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一種玉米漿葡萄糖雙流加發(fā)酵優(yōu)化生產(chǎn)谷氨酸的方法

文檔序號:541103閱讀:496來源:國知局
專利名稱:一種玉米漿葡萄糖雙流加發(fā)酵優(yōu)化生產(chǎn)谷氨酸的方法
技術(shù)領(lǐng)域
本發(fā)明涉及發(fā)酵法生產(chǎn)氨基酸的技術(shù)領(lǐng)域,具體涉及一種通過碳源和有機(jī)氮源雙流加發(fā)酵優(yōu)化生產(chǎn)谷氨酸的方法。
背景技術(shù)
目前,我國的谷氨酸生產(chǎn)行業(yè)形勢嚴(yán)峻:一方面,谷氨酸市場需求不斷擴(kuò)大,產(chǎn)量不能滿足需求;另一方面,隨著原輔料價(jià)格不斷上漲,谷氨酸生產(chǎn)成本不斷提高,生產(chǎn)谷氨酸的利潤下滑。因此,尋求更優(yōu)的工藝優(yōu)化發(fā)酵條件,提高發(fā)酵質(zhì)量和產(chǎn)量,節(jié)約能耗來降低生產(chǎn)成本是所有谷氨酸生產(chǎn)企業(yè)所面臨的一個(gè)重要問題。目前,谷氨酸發(fā)酵主要采用在發(fā)酵培養(yǎng)基中添加足量玉米漿和葡萄糖,在發(fā)酵過程中或后期流加葡萄糖,并維持發(fā)酵液中的糖含量在一定范圍內(nèi)進(jìn)行發(fā)酵,這種發(fā)酵方式存在著底物濃度對菌體滲透壓的影響,在一定程度上影響菌體的生長,延長了發(fā)酵時(shí)間,增加了發(fā)酵生產(chǎn)能耗。

發(fā)明內(nèi)容
本發(fā)明所要解決的技術(shù)問題是:針對現(xiàn)有技術(shù)存在的不足,提供一種發(fā)酵時(shí)間明顯縮短、相比現(xiàn)有技術(shù)水、電、氣、風(fēng)等生產(chǎn)能耗顯著降低的玉米漿葡萄糖雙流加發(fā)酵優(yōu)化生產(chǎn)谷氨酸的方法。為解決上述技術(shù)問題,本發(fā)明的技術(shù)方案是:一種玉米漿葡萄糖雙流加發(fā)酵優(yōu)化生產(chǎn)谷氨酸的方法,包括以下步驟:在谷氨酸的發(fā)酵培養(yǎng)時(shí),發(fā)酵培養(yǎng)基中的葡萄糖的初始添加量為I 10g/L,玉米漿的初始添加量為I 10g/L,初始發(fā)酵培養(yǎng)溫度為30 32°C,發(fā)酵培養(yǎng)開始后,即開始同時(shí)流加玉米漿和葡萄糖,玉米漿按5 19g/L的添加量流加,在發(fā)酵開始后的5 10個(gè)小時(shí)內(nèi)加完,玉米漿總用量(初始玉米漿量加上流加的玉米漿量)為15 20g/L ;流加葡萄糖濃溶液直至發(fā)酵結(jié)束,保持發(fā)酵培養(yǎng)基中殘?zhí)堑牧繛?.05 10g/L ;發(fā)酵全過程流加液氨控制pH值,在發(fā)酵開始的O 14h,pH值為7.0 7.I,發(fā)酵第14 25h,pH值為7.2 7.3,25h至發(fā)酵結(jié)束pH值為6.8,產(chǎn)酸值增幅不大并有pH值上升時(shí)即為發(fā)酵終點(diǎn)。作為一種改進(jìn),當(dāng)發(fā)酵至相對生長Λ OD = 0.35 0.45時(shí)(發(fā)酵液稀釋20倍濃度在620nm處的OD值),轉(zhuǎn)換發(fā)酵溫度到37°C,同時(shí)添加0.5 2.0g/L的甜菜堿;當(dāng)相對生長Λ OD = 0.55 0.65時(shí),再次提高溫度到38°C,并繼續(xù)流加葡糖糖和液氨發(fā)酵直至發(fā)酵結(jié)束。優(yōu)選的,所述甜菜堿為鹽酸鹽甜菜堿、無水甜菜堿、一水甜菜堿中的一種或幾種。優(yōu)選的,所述發(fā)酵培養(yǎng)基中的葡萄糖的初始添加量為I 5g/L,玉米漿的初始添加量為I 5g/L。作為進(jìn)一步的優(yōu)選,所述發(fā)酵培養(yǎng)基中的葡萄糖的初始添加量為4 5g/L,玉米漿的添加量為4 5 g/L。
