專利名稱：雙尾菌增殖促進(jìn)組合物及其用途的制作方法
技術(shù)領(lǐng)域：
本發(fā)明涉及可口服的、能夠使腸內(nèi)菌叢改善為處于良好狀態(tài)、有效地表現(xiàn)出整腸效果的組合物及其用途。詳細(xì)地講，本發(fā)明是涉及含有從乳果糖、低聚半乳糖、低聚果糖中選擇出的1種或2種以上的低聚糖以及棉子糖為有效成分的促進(jìn)雙尾菌增殖的組合物，本發(fā)明還涉及由該組合物以及其它的食用成分組成的配合物。
人的腸道內(nèi)生息著大約100種，100兆個(gè)以上的微生物，它們形成腸內(nèi)細(xì)菌菌從。腸內(nèi)細(xì)菌中，既有象雙尾菌那樣對(duì)人的健康有密切關(guān)系的，認(rèn)為能給予機(jī)體好的影響的細(xì)菌，也有能生成腐敗產(chǎn)物，致癌物質(zhì)等對(duì)機(jī)體產(chǎn)生不好影響的細(xì)菌，這些菌從的分布狀況因年齡，人種，生活環(huán)境，食物成分等各種因素而變化。特別是腸內(nèi)菌從因日常的食物不同而受到顯著的影響。為了提高整腸的效果，一直有在酸奶等乳制品中加有雙尾菌的商品被廣泛地利用，為的是攝取活的乳酸菌后獲得整腸的效果。
另外，為了使腸內(nèi)雙尾菌增殖，人們已知糖源是最重要的，作為雙尾菌生育促進(jìn)物質(zhì)的已知的各種低聚糖的利用正積極地進(jìn)行著。在這些低聚糖中，已知有具有人的消化酶不能分解的，腸道不能吸收的，而能被雙尾菌有選擇資化等共同性質(zhì)的乳果糖，各種低聚半乳糖，各種低聚果糖，低聚異麥芽糖，低聚木糖等多種低聚糖。
以前，這些低聚糖以雙尾菌占優(yōu)勢(shì)的腸內(nèi)菌從的形成等為目的，雖然也在各種食品，藥品等中利用，但都是分別單獨(dú)(含有來(lái)自原料，合成反應(yīng)物的粗提取物的混合物的情形)添加，或只是配合使用(例如，雙尾菌，第6卷，第143～150頁(yè)，1993年，雙尾菌，第8卷，第1～5頁(yè)，1994年，特許第2549638號(hào)公報(bào)，特開平8-256730號(hào)公報(bào)等)。另外，這些低聚糖其功能因種類而異，在被雙尾菌，腐敗菌(例如，梭菌等)利用的程度方面存在著很大的差異，而且分別單獨(dú)在制品中利用時(shí)只限于發(fā)揮出各個(gè)低聚糖的特長(zhǎng)，未必能獲得滿意的雙尾菌的增殖效果。因此，目前的實(shí)際情況是尚未確立能夠發(fā)揮高效整腸作用的方法。
就是說(shuō)，為了使作為促進(jìn)雙尾菌增殖的糖源表現(xiàn)有效的整腸效果，以下兩點(diǎn)很重要。①應(yīng)當(dāng)對(duì)于生存在腸道內(nèi)的主要的雙尾菌具有范圍廣泛的，很高的利用性。②應(yīng)當(dāng)是腸內(nèi)腐敗菌不能利用的，或利用的糖源的量少，而雙尾菌的增殖(消費(fèi))速度盡可能大。
以前，人們還不知道低聚糖相互組合比起單獨(dú)利用低聚糖能獲得良好的促進(jìn)雙尾菌增殖效果，所以能發(fā)揮有效的整腸效果的雙尾菌增殖促進(jìn)糖源一直是人們期盼的。
本發(fā)明人借鑒上述的先有技術(shù)，經(jīng)銳意研究，結(jié)果發(fā)現(xiàn)將棉子糖與特定的低聚糖分別以一定的比例組合成的組合物，以及含有該組合物與其它食品成分的配合物比單獨(dú)使用以前眾所周知的低聚糖時(shí)能對(duì)雙尾菌的增殖效果產(chǎn)生顯著的影響，整腸作用能有效地表現(xiàn)出來(lái)，從而完成了本發(fā)明。
本發(fā)明的目的在于提供能顯著使雙尾菌增殖，沒有腹瀉等副作用的促進(jìn)雙尾菌增殖的組合物。
