專利名稱：一種治療心血管疾病和休克急救的中藥注射劑及其制備方法
技術(shù)領(lǐng)域：
本發(fā)明涉及一種治療心血管疾病和休克急救的中成藥，具體是涉及一種以人參、麥冬天然中草藥為原料制備的中藥注射劑，本發(fā)明還涉及該中藥注射劑的制備方法。
背景技術(shù)：
由人參和麥冬兩味中藥經(jīng)提取精制而成的參麥注射液具有益氣固脫、養(yǎng)陰生津、生脈的功效，已收載于國(guó)家標(biāo)準(zhǔn)中。臨床上廣泛用于冠心病、病毒性心肌炎、休克、慢性肺心病等具有較好的療效。但是目前的參麥注射劑都是以人參和麥冬所含的總皂苷為主要活性成分制成的，在制備過(guò)程中將人參和麥冬中的多糖成分視為無(wú)效成分被除去，因而其中幾乎不含人參多糖和麥冬多糖。藥理學(xué)研究表明，人參多糖和麥冬多糖具有抗缺氧、抗心肌缺血、增加冠脈流量、增強(qiáng)免疫功能的作用，因此目前的參麥注射劑尚未發(fā)揮人參多糖和麥冬多糖藥理作用，也沒(méi)有充分利用人參和麥冬的藥材資源。目前尚無(wú)含有人參多糖和麥冬多糖的參麥注射劑。

發(fā)明內(nèi)容
本發(fā)明的目的在于提供一種用于治療心血管疾病和休克急救的中藥注射劑，該注射劑不僅含有人參皂苷和麥冬皂苷，而且含有人參多糖和麥冬多糖，活性成分明確，質(zhì)量可控，療效確切，并且?guī)缀鯚o(wú)不良反應(yīng)。
本發(fā)明的另一目的在于提供該中藥注射劑的制備方法，該制備方法可以充分提取各味藥中的有效成分。
本發(fā)明提供的治療心血管疾病和休克急救的中藥注射劑，其所含活性成分組成及重量比例為人參總皂苷0.5～6.5、麥冬總皂苷0.3～7.2、總多糖1～20。
本發(fā)明中藥注射劑的有效成分中人參總皂苷和麥冬總皂苷的檢測(cè)采用了高效液相法，總多糖的檢測(cè)是采用比色法。
上述治療心血管疾病和休克急救的中藥注射劑的制備方法，是以人參、麥冬天然中草藥為原料，其重量配比為人參30～70％、麥冬70～30％，按以下步驟制備獲得(1)取人參，用60～80％乙醇加熱回流提取，人參藥渣備用；提取液合并，減壓回收盡乙醇后，加1～3倍量水，攪勻，冷藏12～48小時(shí)，濾過(guò)，濾液上大孔吸附樹(shù)脂層析柱，依次用水和50～80％的乙醇洗脫，收集50～80％的乙醇洗脫液，減壓回收并濃縮至相對(duì)密度為1.10～1.20，干燥，得人參提取物；(2)取麥冬和人參藥渣，加水煎煮，合并煎液，濾過(guò)，濾液減壓濃縮至相對(duì)密度為1.10～1.20，加乙醇使含醇量達(dá)70～85％，冷藏12～48小時(shí)，沉淀備用；上清液減壓回收并濃縮至相對(duì)密度為1.10～1.20，加1～3倍量水，攪勻，過(guò)濾，濾液上大孔吸附樹(shù)脂層析柱，先用水洗至洗脫液無(wú)色為止，再用50～80％的乙醇洗脫，收集乙醇洗脫液，減壓回收并濃縮至相對(duì)密度為1.10～1.20，干燥，得麥冬提取物；(3)取步驟(2)的沉淀，加2～6倍量的水溶解，濾過(guò)，濾液用分子量為10萬(wàn)的膜超濾，超濾液再用分子量為1000～3000的膜超濾濃縮，濃縮液加乙醇使含醇量達(dá)80％，冷藏，濾過(guò)，沉淀用少量乙醇洗滌后真空干燥，粉碎，得總多糖；(4)取上述人參提取物、麥冬提取物、總多糖，加入注射用水和藥用輔料，攪拌溶解，調(diào)pH至6～7.5，靜置12～48小時(shí)，濾過(guò)，濾液按制劑常規(guī)工藝制成注射劑，包括注射液、大輸液、凍干粉針劑。
