專利名稱：一種復(fù)合益生菌發(fā)酵藍(lán)莓果汁粉的制備方法
技術(shù)領(lǐng)域：
本發(fā)明涉及一種復(fù)合益生菌發(fā)酵藍(lán)莓果汁粉的制備方法，具體涉及一種采用復(fù)合益生菌發(fā)酵藍(lán)莓果汁后，經(jīng)冷凍干燥而制得的藍(lán)莓果汁粉，屬生物工程領(lǐng)域。
背景技術(shù)：
藍(lán)莓為杜鵑花科越橘屬植物中藍(lán)果類型商品名統(tǒng)稱，是具有很高經(jīng)濟(jì)價(jià)值和廣闊開(kāi)發(fā)前景的小漿果，其藍(lán)色的果實(shí)不僅極具吸引力，而且肉質(zhì)細(xì)膩、甜酸適度、香氣清爽、風(fēng)味獨(dú)特，既可鮮食，又可加工成多種食品、保健品，深受消費(fèi)者喜愛(ài)。藍(lán)莓果實(shí)中不但富含鈣、鐵、磷、鉀、鈉、硒等多種礦物質(zhì)和維生素A、維生素C、維生素E等，還含有豐富的花青苷、原花色素、SOD等成分，營(yíng)養(yǎng)十分豐富。醫(yī)學(xué)研究表明，藍(lán)莓果實(shí)抗氧化活性極高，具有防止腦神經(jīng)衰老、增強(qiáng)心臟功能、明目及保護(hù)毛細(xì)管的作用和抗癌、抗?jié)?、抗炎癥等功效。因此，藍(lán)莓被國(guó)際糧農(nóng)組織列為五大健康食品之一。目前，全世界野生藍(lán)莓采收量約8萬(wàn)噸，其中，中國(guó)野生藍(lán)莓每年采收量8000噸左右，約占全世界總量的10%。1997年以來(lái)，隨著國(guó)際消費(fèi)市場(chǎng)對(duì)藍(lán)莓需求量的逐年增加，人工栽培藍(lán)莓面積呈現(xiàn)快速發(fā)展勢(shì)頭，世界藍(lán)莓產(chǎn)量迅速增長(zhǎng)。目前，全世界已有超過(guò)30個(gè)國(guó)家人工栽培藍(lán)莓，且栽培面積每年以30%的速度遞增。國(guó)際市場(chǎng)，藍(lán)莓除以鮮果形式直接銷售外，還被加工為三類產(chǎn)品一是作為糕點(diǎn)、酸奶、餡餅等食品的配料；二是加工成罐頭、果醬、果粉(晶)、蜜餞、果酒、濃縮果汁等；三是通過(guò)精深加工提取果實(shí)中的花色苷，用于生產(chǎn)食用色素、制造醫(yī)療保健用品和聞級(jí)化妝品。本項(xiàng)發(fā)明以藍(lán)莓果汁為原料，經(jīng)過(guò)益生菌復(fù)合菌種共同發(fā)酵，再經(jīng)冷凍干燥后制得一種益生菌發(fā)酵藍(lán)莓果汁粉，本發(fā)明首次將藍(lán)莓與益生菌相結(jié)合，開(kāi)發(fā)出一種富含活性益生菌的藍(lán)莓果汁粉固體飲料，填補(bǔ)了國(guó)內(nèi)外藍(lán)莓發(fā)酵食品的空白。

發(fā)明內(nèi)容
本發(fā)明目的在于提供一種復(fù)合益生菌發(fā)酵藍(lán)莓果汁粉的制備方法。本發(fā)明的目的是這樣實(shí)現(xiàn)的本發(fā)明中所涉及的百分比除另有注明之外為重量比，本發(fā)明的產(chǎn)品采用這樣的方法來(lái)制備的
I.益生菌的選擇及培養(yǎng)基的制備