本發(fā)明的另外的目的是提供含有上述促進(jìn)雙尾菌增殖的組合物以及其它的食用成分的配合物。
解決上述課題的本發(fā)明第一項(xiàng)發(fā)明是含有從乳果糖，低聚果糖以及低聚半乳糖中選擇出的1種或2種以上的低聚糖，以及棉子糖為有效成分的雙尾菌增殖促進(jìn)組合物，其中低聚糖的比例優(yōu)選為相對(duì)于9份(重量)棉子糖至少配有1份低聚糖。
解決上述課題的本發(fā)明第二項(xiàng)發(fā)明是由從乳果糖，低聚果糖以及低聚半乳糖中選擇出1種或2種以上的低聚糖，棉子糖，以及其它食用成分構(gòu)成的配合物，其中其它食用成分可以是一般的食品用成分，嬰幼兒食用的奶粉用的成分，以及營(yíng)養(yǎng)劑用成分，將配合物作成所希望的樣式。
以下記載了本發(fā)明，但最初記載的是作為本發(fā)明的第一項(xiàng)發(fā)明的雙尾菌增殖促進(jìn)組合物。
作為本發(fā)明中使用的棉子糖可以使用例如從甜菜根中按照眾所周知的方法制造的產(chǎn)物，也可以將作為大豆低聚糖(日本食品科學(xué)(Japan foodscience)第26卷，第10號(hào)，第56～64頁(yè)，1987年)制造，市場(chǎng)銷售的粗制品作為“含有棉子糖”的低聚糖使用。另外，即使是利用眾所周知的方法(例如，特開昭59-179064號(hào)公報(bào))從大豆乳清中直接提取的棉子糖也可以。
另外，作為本發(fā)明中使用的乳果糖是利用眾所周知的方法將乳糖堿異構(gòu)化后制造的，糖漿狀，粉末狀，顆粒狀等任一種劑型都可以使用，但從副產(chǎn)物少方面來(lái)看，希望例如利用特公昭52-21063號(hào)公報(bào)記載的方法制造的產(chǎn)品。
而作為本發(fā)明使用的低聚果糖，例如蔗果三糖，霉菌赤蘚醛糖可利用眾所周知的方法(例如，特開平8-173109，特公昭59-53834號(hào)公報(bào))從蔗糖溶液中制造。
另外，作為低聚半乳糖，例如可以是用以下通式(1)表示的化合物，可以利用眾所周知的方法(例如，特公昭58-20266號(hào)公報(bào))由乳糖溶液制造。
Gal-(Gal)n-Glc…(1)(式中的Gal代表半乳糖基，Glc代表葡萄糖基，n為1～4的整數(shù))在本發(fā)明中，對(duì)于9份(重量。以下同)作為上述必需成分的棉子糖，至少與一份從乳果糖，低聚果糖以及低聚半乳糖中選擇成的1種或2種以上的低聚糖混合，理想的是從4份棉子糖與1份低聚糖到3份棉子糖與2份低聚糖的范圍內(nèi)混合。而將這些低聚糖組合物讓人攝取時(shí)，希望每1kg體重按0.01～0.5g/日范圍服用，希望在最終的組合物中含有0.05％(重量。以下只要沒有特別指明都是相同的)以上的低聚糖。
本發(fā)明的促進(jìn)雙尾菌增殖組合物雖然是以棉子糖和其它所希望的低聚糖作為必需成分，但為了提高保存性，或?yàn)榱苏{(diào)整劑型，也可以利用常規(guī)方法添加保形劑，賦形劑等。
以下記載作為本發(fā)明的第二項(xiàng)發(fā)明的配合物。作為本發(fā)明的第二項(xiàng)發(fā)明的配合物是由作為上述本發(fā)明的第一項(xiàng)發(fā)明的促進(jìn)雙尾菌增殖組合物以及其它食用成分組成的。作為其它的食用成分有蛋白質(zhì)，脂類，糖，維生素以及礦物質(zhì)等，將這些其它食用成分與作為上述本發(fā)明的第一項(xiàng)發(fā)明的促進(jìn)雙尾菌增殖組合物一起按照所希望的比例進(jìn)行適當(dāng)?shù)呐浜希帽娝苤姆椒梢宰鞒筛鞣N食品，嬰幼兒用奶粉，各種營(yíng)養(yǎng)劑等配合物。本發(fā)明的配合物可以以液體，粉末狀，顆粒狀等通常的狀態(tài)制造。
