適用于胚胎細(xì)胞體外動(dòng)態(tài)循環(huán)非接觸共培養(yǎng)系統(tǒng)及方法
【專利摘要】一種適用于胚胎細(xì)胞體外動(dòng)態(tài)循環(huán)非接觸共培養(yǎng)系統(tǒng)及方法，該方法包括：S1、配置內(nèi)設(shè)至少兩個(gè)可密封的培養(yǎng)室的胚胎細(xì)胞培養(yǎng)器，用至少一個(gè)營(yíng)養(yǎng)室儲(chǔ)存或產(chǎn)生培養(yǎng)胚胎細(xì)胞所需營(yíng)養(yǎng)液，通過硅膠軟管連通該營(yíng)養(yǎng)室和所述培養(yǎng)室形成循環(huán)回路；S2、由低頻交流信號(hào)發(fā)生器驅(qū)動(dòng)環(huán)繞所述培養(yǎng)室的線圈產(chǎn)生電磁場(chǎng)，作用于所述培養(yǎng)室內(nèi)的胚胎細(xì)胞；同時(shí)蠕動(dòng)泵作用于所述硅膠軟管使所述營(yíng)養(yǎng)液在所述營(yíng)養(yǎng)室與培養(yǎng)室之間循環(huán)流動(dòng)，不斷地向所述培養(yǎng)室內(nèi)的胚胎細(xì)胞供給營(yíng)養(yǎng)，同時(shí)帶走胚胎細(xì)胞分泌物。系統(tǒng)設(shè)計(jì)合理，封閉運(yùn)行，可提供胚胎細(xì)胞培養(yǎng)所需空間、營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)、機(jī)械力刺激及模擬動(dòng)物體內(nèi)電磁環(huán)境等，特別適合于不同胚胎細(xì)胞的非接觸共培養(yǎng)。
【專利說明】適用于胚胎細(xì)胞體外動(dòng)態(tài)循環(huán)非接觸共培養(yǎng)系統(tǒng)及方法
【技術(shù)領(lǐng)域】
[0001]本發(fā)明屬于細(xì)胞體外培養(yǎng)的【技術(shù)領(lǐng)域】，具體涉及一種適用于胚胎細(xì)胞體外動(dòng)態(tài)循環(huán)非接觸共培養(yǎng)的系統(tǒng)及方法。
【背景技術(shù)】
[0002]如今細(xì)胞體外培養(yǎng)技術(shù)在胚胎工程方面應(yīng)用非常廣泛，并且成為基本的關(guān)鍵技術(shù)。然而普通的利用培養(yǎng)皿、培養(yǎng)瓶等進(jìn)行細(xì)胞體外培養(yǎng)，僅能為胚胎細(xì)胞提供一個(gè)靜態(tài)的、二維的體外生長(zhǎng)環(huán)境，與胚胎細(xì)胞在動(dòng)物體內(nèi)的生長(zhǎng)環(huán)境相差甚大，這類培養(yǎng)裝置常常會(huì)改變細(xì)胞的生長(zhǎng)速率、功能、形態(tài)等特性，致使體外受精的胚胎細(xì)胞在后續(xù)培養(yǎng)過程中發(fā)育率很低。
[0003]胚胎細(xì)胞在體內(nèi)發(fā)育、成長(zhǎng)期間會(huì)受到輸卵管的擠壓、摩擦、人體內(nèi)電磁環(huán)境、以及輸卵管液流的沖擊影響；胚胎細(xì)胞在發(fā)育、成長(zhǎng)期間需要流動(dòng)的營(yíng)養(yǎng)液提供營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)并帶走胚胎分泌物，同時(shí)還需要子宮蠕動(dòng)產(chǎn)生的機(jī)械力的刺激。而這些液流沖擊、營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)輸送與分泌物排出、機(jī)械力刺激、電磁環(huán)境是普通培養(yǎng)裝置無法提供的。

【發(fā)明內(nèi)容】

