專利名稱：：合成油和植物油基潤滑油產(chǎn)品的生物降解測試方法合成油和植物油基潤滑油產(chǎn)品的生物降解測試方法
技術(shù)領(lǐng)域：
：本發(fā)明涉及生物降解潤滑油的評價(jià)方法，特別是一種合成油和植物油基潤滑油產(chǎn)品的生物降解測試方法。
背景技術(shù)：
：目前，世界上許多國家都已經(jīng)開始了生物降解性潤滑油的研制和使用，因此同時(shí)也就會(huì)有相應(yīng)的生物降解性能標(biāo)準(zhǔn)的建立，各國的潤滑油生物降解能力標(biāo)準(zhǔn)必須按照各國的社會(huì)現(xiàn)狀而定。測定潤滑油產(chǎn)品的生物降解方法主要有一是通過測定氧的消耗和二氧化碳的生成，來評定生物降解率；二是通過測定潤滑油經(jīng)過微生物培養(yǎng)過后的殘留量，來評定其生物降解率。這兩個(gè)方法是目前應(yīng)用最多的試驗(yàn)方法原理。根據(jù)這兩種方法，分別制定了應(yīng)用比較廣泛的OECD301B和CECL-33-A-93法。OECD301B方法操作繁瑣，將會(huì)導(dǎo)致在實(shí)驗(yàn)過程中的人為誤差影響大，影響試驗(yàn)結(jié)果的重復(fù)性和再現(xiàn)性，但是實(shí)驗(yàn)結(jié)果能切實(shí)反應(yīng)試驗(yàn)樣品的生物降解要求，最終產(chǎn)物為二氧化碳，對環(huán)境沒有二次污染，這就造成對試驗(yàn)樣品要求的苛刻；CECL-33-A-93方法操作簡便，采用紅外光譜法測定潤滑油在經(jīng)過培養(yǎng)過后的殘留量，該方法的可靠性、重復(fù)性和再現(xiàn)性相比較其他方法要好，因而得以普遍接受和使用。該方法通常適用于液壓油及低粘度潤滑油的生物降解評定試驗(yàn)，對于其他粘度較高的潤滑油來說，由于在水質(zhì)液相中的影響，其培養(yǎng)過程中的油水分散性能下降，后續(xù)培養(yǎng)液處理過程中油水難于分離等，都會(huì)導(dǎo)致試驗(yàn)結(jié)果不穩(wěn)定，誤差較大，有時(shí)可高達(dá)60%，甚至是完全失敗。
發(fā)明內(nèi)容本發(fā)明的目的在于提供一種合成油和植物油基潤滑油產(chǎn)品的生物降解測試方法，可以克服現(xiàn)有技術(shù)的缺陷。根據(jù)合成油和植物油基潤滑油配方的特定的組成部分能被微生物利用這一特性，通過采集獲得的活性污泥，經(jīng)過馴化后接入到合成油和植物油基潤滑油降解培養(yǎng)基中，經(jīng)過培養(yǎng)，測定降解培養(yǎng)基中的微生物菌液生物量和液相培養(yǎng)基中的潤滑油有機(jī)物殘留量作為評定合成油和植物油基潤滑油生物降解率的評定方法和標(biāo)準(zhǔn)。本發(fā)明操作簡便，數(shù)據(jù)再現(xiàn)性和重復(fù)性穩(wěn)定可靠，成本低廉，適用于各種規(guī)格和粘度級別的可生物降解潤滑油。具有廣泛應(yīng)用前景。本發(fā)明提供的合成油和植物油基潤滑油產(chǎn)品的生物降解測試方法包括的步驟1)目的菌種的馴化采集來自污水處理廠的活性污泥，經(jīng)過2448小時(shí)曝氣處理后，溶解于無菌水中，攪拌，得到菌懸液，吸取菌懸液于液體馴化培養(yǎng)基中，置于2628t:恒溫箱中于180200r/min下避光振蕩培養(yǎng)35天，待培養(yǎng)基變混濁后吸取該菌液反復(fù)接種于相同的馴化培養(yǎng)基中，每次接種量為5mL/100mL培養(yǎng)基。