專利名稱：稠合的五環(huán)聚醚的制作方法
技術(shù)領(lǐng)域：
本發(fā)明涉及多環(huán)聚醚化合物、含有該化合物的藥物組合物和使用該化合物和藥物組合物治療疾病的方法。更具體地說(shuō)，本發(fā)明涉及從海洋甲藻(marine dinoflagellate)K.brevis中分離的天然多環(huán)聚醚化合物“brevenal”，及其衍生物。本發(fā)明還涉及治療雙鞭甲藻神經(jīng)毒素中毒和西加毒素(ciguatoxin)中毒、以及特征為粘液清除率降低和粘液纖毛功能障礙的疾病的藥物組合物和方法，包括該化合物和藥物組合物。
背景技術(shù)：
粘液清除率降低是例如囊性纖維化、慢性阻塞性氣道疾病(也稱為慢性阻塞性肺病(COPD))和哮喘之類的疾病的病理學(xué)特性。受損的粘液清除率也能夠?qū)е路尾扛腥竞蜌獾拦Ｗ璧陌l(fā)病率增大。特別是，囊性纖維化的特征在于氣道上皮細(xì)胞的功能異常。囊性纖維化(或“CF”)是由編碼存在于沿著肺和其它器官的導(dǎo)氣道的上皮細(xì)胞表面上的Na+/Cl-轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白的有缺陷的基因引起的。在該基因中識(shí)別出數(shù)百種變異，所有的變異均導(dǎo)致上皮細(xì)胞的鈉和氯化物的有缺陷的輸送。囊性纖維化(CF)是高加索人中最常見(jiàn)的常染色體隱性遺傳疾病，這種遺傳疾病在美國(guó)引起早產(chǎn)兒死亡。其由第七染色體中編碼囊性纖維化跨膜傳信道調(diào)節(jié)因子(CFTR)的變異引起。CFTR編碼頂膜上皮蛋白，該蛋白起到cCAMP-調(diào)節(jié)的氯化物通道和上皮鈉通道調(diào)節(jié)劑的作用。在CF患者中觀察到的CFTR的缺陷或缺乏可以視為纖毛超微結(jié)構(gòu)、鈉離子和氯離子遷移、以及經(jīng)過(guò)氣道上皮細(xì)胞的水遷移的變化。這些變化可導(dǎo)致粘液增厚和粘液纖毛清除率降低，從而導(dǎo)致氣道感染。這顯示正常肺組織中的CFTR可以通過(guò)向下調(diào)節(jié)鈉離子經(jīng)過(guò)氣道上皮的傳導(dǎo)率和降低進(jìn)入細(xì)胞的水遷移來(lái)調(diào)節(jié)ENaC，從而導(dǎo)致更少的粘性粘液和更快速的粘液纖毛清除率。
CF目前的治療方法集中于幾種不同的療法，但迄今為止最有效的治療方法是改變粘液粘度和治療在增厚粘液捕獲細(xì)菌時(shí)出現(xiàn)的肺部感染的化合物。增加粘液纖毛清除率的療法通常有兩種不同的策略目標(biāo)。第一種是使用例如阿米洛利及其衍生物的鈉通道阻塞劑來(lái)調(diào)節(jié)進(jìn)入頂端上皮細(xì)胞的鈉吸收。通過(guò)降低鈉吸收，進(jìn)入上皮細(xì)胞的流體遷移受到限制，并且表面液體體積規(guī)格化。
第二種策略是采用以嘌呤能受體(purinergic receptor)(即UTP和INS37217)為靶的化合物，該化合物激活氣道上皮細(xì)胞中氯化物的分泌，這種氯化物的分泌依次降低鈉吸收和增加表面液體體積。嘌呤能受體也被認(rèn)為調(diào)節(jié)粘蛋白分泌，并且被認(rèn)為涉及纖毛搏動(dòng)的激活。通過(guò)增加纖毛擺動(dòng)頻率，粘液遷移增加，這將更快速地從肺中清除細(xì)菌和其它粒子。
這些觀察結(jié)果顯示，鈉通道的激活能夠?qū)е抡骋呵宄屎椭夤苁湛s方面的缺陷，這兩者均與包括CF在內(nèi)的氣道疾病相關(guān)。
如果電壓門控鈉通道的激活引起肺疾病，則電壓門控鈉通道的有效調(diào)節(jié)能夠用于與粘液纖毛功能障礙相關(guān)的氣道病狀，例如哮喘、慢性阻塞性肺病、肺感染(例如，肺炎、假單胞菌屬)和囊性纖維化。因此，存在對(duì)能夠調(diào)節(jié)經(jīng)過(guò)上皮細(xì)胞頂膜的水遷移的活化劑的需要，這些化合物將用于調(diào)節(jié)粘液清除率，以及治療或預(yù)防與粘液纖毛功能障礙相關(guān)的病癥或疾病。
已知佛羅里達(dá)紅潮對(duì)海洋生物和人類兩者均具有不利影響。這些浪潮與大規(guī)模的魚類死亡、海洋哺乳動(dòng)物死亡率、甚至和人類疾病有關(guān)。由紅潮引起的人類疾病包括通過(guò)接觸或吸入而導(dǎo)致的呼吸刺激和由消耗曝露或污染的海鮮而引起的神經(jīng)中毒性蛤貝中毒(NSP)(Purkerson-Parker等，Chemistry and Biology，2000，7385-393；Baden，D.G.等，Toxicon，1982；20(5)929-932；Baden，D.G.等，Int.Rev.Cytol.，1983；8299-150)。NSP的癥狀包括惡心、嘔吐、腹瀉和支氣管收縮(Purkerson-Parker等，2000)。紅潮有機(jī)體中的病原體被分離和識(shí)別為雙鞭甲藻神經(jīng)毒素(brevetoxin)。
西加魚中毒(ciguatera fish poisoning)(CFP)是一種由亞熱帶和熱帶海洋魚類的消費(fèi)而引起的人類中毒，這些海洋魚類通過(guò)其飲食累積天然毒素。這些毒素已知源自低緯度西加毒(ciguatera)特有區(qū)域中常見(jiàn)的幾種甲藻(藻類)種類。西加魚中毒最常涉及的海洋魚類包括石斑魚(grouper)、梭魚、笛鯛魚(snapper)、狗魚(jack)、鯖魚和鱗鲀(triggerfish)。許多其它種類的暖水魚類可以含有西加毒素。有毒的魚的出現(xiàn)是零星的，并不是所有特定種類或來(lái)自特定地點(diǎn)的魚都是有毒的。
中毒的初始體征發(fā)生在毒魚消費(fèi)之后六小時(shí)內(nèi)，典型地包括胃腸病癥(例如，惡心、嘔吐和腹瀉)、神經(jīng)學(xué)病癥(例如，加劇的感覺(jué)錯(cuò)亂、關(guān)節(jié)疼痛、肌肉疼痛、頭痛、溫度感覺(jué)顛倒和對(duì)溫度極限非常敏感、眩暈和肌肉無(wú)力)、以及心血管病癥(例如，心律不齊、心動(dòng)過(guò)緩或心動(dòng)過(guò)速和低血壓)的組合。限定在這些常見(jiàn)種類中的癥狀根據(jù)毒魚的地理來(lái)源而改變。CFP的診斷不能令人滿意，其通?；诨颊甙Y狀和最近的飲食史。
西加魚毒通常是自限制的，中毒的體征通常在從發(fā)作開(kāi)始的幾天之內(nèi)消退。然而，已知在重癥的情況下神經(jīng)學(xué)癥狀會(huì)持續(xù)幾周到幾個(gè)月。在幾個(gè)單獨(dú)的病例中，神經(jīng)學(xué)癥狀持續(xù)了幾年，并且在其它病例中恢復(fù)的患者在恢復(fù)后的幾個(gè)月到幾年經(jīng)歷了神經(jīng)學(xué)癥狀的復(fù)發(fā)。這樣的復(fù)發(fā)最經(jīng)常與飲食習(xí)慣的變化或酒精的消費(fèi)相關(guān)。因呼吸道和心血管衰竭而導(dǎo)致的死亡的發(fā)生率低。
目前對(duì)西加魚毒的治療遠(yuǎn)不能令人滿意。通常使用甘露醇靜脈給藥，但是通常僅僅在曝露的最初48-72小時(shí)中使用才會(huì)有效。慢性CFP的治療通常是針對(duì)癥狀的。
CFP和NFP被認(rèn)為是在被稱為位點(diǎn)5(site 5)的電壓門控鈉通道上的普通受體位點(diǎn)處經(jīng)由結(jié)合(binding)來(lái)誘導(dǎo)的。在位點(diǎn)5處通過(guò)雙鞭甲藻神經(jīng)毒素或西加毒素的結(jié)合導(dǎo)致在正常休止電位下鈉離子的大量流入。
因此，存在對(duì)這樣一種活化劑的需要該活化劑能夠充當(dāng)用于結(jié)合雙鞭甲藻神經(jīng)毒素或西加毒素到電壓門控鈉通道的拮抗劑，該拮抗劑用于減輕受NSP和CFP侵襲的人的神經(jīng)學(xué)和胃腸效果。

發(fā)明內(nèi)容
我們已經(jīng)發(fā)現(xiàn)一種具有作為雙鞭甲藻神經(jīng)毒素拮抗劑的活性的稠合的五環(huán)聚醚化合物。這種化合物，Brevenal，是從例如K.brevis及其它紅潮有機(jī)體的天然源中純化分離的。因此，在一個(gè)方面，本發(fā)明提供可以由以下結(jié)構(gòu)式表示的化合物Brevenal 在一個(gè)寬的方面，本發(fā)明提供結(jié)構(gòu)式I的化合物及其藥學(xué)可接受的鹽 其中，R是C1-C12烷基、C2-C12烯基、C1-C12烷基酯、C1-C12烷基酰胺、C4-C12烯基酯、C1-C12烷基芳基酯、C4-C12烯基芳基酯、C4-C12烯基酰胺、C1-C12烷氧基、甲?；鵆1-C12烷基、甲?；鵆2-C12烯基、烷酰基C1-C12烷基、烷?；鵆2-C12烯基、羧基C1-C12烷基、羧基C2-C12烯基，其中烷基和烯基任選地被由1-6個(gè)選自C3-C12環(huán)烷基、C3-C12雜環(huán)基、芳基、雜芳基、C1-C6烷基、C1-C6烷氧基、鹵素、C2-C6烯基、OH、核苷、核苷酸、嘌呤、嘧啶、芳族酯、芳基酯、環(huán)烷基酯、環(huán)烯基酯、嘌呤或嘧啶的取代基所取代；OR1是OH或-O(CO)CH3；和R2是-CH＝CHCH＝CH2、-CH2-苯基或-CH2-吡啶基，其中苯基和吡啶基任選地在每個(gè)可取代的位置由如下基團(tuán)所取代該基團(tuán)獨(dú)立地是C1-C6烷基、C1-C6烷氧基、鹵代烷基、鹵代烷氧基、羥基、羥烷基、鹵素、-CO2H、C1-C6烷氧基羰基、-C(O)NH2、-C(O)NH(C1-C6烷基)或-C(O)N(C1-C6烷基)(C1-C6烷基)；或其藥學(xué)可接受的鹽、溶劑化物、酯、酰胺、水合物或其組合。