[0004]為了解決普通培養(yǎng)皿或培養(yǎng)瓶進(jìn)行胚胎細(xì)胞體外培養(yǎng)時(shí)無法提供模擬子宮內(nèi)環(huán)境，進(jìn)而導(dǎo)致胚胎細(xì)胞成活率低的問題，本發(fā)明提供一種適用于胚胎細(xì)胞體外動(dòng)態(tài)循環(huán)非接觸共培養(yǎng)系統(tǒng)及方 法。
[0005]本發(fā)明提供的適用于胚胎細(xì)胞體外動(dòng)態(tài)循環(huán)非接觸共培養(yǎng)系統(tǒng)，包括:
一胚胎細(xì)胞培養(yǎng)器，它包含:殼體，在該殼體中設(shè)置至少兩個(gè)培養(yǎng)室、與所述培養(yǎng)室的下進(jìn)液管連接的入液管道以及與所述培養(yǎng)室的上出液管連接的出液管道，環(huán)繞所述培養(yǎng)室設(shè)一線圈，該線圈由低頻交流信號(hào)發(fā)生器驅(qū)動(dòng)產(chǎn)生模擬動(dòng)物體內(nèi)的電磁場(chǎng)；于所述培養(yǎng)室上面安裝能夠密封所述培養(yǎng)器的玻璃蓋；
至少一個(gè)營(yíng)養(yǎng)室，用于儲(chǔ)存或產(chǎn)生培養(yǎng)胚胎細(xì)胞所需的營(yíng)養(yǎng)液，該營(yíng)養(yǎng)室的入液口、出液口分別通過硅膠軟管連通所述出液管道和所述入液管道；及
蠕動(dòng)泵，它通過其泵頭作用于所述硅膠軟管使所述營(yíng)養(yǎng)液在所述營(yíng)養(yǎng)室與所述培養(yǎng)室之間循環(huán)流動(dòng)。
[0006]該系統(tǒng)中，所述培養(yǎng)室采用杯形容器結(jié)構(gòu)，所述下進(jìn)液管靠近所述培養(yǎng)室的底部設(shè)置，所述上出液管靠近所述培養(yǎng)室的上口部設(shè)置。
[0007]所述線圈最好安裝于所述殼體外周壁，且所述培養(yǎng)室位于所述線圈產(chǎn)生的電磁場(chǎng)內(nèi)。磁場(chǎng)強(qiáng)度在io「lsr-1crwr之間可達(dá)到胚胎細(xì)胞生長(zhǎng)的最好電磁效果。
[0008]所述交流信號(hào)發(fā)生器可置于所述殼體外部，也可安裝到所述殼體內(nèi)，且位于所述
培養(yǎng)室下。
[0009]所述低頻交流信號(hào)發(fā)生器輸出0.1-300HZ的正弦交流信號(hào)。
[0010]基于本發(fā)明上述系統(tǒng)的一種胚胎細(xì)胞體外動(dòng)態(tài)循環(huán)非接觸共培養(yǎng)方法，包括以下步驟:
51、配置內(nèi)設(shè)至少兩個(gè)可密封的培養(yǎng)室的胚胎細(xì)胞培養(yǎng)器，用至少一個(gè)營(yíng)養(yǎng)室儲(chǔ)存或產(chǎn)生培養(yǎng)胚胎細(xì)胞所需的營(yíng)養(yǎng)液，通過硅膠軟管連通該營(yíng)養(yǎng)室和所述培養(yǎng)室形成循環(huán)回路；
52、由低頻交流信號(hào)發(fā)生器驅(qū)動(dòng)環(huán)繞所述培養(yǎng)室的線圈產(chǎn)生模擬動(dòng)物體內(nèi)電磁環(huán)境的電磁場(chǎng)，作用于所述培養(yǎng)室內(nèi)的胚胎細(xì)胞和所述培養(yǎng)室內(nèi)的營(yíng)養(yǎng)液；同時(shí)蠕動(dòng)泵通過其泵頭作用于所述硅膠軟管使所述營(yíng)養(yǎng)液在所述營(yíng)養(yǎng)室與所述培養(yǎng)室之間循環(huán)流動(dòng)，不斷地向所述培養(yǎng)室內(nèi)的胚胎細(xì)胞供給營(yíng)養(yǎng)，同時(shí)帶走胚胎細(xì)胞分泌物。
