本發(fā)明屬于阿膠的深度加工領域，具體涉及一種阿膠露及其制備方法。

背景技術：

阿膠為馬科動物驢equusasinml.的干燥皮或鮮皮經煎煮、濃縮制成的固體膠。阿膠是傳統(tǒng)的滋補上品、補血圣藥，味甘平，入肺、肝、腎經，具有補血止血、滋陰潤燥等功效，藥食兩用，長期服用可補血養(yǎng)血、美白養(yǎng)顏、抗衰老、抗疲勞、提高免疫力，適用人群廣泛。李時珍著《本草綱目》載：“阿膠《本經》上品。弘景曰：‘出東阿，故名阿膠’”。清道光年間起，河南禹州、周口、山東濟南等地亦有阿膠生產。阿膠表面平整，無油氣孔，質硬而脆，斷面光亮細膩，碎片對光照視呈棕色半透明狀，李時珍贊其"黃透如琥珀色，光黑如瑿漆”。阿膠的化學成分主要含膠原及其水解產生的多種氨基酸，如甘氨酸、賴氨酸、天冬門氨酸、谷氨酸、精氨酸、脯氨酸等，并含有鈣、鐵、鋅等多種元素。

現代醫(yī)學證實：阿膠口服后可提高紅細胞數，促進造血功能，并具有能縮短凝血時間的功效；可改善骨密度，增加鈣的吸收，防治骨質疏松；此外，還有抗輻射、抗休克、抗疲勞、提高免疫力、利尿等作用。

近年來，人們對于保健的需求量增大，阿膠作為我國應用千年且藥理作用廣泛的名貴中藥，開發(fā)阿膠的相關保健品也越來越多，申請?zhí)枮?00610019332.x的專利公布了一種速食阿膠及制備工藝，該專利是一種含中藥提取成分和果仁成分的片狀或塊狀阿膠制品，它是以阿膠、黑芝麻、核桃仁、紅棗、桂圓、冰糖、紹酒、防腐劑等為原料，采用現代加工技術制成的固體阿膠制劑。申請?zhí)枮?01210577776.0的專利公布了一種桂圓膏及其制備方法，桂圓膏，由以下按重量份配比的原料組成：桂圓80-100份、阿膠50-70份、黑芝麻40-80份、核桃仁60-80份、紅棗50-90份、杏仁30-50份、銀耳20-40份、黃芪10-18份、當歸25-40份、何首烏8-15份、白芍5-18份、玉竹6-15份、女貞子8-16份、冰糖40-60份、黃酒30-50份。申請?zhí)枮?01310677046.2的專利公布了一種阿膠糖果，涉及一種以阿膠為輔料的糖果。其由紅糖、阿膠、紅棗、枸杞制成，是一款尤其適合女性食用的糖果。

申請?zhí)枮?01410818804.2的專利公布了一種阿膠核桃露及其制備方法，每1000ml阿膠核桃露由以下原料制成：阿膠1-4g；核桃仁30-70g；白砂糖30-100g；蔗糖酯0.5-3g；乙基麥芽酚5-50mg；三聚磷酸鈉0.1-1g；單雙硬脂酸甘油酯0.5-3g；碳酸氫鈉0.1-1g；其余為純凈水。申請?zhí)枮?01410599728.0的專利公布了一種阿膠桂圓核桃露及其制備方法，所述阿膠桂圓核桃露中包括以下重量百分比的各組分：阿膠1-5％，桂圓5-8％，核桃5-8％，白砂糖4-8％，聚甘油脂肪酸酯0.1-0.3％，黃原膠0.02-0.05％，小蘇打0.1-0.15％，d-異抗壞血酸鈉0.01-0.03％，安賽蜜0.001-0.003％，軟化劑0.02-0.04％，余量為純凈水；該阿膠桂圓核桃露中核桃桂圓是為以磨好的粉狀物與其他成分制備調制阿膠桂圓核桃露。