本發(fā)明所述的藥用輔料為吐溫80、甘露醇、聚維酮K30、葡萄糖、乳糖中的一種或幾種；所述的人參提取物是以人參總皂苷為主要成分的提取物，人參總皂苷含量高于80％；所述的麥冬提取物是以麥冬總皂苷為主要成分的提取物，麥冬總皂苷含量高于80％；所述的總多糖為人參多糖和麥冬多糖的混合多糖，總多糖含量高于85％。
本發(fā)明藥物具有以下特點(diǎn)1、本發(fā)明藥物由人參、麥冬兩味藥物制成，其中人參中含有人參皂苷、多糖類等化學(xué)成分，人參皂苷和人參多糖為人參中最主要的生理活性成分；麥冬含麥冬皂苷和麥冬多糖等化學(xué)成分，為麥冬中最主要生理活性成分。因此本發(fā)明藥物的制備方法根據(jù)各藥物所含主要有效成分的理化性質(zhì)和藥理作用，分別選用水和乙醇作為提取溶劑，并以大孔吸附樹(shù)脂和超濾法進(jìn)行純化處理提取液，以充分提取精制人參和麥冬中的皂苷類和多糖類等活性成分，因而本發(fā)明的藥物具有有效成份明確、質(zhì)量可控的特點(diǎn)。
2、本發(fā)明劑型為注射劑，包括注射液、大輸液、凍干粉針劑，可直接用于肌肉注射、靜脈注射，因而起效迅速、生物利用度高、效果確切可靠。
3、本發(fā)明藥物經(jīng)穩(wěn)定性試驗(yàn)研究表明，有效期長(zhǎng)達(dá)2.7年，澄明度、溶血性、色澤、pH值、熱源、刺激性等指標(biāo)均符合《中國(guó)藥典》有關(guān)注射劑的規(guī)定。
4、本發(fā)明凍干粉針劑除具有注射液特點(diǎn)外，尚有貯存方便、便于攜帶和使用的優(yōu)點(diǎn)。
5、本發(fā)明藥物的主要藥效學(xué)試驗(yàn)表明，在抗心肌梗塞和抗休克作用方面，0.5g生藥/kg的本發(fā)明凍干粉與1.0g生藥/kg的對(duì)照藥參麥注射液作用沒(méi)有明顯差異。說(shuō)明本發(fā)明用藥劑量為對(duì)照藥參麥注射液50％時(shí)(以生藥計(jì))，即可取得相同的療效，因此本發(fā)明可大大降低人參和麥冬的用量、節(jié)省大量藥材資源。
6、經(jīng)臨床初步試驗(yàn)表明，本發(fā)明藥物具有益氣固脫生脈、養(yǎng)陰生津的功效，可提高心輸出量，降低外周血管阻力，升高血壓，增強(qiáng)機(jī)體免疫功能，用于治療心血管疾病和休克的急救療效顯著，尚未發(fā)現(xiàn)明顯毒副作用。
下面通過(guò)實(shí)施例及主要藥效學(xué)試驗(yàn)對(duì)本發(fā)明作進(jìn)一步的說(shuō)明。
實(shí)施例1凍干粉針劑的制備(1)取人參100g，用70％乙醇加熱回流提取4次，每次1.5小時(shí)，人參藥渣備用；提取液合并，減壓回收盡乙醇后，加1.5倍量水，攪勻，冷藏48小時(shí)，濾過(guò)，濾液上大孔吸附樹(shù)脂層析柱(D101型)，依次用水和75％的乙醇洗脫，收集75％的乙醇洗脫液，減壓回收并濃縮至相對(duì)密度為1.16(60℃)，干燥，得人參提取物2.8g，含量83％；(2)取麥冬120g和人參藥渣，加水煎煮3次，每次1.5小時(shí)，合并煎液，濾過(guò)，濾液減壓濃縮至相對(duì)密度為1.18(60℃)，加乙醇使含醇量達(dá)80％，冷藏42小時(shí)，沉淀備用；上清液減壓回收并濃縮至相對(duì)密度為1.16(60℃)，加2倍量水，攪勻，過(guò)濾，濾液上大孔吸附樹(shù)脂層析柱，先用水洗至洗脫液無(wú)色為止，再用70％的乙醇洗脫，收集乙醇洗脫液，減壓回收并濃縮至相對(duì)密度為1.20(60℃)，干燥，得麥冬提取物3.6g，含量86％；
