(shí)例。凡基于本發(fā)明上述內(nèi)容所實(shí)現(xiàn)的技術(shù)均屬于本發(fā)明的范圍。
具體實(shí)施例方式
實(shí)例1 pH依賴制劑包衣輔料篩選取美洲大蠊，加乙醇回流提取三次，醇濃度70％~90％，合并提取液，脫脂，干燥，得藥物干粉。加入適量淀粉及滑石粉，羧甲基纖維素鈉，泛丸法制備微丸，得素丸；取不同配比的EUDRAGIT S100與檸檬酸三乙酯溶于95％乙醇制得包衣液進(jìn)行包衣。流化床底噴包衣，以4g/分鐘的速度噴入包衣液對(duì)微丸進(jìn)行包衣，噴氣壓力0.8kg/cm2，進(jìn)風(fēng)溫度34℃，于40℃烘箱中干燥2小時(shí)，微丸裝膠囊，得成品。

采用藥典附錄XC溶出度測(cè)定法中第二法對(duì)以上樣品進(jìn)行釋放度評(píng)價(jià)，即槳法；溶出介質(zhì)人工胃液(0.1mol/l鹽酸溶液)750ml、人工腸液(pH6.8的磷酸鹽緩沖液)1000ml、人工結(jié)腸液(pH.7.8～8.0的磷酸鹽緩沖液)900ml；攪拌槳轉(zhuǎn)速150rpm；溫度37±0.5℃。
制備的結(jié)腸靶向膠囊投入杯中，分別放入人工胃液中，2小時(shí)后取樣5ml(同時(shí)補(bǔ)加等量的溶出介質(zhì))，過0.46μm微濾膜，進(jìn)樣測(cè)定。加入0.2mol/L磷酸鈉溶液250ml，調(diào)節(jié)pH＝6.8，4小時(shí)后取樣5ml(同時(shí)補(bǔ)加等量的溶出介質(zhì))，過0.46μm微濾膜，進(jìn)樣測(cè)定。傾去溶出液，加入900ml人工結(jié)腸液，分別于1、2小時(shí)后取樣5ml(同時(shí)補(bǔ)加等量的溶出介質(zhì))，過0.46μm微濾膜，進(jìn)樣測(cè)定。
測(cè)定結(jié)果具體測(cè)定結(jié)果見下表結(jié)腸靶向膠囊總氨基酸體外累計(jì)釋放百分率(％)

結(jié)果表明樣品4經(jīng)過人工胃液、人工腸液后氨基酸僅釋放總量的7.3％；當(dāng)藥片在人工結(jié)腸液中1小時(shí)后，總氨基酸的釋放量達(dá)76.8％，在結(jié)腸液中2小時(shí)后，藥物基本釋放完全，結(jié)腸定位效果最佳，故該包衣配比最佳。
實(shí)例2 酶依賴制劑包衣輔料篩選取美洲大蠊，加乙醇回流提取三次，醇濃度70％~90％，合并提取液，脫脂，干燥，得藥物干粉。加入適量淀粉及滑石粉，羧甲基纖維素鈉，泛丸法制備微丸，得素丸；取不同配比的果膠與HPMC溶于水中制得5％的包衣液進(jìn)行包衣。流化床底噴包衣，以30ml/h的速度噴入包衣液對(duì)微丸進(jìn)行包衣，噴氣壓力1kg/cm2，進(jìn)風(fēng)溫度70℃，使微丸增重一定比例，于40℃烘箱中干燥3小時(shí)，微丸裝膠囊，得成品。

采用藥典附錄XC溶出度測(cè)定法中第二法對(duì)以上樣品進(jìn)行釋放度評(píng)價(jià)，即槳法；溶出介質(zhì)人工胃液(0.1mol/l鹽酸溶液)750ml、人工腸液(pH6.8的磷酸鹽緩沖液)1000ml、人工結(jié)腸液(pH.7.8～8.0的磷酸鹽緩沖液)900ml，及果膠酶溶液(pH 4)；攪拌槳轉(zhuǎn)速150rpm；溫度37±0.5℃。