按照上述培養(yǎng)條件進(jìn)行培養(yǎng)。馴化后的優(yōu)勢菌為假單胞菌屬(Pseudomonas)、梭狀芽孢桿菌屬(Clostridium)、分枝桿菌屬(Mycobacterium)等好氣異養(yǎng)型細(xì)菌。馴化培養(yǎng)基KH2P043.4g;Na2HP041.5g;(NH4)2S044.0g;MgS040.7g;酵母粉40.Olg;蓖麻基潤滑油2g;自來水lOOOmL;調(diào)節(jié)pH為7.2-7.62)種子培養(yǎng)生長曲線的確定將馴化后生長比較旺盛的菌種，采用可見分光光度計(jì)在660nm波長下測定混合菌液OD(吸光度)值，繪制生物降解混合菌液的生長曲線，選擇對數(shù)生長期活躍的新生代菌液接種于降解培養(yǎng)基中的時(shí)間。種子培養(yǎng)基蛋白胨1.4質(zhì)量X，NaCl0.6質(zhì)量％，葡萄糖0.3質(zhì)量％，牛肉膏0.5質(zhì)量％，KH2P040.5質(zhì)量％，K2HP040.4質(zhì)量％;培養(yǎng)溫度為37"，培養(yǎng)基pH值為7.5。3)潤滑油生物降解試驗(yàn)根據(jù)種子培養(yǎng)生長曲線選擇生長旺盛的菌液進(jìn)行潤滑油生物降解試驗(yàn)，從種子培養(yǎng)基中吸取混合菌液，接入到準(zhǔn)備好的需要添加菌液的潤滑油生物降解培養(yǎng)基中，置于37t:，轉(zhuǎn)速為200r/min的恒溫振蕩器中，暗室內(nèi)進(jìn)行生物降解培養(yǎng)7天。生物降解試驗(yàn)包括(中性瓶)100mL礦物基營養(yǎng)液+lmL種子菌液；(測試瓶)100mL礦物基營養(yǎng)液+lmL種子菌液+2g合成油和植物油基潤滑油；(參比測試瓶)lOOmL礦物基營養(yǎng)液+lmL種子菌液+2g參比油；(毒化瓶)lOOmL礦物基營養(yǎng)液+2g合成油植物油基潤滑油；(參比毒化瓶)lOOmL礦物基營養(yǎng)液+2g參比油。參比油為降解率達(dá)到96%左右的蓖麻油(文獻(xiàn)報(bào)道)。生物降解培養(yǎng)基礦物營養(yǎng)液:KH2P043.4g;Na2HP041.5g;(NH4)2S044.Og;MgS040.7g;酵母粉O.Olg;自來水lOOOmL;調(diào)節(jié)pH為7.2_7.6;參比油可以選擇文獻(xiàn)中已經(jīng)報(bào)道過的生物降解率較高的植物油。4)樣品預(yù)處理及檢測分析接入混合菌液的生物培養(yǎng)基，在經(jīng)過7天培養(yǎng)后，用質(zhì)量分?jǐn)?shù)為1%鹽酸水溶液和20gNaCl溶解，采用超聲波細(xì)胞破碎儀將培養(yǎng)液進(jìn)行破碎；以TOC為檢測指標(biāo)，對預(yù)處理后的樣品分別進(jìn)行TC(總碳)和IC(無機(jī)碳)的測定，依據(jù)TOC(總有機(jī)碳)計(jì)算公式(TOC=TC-IC)求得TOC值。根據(jù)培養(yǎng)前后TOC值的變化情況，求得待測樣品和參比樣品的TOC降解率，分析樣品的生物可降解性。超聲波破碎條件(采用間歇的方式)200W，2min，工作2s，停止ls。