優(yōu)選的,所述發(fā)酵培養(yǎng)基中殘?zhí)堑牧繛?.1 5g/L。作為進(jìn)一步的優(yōu)選,所述發(fā)酵培養(yǎng)基中殘?zhí)堑牧繛?.1 3g/L。優(yōu)選的,所述流加的葡萄糖溶液為80wt%的葡萄糖濃溶液。優(yōu)選的,所述發(fā)酵培養(yǎng)基包括葡萄糖I 10g/L,玉米漿I 10g/L,K2HPO4 6 8g/L, MgSO4.7H20 I 2g/L,VBl 150 250 μ g/L,VH 500 700 μ g/L,F(xiàn)eSO4.7H20、MnSO4.H2O 各 25 35mg/L,甜菜喊 2 4g/L,尿素 0.5 0.6g/L。121°C滅菌 15min。作為進(jìn)一步的優(yōu)選,所述發(fā)酵培養(yǎng)基包括葡萄糖I 5g/L,玉米漿I 5g/L, K2HPO4 6 8g/L,MgSO4.7H20 I 2g/L,VBl 150 250 μ g/L, VH 500 700 μ g/L,FeSO4.7H20、MnSO4.H2O 各 25 35mg/L,甜菜堿 2 4g/L,尿素 0.5 0.6g/L。作為更進(jìn)一步的優(yōu)選,所述發(fā)酵培養(yǎng)基包括葡萄糖4 5g/L,玉米漿4 5g/L, K2HPO4 6 8g/L,MgSO4.7H20 I 2g/L,VBl 150 250 μ g/L, VH 500 700 μ g/L,FeSO4.7H20、MnSO4.H2O 各 25 35mg/L,甜菜堿 2 4g/L,尿素 0.5 0.6g/L。優(yōu)選的,所述谷氨酸發(fā)酵時(shí)采用的菌株為溫度敏感型谷氨酸生產(chǎn)菌(谷氨酸黃色短桿菌或谷氨酸棒桿菌)。本發(fā)明的種子培養(yǎng)基優(yōu)選為:(/L)葡萄糖15g/L,玉米漿 20g/L,K2HPO4 3g,MgSO4.7Η20 lg/L,VBl 200 μ g/L, DL-^氨酸 50 μ g/L, FeSO4.7Η20、MnSO4.H2O 各 2mg/L,尿素 0.55g/L, pH 7.0 7.2,121°C滅菌15min。

由于采用了上述技術(shù)方案,本發(fā)明的有益效果是:本發(fā)明將初始發(fā)酵培養(yǎng)基中的碳、氮濃度降到最低,然后在發(fā)酵初始便開始流加碳源和有機(jī)氮源,控制菌體生長的最佳碳氮比,將底物濃度對菌體滲透壓的影響降到最低,使菌體一直處于半饑餓狀態(tài),來刺激菌體生長,因此有效提高了菌體的生長速度,縮短了菌體發(fā)酵初期的適應(yīng)期及菌體倍增時(shí)間,可以在短時(shí)間內(nèi)積累大量菌體,從而使發(fā)酵總體時(shí)間縮短。本發(fā)明比現(xiàn)有技術(shù)縮短發(fā)酵時(shí)間2小時(shí)以上,因此,顯著降低了發(fā)酵中水、電、氣、風(fēng)等能源消耗,使谷氨酸總體生產(chǎn)成本降低。本發(fā)明的谷氨酸發(fā)酵方法工藝操作簡單,染菌和退化的概率相比現(xiàn)有技術(shù)大大減小。