[0011]其中，所述營(yíng)養(yǎng)液的流速 在0.0002-100ml/min之間調(diào)節(jié)。所述營(yíng)養(yǎng)液內(nèi)含有營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)、生長(zhǎng)因子等。
[0012]所述低頻交流信號(hào)發(fā)生器能提供0.1-300HZ的正弦交流信號(hào)。調(diào)節(jié)低頻交流信號(hào)
發(fā)生器產(chǎn)生的正弦交流信號(hào)控制線圈產(chǎn)生磁場(chǎng)強(qiáng)度為io-15r-1crMr的電磁場(chǎng)，使所述培
養(yǎng)室內(nèi)的胎細(xì)胞在類似動(dòng)物體內(nèi)電磁環(huán)境中生長(zhǎng)。在所述電磁場(chǎng)為胚胎細(xì)胞提供電磁環(huán)境的同時(shí)，也會(huì)對(duì)培養(yǎng)室內(nèi)的流動(dòng)的營(yíng)養(yǎng)液進(jìn)行磁化處理。
[0013]所述營(yíng)養(yǎng)液以并聯(lián)方式進(jìn)入和流出所述培養(yǎng)室，當(dāng)所述營(yíng)養(yǎng)液從所述培養(yǎng)室的靠近底部的下進(jìn)液管進(jìn)入時(shí)，所述營(yíng)養(yǎng)液對(duì)胚胎細(xì)胞形成流體沖擊效果。
[0014]用于本發(fā)明上述系統(tǒng)的一種胚胎細(xì)胞培養(yǎng)器，包括:殼體；在該殼體中設(shè)置至少兩個(gè)培養(yǎng)室、與所述培養(yǎng)室的下進(jìn)液管連接的入液管道以及與所述培養(yǎng)室的上出液管連接的出液管道；環(huán)繞所述培養(yǎng)室設(shè)一線圈，該線圈由低頻交流信號(hào)發(fā)生器驅(qū)動(dòng)產(chǎn)生模擬動(dòng)物體內(nèi)電磁環(huán)境的電磁場(chǎng)；于所述培養(yǎng)室上面安裝能夠密封所述培養(yǎng)器的玻璃蓋；其中，所述線圈安裝于所述殼體外周壁；所述低頻交流信號(hào)發(fā)生器輸出0.1-300HZ的正弦交流信號(hào)。
[0015]本發(fā)明系統(tǒng)設(shè)計(jì)合理，可提供胚胎細(xì)胞培養(yǎng)所需空間、營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)、機(jī)械力刺激及模擬動(dòng)物體內(nèi)電磁環(huán)境等。
[0016]利用線圈產(chǎn)生的電磁場(chǎng)模擬動(dòng)物體內(nèi)電磁環(huán)境，通過改變低頻交流信號(hào)發(fā)生器產(chǎn)生的正弦交流信號(hào)來控制線圈產(chǎn)生的電磁場(chǎng)，磁場(chǎng)強(qiáng)度在i(T15r-1cr?r之間可達(dá)到胚胎細(xì)胞生長(zhǎng)的最好電磁效果。
[0017]含有營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)、生長(zhǎng)因子等的營(yíng)養(yǎng)液從胚胎細(xì)胞培養(yǎng)器的下進(jìn)液管進(jìn)入培養(yǎng)室時(shí)，對(duì)胚胎細(xì)胞形成理想的沖擊效果。