制備的結(jié)腸靶向膠囊投入杯中，分別放入人工胃液中，2小時(shí)后取樣5ml(同時(shí)補(bǔ)加等量的溶出介質(zhì))，過0.46μm微濾膜，進(jìn)樣測(cè)定。加入0.2mol/L磷酸鈉溶液250ml，調(diào)節(jié)pH＝6.8，4小時(shí)后取樣5ml(同時(shí)補(bǔ)加等量的溶出介質(zhì))，過0.46μm微濾膜，進(jìn)樣測(cè)定。傾去溶出液，加入900ml人工結(jié)腸液，于1小時(shí)后取樣5ml(同時(shí)補(bǔ)加等量的溶出介質(zhì))，過0.46μm微濾膜，進(jìn)樣測(cè)定。傾去溶出液，加入900ml果膠酶溶液(pH 4)，分別于1、2小時(shí)后取樣5ml(同時(shí)補(bǔ)加等量的溶出介質(zhì))，過0.46μm微濾膜，進(jìn)樣測(cè)定。
測(cè)定結(jié)果具體測(cè)定結(jié)果見下表結(jié)腸靶向膠囊總氨基酸體外累計(jì)釋放百分率(％)

結(jié)果表明樣品6經(jīng)過人工胃液、人工腸液后氨基酸僅釋放總量的9.7％；當(dāng)藥片在人工結(jié)腸液中1小時(shí)后，總氨基酸的釋放量15.6％，加入酶后藥物釋放迅速，2小時(shí)后，藥物基本釋放完全，結(jié)腸定位效果最佳，故該包衣配比最佳。
實(shí)例3 口服結(jié)腸靶向膠囊制備工藝取美洲大蠊1000g，加乙醇回流提取三次，醇濃度70％~90％，合并提取液，脫脂，干燥，得藥物干粉178g。加入淀粉178g，滑石粉5g，羧甲基纖維素鈉5g，泛丸法制備微丸，得素丸330g；取100g丙烯酸樹脂III或EUDRAGIT S100，檸檬酸三乙酯10g，加95％乙醇至1250g，得包衣液。流化床底噴包衣，以4g/分鐘的速度噴入包衣液對(duì)微丸進(jìn)行包衣，噴氣壓力0.8kg/cm2，進(jìn)風(fēng)溫度34℃，使微丸增重18％，于40℃烘箱中干燥2小時(shí)，微丸裝膠囊，得成品。
規(guī)格0.42g/粒，每粒相當(dāng)于原藥材1g。
實(shí)例4 口服結(jié)腸靶向膠囊制備工藝取美洲大蠊1000g，加乙醇回流提取三次，醇濃度70％~90％，合并提取液，脫脂，干燥，得藥物干粉181g。加入淀粉181g，滑石粉5g，羧甲基纖維素鈉5g，泛丸法制備微丸，得素丸330g；取果膠75g，HPMC25g，配制濃度為5％的水包衣液。流化床底噴包衣，以30ml/h的速度噴入包衣液對(duì)微丸進(jìn)行包衣，噴氣壓力1kg/cm2，進(jìn)風(fēng)溫度70℃，使微丸增重110％，于40℃烘箱中干燥3小時(shí)，微丸裝膠囊，得成品。
規(guī)格0.43g/粒，每粒相當(dāng)于原藥材0.667g。
實(shí)例5 口服結(jié)腸靶向片劑制備工藝取美洲大蠊1000g，加乙醇回流提取三次，醇濃度70％~90％，合并提取液，脫脂，干燥，得藥物干粉164g。加入淀粉295g，滑石粉5g，羧甲基纖維素鈉5g，按片劑一般工藝制粒壓片，得素片938片；取100g丙烯酸樹脂III或EUDRAGIT S100，檸檬酸三乙酯10g，加95％乙醇至1250g，得包衣液。包衣鍋包衣，將包衣液以5g/min的速度噴入，包衣鍋轉(zhuǎn)速為20r/min，進(jìn)風(fēng)溫度為70℃，出風(fēng)溫度為30～35℃，使藥片增重12％即得結(jié)腸靶向片。
規(guī)格0.58g/片，每片相當(dāng)于原藥材1g。
實(shí)例6 口服結(jié)腸靶向片劑制備工藝取美洲大蠊1000g，加乙醇回流提取三次，醇濃度70％~90％，合并提取液，脫脂，干燥，得藥物干粉173g。加入淀粉192g，滑石粉5g，羧甲基纖維素鈉5g，按片劑般工藝制粒壓片，得素片1000片；取果膠75g，HPMC25g，配制濃度為5％的水包衣液。包衣鍋包衣，將包衣液以30ml/h的速度噴入，包衣鍋轉(zhuǎn)速為25r/min，進(jìn)風(fēng)溫度為70℃，出風(fēng)溫度為30～35℃，使藥片增重100％即得結(jié)腸靶向片。
