專利名稱：以lgE拮抗劑治療特應(yīng)性皮炎的制作方法
背景技術(shù)：
免疫球蛋白E(IgE)是一類免疫球蛋白(或稱“抗體”)分子。IgE在人血清中的存在濃度較其他種類的免疫球蛋白如IgG、IgM、IgA、IgD等要低。IgE被認(rèn)為在人體防御寄生蟲的侵襲中起作用，但該作用從未被明確地確定為是必要或者甚至是有益的，至少在發(fā)達(dá)國(guó)家中，寄生蟲感染并非一項(xiàng)嚴(yán)重的問題。IgE作為即發(fā)型超敏變態(tài)反應(yīng)的介體是眾所周知的，這些變態(tài)反應(yīng)包括變應(yīng)性鼻炎(枯草熱)，外因性氣喘，以及食物和藥物變態(tài)反應(yīng)。
在由IgE介導(dǎo)的變態(tài)反應(yīng)過程中，IgE由B細(xì)胞分泌出來(lái)后，通過其Fc部份結(jié)合到FcεRⅠ受體上，該受體存在于嗜堿粒細(xì)胞、肥大細(xì)胞及朗格罕氏細(xì)胞的表面。如果結(jié)合到這些細(xì)胞表面上的IgE與變應(yīng)原接觸并結(jié)合，會(huì)引起這些結(jié)合IgE分子的交聯(lián)，繼而使得其下的受體亦隨之交聯(lián)，從而觸發(fā)一些藥理學(xué)介體釋放，所述介體是諸如組胺、5-羥色胺、白三烯和過敏性的慢反應(yīng)物質(zhì)。這些介體引起了變態(tài)反應(yīng)的病理表現(xiàn)。
某些曾經(jīng)歷過IgE介導(dǎo)的部分或全部變應(yīng)性疾病的患者，亦容易患一種叫做特應(yīng)性皮炎的痛苦的皮膚病。特應(yīng)性皮炎的特征是瘙癢、紅斑、以及疼痛的皮膚損害。部分慢性皮炎患者，其皮膚會(huì)苔蘚化。雖然特應(yīng)性皮炎通常會(huì)與其它變應(yīng)性疾病同時(shí)出現(xiàn)，但尚未確定在感染患者身上，其特應(yīng)性皮炎的表現(xiàn)或其嚴(yán)重性與IgE含量高低之間存在關(guān)聯(lián)。該領(lǐng)域的技術(shù)人員相信，特應(yīng)性皮炎也許與IgE有關(guān)，但單獨(dú)的IgE并非病原物質(zhì)。
已開發(fā)出一類特別的抗IgE抗體用來(lái)治療變應(yīng)性疾病。這些抗體結(jié)合分泌型IgE，但不會(huì)結(jié)合已附著在FcεRⅠ受體上的IgE。當(dāng)這些抗IgE抗體給藥至人體內(nèi)部時(shí)，它們會(huì)結(jié)合IgE并中和它，使其不能再結(jié)合FcεRⅠ或FcεRⅡ受體，后者存在于B細(xì)胞或其他細(xì)胞類型上。這些抗IgE抗體也會(huì)結(jié)合附著在生成IgE的B細(xì)胞的細(xì)胞膜上的IgE(稱“膜結(jié)合型IgE”)。這些抗體結(jié)合上后，會(huì)通過依賴抗體的細(xì)胞毒性(“ADCC”)或補(bǔ)體介導(dǎo)的細(xì)胞溶解，進(jìn)一步幫助下調(diào)或消除產(chǎn)生IgE的B細(xì)胞，并因此減少分泌型IgE的含量。但是，由于它們不結(jié)合已附著在FcεRⅠ上的IgE，因此不會(huì)引起交聯(lián)，它們本身也不會(huì)導(dǎo)致變態(tài)反應(yīng)的藥理學(xué)介體的釋放。