作為其它食用成分的具體例子如下所示。作為蛋白質(zhì)，有乳蛋白，大豆蛋白，小麥粉，玉米蛋白等，還有蛋白質(zhì)的分解物，肽，氨基酸等。而作為脂類可以使用眾所周知的各種調(diào)制油脂，油脂組合物，脂肪酸組合物等，而作為糖除了上述各種低聚糖以外，可以使用葡萄糖，砂糖，葡聚糖，淀粉等眾所周知的各種糖。
而作為配合使用的礦物質(zhì)類例如有氯化鈉，氯化鉀，氯化鈣，硫酸鎂，甘油磷酸鈣，檸檬酸鐵等，而作為配合使用的維生素類有維生素A，維生素B1，維生素B2，維生素B6，維生素B12，煙酸，葉酸，維生素C，維生素D，維生素E，維生素K，泛酸鈣，尼克酰胺，氯化膽堿等。
此外，作為各種添加劑，例如作為穩(wěn)定劑，可以添加胍兒豆酸，果膠，刺槐豆膠，鹿角菜膠等，作為防腐劑可以添加苯甲酸及其鹽，山梨酸及其鹽等，作為甜味劑可以添加ン-マチン，ステビァ，糖精，氨基酸衍生物，ラクチト-ル等，作為抗氧化劑可以添加多酚類化合物，β-胡蘿卜素，抗壞血酸衍生物等。另外根據(jù)需要也可以添加菌體，眾所周知的賦形劑，增量劑，乳化劑，香料，著色劑，防腐劑等。
如上所述制造的本發(fā)明的促進(jìn)雙尾菌增殖組合物，以及含有該組合物的配合物與單獨(dú)利用以前眾所周知的各種低聚糖相比，就象下面記述的那樣，能有效地促進(jìn)雙尾菌的增殖，改善腸內(nèi)環(huán)境，通便，表現(xiàn)出整腸的效果。
以下給出試驗(yàn)例詳細(xì)說(shuō)明本發(fā)明。
如上所述，作為促進(jìn)雙尾菌增殖的糖源其必需條件是能加速雙尾菌利用該糖源的消費(fèi)速度。因此為了測(cè)定雙尾菌的糖利用性，作為獲得糖與培養(yǎng)時(shí)間再現(xiàn)性比較好的方法，是測(cè)定由菌體的增殖引起培養(yǎng)基濁度的上升。預(yù)備試驗(yàn)1進(jìn)行該試驗(yàn)是為了研究培養(yǎng)基的濁度隨時(shí)間的變化，確定培養(yǎng)幾小時(shí)后測(cè)定的濁度是否是雙尾菌的糖消費(fèi)速度判定中所希望的測(cè)定值。(1)供試菌體使用從健康成年人的糞便中按照常規(guī)方法[光岡知足編，「雙尾菌的研究」，第40～60頁(yè)，財(cái)團(tuán)法人日本雙尾菌中心，1994年]分離鑒定的來(lái)自人的屬于雙歧桿菌屬的微生物Bifidobacterium longum BB-536。而該菌體由本發(fā)明人保藏，必要的時(shí)候可以分享。(2)試驗(yàn)方法1)基礎(chǔ)培養(yǎng)基和預(yù)培養(yǎng)液的制備將由酵母提取液0.5％，肉提取液0.5％，葡萄糖2％，磷酸鉀0.1％，磷酸二鉀0.1％，無(wú)水醋酸鈉0.2％，胱氨酸0.05％，吐溫80(Tween80)0.05％精制水(離子交換水)96.5％組成的液體培養(yǎng)基于115℃高壓滅菌15分鐘后，用作基礎(chǔ)培養(yǎng)基。
將上述基礎(chǔ)培養(yǎng)基按每管10ml分裝在試管中，從前述的雙尾菌的保存斜面取出一鉑匙接種于滅了菌的試管培養(yǎng)基中，再覆蓋一層2ml滅菌液體石蠟，在設(shè)定了厭氧條件的基礎(chǔ)上，于37℃厭氧培養(yǎng)24小時(shí)，作為預(yù)培養(yǎng)液。2)試驗(yàn)培養(yǎng)基的制備取代基礎(chǔ)培養(yǎng)基中的葡萄糖，作成分別使用了作為各種低聚糖代表例的乳果糖(森永乳業(yè)公司制)，棉子糖(日本甜菜制糖公司制)，以及低聚異麥芽糖(林原商事社制)的培養(yǎng)基，分別按照每管10ml分裝在試管中，滅菌之后作為試驗(yàn)用培養(yǎng)基。