A菌——兩歧雙歧桿菌CICC6168 {Bifidobacterium 況/ii/應(yīng))，培養(yǎng)基為酪蛋白胨IOg,肉湯提取物5g,酵母提取物5g,大豆蛋白胨5g,葡萄糖IOg,吐溫80 Iml, K2HPO4 2g/L,MgSO4 X 7 H2O O. 2g/L, MnSO4 x H2O O. 05g/L, NaCl 5g，鹽溶液 4ml，濃度為 25mg/100ml 刃天青4ml，蒸餾水950ml，培養(yǎng)基煮至沸騰，添加半胱氨酸，調(diào)pH至6.8后，在CO2下冷卻至 37°C備用。其中鹽溶液配方為CaCl2 X 2 H2O O. 25g/L, KH2PO4 Ig/L，K2HPO4 lg/L，MgSO4X7 H2O 0. 5g/L, NaHCO3 lOg/L，NaCl 2g/L。B 菌-副干釀乳桿菌CICC20246 {LactobaciIlus paracasei)，培養(yǎng)基為釀蛋
白胨10. Og,牛肉膏10. Og,酵母粉5. Og,葡萄糖5. Og,乙酸鈉5. Og,朽1檬酸二胺2. Og,Tween 80 I. 0g, K2HPO4 2. 0g, MgSO4. 7H20 O. 2g, MnSO4. H2O O. 05g, CaCO3 20.0g，蒸餾水
I.0L, ρΗ6· 8，經(jīng)121°C滅菌20分鐘冷卻至37°C備用。C 菌-鼠李糖乳桿菌 CICC6142 {Lactobacillus rhamnosus)，培養(yǎng)基為釀蛋
白胨10. Og,牛肉膏10. Og,酵母粉5. Og,葡萄糖5. Og,乙酸鈉5. Og,朽1檬酸二胺2. Og,Tween 80 I. 0g, K2HPO4 2. 0g, MgSO4. 7H20 O. 2g, MnSO4. H2O O. 05g, CaCO3 20.0g，蒸餾水
I.0L, ρΗ6· 8，經(jīng)121°C滅菌20分鐘冷卻至37°C備用。2.復(fù)合益生菌發(fā)酵劑凍干粉的制備過(guò)程
2.I原菌種活化
分別量取O. 9%的生理鹽水IOml于3只試管內(nèi)，經(jīng)121°C滅菌20分鐘冷卻至37°C，將3株益生菌安瓶?jī)?nèi)的凍干菌粉末在無(wú)菌狀態(tài)下全部倒入O. 9%的生理鹽水中，震蕩使其溶解，在37°C恒溫箱中靜止活化30分鐘，備用。2. 2益生菌擴(kuò)大培養(yǎng)
2.2. I母發(fā)酵劑的制備
分別量取3株益生菌培養(yǎng)基各IOOml于3只250mL三角瓶?jī)?nèi)，121 °C滅菌20分鐘冷卻至37°C，按培養(yǎng)基體積的10%接種2. I步驟中已經(jīng)活化的菌種，在37°C厭氧箱內(nèi)靜止培養(yǎng)24小時(shí)，作為母發(fā)酵劑。2. 2. 2生產(chǎn)發(fā)酵劑的制備
首先配制質(zhì)量百分比濃度為10%的脫脂奶乳濁液，分裝于3只500mL三角瓶?jī)?nèi)，每瓶200mL, 121°C滅菌20分鐘冷卻至37°C，分別按3%體積比例接種母發(fā)酵劑，37°C厭氧培養(yǎng)48一一54小時(shí)，檢測(cè)3株益生菌發(fā)酵液活菌數(shù)，各發(fā)酵液活菌數(shù)> IO9個(gè)/ml，視同為發(fā)酵成熟，如果活菌數(shù)< IO9個(gè)/ml，繼續(xù)培養(yǎng)，直至達(dá)到IO9個(gè)/ml。2. 3粉末凍干菌種的制備
將成熟的生產(chǎn)發(fā)酵劑在無(wú)菌條件下導(dǎo)入玻璃安瓶中，液面高度O. 8 — lcm，加蓋瓶塞后放入-30°C冰柜速凍，凍結(jié)后將玻璃安瓶用托盤盛裝，放入凍干機(jī)進(jìn)行冷凍干燥，制備粉末凍干菌種。2. 4復(fù)合益生菌發(fā)酵劑凍干粉的制備
