專利名稱：含有脂肪酸的組合物的制作方法
技術(shù)領(lǐng)域：
本發(fā)明涉及可用作抗變態(tài)反應(yīng)劑等藥物的含有脂肪酸的組合物，具體的說，是含有飽和脂肪酸和水溶性硅酸聚合物作為有效成分的藥物組合物。
生命體的單元--細(xì)胞整個(gè)都被膜所包圍著。這層膜不僅起保護(hù)在細(xì)胞內(nèi)部進(jìn)行的細(xì)胞正?；顒拥淖饔茫移鹬鴶z取營養(yǎng)物質(zhì)、排出廢棄物的門戶的作用，進(jìn)一步還有細(xì)胞內(nèi)外信息傳遞的作用。在高等生物的細(xì)胞中，除了外面包圍的細(xì)胞膜外，在細(xì)胞內(nèi)部還有細(xì)胞內(nèi)膜系統(tǒng)的細(xì)胞器。細(xì)胞器具有多種分化的功能，例如線粒體具有產(chǎn)生能量、異化代謝、呼吸等功能，溶酶體內(nèi)部含有多種水解酶，所以可以進(jìn)行細(xì)胞內(nèi)外物質(zhì)的消化，內(nèi)質(zhì)網(wǎng)是合成蛋白質(zhì)和脂類等生命物質(zhì)的場所，高爾基體進(jìn)行將內(nèi)質(zhì)網(wǎng)合成的生命物質(zhì)轉(zhuǎn)移到細(xì)胞外的轉(zhuǎn)運(yùn)分泌。
上述細(xì)胞質(zhì)膜和細(xì)胞器的膜的主要成分是極性脂質(zhì)和膜蛋白。生物膜中所含的脂質(zhì)以磷脂為主，其中磷脂酰膽堿(PC)和磷脂酰乙醇胺(PE)占60～90％。根據(jù)對大鼠肝細(xì)胞磷脂的脂肪酸組成的研究，細(xì)胞質(zhì)膜中的PC之中有37％為棕櫚酸，32％為硬脂酸，PE之中有26％為棕櫚酸，33％為硬脂酸。對線粒體中的PC、PE來說，棕櫚酸均為27％，硬脂酸分別為22％和27％。由此可見，棕櫚酸和硬脂酸等飽和脂肪酸是生物體膜的主要組成成分。
另外硅在動植物界廣泛的分布著，特別是在動物組織中，硅酸鹽在毛、羽、骨、皮膚等處存在，已知是骨形成的必要成分。在動物組織中，作為形成膠原中交錯(cuò)鍵鏈，構(gòu)成酸性粘多糖的組成成分而存在。雖然硅是機(jī)體組織的必要成分，但對于給以動物硅時(shí)的藥理作用，已知不過有因抗巨噬細(xì)胞所致的免疫抑制作用或抗糖尿病作用等幾種藥理作用。至于其醫(yī)藥用途，也只是以硅酸化合物硅酸鎂、硅酸鋁等抗酸劑而使用的程度。
本發(fā)明人著眼于硅酸和含硅化合物在機(jī)體內(nèi)的功能和藥理學(xué)作用而持續(xù)進(jìn)行了研究，對于硅酸聚合物，通過本發(fā)明人獨(dú)特的方法，發(fā)現(xiàn)將水溶性硅酸類聚合物化制得的水溶性硅酸聚合物可以對隨病態(tài)時(shí)所發(fā)生的機(jī)體細(xì)胞功能不全而產(chǎn)生的神經(jīng)系統(tǒng)、內(nèi)分泌系統(tǒng)以及免疫系統(tǒng)的紊亂進(jìn)行調(diào)節(jié)，對此進(jìn)行修復(fù)從而使機(jī)體功能正?；膬?yōu)良作用，并提交了專利申請，該作用是在單體狀態(tài)下沒有表現(xiàn)的藥理活性，只有到了水溶性硅酸聚合物的狀態(tài)才表現(xiàn)出來的效果。例如日本專利第2698908號公報(bào)記載了水溶性硅酸聚合物及其制備方法，日本專利第2588109號公報(bào)、2727441號公報(bào)、2727442號公報(bào)、2948784號公報(bào)、3113619號公報(bào)中分別記載了該水溶性硅酸聚合物作為鎮(zhèn)痛劑、抗變態(tài)反應(yīng)劑、知覺異常改善劑、末梢血流改善劑、抗炎劑的用途。