現行2015版藥典收載的“阿膠”，為阿膠塊(飲片)，其質硬而脆，需烊化兌服，食用不方便。

中藥大辭典記載，阿膠脾胃虛弱者慎服，其原因為阿膠的分子量偏大(現有阿膠分子量分布為6千～20萬道爾頓)，胃腸虛弱的病人難以消化吸收；阿膠的分子量偏大，因此難以制成澄清的溶液制劑，復方阿膠漿為阿膠與藥材提取物(人參、熟地黃、黨參、山楂)制成混懸狀的液體制劑，且阿膠含量約為阿膠露的1/2，沒有阿膠多肽口服液體產品。

技術實現要素：

有鑒于此，本發(fā)明的目的在于提供一種阿膠露及其制備方法。本發(fā)明的阿膠露采用了復合酶解技術，降低阿膠中膠原蛋白的分子量到1萬以下，徹底解決阿膠溶液渾濁易沉淀的缺點；同時克服阿膠滋膩，難以吸收的特性，制備得到的阿膠露阿膠含量高，溶液澄清透明，口感好，生物利用度高，服用方便。

為實現上述目的，本發(fā)明的技術方案為：

復合酶，按重量份計包括由以下組分組成：木瓜蛋白酶10-90份、堿性蛋白酶5-80份、風味酶10-90份和胰酶5-80份。

進一步，所述的復合酶按重量份計包括由以下組分組成：木瓜蛋白酶15-60份、堿性蛋白酶10-50份、風味酶15-60份和胰酶15-60份；所述堿性蛋白酶為地衣芽胞桿菌蛋白酶。

作為一種優(yōu)選，所述的復合酶按重量份計包括由以下組分組成：木瓜蛋白酶30-50份、地衣芽胞桿菌蛋白酶25-45份、風味酶30-50份和胰酶30-45份。

木瓜蛋白酶是一種在酸性、中性、堿性環(huán)境下均能分解蛋白質的蛋白酶。它的外觀為白色至淺黃色的粉末，微有吸濕性；木瓜蛋白酶是一種含巰基(-sh)肽鏈內切酶，具有蛋白酶和酯酶的活性，有較廣泛的特異性，它具有酶活高、熱穩(wěn)定性好、天然衛(wèi)生安全等特點，對動植物蛋白、多肽、酯、酰胺等有較強的水解能力。

堿性蛋白酶又稱絲氨酸蛋白酶，分子量約為27300，是絲氨酸型的內切蛋白酶，在一定溫度、ph值下能將大分子的蛋白質水解成多肽及氨基酸等產物，具有較強的分解蛋白質的能力。其生產工藝是采用微濾超濾膜分離、噴霧干燥或真空冷凍干燥等先進技術，產品質量達到食品級標準及試劑級標準，廣泛應用于食品、醫(yī)療、釀造等行業(yè)，可以滿足各種不同要求需要。

作為一種優(yōu)選，所述堿性蛋白酶為地衣芽胞桿菌蛋白酶。所述地衣芽胞桿菌蛋白酶是由地衣芽胞桿菌經發(fā)酵提煉而成的蛋白水解酶，主要成分為地衣芽胞桿菌蛋白酶。

風味酶是由米曲霉菌株發(fā)酵，經提純、復配而成的復合酶，含有氨肽酶，羧肽酶，通過末端水解多肽，提高水解度，最高可達75％，其包含了多肽外切與內切兩種活性酶。作用于蛋白質分子肽鏈的不同位置，分解成小分子多肽和氨基酸。適用于各類動、植物蛋白質的水解，避免和去除了水解造成的苦肽鏈，最終降解為氨基酸和小分子多肽同時增加風味的效果。作用機理為：在食品加工過程中添加合適的風味酶，使風味前體物水解，從而釋放出風味物質，增強和改善食品的風味；風味酶還可以控制肽的苦味，其原理為通過內切蛋白酶切斷多肽內部的肽鍵，形成短鏈肽，其中一些含有疏水氨基酸，因而成為苦肽，使用外切酶每一次從多肽鏈的末端切斷釋放一個氨基酸，從而把苦肽徹底降解為氨基酸。