按各粉末凍干菌種重量，取A菌粉末3-4份，B菌粉末1-2份，C菌粉末2-3份，充分混勻后制成復(fù)合益生菌發(fā)酵劑凍干粉，用于發(fā)酵加糖藍(lán)莓果汁，復(fù)合益生菌發(fā)酵劑凍干粉的添加量為加糖藍(lán)莓果汁中固形物重量的O. 03%。需要進(jìn)一步說(shuō)明的是本發(fā)明中選用的益生菌購(gòu)于中國(guó)工業(yè)微生物菌種保存中心，這些益生菌的活化、凍干方法不僅僅限于本發(fā)明所述的具體方法，培養(yǎng)基的成分也不限于此，其它常規(guī)技術(shù)和方法都是可以的，只要可以提高菌種的活力、并將其制備成凍干粉狀而方便使用即可。3.益生菌發(fā)酵藍(lán)莓果汁粉的制備
3.I原料選擇選用新鮮藍(lán)莓，剔除病爛、病蟲(chóng)果，用清水洗凈。3. 2制取果汁用滾筒式或離心式破碎機(jī)將果實(shí)壓破。3. 3過(guò)濾用板框過(guò)濾機(jī)過(guò)濾，收集清汁。3. 4加糖按藍(lán)莓清汁重量的12%添加白砂糖，完全溶解后制成加糖藍(lán)莓果汁。3. 5滅菌采用142°C 3秒超高溫瞬時(shí)滅菌機(jī)滅菌，冷卻至37°C等待發(fā)酵。
3. 6復(fù)合益生菌發(fā)酵按加糖藍(lán)莓果汁中固形物重量的O. 03%添加步驟2. 4制備的復(fù)合益生菌發(fā)酵劑凍干粉，37°C厭氧發(fā)酵72小時(shí)。3. 7冷凍干燥
將步驟3. 6發(fā)酵處理后的物料，打入冷凍干燥機(jī)進(jìn)行冷凍干燥，獲得益生菌發(fā)酵藍(lán)莓果汁粉。具體實(shí)施例方式
下面結(jié)合具體實(shí)施例對(duì)本發(fā)明作更詳細(xì)的描述
實(shí)施例一
本發(fā)明采用的3株益生菌均采購(gòu)于中國(guó)工業(yè)微生物菌種保藏中心，分別為兩歧雙歧桿菌CICC6168、副干酪乳桿菌CICC20246、鼠李糖乳桿菌CICC6142，本發(fā)明中將上述菌株簡(jiǎn)稱為A菌、B菌、C菌。I.益生菌的選擇及培養(yǎng)基的制備
A菌——兩歧雙歧桿菌CICC6168 {Bifidobacterium 況/ii/應(yīng))，培養(yǎng)基為酪蛋白胨IOg,肉湯提取物5g,酵母提取物5g,大豆蛋白胨5g,葡萄糖IOg,吐溫80 Iml, K2HPO4 2g/L,MgSO4 X 7 H2O O. 2g/L, MnSO4 x H2O O. 05g/L, NaCl 5g，鹽溶液 4ml，濃度為 25mg/100ml 刃天青4ml，蒸餾水950ml，培養(yǎng)基煮至沸騰，添加半胱氨酸，調(diào)pH至6.8后，在CO2下冷卻至 37°C 備用。其中鹽溶液配方為CaCl2 X 2 H2O O. 25g/L, KH2PO4 I g/L，K2HPO4 lg/L,MgSO4X7 H2O 0. 5g/L, NaHCO3 lOg/L，NaCl 2g/L。B 菌-副干釀乳桿菌CICC20246 {LactobaciIlus paracasei)，培養(yǎng)基為釀蛋
白胨10. Og,牛肉膏10. Og,酵母粉5. Og,葡萄糖5. Og,乙酸鈉5. Og,朽1檬酸二胺2. Og,Tween 80 I. 0g, K2HPO4 2. 0g, MgSO4. 7H20 O. 2g, MnSO4. H2O O. 05g, CaCO3 20.0g，蒸餾水I. 0L, ρΗ6· 8，經(jīng)121°C滅菌20分鐘冷卻至37°C備用。C 菌-鼠李糖乳桿菌 CICC6142 {Lactobacillus rhamnosus)，培養(yǎng)基為釀蛋
白胨10. Og,牛肉膏10. Og,酵母粉5. Og,葡萄糖5. Og,乙酸鈉5. Og,朽1檬酸二胺2. Og,Tween 80 I. 0g, K2HPO4 2. 0g, MgSO4. 7H20 O. 2g, MnSO4. H2O O. 05g, CaCO3 20.0g，蒸餾水