在動(dòng)物模型及人體臨床試驗(yàn)中已顯示此類抗IgE抗體可降低IgE含量(參見Corne等，《臨床檢查雜志》99,No.5,879-887,1997)。此類抗IgE抗體在數(shù)項(xiàng)人體臨床試驗(yàn)中還顯示具有治療變應(yīng)性鼻炎和外因性氣喘的功效，正如由其降低體內(nèi)IgE含量的事實(shí)所預(yù)期的那樣。(參見Corne等，同上；Boulet等，《Am.J.Respir.Crit.Care Med.》155:1835-1840(1997)；Fahy等，《Am.J.Respir.Crit.Care Med.》155:1828-1834(1997))。利用這些抗IgE抗體來(lái)治療特應(yīng)性皮炎則尚未進(jìn)行任何臨床試驗(yàn)。由于高IgE含量與特應(yīng)性皮炎癥狀的嚴(yán)重性之間缺乏相互關(guān)聯(lián)，一般人不會(huì)預(yù)期到這些抗體將可用于特應(yīng)性皮炎的治療。至于其他IgE拮抗劑，是通過防止或抑制IgE結(jié)合到FcεRⅠ并且不引起變態(tài)反應(yīng)的藥理學(xué)介體釋放而起作用，它們亦不會(huì)被預(yù)期對(duì)治療特應(yīng)性皮炎有效。這類拮抗劑包括小分子和其他新的化學(xué)或生物實(shí)體。
雖然依據(jù)常規(guī)判斷，光靠減少或去除IgE而不附加其他方式將不會(huì)有效地治療特應(yīng)性皮炎，但本申請(qǐng)依據(jù)的前提則是IgE拮抗劑，包括單獨(dú)的抗IgE抗體，將證明是有效的治療藥劑。事實(shí)上，抗IgE抗體將證明能對(duì)特應(yīng)性皮炎患者提供比本領(lǐng)域技術(shù)人員預(yù)期的更好的實(shí)質(zhì)效果。
如果所選的IgE拮抗劑為抗IgE抗體，則可利用下列技術(shù)對(duì)其進(jìn)行修飾，目的是減低其抗原性以更適于人體給藥。所述技術(shù)包括抗體嵌合法(chimerization)，人源化(通過CDR移植)，或相反，包括用轉(zhuǎn)基因動(dòng)物生產(chǎn)全人抗體或通過噬菌體展示文庫(kù)技術(shù)生產(chǎn)人抗體的單鏈片段。優(yōu)選這些抗體具有人IgGl或IgG3重鏈恒定區(qū)，因?yàn)檫@類區(qū)域已知可介導(dǎo)ADCC和補(bǔ)體介導(dǎo)的細(xì)胞溶解，由此可輔助去除生成IgE的B細(xì)胞。本發(fā)明的藥物組合物當(dāng)通過諸如靜脈內(nèi)、肌內(nèi)或皮下注射等方式內(nèi)部給藥時(shí)可能是最有效的。它也可利用不受消化分解的適當(dāng)載體通過口服方式內(nèi)部給藥；或者通過吸入器送入肺部的肺泡。此外，該組合物也可能局部給藥至受感染部位，讓其在此吸收并局部起作用。
實(shí)施及使用本發(fā)明的描述1．實(shí)施本發(fā)明的各種實(shí)施方案適于用作IgE拮抗劑的化學(xué)或生物實(shí)體可以利用多種方法來(lái)選擇和篩選，包括使用與下述用來(lái)篩選TES-C21的方法類似的測(cè)定?；旧?，這些方法的第一步將是篩選結(jié)合分泌型IgE的物質(zhì)，其后從這些物質(zhì)中再選出不會(huì)導(dǎo)致變態(tài)反應(yīng)的藥理學(xué)介體釋放的分子。本領(lǐng)域技術(shù)人員熟知的許多不同測(cè)定法都可用來(lái)完成這項(xiàng)工作。
在一個(gè)具體實(shí)施方案中，用于本發(fā)明的單克隆抗IgE抗體是由連續(xù)的(永生化的)、穩(wěn)定的抗體生成細(xì)胞系生產(chǎn)的。優(yōu)選的抗體生成細(xì)胞系是雜交瘤及轉(zhuǎn)染瘤細(xì)胞系。不過，它們也可以是含有并能夠表達(dá)已經(jīng)過功能重排的、編碼所研究抗體(或片段)的基因的任何一種細(xì)胞系。能自然生產(chǎn)裝配型免疫球蛋白的淋巴樣細(xì)胞是優(yōu)選的。
