專利名稱：一種利用乳酸鏈球菌發(fā)酵l-乳酸的方法
技術(shù)領(lǐng)域：
本發(fā)明屬于發(fā)酵技術(shù)領(lǐng)域，具體涉及一種利用乳酸鏈球菌發(fā)酵L-乳酸的方法。
背景技術(shù)：
乳酸，是目前世界上公認(rèn)的三大有機(jī)酸之一。乳酸及其衍生物，廣泛的應(yīng)用于食品、醫(yī)藥、飼料、化工等領(lǐng)域。乳酸的構(gòu)型分為Z-乳酸乳酸、乳酸3種，人體只能吸收Z-乳酸，過多地食用乳酸或乳酸可導(dǎo)致人體代謝功能的紊亂。Z-乳酸最具有應(yīng)用潛力的是生產(chǎn)聚乳酸(PLA)，制造生物可降解性塑料，其市場潛力巨大，發(fā)展前景十分誘人，因此國內(nèi)外對Z-乳酸的研究和生產(chǎn)十分重視。乳酸菌是公認(rèn)的營養(yǎng)要求苛刻的菌種，但培養(yǎng)基的復(fù)雜性提高了 Z-乳酸的生產(chǎn) 成本，約占總成本的30%左右。目前國內(nèi)細(xì)菌發(fā)酵生產(chǎn)乳酸基本以添加酵母粉、牛肉膏為主，其添加量占到生產(chǎn)成本的10%，甚至更高。因此尋找一種低成本且有效的營養(yǎng)物質(zhì)來提高底物的轉(zhuǎn)化率和乳酸產(chǎn)量成為目前的一個(gè)研究焦點(diǎn)。玉米漿含有多種氨基酸、維生素和金屬離子，且成本較低，能夠代替酵母粉、牛肉膏作為乳酸發(fā)酵的營養(yǎng)資源，從而降低生廣成本提聞生廣效益。

發(fā)明內(nèi)容
本發(fā)明提供了一種利用乳酸鏈球菌發(fā)酵L-乳酸的方法，本發(fā)明以乳酸鏈球菌為出發(fā)菌株，以玉米漿發(fā)酵生產(chǎn)L-乳酸進(jìn)行研究。本發(fā)明考察了種齡、不同碳源、不同氮源、不同PH值及玉米漿質(zhì)量濃度對L-乳酸發(fā)酵的影響。I.一種利用乳酸鏈球菌發(fā)酵L-乳酸的方法，其特征在于發(fā)酵時(shí)，發(fā)酵培養(yǎng)基中接入一定種齡的種子液，37°C于培養(yǎng)箱中培養(yǎng)72 ho2.步驟I所述的發(fā)酵培養(yǎng)基(g/L):葡萄糖80. O、蛋白胨10. O、酵母膏10. O、硫酸銨2. O、硫酸鎂O. 2、硫酸錳O. 05、乙酸鈉5. O、磷酸二氫鉀2. O、吐溫I. O mL、碳酸鈣
5.0，控制在一定的初始pH值。3.步驟I所述的種子液體培養(yǎng)基成分(g/L)及培養(yǎng)條件葡萄糖50. O,蛋白胨 10. O、牛肉浸膏 10. O、酵母浸粉 5. O、乙酸鈉 2. O、K2HPO4 2. O、MgSO4 · 7H20 0.58、MnSO4 · H2O O. 25、吐溫-80 I. O mL，37°C于培養(yǎng)箱中培養(yǎng) 24 h。4.步驟I所述的最佳種齡為15 h。5.步驟2所述的最佳碳源為葡萄糖。6. 步驟2所述的最佳氮源為玉米漿。7.步驟2所述的最佳pH值為6. O。8.步驟6所述的玉米衆(zhòng)的最佳濃度為45 g/L。本發(fā)明的有益效果在于本發(fā)明對乳酸鏈球菌發(fā)酵生產(chǎn)Z-乳酸進(jìn)行研究，以期為實(shí)際工業(yè)生產(chǎn)提供參考。


圖I菌體生長曲線。圖2玉米漿質(zhì)量濃度對Z-乳酸發(fā)酵的影響。