具體實(shí)施例方式下面結(jié)合具體的實(shí)施例來進(jìn)一步闡述本發(fā)明。實(shí)施例1采用的菌株為谷氨酸溫度敏感型突變株(谷氨酸黃色短桿菌);培養(yǎng)方法:將斜面菌種用IOml無菌水洗下,轉(zhuǎn)接于裝有1200mL種子培養(yǎng)基的5000mL種瓶中,培養(yǎng)溫度32°C,160rpm,振蕩培養(yǎng)16h至對數(shù)期,按12%的接種量將種子液全部接入含有發(fā)酵培養(yǎng)基(初始玉米漿和葡萄糖添加量均為5g/L)的15L全自動(dòng)控制發(fā)酵罐中,控制初始培養(yǎng)溫度為32°C,滴加液氨調(diào)PH值至7.0 ;分階段供氧模式控制溶氧:0 IOh為20%,10 放罐為5% ;發(fā)酵開始時(shí),玉米漿按15g/L的添加量流加,全程控制7個(gè)小時(shí)加完;全過程流加葡萄糖濃溶液至發(fā)酵結(jié)束,控制發(fā)酵液殘?zhí)堑牧吭?g/L;當(dāng)相對生長Λ OD = 0.4時(shí)(發(fā)酵液稀釋20倍濃度在620nm處的OD值),轉(zhuǎn)換溫度到37°C,同時(shí)添加1.0g/L的鹽酸鹽甜菜堿;Λ OD = 0.6時(shí),再次提高溫度到38°C繼續(xù)發(fā)酵。全過程流加液氨控制pH,在發(fā)酵開始的O 14h,pH值為7.0,發(fā)酵第14 25h,pH值為7.2,25h至發(fā)酵結(jié)束pH值為6.8,產(chǎn)酸值增幅不大并有pH值上升時(shí)即為發(fā)酵終點(diǎn)。至發(fā)酵終點(diǎn)發(fā)酵過程共持續(xù)28小時(shí)。發(fā)酵結(jié)束時(shí)L-谷氨酸的產(chǎn)量為213.6g/L,糖酸轉(zhuǎn)化率為63.7%。
對比例1對比例I跟實(shí)施例1的不同點(diǎn)在于:發(fā)酵始培養(yǎng)基中玉米漿和葡萄糖的初始添加量均為20g/L,發(fā)酵過程玉米漿不流加;控制發(fā)酵培養(yǎng)基中殘?zhí)堑牧吭?g/L。至發(fā)酵終點(diǎn)時(shí)發(fā)酵過程共持續(xù)31小時(shí)。發(fā)酵結(jié)束時(shí)L-谷氨酸的產(chǎn)量為212.5g/L、糖酸轉(zhuǎn)化率為63.6%。實(shí)施例1發(fā)酵時(shí)間跟對比例I (發(fā)酵時(shí)間31小時(shí))相比,提前3小時(shí)。放罐時(shí),L-谷氨酸的產(chǎn)量、糖酸轉(zhuǎn)化率比對比例I略高。實(shí)施例2采用的菌株為谷氨酸溫度敏感型突變株(谷氨酸棒桿菌);培養(yǎng)方法:將斜面菌種用IOml無菌水洗下,轉(zhuǎn)接于裝有1200mL種子培養(yǎng)基的5000mL種瓶中,培養(yǎng)溫度32°C,160rpm,振蕩培養(yǎng)16h至對數(shù)期,按12%的接種量將種子液全部接入含有發(fā)酵培養(yǎng)基(初始玉米漿和葡萄糖添加量均為10g/L)的15L全自動(dòng)控制發(fā)酵罐中,控制初始培養(yǎng)溫度為31 °C,滴加液氨調(diào)pH值至7.2 ;分階段供氧模式控制溶氧:0 12h為20%,12 放罐為5% ;發(fā)酵開始時(shí),玉米漿按12g/L的添加量流加,全程控制8個(gè)小時(shí)加完;全過程流加80%的葡萄糖濃液至發(fā)酵結(jié)束,控制發(fā)酵液殘?zhí)堑牧吭?g/L;當(dāng)相對生長Λ OD = 0.35時(shí)(發(fā)酵液稀釋20倍濃度在620nm處的OD值),轉(zhuǎn)換溫度到37°C,同時(shí)添加1.0g/L的無水甜菜堿;Λ OD=0.55時(shí),再次提高溫度到38°C。