[0018]整個(gè)系統(tǒng)內(nèi)提供給胚胎細(xì)胞生長(zhǎng)的營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)、生長(zhǎng)因子等是動(dòng)態(tài)流動(dòng)的，新的營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)、生長(zhǎng)因子等源源不斷的提供給胚胎細(xì)胞的同時(shí)也帶走了胚胎細(xì)胞的分泌物，同時(shí)流動(dòng)能使胚胎細(xì)胞的分泌物易于擴(kuò)散，細(xì)胞和營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)、生長(zhǎng)因子充分接觸。
[0019]通過對(duì)蠕動(dòng)泵的控制能實(shí)現(xiàn)系統(tǒng)內(nèi)營(yíng)養(yǎng)液的循環(huán)流動(dòng)速度，以期達(dá)到適合細(xì)胞生長(zhǎng)的最佳效果。
[0020]整個(gè)系統(tǒng)運(yùn)行時(shí)是封閉的，能夠在胚胎細(xì)胞和其他細(xì)胞不接觸的情況下實(shí)現(xiàn)多種細(xì)胞共培養(yǎng)。
[0021]系統(tǒng)中可以配置多個(gè)營(yíng)養(yǎng)室，可根據(jù)需要在各個(gè)營(yíng)養(yǎng)室中分別滋養(yǎng)不同的細(xì)胞，產(chǎn)生不同的營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)、生長(zhǎng)因子等?！緦＠綀D】

【附圖說明】
[0022]圖1為本發(fā)明培養(yǎng)系統(tǒng)原理示意圖；
圖2為本發(fā)明培養(yǎng)系統(tǒng)實(shí)施例1示意圖；
圖3、圖4為圖2實(shí)施例1中胚胎細(xì)胞培養(yǎng)器的結(jié)構(gòu)示意圖；
圖5為圖3胚胎細(xì)胞培養(yǎng)器中一個(gè)培養(yǎng)室結(jié)構(gòu)及它與入液管道、出液管道連接示意
圖；
圖6為圖2實(shí)施例1中營(yíng)養(yǎng)室的結(jié)構(gòu)不意圖。
【具體實(shí)施方式】
[0023]下面將結(jié)合實(shí)施例附圖對(duì)本發(fā)明詳細(xì)說明。
[0024]圖1適用于胚胎細(xì)胞體外動(dòng)態(tài)循環(huán)非接觸共培養(yǎng)系統(tǒng)，包括胚胎細(xì)胞培養(yǎng)器1、兩個(gè)營(yíng)養(yǎng)室(a、b)及蠕動(dòng)泵。胚胎細(xì)胞培養(yǎng)器I為自行設(shè)計(jì)，它提供胚胎細(xì)胞培養(yǎng)所需的空間、營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)、機(jī)械力刺激及電磁環(huán)境等。胚胎細(xì)胞培養(yǎng)器I主要包含至少兩個(gè)培養(yǎng)室，由環(huán)繞所述培養(yǎng)室的線圈產(chǎn)生電磁場(chǎng)來模擬動(dòng)物體內(nèi)電磁環(huán)境。兩個(gè)營(yíng)養(yǎng)室(a、b)分別用娃膠軟管與胚胎細(xì)胞培養(yǎng)器I連通，且兩個(gè)營(yíng)養(yǎng)室互連形成系統(tǒng)循環(huán)回路。兩個(gè)營(yíng)養(yǎng)室為胚胎細(xì)胞培養(yǎng)提供營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)、生長(zhǎng)因子等，可通過兩種方法為胚胎細(xì)胞培養(yǎng)器I提供營(yíng)養(yǎng)液:一種是直接將胚胎細(xì)胞培養(yǎng)所需的營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)加入營(yíng)養(yǎng)室從而進(jìn)入整個(gè)系統(tǒng)；另一種是在營(yíng)養(yǎng)室植入滋養(yǎng)層細(xì)胞，將其產(chǎn)生的分泌物作為營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)進(jìn)入整個(gè)培養(yǎng)系統(tǒng)。胚胎細(xì)胞培養(yǎng)需要的營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)、生長(zhǎng)因子等可參考現(xiàn)有相關(guān)文獻(xiàn)。