本發(fā)明人對上述水溶性硅酸聚合物作進(jìn)一步研究的結(jié)果，發(fā)現(xiàn)通過將細(xì)胞膜主要構(gòu)成成分飽和脂肪酸與水溶性硅酸聚合物加以組合，具有增強(qiáng)該硅酸聚合物的藥理活性的效果，完成了本發(fā)明。
本發(fā)明的目的在于提供可用于抗變態(tài)反應(yīng)劑等藥物的含有飽和脂肪酸和水溶性硅酸聚合物作為有效成分的藥物組合物。
本發(fā)明藥物組合物的有效成分之一是水溶性硅酸聚合物，是由硅酸或硅酸鹽聚合而成的硅酸聚合物。作為硅酸的種類例如原硅酸、偏硅酸、中(meso)二硅酸、中三硅酸、中四硅酸等。也可以用上述硅酸的鹽例如鈉、鉀等堿金屬鹽或硅酸堿鹽的稠溶液水玻璃等含硅酸物質(zhì)加以制備。另外也可以使用在硅氧化物中加入堿水溶液加熱溶解而生成的硅酸鹽溶液。
本發(fā)明的水溶性硅酸聚合物分子量為4800～200萬，優(yōu)選13000～100萬(采用凝膠過濾法、超濾法、電泳法等進(jìn)行分析)，硅酸的聚合度75～33000，優(yōu)選210～16500。
本發(fā)明的硅酸聚合物，例如可以采用如下方法制造。將原硅酸鈉、偏硅酸鈉、原硅酸鉀、偏硅酸鉀等水溶性硅酸鹽，或水玻璃等含硅酸物質(zhì)用水溶性溶劑溶解。上述硅酸鹽水溶液是高pH的，用鹽酸、硫酸、醋酸等常用的酸類調(diào)節(jié)pH至2～10，優(yōu)選pH 4～9.5的范圍。該水溶液中優(yōu)選添加乳糖、甘露醇、山梨醇、白糖、葡萄糖、果糖、半乳糖等糖類。另外也可以添加食鹽、氯化鉀、硫酸鈉等鹽類。
另外，由丹參、紫芝、木賊等來源于動植物的生藥、還有接種了痘苗病毒的動物組織提取物中也含有上述水溶性硅酸聚合物。因此，由上述生藥或提取物精制得到的水溶性硅酸聚合物也可以作為本發(fā)明的有效成分加以利用，或者也可以在該生藥或提取物中加入飽和脂肪酸，增強(qiáng)其中所含的水溶性硅酸聚合物的作用。
在制劑上優(yōu)選的是將含有上述水溶性硅酸聚合物的溶液干燥制成粉末狀。粉末化時(shí)可以采用通常所用的方法進(jìn)行。例如加熱或凍干方法。加熱干燥時(shí)，優(yōu)選例如在150～250℃下進(jìn)行干燥的方法以進(jìn)行粉末化。凍干時(shí)可按照常規(guī)方法在減壓下冷凍干燥粉末化。
聚合物的確認(rèn)可采用加入鉬酸銨溶液，通過用亞硫酸鹽溶液還原而生成的鉬酸青的發(fā)色因聚合而減弱的方法等加以確認(rèn)。另外也可以在酸性條件下通過凝膠過濾法從高分子帶中分離聚合物，將其用堿分解通過鉬硅酸青加以確認(rèn)。