該步驟結(jié)束后，超聲波可使容器中的物質(zhì)變熱，此時(shí)的溫度要保持在2025t:的范圍內(nèi)；5)生物降解率測定用顯微鏡觀察水質(zhì)潤滑油生物降解培養(yǎng)基中的微生物菌群生物量變化率，可作為評定該潤滑油被微生物利用的一個(gè)定性指標(biāo)。采用總有機(jī)碳檢測方法，檢測水質(zhì)培養(yǎng)基中的有機(jī)物變化率作為其生物降解的定量指標(biāo)，計(jì)算公式如下生物降解率(%)=(尸-x歸P:毒化瓶中殘余油含量，％(平均值)T:測試瓶中殘余油含量，％(平均值)根據(jù)潤滑油在液相水質(zhì)中的消耗量和微生物菌群在培養(yǎng)過程中的增加量來共同評定潤滑油的生物降解性能。該方法在技術(shù)上有以下的改進(jìn)減少了水質(zhì)有機(jī)物生物降解培養(yǎng)中對潤滑油粘度的限制要求；改良了培養(yǎng)基中對礦物基營養(yǎng)物質(zhì)的苛求，采用普通營5養(yǎng)物質(zhì)既可滿足生物降解培養(yǎng)試驗(yàn)；對于潤滑油的生物降解率，從另外一個(gè)層面上進(jìn)行了詮釋，水質(zhì)潤滑油培養(yǎng)基經(jīng)過微生物培養(yǎng)后，經(jīng)超聲波細(xì)胞破碎后，使微生物細(xì)胞內(nèi)容物釋放，然后采用總有機(jī)碳分析法檢測水質(zhì)溶液中的有機(jī)物殘留，損耗的潤滑油有機(jī)物則生成二氧化碳，以此來作為合成油和植物油基潤滑油的生物降解率測定結(jié)果。本發(fā)明是利用自然界中的微生物降解潤滑油產(chǎn)品的一種生物學(xué)技術(shù)。該方法以合成油和植物油基潤滑油產(chǎn)品為唯一碳源，配以足夠的氮源和微生物生長必需的其他營養(yǎng)成分，制備成水基溶液培養(yǎng)基，添加一定生物活性的自然界微生物菌種，在恒定的溫度和通氧條件下，經(jīng)過一段時(shí)間的培養(yǎng)后，水基溶液培養(yǎng)基中的潤滑油產(chǎn)品被微生物消耗利用，從而達(dá)到降解的目的。其中潤滑油在水質(zhì)中的含量測定方法，采用精確度較高的總有機(jī)碳檢測方法。該方法已經(jīng)應(yīng)用到蓖麻基全合成高性能潤滑油產(chǎn)品的生物降解測試試驗(yàn)中，并以文獻(xiàn)報(bào)道中生物降解率在96%左右的蓖麻油作為參比油，測得的蓖麻油生物降解率為97%，蓖麻基全合成高性能潤滑油的生物降解率達(dá)到了85%。本發(fā)明是一種操作簡便、數(shù)據(jù)再現(xiàn)性和重復(fù)性穩(wěn)定的合成油和植物基潤滑油生物降解評定方法，適用于各種規(guī)格和粘度級別的可生物降解潤滑油。操作簡便，成本低廉，具有廣泛應(yīng)用前景。圖1混合菌液的生長曲線。具體實(shí)施方式—、培養(yǎng)基配制馴化培養(yǎng)基KH2P043.4g;Na2HP041.5g;(NH4)2S044.0g;MgS040.7g;酵母粉0.Olg;蓖麻基潤滑油2g;自來水1000mL;調(diào)節(jié)pH為7.2-7.6種子培養(yǎng)基蛋白胨1.4%，NaCl0.6%，葡萄糖0.3%，牛肉膏0.5%，KH2P040.5%，K2HP040.4%;培養(yǎng)溫度為37t:，培養(yǎng)基pH值為7.5。降解培養(yǎng)基礦物營養(yǎng)液KH^043.4g;Na2HP041.5g;(NH4)2S044.0g;MgS040.7g;酵母粉0.Olg;自來水lOOOmL;調(diào)節(jié)pH為7.2-7.6。