[0025]圖2實(shí)施例1系統(tǒng)包括胚胎細(xì)胞培養(yǎng)器1、營(yíng)養(yǎng)室2、提供動(dòng)力的蠕動(dòng)泵4和低頻交流信號(hào)發(fā)生器17等。
[0026]如圖3、圖4、圖5所示，胚胎細(xì)胞培養(yǎng)器I包含殼體1’，在殼體I’中設(shè)置四個(gè)培養(yǎng)室6、四個(gè)培養(yǎng)室6兩邊有入液管道10和出液管道12，各培養(yǎng)室6均采用杯形容器結(jié)構(gòu)，靠近其底部設(shè)置下進(jìn)液管11，靠近其上口部設(shè)置上出液管13，四個(gè)下進(jìn)液管11分別連通入液管道10，四個(gè)上出液管13分別連通出液管道12。
[0027]環(huán)繞殼體I’的外周壁安裝一線圈14，線圈14和開關(guān)16串聯(lián)后連接于低頻交流信號(hào)發(fā)生器17的輸出端。低頻交流信號(hào)發(fā)生器17通過線圈14產(chǎn)生電磁場(chǎng)，且四個(gè)培養(yǎng)室6位于線圈14產(chǎn)生的電磁場(chǎng)內(nèi)。磁場(chǎng)強(qiáng)度在10-15T-10-ΜT之間可達(dá)到胚胎細(xì)胞生長(zhǎng)的最好電磁效果。
[0028]玻璃蓋9放置于四個(gè)培養(yǎng)室6上面,玻璃蓋9能夠密封四個(gè)培養(yǎng)器6的上口 ；同時(shí)透過玻璃蓋可觀測(cè)培養(yǎng)室6內(nèi)部環(huán)境及細(xì)胞生長(zhǎng)狀況。
[0029]兩個(gè)營(yíng)養(yǎng)室2如圖6,用于儲(chǔ)存或產(chǎn)生培養(yǎng)胚胎細(xì)胞所需的營(yíng)養(yǎng)液。營(yíng)養(yǎng)室2設(shè)有入液口 18、出液口 19和注射口 20，通過注射口 20可以為營(yíng)養(yǎng)室2注入營(yíng)養(yǎng)液。參照?qǐng)D2，一個(gè)營(yíng)養(yǎng)室2的入液口 18通過硅膠軟管5連通所述出液管道12的出口端8，另一個(gè)營(yíng)養(yǎng)室2的出液口 19通過硅膠軟管5連通所述入液管道10的進(jìn)口端7，且一個(gè)營(yíng)養(yǎng)室2的出液口 19和另一個(gè)營(yíng)養(yǎng)室2的入液口 18用另一條硅膠軟管5連接構(gòu)成循環(huán)回路。把該另一條硅膠軟管5夾持在蠕動(dòng)泵4的擠壓裝置中，泵頭與該軟管接觸擠壓實(shí)現(xiàn)軟管內(nèi)液體的低速流動(dòng)。[0030]蠕動(dòng)泵4作為動(dòng)力源，蠕動(dòng)泵通過其泵頭作用于所述硅膠軟管5提供將營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)等從營(yíng)養(yǎng)室傳輸?shù)脚咛ゼ?xì)胞培養(yǎng)器所需的動(dòng)力，并使液體內(nèi)部產(chǎn)生壓力差，使所述營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)等在所述營(yíng)養(yǎng)室2與所述培養(yǎng)室6之間循環(huán)流動(dòng)，在胚胎細(xì)胞培養(yǎng)器的培養(yǎng)室6內(nèi)形成液流沖擊效果。