本發(fā)明的藥物組合物中作為有效成分而含有的飽和脂肪酸是分子內(nèi)沒有雙鍵、三鍵的脂肪酸的總稱，可以用化學(xué)式CnH2n+1COOH表示。該飽和脂肪酸可以使用直鏈或支鏈的飽和脂肪酸，優(yōu)選碳8～26的飽和脂肪酸，例如辛酸(8:0)、癸酸(10:0)、月桂酸(12:0)、肉豆蔻酸(14:0)、十五酸(15:0)、棕櫚酸(16:0)、十七酸(17:0)、硬脂酸(18:0)、二十酸(20:0)、二十一酸(21:0)、二十二酸(22:0)、二十三酸(23:0)、二十四酸(24:0)、二十六酸(26:0)等直鏈飽和脂肪酸和2-己基癸酸(16:0)、13-甲基十五酸(16:0)、16-甲基十七酸(18:0)等支鏈飽和脂肪酸。
上述飽和脂肪酸可以使用一種或多種組合的混合物。可以使用游離型或鈉鹽或鉀鹽等鹽類，優(yōu)選以可溶于水的形式使用。飽和脂肪酸及其鹽也可使用市售品，或者使用從動物性油脂或植物油等原料提取·精制的產(chǎn)品。
本發(fā)明中，使用相對于水溶性硅酸聚合物(以硅計(jì))1/20倍～50倍(w/w)、優(yōu)選1/10倍～30倍量的飽和脂肪酸，可以獲得期望的效果。
本發(fā)明的有效成分飽和脂肪酸和水溶性硅酸聚合物可與適當(dāng)?shù)乃幱脫?dān)體或稀釋劑組合成為醫(yī)藥組合物，可以按照常規(guī)方法制成各種制劑，制成皮下、靜脈內(nèi)、肌肉內(nèi)、直腸內(nèi)、鼻腔內(nèi)給藥的非口服制劑、或者片劑、膠囊劑、粉末劑、液劑等口服制劑。處方時(shí)，可以單獨(dú)使用本發(fā)明的有效成分，或者與其它藥物活性成分適當(dāng)組合處方。
作為注射劑，可以制成注射用蒸餾水、生理鹽水、葡萄糖注射液等水性溶劑或丙二醇等的非水性溶劑的溶液、懸浮液或乳化液，必要時(shí)也可適當(dāng)加入溶解助劑、等滲劑、懸浮劑、穩(wěn)定劑、防腐劑等通常所用的添加劑。另外，經(jīng)過滅菌處理后的粉末加入西林瓶中，也可以在使用時(shí)加入例如注射用蒸餾水、生理鹽水、林格液等上述溶液溶解了使用。此外，根據(jù)疾病種類和患者的不同，其最適合治療的劑型也可以制成上述之外的劑型，例如糖漿劑、栓劑、吸入劑、氣霧劑、點(diǎn)眼劑、外用劑型(軟管劑、凝膠劑、貼劑等)等。
制備口服給藥制劑時(shí)，可以使用2種有效成分本身或者與適當(dāng)?shù)奶砑觿缛樘?、甘露醇、玉米淀粉、馬鈴薯淀粉、檸檬酸鈣等常用的賦形劑共同，與結(jié)晶纖維素、羥丙甲基纖維素等纖維素衍生物、阿拉伯膠、玉米淀粉、明膠等粘合劑，玉米淀粉、馬鈴薯淀粉、羧甲基纖維素鈣等崩解劑，滑石等潤滑劑，還有填充劑、濕潤劑、緩沖劑、穩(wěn)定劑、防腐劑、香料等適當(dāng)組合，制成片劑、散劑、顆粒劑或膠囊劑。
本發(fā)明物質(zhì)的期望給藥量，因給藥對象(或者的年齡、體重、癥狀等)、劑型、給藥方法、給藥時(shí)間等而變，為獲得期待的效果，對于一般的成人按硅酸計(jì)1日可以給以1μg～10mg/kg，分1次～多次給藥。在以注射劑等非口服給藥的時(shí)候，因吸收等的影響，一般以口服給藥量的1/3到1/10水平即可。
實(shí)施例參考例17.6g水玻璃(以硅計(jì)1.2g)溶于100mL水。另取97.5g乳糖用水300mL加熱溶解，將其與水玻璃溶液混合，用稀鹽酸調(diào)節(jié)pH8.0。于200℃干燥，回收得到90g粉末。所得的本發(fā)明硅酸聚合物具有如下物性值，1g中含12mg硅。