規(guī)格0.6g/片，每片相當(dāng)于原藥材0.667g。
實(shí)例7 口服結(jié)腸靶向丸劑制備工藝取美洲大蠊1000g，加乙醇回流提取三次，醇濃度70％~90％，合并提取液，脫脂，干燥，得藥物干粉171g。加入淀粉171g，滑石粉5g，羧甲基纖維素鈉5g，泛丸法制備微丸，得素丸342g；取100g丙烯酸樹脂III或EUDRAGIT S100，檸檬酸三乙酯10g，加95％乙醇至1250g，得包衣液。包衣鍋包衣，將包衣液以5g/min的速度噴入，包衣鍋轉(zhuǎn)速為26r/min，進(jìn)風(fēng)溫度為70℃，出風(fēng)溫度為30～35℃，使藥丸增重15％，即得口服結(jié)腸靶向丸劑。
規(guī)格2g/15丸，每丸含原藥材0.32g。
實(shí)例8 口服結(jié)腸靶向丸劑制備工藝取美洲大蠊1000g，加乙醇回流提取三次，醇濃度70％~90％，合并提取液，脫脂，干燥，得藥物干粉180g。加入淀粉180g，滑石粉5g，羧甲基纖維素鈉5g，泛丸法制備微丸，得素丸360g；取果膠75g，HPMC25g，配制濃度為5％的水包衣液。包衣鍋包衣，將包衣液以30ml/h的速度噴入，包衣鍋轉(zhuǎn)速為28r/min，進(jìn)風(fēng)溫度為70℃，出風(fēng)溫度為30～35℃，使藥丸增重100％，即得口服結(jié)腸靶向丸劑。
規(guī)格2g/15丸，每丸含原藥材0.21g。
以下以實(shí)例3所制備膠囊制劑為例說明本發(fā)明制劑質(zhì)量控制方法實(shí)例9 實(shí)例3制劑質(zhì)量控制方法1、定性鑒別對(duì)照品溶液的制備分別取甘氨酸和丙氨酸0.005g，置5ml容量瓶中，用75％乙醇溶解，定容至刻度。
樣品溶液的制備取出膠囊內(nèi)容物，研磨成粉，取0.1g粉末，加75％乙醇2ml溶解，濾過，取濾液。
展開劑∶正丁醇∶甲酸∶水(75∶15∶10)薄層板硅膠G板展開方式預(yù)平衡15分鐘；上行展開；展距10~13cm顯色0.5％茚三酮丙酮溶液色譜識(shí)別日光下顯色后檢視，在相應(yīng)位置可見斑點(diǎn)。
2、含量測(cè)定美洲大蠊提取物含有多種氨基酸。原標(biāo)準(zhǔn)采用紫外分光光度法測(cè)定總氨基酸含量。本發(fā)明使用氨基酸自動(dòng)分析儀對(duì)各主要氨基酸及總氨基酸含量進(jìn)行測(cè)定2.1儀器日立835-50型氨基酸自動(dòng)分析儀2.2分析條件離子交換柱2.6mm×150mm可見光檢測(cè)器波長570nm；440nm(Pro，Hypro)流動(dòng)相檸檬酸和檸檬酸納的緩沖液流速柱泵0.225ml/min茚三酮泵0.3ml/min2.3樣品制備將樣品研成粉末，精確稱取樣品粉末約100mg，加6mol/L鹽酸置15ml安瓶中，真空封管酸水解，置于110℃烘箱中水解24小時(shí)。冷卻后移入25ml量瓶中，并用6mol/L鹽酸稀釋至刻度。然后蒸去鹽酸，用0.02mol/L的鹽酸溶解，供測(cè)試用。
2.4測(cè)定方法準(zhǔn)確吸取0.200ml混合氨基酸標(biāo)準(zhǔn)，用pH2.2的緩沖液稀釋至5ml，作為上機(jī)測(cè)定用的氨基酸標(biāo)準(zhǔn)，用氨基酸自動(dòng)分析儀以外標(biāo)法測(cè)定樣品液的氨基酸含量。測(cè)定結(jié)果見表表1 美洲大蠊結(jié)腸靶向膠囊氨基酸含量測(cè)定(％)

以下通過藥效學(xué)對(duì)比試驗(yàn)證明本發(fā)明的有益效果。
