專利名稱：一種羊肚菌多糖的制備方法
技術(shù)領(lǐng)域：
本發(fā)明屬于食用菌資源開發(fā)技術(shù)領(lǐng)域，具體地說是從液體發(fā)酵獲得的羊肚菌菌絲體中提取羊肚菌多糖的方法。
背景技術(shù)：
羊肚菌的營養(yǎng)相當(dāng)豐富，據(jù)測定，羊肚菌含粗蛋白20%、粗脂肪26%、碳水化合物38. 1%，還含有多種氨基酸，特別是谷氨酸含量高達(dá)I. 76 %。因此，被認(rèn)為是“十分好的蛋白質(zhì)來源”，并有“素中之暈”的美稱。人體中的蛋白質(zhì)是由2 0種氨基酸搭配而組成的，而羊肚菌就含有I 8種，其中8種氨基酸是人體不能制造的，但在人體營養(yǎng)上顯得格外重要，所以被稱之為“必需氨基酸”。另外，據(jù)測定羊肚菌至少含有8種維生素維生素B工、維生素B
2、維生素B 12、煙酸、泛酸、吡卩歲醇、生物素、葉酸等。羊肚菌的營養(yǎng)成份，可與牛乳、肉和魚粉相當(dāng)。因此，國際上常稱它為“健康食品”之一。羊肚菌除了味道鮮美、營養(yǎng)豐富之外，還具有補(bǔ)腎、壯陽、補(bǔ)腦、提神的功能，主治腎虧損、陽萎不舉、性欲冷淡，對頭暈失眠、腸胃炎癥、脾胃虛弱、消化不良、飲食不振有良好的治療作用，同時也可防癌、抗癌、預(yù)防感冒，增強(qiáng)人體免疫力的效果，在醫(yī)學(xué)上有重要的價值。羊肚菌的研究歷史已將近100年，內(nèi)容較多，它的人工馴化栽培一直是國內(nèi)外菌物學(xué)家致力研究探索的課題之一。近幾年，國內(nèi)對羊肚菌的研究也有多篇報道，主要限于資源考察、菌種分離鑒定及菌核發(fā)生條件的試驗等初級工作。國內(nèi)外雖有報道稱已實現(xiàn)羊肚菌的人工栽培，但目前人工栽培技術(shù)仍未成熟，迄今為止未見商品化人工栽培羊肚菌成功的報道。在羊肚菌的人工栽培過程中，仍有一些技術(shù)難題沒有徹底解決。由于人工培養(yǎng)羊肚菌的菌絲體相對容易，并且菌絲體和子實體的營養(yǎng)成分是十分接近的，所以可以利用羊肚菌菌絲體提取羊肚菌的主要功效成分——羊肚菌多糖，實現(xiàn)羊肚菌資源的可持續(xù)利用。

發(fā)明內(nèi)容
本發(fā)明的目的在于針對野生羊肚菌資源不足、采集困難的現(xiàn)狀，提供一種低成本、高質(zhì)量的羊肚菌多糖的制備方法。本發(fā)明的目的是這樣實現(xiàn)的稱取黃豆芽200克、切成5 —10毫米厚薄片的蘋果100克，加1500毫升水煮沸30分鐘，用紗布過濾，在濾液中加入白砂糖40克、蛋白胨2克、磷酸二氫鉀2克、硫酸鎂I克，PH自然，用水定容至2000毫升。攪拌均勻，121°C滅菌30分鐘，冷卻至20°C，接入粗柄羊肚菌As5. 382斜面種子，15—20°C，旋轉(zhuǎn)搖床150rpm，培養(yǎng)7天。培養(yǎng)結(jié)束后過濾發(fā)酵液得羊肚菌菌絲體，然后將羊肚菌菌絲體在50— 60°C條件下干燥至含水10%以下，即得羊肚菌干菌絲體。將羊肚菌干菌絲體粉碎至20目，加入20倍水，1%的纖維素酶(10000u/g)保持溫度50— 55 V，反應(yīng)時間為40— 50 min水解菌絲體細(xì)胞壁，然后提溫到85— 90°C滅酶并保持90min浸提羊肚菌多糖，然后降溫到65°C，用0.3% — 0.5%的活性炭保溫65 °C脫色40—50分鐘，離心除去沉淀，上清液中加入95%乙醇，使乙醇終體積分?jǐn)?shù)為75%，離心取沉淀，在50— 60°C條件下干燥至含水10%以下，SP得羊肚菌多糖粗品。(四)、具體實施方案
稱取黃豆芽200克、切成5 —10毫米厚薄片的蘋果100克，加1500毫升水煮沸30分鐘，用紗布過濾，在濾液中加入白砂糖40克、蛋白胨2克、磷酸二氫鉀2克、硫酸鎂I克，PH自然，用水定容至2000毫升。攪拌均勻，121°C滅菌30分鐘，冷卻至20°C，接入粗柄羊肚菌As5. 382斜面種子，180C，旋轉(zhuǎn)搖床150rpm，培養(yǎng)7天。培養(yǎng)結(jié)束后過濾發(fā)酵液得羊肚菌菌絲體，然后將羊肚菌菌絲體在55°C條件下干燥至含水10%以下，即得羊肚菌干菌絲體。將羊肚菌干菌絲體粉碎至20目，稱取羊肚菌菌絲體干粉10克，加入200ml水，0. Ig的纖維素酶(10000u/g)保持溫度55 0C ,反應(yīng)時間為45 min，然后提溫到90°C滅酶并保持90min浸提羊肚菌多糖，然后降溫到65°C，加0. Sg的活性炭保溫65 °C脫色45分鐘，離心除去