生產(chǎn)本發(fā)明所用的特定抗體的雜交瘤細(xì)胞可以用Kohler及Milstein的標(biāo)準(zhǔn)體細(xì)胞雜交技術(shù)(《自然》256:495,1975年)制備，或用使用不同融合試劑的類似方法制備。該方法簡(jiǎn)述如下用已確定包含所研究的位于IgE Fc區(qū)域中的抗原表位的人IgE或生成IgE的B細(xì)胞或人IgE(分泌型或膜式)的肽區(qū)段對(duì)動(dòng)物進(jìn)行免疫接種，從而生產(chǎn)出單克隆的抗IgE抗體。肽可以化學(xué)合成或用重組DNA技術(shù)生產(chǎn)，為了增強(qiáng)抗原作用，可使其與載體蛋白諸如匙孔嘁血藍(lán)蛋白綴合。之后，從免疫接種過的動(dòng)物獲得淋巴樣細(xì)胞(如脾淋巴細(xì)胞)，并使其與無(wú)限增殖細(xì)胞(例如骨髓瘤或異骨髓瘤)融合生成雜交細(xì)胞。這些雜交細(xì)胞再用下文中詳細(xì)描述的篩選方法篩選出能生產(chǎn)所需抗IgE抗體的那些。
當(dāng)考慮抗體長(zhǎng)期給藥，就如同本文中用抗IgE治療特應(yīng)性皮炎時(shí)，這些抗體優(yōu)選為人類抗體或基本上為人類抗體，以減少或消除人類抗小鼠(HAMA)抗體反應(yīng)。小鼠抗體部分本身可能觸發(fā)變態(tài)反應(yīng)，或者針對(duì)這類部分的HAMA反應(yīng)可能降低治療的功效。
分泌人類抗體的人雜交瘤細(xì)胞可由Khler及Milstein技術(shù)生產(chǎn)。盡管治療人疾病時(shí)特別優(yōu)選人類抗體，但一般而言，利用此技術(shù)生成穩(wěn)定的人-人雜交瘤來(lái)長(zhǎng)期生產(chǎn)人類單克隆抗體是相當(dāng)困難的。另一種生產(chǎn)人類抗體的技術(shù)是利用轉(zhuǎn)基因小鼠。簡(jiǎn)言之，此方法牽涉到將內(nèi)源性鼠重鏈和κ輕鏈部位破壞，隨后構(gòu)建含有V,D,J區(qū)段的重鏈和κ輕鏈轉(zhuǎn)基因，以及人類來(lái)源的C基因。然后，使用人類轉(zhuǎn)基因通過前核顯微注射將這些基因引入小鼠體內(nèi)。這些小鼠經(jīng)雜交產(chǎn)生人類抗體生成菌株。此技術(shù)詳述于許多文獻(xiàn)，其中之一為美國(guó)專利第5,569,825號(hào)。此技術(shù)可由GenPharm International,Inc.(Mountain View,California,USA)公司授權(quán)獲得。
另一種解決抗原性問題的方法是利用噬菌體展示文庫(kù)法來(lái)生產(chǎn)如單鏈Fv區(qū)等全人類抗體片段。簡(jiǎn)言之，此方法涉及通過聚合酶鏈?zhǔn)椒磻?yīng)(PCR)從骨髓、血液和扁桃體樣品擴(kuò)增人類V基因所有組成成分，接著制備含有重鏈和輕鏈(κ鏈和λ鏈)V基因的獨(dú)立文庫(kù)。然后將這些獨(dú)立片段裝配到單鏈Fv中用于展示在噬菌體表面，在此處可以容易地篩選出所需片段。更詳細(xì)描述此技術(shù)的參考文獻(xiàn)包括美國(guó)專利第5,565,332號(hào)及歐洲專利第0589877B1號(hào)。此技術(shù)也可由英格蘭Melbourn的Cambridge Antibody Technology Limited公司授權(quán)獲得。
用嚙齒類動(dòng)物特別是小鼠生產(chǎn)抗體是一項(xiàng)相當(dāng)完備的技術(shù)。減少抗IgE抗體中鼠類部分的另一方法是先由嚙齒類動(dòng)物系統(tǒng)生產(chǎn)此抗體，再通過其他確定的技術(shù)將它們轉(zhuǎn)變成嵌合嚙齒動(dòng)物/人抗體或CDR移殖的人源化抗體。嵌合抗體可以如美國(guó)專利第4,816,397號(hào)中所述進(jìn)行生產(chǎn)。人源化抗體的制造見于各式參考文獻(xiàn)，包括下列專利美國(guó)專利第5,693,762；5,693,761；5,225,539號(hào)及WO89/06692和WO92/22653等。