本發(fā)明的化合物具有作為雙鞭甲藻神經(jīng)毒素拮抗劑的活性，因此可用于治療雙鞭甲藻神經(jīng)毒素和西加毒素中毒。
本發(fā)明還提供結(jié)構(gòu)式I的化合物，其中R是 其中，Hal是氯、氟、碘或溴；R3選自H、OH、NH2、鹵素和NO2，和
Y選自CH、N、O和S。
本發(fā)明還涉及含有結(jié)構(gòu)式I的化合物或其藥學(xué)可接受的鹽、水合物或溶劑化物與藥學(xué)可接受的載體、賦形劑、溶劑、佐劑或稀釋劑的結(jié)合的藥物組合物。
本發(fā)明的化合物也可充當(dāng)被稱為雙鞭甲藻神經(jīng)毒素和西加毒素的化合物類別的拮抗劑。
本發(fā)明進(jìn)一步涉及在對(duì)象中調(diào)節(jié)粘液清除速度和治療與粘液清除率降低和粘液纖毛功能障礙相關(guān)的病癥或疾病的方法，包括對(duì)對(duì)象給予結(jié)構(gòu)式I的化合物或其藥學(xué)可接受的鹽、溶劑化物或水合物。
本發(fā)明還提供治療雙鞭甲藻神經(jīng)毒素和西加毒素中毒的方法，包括對(duì)對(duì)象給予有效治療雙鞭甲藻神經(jīng)毒素和西加毒素中毒量的本發(fā)明的化合物或其藥學(xué)可接受的鹽、溶劑化物或水合物。這種治療雙鞭甲藻神經(jīng)毒素和西加毒素中毒的方法可有助于預(yù)防、治療與雙鞭甲藻神經(jīng)毒素和西加毒素中毒相關(guān)的病癥或疾病狀態(tài)、降低其嚴(yán)重性或延遲其發(fā)作或發(fā)展。
附圖概述

圖1說(shuō)明綿羊中brevenal濃度(3、10和100pg/mL)對(duì)PbTx-3誘導(dǎo)的氣道狹窄的影響。
圖2說(shuō)明綿羊中brevenal濃度(3、10和100pg/mL)對(duì)PbTx-2誘導(dǎo)的氣道狹窄的影響。
圖3說(shuō)明綿羊中brevenal(10pg/mL)對(duì)半-雙鞭甲藻神經(jīng)毒素誘導(dǎo)的氣道狹窄的影響。
圖4說(shuō)明綿羊中β-萘甲酰基-PbTx-3和brevenal(100pg/mL)對(duì)PbTx-3誘導(dǎo)的氣管粘液速度(TMV)的降低的影響。
圖5說(shuō)明綿羊中PbTx-3和PbTx-2(總共10pg/mL)對(duì)氣管粘液速度(TMV)的影響。
具體實(shí)施例方式
定義除非另外定義，本文所使用的所有科學(xué)和技術(shù)術(shù)語(yǔ)均具有與本發(fā)明所屬領(lǐng)域技術(shù)人員通常理解相同的意義。
本文所提及的所有專利和出版物均為所有目的在此并入作為參考。
“治療有效”量定義為有效降低或減少所治療的疾病的至少一種癥狀或降低或延遲該疾病的一種或多種臨床標(biāo)記或癥狀的發(fā)作的量。
除非上下文中另外明確指出，用于本說(shuō)明書和所附權(quán)利要求的單數(shù)形式“一(a)”、“一種(an)”和“該(the)”包括復(fù)數(shù)的指代對(duì)象。因此，例如含有“一種化合物”的組合物的指代對(duì)象包括兩種或多種化合物的混合物。還應(yīng)當(dāng)注意，除非上下文中另外明確指出，術(shù)語(yǔ)“或”通常以其包括“和/或”的含義來(lái)使用。
本發(fā)明的“烷基”和“C1-C6烷基”表示含有1-6個(gè)碳原子的直鏈或支鏈的烷基，例如甲基、乙基、丙基、異丙基、正丁基、仲丁基、叔丁基、戊基、2-戊基、異戊基、新戊基、己基、2-己基、3-己基和3-甲基戊基。要理解在其中取代基(例如烷基、烷氧基或烯基)的烷基鏈短于或長(zhǎng)于6個(gè)碳的情況下，其應(yīng)當(dāng)如第二個(gè)“C”中所表示的那樣，例如“C1-C10”表示最多10個(gè)碳。
本發(fā)明中的術(shù)語(yǔ)“鹵素”表示氟、溴、氯和碘。
“烯基”和“C2-Cn烯基”表示含有2-n個(gè)碳原子和1-4個(gè)雙鍵的直鏈和支鏈的烴基，包括例如乙烯基、丙烯基、1-丁烯-3-基、1-戊烯-3-基、1-己烯-5-基、(3E，5E)-4，5-二甲基-3，5-癸二烯等。
本文使用的術(shù)語(yǔ)“環(huán)烷基”表示含有3-12個(gè)碳原子的飽和碳環(huán)基團(tuán)。環(huán)烷基可以是單環(huán)體系或多環(huán)稠合體系。這樣的基團(tuán)的例子包括環(huán)丙基、環(huán)丁基、環(huán)戊基和環(huán)己基。本文的環(huán)烷基是未取代的，或者如所特別指出的那樣，在一個(gè)或多個(gè)可取代的位置由各種基團(tuán)取代。例如，這樣的環(huán)烷基可以任選地由例如C1-C6烷基、C1-C6烷氧基、鹵素、羥基、氰基、硝基、氨基、單(C1-C6)烷基氨基、二(C1-C6)烷基氨基、C2-C6烯基、C2-C6炔基、C1-C6鹵代烷基、C1-C6鹵代烷氧基、氨基(C1-C6)烷基、單(C1-C6)烷基氨基(C1-C6)烷基或二(C1-C6)烷基氨基(C1-C6)烷基所取代。
“芳基”表示含有單環(huán)(例如，苯基)、多環(huán)(例如，聯(lián)苯)或其中至少一個(gè)是芳環(huán)的多個(gè)稠合的環(huán)(例如，1，2，3，4-四氫化萘基、萘基)的芳族碳環(huán)基團(tuán)，其任選地是單、二或三取代的。本發(fā)明優(yōu)選的芳基是苯基、1-萘基、2-萘基、茚滿基、茚基、二氫化萘基、1，2，3，4-四氫化萘基或6，7，8，9-四氫-5H-苯并[a]環(huán)庚烯基。本文的芳基是未取代的，或者如所特別指出的那樣，在一個(gè)或多個(gè)可取代的位置由各種基團(tuán)所取代。優(yōu)選的芳基任選地由C1-C6烷基、C1-C6烷氧基、鹵素、羥基、氰基、硝基、氨基、單(C1-C6)烷基氨基、二(C1-C6)烷基氨基、C2-C6烯基、C2-C6炔基、C1-C6鹵代烷基、C1-C6鹵代烷氧基、氨基(C1-C6)烷基、單(C1-C6)烷基氨基(C1-C6)烷基或二(C1-C6)烷基氨基(C1-C6)烷基所取代。優(yōu)選的芳基是苯基和萘基，二者任選如上所述地取代。
“雜芳基”表示5元、6元或7元環(huán)的一個(gè)或多個(gè)芳環(huán)體系，其包括含有至少一個(gè)和至多四個(gè)選自氮、氧或硫的雜原子的9-11個(gè)原子的稠環(huán)體系。本發(fā)明優(yōu)選的雜芳基包括吡啶基、嘧啶基、喹啉基、苯并噻吩基、吲哚基、二氫吲哚基、噠嗪基、吡嗪基、異吲哚基、異喹啉基、喹唑啉基、喹喔啉基、酞嗪基、咪唑基、異噁唑基、吡唑基、噁唑基、噻唑基、吲嗪基、吲唑基、苯并噻唑基、苯并咪唑基、苯并呋喃基、呋喃基、噻吩基、吡咯基、噁二唑基、噻二唑基、三唑基、四唑基、噁唑并吡啶基、咪唑并吡啶基、異噻唑基、萘啶基、鄰二氮雜萘基(cinnolinyl)、咔唑基、β-咔啉基、異苯并二氫吡喃基(isochromanyl)、苯并二氫吡喃基、四氫異喹啉基、異二氫吲哚基、異苯并四氫呋喃基、異苯并四氫噻吩基、異苯并噻吩基、苯并噁唑基、吡啶并吡啶基、苯并四氫呋喃基、苯并四氫噻吩基、嘌呤基、苯并間二氧雜環(huán)戊烯基(benzodioxolyl)、三嗪基、吩噁嗪基、吩噻嗪基、蝶啶基、苯并噻唑基、咪唑并吡啶基、咪唑并噻唑基、二氫苯并異噁唑基、苯并異噁嗪基、苯并噁嗪基、二氫苯并異噻嗪基、苯并吡喃基、苯并噻喃基(benzothiopyranyl)、香豆素基、異香豆素基、色酮基、苯并二氫呋喃-4-酮基、吡啶基-N-氧化物、四氫喹啉基、二氫喹啉基、二氫異喹啉基、二氫香豆素基、二氫異香豆素基、異二氫吲哚酮基、苯并二噁烷基、苯并噁唑啉酮基、吡咯基N-氧化物、嘧啶基N-氧化物、噠嗪基N-氧化物、吡嗪基N-氧化物、喹啉基N-氧化物、吲哚基N-氧化物、二氫吲哚基N-氧化物、異喹啉基N-氧化物、喹唑啉基N-氧化物、喹喔啉基N-氧化物、酞嗪基N-氧化物、咪唑基N-氧化物、異噁唑基N-氧化物、噁唑基N-氧化物、噻唑基N-氧化物、吲嗪基N-氧化物、吲唑基N-氧化物、苯并噻唑基N-氧化物、苯并咪唑基N-氧化物、吡咯基N-氧化物、噁二唑基N-氧化物、噻二唑基N-氧化物、三唑基N-氧化物、四唑基N-氧化物、苯并噻喃基S-氧化物、苯并噻喃基S，S-二氧化物。更優(yōu)選的雜芳基包括噁唑基、異噁唑基、吡啶基、嘧啶基、噠嗪基和吡嗪基。本文的雜芳基是未取代的，或者如所特別指出的那樣，在一個(gè)或多個(gè)可取代的位置由各種基團(tuán)所取代。優(yōu)選的雜芳基任選地由C1-C6烷基、C1-C6烷氧基、鹵素、羥基、氰基、硝基、氨基、單(C1-C6)烷基氨基、二(C1-C6)烷基氨基、C2-C6烯基、C2-C6炔基、C1-C6鹵代烷基、C1-C6鹵代烷氧基、氨基(C1-C6)烷基、單(C1-C6)烷基氨基(C1-C6)烷基或二(C1-C6)烷基氨基(C1-C6)烷基所取代。
“雜環(huán)”、“雜環(huán)烷基”或“雜環(huán)基”表示4元、5元、6元或7元環(huán)的一個(gè)或多個(gè)碳環(huán)體系，其包括含有至少一個(gè)和至多四個(gè)選自氮、氧或硫的雜原子的9-11個(gè)原子的稠環(huán)體系。本發(fā)明優(yōu)選的雜環(huán)包括嗎啉基、硫代嗎啉基、硫代嗎啉基S-氧化物、硫代嗎啉基S，S-二氧化物、哌嗪基、高哌嗪基、吡咯烷基、吡咯啉基、四氫吡喃基、哌啶基、四氫呋喃基、嘧啶-2，4(1H，3H)-二酮、1H-苯并[d]咪唑-2(3H)-酮四氫噻吩基、高哌啶基、高嗎啉基、高硫代嗎啉基、高硫代嗎啉基S，S-二氧化物、噁唑烷酮基、二氫吡唑基、二氫吡咯基、二氫吡嗪基、二氫吡啶基、二氫嘧啶基、二氫呋哺基、二氫吡喃基、四氫噻吩基S-氧化物、四氫噻吩基S，S-二氧化物和高硫代嗎啉基S-氧化物。更優(yōu)選的雜環(huán)基團(tuán)包括1H-苯并[d]咪唑-2(3H)-酮基、嘧啶-2，4(1H，3H)-二酮基、哌啶基、吡咯烷基和哌嗪基。本文的雜環(huán)基團(tuán)是未取代的，或者如所特別指出的那樣，在一個(gè)或多個(gè)可取代的位置由各種基團(tuán)所取代。優(yōu)選的雜環(huán)基團(tuán)任選地由C1-C6烷基、C1-C6烷氧基、鹵素、羥基、氰基、硝基、氨基、單(C1-C6)烷基氨基、二(C1-C6)烷基氨基、C2-C6烯基、C2-C6炔基、C1-C6鹵代烷基、C1-C6鹵代烷氧基、氨基(C1-C6)烷基、單(C1-C6)烷基氨基(C1-C6)烷基、二(C1-C6)烷基氨基(C1-C6)烷基或＝O所取代。