胰酶是胰蛋白酶、胰淀粉酶、胰脂肪酶的混合物。胰蛋白酶能使蛋白質轉化為蛋白胨，胰淀粉酶能使淀粉轉化為糖，胰脂肪酶則能使脂肪分解為甘油及脂肪酸，從而促進消化、增進食欲。

本發(fā)明的目的之二在于用所述的復合酶制備阿膠露的方法，包括以下步驟：

1)取阿膠加入阿膠4-5倍重量份的水介質中加熱融化，得阿膠溶液；

2)在步驟1)所述阿膠溶液中加入所述復合酶，調節(jié)ph值后恒溫水解；

3)在步驟2)水解后的阿膠溶液中加入低聚糖和調味劑，攪拌溶解均勻后得阿膠露。

作為一種優(yōu)選，所述阿膠為阿膠粉。

作為一種優(yōu)選，步驟1)所述加熱融化的溫度為60-90℃。

進一步，步驟2)中復合酶的加入量為步驟1)阿膠重量的1.5-2.5％。

作為一種優(yōu)選，步驟2)中復合酶的加入量為步驟1)阿膠重量的2％。

進一步，步驟2)中調節(jié)ph5.0-10.0，恒溫水解的溫度為30-60℃；所述恒溫水解的時間為18-25h。

作為一種優(yōu)選，步驟2)中調節(jié)ph8.0。

進一步，步驟3)中所述低聚糖與步驟1)所述阿膠的重量比為5-20:5-40；步驟3)中所述調味劑與步驟1)所述阿膠的重量比為3-20:5-40。

進一步，所述復合酶制備阿膠露的方法，還包括步驟：

4)步驟3)所得阿膠露經過濾、灌裝和滅菌后得阿膠露成品。

作為一種優(yōu)選，所述滅菌為濕熱滅菌。

進一步，所述低聚糖包括低聚果糖、低聚異麥芽糖、海藻糖和聚葡萄糖；所述調味劑包括食糖和葡萄糖漿；所述調味劑包括食糖和葡萄糖漿。

作為一種優(yōu)選，所述低聚糖選用低聚果糖。低聚果糖少糖健康、有清香味，能起幫助排便的作用。

本發(fā)明的目的之三在于上述方法制備的阿膠露，所述阿膠露中含阿膠0.05-0.5g/ml；所述阿膠露中所含阿膠成分90％以上的分子量小于10kd。

本發(fā)明的阿膠露中阿膠含量高，極大的減少了輔料。阿膠的化學成分主要含膠原及其水解產生的多種氨基酸，膠原蛋白具有獨特的三股超螺旋結構，三條鏈相互平行而且由鏈間氫鍵相連，具有十分穩(wěn)定的性質，一般的加工溫度及短時間加熱都難使其分解，因此難被人體吸收，食用利用率較低，將膠原蛋白通過復合酶水解為多肽后，其營養(yǎng)及生理功能可顯著提高，蛋白質消化吸收率幾乎達100％，能保護胃黏膜以及抗?jié)儯龠M皮膚膠原代謝，抑制血壓上升，對關節(jié)炎等膠原病具有很好的預防及治療作用，能促進鈣吸收和降低血清中膽固醇含量等。本發(fā)明通過復合酶解技術使阿膠露中所含的阿膠成分90％以上的分子量小于10kd，利于吸收，生物利用度高，脾胃虛弱的人群不能服阿膠但能服阿膠露。

采用所述復合酶通過復合酶解技術使阿膠大分子被降解為氨基酸和小分子多肽，使阿膠露中不含苦味肽，苦味肽形成的原理為通過內切蛋白酶切斷多肽內部的肽鍵，形成短鏈肽，其中一些含有疏水氨基酸，因而成為苦肽，使用外切酶每一次從多肽鏈的末端切斷釋放一個氨基酸，從而把苦肽徹底降解為氨基酸。