全過程流加液氨控制pH,在發(fā)酵開始的O 14h,pH值為7.1,發(fā)酵第14 25h,pH值為7.3,25h至發(fā)酵結(jié)束pH值為6.8,產(chǎn)酸值增幅不大并有pH值上升時(shí)即為發(fā)酵終點(diǎn)。至發(fā)酵終點(diǎn)發(fā)酵過程共持續(xù)29小時(shí)。發(fā)酵結(jié)束時(shí)L-谷氨酸的產(chǎn)量為212.2g/L,糖酸轉(zhuǎn)化率 為62.3%。對比例2對比例2跟實(shí)施例2的不同點(diǎn)在于:發(fā)酵培養(yǎng)基中玉米漿和葡萄糖的初始添加量均為20g/L,發(fā)酵過程玉米漿不流加;控制發(fā)酵培養(yǎng)基中殘?zhí)堑牧吭?g/L。至發(fā)酵終點(diǎn)時(shí)發(fā)酵過程共持續(xù)31小時(shí)。發(fā)酵結(jié)束時(shí)L-谷氨酸的產(chǎn)量為211.7g/L,糖酸轉(zhuǎn)化率為61.8%。實(shí)施例2發(fā)酵時(shí)間跟對比例2 (發(fā)酵時(shí)間31小時(shí))相比,提前2小時(shí)。放罐時(shí),L-谷氨酸的產(chǎn)量、糖酸轉(zhuǎn)化率比對比例2略高。實(shí)施例3采用的菌株為谷氨酸溫度敏感型突變株(谷氨酸黃色短桿菌);培養(yǎng)方法:將斜面菌種用IOml無菌水洗下,轉(zhuǎn)接于裝有1200mL種子培養(yǎng)基的5000mL種瓶中,培養(yǎng)溫度32°C,160rpm,振蕩培養(yǎng)15h至對數(shù)期,按12%的接種量將種子液全部接入含有發(fā)酵培養(yǎng)基(葡萄糖 5g/L,玉米漿 5g/L,K2HPO4 6g/L,MgSO4.7H20 2g/L, VBl 150 μ g/L, VH 700 μ g/L,FeSO4.7H20、MnSO4.H2O 各 25mg/L,甜菜堿 2g/L,尿素 0.6g/L。121°C滅菌 15min)的 15L全自動(dòng)控制發(fā)酵罐中,控制初始培養(yǎng)溫度為32°C,滴加液氨調(diào)pH值至7.1 ;分階段供氧模式控制溶氧:0 9h為20%,9小時(shí) 放罐為5% ;發(fā)酵開始時(shí),玉米漿按16g/L的添加量流加,全程控制6個(gè)小時(shí)加完;全過程流加80%的葡萄糖濃液至發(fā)酵結(jié)束,控制發(fā)酵液殘?zhí)堑牧吭?g/L;當(dāng)相對生長0.45時(shí)(發(fā)酵液稀釋20倍濃度在620nm處的OD值),轉(zhuǎn)換溫度到37°C,同時(shí)添加1.0g/L的一水甜菜堿;Λ OD = 0.65,再次提高溫度到38°C。全過程流加液氨控制pH,在發(fā)酵開始的O 14h,pH值為7.0,發(fā)酵第14 25h,pH值為7.2,25h至發(fā)酵結(jié)束pH值為6.8,產(chǎn)酸值增幅不大并有pH值上升時(shí)即為發(fā)酵終點(diǎn)。至發(fā)酵終點(diǎn)發(fā)酵過程共持續(xù)27.5小時(shí)。發(fā)酵結(jié)束時(shí)L-谷氨酸的產(chǎn)量為212.8g/L,糖酸轉(zhuǎn)化率為63.4%。對比例3對比例3跟實(shí)施例3的不同點(diǎn)在于:發(fā)酵始培養(yǎng)基中玉米漿和葡萄糖的初始添加量均為20g/L,發(fā)酵過程玉米漿不流加;葡萄糖在溫度轉(zhuǎn)換至38°C時(shí),添加1.0g/L的一水甜菜堿;控制發(fā)酵培養(yǎng)基中殘?zhí)堑牧吭?g/L。