沉淀，上清液中加入95%乙醇，使乙醇終體積分?jǐn)?shù)為75%，離心取沉淀，在55°C條件下干燥至含水10%以下，即得羊肚菌多糖粗品。
權(quán)利要求
1.一種羊肚菌多糖的制備方法，其特征是稱取黃豆芽200克、切成5-10毫米厚薄片的蘋果100克，加1500毫升水煮沸30分鐘，用紗布過濾，在濾液中加入白砂糖40克、蛋白胨2克、磷酸二氫鉀2克、硫酸鎂I克，PH自然，用水定容至2000毫升。攪拌均勻，121°C滅菌30分鐘，冷卻至20°C，接入粗柄羊肚菌As5. 382斜面種子，15-20°C，旋轉(zhuǎn)搖床150rpm，培養(yǎng)7天。培養(yǎng)結(jié)束后過濾發(fā)酵液得羊肚菌菌絲體，然后將羊肚菌菌絲體在50-60°C條件下干燥至含水10%以下，即得羊肚菌干菌絲體。將羊肚菌干菌絲體粉碎至20目，加入20倍水，I %的纖維素酶(10000u/g)保持溫度50-55°C，反應(yīng)時間為40-50min水解菌絲體細(xì)胞壁，然后提溫到85-900C滅酶并保持90min浸提羊肚菌多糖，然后降溫到65°C，用0. 3 % -0. 5 %的活性炭保溫65°C脫色40-50分鐘，離心除去沉淀，上清液中加入95%乙醇，使乙醇終體積分?jǐn)?shù)為75%，離心取沉淀，在50-60°C條件下干燥至含水10%以下，即得羊肚菌多糖粗品。
2.根據(jù)權(quán)利要求I所述的一種羊肚菌多糖的制備方法，其特征是將羊肚菌干菌絲體粉碎至20目，加入20倍水，I %的纖維素酶(10000u/g)保持溫度50-55°C，反應(yīng)時間為40-50min水解菌絲體細(xì)胞壁。
3.根據(jù)權(quán)利要求I所述的一種羊肚菌多糖的制備方法，其特征是水解細(xì)胞壁后，提溫到85-90°C滅酶并保持90min浸提羊肚菌多糖。
4.根據(jù)權(quán)利要求I所述的一種羊肚菌多糖的制備方法，其特征是水浸提后的溶液需用0. 3-0. 5%活性炭保溫65°C脫色40-50分鐘。
5.根據(jù)權(quán)利要求I所述的一種羊肚菌多糖的制備方法，其特征是脫色后的水溶液離心除去沉淀，上清液中加入95%乙醇，使乙醇終體積分?jǐn)?shù)為75%，離心取沉淀。
6.根據(jù)權(quán)利要求I所述的一種羊肚菌多糖的制備方法，其特征是醇沉后的離心沉淀，在50-60°C條件下干燥至含水10%以下，即為羊肚菌多糖粗品。
全文摘要
一種羊肚菌多糖的制備方法屬于食用菌資源開發(fā)技術(shù)領(lǐng)域，具體地說是從液體發(fā)酵獲得的羊肚菌菌絲體中提取羊肚菌多糖的方法。配制羊肚菌液體培養(yǎng)基，121℃滅菌30分鐘，冷卻至20℃，接入粗柄羊肚菌As5.382斜面種子，15—20℃，旋轉(zhuǎn)搖床150rpm,培養(yǎng)7天。培養(yǎng)結(jié)束后過濾發(fā)酵液得羊肚菌菌絲體，然后將羊肚菌菌絲體在50—60℃條件下干燥至含水10%以下并粉碎至20目,加入20倍水,1%的纖維素酶(10000u/g)保持溫度50—55℃,反應(yīng)時間為40—50min，然后提溫到85—90℃滅酶并保持90min浸提羊肚菌多糖,然后用活性炭脫色、離心除去沉淀,上清液中加入95%乙醇、離心取沉淀，將沉淀物干燥至含水10%以下，即得羊肚菌多糖粗品。
文檔編號C12R1/645GK102808009SQ201110143720
公開日2012年12月5日 申請日期2011年5月31日 優(yōu)先權(quán)日2011年5月31日
發(fā)明者呂偉民, 宋殿峰, 張勁松 申請人:黑龍江省麒麟工貿(mào)公司