國(guó)際專利申請(qǐng)WO92/17207中描述了本發(fā)明的抗IgE抗體(稱為TES-C21)及其嵌合鼠/人形式(稱TESC-2)的一個(gè)實(shí)例。TES-C21及TESC-2的篩選方案(見下述)可同樣用來(lái)篩選其他抗IgE抗體，以制得適合嵌合或通過CDR-移植人源化的本發(fā)明抗體。生產(chǎn)TES-C21的雜交瘤細(xì)胞系可自位于美國(guó)Maryland州Rockville市的美國(guó)典型培養(yǎng)物保藏中心(ATCC)獲得，登記號(hào)碼為11134，生產(chǎn)TESC-2的細(xì)胞系以登記號(hào)BRL10706保藏在此。
按照1997年5月25日授權(quán)的澳洲專利第675449號(hào)中詳細(xì)描述的方法制備小鼠抗體TES-C21的人源化變型。類似的操作可用來(lái)生產(chǎn)其他抗IgE人源化抗體。生產(chǎn)適用于本發(fā)明的人源化抗IgE抗體的數(shù)種轉(zhuǎn)染瘤可自ATCC獲得，其登記號(hào)碼分別為11130；11131；11132；11133。其中，一種與從登記號(hào)11131保藏的轉(zhuǎn)染瘤生產(chǎn)的抗體類似的抗IgE抗體具有用來(lái)治療特應(yīng)性皮炎的完全臨床開發(fā)潛能。另一種適于治療特應(yīng)性皮炎的人源化抗體為E25(rhuMAb-E25)，由Genentech,Inc.公司生產(chǎn)。該抗體于下列文獻(xiàn)中詳述Presta等，《免疫學(xué)雜志》151:2623-2632(1993)。A.TES-C21及TESC-2的生產(chǎn)和篩選如下所述生產(chǎn)和篩選TES-C2及TESC-2。簡(jiǎn)言之，雄性Balb/c小鼠用來(lái)自人類血清的多克隆IgE(由Vertex公司提供)接種數(shù)次。該IgE與合適的佐劑混合。最后一次注射免疫原后將小鼠處死，取出脾臟，制備成單細(xì)胞懸浮液以備與骨髓瘤細(xì)胞融合。脾細(xì)胞利用聚乙二醇-1450(Kodak)、CMF-PBS和DMSO的融合混合物與Sp2/O細(xì)胞融合。在細(xì)胞懸浮液混合后加入DMEM。
由該融合產(chǎn)生的雜交瘤細(xì)胞利用酶聯(lián)免疫吸附測(cè)定(ELISA)針對(duì)與Immulon2平板結(jié)合的人IgE進(jìn)行篩選。這些雜交瘤細(xì)胞之一即生產(chǎn)TES-C21。
TES-C21進(jìn)一步用ELISA進(jìn)行篩選，選出對(duì)人IgE有特異性，并且不與IgG、IgM、IgA、IgD、人血清白蛋白、轉(zhuǎn)鐵蛋白或胰島素等反應(yīng)的那些。TES-C21與各種IgE分子同樣結(jié)合得很好。此外，TES-C21還以劑量依賴方式結(jié)合分泌IgE的細(xì)胞系SKO-007、U266和SE44，顯示此抗體可結(jié)合人類膜結(jié)合型IgE。但TES-C21不結(jié)合攜帶表面IgM、IgD、IgG或IgA的人類B細(xì)胞系；T細(xì)胞系；或SE44的鼠類母細(xì)胞系；或分泌嵌合人IgG的鼠細(xì)胞系。TES-C21也不結(jié)合高親合力FcεRⅠ受體或低親合力FcεRⅡ受體上的IgE，這些受體呈現(xiàn)在各種各樣的細(xì)胞類型上。此外，TES-C21對(duì)新鮮制備的人血嗜堿粒細(xì)胞(其表面的FcεR粘附有IgE)亦不誘導(dǎo)組胺釋放。TES-C21在10μg/ml的濃度下可完全抑制1μg的IgE對(duì)FcεRⅡ的結(jié)合。