I.0L, ρΗ6· 8，經(jīng)121°C滅菌20分鐘冷卻至37°C備用。2.復(fù)合益生菌發(fā)酵劑凍干粉的制備過(guò)程
2.I原菌種活化
分別量取O. 9%的生理鹽水IOml于3只試管內(nèi)，經(jīng)121°C滅菌20分鐘冷卻至37°C，將3株益生菌安瓶?jī)?nèi)的凍干菌粉末在無(wú)菌狀態(tài)下全部倒入O. 9%的生理鹽水中，震蕩使其溶解，在37°C恒溫箱中靜止活化30分鐘，備用。2. 2益生菌擴(kuò)大培養(yǎng)
2.2. I母發(fā)酵劑的制備
分別量取3株益生菌培養(yǎng)基各IOOml于3只250mL三角瓶?jī)?nèi)，121 °C滅菌20分鐘冷卻至37°C，按培養(yǎng)基體積的10%接種2. I步驟中已經(jīng)活化的菌種，在37°C厭氧箱內(nèi)靜止培養(yǎng)24小時(shí)，作為母發(fā)酵劑。2. 2. 2生產(chǎn)發(fā)酵劑的制備
首先配制質(zhì)量百分比濃度為10%的脫脂奶乳濁液，分裝于3只500mL三角瓶?jī)?nèi)，每瓶200mL, 121°C滅菌20分鐘冷卻至37°C，分別按3%體積比例接種母發(fā)酵劑，37°C厭氧培養(yǎng)48—54小時(shí)，檢測(cè)3株益生菌發(fā)酵液活菌數(shù)，各發(fā)酵液活菌數(shù)> IO9個(gè)/ml，視同為發(fā)酵成熟，如果活菌數(shù)< IO9個(gè)/ml，繼續(xù)培養(yǎng)，直至達(dá)到IO9個(gè)/ml。2. 3粉末凍干菌種的制備
將成熟的生產(chǎn)發(fā)酵劑在無(wú)菌條件下導(dǎo)入玻璃安瓶中，液面高度O. 8 — lcm，加蓋瓶塞后放入-30°C冰柜速凍，凍結(jié)后將玻璃安瓶用托盤盛裝，放入凍干機(jī)進(jìn)行冷凍干燥，制備粉末凍干菌種。2. 4復(fù)合益生菌發(fā)酵劑凍干粉的制備
按各粉末凍干菌種重量，取A菌粉末3份，B菌粉末I份，C菌粉末2份，充分混勻后制成復(fù)合益生菌發(fā)酵劑凍干粉，用于發(fā)酵加糖藍(lán)莓果汁，復(fù)合益生菌發(fā)酵劑凍干粉的添加量為加糖藍(lán)莓果汁中固形物重量的O. 03%。3.益生菌發(fā)酵藍(lán)莓果汁粉的制備
3.I原料選擇選用新鮮藍(lán)莓，剔除病爛、病蟲(chóng)果，用清水洗凈。3. 2制取果汁用滾筒式或離心式破碎機(jī)將果實(shí)壓破。3. 3過(guò)濾用板框過(guò)濾機(jī)過(guò)濾，收集清汁。3. 4加糖按藍(lán)莓清汁重量的12%添加白砂糖，完全溶解后制成加糖藍(lán)莓果汁。3. 5滅菌采用142°C 3秒超高溫瞬時(shí)滅菌機(jī)滅菌，冷卻至37°C等待發(fā)酵。3. 6復(fù)合益生菌發(fā)酵按加糖藍(lán)莓果汁中固形物重量的O. 03%添加步驟2. 4制備的復(fù)合益生菌發(fā)酵劑凍干粉，37°C厭氧發(fā)酵72小時(shí)。3. 7冷凍干燥
將步驟3. 6發(fā)酵處理后的物料，打入冷凍干燥機(jī)進(jìn)行冷凍干燥，獲得益生菌發(fā)酵藍(lán)莓果汁粉。實(shí)施例二
1.益生菌的選擇及培養(yǎng)基的制備