[0031]上述胚胎細(xì)胞培養(yǎng)器I的各培養(yǎng)室6米用并聯(lián)方式提供營(yíng)養(yǎng)液流動(dòng),并各培養(yǎng)室6均被玻璃蓋9密封，可將它們內(nèi)部生長(zhǎng)的胚胎細(xì)胞(不同的胚胎細(xì)胞或相同的胚胎細(xì)胞)限制在各自培養(yǎng)室中，實(shí)現(xiàn)各培養(yǎng)室的細(xì)胞互不接觸，營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)、生長(zhǎng)因子等循環(huán)流動(dòng)的共培養(yǎng)狀態(tài)。非常適合于在一些培養(yǎng)室中的胚胎細(xì)胞和另一些培養(yǎng)室中的其他細(xì)胞非接觸共培養(yǎng)。
[0032]通過實(shí)施例1培養(yǎng)系統(tǒng)培養(yǎng)胚胎時(shí)，在培養(yǎng)室6中放入胚胎細(xì)胞，營(yíng)養(yǎng)室2內(nèi)植入滋養(yǎng)層細(xì)胞(分泌產(chǎn)生不同的營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)和生長(zhǎng)因子等)；打開蠕動(dòng)泵4，讓營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)在培養(yǎng)系統(tǒng)的循環(huán)回路內(nèi)循環(huán)流動(dòng)起來，不斷地向培養(yǎng)室6內(nèi)的胚胎細(xì)胞供給營(yíng)養(yǎng)，同時(shí)帶走胚胎細(xì)胞分泌物；并開啟開關(guān)16，低頻交流信號(hào)發(fā)生器17驅(qū)動(dòng)線圈14產(chǎn)生需要的電磁場(chǎng)，使四個(gè)培養(yǎng)室6內(nèi)的胚胎細(xì)胞在該電磁環(huán)境下生長(zhǎng)。
[0033]調(diào)節(jié)蠕動(dòng)泵4可調(diào)節(jié)營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)(或營(yíng)養(yǎng)液)在該循環(huán)回路內(nèi)的流動(dòng)速度，實(shí)現(xiàn)在電磁環(huán)境下對(duì)胚胎細(xì)胞和滋養(yǎng)層細(xì)胞的動(dòng)態(tài)循環(huán)共培養(yǎng)。該循環(huán)回路內(nèi)營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)的流動(dòng)速度在0.0002-100ml/min范圍調(diào)節(jié)即可滿足要求。
[0034]在胚胎細(xì)胞培養(yǎng)器I中，由于線圈14環(huán)繞四個(gè)培養(yǎng)室6設(shè)置,營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)(或營(yíng)養(yǎng)液)從培養(yǎng)室6的底部的下進(jìn)液管11進(jìn)入(向上流出)，這樣四個(gè)培養(yǎng)室6位于線圈14產(chǎn)生的電磁場(chǎng)內(nèi)。線圈14產(chǎn) 生的電磁場(chǎng)為培養(yǎng)室6內(nèi)的胚胎細(xì)胞提供電磁環(huán)境，同時(shí)對(duì)培養(yǎng)室內(nèi)的流動(dòng)的營(yíng)養(yǎng)液進(jìn)行磁化處理。
