專利名稱：治療乙肝的注射液及其制備方法
技術(shù)領(lǐng)域：
本發(fā)明涉及一種治療乙肝的注射液及其制備工藝。
背景技術(shù)：
現(xiàn)在用于治療乙肝的同類品種只有苦參堿注射液和苦參素(氧化苦參堿)注射液兩種，這兩個(gè)品種均是由苦參或苦豆子藥材中提取分離出的單一有效成分組成的，它們存在成本高(3000元/kg，)和資源利用不合理的缺點(diǎn)。

發(fā)明內(nèi)容
本發(fā)明為了解決同類產(chǎn)品成本高和資源利用不合理的缺點(diǎn)，提供一種治療乙肝的注射液及其制備方法。本發(fā)明的治療乙肝的注射液為1～5％的苦參總堿水溶液。它按照下述步驟進(jìn)行制備a、將去除泥土、砂石及其它雜質(zhì)的苦參粉碎成粗粉；b、用濃度為0.1～0.3％的鹽酸對(duì)苦參粗粉進(jìn)行滲漉，收集滲漉液；c、用堿調(diào)節(jié)滲漉液的pH值為6～8，過濾；d、將濾液通過H+型陽離子交換樹脂，用濃度為3～10％的氨水洗脫陽樹脂，收集洗脫液；e、用酸調(diào)節(jié)洗脫液的pH值為酸性，過濾；f、濾液通過OH-型陰離子交換樹脂，收集流出液；g、將流出液通過H+型陽離子交換樹脂，用濃度為3～10％的氨水洗脫陽離子交換樹脂，收集洗脫液濃縮至干，得到黃色或黃棕色固態(tài)苦參總堿；h、按照苦參總堿1～5g、注射水100ml的比例配成苦參總堿水溶液，用鹽酸調(diào)節(jié)苦參總堿水溶液的pH值為4.0～4.2；i、加入濃度為0.1～0.5％的活性炭，在80～100℃的條件下加熱30～60分鐘，過濾至澄明；j、灌封，以100℃流通蒸汽加熱30～60分鐘，得到無色注射液。本發(fā)明的苦參總堿是經(jīng)過特殊工藝提取出來的，它具有如下優(yōu)點(diǎn)(1)含量高兩次pH梯度沉淀和陰樹脂的進(jìn)一步除雜質(zhì)使苦參總堿的含量提高，經(jīng)過上述除去雜質(zhì)的苦參總堿水溶液，再通過陽離子交換樹脂對(duì)苦參總堿進(jìn)一步富集，使苦參總堿的含量進(jìn)一步提高，在收率不變的情況下比已有提取方法的含量(70％)提高10％以上；(2)顏色淺性狀由現(xiàn)有工藝的棕褐色膏狀物改變?yōu)辄S色或黃棕色固體；(3)低能耗以往樹脂法需要將吸附生物堿的陽離子交換樹脂出柱干燥，干燥周期長(zhǎng)、能耗高，本發(fā)明的工藝流程中僅最后一步需要加熱濃縮，大大降低了能源消耗；(4)無污染、成本低本發(fā)明首次研究清楚苦參總堿與共存雜質(zhì)理化性質(zhì)的區(qū)別，利用pH梯度沉淀法和陰離子樹脂去除雜質(zhì)而不是應(yīng)用有機(jī)溶媒提純，采用水作為溶劑，成本降低、不污染環(huán)境，而且所得產(chǎn)物中沒有有機(jī)溶媒殘留；(5)毒性低小鼠LD50為893.3mg·kg-1，而現(xiàn)有工藝小鼠LD50為298.5mg·kg-1，毒性降低了3倍?？鄥⒕哂薪舛尽⑶鍩?、利濕、祛風(fēng)燥濕、殺蟲等作用，氧化苦參堿具有抗HBV及HCV、改善肝細(xì)胞功能、抗肝纖維化、調(diào)節(jié)免疫功能及抗細(xì)胞凋亡的作用。本發(fā)明將氧化苦參堿和苦參堿作為治療乙肝的主要有效成分，集兩者療效于一體，使兩者相輔相成，達(dá)到治療乙肝的最佳效果。本發(fā)明具有如下優(yōu)點(diǎn)(1)資源利用合理以苦參總堿為主要有效成分治療乙肝，其中苦參總堿含氧化苦參堿約60％、苦參堿5％，資源利用比單一應(yīng)用有效成分更合理；(2)成本低苦參堿3000元/kg，氧化苦參堿3000元/kg，而苦參總堿800元/kg，成本降低了73％；(3)顏色淺所得注射液為無色水針；(4)療效好注射液對(duì)HepG22.2.15細(xì)胞分泌的HbsAg和HbeAg均有抑制作用；對(duì)鴨乙型肝炎病毒感染亦有治療作用；對(duì)小鼠CCl4急性肝損傷具有明顯保護(hù)作用。