(3)取步驟(2)的沉淀，加5倍量的水溶解，濾過(guò)，濾液用分子量為10萬(wàn)的膜超濾，超濾液再用分子量為3000的膜超濾濃縮，濃縮液加乙醇使含醇量達(dá)80％，冷藏，濾過(guò)，沉淀用少量乙醇洗滌后真空干燥，粉碎，得總多糖8.7g，含量87％；(4)取上述人參提取物、麥冬提取物、總多糖，加入注射用水850ml、甘露醇130g、聚維酮K30 5g，攪拌溶解，用40％的氫氧化鈉溶液調(diào)pH至7，靜置16小時(shí)，濾過(guò)，濾液加注射用水止1000ml，混勻、分裝于已滅菌的西林瓶中，2ml/支，冷凍干燥，壓塞、壓蓋，即制得本發(fā)明凍干粉針劑。
實(shí)施例2注射液的制備(1)取人參90g，用75％乙醇加熱回流提取5次，每次1小時(shí)，人參藥渣備用；提取液合并，減壓回收盡乙醇后，加2倍量水，攪勻，冷藏40小時(shí)，濾過(guò)，濾液上大孔吸附樹(shù)脂層析柱，依次用水和70％的乙醇洗脫，收集70％的乙醇洗脫液，減壓回收并濃縮至相對(duì)密度為1.20(60℃)，干燥，得人參提取物2.3g，含量85％；(2)取麥冬150g和人參藥渣，加水煎煮3次，每次2小時(shí)，合并煎液，濾過(guò)，濾液減壓濃縮至相對(duì)密度為1.16(60℃)，加乙醇使含醇量達(dá)85％，冷藏48小時(shí)，沉淀備用；上清液減壓回收并濃縮至相對(duì)密度為1.18(60℃)，加2.5倍量水，攪勻，過(guò)濾，濾液上大孔吸附樹(shù)脂層析柱，先用水洗至洗脫液無(wú)色為止，再用65％的乙醇洗脫，收集乙醇洗脫液，減壓回收并濃縮至相對(duì)密度為1.18(60℃)，干燥，得麥冬提取物5.1g，含量88％；(3)取步驟(2)的沉淀，加6倍量的水溶解，濾過(guò)，濾液用分子量為10萬(wàn)的膜超濾，超濾液再用分子量為1000的膜超濾濃縮，濃縮液加乙醇使含醇量達(dá)80％，冷藏，濾過(guò)，沉淀用少量乙醇洗滌后真空干燥，粉碎，得總多糖9.8g，含量89.6％；(4)取人參提取物、麥冬提取物、總多糖，加入注射用水900ml和葡萄糖30g，攪拌溶解，用40％的氫氧化鈉溶液調(diào)pH至7.5，靜置48小時(shí)，濾過(guò)，濾液加注射用水至1000ml，再用微孔濾膜濾過(guò)，濾液灌封于10ml的安瓿中，滅菌、質(zhì)檢，即制得本發(fā)明注射液。
實(shí)施例3大輸液的制備(1)取麥冬120g、人參110g，其余步驟同實(shí)施例2之步驟(1)(2)(3)相同，分別制備人參提取物、黃芪提取物、總多糖；(2)取上述人參提取物、黃芪提取物、總多糖，加入注射用水2000ml和葡萄糖50g，攪拌溶解，用40％的氫氧化鈉溶液調(diào)pH7.5，靜置40小時(shí)，濾過(guò)，濾液再用濾膜濾過(guò)，濾液灌封于100ml輸液瓶中，滅菌、質(zhì)檢，即制得本發(fā)明大輸液劑。
以上實(shí)施例僅為了對(duì)本發(fā)明作進(jìn)一步的說(shuō)明，而本發(fā)明的范圍不受所舉實(shí)施例的局限。