具體實(shí)施例方式下面的實(shí)施例對本發(fā)明作詳細(xì)說明，但對本發(fā)明沒有限制。本發(fā)明所用的菌株為乳酸鏈球菌，購買于ACCC，編號為ACCC11094。實(shí)施例I
本實(shí)施案例說明種子培養(yǎng)時(shí)間對發(fā)酵過程的影響，用接種環(huán)挑取冷藏斜面菌種接種到 裝有20 mL種子培養(yǎng)基的試管，37°C靜置培養(yǎng)24 h。菌體生長曲線見圖I。由圖I可知,菌種的對數(shù)生長期為6 16 h, 15 h時(shí)OD62c!達(dá)到最高，因此可確定最佳接種菌齡為15 ho實(shí)施例2
本實(shí)施案例說明不同碳源對發(fā)酵Z-乳酸的影響，以發(fā)酵培養(yǎng)基為基礎(chǔ)，碳源分別替換成葡萄糖、蔗糖、乳糖、糖蜜，其他條件不變，比較不同碳源對Z-乳酸產(chǎn)量的影響，其結(jié)果見表I。由表I可知，葡萄糖作為碳源時(shí)Z-乳酸產(chǎn)量最高為8. 24 g/L。表I不同碳源對發(fā)酵的影響
權(quán)利要求
1.一種利用乳酸鏈球菌發(fā)酵L-乳酸的方法，包括種子培養(yǎng)和發(fā)酵產(chǎn)酸步驟，其特征在于發(fā)酵時(shí)，發(fā)酵培養(yǎng)基中接入一定種齡的種子液，37°C于培養(yǎng)箱中培養(yǎng)72 ho
2.根據(jù)權(quán)利要求I所述的方法，其特征在于，發(fā)酵培養(yǎng)基葡萄糖80.O g/L、蛋白胨10.0g/L、酵母膏10. O g/L、硫酸銨2. O g/L、硫酸鎂O. 2 g/L、硫酸錳O. 05 g/L、乙酸鈉5. Og/L、磷酸二氫鉀2. O g/L、吐溫I. O mL、碳酸|丐5. O g/L,控制在一定的初始pH值。
3.根據(jù)權(quán)利要求I所述的方法，其特征在于，種子液體培養(yǎng)基成分及培養(yǎng)條件葡萄糖50.0g/L，蛋白胨 10.0 g/L、牛肉浸膏 10.0 g/L、酵母浸粉 5.0 g/L、乙酸鈉 2.0 g/L, K2HPO42.O g/L、MgSO4 · 7H20 O. 58 g/L、MnSO4 · H2O 0. 25 g/L、吐溫-80 I. 0 mL，37°C于培養(yǎng)箱中培養(yǎng)24 ho
4.根據(jù)權(quán)利要求I所述的方法，其特征在于，種齡為15h。
5.根據(jù)權(quán)利要求2所述的方法，其特征在于，碳源為葡萄糖。
6.根據(jù)權(quán)利要求2所述的方法，其特征在于，氮源為玉米漿。
7.根據(jù)權(quán)利要求6所述的方法，其特征在于，玉米漿的濃度為45g/L。
8.根據(jù)權(quán)利要求2所述的方法，其特征在于，pH值為6.O。
全文摘要
本發(fā)明提供了一種利用乳酸鏈球菌發(fā)酵L-乳酸的方法，本發(fā)明以乳酸鏈球菌為出發(fā)菌株，以玉米漿發(fā)酵生產(chǎn)L-乳酸進(jìn)行研究。本發(fā)明考察了種齡、不同碳源、不同氮源、不同pH值及玉米漿質(zhì)量濃度對L-乳酸發(fā)酵的影響。
文檔編號C12R1/46GK102864186SQ201210311909
公開日2013年1月9日 申請日期2012年8月29日 優(yōu)先權(quán)日2012年8月29日
發(fā)明者金雅新 申請人:太倉市茂通化建有限公司