二、土壤采集及降解菌馴化1)采集土壤的要求采集來自曝氣池中的活性污泥，采樣深度1530cm即可；采集的器具為經(jīng)過消毒后的土壤采集器和塑料封口袋。2)土壤與處理土壤采集后，經(jīng)過24小時(shí)曝氣處理后，方可進(jìn)行篩菌試驗(yàn)。將從活性污泥廠不同方位采集的土壤樣品每份稱取5.0g至45mL無菌水中(內(nèi)裝玻璃珠若干)，充分振蕩10min(120r/min)，然后向250mL三角瓶中吸取5mL菌懸液于100mL液體馴化培養(yǎng)基中，置于2628t:恒溫箱中于180200r/min下避光振蕩培養(yǎng)35天，待培養(yǎng)基變混濁后吸取該菌液反復(fù)接種于成分、濃度都相同的馴化培養(yǎng)基中，每次接種量為5mL/100mL培養(yǎng)基。仍按照上述培養(yǎng)條件進(jìn)行培養(yǎng)。馴化后的優(yōu)勢菌為假單胞菌屬(Pseudomonas)、梭狀芽孢桿菌屬(Clostridium)、分枝桿菌屬(Mycobacterium)等好氣異養(yǎng)型細(xì)菌，總活菌濃度為1.0X1051.0X106個(gè)/mL。三、種子培養(yǎng)1)種子培養(yǎng)生長曲線的確定將馴化后生長比較旺盛的上述菌液，采用可見分光光度計(jì)在660nm波長下測定混合菌液0D(吸光度)值，繪制生物降解混合菌液的生長曲線，選擇其最佳接種時(shí)間。2)種子擴(kuò)大培養(yǎng)將經(jīng)過馴化后的微生物混合菌液，在一定的溫度條件、通氧情況下，培養(yǎng)到其生長穩(wěn)定的階段，作為種子菌液接入到潤滑油降解培養(yǎng)基中。四、生物降解培養(yǎng)1)培養(yǎng)瓶的準(zhǔn)備(中性瓶)100mL礦物基營養(yǎng)液+lmL種子菌液；(測試瓶)lOOmL礦物基營養(yǎng)液+lmL種子菌液+2g合成油和植物基潤滑油；(參比測試瓶)lOOmL礦物基營養(yǎng)液+lmL種子菌液+2g參比油；(毒化瓶)lOOmL礦物基營養(yǎng)液+2g合成油植物基潤滑油；(參比毒化瓶)100mL礦物基營養(yǎng)液+2g參比油。(注參比油可以選擇文獻(xiàn)中已經(jīng)報(bào)道過的生物降解率較高的植物油如蓖麻油，它的生物降解率為96%)。2)培養(yǎng)方式根據(jù)種子培養(yǎng)生長曲線選擇生長旺盛的菌液進(jìn)行潤滑油的生物降解試驗(yàn)，從種子培養(yǎng)基中吸取lmL混合菌液，接入到上述準(zhǔn)備好的需要添加菌液的錐形瓶中，置于37°C，轉(zhuǎn)速為200r/min的恒溫振蕩器中，暗室培養(yǎng)7天。表1生物降解行試驗(yàn)所需燒瓶數(shù)量及分配培養(yǎng)期每種待測油每種待測油每種參比油每種參比油中性瓶(天)的測試瓶的毒化瓶的測試瓶的毒化瓶0332213232注"O天"燒瓶應(yīng)該在試驗(yàn)開始后再準(zhǔn)備，并且馬上對其進(jìn)行萃取五、培養(yǎng)液處理及總有機(jī)碳檢測方法1)破乳和破細(xì)胞壁培養(yǎng)期結(jié)束后，在各個(gè)錐形瓶中加入約lmL鹽酸水溶液和20gNaCl，NaCl通過搖動(dòng)而溶解，待完全溶解后，采用超聲波細(xì)胞破碎儀將培養(yǎng)基中的微生物細(xì)胞壁破碎，從而使放出內(nèi)容物，另一方面也能達(dá)到進(jìn)一步破乳的目的。超聲波破碎條件(采用間歇的方式)200W，2min，工作2s，停止ls。