3)培養(yǎng)與濁度的測(cè)定向每2只裝有上述各個(gè)試驗(yàn)用培養(yǎng)基的試管中分別接種雙尾菌的預(yù)培養(yǎng)液各0.5ml，然后立即使用分光光度計(jì)(日立制作所制)，在波長(zhǎng)660nm，石英皿，光路長(zhǎng)10mm條件下測(cè)定濁度。測(cè)定后覆蓋一層滅菌液體石蠟2ml，于37℃在通常的溫育器中培養(yǎng)24小時(shí)，每隔2小時(shí)于上述同一條件下測(cè)定濁度，算出兩只管的濁度的平均值作為測(cè)定值。同時(shí)，作為對(duì)照使用含有葡萄糖的基礎(chǔ)培養(yǎng)基同樣測(cè)定濁度。(3)試驗(yàn)結(jié)果該試驗(yàn)結(jié)果如

圖1所表示的那樣。圖1給出了培養(yǎng)時(shí)間與培養(yǎng)基的濁度增加之間的關(guān)系，橫軸和縱軸分別代表培養(yǎng)時(shí)間和菌體增殖引起的濁度增加。給出了于37℃直至培養(yǎng)24小時(shí)后的Bifidobacterium longum在4種不同糖源的增殖曲線。圖中—表示使用葡萄糖的培養(yǎng)基，
代表使用棉子糖的培養(yǎng)基，
代表使用乳果糖的培養(yǎng)基，-----代表使用低聚異麥芽糖的培養(yǎng)基。
就象圖1所表明的那樣，使用棉子糖的培養(yǎng)基超過(guò)使用作為基準(zhǔn)糖源的葡萄糖的培養(yǎng)基的消費(fèi)速度，使用乳果糖的培養(yǎng)基大致與使用葡萄糖培養(yǎng)基的消費(fèi)速度相當(dāng)，使用低聚異麥芽糖的培養(yǎng)基低于使用葡萄糖培養(yǎng)基的消費(fèi)速度。而作為測(cè)定時(shí)間點(diǎn)，因?yàn)樵诒M可能短時(shí)間的場(chǎng)合能反映出以使用葡萄糖培養(yǎng)基為基準(zhǔn)的菌體的增殖速度，因此是理想的，但培養(yǎng)8小時(shí)后，就能清楚了解到能夠明確測(cè)定因雙尾菌引起的糖消費(fèi)速度。預(yù)備試驗(yàn)2以前雖然知道各種低聚糖可作為雙尾菌增殖因子，但由于通過(guò)同一培養(yǎng)條件，同一尺度研究主要的總低聚糖經(jīng)雙尾菌的消費(fèi)速度的例子還沒有，所以本發(fā)明人進(jìn)行了這方面的比較評(píng)價(jià)。(1)供試菌株來(lái)自人的屬于Bifidobacterium屬的微生物，所謂的雙尾菌雖然現(xiàn)在已經(jīng)知道有10種，但作為盡可能反映腸內(nèi)的雙尾菌的菌株，在我國(guó)從嬰幼兒到大人普遍地廣泛分離的菌種已知有以下4個(gè)菌種可供實(shí)驗(yàn)用。
Bifidobacterium bifidum BB-225，Bifidobacterium adolescentisBB-102，Bifidobacterium longum breve BB-308，Bifidobacteriumlongum BB-536。
供預(yù)備試驗(yàn)1用的Bifidobacterium longum BB-536以外的3個(gè)菌種用的是本發(fā)明人從嬰幼兒以及健康成年人的腸內(nèi)的糞便通過(guò)與前述同一方法分離，并根據(jù)常規(guī)方法在進(jìn)行了包括DNA同源性，糖消化性等在內(nèi)的菌種鑒定試驗(yàn)的基礎(chǔ)上確定菌種的保存菌株。另外，這些菌株由本發(fā)明人保藏，根據(jù)需要可以分享。(2)試驗(yàn)方法基礎(chǔ)培養(yǎng)基以及預(yù)培養(yǎng)液的制備與前述預(yù)備試驗(yàn)1同樣進(jìn)行，試驗(yàn)培養(yǎng)基使用作為一般雙尾菌增殖因子而廣泛利用的以下7種低聚糖取代葡萄糖來(lái)制備。