本文所使用的術(shù)語(yǔ)“芳基酯”包括芳氧基羰基和芳基羰氧基基團(tuán)。
本文所使用的術(shù)語(yǔ)“烷基酯”包括烷氧基羰基和烷基羰氧基基團(tuán)。
本文所使用的烷基羰基具有與烷?；嗤囊饬x。
本文所使用的術(shù)語(yǔ)“烷基酰胺”包括烷基氨基羰基、二烷基羰基和烷酰基氨基。
本文所使用的術(shù)語(yǔ)“烯基酰胺”包括烯基氨基羰基、二烯基羰基和烯基羰基氨基。
本文所使用的術(shù)語(yǔ)“烯基酯”包括烯氧基羰基和烯基羰氧基。
本文所使用的術(shù)語(yǔ)烷基芳基酯表示烷氧基羰基和烷酰基氧基，其中烷基部分帶有芳基或雜芳基。
本文所使用的術(shù)語(yǔ)烯基芳基酯表示烯氧基羰基和烯基羰氧基，其中烯基部分帶有芳基或雜芳基。
短語(yǔ)“調(diào)節(jié)粘液清除率”包括“控制、促進(jìn)和/或影響粘液清除率?！北疚乃褂玫男g(shù)語(yǔ)“治療(treatment)”和“治療(treating)”包括化合物或含有該化合物的藥物組合物的預(yù)防性給藥(“預(yù)防”)以及降低或消除本文所提及的疾病或病癥的治療。預(yù)防性給藥意圖用于預(yù)防病癥或預(yù)防病癥的復(fù)發(fā)，并且可用于治療處于具有或患有一種或多種本文所提及的病癥的風(fēng)險(xiǎn)中的對(duì)象。因此，當(dāng)本發(fā)明的活性成分進(jìn)行預(yù)防性給藥或在疾病狀態(tài)發(fā)作之后給予本發(fā)明的活性成分時(shí)，本文所使用的術(shù)語(yǔ)“治療”或其衍生預(yù)期部分或完全地抑制所述疾病狀態(tài)?！邦A(yù)防”表示對(duì)哺乳動(dòng)物給予活性成分以該保護(hù)哺乳動(dòng)物免患本文所列出的任何病癥及其它病癥。
本文所使用的術(shù)語(yǔ)“對(duì)象”包括包含哺乳動(dòng)物和魚類在內(nèi)的動(dòng)物。優(yōu)選該術(shù)語(yǔ)表示例如人類、牛和馬的哺乳動(dòng)物，更優(yōu)選表示人類和例如貓、狗、和馬的家養(yǎng)動(dòng)物，最優(yōu)選表示人類。
在一個(gè)方面，本發(fā)明涉及結(jié)構(gòu)式(I)的化合物或其藥學(xué)可接受的鹽
其中R是C1-C12烷基、C2-C12烯基、C1-C12烷基酯、C1-C12烷基酰胺、C4-C12烯基酯、C1-C12烷基芳基酯、C4-C12烯基芳基酯、C4-C12烯基酰胺、C1-C12烷氧基、甲?；鵆1-C12烷基、甲?；鵆2-C12烯基、烷?；鵆1-C12烷基、烷?；鵆2-C12烯基、羧基C1-C12烷基、羧基C2-C12烯基，其中烷基和烯基任選地由1-6個(gè)選自C3-C12環(huán)烷基、C3-C12雜環(huán)基、芳基、雜芳基、C1-C6烷基、C1-C6烷氧基、鹵素、C2-C6烯基、OH、核苷、核苷酸、嘌呤、嘧啶、芳族酯、芳基酯、環(huán)烷基酯、環(huán)烯基酯、嘌呤或嘧啶的取代基所取代；OR1是OH或-O(CO)CH3；R2是-CH＝CHCH＝CH2、-CH2-苯基、或-CH2-吡啶基，其中苯基和吡啶基任選地在每個(gè)可取代的位置由如下的1、2或3個(gè)基團(tuán)所取代該基團(tuán)獨(dú)立地是C1-C6烷基、C1-C6烷氧基、鹵代烷基、鹵代烷氧基、羥基、羥烷基、鹵素、-CO2H、C1-C6烷氧基羰基、-C(O)NH2、-C(O)NH(C1-C6烷基)或-C(O)N(C1-C6烷基)(C1-C6烷基)。
在另一個(gè)寬的方面，R1和R2如上所定義，R是烷基、鹵素、烯基、環(huán)烷基、芳基、雜芳基、雜環(huán)、雜環(huán)烷基或雜環(huán)基。
在又一個(gè)方面，R是C6-C12烷基、C6-C12烷基酯、C6-C12烷基酰胺、C6-C12烷基苯基酯、C1-C6烷氧基、甲?；鵆6-C12烷基、烷?；鵆6-C12烷基、羧基C6-C12烷基，其中烷基部分任選地由1-4個(gè)選自C3-C6環(huán)烷基、C5-C6雜環(huán)基、penyl、萘基、吡啶基、嘧啶基(pyrmidyl)、噠嗪基、吡嗪基、呋喃基、噻吩基、喹啉基、吲哚基、C1-C6烷基、C1-C6烷氧基、鹵素、C2-C6烯基、OH、核苷、核苷酸、嘌呤、嘧啶、苯基酯、環(huán)烷基酯、環(huán)烯基酯、嘌呤和嘧啶，其中R上的每個(gè)環(huán)狀取代基均任選地進(jìn)一步由至多5個(gè)基團(tuán)所取代，該基團(tuán)獨(dú)立地是C1-C6烷基、C1-C6烷氧基、鹵素、鹵代烷基、鹵代烷氧基、羥基、羥基C1-C6烷基、C1-C4烷氧基C1-C6烷基、CO2H、C(O)NH2、C(O)NH(C1-C6烷基)、或C(O)N(C1-C6烷基)(C1-C6烷基)。
在仍然另一方面，R是C6-C12烯基、C6-C12烯基酯、C6-C12烯基苯基酯、C6-C12烯基酰胺、甲?；鵆6-C12烯基、烷酰基C6-C12烷基、烷?；鵆6-C12烯基、羧基C6-C12烷基、羧基C6-C12烯基，其中烯基任選地由1-4個(gè)選自C3-C6環(huán)烷基、C5-C6雜環(huán)基、penyl、萘基、吡啶基、嘧啶基、噠嗪基、吡嗪基、呋喃基、噻吩基、喹啉基、吲哚基、C1-C6烷基、C1-C6烷氧基、鹵素、C2-C6烯基、OH、核苷、核苷酸、嘌呤、嘧啶、苯基酯、環(huán)烷基酯、環(huán)烯基酯、嘌呤和嘧啶，其中R上的每個(gè)環(huán)狀取代基任選地進(jìn)一步由至多5個(gè)基團(tuán)取代，該基團(tuán)獨(dú)立地是C1-C6烷基、C1-C6烷氧基、鹵素、鹵代烷基、鹵代烷氧基、羥基、羥基C1-C6烷基、C1-C4烷氧基C1-C6烷基、CO2H、C(O)NH2、C(O)NH(C1-C6烷基)或C(O)N(C1-C6烷基)(C1-C6烷基)。
在仍然又一個(gè)方面，OR1是OH。
在仍然又一個(gè)方面，R2是-CH＝CHCH＝CH2、-CH2-苯基或-CH2-吡啶基，其中苯基和吡啶基任選地由1、2或3個(gè)基團(tuán)所取代，該基團(tuán)獨(dú)立地是C1-C6烷基、C1-C6烷氧基、鹵代烷基、鹵代烷氧基、羥基、羥基烷基、鹵素、-CO2H、C1-C6烷氧基羰基、-C(O)NH2、-C(O)NH(C1-C6烷基)或-C(O)N(C1-C6烷基)(C1-C6烷基)。
在另一方面，R是由1、2或3個(gè)基團(tuán)取代的C6-C12烯基，該基團(tuán)獨(dú)立地是C1-C4烷氧基、鹵素、-CHO、-OCH2CH2O-、-OCH2CH2CH2O-或OH。
在又一個(gè)方面，R是由1、2或3個(gè)基團(tuán)取代的C8-C12烯基，該基團(tuán)獨(dú)立地是C1-C4烷氧基、鹵素、-CHO、-OCH2CH2O-、-OCH2CH2CH2O-或OH。
在仍然又一個(gè)方面，R是由1、2或3個(gè)基團(tuán)取代的C9-C10烯基，該基團(tuán)獨(dú)立地是C1-C4烷氧基、鹵素、-CHO、-OCH2CH2O-、-OCH2CH2CH2O-或OH。在一個(gè)方面，當(dāng)R由兩個(gè)C1-C4烷氧基取代時(shí)，其是相同的。仍然更優(yōu)選地，當(dāng)這兩個(gè)C1-C4烷氧基相同時(shí)，其連接到相同的碳上，從而形成縮醛。
在仍然又一個(gè)方面，R是 在仍然又一個(gè)方面，R是
在仍然又一個(gè)方面，R是 在仍然又一個(gè)方面，R是 在本方面的另一個(gè)實(shí)施方式中，化合物具有結(jié)構(gòu)式(I)，其中R是 其中，Hal是氯、氟、碘或溴；R3選自H、OH、NH2、鹵素和NO2，和
Y選自CH、N、O和S。
在另一方面，R2是-CH＝CHCH＝CH2。
在優(yōu)選實(shí)施方式中，結(jié)構(gòu)式(I)的化合物中的R2是順式構(gòu)型的-CH＝CHCH＝CH2。
在優(yōu)選的實(shí)施方式中，結(jié)構(gòu)式(I)的化合物中的R2是順式構(gòu)型的-CH＝CHCH＝CH2，并且R是含有二烯的C2-C12烯基。
在更優(yōu)選的實(shí)施方式中，結(jié)構(gòu)式(I)的化合物中的R2是順式構(gòu)型的-CH＝CHCH＝CH2，并且R是反式構(gòu)型的含有二烯的C2-C12烯基。
在另一個(gè)實(shí)施方式中，結(jié)構(gòu)式(I)的化合物中的R2是反式構(gòu)型的CH＝CHCH＝CH2，并且R是反式構(gòu)型的含有二烯的C8-C12烯基。
在另一個(gè)實(shí)施方式中，R2是-CH2-苯基或-CH2-吡啶基，其中苯基和吡啶基任選地由1、2或3個(gè)基團(tuán)取代，該基團(tuán)獨(dú)立地是C1-C6烷基、C1-C6烷氧基、CF3、OCF3、羥基、羥基C1-C6烷基、鹵素、-CO2H、C1-C6烷氧基羰基、-C(O)NH2、-C(O)NH(C1-C6烷基)或-C(O)N(C1-C6烷基)(C1-C6烷基)。
