一種奴卡氏菌培養(yǎng)基的制作方法
【專(zhuān)利摘要】本發(fā)明公開(kāi)了一種奴卡氏菌培養(yǎng)基。其特征在于，配制1000ml培養(yǎng)基的配方中含有：可溶性淀粉2～4g；牛肝粉10～20g；苯唑青霉素0.005～0.02g；多枯菌素3～5萬(wàn)單位；蒜硫胺素0.1～0.4g；肌醇0.01～0.2g；硫酸鎂0.8～1.1g；瓊脂15～20g；蒸餾水加至1000ml。本發(fā)明與現(xiàn)有技術(shù)相比較，具有檢出可靠、奴卡氏菌分離率高的特點(diǎn)。
【專(zhuān)利說(shuō)明】一種奴卡氏菌培養(yǎng)基
【技術(shù)領(lǐng)域】
[0001]本發(fā)明涉及檢驗(yàn)微生物培養(yǎng)領(lǐng)域，具體涉及一種適用于奴卡氏菌的培養(yǎng)基。
【背景技術(shù)】
[0002]奴卡氏菌屬已有的種近30個(gè)，與醫(yī)學(xué)有關(guān)的種也近10個(gè)，屬于放線菌屬，為需氧菌，存在于土壤，可引起人的奴卡菌病。帶菌的灰塵、土壤或食物通過(guò)呼吸道、皮膚創(chuàng)口或消化道進(jìn)入人體，然后局限于某一器官或組織，或經(jīng)血循環(huán)散播至腦、腎或其他器官。由于該菌不很常見(jiàn)，而且生長(zhǎng)較慢，使用傳統(tǒng)方法需要幾周方能較準(zhǔn)確地做出鑒定，因而臨床上又很容易誤診。常用一般抗生素進(jìn)行治療，結(jié)果延誤時(shí)間，造成多處病灶轉(zhuǎn)移，如轉(zhuǎn)移至腦部極易造成死亡。故臨床細(xì)菌檢查的正確與快速鑒定極為重要。目前臨床培養(yǎng)多使用血瓊脂平板，在37°C需氧培養(yǎng)下多數(shù)于3~7d才能生長(zhǎng)為肉眼可見(jiàn)的針尖大的菌落，做生化反應(yīng)進(jìn)行鑒定則需培養(yǎng)4~6周。而且如果是痰標(biāo)本，則很有可能會(huì)被痰標(biāo)本中的正常菌群所掩蓋而產(chǎn)生誤診。

【發(fā)明內(nèi)容】

[0003]本發(fā)明的技術(shù)任務(wù)是針對(duì)以上現(xiàn)有技術(shù)的不足，提供一種加速奴卡氏菌生長(zhǎng)且分
離率高的培養(yǎng)基。
[0004]本發(fā)明解決其技術(shù)問(wèn)題的技術(shù)方案是:一種奴卡氏菌培養(yǎng)基，其特征在，配制1000ml培養(yǎng)基 的配方中含有:
[0005]可溶性淀粉2~4g ;
[0006]牛肝粉10~20g ；
[0007]苯唑青霉素0.005~0.02g ；
[0008]多枯菌素3~5萬(wàn)單位；
[0009]蒜硫胺素0.1~0.4g ;
[0010]肌醇0.01 ~0.2g;
[0011]硫酸鎂0.8 ~1.1g;
[0012]瓊脂15 ~20g;
[0013]蒸餾水加至1000ml。
[0014]優(yōu)化方案中，每1000ml培養(yǎng)基還含有胸腺嘧啶核苷0.05~0.5g。
[0015]優(yōu)化方案中，每1000ml培養(yǎng)基還含有丙酮酸鈣0.01~0.lg。
[0016]優(yōu)化方案中，每1000ml培養(yǎng)基還含有檸檬酸鋅0.01~0.lg。
[0017]優(yōu)化方案中，上述的可溶性淀粉為薯蕷淀粉。
[0018]其中所述的可溶性淀粉、牛肝粉提供碳氮源和能量；苯唑青霉素、多枯菌素抑制雜菌生長(zhǎng)，提高了奴卡氏菌的分離率；肌醇為營(yíng)養(yǎng)增強(qiáng)劑，蒜硫胺素為激活劑，可以促進(jìn)肌醇攝??；硫酸鎂為緩沖劑，且可以破壞標(biāo)本中殘留的抗真菌菌素；瓊脂是培養(yǎng)基的凝固劑；胸腺嘧啶核苷為營(yíng)養(yǎng)增強(qiáng)劑，丙酮酸鈣和檸檬酸鋅除有營(yíng)養(yǎng)增強(qiáng)作用外，還可以抑制革蘭氏陽(yáng)性菌生長(zhǎng)。
[0019]本發(fā)明與現(xiàn)有技術(shù)相比較，具有檢出可靠、奴卡氏菌分離率高的特點(diǎn)。
【具體實(shí)施方式】
[0020]以下結(jié)合實(shí)際情況，對(duì)本發(fā)明的【具體實(shí)施方式】作詳細(xì)說(shuō)明。
[0021]實(shí)施例1，配制1000ml培養(yǎng)基的配方中含有:玉米淀粉2g ;牛肝粉20g ;硫酸鎂
0.8g ;瓊脂15g ;苯唑青霉素0.02g ;多枯菌素5萬(wàn)單位；蒜硫胺素0.1g,肌醇0.2g ;蒸懼水加至 1000mlo
[0022]實(shí)施例2，配制1000ml培養(yǎng)基的配方中含有:豌豆淀粉4g ;牛肝粉IOg ;硫酸鎂