棉子糖(日本甜菜制糖公司制)，乳果糖(森永乳業(yè)公司制)，低聚半乳糖(日新制糖公司制)，乳蔗糖(林原商事公司制)，低聚果糖(明治制果公司制)，低聚異麥芽糖(林原商事公司制)，低聚木糖(三得利公司制)培養(yǎng)與前述預(yù)備試驗(yàn)1同樣進(jìn)行，以培養(yǎng)8小時(shí)后的各個(gè)培養(yǎng)基的濁度的增值作為指標(biāo)通過(guò)下式算出，進(jìn)行比較研究。
消費(fèi)速度促進(jìn)效果(倍)＝(于試驗(yàn)培養(yǎng)基中培養(yǎng)8小時(shí)后的濁度的增值)/(于基礎(chǔ)培養(yǎng)基中培養(yǎng)8小時(shí)后的濁度的增值)(3)試驗(yàn)結(jié)果該試驗(yàn)結(jié)果如表1所示。如果將糖的消費(fèi)速度促進(jìn)效果1.0以上作為具有與葡萄糖同等以上的雙尾菌增殖促進(jìn)效果，獲得可利用性的話，可以看出對(duì)于供試的全部4個(gè)菌種超過(guò)該基準(zhǔn)值的低聚糖是不存在的。表中有特征的地方在于乳果糖對(duì)于所有四種菌種都表現(xiàn)出比較高的消費(fèi)速度促進(jìn)效果，棉子糖雖然Bifidobacterium bifidum的棉子糖可利用性完全沒有，但對(duì)其它3種雙尾菌消費(fèi)速度促進(jìn)效果表現(xiàn)出了最高的結(jié)果。
從這些結(jié)果雖然可以看出幾個(gè)低聚糖中的突出的優(yōu)點(diǎn)，但充分滿足作為前述的雙尾菌的增殖糖源表現(xiàn)的有效的整腸效果的條件，而且實(shí)用上接近理想的單一的低聚糖還不存在。表1
試驗(yàn)例1以下，本發(fā)明人以調(diào)查各種低聚糖的組合對(duì)雙尾菌的增殖促進(jìn)效果為目的進(jìn)行試驗(yàn)。即，對(duì)在前述預(yù)備試驗(yàn)2中，從雙尾菌的可利用性以及消費(fèi)速度方面認(rèn)為最實(shí)用的低聚糖棉子糖作為基本，通過(guò)與其它的低聚糖組合引起的4種雙尾菌的消費(fèi)速度促進(jìn)效果進(jìn)行研究。(1)供試菌株使用與前述預(yù)備試驗(yàn)2用的同一的4種雙尾菌。(2)試驗(yàn)方法基礎(chǔ)培養(yǎng)基以及預(yù)培養(yǎng)液的制備與前述預(yù)備試驗(yàn)1同樣進(jìn)行。試驗(yàn)培養(yǎng)基的制備是用合計(jì)總量為2.0％的所希望的棉子糖與各個(gè)低聚糖取代基礎(chǔ)培養(yǎng)基中的2.0％葡萄糖，在13階段中變更添加比例進(jìn)行制備的。使用的低聚糖與前述預(yù)備試驗(yàn)2相同，培養(yǎng)方法，濁度測(cè)定以及消費(fèi)速度促進(jìn)效果的評(píng)價(jià)也與前述預(yù)備試驗(yàn)2同樣進(jìn)行。(3)試驗(yàn)結(jié)果由棉子糖和乳果糖組合后使用的培養(yǎng)基在4種供試雙尾菌中引起的消費(fèi)速度促進(jìn)效果，以及4種供試菌種中的平均的消費(fèi)速度促進(jìn)效果的結(jié)果就象表2中給出的那樣，而使用棉子糖和乳果糖培養(yǎng)基以外的各個(gè)試驗(yàn)培養(yǎng)基引起的4種供試菌種中的平均的消費(fèi)速度促進(jìn)效果的結(jié)果就象表3中給出的那樣。