主要藥效學(xué)試驗(yàn)1.實(shí)驗(yàn)材料與方法1.1材料藥品本發(fā)明凍干粉針，規(guī)格，2g生藥/瓶。參麥注射液，20ml/支，正大青春寶藥業(yè)有限公司生產(chǎn)。
儀器RM-6000型四道生理多導(dǎo)儀(日本光電產(chǎn))，所用插件分別為浮地式生物電放大器(AT-601G)、載波放大器(AP-621G)、血壓記錄器(AP-611G)、心率計(jì)數(shù)器(AT-601G)。MF-1200型電磁流量計(jì)(日本光電產(chǎn))；BL-410生物信號(hào)采集與分析裝置，四川泰盟科技公司生產(chǎn)。動(dòng)物人工呼吸機(jī)，DH-150，浙江大學(xué)醫(yī)學(xué)儀器廠生產(chǎn)。
動(dòng)物雜種犬，體重10-15kg，雌雄兼用，由中山大學(xué)中山醫(yī)學(xué)院實(shí)驗(yàn)動(dòng)物部提供。
1.2方法健康合格的雜種犬25條，雌雄兼用，3％戊巴比妥鈉(30mg/kg)靜脈注射行全身麻醉，背位固定。切開(kāi)氣管，插入氣管套管，保持呼吸通暢。一側(cè)股動(dòng)脈插管并與壓力換能器相連，經(jīng)AP-601G放大器測(cè)量股動(dòng)脈血壓。標(biāo)準(zhǔn)II導(dǎo)程導(dǎo)聯(lián)與AB-601G生物電放大器相連，記錄心電圖。用心電R波觸發(fā)AT-601G心率計(jì)測(cè)量心率。氣管插管接呼吸機(jī)行正壓人工呼吸(20次/min)。右側(cè)臥位固定，于左第III肋間使用電刀開(kāi)胸(盡可避免出血、滲血)，以擴(kuò)胸器張開(kāi)胸腔，分離升主動(dòng)脈根部安放電磁流量計(jì)探頭并固定，連接記錄MF-1200型電磁流量計(jì)記錄心輸出量。同時(shí)以BL-410生物信號(hào)采集與分析裝置描記心外膜電圖及心電圖。于冠狀動(dòng)脈左前支(LAD)末稍、中部、根部下方，分別穿入細(xì)絲線，以備結(jié)扎。測(cè)定血壓與心電，穩(wěn)定20min后，每隔10min順次結(jié)扎LAD末梢、中部、根部，待MAP下降為原來(lái)的70％以下，CO減少原30％為休克。BP穩(wěn)定10min不再回升后把胸腔縫合。分別iv給藥治療。
給藥方法，模型成立后先分別靜脈推注本發(fā)明凍干粉1.0、0.5g/kg，參麥注射液1.0g/kg，給藥體積為10ml，對(duì)照組給等體積5％葡萄糖注射液。后給三倍劑量進(jìn)行滴注，給藥體積為30ml，滴速為0.5ml/min。
觀察指標(biāo)(1)心功能、血流動(dòng)力學(xué)指標(biāo)手術(shù)完畢，待所有觀測(cè)指標(biāo)穩(wěn)定后(如有出血即適當(dāng)輸液待穩(wěn)定后才進(jìn)行實(shí)驗(yàn))，記錄正常指標(biāo)。然后iv給藥分別記錄給藥前及給藥后5、15、30、60、90、120、180分鐘分別測(cè)定收縮壓(SAP)、舒張壓(DAP)、平均動(dòng)脈血壓(MAP)、心率(HR)、心輸出量(CO)、并計(jì)算總外周阻力(TPVR)。
(2)對(duì)心源性休克的治療作用A、分別在各個(gè)時(shí)間點(diǎn)用BL-410生物信號(hào)系統(tǒng)描記心外膜電圖，心電圖缺血范圍(N-ST)以每導(dǎo)聯(lián)中 ST段抬高超出0.2mV的點(diǎn)數(shù)總和表示。心肌缺血程度(∑-ST)以每導(dǎo)聯(lián)中ST段上升或下降幅度的總和表示。