·分子量13000～100萬·聚合度210～16500參考例212.9g偏硅酸鈉(以硅計(jì)1.2g)溶于100mL水。另取95.8g乳糖用水300mL加熱溶解，將其與偏硅酸鈉溶液混合，用稀鹽酸調(diào)節(jié)pH8.0。于200℃干燥，回收得到90g粉末。所得的本發(fā)明硅酸聚合物具有如下物性值，1g中含12mg硅。
·分子量15000～90萬·聚合度250～15000參考例35.9g原硅酸鈉(以硅計(jì)0.6g)溶于100mL水。另取99g甘露醇用水300mL加熱溶解，將其與原硅酸鈉溶液混合，用稀鹽酸調(diào)節(jié)pH8.0。于200℃干燥，回收得到88g粉末。所得的本發(fā)明硅酸聚合物具有如下物性值，1g中含6mg硅。
·分子量20000～100萬·聚合度330～16500參考例41.89g水玻璃(以硅計(jì)0.3g)溶于100mL水。向其中加入500mL的20％乳糖溶液，用稀鹽酸調(diào)節(jié)pH 8.0。將溶液充入西林瓶中，冷凍干燥。所得的干燥粉末每瓶中含0.6mg硅，具有如下物性值。
·分子量30000～150萬·聚合度490～25000實(shí)施例1為供以下藥理測試之用，按以下方法配制本發(fā)明含脂肪酸組合物的水溶液。本測試所用的飽和脂肪酸自和光純藥工業(yè)株式會社和東京化成工業(yè)株式會社購入。取飽和脂肪酸20mg，用其等摩爾量(必要時(shí)可以增加)的氫氧化鈉(1mol/L水溶液)和生理鹽水(或蒸餾水)溶解，總量成200mL。該溶液(100μg/mL)直接(原液)或用生理鹽水適當(dāng)稀釋后用于測試。因二十酸以上的長鏈脂肪酸難以溶解，制成25μg/mL濃度的溶液作為原液。
水溶性硅酸聚合物以西林瓶量取上述參考例1的粉末25mg，在單獨(dú)測定該硅酸聚合物的時(shí)候，以3mL生理鹽水溶解制成原液，將生理鹽水溶液適當(dāng)稀釋用于測試。本發(fā)明組合物是由飽和脂肪酸和水溶性硅酸聚合物制成的，因此在西林瓶中加入25mg水溶性硅酸聚合物，加入3ml上述飽和脂肪酸的原液代替生理鹽水溶解，所得溶液作為本發(fā)明組合物的原液同樣用于試驗(yàn)。
實(shí)施例2、肥大細(xì)胞組胺釋放抑制作用(脫顆粒抑制作用)Wistar系雄性大鼠(150～200g)斷頭放血，在其腹腔內(nèi)注入含5U/ml肝素的MCM(肥大細(xì)胞培養(yǎng)基，150mmol/L-NaCl,3.7mmol/L-KCl,0.9mmol/L-CaCl2,0.9mmol/L-MgCl2,3.0mmol/L-Na2PO4,3.5mmol/L-KH2PO4,5.6 mmol/L-葡萄糖，0.1％-明膠，pH=6.8)10ml，按揉約90秒后，開腹，取腹內(nèi)滲出細(xì)胞(PEC)懸浮液。該細(xì)胞在4℃下以130×g離心洗3次，最后用適量的MCM懸浮，成肥大細(xì)胞懸浮液(1～2×105個(gè)/ml)。該細(xì)胞懸浮液1ml與各被檢物質(zhì)(原液和將原液適當(dāng)稀釋后的試樣)0.5ml加入Polytube中，于37℃反應(yīng)10分鐘。然后加入化合物48/80(終濃度50mg/ml)0.5ml反應(yīng)10分鐘。之后將管子加入冰水中，終止反應(yīng)，于4℃以130×g離心5分鐘分離，取其上清1ml，用Shore等的方法(J.Pharm.Exp.Ther.,127,183-186(1959))提取測定釋放組胺含量。另取細(xì)胞懸浮液1ml，加入蒸餾水和6％高氯酸各0.5ml混合，離心分離(130×g)，對所得上清以同樣方法測定組胺含量，作為總組胺含量。按組胺釋放量為總組胺量的大約半量的程度確定化合物48/80的使用濃度。