圖1為苦參藥材的指紋圖，圖2為本發(fā)明提取的苦參總堿的指紋圖，圖3為本發(fā)明注射液的指紋圖。
具體實(shí)施例方式具體實(shí)施方式
一本實(shí)施方式的治療乙肝的注射液為1～5％的苦參總堿水溶液，即苦參總堿1～5g、注射用水100ml制成的水溶液。
具體實(shí)施方式
二本實(shí)施方式的注射液為1％的苦參總堿水溶液，即苦參總堿1g、注射用水100ml制成的水溶液。
具體實(shí)施方式
三本實(shí)施方式按照下述步驟制備注射液a、將去除泥土、砂石及其它雜質(zhì)的苦參粉碎成粗粉；b、用濃度為0.1～0.3％的鹽酸對(duì)苦參粗粉進(jìn)行滲漉，收集滲漉液；c、用堿調(diào)節(jié)滲漉液的pH值為6～8，過濾；d、將濾液通過H+型陽離子交換樹脂，用濃度為3～10％的氨水洗脫陽樹脂，收集洗脫液；e、用酸調(diào)節(jié)洗脫液的pH值為酸性，過濾；f、濾液通過OH-型陰離子交換樹脂，收集流出液；g、將流出液通過H+型陽離子交換樹脂，用濃度為3～10％的氨水洗脫陽離子交換樹脂，收集洗脫液濃縮至干，得到黃色或黃棕色固態(tài)苦參總堿；h、按照苦參總堿1～5g、注射水100ml的比例配成苦參總堿水溶液，用鹽酸調(diào)節(jié)苦參總堿水溶液的pH值為4.0～4.2；i、加入濃度為0.1～0.5％的活性炭，在80～100℃的條件下加熱30～60分鐘，過濾至澄明；j、灌封，以100℃流通蒸汽加熱30～60分鐘，得到無色注射液，即乙肝康注射液。所述H+型陽離子交換樹脂為H+型732樹脂或H+型110樹脂；OH-型陰離子交換樹脂為OH-型717樹脂或OH-型330樹脂。用高效液相法測(cè)試所得的苦參總堿和注射液，從譜圖可以看出本發(fā)明所得苦參總堿指紋圖(圖2)、注射液指紋圖(圖3)與苦參藥材指紋圖(圖1)相似度符合要求。
具體實(shí)施方式
四本實(shí)施方式按照下述步驟進(jìn)行a、將去除泥土、砂石及其它雜質(zhì)的苦參粉碎成粗粉；b、用濃度為0.2％的鹽酸對(duì)苦參粗粉在常溫常壓下進(jìn)行滲漉，收集滲漉液；c、用氨水調(diào)節(jié)滲漉液的pH值為7，過濾；d、將濾液通過H+型110樹脂，用濃度為8％的氨水洗脫110樹脂，收集洗脫液；e、用鹽酸調(diào)節(jié)洗脫液的pH值為2，過濾；f、濾液通過OH-型330樹脂，收集流出液；g、將流出液通過H+型110樹脂，用濃度為8％的氨水洗脫110樹脂，收集洗脫液濃縮至干，得到黃色或黃棕色固態(tài)苦參總堿；h、按照苦參總堿1g、注射水100ml的比例配成苦參總堿水溶液，用鹽酸調(diào)節(jié)苦參總堿水溶液的pH值為4.1；i、加入濃度為0.8％的活性炭，在100℃的條件下加熱30分鐘，過濾至澄明；j、灌封，以100℃流通蒸汽加熱30分鐘，得到無色水針，即乙肝康注射液。該注射液每支5ml，含苦參總堿50mg，應(yīng)為標(biāo)示量的90.0～110.0。
該注射液經(jīng)中國(guó)藥品生物制品檢定所藥理室進(jìn)行藥效學(xué)毒理研究結(jié)論如下乙肝康注射液在0.25～1mg·ml-1的劑量范圍內(nèi)，給藥3、6、9天對(duì)HepG22.2.15細(xì)胞分泌的HbsAg和HbeAg均有一定的抑制作用，隨著劑量的增加抑制作用也加強(qiáng)，苦參堿在0.025±0.5mg·ml-1的劑量范圍內(nèi)也有抑制作用。接觸細(xì)胞9天內(nèi)，乙肝康注射對(duì)HbsAg的IC50和SI的平均值分別為0.527mg·ml-1和3.35；而苦參堿為0.222mg·ml-1和3.83。接觸細(xì)胞9天后，乙肝康注射對(duì)HbeAg的IC50和SI分別為0.704mg·ml-1和2.5；而苦參堿為0.286mg·ml-1和2.69。乙肝康注射液和苦參堿注射液對(duì)培養(yǎng)的HepG22.2.15細(xì)胞的TC50分別為1.76±0.50和0.77±0.19mg·ml-1。