為了生產(chǎn)TESC-2，將Sp2/O細(xì)胞用TES-C21重鏈和輕鏈的可變區(qū)、以及人γ1和κ恒定區(qū)共轉(zhuǎn)染，并等分到96孔平板上用于選擇。篩選分泌已與人IgE結(jié)合的人IgG的上清液。讓轉(zhuǎn)染瘤細(xì)胞在無(wú)血清的培養(yǎng)基中適應(yīng)生長(zhǎng)。然后TESC-2利用固定化蛋白A柱從鋪滿培養(yǎng)物的培養(yǎng)基中純化。
TES-C21和TESC-2對(duì)結(jié)合在微量滴定板上的IgE可同樣結(jié)合得很好。這可如下所述得以證明Immulon2平板用gp120肽-卵清蛋白綴合物包被，并將IgE-SE44結(jié)合到固定化抗原上。加入各種濃度的TES-C21或TESC-2。結(jié)合情況利用與辣根過氧化物酶(HRP)綴合的山羊抗小鼠IgG(測(cè)TES-C21用)或HRP-山羊抗人IgG Fc(測(cè)TESC-2用)進(jìn)行檢測(cè)。
據(jù)測(cè)定，TES-C21和TESC-2對(duì)結(jié)合在微量滴定板上的IgE具有相同的相對(duì)親合力。Immulon2平板用gp120肽-卵清蛋白綴合物包被，并將IgE-SE44結(jié)合到固定化抗原上。TES-C21和TESC-2分別以不同濃度加入，預(yù)溫育1小時(shí)后，加入0.22μg/ml的生物素化TES-C21。生物素化TES-C21的結(jié)合利用與辣根過氧化物酶綴合的鏈霉抗生物素蛋白進(jìn)行檢測(cè)。
TES-C21和TESC-2對(duì)生成IgE的細(xì)胞也顯示出相等的結(jié)合。這由下述方法證明將細(xì)胞于2×106細(xì)胞/100μl PBS-1％山羊血清的狀態(tài)下在不同抗體濃度下在0℃溫育30分鐘。TES-C21的結(jié)合情況利用FITC-山羊(Fab’)2抗小鼠IgG測(cè)定；TESC-2的結(jié)合情況則利用FITC-山羊(Fab’)2抗人IgG測(cè)定。結(jié)合情況使用Coulter Epics V通過螢光流式細(xì)胞計(jì)數(shù)儀定量測(cè)定。FITC強(qiáng)度門設(shè)置在當(dāng)不存在最初的免疫球蛋白時(shí)得到10％±0.5％的陽(yáng)性細(xì)胞。
TES-C21及TESC-2二者對(duì)已結(jié)合在低親和力IgE受體上的IgE都不結(jié)合。TESC-2識(shí)別與CD23復(fù)合的IgE的可能性利用一個(gè)分泌IgG的人類淋巴母細(xì)胞系IM-9的細(xì)胞進(jìn)行研究。IM-9細(xì)胞上存在CD23可由其被抗-Leu20強(qiáng)染色確證，抗-Leu20是一種對(duì)CD23具有特異性的MAb。IM-9細(xì)胞用5至10μg/ml的人IgE溫育，洗滌，然后用生物素標(biāo)記的TESC-2或陽(yáng)性對(duì)照物抗IgE Mab TES-19溫育，最后再用FITC-鏈霉抗生物素蛋白溫育，通過流式細(xì)胞計(jì)數(shù)儀分析。
嵌合TESC-2和鼠TES-C21二者均可抑制IgE對(duì)FcεRⅡ的結(jié)合?？贵w在不同濃度下用20μg IgE-SE44在37°下預(yù)溫育一小時(shí)，然后加入帶有FcεRⅡ的IM-9細(xì)胞。IgE與細(xì)胞的結(jié)合情況使用生物素化TES-19和FITC-鏈霉抗生物素蛋白檢測(cè)，并用螢光流式細(xì)胞計(jì)數(shù)儀定量。