在另一個(gè)實(shí)施方式中，R2是-CH＝CHCH＝CH2。在仍然另一個(gè)實(shí)施方式中，R2是 在仍然另一個(gè)實(shí)施方式中，R2是 在仍然另一個(gè)實(shí)施方式中，R是 并且R2是 在另一個(gè)實(shí)施方式中，R和R2如上所定義，并且R1是H。
在另一個(gè)優(yōu)選的實(shí)施方式中，結(jié)構(gòu)式(I)的化合物是
在另一個(gè)優(yōu)選的實(shí)施方式中，結(jié)構(gòu)式(I)的化合物是 在另一個(gè)優(yōu)選的實(shí)施方式中，結(jié)構(gòu)式(I)的化合物是 在另一個(gè)優(yōu)選的實(shí)施方式中，結(jié)構(gòu)式(I)的化合物是 在另一個(gè)優(yōu)選的實(shí)施方式中，結(jié)構(gòu)式(I)的化合物是 在另一個(gè)優(yōu)選的實(shí)施方式中，結(jié)構(gòu)式(I)的化合物是
在另一個(gè)優(yōu)選的實(shí)施方式中，結(jié)構(gòu)式(I)的化合物是 在另一個(gè)優(yōu)選的實(shí)施方式中，結(jié)構(gòu)式(I)的化合物是 在另一個(gè)優(yōu)選的實(shí)施方式中，結(jié)構(gòu)式(I)的化合物是 在另一個(gè)優(yōu)選的實(shí)施方式中，結(jié)構(gòu)式(I)的化合物是 在另一個(gè)優(yōu)選的實(shí)施方式中，結(jié)構(gòu)式(I)的化合物是
在另一個(gè)優(yōu)選的實(shí)施方式中，結(jié)構(gòu)式(I)的化合物是 在另一個(gè)優(yōu)選的實(shí)施方式中，結(jié)構(gòu)式(I)的化合物是 在另一個(gè)優(yōu)選的實(shí)施方式中，結(jié)構(gòu)式(I)的化合物是 在另一個(gè)優(yōu)選的實(shí)施方式中，結(jié)構(gòu)式(I)的化合物是
在另一個(gè)優(yōu)選的實(shí)施方式中，結(jié)構(gòu)式(I)的化合物是 在本優(yōu)選實(shí)施方式的一個(gè)方面中，結(jié)構(gòu)式(I)的化合物是 在另一個(gè)優(yōu)選實(shí)施方式中，結(jié)構(gòu)式(I)的化合物是 在本優(yōu)選實(shí)施方式的一個(gè)方面，結(jié)構(gòu)式(I)的化合物是 在另一個(gè)優(yōu)選的實(shí)施方式中，結(jié)構(gòu)式(I)的化合物是
結(jié)構(gòu)式(I)的化合物可以具有不對(duì)稱中心，并且可以作為外消旋體、外消旋混合物存在和作為單個(gè)非對(duì)映體或旋光對(duì)映體存在。所有的異構(gòu)體形式均包含在本發(fā)明的范圍內(nèi)。
在優(yōu)選方面，本發(fā)明的化合物基于brevenal核心(core)，即，結(jié)構(gòu)式(I)的化合物中的每一個(gè)立體中心均具有與brevenal中立體中心相同的構(gòu)型。
在另一方面，本發(fā)明涉及含有結(jié)構(gòu)式I的化合物或其藥學(xué)可接受的鹽、溶劑化物或水合物和藥學(xué)可接受的載體、賦形劑、溶劑、佐劑或稀釋劑的藥物組合物。
在另一方面，本發(fā)明提供調(diào)節(jié)粘液清除率的方法，包括對(duì)對(duì)象給予或使細(xì)胞接觸有效調(diào)節(jié)對(duì)象或細(xì)胞中粘液清除率的量的本發(fā)明的化合物、鹽、溶劑化物或水合物，或者含有本發(fā)明的化合物、鹽、水合物或溶劑化物的藥物組合物。
本文所使用的粘液清除率降低或粘液纖毛功能障礙通常由氣管粘液遷移(TMV)來(lái)測(cè)量，氣管粘液遷移是整個(gè)肺清除率的代用標(biāo)記。
在另一方面，本發(fā)明提供治療涉及粘液清除率降低或者與粘液清除率降低相關(guān)的病癥或疾病的方法，包括對(duì)對(duì)象給予有效治療病癥或疾病的量的本發(fā)明的化合物，或者含有本發(fā)明的化合物或藥學(xué)可接受的鹽、水合物、酯、酰胺、溶劑化物或其混合物的藥物組合物。這種治療與粘液清除率降低相關(guān)的病癥或疾病的方法可有助于預(yù)防、治療與粘液清除率降低的病癥和疾病狀態(tài)、降低其嚴(yán)重性或者延遲其發(fā)作或發(fā)展。這樣的病癥或疾病包括但不限于慢性阻塞性氣道疾病(也稱為慢性阻塞性肺疾病(COPD))；哮喘；囊性纖維化；支氣管收縮和包括肺部感染的其它肺部疾病，例如但不限于肺炎、假單胞菌屬和支氣管炎；以及囊性纖維化。
在一個(gè)實(shí)施方式中，治療方法可用于治療慢性阻塞性肺疾病，例如肺氣腫、肺纖維化和/或吸煙者的咳嗽。
在一個(gè)實(shí)施方式中，治療方法可用于治療哮喘。
在一個(gè)實(shí)施方式中，治療方法可用于治療肺部疾病(pulmonarydisease)。
在一個(gè)實(shí)施方式中，治療方法可用于治療肺部感染，該肺部感染包括但不限于肺炎或假單胞菌屬(Pseudomonas)。
在一個(gè)實(shí)施方式中，治療方法可用于治療雙鞭甲藻神經(jīng)毒素或西加毒素中毒及其癥狀。
在優(yōu)選的實(shí)施方式中，治療方法可用于疾病是囊性纖維化的情況。
在另一方面，本發(fā)明提供治療涉及與粘液清除率降低或粘液纖毛功能障礙有關(guān)的病癥或疾病的癥狀的方法，包括對(duì)需要這樣的治療的對(duì)象給予治療有效量的本發(fā)明化合物或其藥學(xué)可接受的鹽、水合物或溶劑化物。
在本方面的實(shí)施方式中，本發(fā)明的方法可用于治療與粘膜相關(guān)的疾病，包括這樣的疾病涉及胰腺、腸、腎臟、輸卵管和/或輸精管的疾病。
在本方面的另一個(gè)實(shí)施方式中，該方法可任選地包括，結(jié)構(gòu)式(I)的化合物或其藥學(xué)可接受的鹽、溶劑化物或水合物與有效量的已知可用于治療與粘液清除率降低相關(guān)的病癥或疾病的化合物的組合。本發(fā)明的方法可任選地包括另外的治療方式，例如支持療法或佐劑療法。
在本發(fā)明方法的一個(gè)實(shí)施方式中，對(duì)象是動(dòng)物。更優(yōu)選動(dòng)物是哺乳動(dòng)物。進(jìn)一步優(yōu)選哺乳動(dòng)物是人類。
在另一個(gè)實(shí)施方式中，動(dòng)物是伴侶動(dòng)物(companion aminal)，例如馬、狗或貓。
適于該方法的本發(fā)明的化合物的治療有效量通常為大約0.1pg/天至大約1000mg/天。治療有效量將會(huì)根據(jù)各種參數(shù)變化，該參數(shù)包括，例如，具體的治療用途和對(duì)象/患者的物理特性，這是在本領(lǐng)域技術(shù)人員認(rèn)識(shí)范圍內(nèi)的。
在優(yōu)選方面，口服給藥的治療有效量是大約1mg/天至大約1000mg/天。在另一方面，大約1mg/天至大約500mg/天。在又一個(gè)方面，大約1mg/天至大約100mg/天。在仍然另一個(gè)方面，大約0.1mg/天至大約10mg/天。
在另一方面，治療有效量以每劑大約1mg至大約500mg的劑量給予。
在仍然另一方面，治療有效量包括每劑大約1mg至大約100mg的劑量。
吸入給藥的優(yōu)選劑量是大約0.1pg至大約1μg/天。
注射給藥(即胃腸外給藥)的優(yōu)選劑量是大約100ng至大約1mg/天。
本發(fā)明還包括結(jié)構(gòu)式(I)的化合物或其藥學(xué)可接受的鹽用于制造具有以下用途的藥物的用途，該藥物用于治療需要這種治療的具有NSP和/或CFP以及與那些中毒相關(guān)的癥狀的對(duì)象、或預(yù)防需要這種治療的對(duì)象顯現(xiàn)NSP和/或CFP以及與那些中毒相關(guān)的癥狀。
在一個(gè)方面，結(jié)構(gòu)式(I)的化合物的這種用途可以用于疾病或病癥是慢性阻塞性肺疾病的情況。
在另一方面，結(jié)構(gòu)式(I)的化合物的這種用途可以用于疾病或病癥是哮喘的情況。
在另一方面，結(jié)構(gòu)式(I)的化合物的這種用途可以用于疾病或病癥是肺部疾病的情況。
在另一方面，結(jié)構(gòu)式(I)的化合物的這種用途可以用于疾病或病癥是肺部感染的情況。
在另一方面，結(jié)構(gòu)式(I)的化合物的這種用途可以用于疾病或病癥是囊性纖維化的情況。
在另一方面，結(jié)構(gòu)式(I)的化合物的這種用途可以用于疾病或病癥是慢性支氣管炎。
在另一方面，結(jié)構(gòu)式(I)的化合物的這種用途可以用于疾病或病癥是卡塔格納綜合征(Karteneger’s syndrome)的情況。
在另一方面，結(jié)構(gòu)式(I)的化合物的這種用途可以用于疾病或病癥是支氣管擴(kuò)張的情況。
在另一方面，結(jié)構(gòu)式(I)的化合物的這種用途可以用于疾病或病癥是由吸入氣體、織物粒子、砂?；蚱渌I(yè)粒子或煙塵引起或加重的工業(yè)相關(guān)疾病。粒子和砂粒的具體例子包括，例如，氧化鐵、二氧化硅、滑石、碳、石墨、纖維、木塵、細(xì)粒粉塵、有機(jī)溶劑和污染物氣體。