如表2所示，將棉子糖和乳果糖組合后使用的培養(yǎng)基，棉子糖對(duì)乳果糖的比率在0.6∶1.4(3∶7)到1.8∶0.2(9∶1)的范圍能看出良好的雙尾菌引起的消費(fèi)速度促進(jìn)效果，特別是在1.2∶0.8(3∶2)到1.6∶0.4(4∶1)的范圍內(nèi)，其效果更顯著。
另外就象從表3所表明的那樣，棉子糖與低聚半乳糖，低聚果糖中的任一個(gè)組合使用的培養(yǎng)基中，能夠看出與乳果糖組合使用的培養(yǎng)基同樣可獲得與葡萄糖同等以上的顯著的消費(fèi)速度促進(jìn)效果。棉子糖與這些果糖的比率也與乳果糖的情形大致一樣，清楚了解到9份棉子糖與各1份以上的低聚半乳糖，低聚果糖的組合是理想的組合。
通常，據(jù)說(shuō)人的腸內(nèi)生存著2～3種雙尾菌，所以希望在本試驗(yàn)例1中供試驗(yàn)用的來(lái)自人的主要的4種雙尾菌種中的消費(fèi)速度促進(jìn)效果平均值高的狀態(tài)作為反映人腸內(nèi)的實(shí)際狀態(tài)的指標(biāo)。
另外在使用了其它的低聚糖，乳蔗糖，低聚異麥芽糖，以及低聚木糖的培養(yǎng)基中，使用與棉子糖組合的培養(yǎng)基，與單獨(dú)使用這些低聚糖的培養(yǎng)基相比，雖然可以看出消費(fèi)速度促進(jìn)效果，但與葡萄糖同等或以上的顯著的效果還不能確認(rèn)。
對(duì)棉子糖，通過(guò)將乳果糖，低聚半乳糖，低聚果糖中的2種以上混合后，對(duì)合計(jì)3種以上的低聚糖組合物進(jìn)行相同的試驗(yàn)，得到大致同樣的效果。表2
表3
試驗(yàn)例2該試驗(yàn)的進(jìn)行是為了研究利用與實(shí)施例3同一方法制造的育兒用調(diào)制奶粉對(duì)嬰兒的通便性的效果。(1)樣品和試驗(yàn)方法將利用與實(shí)施例3同一方法制造的育兒用調(diào)制奶粉對(duì)平均月齡4個(gè)月的10個(gè)嬰兒喂奶粉一個(gè)月，然后收集這些嬰兒的糞便，調(diào)查它們的通便性，菌從。而作為對(duì)照收集飲用市場(chǎng)銷售的育兒調(diào)制奶粉(A公司制。低聚半乳糖1.2g/100g)的大致在同一條件下的10個(gè)嬰兒的糞便，調(diào)查同樣的項(xiàng)目。另外菌從的調(diào)查按照從糞便中分離，培養(yǎng)的方法、光岡的方法等(光岡知足著，「腸內(nèi)菌的世界」，叢文社，1980年)進(jìn)行。(2)試驗(yàn)結(jié)果該試驗(yàn)結(jié)果如表4所示。就象從表4所看到的那樣，用含有棉子糖和低聚半乳糖的調(diào)制奶粉哺育的嬰兒的通便性(性狀水分含量，色調(diào)，味道，pH)與用市場(chǎng)銷售的調(diào)制奶粉哺育的嬰兒的糞便相比能保持良好的性狀，而前者的腸內(nèi)菌從隨著雙尾菌的增加腐敗菌減少，雙尾菌的總量和雙尾菌對(duì)所有腸內(nèi)菌的占有比例也看出有顯著的增加。人們認(rèn)為這是由于由以前產(chǎn)品所期望的糖源被腸內(nèi)的雙尾菌大幅度地迅速地消費(fèi)，早期形成雙尾菌菌從引起的。
從這些結(jié)果可以清楚了解到含有一定比例的棉子糖和低聚半乳糖的調(diào)制奶粉在嬰兒的通便性的改善，腸內(nèi)菌從的改善中發(fā)揮著作用。而在實(shí)施例3中的育兒用調(diào)制奶粉中，完全看不到腹瀉等副作用。另外就通過(guò)其它方法制造的育兒用調(diào)制奶粉也進(jìn)行了試驗(yàn)，得到大致相同的結(jié)果。表4