為了排除在這些實(shí)驗(yàn)中TESC-2與IgE在預(yù)溫育過程中形成免疫復(fù)合物，其與細(xì)胞結(jié)合產(chǎn)生假陽(yáng)性的可能性，用生物素標(biāo)記的TESC-2或FITC山羊抗人IgE(帶有TES-C21)確認(rèn)這些免疫復(fù)合物也不結(jié)合FcεRⅡ。
TESC-2和TES-C21都不會(huì)誘導(dǎo)新鮮制備的人血嗜堿粒細(xì)胞(其上的FcεR結(jié)合有IgE)釋放組胺。由于不同供體的嗜堿粒細(xì)胞釋放不同的介體，因此抗體在多種濃度下對(duì)來(lái)自50名以上的單獨(dú)供體的嗜堿粒細(xì)胞制劑進(jìn)行檢驗(yàn)。沒有觀察到TESC-2或TES-C21誘導(dǎo)組胺釋放。
為了解決TES-C21可能結(jié)合嗜堿粒細(xì)胞但不誘導(dǎo)受體發(fā)生交聯(lián)而導(dǎo)致組胺釋放的問題，使用第二抗體進(jìn)行交聯(lián)。由于單獨(dú)的抗人IgG可誘導(dǎo)組胺釋放，因此在這些實(shí)驗(yàn)中僅使用鼠抗體TES-C21。交聯(lián)山羊抗小鼠IgG增強(qiáng)了由亞最適濃度的對(duì)照抗IgE抗體誘導(dǎo)的組胺釋放。不過，TES-C21即使在這些非常寬容的條件下仍沒有誘導(dǎo)組胺釋放。
進(jìn)一步檢測(cè)TESC-2，以確定其是否會(huì)阻斷IgE對(duì)FcεR1受體的結(jié)合，以及TESC-2與IgE的免疫復(fù)合物是否會(huì)結(jié)合這些受體。為了測(cè)定TESC-2是否抑制人IgE結(jié)合FcεR1，將已在低pH值下通過處理去除了IgE的人外周血嗜堿粒細(xì)胞用衍生自SE44的對(duì)肽抗原具有活性的嵌合IgE重新加載或敏感化。SE44-IgE的功能結(jié)合通過IgE-SE44可變區(qū)結(jié)合的多價(jià)R15K肽-卵清蛋白輟合物誘導(dǎo)的組胺釋放來(lái)測(cè)定。IgE-SE44用TESC-2預(yù)溫育后抑制了IgE結(jié)合到FcεR1上。當(dāng)嗜堿粒細(xì)胞接觸IgE-SE44之前先用另一種IgE(PS)溫育時(shí)，其與IgE-SE44的結(jié)合也受到抑制?？梢约僭O(shè)，TESC-2與IgE在預(yù)溫育過程中形成了免疫復(fù)合物且它們不會(huì)引起組胺釋放。這些實(shí)驗(yàn)的條件和結(jié)果總結(jié)在下表1中。
表1:TESC-2對(duì)IgE結(jié)合高親和力IgE受體的抑制
對(duì)于前面所提及的TES-C21的CDR-移植變型亦進(jìn)行了上述這些研究，并且得到了類似的結(jié)果。
2．使用本發(fā)明的抗體治療特應(yīng)性皮炎本發(fā)明的IgE拮抗劑或抗體在可出售之前，必須經(jīng)過人體臨床試驗(yàn)以證實(shí)其安全有效。舉一個(gè)例子說(shuō)明，臨床試驗(yàn)可由最多30名特應(yīng)性皮炎患者開始。這些患者雖針對(duì)特應(yīng)性皮炎進(jìn)行了定期治療，如用抗組胺藥物、皮質(zhì)類固醇、緩解浴和洗液等進(jìn)行治療，但其癥狀仍繼續(xù)出現(xiàn)。這些患者將靜脈內(nèi)或皮下注射50至300毫克的抗IgE抗體，每周、隔周或每月注射一次，為期3至6個(gè)月?？笽gE治療對(duì)特應(yīng)性皮炎患者的療效將用例如SCORAD指數(shù)打分(參見B.Kung等，《皮膚病學(xué)》195:10-19,1997)。此外將評(píng)估該療法對(duì)循環(huán)IgE濃度的影響與臨床功效之間的關(guān)系。