至發(fā)酵終點(diǎn)時(shí)發(fā)酵過程共持續(xù)31小時(shí)。發(fā)酵結(jié)束時(shí)L-谷氨酸的產(chǎn)量為212.5g/L,糖酸轉(zhuǎn)化率為63.1%。實(shí)施例3發(fā)酵時(shí)間跟對比例3 (發(fā)酵時(shí)間31小時(shí))相比,提前3.5小時(shí)。放罐時(shí),L-谷氨酸的產(chǎn)量、糖酸轉(zhuǎn)化率比對比例3略高。實(shí)施例4 采用的菌株為谷氨酸溫度敏感型突變株(谷氨酸黃色短桿菌);培養(yǎng)方法:將斜面菌種用IOml無菌水洗下,轉(zhuǎn)接于裝有1200mL種子培養(yǎng)基的5000mL種瓶中,培養(yǎng)溫度32°C,160rpm,振蕩培養(yǎng)14 16h至對數(shù)期,按12%的接種量將種子液全部接入含有發(fā)酵培養(yǎng)基(葡萄糖 8g/L,玉米漿 8g/L,K2HP8g/L,MgSO4.7H20 I g/L, VBl 250 μ g/L, VH 500 μ g/L,FeSO4.7H20、MnSO4.H2O 各 35mg/L,甜菜堿 3g/L,尿素 0.6g/L。121°C滅菌 15min)的 15L全自動(dòng)控制發(fā)酵罐中,控制初始培養(yǎng)溫度為32°C,滴加液氨調(diào)pH值至7.0 7.2 ;分階段供氧模式控制溶氧:0 IOh為20%,10 放罐為5% ;玉米漿按10g/L的添加量流加,全程控制10個(gè)小時(shí)加完;全過程流加80%的葡萄糖濃液至發(fā)酵結(jié)束,控制發(fā)酵液殘?zhí)堑牧吭?g/L左右;當(dāng)相對生長Λ OD = 0.4時(shí)(發(fā)酵液稀釋20倍濃度在620nm處的OD值),轉(zhuǎn)換溫度到37°C,同時(shí)添加1.5g/L的鹽酸鹽甜菜堿;Λ OD = 0.6時(shí),再次提高溫度到38°C。全過程流加液氨控制PH,在發(fā)酵開始的O 14h,pH值為7.1,發(fā)酵第14 25h,pH值為7.3,25h至發(fā)酵結(jié)束PH值為6.8,產(chǎn)酸值增幅不大并有pH值上升時(shí)即為發(fā)酵終點(diǎn)。至發(fā)酵終點(diǎn)發(fā)酵過程共持續(xù)30.5小時(shí)。發(fā)酵結(jié)束時(shí)L-谷氨酸的產(chǎn)量為211.9g/L,糖酸轉(zhuǎn)化率為62.1%。對比例4對比例4跟實(shí)施例4的不同點(diǎn)在于:發(fā)酵始培養(yǎng)基中玉米漿和葡萄糖的初始添加量均為20g/L,葡萄糖流加時(shí)控制發(fā)酵培養(yǎng)基中殘?zhí)堑牧吭?g/L。至發(fā)酵終點(diǎn)時(shí)發(fā)酵過程共持續(xù)32.5小時(shí)。發(fā)酵結(jié)束時(shí)L-谷氨酸的產(chǎn)量為211.3g/L,糖酸轉(zhuǎn)化率為61.2%。實(shí)施例4發(fā)酵時(shí)間跟對比例4 (發(fā)酵時(shí)間32.5小時(shí))相比,提前2小時(shí)。放罐時(shí),實(shí)施例4中L-谷氨酸的產(chǎn)量、糖酸轉(zhuǎn)化率相比對比例4略好。對比例5對比例5跟實(shí)施例4的不同點(diǎn)在于:發(fā)酵始培養(yǎng)基中玉米漿和葡萄糖的初始添加量均為15g/L,發(fā)酵培養(yǎng)基中不含甜菜堿,發(fā)酵過程不添加甜菜堿,在發(fā)酵至第3小時(shí)開始流加玉米漿和葡萄糖,玉米漿按10g/L的添加量流加,葡萄糖流加時(shí)控制發(fā)酵培養(yǎng)基中殘?zhí)堑牧吭?g/L。