注)菌數(shù)為每1g糞便，10例的平均常用對(duì)數(shù)值，()內(nèi)表示占有率(％)。試驗(yàn)例3該試驗(yàn)使用的是與實(shí)施例4同一方法制造的術(shù)后患者用營(yíng)養(yǎng)劑，就該營(yíng)養(yǎng)劑對(duì)健康正常的成年人腸內(nèi)腐敗產(chǎn)物的效果進(jìn)行了研究。(1)試驗(yàn)方法以20位健康正常的成年人(年齡25～58歲，平均48歲)為對(duì)象，使他們攝取實(shí)施例記載的術(shù)后患者用營(yíng)養(yǎng)劑，每日10g，攝取10天，分別于攝取前，攝取第5天，第10天，以及攝取結(jié)束后的第10天收集各個(gè)試驗(yàn)對(duì)象的糞便，測(cè)定糞便中的糞便產(chǎn)物量。而氨的測(cè)定通過(guò)使用了氨測(cè)定試劑盒(和光純藥工業(yè)公司制)的比色法，其它的腐敗產(chǎn)物的定量通過(guò)Yoshihara的方法[農(nóng)業(yè)和生物化學(xué)(Agricultural andBiological Chemistry)，第45卷，第1873～1875頁(yè)，1981年]定量。(2)試驗(yàn)結(jié)果20個(gè)試驗(yàn)對(duì)象的便中的腐敗產(chǎn)物量的平均值如表5所示。就象表5所表明的那樣，可以看出作為測(cè)定的腐敗產(chǎn)物的苯酚，吲哚，3-甲基吲哚，氨等表5中給出的所有測(cè)定項(xiàng)目在攝取到第10天的糞便中的含量都降低了。這表明腸內(nèi)菌從變化為雙尾菌占優(yōu)勢(shì)的菌從，梭狀芽孢桿菌等腐敗菌減少了，以及與氨的生成有關(guān)的消化球菌，擬桿菌等厭氧性菌的生長(zhǎng)發(fā)育受到了抑制。
因此，很清楚通過(guò)攝取實(shí)施例4營(yíng)養(yǎng)劑，便中腐敗產(chǎn)物顯著減少，對(duì)術(shù)后患者的營(yíng)養(yǎng)具有很大的效果。另外，就通過(guò)其它方法制造的營(yíng)養(yǎng)劑也進(jìn)行了試驗(yàn)，得到大致同樣的結(jié)果。表5
(注)單位μg/g糞便附圖的簡(jiǎn)單說(shuō)明圖1是表示雙尾菌的培養(yǎng)時(shí)間與培養(yǎng)基濁度增加之間的關(guān)系的說(shuō)明圖。
實(shí)施發(fā)明的最好的形態(tài)以下給出實(shí)施例進(jìn)一步詳細(xì)說(shuō)明本發(fā)明，但本發(fā)明并不限定于以下的實(shí)施例。實(shí)施例1將棉子糖(日本甜菜制糖公司制)8kg，以及乳果糖粉末(森永乳業(yè)公司制)5kg，其它市場(chǎng)銷售的賦形劑，粘合劑等3kg混合均勻，裝入鋁箔制的袋中，每袋10g，密封，得到促進(jìn)雙尾菌增殖組合物5000袋。實(shí)施例2將大豆低聚糖(カルピス食品工業(yè)公司制。棉子糖含量7％)20kg，乳果糖粉末(森永乳業(yè)公司制)0.5kg，低聚果糖(明治制果公司制)，以及雙尾菌粉末(森永乳業(yè)公司制，雙尾菌數(shù)目1010個(gè)/g)10g，其它糊精等市場(chǎng)銷售的賦形劑，粘合劑共計(jì)80kg混合均勻，然后作成藥片，得到每一片大約1g的雙尾菌增殖促進(jìn)片10萬(wàn)片。實(shí)施例3通過(guò)常規(guī)方法制造具有以下組成的育兒用調(diào)制奶粉。蛋白質(zhì) 酪蛋白 4.2(g/100g)乳清蛋白質(zhì) 6.2蛋白質(zhì)分解物2.6氨基酸 0.3脂類 調(diào)制脂肪24.3糖 乳糖51.4糊精3.0棉子糖 0.8低聚半乳糖 0.4維生素 2.0礦物質(zhì) 2.0另外，使用了棉子糖(日本甜菜制糖公司制)，低聚半乳糖(日新制糖公司制)，其它都是市場(chǎng)銷售產(chǎn)品。實(shí)施例4將棉子糖(日本甜菜制糖公司制)20kg，以及乳果糖粉末(森永乳業(yè)公司制)5kg，DHA粉末(日本油脂公司制)50g，卵黃油脂(キュ-ピ-公司制)100g，以及維生素(市場(chǎng)銷售品，維生素A，D，E，C)共計(jì)20g混合，裝入鋁箔制的袋中，每袋15g，密封，制造出術(shù)后患者用營(yíng)養(yǎng)劑1600袋。