乙肝康注射液100mg/kg腹腔注射，對(duì)鴨血清DHBV-DNA有非常顯著的抑制作用。(P＜0.05)苦參堿注射液50mg/kg抑制作用不明顯，100mg/kg有顯著抑制作用，拉米夫啶50mg·ml-1，有顯著抑制作用。
乙肝康注射液高劑量組(100mg/kg/d)連續(xù)給藥7天，具有明顯的抑制CCl4致急性肝損傷小鼠血清谷丙轉(zhuǎn)氨酶(P＜0.05)和谷草轉(zhuǎn)氨酶(P＜0.01)升高的作用。中、低劑量(50，25mg/kg/d)抑制谷丙轉(zhuǎn)氨酶不明顯(P＞0.05)，但具有明顯的抑制谷草轉(zhuǎn)氨酶作用(P＜0.01)；50mg/kg/d的苦參堿降酶作用不及乙肝康注射液中劑量組(50mg/kg/d)。100mg/kg/d的乙肝康注射液連續(xù)給藥7天對(duì)小鼠CCl4急性肝損傷具有明顯的保護(hù)作用，相同臨床用量倍數(shù)的乙肝康注射液的降酶作用強(qiáng)于苦參堿。
本發(fā)明的注射液經(jīng)藥效學(xué)毒理研究表明乙肝康注射液對(duì)HepG22.2.15細(xì)胞分泌的HbsAg和HbeAg均有一定的抑制作用；乙肝康注射液對(duì)鴨乙型肝炎病毒感染有治療作用；乙肝康注射液對(duì)小鼠CCl4急性肝損傷有明顯保護(hù)作用。乙肝康注射液對(duì)小鼠靜脈注射的LD50為114.49mg/kg，95％可信限為105.46～124.36mg/kg。
權(quán)利要求
1.治療乙肝的注射液，其特征在于它為1～5％的苦參總堿水溶液。
2.根據(jù)權(quán)利要求1所述的治療乙肝的注射液，其特征在于它為1％的苦參總堿水溶液。
3.治療乙肝的注射液的制備方法，其特征在于它按照下述步驟進(jìn)行制備a、將去除泥土、砂石及其它雜質(zhì)的苦參粉碎成粗粉；b、用濃度為0.1～0.3％的鹽酸對(duì)苦參粗粉進(jìn)行滲漉，收集滲漉液；c、用堿調(diào)節(jié)滲漉液的pH值為6～8，過濾；d、將濾液通過H+型陽離子交換樹脂，用濃度為3～10％的氨水洗脫陽樹脂，收集洗脫液；e、用酸調(diào)節(jié)洗脫液的pH值為酸性，過濾；f、濾液通過OH-型陰離子交換樹脂，收集流出液；g、將流出液通過H+型陽離子交換樹脂，用濃度為3～10％的氨水洗脫陽離子交換樹脂，收集洗脫液濃縮至干，得到黃色或黃棕色固態(tài)苦參總堿；h、按照苦參總堿1～5g、注射水100ml的比例配成苦參總堿水溶液，用鹽酸調(diào)節(jié)苦參總堿水溶液的pH值為4.0～4.2；i、加入濃度為0.1～0.5％的活性炭，在80～100℃的條件下加熱30～60分鐘，過濾至澄明；j、灌封，以100℃流通蒸汽加熱30～60分鐘，得到無色注射液。
4.根據(jù)權(quán)利要求3所述的治療乙肝的注射液的制備方法，其特征在于所述H+型陽離子交換樹脂為H+型732樹脂或H+型110樹脂。
5.根據(jù)權(quán)利要求3所述的治療乙肝的注射液的制備方法，其特征在于所述OH-型陰離子交換樹脂為OH-型717樹脂或OH-型330樹脂。
全文摘要
治療乙肝的注射液及其制備方法，它涉及一種注射液及其制備工藝。本發(fā)明的注射液為1～5％的苦參總堿水溶液，其制備步驟為a.將苦參粉碎成粗粉；b.用鹽酸對(duì)苦參粗粉進(jìn)行滲漉；c.用堿調(diào)節(jié)滲漉液的pH值，過濾；d.將濾液通過H
文檔編號(hào)A61P31/00GK1593602SQ200410043718
公開日2005年3月16日 申請(qǐng)日期2004年7月16日 優(yōu)先權(quán)日2004年7月16日
發(fā)明者于喜水, 王有志 申請(qǐng)人:黑龍江省醫(yī)藥工業(yè)研究所, 于喜水, 王有志