在仍然另一方面，結(jié)構(gòu)式(I)的化合物和含有結(jié)構(gòu)式(I)的藥物組合物可以用于其中疾病或病癥來(lái)自于吸入細(xì)菌或例如真菌粒子的其它致病粒子的情況。因此，本發(fā)明還包括清除例如含有例如炭疽的細(xì)在另一個(gè)優(yōu)選的實(shí)施方式中，結(jié)構(gòu)式(I)的化合物是 在另一個(gè)優(yōu)選的實(shí)施方式中，結(jié)構(gòu)式(I)的化合物是 在另一個(gè)優(yōu)選的實(shí)施方式中，結(jié)構(gòu)式(I)的化合物是 在本優(yōu)選實(shí)施方式的一個(gè)方面，結(jié)構(gòu)式(I)的化合物是菌或真菌顆粒的致病粒子的方法。

菌或真菌顆粒的致病粒子的方法。
本發(fā)明還包括含有多個(gè)容器的容器試劑盒(container kit)，每個(gè)容器均包括一個(gè)或多個(gè)單位劑量的結(jié)構(gòu)式(I)的化合物或其藥學(xué)可接受的鹽。
在一個(gè)實(shí)施方式中，該容器試劑盒包括適用于口服輸送的每個(gè)容器，并且包括片劑、凝膠或膠囊或吸入劑。
在一個(gè)實(shí)施方式中，該容器試劑盒包括適用于胃腸外輸送的每個(gè)容器，并且包括長(zhǎng)效產(chǎn)品、注射器、安瓿劑或小瓶。
在一個(gè)實(shí)施方式中，該容器試劑盒包括適用于局部輸送的每個(gè)容器，并且包括貼劑、醫(yī)療墊、軟膏或乳膏。
當(dāng)與適當(dāng)?shù)乃峄驂A反應(yīng)時(shí)，結(jié)構(gòu)式(I)的化合物可形成鹽。藥學(xué)可接受的鹽通常比相應(yīng)的結(jié)構(gòu)式(I)的化合物更優(yōu)選，因?yàn)槠浣?jīng)常產(chǎn)生通常水溶性更好、穩(wěn)定和/或更具結(jié)晶性的化合物。藥學(xué)可接受的鹽是任意保持母體化合物的活性并且不會(huì)對(duì)所給藥的對(duì)象(在上下文中其被給藥)賦予任何有害或不被希望的效果的鹽。藥學(xué)可接受的鹽包括無(wú)機(jī)酸和有機(jī)酸的酸加成鹽。優(yōu)選的藥學(xué)可接受的鹽包括例如Berge，Bighley和Monkhouse，J.Pharm.Sci.，1977，66，1-19描述的那些鹽。這樣的鹽可以由無(wú)機(jī)酸和有機(jī)酸形成。其代表性的例子包括馬來(lái)酸、富馬酸、苯甲酸、抗壞血酸、雙羥萘酸、琥珀酸、雙亞甲基水楊酸、甲磺酸、乙烷二磺酸、乙酸、丙酸、酒石酸、水楊酸、檸檬酸、葡糖酸、天門冬氨酸、硬脂酸、棕櫚酸、衣康酸、羥乙酸、對(duì)氨基苯甲酸、谷氨酸、苯磺酸、鹽酸、氫溴酸、硫酸、環(huán)己基氨磺酸、磷酸和硝酸。對(duì)于其它可接受的鹽，參見(jiàn)Int.J.Pharm.，33，201-217(1986)。
該化合物的水合物和溶劑化物以及其多晶型物也是本發(fā)明化合物的形式，并且可以根據(jù)制藥領(lǐng)域技術(shù)人員已知的技術(shù)形成。本發(fā)明進(jìn)一步包括本發(fā)明化合物的配合物，特別是有機(jī)金屬配合物。當(dāng)適當(dāng)?shù)厥褂帽绢I(lǐng)域已知的方法時(shí)可以制備配合物。
本發(fā)明的方法本發(fā)明的化合物、含有所述化合物的藥學(xué)制劑及其藥學(xué)可接受的鹽可用于治療患有與粘液清除率降低相關(guān)的疾病或病癥的對(duì)象，優(yōu)選該對(duì)象是哺乳動(dòng)物，更優(yōu)選人類，還可用于幫助預(yù)防或延遲這樣的疾病或病癥的發(fā)作。本發(fā)明的化合物和制劑特別有益于治療、預(yù)防或者減緩慢性阻塞性肺疾病、哮喘、肺部疾病、肺部感染和囊性纖維化的進(jìn)展。當(dāng)治療或預(yù)防與粘液清除率降低相關(guān)的疾病和病癥以及相關(guān)癥狀時(shí)，本發(fā)明的化合物可以根據(jù)對(duì)對(duì)象最好的方式而單獨(dú)或結(jié)合使用。
關(guān)于這些疾病和病癥，術(shù)語(yǔ)“治療”表示本發(fā)明的化合物可用于現(xiàn)在患有病癥或疾病的對(duì)象，優(yōu)選人類對(duì)象/患者。本發(fā)明的化合物不一定治愈患有疾病的對(duì)象，但是將延遲或減緩疾病的進(jìn)展或者預(yù)防疾病的進(jìn)一步進(jìn)展，因此為個(gè)體提供更多的生存時(shí)間。
術(shù)語(yǔ)“預(yù)防”表示如果將本發(fā)明的化合物給予現(xiàn)在未患有疾病或具有疾病癥狀、但是通常將顯現(xiàn)疾病或處于疾病的高風(fēng)險(xiǎn)中那些對(duì)象，則其將不會(huì)顯現(xiàn)疾病。此外，“預(yù)防”也包括延遲由于年齡、家族史、遺傳或染色體變異、和/或由于一種或多種疾病生物學(xué)標(biāo)記的存在而最終將會(huì)顯現(xiàn)疾病或者將處于疾病風(fēng)險(xiǎn)中的個(gè)體的疾病顯現(xiàn)。通過(guò)延遲疾病的發(fā)作，本發(fā)明的化合物可使個(gè)體在正常情況下將會(huì)患有疾病的時(shí)期內(nèi)免于患病，或者在進(jìn)行了本發(fā)明化合物的給藥直到個(gè)體最終患病的時(shí)間內(nèi)降低疾病或其部分效果的發(fā)展速度。預(yù)防還包括對(duì)那些被認(rèn)為具有疾病遺傳因素的個(gè)體給予本發(fā)明的化合物。
在一個(gè)優(yōu)選方面，本發(fā)明的化合物用于減緩疾病癥狀的進(jìn)展。
在另一個(gè)優(yōu)選的方面，本發(fā)明的化合物用于防止疾病癥狀的進(jìn)一步進(jìn)展。
在治療或預(yù)防上述疾病中，本發(fā)明的化合物以治療有效量給藥。治療有效量將根據(jù)所使用的具體化合物、所治療的對(duì)象的物理特性和給藥途徑而變化，正如本領(lǐng)域技術(shù)人員已知的那樣。
在治療顯示出診斷的以上病癥的對(duì)象中，醫(yī)師可以根據(jù)需要立即給予本發(fā)明的化合物和不確定地持續(xù)給藥。
劑型和數(shù)量本發(fā)明的化合物可以通過(guò)吸入、口服、胃腸外、(IV，IM，depo-IM，SQ和depo SQ)、舌下、鼻內(nèi)、鞘內(nèi)、局部、陰道或直腸給藥。本領(lǐng)域技術(shù)人員已知的劑型適用于輸送本發(fā)明的化合物。
提供含有治療有效量的本發(fā)明化合物的組合物。該化合物優(yōu)選配制成合適的藥學(xué)制劑，例如用于口服給藥的片劑、膠囊或酏劑，或者用于胃腸外給藥的無(wú)菌溶液或懸浮體中。通常上述化合物使用本領(lǐng)域公知的技術(shù)和過(guò)程配制成藥物組合物。
大約1pg至大約100mg本發(fā)明的化合物或化合物的混合物或生理學(xué)可接受的鹽或酯與生理學(xué)可接受的賦形物(vehicle)、載體、賦形劑、粘合劑、防腐劑、穩(wěn)定劑、香料等以制藥用途可接受的單位劑型混合。那些組合物或制劑中活性物質(zhì)的量使得可以獲得在所示范圍內(nèi)的合適劑量。組合物優(yōu)選配置為單位劑型，每劑含有大約0.1pg至大約100mg活性成分，優(yōu)選大約0.1pg至大約10mg，更優(yōu)選大約0.1pg至大約10pg，或者大約1pg至大約10mg。術(shù)語(yǔ)“單位劑型”表示適合作為用于人類對(duì)象和其它哺乳動(dòng)物的單位劑量的物理離散單位，每個(gè)單位含有計(jì)算的預(yù)定數(shù)量的活性物質(zhì)與合適的藥學(xué)賦形劑相結(jié)合以產(chǎn)生所需的療效。
為制備本發(fā)明的藥學(xué)可接受的組合物，一種或多種本發(fā)明的化合物與合適的藥學(xué)可接受的載體相混合。經(jīng)過(guò)化合物的混合或加入，所獲混合物可以是溶液、懸浮體、乳液等。脂質(zhì)體懸浮體也可以適合作為藥學(xué)可接受的載體。這些可以根據(jù)本領(lǐng)域技術(shù)人員已知的方法制備。獲得的混合物的形式與許多因素有關(guān)，包括預(yù)期給藥模式和該化合物在所選擇的載體或賦形物中的溶解度。有效濃度足以減少或改善至少一種疾病、病癥(disorder)或病癥(conditions)癥狀，并且可以根據(jù)經(jīng)驗(yàn)確定。
適用于本文所提供的化合物的給藥的藥學(xué)載體或賦形物包括本領(lǐng)域技術(shù)人員已知的適用于特定給藥模式的任何這樣的載體。此外，還可以將活性材料與不損害所需作用的其它活性材料、或者補(bǔ)充所需作用或具有另一種作用的材料相混合。該化合物可以配置為組合物中唯一的藥學(xué)活性成分，或者可以與其它活性成分相結(jié)合。
在化合物的溶解度不足的情況下，可以使用增溶方法。這樣的方法是已知的，包括但不限于使用例如二甲亞砜(DMSO)的助溶劑、使用例如Tween_的表面活性劑和溶解在碳酸氫鈉水溶液中。該化合物的衍生物，例如鹽或藥物前體也可用于配制有效的藥物組合物。
化合物的濃度可有效地輸送給藥劑量，該給藥劑量減輕或改善給予該化合物的病癥的至少一種癥狀。典型地，組合物配置為單劑給藥。
本發(fā)明的化合物可以使用保護(hù)其免于被身體快速消除的載體來(lái)配置，例如緩釋制劑或糖衣。這樣的載體包括控制釋放制劑，例如但不限于微膠囊(microencapsulated)輸送體系?；钚曰衔镌谒帉W(xué)可接受的載體中的量足以在不存在不被希望的副作用的情況下對(duì)治療對(duì)象施加治療有用的效果。治療有效濃度可以通過(guò)在用于所治療的病癥的已知體外和體內(nèi)模型體系中檢測(cè)該化合物來(lái)經(jīng)驗(yàn)地確定。