至發(fā)酵終點(diǎn)時(shí)發(fā)酵過程共持續(xù)32小時(shí)。發(fā)酵結(jié)束時(shí)L-谷氨酸的產(chǎn)量為191.7g/L,糖酸轉(zhuǎn)化率為60.1%。實(shí)施例4發(fā)酵時(shí)間跟對比例5 (發(fā)酵時(shí)間32小時(shí))相比,提前2.5小時(shí)。放罐時(shí),L-谷氨酸的產(chǎn)量、糖酸轉(zhuǎn)化率比對比例5高。對比例6控制發(fā)酵培養(yǎng)基中初始玉米漿添加量為15g/L,發(fā)酵開始時(shí),玉米漿按5g/L的添加量流加,全程控制5個(gè)小時(shí)加完;全過程流加80%的葡萄糖濃溶液至發(fā)酵結(jié)束,控制發(fā)酵液殘?zhí)堑牧吭?5g/L;其他條件同實(shí)施例1。至發(fā)酵終點(diǎn),發(fā)酵過程共持續(xù)30小時(shí)。發(fā)酵結(jié)束時(shí)L-谷氨酸的產(chǎn)量為211.9g/L,糖酸轉(zhuǎn)化率為61.9%。實(shí)施例1發(fā)酵時(shí)間跟對比例6 (發(fā)酵時(shí)間30小時(shí))相比,提前2小時(shí)。放罐時(shí),實(shí)施例I中L-谷氨酸的產(chǎn)量、糖酸轉(zhuǎn)化率比對比例I高。說明發(fā)酵過程發(fā)酵液中殘?zhí)橇枯^高時(shí),不利于菌體生長?!?br> 權(quán)利要求
1.一種玉米漿葡萄糖雙流加發(fā)酵優(yōu)化生產(chǎn)谷氨酸的方法,其特征在于包括以下步驟:在谷氨酸的發(fā)酵培養(yǎng)時(shí),發(fā)酵培養(yǎng)基中葡萄糖的初始添加量為I 10g/L,玉米漿的初始添加量為I 10g/L,初始發(fā)酵培養(yǎng)溫度為30 32°C,發(fā)酵培養(yǎng)開始后,即開始同時(shí)流加玉米漿和葡萄糖,玉米漿按5 19g/L的添加量流加,在發(fā)酵開始后的5 10個(gè)小時(shí)內(nèi)加完,玉米漿總用量為15 20g/L ;流加葡萄糖溶液直至發(fā)酵結(jié)束,保持發(fā)酵培養(yǎng)基中殘?zhí)堑牧繛?.05 10g/L ;發(fā)酵全過程流加液氨控制pH值,在發(fā)酵開始的O 14h,pH值為7.0 7.1,發(fā)酵第14 25h,pH值為7.2 7.3,25h至發(fā)酵結(jié)束pH值為6.8。
2.如權(quán)利要求1所述的玉米漿葡萄糖雙流加發(fā)酵優(yōu)化生產(chǎn)谷氨酸的方法,其特征在于:當(dāng)發(fā)酵至相對生長Λ OD = 0.35 0.45時(shí),轉(zhuǎn)換發(fā)酵溫度到37°C,同時(shí)添加0.5 2.0g/L的甜菜堿;當(dāng)相對生長Λ OD = 0.55 0.65時(shí),再次提高溫度到38°C,并繼續(xù)流加葡糖糖和液氨直至發(fā)酵結(jié)束。
3.如權(quán)利要求2所述的玉米漿葡萄糖雙流加發(fā)酵優(yōu)化生產(chǎn)谷氨酸的方法,其特征在于:所述甜菜堿為鹽酸鹽甜菜堿、無水甜菜堿、一水甜菜堿中的一種或幾種。
4.如權(quán)利要求1或2所述的玉米漿葡萄糖雙流加發(fā)酵優(yōu)化生產(chǎn)谷氨酸的方法,其特征在于:所述發(fā)酵培養(yǎng)基中的葡萄糖的初始添加量為I 5g/L,玉米漿的初始添加量為I 5g/L。