將上述營(yíng)養(yǎng)劑15g通常一日2次給患者服用。實(shí)施例5通過(guò)常規(guī)方法制造具有以下組成的液體營(yíng)養(yǎng)劑。蛋白質(zhì) 酪蛋白4.0(g/100ml)蛋白質(zhì)分解物 0.5氨基酸0.5脂類 調(diào)制脂肪 2.2糖 糊精 13.5棉子糖1.0低聚果糖 0.5維生素 0.3礦物質(zhì) 0.7另外，使用了棉子糖(日本甜菜制糖公司制)，低聚果糖(明治制果公司制)，其它都是市場(chǎng)銷售產(chǎn)品。
產(chǎn)業(yè)上利用的可能性如上所述，本發(fā)明涉及含有從乳果糖，低聚半乳糖，低聚果糖中選擇出的1種或2種以上的低聚糖，以及棉子糖為有效成分的雙尾菌增殖促進(jìn)組合物，配合有該組合物以及其它的食用成分的配合物，通過(guò)本發(fā)明可給出的效果如下所示。
1)本發(fā)明的促進(jìn)雙尾菌增殖的組合物由于被雙尾菌利用的速度非?？?，而且可以廣泛地被腸內(nèi)主要的雙尾菌種利用，所以盡管應(yīng)攝取的低聚糖的總量是少量的，但表現(xiàn)出促進(jìn)雙尾菌增殖效果，并且沒有腹瀉等副作用。
2)本發(fā)明的促進(jìn)雙尾菌增殖的組合物可以有效地促進(jìn)腸內(nèi)的雙尾菌有選擇地增殖，抑制腐敗菌的增殖。
3)本發(fā)明的促進(jìn)雙尾菌增殖的組合物在維持便的性狀處于良好的狀態(tài)的同時(shí)，還能抑制各種腐敗產(chǎn)物的發(fā)生，維持人體健康。
4)本發(fā)明的配合物由于從效果上看可以獲得從嬰幼兒到高齡人的廣泛年齡層中的整腸改善效果，所以在調(diào)制奶粉，各種營(yíng)養(yǎng)劑，其它各種食品中都可以利用。
權(quán)利要求
1.含有從乳果糖、低聚果糖、低聚半乳糖中選擇出的1種或2種以上的低聚糖以及棉子糖為有效成分的雙尾菌增殖促進(jìn)組合物。
2.權(quán)利要求1記載的雙尾菌增殖促進(jìn)組合物，其中相對(duì)于9份(重量)棉子糖至少含有1份(重量)低聚糖。
3.由從乳果糖、低聚果糖、低聚半乳糖中選擇出的1種或2種以上的低聚糖和棉子糖以及其它食用成分組成的配合物。
4.權(quán)利要求3記載的配合物，其中其它食用成分是一般的食品用成分。
5.權(quán)利要求3記載的配合物，其中其它食用成分是嬰幼兒奶粉用的成分。
6.權(quán)利要求3記載的配合物，其中其它食用成分是營(yíng)養(yǎng)劑用的成分。
全文摘要
本發(fā)明提供能使雙尾菌顯著增殖，無(wú)腹瀉等副作用的雙尾菌增殖促進(jìn)組合物，以及含有上述雙尾菌增殖促進(jìn)組合物和其它食用成分的配合物。本發(fā)明涉及含有從乳果糖，低聚半乳糖，低聚果糖中選擇出的1種或2種以上的低聚糖以及棉子糖為有效成分的促進(jìn)雙尾菌增殖的組合物，以及由該組合物以及其它的食用成分組成的配合物。
文檔編號(hào)C12N1/26GK1239998SQ97180524
公開日1999年12月29日 申請(qǐng)日期1997年10月28日 優(yōu)先權(quán)日1996年12月12日
發(fā)明者富田守, 大橋俊夫, 早澤宏紀(jì), 高瀨光德, 中村浩彥, 佐山晃司 申請(qǐng)人:森永乳業(yè)株式會(huì)社