1.1g ;瓊脂20g ;苯唑青霉素0.005g ;多枯菌素3萬(wàn)單位；蒜硫胺素0.4g，肌醇0.01g ;蒸餾水加至1000ml0
[0023]實(shí)施例3，配制1000ml培養(yǎng)基的配方中含有:土豆淀粉2g ;牛肝粉20g ;硫酸鎂
0.Sg ;瓊脂15g ;苯唑青霉素0.02g ;多枯菌素5萬(wàn)單位；蒜硫胺素0.lg，肌醇0.2g，胸腺嘧啶核苷0.05g ;蒸餾水加至1000ml。
[0024]實(shí)施例4，配制1000ml培養(yǎng)基的配方中含有:薯蕷淀粉4g ;牛肝粉IOg ;硫酸鎂
1.1g ;瓊脂20g ;苯唑青 霉素0.005g ;多枯菌素3萬(wàn)單位；蒜硫胺素0.4g,肌醇0.01g,胸腺嘧啶核苷0.5g ;蒸餾水加至1000ml。
[0025]實(shí)施例5，配制1000ml培養(yǎng)基的配方中含有:土豆淀粉3g ;牛肝粉15g ;硫酸鎂Ig ；瓊脂18g ;苯唑青霉素0.01g ;多枯菌素4萬(wàn)單位；蒜硫胺素0.2g，肌醇0.1g,胸腺嘧啶核苷
0.1g ;蒸餾水加至1000ml。
[0026]實(shí)施例6，配制1000ml培養(yǎng)基的配方中含有:土豆淀粉2g ;牛肝粉20g ;硫酸鎂
0.8g ;瓊脂15g ;苯唑青霉素0.02g ;多枯菌素5萬(wàn)單位；蒜硫胺素0.1g,肌醇0.01g,胸腺嘧啶核苷0.05g，丙酮酸鈣0.lg，檸檬酸鋅0.1g;蒸餾水加至1000ml。
[0027]實(shí)施例7，配制1000ml培養(yǎng)基的配方中含有:薯蕷淀粉4g ;牛肝粉IOg ;硫酸鎂
1.1g ;瓊脂20g ;苯唑青霉素0.005g ;多枯菌素3萬(wàn)單位；蒜硫胺素0.4g，肌醇0.2g，胸腺嘧啶核苷0.5g，丙酮酸鈣0.01g，檸檬酸鋅0.01g ;蒸餾水加至1000ml。
[0028]實(shí)施例8，配制1000ml培養(yǎng)基的配方中含有:薯蕷淀粉3g ;牛肝粉15g ;硫酸鎂Ig ；瓊脂18g ;苯唑青霉素0.01g ;多枯菌素4萬(wàn)單位；蒜硫胺素0.3g，肌醇0.1g,胸腺嘧啶核苷0.2g,丙酮酸鈣0.05g,檸檬酸鋅0.05g ;蒸懼水加至1000ml。
[0029]實(shí)施例1~8培養(yǎng)基的制備方法可以為:取除多枯菌素、苯唑青霉素外的原料溶于蒸懼水中，混勻，蒸懼水定容至1000ml, 121°C, 15min滅菌后，降溫到50~60°C,無(wú)菌操作下加入多枯菌素、苯唑青霉素溶解混勻，分裝。
[0030]本發(fā)明所得奴卡氏菌培養(yǎng)基具有奴卡氏菌生長(zhǎng)快，分離率高的特點(diǎn)，為臨床資料充分證明:20株奴卡氏菌菌株(其中:星形奴卡氏菌8株、巴西氏奴卡氏菌8株及豚鼠奴卡氏菌4株)制成生理鹽水菌懸液，以McFarland 0.5標(biāo)準(zhǔn)比濁管調(diào)整菌懸液濁度，用鹽水連續(xù)10倍稀釋?zhuān)謩e取0.1rnl接種于實(shí)施例8方案培養(yǎng)基、實(shí)施例5方案培養(yǎng)基、實(shí)施例2方案培養(yǎng)基、血瓊脂平板上。36~37°C保溫，48小時(shí)時(shí)各組檢出陽(yáng)性菌株(中央內(nèi)凹，表面有皺褶，顆粒狀橙黃色，菌落表面有白色菌絲生長(zhǎng))例數(shù)為:實(shí)施例8方案培養(yǎng)基15例、實(shí)施例5方案培養(yǎng)基12例、實(shí)施例2方案培養(yǎng)基8例、血瓊脂平板6例。96小時(shí)時(shí)各組檢出菌例數(shù)為:實(shí)施例8方案培養(yǎng)基20例、實(shí)施例5方案培養(yǎng)基20例、實(shí)施例2方案培養(yǎng)基18
例、血瓊脂平板14例。結(jié)果表明，本發(fā)明實(shí)施例奴卡氏菌分離率明顯高目前常用于的血瓊
脂平 板。
【權(quán)利要求】
1.一種奴卡氏菌培養(yǎng)基，其特征在于，配制1000ml培養(yǎng)基的配方中含有: 可溶性淀粉2~4g ; 牛肝粉10~20g ； 蒜硫胺素0.1~0.4g ; 肌醇0.01~0.2g ; 硫酸鎂0.8~1.1g ; 瓊脂15~20g ; 蒸餾水加至1000ml。
2.根據(jù)權(quán)利要求1所述的一種奴卡氏菌培養(yǎng)基，其特征在于每1000ml培養(yǎng)基還含有胸腺嘧啶核苷0.05~0.5g。`
【文檔編號(hào)】C12Q1/04GK103789394SQ201210595203
【公開(kāi)日】2014年5月14日 申請(qǐng)日期:2012年12月24日 優(yōu)先權(quán)日:2012年12月24日
【發(fā)明者】郭三保 申請(qǐng)人:郭三保