A菌——兩歧雙歧桿菌CICC6168 {Bifidobacterium 況/ii/應(yīng))，培養(yǎng)基為酪蛋白胨IOg,肉湯提取物5g,酵母提取物5g,大豆蛋白胨5g,葡萄糖IOg,吐溫80 Iml, K2HPO4 2g/L,MgSO4 X 7 H2O O. 2g/L, MnSO4 x H2O O. 05g/L, NaCl 5g，鹽溶液 4ml，濃度為 25mg/100ml 刃天青4ml，蒸餾水950ml，培養(yǎng)基煮至沸騰，添加半胱氨酸，調(diào)pH至6.8后，在CO2下冷卻至 37°C 備用。其中鹽溶液配方為CaCl2 X 2 H2O O. 25g/L, KH2PO4 I g/L，K2HPO4 lg/L,MgSO4X7 H2O 0. 5g/L, NaHCO3 lOg/L，NaCl 2g/L。B 菌-副干釀乳桿菌CICC20246 {LactobaciIlus paracasei)，培養(yǎng)基為釀蛋
白胨10. Og,牛肉膏10. Og,酵母粉5. Og,葡萄糖5. Og,乙酸鈉5. Og,朽1檬酸二胺2. Og,Tween 80 I. 0g, K2HPO4 2. 0g, MgSO4. 7H20 O. 2g, MnSO4. H2O O. 05g, CaCO3 20.0g，蒸餾水I. 0L, ρΗ6· 8，經(jīng)121°C滅菌20分鐘冷卻至37°C備用。C 菌-鼠李糖乳桿菌 CICC6142 {Lactobacillus rhamnosus)，培養(yǎng)基為釀蛋
白胨10. Og,牛肉膏10. Og,酵母粉5. Og,葡萄糖5. Og,乙酸鈉5. Og,朽1檬酸二胺2. Og,Tween 80 I. 0g, K2HPO4 2. 0g, MgSO4. 7H20 O. 2g, MnSO4. H2O O. 05g, CaCO3 20.0g，蒸餾水
I.0L, ρΗ6· 8，經(jīng)121°C滅菌20分鐘冷卻至37°C備用。2.復(fù)合益生菌發(fā)酵劑凍干粉的制備過(guò)程
2.I原菌種活化分別量取O. 9%的生理鹽水IOml于3只試管內(nèi)，經(jīng)121°C滅菌20分鐘冷卻至37°C，將3株益生菌安瓶?jī)?nèi)的凍干菌粉末在無(wú)菌狀態(tài)下全部倒入O. 9%的生理鹽水中，震蕩使其溶解，在37°C恒溫箱中靜止活化30分鐘，備用。2. 2益生菌擴(kuò)大培養(yǎng)
2.2. I母發(fā)酵劑的制備
分別量取3株益生菌培養(yǎng)基各IOOml于3只250mL三角瓶?jī)?nèi)，121 °C滅菌20分鐘冷卻至37°C，按培養(yǎng)基體積的10%接種2. I步驟中已經(jīng)活化的菌種，在37°C厭氧箱內(nèi)靜止培養(yǎng)24小時(shí)，作為母發(fā)酵劑。2. 2. 2生產(chǎn)發(fā)酵劑的制備
首先配制質(zhì)量百分比濃度為10%的脫脂奶乳濁液，分裝于3只500mL三角瓶?jī)?nèi)，每瓶200mL, 121°C滅菌20分鐘冷卻至37°C，分別按3%體積比例接種母發(fā)酵劑，37°C厭氧培養(yǎng)48一一54小時(shí)，檢測(cè)3株益生菌發(fā)酵液活菌數(shù)，各發(fā)酵液活菌數(shù)> IO9個(gè)/ml，視同為發(fā)酵成熟，如果活菌數(shù)< IO9個(gè)/ml，繼續(xù)培養(yǎng)，直至達(dá)到IO9個(gè)/ml。2. 3粉末凍干菌種的制備
將成熟的生產(chǎn)發(fā)酵劑在無(wú)菌條件下導(dǎo)入玻璃安瓶中，液面高度O. 8 — lcm，加蓋瓶塞后放入-30°C冰柜速凍，凍結(jié)后將玻璃安瓶用托盤盛裝，放入凍干機(jī)進(jìn)行冷凍干燥，制備粉末凍干菌種。2. 4復(fù)合益生菌發(fā)酵劑凍干粉的制備
按各粉末凍干菌種重量，取A菌粉末4份，B菌粉末2份，C菌粉末3份，充分混勻后制成復(fù)合益生菌發(fā)酵劑凍干粉，用于發(fā)酵加糖藍(lán)莓果汁，復(fù)合益生菌發(fā)酵劑凍干粉的添加量為加糖藍(lán)莓果汁中固形物重量的O. 03%。3.益生菌發(fā)酵藍(lán)莓果汁粉的制備