該步驟結(jié)束后，超聲波可使容器中的物質(zhì)變熱，此時(shí)的溫度要保持在2025°C的范圍內(nèi)，如果過熱，可以放在冷水浴中進(jìn)行。每瓶溶液超聲波破碎結(jié)束后，用蒸餾水將變幅桿上殘留的液體沖洗回收入錐形瓶中，方可進(jìn)入下一個(gè)樣品的試驗(yàn)。2)總有機(jī)碳檢測本實(shí)驗(yàn)以TOC含量的變化來表征潤滑油的變化，即以TOC為檢測指標(biāo)，對待測樣品中的有機(jī)物含量變化分析采用TOC法。對預(yù)處理后的樣品分別進(jìn)行TC(總碳)和IC(無機(jī)碳)的測定，依據(jù)TOC(總有機(jī)碳)計(jì)算公式(TOC=TC-IC)求得TOC值。根據(jù)培養(yǎng)前后TOC值的變化情況，求得待測樣品和參比樣品的TOC降解率，分析樣品的生物可降解性。六、生物降解率測定方法1)微生物菌群生物量用顯微鏡觀察水質(zhì)潤滑油生物降解培養(yǎng)基中的微生物菌群生物量變化率，可作為評定其潤滑油被微生物利用的一個(gè)定性指標(biāo)。2)生物降解率采用總有機(jī)碳分析方法，檢測水質(zhì)培養(yǎng)基中的有機(jī)物變化率作為其生物降解的定量指標(biāo)。計(jì)算公式如下生物降解率(0/0)=(尸-，腦P:毒化瓶中殘余油含量，％(平均值)[OO54]T:測試瓶中殘余油含量，％(平均值)。具體應(yīng)用實(shí)施例以蓖麻基潤滑油的生物降解測定為例，參比油選擇文獻(xiàn)(王昆，方建華，潤滑油生物降解快速測定方法的研究[J]，石油學(xué)報(bào)，2004，20(6))報(bào)道中報(bào)道的降解率達(dá)到96%的蓖麻油，按照上述操作方法—、篩選出的混合菌液進(jìn)行種子培養(yǎng)測定生長曲線，確定最佳接種期混合菌液的生長曲線，其結(jié)果如圖1所示。圖1混合菌液的生長曲線。由上圖生長曲線可以看出，混合菌液的延滯期比較短，在llh開始進(jìn)入穩(wěn)定期。另外，混合菌液的穩(wěn)定期時(shí)間長達(dá)llh，到培養(yǎng)23h后進(jìn)入衰亡期。二、蓖麻基潤滑油生物降解培養(yǎng)結(jié)束后錐形瓶中殘余物質(zhì)的總有機(jī)碳檢測值。三、生物降解率結(jié)果計(jì)算蓖麻油的生物降解率表1蓖麻油總有機(jī)碳數(shù)據(jù)(單位g/100ml)檢測瓶名稱總有機(jī)碳檢測數(shù)據(jù)o天培養(yǎng)1.0483601,0033601.044210中性瓶0.1766130,187793—21天測試瓶0,1994420.2107100.20261621天毒化瓶0.9261960,974818—中性瓶總有機(jī)碳平均值0.182203修正0天培養(yǎng)瓶總有機(jī)碳值0.866157、0.821157、0.862007;修正后平均值X=0.849774;標(biāo)準(zhǔn)偏差s=0.0203變化系數(shù)Cv=2.389%<5%;修正后的測試瓶和毒化瓶數(shù)據(jù)結(jié)果如下表表2修正后0天培養(yǎng)瓶、測試瓶和毒化瓶數(shù)據(jù)結(jié)果(單位g/100ml)<table>tableseeoriginaldocumentpage8</column></row><table>按照給方法要求變異相關(guān)系數(shù)0%<5%，測定的蓖麻油的生物降解率為97.14%。