實(shí)驗(yàn)例1 本發(fā)明藥物不同給藥方式的藥效學(xué)對(duì)比試驗(yàn)1、實(shí)驗(yàn)動(dòng)物SD大鼠，雌雄各半，體重200～250g；2、潰瘍性結(jié)腸炎的動(dòng)物模型的造模方法將實(shí)驗(yàn)動(dòng)物禁食24小時(shí)后，排凈大便，用乙醚麻醉動(dòng)物，采用內(nèi)徑為3mm的輸液管將濃度為33.33mg/ml三硝基苯磺酸的30％乙醇溶液0.6ml導(dǎo)入距肛門8cm處，使動(dòng)物保持平躺，自然清醒。
3、實(shí)驗(yàn)方案將藥物浸膏配制成含原生灌胃給予初步擬訂的處方三天，第四天造模，再連續(xù)給藥七天，第八天處死動(dòng)物，取自肛門以上8cm結(jié)腸，縱剖開，用冰生理鹽水洗去腸內(nèi)糞便等內(nèi)容物，用10％甲醛固定，石蠟包埋，切片4μm，HE染色，光鏡下觀察結(jié)腸潰瘍、炎癥情況、病變深度及纖維化程度等病理變化，以表示結(jié)腸病變及藥物對(duì)其影響作用；4、分組情況分為模型組、陽性對(duì)照組、受試藥物組，每組動(dòng)物各10只。
受試藥物含原藥材1g/ml的水溶液模型組除造模外，每天給予相同量的生理鹽水；陽性對(duì)照組除造模外，每天給予0.3g柳氮磺吡啶/kg(柳氮磺吡啶片，海南紅惠制藥有限公司，批號(hào)030101)；受試藥物組除造模外，每天給予本發(fā)明藥物水煎液，劑量為0.66ml/kg；實(shí)驗(yàn)結(jié)果見下表不同給藥方式實(shí)驗(yàn)結(jié)果

注I為模型組，II為陽性對(duì)照組，III為灌胃給藥組，IV為灌腸給藥組，與模型組比較★P＜0.05★★P＜0.01。
結(jié)果表明，灌胃給藥，具有能減小結(jié)腸潰瘍、減輕其炎癥、降低其病變深度和纖維化程度的趨勢(shì)；而灌腸給藥組與模型組比較各項(xiàng)指標(biāo)具有顯著性差異，治療效果優(yōu)于灌胃給藥。
實(shí)驗(yàn)例2 本發(fā)明藥物結(jié)腸靶向制劑與普通口服制劑的藥效學(xué)對(duì)比實(shí)驗(yàn)1、實(shí)驗(yàn)動(dòng)物、潰瘍性結(jié)腸炎動(dòng)物模型的造模方法同實(shí)驗(yàn)例1；2、分組情況分為模型組、陽性對(duì)照組、普通制劑給藥組、結(jié)腸靶向給藥組1，結(jié)腸靶向給藥組2、每組動(dòng)物各10只；3、實(shí)驗(yàn)方案除給藥方式采用直接將藥物小丸塞入大鼠胃部外，其余同實(shí)驗(yàn)例1；4、給藥方案模型組除造模外，每天給予相同量的生理鹽水；陽性對(duì)照組除造模外，每天給予0.3g柳氮磺吡啶/kg(柳氮磺吡啶片，海南紅惠制藥有限公司，批號(hào)030101)；普通制劑給藥組，每天自胃部給予普通藥物制劑，劑量按原藥材計(jì)為0.66g/kg結(jié)腸靶向制劑給藥組，按實(shí)例3方法制備，每天自胃部給予結(jié)腸靶向制劑，劑量按原藥材計(jì)為0.66g/kg。
實(shí)驗(yàn)結(jié)果見下表普通制劑與結(jié)腸靶向制劑藥效對(duì)比實(shí)驗(yàn)結(jié)果

注I為模型組，II為陽性對(duì)照組，III為普通制劑給藥組，IV為結(jié)腸靶向給藥組，與模型組比較★P＜0.05★★P＜0.01。
結(jié)果表明本發(fā)明藥物普通制劑、結(jié)腸靶向制劑給藥治療后，各項(xiàng)指標(biāo)與模型組比較均得到改善，其中結(jié)腸靶向制劑效果更好，各項(xiàng)指標(biāo)與模型組比較有極顯著性差異。
以下以實(shí)例3中結(jié)腸靶向膠囊制劑為例說明本發(fā)明結(jié)腸靶向制劑的優(yōu)越性。