3.I原料選擇選用新鮮藍(lán)莓，剔除病爛、病蟲(chóng)果，用清水洗凈。3. 2制取果汁用滾筒式或離心式破碎機(jī)將果實(shí)壓破。3. 3過(guò)濾用板框過(guò)濾機(jī)過(guò)濾，收集清汁。3. 4加糖按藍(lán)莓清汁重量的12%添加白砂糖，完全溶解后制成加糖藍(lán)莓果汁。3. 5滅菌采用142°C 3秒超高溫瞬時(shí)滅菌機(jī)滅菌，冷卻至37°C等待發(fā)酵。3. 6復(fù)合益生菌發(fā)酵按加糖藍(lán)莓果汁中固形物重量的O. 03%添加步驟2. 4制備的復(fù)合益生菌發(fā)酵劑凍干粉，37°C厭氧發(fā)酵72小時(shí)。3. 7冷凍干燥
將步驟3. 6發(fā)酵處理后的物料，打入冷凍干燥機(jī)進(jìn)行冷凍干燥，獲得益生菌發(fā)酵藍(lán)莓果汁粉。
權(quán)利要求
1. 一種復(fù)合益生菌發(fā)酵藍(lán)莓果汁粉的制備方法，其特征是按下述方法制備 1)益生菌的選擇及培養(yǎng)基的制備 A菌——兩歧雙歧桿菌CICC6168 {Bifidobacterium 況/ii/應(yīng))，培養(yǎng)基為酪蛋白胨IOg,肉湯提取物5g,酵母提取物5g,大豆蛋白胨5g,葡萄糖IOg,吐溫80 Iml, K2HPO4 2g/L,MgSO4 X 7 H2O O. 2g/L, MnSO4 x H2O O. 05g/L, NaCl 5g，鹽溶液 4ml，濃度為 25mg/100ml 刃天青4ml，蒸餾水950ml，培養(yǎng)基煮至沸騰，添加半胱氨酸，調(diào)pH至6.8后，在CO2下冷卻至 37°C備用。其中鹽溶液配方為CaCl2 X 2 H2O O. 25g/L, KH2PO4 Ig/L，K2HPO4 lg/L，MgSO4X7 H2O 0. 5g/L, NaHCO3 lOg/L，NaCl 2g/L。
B菌-副干釀乳桿菌CICC20246 {Lactobacillus paracasei)，培養(yǎng)基為釀蛋白腺.10.Og,牛肉膏10. Og,酵母粉5. 0g，葡萄糖5. Og,乙酸鈉5. Og,朽1檬酸二胺2. 0g, Tween.80 I. 0g, K2HPO4 2. 0g, MgSO4. 7H20 O. 2g, MnSO4. H2O O. 05g, CaCO3 20. 0g，蒸餾水 I. 0L,pH6. 8，經(jīng)121°C滅菌20分鐘冷卻至37°C備用。
C菌-鼠李糖乳桿菌CICC6142 {Lactobacillus rhamnosus)，培養(yǎng)基為釀蛋白腺.10.Og,牛肉膏10. Og,酵母粉5. 0g，葡萄糖5. Og,乙酸鈉5. Og,朽1檬酸二胺2. 0g, Tween.80 I. 0g, K2HPO4 2. 0g, MgSO4. 7H20 O. 2g, MnSO4. H2O O. 05g, CaCO3 20. 0g，蒸餾水 I. 0L,pH6. 8，經(jīng)121°C滅菌20分鐘冷卻至37°C備用。
2)原菌種活化 分別量取0. 9%的生理鹽水IOml于3只試管內(nèi)，經(jīng)121°C滅菌20分鐘冷卻至37°C，將3株益生菌安瓶?jī)?nèi)的凍干菌粉末在無(wú)菌狀態(tài)下全部倒入0. 9%的生理鹽水中，震蕩使其溶解，在37°C恒溫箱中靜止活化30分鐘，備用。
3)母發(fā)酵劑的制備 分別量取3株益生菌培養(yǎng)基各IOOml于3只250mL三角瓶?jī)?nèi)，121 °C滅菌20分鐘冷卻至37°C，按培養(yǎng)基體積的10%接種步驟2)中已經(jīng)活化的菌種，在37°C厭氧箱內(nèi)靜止培養(yǎng)24小時(shí)，作為母發(fā)酵劑。