本發(fā)明的目的還在于提供一種所述的復合酶在制備阿膠產品中的應用。

本發(fā)明的有益效果在于：

1)本發(fā)明的阿膠露采用了復合酶解技術，改變阿膠難溶的固有物理特性，制備得到的阿膠露阿膠含量高，溶液澄清透明，服用方便。

2)本發(fā)明的阿膠露將阿膠通過復合酶水解為多肽和氨基酸后，其營養(yǎng)及生理功能可顯著提高，通過復合酶解技術使阿膠露中所含的阿膠成分90％以上的分子量小于10kd，利于吸收，生物利用度高，脾胃虛弱的人群不能服阿膠但能服阿膠露。

3)采用所述復合酶通過復合酶解技術使阿膠大分子被降解為氨基酸和小分子多肽，使阿膠露中不含苦味肽，口感好。

4)本發(fā)明阿膠露的功效：滋陰，補血，并具有能縮短凝血時間的功效；；可改善骨密度，增加鈣的吸收，防治骨質疏松；降低血清中膽固醇含量等，此外，還有抗輻射、抗休克、抗疲勞、提高免疫力、利尿等作用。

附圖說明

圖1為阿膠溶液酶解前后性狀對比圖。

圖2為阿膠露(未酶解)透射比-濃度示意圖。

圖3為阿膠露(酶解)透射比-濃度示意圖。

圖4為阿膠口服液(未酶解)樣品分子量分布圖。

圖5為阿膠口服液(酶解)樣品分子量分布圖。

具體實施方式

以下將對本發(fā)明的優(yōu)選實施例進行詳細描述。優(yōu)選實施例中未注明具體條件的實驗方法，通常按照常規(guī)條件，所舉實施例是為了更好地對本發(fā)明的內容進行說明，但并不是本發(fā)明的內容僅限于所舉實施例。所以熟悉本領域的技術人員根據上述發(fā)明內容對實施方案進行非本質的改進和調整，仍屬于本發(fā)明的保護范圍。