1例結(jié)果如下所示。為將原液稀釋到1/4的被檢物質(zhì)的結(jié)果(被檢藥溶液0.5ml/測試體系的最終量2ml)。被檢物質(zhì)的組胺釋放抑制作用，以對照(僅生理鹽水)的組胺釋放量為100％，所示為相對于對照的(％)值。另外，肥大細(xì)胞是每次制備的，其靈敏度也因各次制備而變化。例如，表3測試中所制備的細(xì)胞感受性非常高，低濃度試樣也可以看見效果。
表1
表2
表3
由上述藥理試驗(yàn)結(jié)果可見，飽和脂肪酸類對組胺自肥大細(xì)胞的釋放幾乎無抑制作用。如表1所示，水溶性硅酸聚合物具有用量依賴性的組胺釋放抑制作用，通過與飽和脂肪酸的組合，其作用增強(qiáng)得非常多。因此，本發(fā)明組合物可用作為與組胺相關(guān)的疾病，例如變態(tài)反應(yīng)或炎癥的預(yù)防·治療劑。
肥大細(xì)胞(Mast細(xì)胞)內(nèi)含含有組胺的顆粒，因IgE受體的交聯(lián)反應(yīng)、過敏素--補(bǔ)體成分C3a或C5a、化學(xué)物質(zhì)化合物48/80等作用發(fā)生脫粒，向細(xì)胞外釋放組胺，引起變態(tài)反應(yīng)。也就是說，因引發(fā)物質(zhì)的作用在肥大細(xì)胞的細(xì)胞膜上發(fā)生了結(jié)構(gòu)的變化，釋放組胺，可以認(rèn)為本發(fā)明組合物對上述細(xì)胞膜的變化具有保護(hù)作用。細(xì)胞是生命體的基本單元，因外部·內(nèi)部刺激或應(yīng)激等導(dǎo)致細(xì)胞受到傷害，引起變態(tài)反應(yīng)或炎癥，本發(fā)明組合物防御細(xì)胞傷害，具有優(yōu)良的機(jī)體維持功能。
權(quán)利要求
1．藥物組合物，含有飽和脂肪酸和水溶性硅酸聚合物作為有效成分。
2．增強(qiáng)水溶性硅酸聚合物活性的方法，采用飽和脂肪酸增強(qiáng)。
全文摘要
提供了增強(qiáng)水溶性硅酸聚合物藥理活性的組合物。本發(fā)明組合物為含有飽和脂肪酸和水溶性硅酸聚合物的醫(yī)藥組合物,可用作為抗變態(tài)反應(yīng)劑等藥物。發(fā)現(xiàn)通過飽和脂肪酸與水溶性硅酸聚合物的組合,硅酸聚合物的藥理活性增強(qiáng)的效應(yīng)。本發(fā)明組合物抑制因誘發(fā)物質(zhì)所引起的肥大細(xì)胞的細(xì)胞膜結(jié)構(gòu)變化所導(dǎo)致的組胺釋放,具有細(xì)胞防御等優(yōu)良的機(jī)體維持功能,可用作為抗變態(tài)反應(yīng)劑等藥物。
文檔編號A61K47/12GK1312080SQ0110461
公開日2001年9月12日 申請日期2001年2月16日 優(yōu)先權(quán)日2000年2月18日
發(fā)明者小西甚右衛(wèi)門 申請人:日本臟器制藥株式會社