本發(fā)明的化合物和組合物可以包裝在多劑量容器或單劑量容器中。包裝好的化合物和組合物可以在試劑盒中提供，例如該試劑盒包括可以為使用而組裝的組件部分。例如，凍干形式的化合物抑制劑和合適的稀釋劑可以作為在使用前進(jìn)行組合的單獨(dú)組分來(lái)提供。試劑盒可以包括化合物抑制劑和用于共同給藥的第二治療劑。抑制劑和第二治療劑可以作為單獨(dú)的組件部分來(lái)提供。試劑盒可以包括多個(gè)容器，每個(gè)容器容納一個(gè)或多個(gè)單位劑量的本發(fā)明化合物。容器優(yōu)選適用于所需的給藥模式，包括但不限于用于口服給藥的片劑、凝膠膠囊、持續(xù)釋放膠囊等；用于胃腸外給藥的長(zhǎng)效產(chǎn)品、預(yù)填充注射器、安瓿劑、小瓶等；以及用于局部給藥的貼劑、醫(yī)療墊、乳膏等。
活性化合物在藥物組合物中的濃度與給藥途徑，化合物的分布、代謝和排泄速率，以及服藥日程和給藥量，還有本領(lǐng)域技術(shù)人員已知的其它因素有關(guān)。
活性成分可以一次給藥，或者可以分成許多較小劑量在一定時(shí)間間隔下給藥。要理解，精確的劑量和治療持續(xù)時(shí)間是所治療的疾病的函數(shù)，其可以使用已知的測(cè)試方式或者通過(guò)從體內(nèi)或體外測(cè)試數(shù)據(jù)的外推來(lái)經(jīng)驗(yàn)地確定。要注意，濃度和劑量值也可以根據(jù)所減緩的病癥的嚴(yán)重性而變化。要進(jìn)一步理解對(duì)于任何特定的對(duì)象，具體的劑量方案應(yīng)當(dāng)根據(jù)個(gè)體需求和給藥或監(jiān)督組合物給藥的人們的專業(yè)判斷而隨時(shí)間進(jìn)行調(diào)節(jié)，本文所列出的濃度范圍僅僅是示例，并不代表限制所要求保護(hù)的組合物的范圍或?qū)嵤?br> 如果希望口服給藥，化合物應(yīng)當(dāng)在保護(hù)其免受胃的酸性環(huán)境影響的組合物中提供。例如，組合物可以配置在腸溶衣中，該腸溶衣在胃中保護(hù)其完整性并且在腸中釋放活性化合物。組合物也可以與抗酸劑或其它這樣的成分結(jié)合以配制組合物。
口服組合物通常含有惰性稀釋劑或可食用載體，其可以壓縮成片劑或包裝在凝膠膠囊中。對(duì)于口服治療給藥的目的來(lái)說(shuō)，活性化合物或多種活性化合物可以與賦形劑混合，并且以片劑、膠囊或錠劑的形式使用?？梢院兴帉W(xué)可相容的粘合劑和佐劑材料作為組合物的部分。
片劑、丸劑、膠囊、錠劑等可以含有任何具有相似性質(zhì)的下述成分或化合物粘合劑，例如但不限于西黃蓍膠、阿拉伯膠、玉米淀粉或凝膠；賦形劑，例如微晶纖維素、淀粉或乳糖；崩解劑，例如但不限于褐藻酸和玉米淀粉；潤(rùn)滑劑，例如但不限于硬脂酸鎂；助流劑(gildant)，例如但不限于膠體二氧化硅；甜味劑，例如蔗糖或糖精；以及增香劑，例如薄荷、水楊酸甲酯或水果香料。
當(dāng)劑量單位形式是膠囊時(shí)，除以上類型的材料以外，其可以含有例如脂肪油的液體載體。此外，劑量單位形式可以含有各種改變劑量單位的物理形式的其它材料，例如糖和其它腸內(nèi)吸收劑的包衣。該化合物還可以作為酏劑、懸浮體、糖漿、干膠片(wafer)、咀嚼膠(chewinggum)等的組分來(lái)給藥。除活性化合物以外，糖漿可以含有作為甜味劑的蔗糖和某些防腐劑、染料和著色劑、以及香料。
活性物質(zhì)還可以與不會(huì)損害所需作用的其它藥學(xué)可接受的活性劑或者補(bǔ)充所需作用的物質(zhì)混合或摻和。
用于胃腸外、真皮內(nèi)、皮下或局部應(yīng)用的溶液或懸浮體可以含有任何如下組分無(wú)菌稀釋劑，例如注射用水、鹽水溶液、不揮發(fā)的油、天然植物油(例如芝麻油、椰子油、花生油、棉子油等)、或者例如油酸乙酯等的合成脂肪賦形物、聚乙二醇，甘油、丙二醇或其它合成溶劑；抗菌劑，例如芐醇和對(duì)羥基苯甲酸甲酯；抗氧化劑，例如抗壞血酸和亞硫酸氫鈉；螯合劑，例如乙二胺四乙酸(EDTA)；緩沖劑，例如乙酸鹽、檸檬酸鹽和磷酸鹽；以及用于調(diào)節(jié)緊張度(tonicity)的藥劑，例如氯化鈉和葡萄糖。胃腸外制劑可以包裝在安瓿瓶，一次性注射器，或者用玻璃、塑料或其它合適材料制成的多劑量小瓶中。根據(jù)需要，可以加入緩沖劑、防腐劑、抗氧化劑等。
在靜脈給藥的情況下，合適的載體包括生理鹽水，磷酸鹽緩沖鹽水(PBS)和含有例如葡萄糖、聚乙二醇、聚丙二醇及其混合物的增稠劑和增溶劑的溶液。含有組織定向的脂質(zhì)體的脂質(zhì)體懸浮體也可以適合作為作為藥學(xué)可接受的載體。這些可以根據(jù)已知的方法來(lái)制備，例如，如美國(guó)專利4,522,811所述的方法。
活性化合物可以與保護(hù)該化合物對(duì)抗從身體中快速消除的載體(例如緩釋制劑或包衣)來(lái)制備。這樣的載體包括控制釋放制劑，例如但不限于埋植劑和微膠囊輸送體系；以及可生物降解的生物相容聚合物，例如膠原、乙烯醋酸乙烯酯、聚酸酐、聚乙醇酸、聚原酯(polyorthoester)、聚乳酸等。制備這樣的制劑的方法是本領(lǐng)域技術(shù)人員已知的。
本發(fā)明的化合物可以通過(guò)吸入(經(jīng)口或經(jīng)鼻)、口服、胃腸外(IV、IM、depo-IM、SQ和depo-SQ)、舌下、鞘內(nèi)、局部或直腸給藥。本領(lǐng)域技術(shù)人員已知的劑型適用于本發(fā)明化合物的輸送。
本發(fā)明的化合物可以腸內(nèi)或胃腸外給藥。當(dāng)口服給藥時(shí)，本發(fā)明的化合物可以以口服給藥的常用劑型給藥，正如本領(lǐng)域技術(shù)人員所公知的那樣。這些劑型包括片劑和膠囊的常用固體單位劑型，以及例如溶液、懸浮體和酏劑的液體記性。當(dāng)使用固體劑型時(shí)，優(yōu)選持續(xù)釋放類型以便使得本發(fā)明的化合物每天僅需要給藥一次或兩次。
口服劑型對(duì)對(duì)象每天給藥1、2、3或4次或者根據(jù)需要給藥更多次。優(yōu)選本發(fā)明的化合物每天給藥三次或更少次，更優(yōu)選一次或兩次。因此，優(yōu)選本發(fā)明的化合物以口服劑型給藥。優(yōu)選無(wú)論使用什么口服劑型，該劑型均設(shè)計(jì)為保護(hù)本發(fā)明的化合物免受胃的酸性環(huán)境的影響。腸溶片劑是本領(lǐng)域技術(shù)人員公知的。此外，各自包衣(coat)以免受胃的酸性環(huán)境影響的小球填充的膠囊也是本領(lǐng)域技術(shù)人員公知的。
如上所述，根據(jù)是否存在不對(duì)稱碳原子，本發(fā)明的化合物可以作為異構(gòu)體混合物、作為外消旋化合物或作為純異構(gòu)體的形式存在。
化合物的鹽優(yōu)選是結(jié)構(gòu)式I的化合物的藥學(xué)可接受的鹽或無(wú)毒鹽。為分離純化的目的，也可以使用藥學(xué)不可接受的鹽。
實(shí)施例實(shí)施例1化合物的合成Brevenal的分離Brevenal可以從例如K.brevis或其它紅潮有機(jī)體來(lái)分離純化。合適的純化方法是本領(lǐng)域所公知的。參見(jiàn)，例如，Baden等，1981，Toxicon19455-463；Poli等，Molecular Pharmacology，1986，30129-135。如下過(guò)程是代表性的。
使用氯仿將Brevenal從K.brevis培養(yǎng)物中提取出來(lái)(Provasoli-Guillard National Center for Culture of Marine Phytoplankton，West Boothbay Harbor，ME)。收集氯仿層，干燥，然后在石油醚和甲醇水溶液之間分配以除去顏料和細(xì)胞脂質(zhì)碎屑。將甲醇水溶液層(90％)在真空下干燥，然后使用硅膠柱分離組分(流動(dòng)相CHCl3∶甲醇∶乙酸；100∶10∶1v/v)。Brevenal和雙鞭甲藻神經(jīng)毒素從二氧化硅柱上共同洗脫；收集并合并含有這些材料的部分(fraction)。使用乙腈∶水流動(dòng)相(80∶20v/v)，使用低壓C18基質(zhì)柱從雙鞭甲藻神經(jīng)毒素和brevenal中分離剩余的顏料，從而產(chǎn)生“澄清的”提取物。用90∶10的甲醇∶水的電泳緩沖液(running buffer)在合適的泵速(例如，3-4mL/min)下，將澄清的提取物施加到例如Varian C18反相柱(0.8×25cm)HPLC柱。洗脫峰的檢測(cè)可以通過(guò)本領(lǐng)域已知的任何方法進(jìn)行，例如215nm下的紫外檢測(cè)。將所關(guān)注的峰分離并在合適的電泳緩沖液(例如99％的甲醇∶1％的水)中施加到另一個(gè)柱子，例如疏水相互作用(HI)柱(例如，Phenomenex C18苯基-己基柱0.8×25cm)。將含有所關(guān)注的化合物的部分匯集在一起，并且通過(guò)任何已知的方法(例如結(jié)晶、溶劑蒸發(fā)(Roto-Vap))分離。
Brevenal的結(jié)構(gòu)使用多種光譜方法來(lái)確定，包括NMR、質(zhì)譜和FT-IR。通過(guò)高分辨質(zhì)譜測(cè)量的brevenal的精確質(zhì)量(exact mass)是656.4043。主要結(jié)構(gòu)和立體特異性結(jié)構(gòu)使用1-D和2-D NMR光譜在四種不同的溶劑中闡明。