實(shí)驗(yàn)例3 結(jié)腸靶向制劑靶向性的體內(nèi)外釋放度評(píng)價(jià)1、本發(fā)明結(jié)腸靶向制劑體外釋放度試驗(yàn)1.1體外釋放度測(cè)定條件采用藥典附錄XC溶出度測(cè)定法中第二法，即槳法；溶出介質(zhì)人工胃液(0.1mol/l鹽酸溶液)750ml、人工腸液(pH6.8的磷酸鹽緩沖液)1000ml、人工結(jié)腸液(pH.7.8～8.0的磷酸鹽緩沖液)900ml；攪拌槳轉(zhuǎn)速150rpm；溫度37±0.5℃。
1.2體外釋放度含量測(cè)定方法選用總氨基酸為指標(biāo)，采用氨基酸自動(dòng)分析儀進(jìn)行測(cè)定。
1.3體外釋放度測(cè)定將實(shí)例3制備的結(jié)腸靶向膠囊投入杯中，分別放入人工胃液中，2小時(shí)后取樣5ml(同時(shí)補(bǔ)加等量的溶出介質(zhì))，過0.46μm微濾膜，進(jìn)樣測(cè)定。加入0.2mol/L磷酸鈉溶液250ml，調(diào)節(jié)pH＝6.8，4小時(shí)后取樣5ml(同時(shí)補(bǔ)加等量的溶出介質(zhì))，過0.46μm微濾膜，進(jìn)樣測(cè)定。傾去溶出液，加入900ml人工結(jié)腸液，分別于1、2小時(shí)后取樣5ml(同時(shí)補(bǔ)加等量的溶出介質(zhì))，過0.46μm微濾膜，進(jìn)樣測(cè)定。
1.4測(cè)定結(jié)果具體測(cè)定結(jié)果見下表結(jié)腸靶向膠囊總氨基酸體外累計(jì)釋放百分率(％)

結(jié)果表明本發(fā)明藥物結(jié)腸靶向膠囊，經(jīng)過人工胃液、人工腸液后氨基酸僅釋放總量的8.6％；當(dāng)藥片在人工結(jié)腸液中1小時(shí)后，總氨基酸的釋放量達(dá)85.5％，在結(jié)腸液中2小時(shí)后，藥物基本釋放完全。
1.5結(jié)論通過上述實(shí)驗(yàn)結(jié)果表明，該制劑在體外能達(dá)到良好的結(jié)腸靶向釋藥的目的。
2.體內(nèi)釋放度研究2.1受試藥物包相同衣層的醫(yī)用硫酸鋇微丸裝膠囊。
2.2試驗(yàn)方法試驗(yàn)前12小時(shí)服用3g番瀉葉煎液，等腹瀉排空腸道后，服用硫酸鋇膠囊5粒，每隔0.5～1小時(shí)，在X光機(jī)上觀察硫酸鋇膠囊在腸道中的位置及崩解情況。
2.3試驗(yàn)對(duì)象胃腸功能正常的成年男女志愿者受試者各3人。
2.4試驗(yàn)結(jié)果具體實(shí)驗(yàn)結(jié)果見下表本發(fā)明藥物結(jié)腸靶向膠囊體內(nèi)釋放結(jié)果

從上表可以看出各受試者的胃排空時(shí)間0.5～2.0h、小腸轉(zhuǎn)運(yùn)時(shí)間2.5～4.0h、到達(dá)回盲部時(shí)間3.5～5.5h，存在較大個(gè)體差異；藥物的釋藥部位不受胃腸道轉(zhuǎn)運(yùn)時(shí)間差異的影響，除有一例達(dá)到升結(jié)腸后開始釋藥外，都集中在回盲部崩解釋藥；受試藥物的崩解時(shí)間在不同個(gè)體間較穩(wěn)定，集中在1.0～2.5h。
2.5結(jié)論從體內(nèi)試驗(yàn)結(jié)果可以得出結(jié)論該藥物制劑能達(dá)到結(jié)腸靶向給藥的目的。
通過上述藥效實(shí)驗(yàn)說明，本發(fā)明口服結(jié)腸靶向制劑治療潰瘍性結(jié)腸炎，能顯著減小結(jié)腸潰瘍、減輕其炎癥、降低其病變深度和纖維化程度的趨勢(shì)，具有較好的療效。選擇本發(fā)明藥物結(jié)腸靶向制劑給藥，效果更好，通過靶向制劑輔料的選擇、使用，達(dá)到了靶向功效，且服用方便、服用量小、物質(zhì)基礎(chǔ)明確、療效確切。