5.如權(quán)利要求4所述的玉米漿葡萄糖雙流加發(fā)酵優(yōu)化生產(chǎn)谷氨酸的方法,其特征在于:所述發(fā)酵培養(yǎng)基中的葡萄糖的初始添加量為4 5g/L,玉米漿的初始添加量為4 5g/L0
6.如權(quán)利要求1或2所述的玉米漿葡萄糖雙流加發(fā)酵優(yōu)化生產(chǎn)谷氨酸的方法,其特征在于:所述發(fā)酵培養(yǎng)基中殘?zhí)堑牧繛?.1 3g/L。
7.如權(quán)利要求1或2所述的玉米漿葡萄糖雙流加發(fā)酵優(yōu)化生產(chǎn)谷氨酸的方法,其特征在于:所述流加的葡萄糖溶液為80wt%的葡萄糖濃溶液。
8.如權(quán)利要求1或2所述的玉米漿葡萄糖雙流加發(fā)酵優(yōu)化生產(chǎn)谷氨酸的方法,其特征在于:所述發(fā)酵培養(yǎng)基包括葡萄糖I 10g/L,玉米漿I 10g/L,K2HPO4 6 8g/L,MgSO4.7H20 I 2g/L,VBl 150 250 μ g/L, VH 500 700 μ g/L, FeSO4.7H20、MnSO4.H2O各25 35mg/L,舌甘菜堿2 4g/L,尿素0.5 0.6g/L。
9.如權(quán)利要求8所述的玉米漿葡萄糖雙流加發(fā)酵優(yōu)化生產(chǎn)谷氨酸的方法,其特征在于:所述發(fā)酵培養(yǎng)基包括葡萄糖I 5g/L,玉米漿I 5g/L,K2HPO4 6 8g/L,MgSO4.7Η20I 2g/L,VBl 150 250 μ g/L, VH 500 700 μ g/L, FeSO4.7Η20,MnSO4.Η20 各 25 35mg/L,甜菜堿2 4g/L,尿素0.5 0.6g/L。
10.如權(quán)利要求1或2所述的玉米漿葡萄糖雙流加發(fā)酵優(yōu)化生產(chǎn)谷氨酸的方法,其特征在于:所述發(fā)酵培養(yǎng)基包括葡萄糖4 5g/L,玉米漿4 5g/L,K2HP04 6 8g/L,MgS04.7Η20I 2g/L,VBl 150 250 μ g/L, VH 500 700 μ g/L, FeSO4.7Η20,MnSO4.Η20 各 25 35mg/L,甜菜堿2 4g/L,尿素0.5 0.6g/L。
全文摘要
本發(fā)明公開了一種玉米漿葡萄糖雙流加發(fā)酵優(yōu)化生產(chǎn)谷氨酸的方法,包括以下步驟在谷氨酸的發(fā)酵培養(yǎng)時(shí),發(fā)酵培養(yǎng)基中葡萄糖的初始添加量為1~10g/L,玉米漿的初始添加量為1~10g/L,發(fā)酵培養(yǎng)開始后,即開始同時(shí)流加玉米漿和葡萄糖,玉米漿按5~19g/L的添加量流加,在發(fā)酵開始后的5~10個(gè)小時(shí)內(nèi)加完,玉米漿總用量為15~20g/L;流加葡萄糖濃溶液直至發(fā)酵結(jié)束,保持發(fā)酵培養(yǎng)基中殘?zhí)堑牧繛?.05~10g/L;發(fā)酵全過程流加液氨控制pH值為6.8~7.3。本發(fā)明有效提高了菌體的生長速度,縮短了菌體發(fā)酵初期的適應(yīng)期及菌體倍增時(shí)間,使發(fā)酵總體時(shí)間縮短,使谷氨酸總體生產(chǎn)成本降低。
文檔編號C12R1/15GK103243132SQ20131020487
公開日2013年8月14日 申請日期2013年5月28日 優(yōu)先權(quán)日2013年5月28日
發(fā)明者馬興群, 劉雨, 宋琦, 呂麗娟 申請人:山東祥維斯生物科技有限公司
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