B、對(duì)心肌梗死范圍的測(cè)定于180min后，取下心臟進(jìn)行心肌組織TTC染色，以稱重法測(cè)定梗死的范圍(梗死區(qū)/左室重×100％)。
C、血清酶測(cè)定分別在給藥前與給藥后180min時(shí)取血，分離血清，應(yīng)用生化自動(dòng)分析儀測(cè)定血清乳酸脫氫酶(LDH)和肌酸磷酸激酶(CK)。
2.實(shí)驗(yàn)結(jié)果實(shí)驗(yàn)結(jié)果表明對(duì)犬進(jìn)行冠脈結(jié)扎后，出現(xiàn)血壓明顯下降，心輸出量明顯降低，在試驗(yàn)過(guò)程，即0-180min內(nèi)各動(dòng)物的血壓相對(duì)比較平穩(wěn)。采用藥物治療后對(duì)休克狀態(tài)有明顯改善作用，本發(fā)明凍干粉1.0、0.5g/kg兩劑量組推注給藥后5min-180min均表明出明顯升壓的作用(P＜0.05 or P＜0.01)，同時(shí)也可增加心輸出量的作用，高劑量組在用藥后60-120min有明顯的統(tǒng)計(jì)學(xué)差異(P＜0.05)，對(duì)心率和外周血管阻力未見(jiàn)明顯作用。陽(yáng)性對(duì)照藥參麥注液具有相似作用。提示本發(fā)明凍干粉可通過(guò)升高休克犬的血壓和心輸出量起到改善休克所致全身供血障礙，作用呈劑量相關(guān)性，0.5g/kg本發(fā)明凍干粉與1.0g/kg參麥注射液作用沒(méi)有明顯差異。
對(duì)犬進(jìn)行冠脈結(jié)扎后心電圖發(fā)生明顯改變，開(kāi)始心率加快，T波明顯升高或倒置。心電圖缺血范圍(N-ST)、心肌缺血程度(∑-ST)及梗死性心肌MTT染色結(jié)果均表現(xiàn)出明顯的嚴(yán)重病變。經(jīng)藥物治療后各指標(biāo)均有明顯的改善作用，表現(xiàn)為本發(fā)明凍干粉1.0、0.5g/kg兩劑量組推注給藥后5min-180min對(duì)N-ST、∑-ST的改變均有明顯抑制作用(P＜0.05 or P＜0.01)，同時(shí)可以明顯降低心肌梗死面積和降低心肌酶在血清中的水平。提示本發(fā)明凍干粉對(duì)心肌梗塞有良好的治療作用，且呈劑量相關(guān)性，0.5g/kg本發(fā)明凍干粉與1.0g/kg參麥注射液作用沒(méi)有明顯差異。
表1 本發(fā)明凍干粉對(duì)心肌缺血犬MBP、HR、CO、TPVR的影響(n＝6，X±SD)

組間配對(duì)t檢驗(yàn)，*為p＜0.05，**為p＜0.01
表2 對(duì)心肌缺血犬心外膜電圖影響(X±SD)

組間配對(duì)t檢驗(yàn)，*為p＜0.05，**為p＜0.01
表3 對(duì)心肌缺血犬心肌梗死范圍與心肌酶的影響(X±SD)

t檢驗(yàn)或組間配對(duì)t檢驗(yàn)，*為p＜0.05，**為p＜0.01結(jié)論由上述實(shí)驗(yàn)結(jié)果表明，本發(fā)明凍干粉對(duì)心肌梗塞性休克犬的心臟功能有明顯的保護(hù)作用，可明顯提高心輸出量，降低外周血管阻力，提升血壓，增加重要器官及全身的供血，同時(shí)實(shí)驗(yàn)結(jié)果顯示本發(fā)明凍干粉對(duì)心肌缺血有明顯的治療作用，主要表現(xiàn)在降低心肌缺血范圍與梗死面積，明顯降低心肌酶LDH和CPK。提示本發(fā)明凍干粉對(duì)心肌梗塞有良好的治療作用，且呈劑量相關(guān)性，0.5g/kg本發(fā)明凍干粉與1.0g/kg參麥注射液作用沒(méi)有明顯差異。