[0035]實(shí)施例2培養(yǎng)系統(tǒng)和實(shí)施例1培養(yǎng)系統(tǒng)(圖2)結(jié)構(gòu)相同，區(qū)別在于直接在營(yíng)養(yǎng)室2內(nèi)注入營(yíng)養(yǎng)液，營(yíng)養(yǎng)液中包含胚胎細(xì)胞生長(zhǎng)所需的營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)、生長(zhǎng)因子等。
[0036]通過實(shí)施例2培養(yǎng)系統(tǒng)培養(yǎng)胚胎時(shí),在培養(yǎng)室6中放入胚胎細(xì)胞,營(yíng)養(yǎng)室2內(nèi)注入含有胚胎細(xì)胞生長(zhǎng)所需的營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)、生長(zhǎng)因子等的營(yíng)養(yǎng)液；開啟開關(guān)16，低頻交流信號(hào)發(fā)生器17驅(qū)動(dòng)線圈14產(chǎn)生需要的電磁場(chǎng)，作用于四個(gè)培養(yǎng)室6內(nèi)的胚胎細(xì)胞；并打開蠕動(dòng)泵4,讓營(yíng)養(yǎng)液在培養(yǎng)系統(tǒng)內(nèi)以0.0002ml/min、5ml/min或50ml/min流速循環(huán)流動(dòng)起來,不斷地向所述培養(yǎng)室6內(nèi)的胚胎細(xì)胞供給營(yíng)養(yǎng)，同時(shí)帶走胚胎細(xì)胞的分泌物。
[0037]以上通過具體實(shí)施例對(duì)本發(fā)明做了詳細(xì)的說明，這些具體的描述不能認(rèn)為本發(fā)明僅僅限于這些實(shí)施例的內(nèi)容。本領(lǐng)域技術(shù)人員根據(jù)本發(fā)明構(gòu)思、這些描述并結(jié)合本領(lǐng)域公知常識(shí)做出的任何改進(jìn)、等同替代方案，均應(yīng)包含在本發(fā)明權(quán)利要求的保護(hù)范圍內(nèi)。
【權(quán)利要求】
1.一種適用于胚胎細(xì)胞體外動(dòng)態(tài)循環(huán)非接觸共培養(yǎng)系統(tǒng)，其特征在于包括: 一胚胎細(xì)胞培養(yǎng)器，它包含殼體，在該殼體中設(shè)置至少兩個(gè)可密封的培養(yǎng)室、與所述培養(yǎng)室的下進(jìn)液管連接的入液管道以及與所述培養(yǎng)室的上出液管連接的出液管道；環(huán)繞所述培養(yǎng)室設(shè)一線圈，該線圈由低頻交流信號(hào)發(fā)生器驅(qū)動(dòng)產(chǎn)生模擬動(dòng)物體內(nèi)的電磁場(chǎng)； 至少一個(gè)營(yíng)養(yǎng)室，用于儲(chǔ)存或產(chǎn)生培養(yǎng)胚胎細(xì)胞所需的營(yíng)養(yǎng)液，該營(yíng)養(yǎng)室入液口、出液口分別通過硅膠軟管連通所述出液管道和所述入液管道；及 蠕動(dòng)泵，它作用于所述硅膠軟管使所述營(yíng)養(yǎng)液在所述營(yíng)養(yǎng)室與所述培養(yǎng)室之間循環(huán)流動(dòng)。
2.根據(jù)權(quán)利要求1所述的系統(tǒng)，其特征在于:所述培養(yǎng)室采用杯形容器結(jié)構(gòu)，所述下進(jìn)液管設(shè)置于靠近所述培養(yǎng)室的底部，所述上出液管設(shè)置于靠近所述培養(yǎng)室的上口部。
3.根據(jù)權(quán)利要求1所述的系統(tǒng)，其特征在于:所述線圈安裝于所述殼體外周壁，且所述培養(yǎng)室位于所述電磁場(chǎng)內(nèi)，所述電磁場(chǎng)的磁場(chǎng)強(qiáng)度為IO-15F-JO-bT。