各種合成方法可用于制備本發(fā)明的化合物；brevenal是合適的起始物料。合適的方法是本領(lǐng)域已知的。Brevenal可以以其自身用作起始物料，或者可以首先將其保護(hù)或轉(zhuǎn)化成對(duì)應(yīng)的醇或羧酸用于隨后的加工。從這樣的起始物料來(lái)制備本發(fā)明的化合物的代表性合成過(guò)程在例如Mende，T.J.等，Tetr.Lett.，1990；31(37)5307-5310；Trainer，V.L.等，Molec.Pharm.，1991；40(6)988-994；Keck，G.E.等，Tetrahedron Lett.，1987，28139-142；Alvarez，E.等，Chem.Rev.，1995，951953-1980；Rein等，1994(a)J.Org Chem.，592107-2113；(b)J.Org.Chem..592101-2106中公開(kāi)。這些參考文獻(xiàn)中的每一篇均在此全文引入作為參考。本領(lǐng)域技術(shù)人員將會(huì)認(rèn)識(shí)到可以對(duì)特定的過(guò)程進(jìn)行少量修改以實(shí)現(xiàn)本發(fā)明的化合物。
實(shí)施例1α-阿米洛利衍生物阿米洛利(N-脒基-3，5-二氨基-6-氯吡嗪酰胺(chloropyrazine-carboxamide))以帶電形式存在于如下所示的生理?xiàng)l件下。
生理學(xué)條件下的阿米洛利結(jié)構(gòu) 海藻毒素 河豚毒素
Brevenal的阿米洛利官能化在brevenal側(cè)鏈上引入胍部分如下進(jìn)行。在叔丁醇/2-甲基-2-丁烯的溶劑混合物中用亞氯酸鈉和磷酸二氫鈉處理brevenal，以生成酸brevenal衍生物2(方案2)。在DMF中用CDI處理2，隨后加入胍(游離堿)或碳酸胍以提供胍化合物3。
方案2brevenal的α，β不飽和醛側(cè)鏈上胍的引入苯戊基(benzamvl)胍brevenal的制備基本遵循與合成3相同的過(guò)程進(jìn)行合成，只是加入苯戊基胍代替胍(方案2)?；蛘撸梢詫revenal轉(zhuǎn)化成對(duì)應(yīng)的鹽酸鹽以進(jìn)行對(duì)胍衍生物的轉(zhuǎn)化。
實(shí)施例2β-萘甲酰基衍生物β-萘甲?；鵥revenal如下制備。將羰二咪唑和2-萘甲酸在苯中的溶液加入到brevenol中，并且回流過(guò)夜以得到β-萘甲?；鵥revenal 5(方案3)。
方案3β-萘甲?；苌锏暮铣蓪revenal用硼氫化鈉和氯化鈰在DMF/甲醇的混合物中處理。在醚萃取之后，將粗提取物在HPLC上純化以得到具有良好收率的brevenol?；蛘?，可以先將Brevenal轉(zhuǎn)化成對(duì)應(yīng)的羧酸，隨后與適當(dāng)?shù)拇挤磻?yīng)以提供酯。
實(shí)施例3芳族BrevenalA.羥芐基部分的引入是通過(guò)溴化苯基鎂和brevenal之間的格氏反應(yīng)而實(shí)現(xiàn)的(方案4)。萃取，隨后純化以得到brevenal 6的麻黃素加合物。
方案4brevenal的麻黃素模型的合成
B.一步合成可用于制備幾種苯屬化合物。使用Wittig反應(yīng)和市售的正膦，可以制備各種含有苯基的衍生物。因此，用堿處理正膦7a-7f，隨后加入brevenal以提供對(duì)應(yīng)的炔屬化合物8a-bf(方案5)?；衔锟梢杂肏PLC進(jìn)一步純化。
方案5苯屬衍生物的合成實(shí)施例4苯并咪唑酮衍生物合成由brevenol活化為甲磺酸酯中間體開(kāi)始，隨后由碘化物取代甲磺酸酯以得到碘代-brevenal衍生物9(方案6)。然后用氫化鈉在DMF中處理市售的1，3-二氫-苯并咪唑-2-酮，隨后加入碘代brevenal 9，在萃取和純化之后，得到苯并咪唑酮-brevenal衍生物10。
方案6brevenal的苯并咪唑酮模型的合成實(shí)施例5Brevenal的核苷模型用二環(huán)己基碳二酰亞胺在DMF中處理ATP或UTP以生成然后會(huì)被添加到brevenol的反應(yīng)性部分。反應(yīng)混合物在回流下加熱和萃取。純化粗提取物以得到核苷酸衍生物11和12(方案7)。
方案7UTP-Brevenal和ATP-Brevenal的合成實(shí)施例6氣道力學(xué)試驗(yàn)方案氣道力學(xué)的測(cè)量——將未鎮(zhèn)靜(undated)的綿羊以伏臥位限制在手推車中，固定其頭部。用2％的利多卡因溶液進(jìn)行鼻道局部麻醉之后，將氣囊導(dǎo)管通過(guò)一個(gè)鼻孔送入下食道。用柔性光纖氣管鏡通過(guò)另一個(gè)鼻孔給動(dòng)物插上箍邊氣管內(nèi)導(dǎo)管。用食管氣囊導(dǎo)管(填充有1ml空氣)估算胸膜腔壓力，該導(dǎo)管位于距離胃食管連接部5-10cm處。在該位置，末端呼氣胸膜腔壓力范圍在-2和-5cm H2O之間。一旦放置氣囊，將其固定以便在試驗(yàn)的持續(xù)時(shí)間內(nèi)保持其位置。氣管中的側(cè)壓用側(cè)孔導(dǎo)管(內(nèi)部尺寸，2.5mm)來(lái)測(cè)量，該側(cè)孔導(dǎo)管通過(guò)氣管內(nèi)導(dǎo)管前進(jìn)，并且位于氣管內(nèi)插管的末梢至尖端。經(jīng)肺動(dòng)脈壓(transpulmonarypressure)，氣管壓力和胸膜腔壓力之間的差值，用差壓變送器導(dǎo)管系統(tǒng)測(cè)量，該系統(tǒng)不顯示壓力和流量之間的相移直到達(dá)到9Hz的頻率。對(duì)于肺阻力(RL)的測(cè)量，將氣管內(nèi)插管的近端連接到呼吸速率計(jì)(Fleisch，Dyna Sciences，Blue Bell，PA)。流量和經(jīng)肺動(dòng)脈壓的信號(hào)記錄在連接到計(jì)算機(jī)上的示波器記錄儀上，該計(jì)算機(jī)用于通過(guò)等體積技術(shù)(iso-volume technique)從經(jīng)肺動(dòng)脈壓、呼吸體積(通過(guò)數(shù)字積分獲得)和流量來(lái)在線計(jì)算RL。5-10次呼吸的分析用于RL的測(cè)定(Abraham等，1994)。
氣溶膠輸送系統(tǒng)——所有的氣溶膠均使用一次性醫(yī)療噴霧器(Raindrop_，Puritan Bennett，Lenexa，KS)生成，該噴霧器提供質(zhì)量中位直徑為3.2μm的氣溶膠(幾何SD為1.9)，該氣溶膠的質(zhì)量中位直徑由Andersen級(jí)聯(lián)沖擊取樣器測(cè)定。將噴霧器連接到由電磁閥和壓縮空氣源(20psi)組成的測(cè)量劑量裝置系統(tǒng)。將噴霧器的輸出導(dǎo)引入塑料T-形片，其一端連接到Harvard呼吸器的吸氣端口。在呼吸器的吸氣循環(huán)開(kāi)始時(shí)將電磁閥啟動(dòng)一秒。將氣溶膠在500ml的潮氣量和20次呼吸/分鐘的速率下輸送(Abraham等，1994)。
氣道響應(yīng)性——為評(píng)價(jià)氣道響應(yīng)性，我們通過(guò)在吸入緩沖液之后和在增加濃度的卡巴膽堿(0.25、0.5、1.0、2.0和4.0％w/v緩沖鹽水)的10次呼吸的每次連續(xù)給藥之后立即測(cè)量RL來(lái)制作卡巴膽堿的累積劑量響應(yīng)曲線。當(dāng)RL增加到鹽水后值(post-saline value)的400％時(shí)或在給予了最高的卡巴膽堿濃度之后，中斷激發(fā)試驗(yàn)。通過(guò)用劑量響應(yīng)曲線內(nèi)插法來(lái)測(cè)定的RL增大了400％的呼吸單位(BU)中的累積卡巴膽堿劑量來(lái)估算氣道響應(yīng)性。一個(gè)呼吸單位(BU)定義為包含1％wt/vol的卡巴膽堿的氣溶膠溶液的1次呼吸(Abraham等，1994)。
鼻通氣阻力——鼻通氣阻力(NAR)用修改的掩蔽鼻腔測(cè)壓技術(shù)測(cè)量。將綿羊的頭部放入連接面板的有機(jī)玻璃罩，該面板包含呼吸速率計(jì)以測(cè)量流量和兩個(gè)導(dǎo)管端口以測(cè)量在鼻和口壓力之間的壓差(Abraham等，1998)。
氣管粘液速度——在用2％的利多卡因溶液進(jìn)行鼻道局部麻醉之后，用直徑縮短6cm的氣管內(nèi)插管7.5cm由鼻插管。將管子的套囊就放置在聲帶以下(由熒光透視法證實(shí))以使得氣管表面積的最大曝露。TMV由X線攝影技術(shù)體內(nèi)測(cè)量。將10-20個(gè)不透過(guò)放射線的特氟隆/三氧化二鉍盤(直徑為1-mm，厚度為0.8-mm，重量為1.8mg)經(jīng)由氣管內(nèi)插管吹入氣管。在來(lái)自便攜式圖象增強(qiáng)器單元的錄像帶上記錄單個(gè)盤的頭向-軸向速度。測(cè)量每個(gè)盤在1-min觀察期間的運(yùn)動(dòng)距離來(lái)計(jì)算單個(gè)盤速度。對(duì)于每次試驗(yàn)，計(jì)算所有單個(gè)盤速度的平均值。給綿羊帶上含有長(zhǎng)度已知的含有不透過(guò)放射線的參考標(biāo)記的墊圈戴上，并且用作標(biāo)準(zhǔn)物以校正熒光透視法單元中固有的放大效應(yīng)(O′Riordan等，1997)。