權(quán)利要求
1.一種治療心血管疾病和休克急救的中藥注射劑，其特征在于所含活性成分組成及其重量比例為人參總皂苷0.5～6.5、麥冬總皂苷0.3～7.2、總多糖1～20。
2.根據(jù)權(quán)利要求1所述的治療心血管疾病和休克急救的中藥注射劑，其特征在于所述的注射劑包括注射液、大輸液、凍干粉針劑。
3.權(quán)利要求1和2所述的治療心血管疾病和休克急救的中藥注射劑的制備方法，其特征在于以人參、麥冬天然中草藥為原料，其重量配比為人參30～70％、麥冬70～30％，按以下步驟制備獲得(1)取人參，用60～80％乙醇加熱回流提取，人參藥渣備用；提取液合并，減壓回收盡乙醇后，加1～3倍量水，攪勻，冷藏12～48小時(shí)，濾過(guò)，濾液上大孔吸附樹(shù)脂層析柱，依次用水和50～80％的乙醇洗脫，收集50～80％的乙醇洗脫液，減壓回收并濃縮至相對(duì)密度為1.10～1.20，干燥，得人參提取物；(2)取麥冬和人參藥渣，加水煎煮，合并煎液，濾過(guò)，濾液減壓濃縮至相對(duì)密度為1.10～1.20，加乙醇使含醇量達(dá)70～85％，冷藏12～48小時(shí)，沉淀備用；上清液減壓回收并濃縮至相對(duì)密度為1.10～1.20，加1～3倍量水，攪勻，過(guò)濾，濾液上大孔吸附樹(shù)脂層析柱，先用水洗至洗脫液無(wú)色為止，再用50～80％的乙醇洗脫，收集乙醇洗脫液，減壓回收并濃縮至相對(duì)密度為1.10～1.20，干燥，得麥冬提取物；(3)取步驟(2)的沉淀，加2～6倍量的水溶解，濾過(guò)，濾液用分子量為10萬(wàn)的膜超濾，超濾液再用分子量為1000～3000的膜超濾濃縮，濃縮液加乙醇使含醇量達(dá)80％，冷藏，濾過(guò)，沉淀用少量乙醇洗滌后真空干燥，粉碎，得總多糖；(4)取上述人參提取物、麥冬提取物、總多糖，加入注射用水和藥用輔料，攪拌溶解，調(diào)pH至6～7.5，靜置12～48小時(shí)，濾過(guò)，濾液按制劑常規(guī)工藝制成注射劑，包括注射液、大輸液、凍干粉針劑。
4.根據(jù)權(quán)利要求3所述的治療心血管疾病和休克急救的中藥注射劑的制備方法，其特征在于所述的藥用輔料為吐溫80、甘露醇、聚維酮K30、葡萄糖、乳糖中的一種或幾種。
全文摘要
本發(fā)明公開(kāi)了一種治療心血管疾病和休克急救的中藥注射劑，主要含有從中藥人參、麥冬中提取分離得到的活性成分人參總皂苷、人參多糖、麥冬總皂苷和麥冬多糖。本發(fā)明還公開(kāi)了上述中藥注射劑的制備方法。本發(fā)明經(jīng)藥效學(xué)試驗(yàn)表明，對(duì)心肌梗塞性休克犬的心臟功能有明顯的保護(hù)作用，可明顯提高心輸出量，降低外周血管阻力，提升血壓，增加重要器官及全身的供血，有明顯的抗心肌缺血作用，用于治療心血管疾病和休克急救，作用迅速，療效確切。
文檔編號(hào)A61P9/00GK1528336SQ03147020
公開(kāi)日2004年9月15日 申請(qǐng)日期2003年9月30日 優(yōu)先權(quán)日2003年9月30日
發(fā)明者秦吉興 申請(qǐng)人:廣州歐華醫(yī)藥生物技術(shù)有限公司