其他研究將測(cè)試不同的給藥方案、給藥間隔，并將比較抗IgE治療與安慰藥劑之間的差異。還將研究局部應(yīng)用抗IgE的功效。本發(fā)明的藥物組合物通過任何可接受的途徑給藥后，預(yù)期會(huì)對(duì)特應(yīng)性皮炎患者產(chǎn)生顯著效益。
以上描述、術(shù)語(yǔ)、表達(dá)方式和實(shí)施例等僅是例舉性的，不具有限制作用。本發(fā)明包括所有前述實(shí)施方案的對(duì)等物，不管是已知或未知的。本發(fā)明的保護(hù)范圍僅由下列權(quán)利要求書限定，而不應(yīng)由本文件其他任何部分的任何陳述或其他任何來(lái)源決定。
權(quán)利要求
1．一種用于治療特應(yīng)性皮炎的藥物組合物，它包含IgE拮抗劑。
2．一種用于治療特應(yīng)性皮炎的藥物組合物，它包含與分泌型IgE結(jié)合但不與嗜堿粒細(xì)胞結(jié)合的抗IgE抗體。
3．一種用于治療特應(yīng)性皮炎的藥物組合物，它包含與分泌型IgE和膜結(jié)合型IgE結(jié)合但不與嗜堿粒細(xì)胞結(jié)合的抗IgE抗體。
4．一種用于治療特應(yīng)性皮炎的藥物組合物，它包含與分泌型IgE和膜結(jié)合型IgE結(jié)合、但不與嗜堿粒細(xì)胞和已結(jié)合了FcεRⅡ受體的IgE結(jié)合的抗IgE抗體。
5．如權(quán)利要求2至4中任何一項(xiàng)所述的藥物組合物，其中抗IgE抗體不結(jié)合肥大細(xì)胞。
6．如權(quán)利要求2至4中任何一項(xiàng)所述的藥物組合物，其中抗IgE抗體是單克隆抗體。
7．如權(quán)利要求6所述的藥物組合物，其中抗IgE抗體是嵌合抗體、經(jīng)CDR移殖人源化的抗體，或人類抗體。
8．如權(quán)利要求6所述的藥物組合物，其中抗IgE抗體的作用目標(biāo)是人IgE。
9．如權(quán)利要求8所述的藥物組合物，其中抗IgE抗體具有人IgG1或IgG3重鏈恒定區(qū)。
10．如權(quán)利要求2至9中任何一項(xiàng)所述的藥物組合物，它進(jìn)一步包括使該組合物適于體內(nèi)使用的賦形劑和溶劑。
11．如權(quán)利要求10所述的藥物組合物，其中賦形劑和溶劑使該組合物適于皮下或靜脈注射。
12．一種用于治療特應(yīng)性皮炎的藥物組合物，它包含抗IgE抗體，該抗體具有與在美國(guó)典型培養(yǎng)物保藏中心以登記號(hào)BRL10706保藏的細(xì)胞系生成的抗體相同的性能。
13．一種用于治療特應(yīng)性皮炎的藥物組合物，它包含抗IgE抗體，該抗體具有與在美國(guó)典型培養(yǎng)物保藏中心以登記號(hào)11131保藏的細(xì)胞系生成的抗體相同的結(jié)構(gòu)。
全文摘要
本發(fā)明涉及用于治療特應(yīng)性皮炎的藥物組合物,該組合物包含不會(huì)誘導(dǎo)變態(tài)反應(yīng)的介體釋放的適宜IgE拮抗劑;例如,結(jié)合分泌型IgE的抗IgE抗體,與生成IgE的B細(xì)胞表面上的膜結(jié)合型IgE結(jié)合的抗IgE抗體,但其不與已結(jié)合了嗜堿粒細(xì)胞或肥大細(xì)胞表面上的FcεRⅠ受體的IgE結(jié)合。優(yōu)選這些抗體也不結(jié)合已與FcεRⅡ受體結(jié)合的IgE。這些抗體優(yōu)選具有人IgG1或IgG3恒定區(qū),以及其他人類抗體部分(如果需要的話)。該藥物組合物可系統(tǒng)給藥或局部給藥。
文檔編號(hào)C12N15/02GK1289253SQ99802505
公開日2001年3月28日 申請(qǐng)日期1999年1月6日 優(yōu)先權(quán)日1998年1月29日
發(fā)明者張子文 申請(qǐng)人:泰諾士公司