權(quán)利要求
1.一種治療潰瘍性結(jié)腸炎的口服結(jié)腸靶向制劑，其特征在于它是由含有美洲大蠊(Peripleneta americana(Linnaeus))的提取物與藥學(xué)上可接受的結(jié)腸靶向制劑的輔料混合制成的口服結(jié)腸靶向制劑。
2.根據(jù)權(quán)利要求1所述治療潰瘍性結(jié)腸炎的口服結(jié)腸靶向制劑，其特征在于所述的藥學(xué)上可接受的結(jié)腸靶向制劑的輔料是丙烯酸樹脂III或EUDRAGIT S100、檸檬酸三乙酯、果膠、羥丙基甲基纖維素(HPMC)中的任意一種或幾種的混合物。
3.根據(jù)權(quán)利要求2所述治療潰瘍性結(jié)腸炎的口服結(jié)腸靶向制劑，其特征在于所述的藥學(xué)上可接受的結(jié)腸靶向制劑的輔料是丙烯酸樹脂III或EUDRAGIT S100，檸檬酸三乙酯，其中混合使用的重量比值范圍是20∶1～2∶1。
4.根據(jù)權(quán)利要求2所述治療潰瘍性結(jié)腸炎的口服結(jié)腸靶向制劑，其特征在于所述的藥學(xué)上可接受的結(jié)腸靶向制劑的輔料是果膠、羥丙基甲基纖維素(HPMC)，其中混合使用中HPMC的重量含量為10％~90％。
5.根據(jù)權(quán)利要求1所述治療潰瘍性結(jié)腸炎的口服結(jié)腸靶向制劑，其特征在于所述的口服結(jié)腸靶向制劑是口服結(jié)腸靶向片劑、口服結(jié)腸靶向膠囊、口服結(jié)腸靶向丸劑。
6.根據(jù)權(quán)利要求5所述治療潰瘍性結(jié)腸炎的口服結(jié)腸靶向制劑，其特征在于所述的口服結(jié)腸靶向制劑是口服結(jié)腸靶向膠囊。
7.根據(jù)權(quán)利要求5、6所述治療潰瘍性結(jié)腸炎的口服結(jié)腸靶向制劑，其特征在于它含有18種氨基酸，以原藥材重量為基準(zhǔn)，總氨基酸含量不低于0.1mg/g。
8.權(quán)利要求1所述的治療潰瘍性結(jié)腸炎的口服結(jié)腸靶向制劑的制備方法，它包含以下步驟a、制備含有美洲大蠊(Peripleneta americana(Linnaeus))提取物的半成品b、將a步驟所得半成品與藥學(xué)上可接受的輔料或輔助性成分制備成口服結(jié)腸靶向制劑。
9.根據(jù)權(quán)利8所述治療潰瘍性結(jié)腸炎的口服結(jié)腸靶向制劑的制備方法，其特征在于步驟a的具體步驟是i、取美洲大蠊加乙醇回流提取，過濾，濾液備用ii、將i步驟得到的濾液脫脂，濃縮成浸膏，得半成品。
10.根據(jù)權(quán)利9所述治療潰瘍性結(jié)腸炎的口服結(jié)腸靶向制劑的制備方法，其特征在于步驟a的具體步驟中所用的乙醇濃度為70％～90％。
11.權(quán)利要求1～7任一項(xiàng)所述的口服結(jié)腸靶向制劑在制備治療潰瘍性結(jié)腸炎藥中的應(yīng)用。
全文摘要
本發(fā)明提供了一種治療潰瘍性結(jié)腸炎的中藥制劑，它是由美洲大蠊提取物為原料制備而成的口服結(jié)腸靶向制劑，本發(fā)明還提供了該靶向制劑的制備方法和用途。該制劑具有劑型新穎美觀、藥物直接定位于靶區(qū)(結(jié)腸)，使靶區(qū)藥物濃度富集，降低全身副作用，且服用方便、服用量小、物質(zhì)基礎(chǔ)明確、療效更為顯著。
文檔編號(hào)A61P1/00GK1853655SQ20051002080
公開日2006年11月1日 申請(qǐng)日期2005年4月28日 優(yōu)先權(quán)日2005年4月28日
發(fā)明者楊明, 邱雪蘭, 謝興亮, 肖禾 申請(qǐng)人:楊明