4.根據(jù)權(quán)利要求1或3所述的系統(tǒng)，其特征在于:所述低頻交流信號(hào)發(fā)生器輸出.0.1-300HZ的正弦交流信號(hào)。
5.根據(jù)權(quán)利要求1所述的系統(tǒng)，其特征在于:在所述培養(yǎng)室上面安裝能夠密封所述培 養(yǎng)器的玻璃蓋。
6.基于權(quán)利要求1-5任一項(xiàng)所述系統(tǒng)的胚胎細(xì)胞體外動(dòng)態(tài)循環(huán)非接觸共培養(yǎng)方法，其特征在于包括以下步驟: 51、配置內(nèi)設(shè)至少兩個(gè)可密封的培養(yǎng)室的胚胎細(xì)胞培養(yǎng)器，用至少一個(gè)營(yíng)養(yǎng)室儲(chǔ)存或產(chǎn)生培養(yǎng)胚胎細(xì)胞所需的營(yíng)養(yǎng)液，通過硅膠軟管連通該營(yíng)養(yǎng)室和所述培養(yǎng)室形成循環(huán)回路； 52、由低頻交流信號(hào)發(fā)生器驅(qū)動(dòng)環(huán)繞所述培養(yǎng)室的線圈產(chǎn)生模擬動(dòng)物體內(nèi)電磁環(huán)境的電磁場(chǎng)，作用于所述培養(yǎng)室內(nèi)的胚胎細(xì)胞；同時(shí)蠕動(dòng)泵作用于所述硅膠軟管使所述營(yíng)養(yǎng)液在所述營(yíng)養(yǎng)室與所述培養(yǎng)室之間循環(huán)流動(dòng)，不斷地向所述培養(yǎng)室內(nèi)的胚胎細(xì)胞供給營(yíng)養(yǎng)，同時(shí)帶走胚胎細(xì)胞分泌物。
7.根據(jù)權(quán)利要求6所述的方法，其特征在于:所述營(yíng)養(yǎng)液的流速為0.0002-100ml/min,所述電磁場(chǎng)的磁場(chǎng)強(qiáng)度為IO-1sT-1Q-vsT ο
8.根據(jù)權(quán)利要求6或7所述的方法，其特征在于:所述低頻交流信號(hào)發(fā)生器輸出.0.1-300HZ的正弦交流信號(hào)。
9.根據(jù)權(quán)利要求6所述的方法，其特征在于:所述營(yíng)養(yǎng)液以并聯(lián)方式進(jìn)入和流出所述培養(yǎng)室，當(dāng)所述營(yíng)養(yǎng)液從所述培養(yǎng)室的靠近底部的下進(jìn)液管進(jìn)入時(shí)，所述營(yíng)養(yǎng)液對(duì)胚胎細(xì)胞形成流體沖擊效果。
10.用于權(quán)利要求1-5任一項(xiàng)所述系統(tǒng)的一種胚胎細(xì)胞培養(yǎng)器，其特征在于包括:殼體；在該殼體中設(shè)置至少兩個(gè)培養(yǎng)室、與所述培養(yǎng)室的下進(jìn)液管連接的入液管道以及與所述培養(yǎng)室的上出液管連接的出液管道；環(huán)繞所述培養(yǎng)室設(shè)一線圈，該線圈由低頻交流信號(hào)發(fā)生器驅(qū)動(dòng)產(chǎn)生模擬動(dòng)物體內(nèi)電磁環(huán)境的電磁場(chǎng)；于所述培養(yǎng)室上面安裝能夠密封所述培養(yǎng)器的玻璃蓋；其中，所述線圈安裝于所述殼體外周壁；所述低頻交流信號(hào)發(fā)生器輸出.0.1- 300HZ的正弦交流信號(hào)。
【文檔編號(hào)】C12N5/073GK103966093SQ201410173738
【公開日】2014年8月6日 申請(qǐng)日期:2014年4月28日 優(yōu)先權(quán)日:2014年4月28日
【發(fā)明者】彌勝利, 劉長(zhǎng)勇, 徐圓圓, 孫偉, 雷安民, 劉多靜, 蘇鑫, 孔彬 申請(qǐng)人:清華大學(xué)深圳研究生院