統(tǒng)計(jì)學(xué)分析——如果數(shù)據(jù)正常分布，則使用參數(shù)統(tǒng)計(jì)學(xué)；如果數(shù)據(jù)不符合正常分布，則使用無(wú)參數(shù)統(tǒng)計(jì)學(xué)?；A(chǔ)統(tǒng)計(jì)學(xué)實(shí)驗(yàn)包括方差分析(ANOVA)，即，單向ANOVA或雙向ANOVA與多點(diǎn)分析的重復(fù)實(shí)驗(yàn)，和適當(dāng)?shù)膯吸c(diǎn)分析的未配對(duì)或配對(duì)t-檢驗(yàn)。這些檢驗(yàn)的無(wú)參數(shù)對(duì)應(yīng)檢驗(yàn)是a)Mann-Whitney檢驗(yàn)，其是未配對(duì)t-檢驗(yàn)的對(duì)應(yīng)檢驗(yàn)；b)Wilcoxon′s符號(hào)秩檢驗(yàn)，配對(duì)t-檢驗(yàn)的對(duì)應(yīng)檢驗(yàn)；c)對(duì)于相關(guān)樣品的Friedman方差分析，即隨機(jī)區(qū)組設(shè)計(jì)；d)Quade檢驗(yàn)，也是隨機(jī)區(qū)組設(shè)計(jì)，但是用于小區(qū)組(n≤4)；e)Kruskal-Wallis檢驗(yàn)，用于不相關(guān)樣品的ANOVA；和f)物參數(shù)配對(duì)比較，類似于參數(shù)Newman-Kuels配對(duì)檢驗(yàn)。在適用的情況下，線性回歸分析由最小平方差法進(jìn)行，并且對(duì)用Spearman’sρtest的測(cè)試其關(guān)聯(lián)性。對(duì)于所有的研究，在兩尾分析上接受p＜0.05的顯著度(Conover，1980)。
實(shí)施例7魚生物測(cè)定雄性食蚊魚(n＝104)用于此測(cè)定。將魚單個(gè)放入含有20mL水的50mL燒杯中。將測(cè)試化合物(PbTx-2和brevenal)溶解在EtOH中，濃度為0.1mg/mL，并且向魚中加入總量為200μL的EtOH。對(duì)照魚接受200μL的EtOH。將魚曝露于單獨(dú)的毒素(1μg/mL水)、單獨(dú)的brevenal(1或2μg/mL水)、或brevenal(1.0μg/mL水)和毒素(1.0μg/mL水)兩者(其中brevenal在毒素之前3min加入)中。在加入不同的化合物之后，監(jiān)測(cè)魚24h.或直到死亡時(shí)間。使用雙向Student氏t測(cè)驗(yàn)測(cè)定明顯的差異。
曝露于PbTx-2的魚僅僅在在大約7.5min.內(nèi)死亡，而曝露在對(duì)照物或者l或2μg/ml的brevenal中的魚在24h之后仍未死亡。Brevenal有效地保護(hù)魚免受相等濃度的PbTx-2，延長(zhǎng)壽命約2.5倍(魚在曝露之后大約17min死亡)。這顯示brevenal在作為雙鞭甲藻神經(jīng)毒素拮抗劑活性有效的濃度下不是毒性的。
實(shí)施例8競(jìng)爭(zhēng)性鼠腦突觸體測(cè)定如Poli等，1986中所述的那樣進(jìn)行。數(shù)據(jù)顯示當(dāng)加入大約1000x氚標(biāo)記的PbTx-2的濃度的化合物時(shí)，氚標(biāo)記的雙鞭甲藻神經(jīng)毒素PbTx-2被brevenal和二-O-Me brevenal有效地取代了(～80％)。每個(gè)的近似EC50是PbTx-2，3.53nM(Ki＝1.76nM)；brevenal，3.69uM(Ki＝1.86μM)；二-O-Me brevenal，1.35μM(Ki＝0.68M)。
本發(fā)明已經(jīng)參考各種具體的和優(yōu)選的實(shí)施方式和技術(shù)進(jìn)行描述。然而，應(yīng)當(dāng)理解可以進(jìn)行許多變化和改變，同時(shí)保持在本發(fā)明的精神和范圍內(nèi)。
權(quán)利要求
1.結(jié)構(gòu)式如下的化合物或其藥學(xué)可接受的鹽、溶劑化物、酯、酰胺、水合物或它們的組合 其中R是C1-C12烷基、C2-C12烯基、C1-C12烷基酯、C1-C12烷基酰胺、C4-C12烯基酯、C1-C12烷基芳基酯、C4-C12烯基芳基酯、C4-C12烯基酰胺、C1-C12烷氧基、甲?；鵆1-C12烷基、甲?；鵆2-C12烯基、烷?；鵆1-C12烷基、烷酰基C2-C12烯基、羧基C1-C12烷基、羧基C2-C12烯基，其中所述烷基和烯基任選地由1-6個(gè)選自C3-C12環(huán)烷基、C3-C12雜環(huán)基、芳基、雜芳基、C1-C6烷基、C1-C6烷氧基、鹵素、C2-C6烯基、OH、核苷、核苷酸、嘌呤、嘧啶、芳族酯、芳基酯、環(huán)烷基酯、環(huán)烯基酯、嘌呤或嘧啶的取代基所取代；OR1是OH或-O(CO)CH3；R2是-CH＝CHCH＝CH2、-CH2-苯基或-CH2-吡啶基，其中所述苯基和吡啶基任選地在每個(gè)可取代的位置由如下基團(tuán)取代該基團(tuán)獨(dú)立地是C1-C6烷基、C1-C6烷氧基、鹵代烷基、鹵代烷氧基、羥基、羥烷基、鹵素、-CO2H、C1-C6烷氧基羰基、-C(O)NH2、-C(O)NH(C1-C6烷基)或-C(O)N(C1-C6烷基)(C1-C6烷基)。
2.權(quán)利要求1所述的化合物，其中R是 其中Hal是氯、氟、碘或溴；R3選自H、OH、NH2、鹵素和NO2，和Y選自CH、N、O和S。
3.權(quán)利要求1所述的化合物，其中所述化合物選自
4.藥物組合物，其含有至少一種權(quán)利要求1所述的化合物、藥學(xué)可接受的鹽、溶劑化物、水合物、酯、酰胺或異構(gòu)體，和至少一種藥學(xué)可接受的載體、賦形劑、溶劑、佐劑、稀釋劑或其混合物。
5.權(quán)利要求4所述的藥物組合物，其中所述藥物組合物為單位劑型。
6.權(quán)利要求5所述的單位劑型的藥物組合物，其中所述結(jié)構(gòu)式I的化合物的存在量為大約1pg至大約100mg。
7.治療對(duì)象中粘液纖毛功能障礙的方法，包括對(duì)需要這樣的治療的對(duì)象給予治療有效量的權(quán)利要求1所述的化合物或其藥學(xué)可接受的鹽、溶劑化物、水合物、酯、酰胺或異構(gòu)體。
8.治療對(duì)象中粘液纖毛功能障礙的方法，包括對(duì)需要這樣的治療的對(duì)象給予治療有效量的權(quán)利要求4所述的藥物組合物。
9.治療、預(yù)防、或者治療和預(yù)防哺乳動(dòng)物中與粘液清除率降低相關(guān)的疾病的方法，包括對(duì)需要這樣的治療的哺乳動(dòng)物給予治療有效量的權(quán)利要求1所述的化合物或其藥學(xué)可接受的鹽、溶劑化物、水合物、酯、酰胺或異構(gòu)體。
10.治療、預(yù)防、或者治療和預(yù)防哺乳動(dòng)物中與粘液清除率降低相關(guān)的疾病的方法，包括對(duì)需要這樣的治療的哺乳動(dòng)物給予治療有效量的權(quán)利要求4所述的藥物組合物。
11.治療哺乳動(dòng)物中與粘液清除率降低相關(guān)的疾病的方法，包括對(duì)需要這樣的治療的哺乳動(dòng)物給予治療有效量的權(quán)利要求1的化合物或其藥學(xué)可接受的鹽、溶劑化物、水合物、酯、酰胺或異構(gòu)體。
12.治療哺乳動(dòng)物中與粘液清除率降低相關(guān)的疾病的方法，包括對(duì)需要這樣的治療的哺乳動(dòng)物給予治療有效量的權(quán)利要求4所述的藥物組合物。
13.權(quán)利要求12所述的方法，其中所述治療有效量的給藥劑量是每天大約0.1pg至大約100mg。
14.權(quán)利要求12所述的方法，其中所述治療有效量包括每天大約0.1mg至大約10mg的劑量。
15.治療患有慢性阻塞性肺疾病、哮喘、肺部疾病、肺部感染或囊性纖維化或者處于這些疾病的風(fēng)險(xiǎn)之中的對(duì)象或方法，包括對(duì)需要這樣的治療的對(duì)象給予治療有效量的權(quán)利要求1所述的化合物或其藥學(xué)可接受的鹽、溶劑化物、水合物、酯、酰胺或異構(gòu)體。
16.治療患有慢性阻塞性肺疾病、哮喘、肺部疾病、肺部感染或囊性纖維化或者處于這些疾病的風(fēng)險(xiǎn)之中的對(duì)象的方法，包括對(duì)需要這樣的治療的對(duì)象給予治療有效量的權(quán)利要求4所述的藥物組合物。
17.調(diào)節(jié)細(xì)胞中粘液清除率的方法，包括使細(xì)胞與有效量的權(quán)利要求1所述的化合物或其藥學(xué)可接受的鹽、溶劑化物、水合物、酯、酰胺或異構(gòu)體相接觸。
18.調(diào)節(jié)細(xì)胞中粘液清除率的方法，包括使細(xì)胞與有效量的權(quán)利要求4所述的藥物組合物相接觸。
19.權(quán)利要求1所述的化合物，其中R是
20.權(quán)利要求19所述的化合物，其中R1是H。
21.權(quán)利要求2所述的化合物，其中R2是-CH＝CHCH＝CH2。
22.治療工業(yè)病的方法，包括對(duì)需要這樣的治療的對(duì)象給予藥學(xué)可接受量的權(quán)利要求1所述的化合物或其藥學(xué)可接受的鹽、溶劑化物、水合物、酯、酰胺或異構(gòu)體。
23.權(quán)利要求22所述的治療方法，其中所述工業(yè)病由吸入氣體、織物粒子、砂粒或其它工業(yè)粒子或煙塵而引起或加重。
24.治療由吸入細(xì)菌或其它致病粒子而導(dǎo)致的疾病或病癥的方法，包括對(duì)需要這樣的治療的對(duì)象給予藥學(xué)可接受量的權(quán)利要求1所述的化合物或其藥學(xué)可接受的鹽、溶劑化物、水合物、酯、酰胺或異構(gòu)體。
全文摘要
本發(fā)明公開(kāi)了結(jié)構(gòu)式(I)的多環(huán)聚醚化合物和含有這樣的化合物的藥物組合物。其中R、OR
文檔編號(hào)A61K31/42GK1882593SQ200480034118
公開(kāi)日2006年12月20日 申請(qǐng)日期2004年9月20日 優(yōu)先權(quán)日2003年9月19日
發(fā)明者D·G·巴登, W·M·亞伯拉罕, A·J·布爾德萊斯, S·邁克利澤 申請(qǐng)人:北卡羅來(lái)納威爾明頓大學(xué)