4)生產(chǎn)發(fā)酵劑的制備 首先配制質(zhì)量百分比濃度為10%的脫脂奶乳濁液，分裝于3只500mL三角瓶?jī)?nèi)，每瓶.200mL, 121°C滅菌20分鐘冷卻至37°C，分別按3%體積比例接種母發(fā)酵劑，37°C厭氧培養(yǎng).48—54小時(shí)，檢測(cè)3株益生菌發(fā)酵液活菌數(shù)，各發(fā)酵液活菌數(shù)> IO9個(gè)/ml，視同為發(fā)酵成熟，如果活菌數(shù)< IO9個(gè)/ml，繼續(xù)培養(yǎng)，直至達(dá)到IO9個(gè)/ml。
5)粉末凍干菌種的制備 將成熟的生產(chǎn)發(fā)酵劑在無(wú)菌條件下導(dǎo)入玻璃安瓶中，液面高度0. 8 — lcm，加蓋瓶塞后放入-30°C冰柜速凍，凍結(jié)后將玻璃安瓶用托盤盛裝，放入凍干機(jī)進(jìn)行冷凍干燥，制備粉末凍干菌種。
6)復(fù)合益生菌發(fā)酵劑凍干粉的制備 按各粉末凍干菌種重量，取A菌粉末3-4份，B菌粉末1-2份，C菌粉末2-3份，充分混勻后制成復(fù)合益生菌發(fā)酵劑凍干粉，用于發(fā)酵加糖藍(lán)莓果汁，復(fù)合益生菌發(fā)酵劑凍干粉的添加量為加糖藍(lán)莓果汁中固形物重量的0. 03%。
.7)益生菌發(fā)酵藍(lán)莓果汁粉的制備 .7.I)原料選擇選用新鮮藍(lán)莓，剔除病爛、病蟲(chóng)果，用清水洗凈?！?. 2)制取果汁用滾筒式或離心式破碎機(jī)將果實(shí)壓破。
·7. 3)過(guò)濾用板框過(guò)濾機(jī)過(guò)濾，收集清汁。
·7. 4)加糖按藍(lán)莓清汁重量的12%添加白砂糖，完全溶解后制成加糖藍(lán)莓果汁。 · 7. 5)滅菌采用142°C 3秒超高溫瞬時(shí)滅菌機(jī)滅菌，冷卻至37°C等待發(fā)酵?！?.6)復(fù)合益生菌發(fā)酵按加糖藍(lán)莓果汁中固形物重量的O. 03%添加步驟2. 4制備的復(fù)合益生菌發(fā)酵劑凍干粉，37°C厭氧發(fā)酵72小時(shí)。
·7.7)冷凍干燥 將步驟7. 6)發(fā)酵處理后的物料，打入冷凍干燥機(jī)進(jìn)行冷凍干燥，獲得益生菌發(fā)酵藍(lán)莓果汁粉。
全文摘要
本發(fā)明提供了一種復(fù)合益生菌發(fā)酵藍(lán)莓果汁粉的制備方法。以兩歧雙歧桿菌，副干酪乳桿菌，鼠李糖乳桿菌三株益生菌為出發(fā)菌株，經(jīng)擴(kuò)大培養(yǎng)、粉末凍干菌種制備、復(fù)合益生菌發(fā)酵劑凍干粉的復(fù)配，獲得復(fù)合益生菌發(fā)酵劑凍干粉。按藍(lán)莓清汁重量的12%添加白砂糖，完全溶解后制成加糖藍(lán)莓果汁，再采用142℃3秒超高溫瞬時(shí)滅菌機(jī)滅菌，冷卻至37℃后，按加糖濃縮葡萄果汁中固形物重量的0.03%添加復(fù)合益生菌發(fā)酵劑凍干粉，37℃厭氧發(fā)酵60小時(shí)，打入冷凍干燥機(jī)進(jìn)行冷凍干燥，獲得益生菌發(fā)酵藍(lán)莓果汁粉。
文檔編號(hào)A23L2/02GK102919922SQ201210441848
公開(kāi)日2013年2月13日 申請(qǐng)日期2012年11月8日 優(yōu)先權(quán)日2012年11月8日
發(fā)明者陳成, 常洪娟, 栗偉, 李娜, 孫東方, 顧利文, 劉文玉, 呂偉民, 趙姍姍 申請(qǐng)人:黑龍江省輕工科學(xué)研究院