以下原料均可以通過市售得到，或根據本領域技術人員所熟知的方法制得。

實施例1復合酶1

復合酶，按重量份計包括由以下組分組成：木瓜蛋白酶20份、堿性蛋白酶30份、風味酶20份和胰酶30份。

實施例2復合酶2

復合酶，按重量份計包括由以下組分組成：木瓜蛋白酶15份、堿性蛋白酶35份、風味酶20份和胰酶30份。

實施例3復合酶3

復合酶，按重量份計包括由以下組分組成：木瓜蛋白酶10份、地衣芽胞桿菌蛋白酶40份、風味酶20份和胰酶30份。

實施例4制備阿膠露的方法1

用實施例1所述的復合酶制備阿膠露的方法，包括以下步驟：

1)取阿膠粉100g加入500ml的水介質中加熱融化，得阿膠溶液；

2)在步驟1)所述阿膠溶液中加入2g所述復合酶，調節(jié)ph8.0值后恒溫55℃水解22h；

3)在步驟2)水解后的阿膠溶液中加入80g低聚果糖和60g食糖，攪拌溶解均勻后得阿膠露；

4)步驟3)所得阿膠露經過濾、灌裝和濕熱滅菌后得阿膠露成品。

實施例5制備阿膠露的方法2

用實施例2所述的復合酶制備阿膠露的方法，包括以下步驟：

1)取阿膠粉200g加入1l的水介質中加熱融化，得阿膠溶液；

2)在步驟1)所述阿膠溶液中加入4.4g所述復合酶，調節(jié)ph5.5值后恒溫58℃水解23h；

3)在步驟2)水解后的阿膠溶液中加入120g低聚異麥芽糖和100g葡萄糖漿，攪拌溶解均勻后得阿膠露；

4)步驟3)所得阿膠露經過濾、灌裝和濕熱滅菌后得阿膠露成品。

實施例6制備阿膠露的方法3

用實施例3所述的復合酶制備阿膠露的方法，包括以下步驟：

1)取阿膠粉500g加入2.5l的水介質中加熱融化，得阿膠溶液；

2)在步驟1)所述阿膠溶液中加入10g所述復合酶，調節(jié)ph9.5值后恒溫32℃水解20h；

3)在步驟2)水解后的阿膠溶液中加入500g低聚果糖和250g食糖，攪拌溶解均勻后得阿膠露；

4)步驟3)所得阿膠露經過濾、灌裝和濕熱滅菌后得阿膠露成品。

對比實施例

取阿膠粉100g加入500ml的水介質中加熱融化，得阿膠溶液。

實施例口感和外觀測試

征集40人無感冒、味覺正常且食欲正常的人員，分為4組分別對實施例4-6制得的阿膠露和對比實施例制得的阿膠溶液進行品鑒，實驗結果如下：

表1阿膠露口感和外觀測試數據

由此可知，在口感和色澤上，由阿膠溶化制備的阿膠液體(未酶解)，呈棕黃色，透明度差，久置底部出現明顯沉淀，溶液上層漂浮有油脂性物質，圖1左；阿膠露(采用酶解工藝)食用口感好，為澄清透明的暗紅色溶液，圖1右，兩者外觀性狀對比如圖1所示。

實施例阿膠露的物理性質測試

1.阿膠露透射比實驗研究

阿膠溶液采用酶解工藝后，透光度發(fā)生顯著變化，我們對阿膠的透射比進行了研究。檢測方法，采用gb-6783-2013食品安全國家標準食品添加劑明膠，透射比測試方法。結果表明，阿膠溶液酶解后，溶液的透射比顯著增加，具體見圖2和圖3阿膠溶液酶解前后透射比-濃度對比示意圖。

表2阿膠溶液酶解前后透射比-濃度對比研究結果

2.阿膠溶液酶解前后運動粘度的對比分析

我們按照2015版藥典(第一法)，對阿膠溶液酶解前后的運動粘度進行對比分析，研究其流體學的變化。運動粘度結果表明，酶解后阿膠溶液的運動粘度顯著下降。

表3阿膠溶液酶解前后的運動粘度進行對比分析

3.阿膠溶液酶解前后分子量分布的變化

采用凝膠色譜對阿膠溶液酶解前后分子量分布的變化進行測試，如圖4和圖5所示，結果表明酶解后阿膠溶液分子量分布明顯降低，未酶解時，阿膠溶液70％左右的分子量大于1萬；阿膠溶液酶解后，95％左右的分子量小于1萬。分子量降低，阿膠溶液更容易吸收，提高了阿膠的生物利用度。

4.阿膠露與復方阿膠漿中蛋白質含量比較

阿膠多由膠原(collagen)組成，其水解可得明膠、蛋白質及多種氨基酸。阿膠的蛋白類含量約為60％～80％左右，可通過產品中蛋白質的含量計算阿膠的加入量。本實驗采用凱氏定氮法，對阿膠露、復方阿膠漿的總氮值進行含量測定，部分復方阿膠漿中總氮值源于山東東阿阿膠股份有限公司化驗檢測中心的文獻報道。根據檢測結果計算，阿膠露中膠原蛋白含量約為復方阿膠漿的2倍。

表4阿膠露與復方阿膠漿總氮值的對比分析

注：a為西南藥業(yè)股份有限公司測定，b為引用山東東阿阿膠股份有限公司化驗檢測中心的文獻報道

參考文獻：臧香銀,辛杰.復方阿膠漿總氮含量檢測方法新探[j].中國藥物評價,2014,31(5):267-269

最后說明的是，以上實施例僅用以說明本發(fā)明的技術方案而非限制，盡管參照較佳實施例對本發(fā)明進行了詳細說明，本領域的普通技術人員應當理解，可以對本發(fā)明的技術方案進行修改或者等同替換，而不脫離本發(fā)明技術方案的宗旨和范圍，其均應涵蓋在本發(fā)明的權利要求范圍當中。