2、蓖麻基全合成潤滑油生物降解率表3潤滑油總有機(jī)碳數(shù)據(jù)(單位g/100ml)<table>tableseeoriginaldocumentpage9</column></row><table>中性瓶總有機(jī)碳平均值為0.182203;修正0天培養(yǎng)瓶總有機(jī)碳值0.620081、0.599222、0.584017;修正后平均值X=0.601107;標(biāo)準(zhǔn)偏差s=0.0148;變化系數(shù)Cv=2.459%<5%;修正后的測試瓶和毒化瓶數(shù)據(jù)結(jié)果如下表表4修正后0天培養(yǎng)瓶、測試瓶和毒化瓶數(shù)據(jù)結(jié)果(單位g/100ml)<table>tableseeoriginaldocumentpage9</column></row><table>按照給方法要求變異相關(guān)系數(shù)0%<5%，測定的潤滑油的生物降解率為85.49%。從上表數(shù)據(jù)中可以看出，采用該方法經(jīng)過6天培養(yǎng)，蓖麻油和蓖麻基全合成潤滑油的生物降解率分別達(dá)到了97.14%和85.49%，平行試驗(yàn)的變異相關(guān)系數(shù)在可信度范圍之內(nèi)。效果說明1、對馴化后的混合菌液進(jìn)行擴(kuò)大化種子培養(yǎng)，為增強(qiáng)菌液在降解培養(yǎng)基中的活性；2、通過對降解培養(yǎng)基的改良，降低了對培養(yǎng)基營養(yǎng)物質(zhì)的要求；3、在模擬自然環(huán)境條件下通過對降解培養(yǎng)基的培養(yǎng)條件優(yōu)化，提高了微生物降解植物基潤滑油的能力，而且相比較CEC的方法，縮短了降解時(shí)間，也簡化了培養(yǎng)前期的菌液平板計(jì)算方法，不僅能夠?qū)崿F(xiàn)操作的可重復(fù)性，也能大大提高生物降解效果；4、采用超聲波細(xì)胞破碎的方法，將微生物內(nèi)容物釋放，測定的微生物降解合成油和植物基潤滑油的能力為有效降解能力。權(quán)利要求一種合成油和植物油基潤滑油產(chǎn)品的生物降解測試方法，其特征在于它包括的步驟1)采集來自污水處理廠的活性污泥，經(jīng)過24-48小時(shí)曝氣處理后，溶解于無菌水中，攪拌，得到菌懸液，吸取該菌懸液于液體馴化培養(yǎng)基中，置于26～28℃恒溫箱中于180～200r/min下避光振蕩培養(yǎng)3～5天，待培養(yǎng)基變混濁后吸取該菌液反復(fù)接種于成分、濃度都相同的馴化培養(yǎng)基中，每次接種量為5mL/100mL培養(yǎng)基。仍按照上述培養(yǎng)條件進(jìn)行培養(yǎng)。馴化后的優(yōu)勢菌為假單胞菌屬(Pseudomonas)、梭狀芽孢桿菌屬(Clostridium)、分枝桿菌屬(Mycobacterium)等好氣異養(yǎng)型細(xì)菌，總活菌濃度為1.0×105～1.0×106個(gè)/mL。2)種子培養(yǎng)生長曲線的確定將馴化后生長比較旺盛的菌種于種子培養(yǎng)基中培養(yǎng)，培養(yǎng)溫度為37℃，采用可見分光光度計(jì)在660nm波長下測定混合菌液OD值，繪制生物降解混合菌液的生長曲線，選擇對數(shù)生長期活躍的新生代菌液接種于降解培養(yǎng)基中的時(shí)間；3)根據(jù)種子培養(yǎng)生長曲線選擇生長旺盛的菌液進(jìn)行潤滑油的生物降解試驗(yàn)，從種子培養(yǎng)基中吸取混合菌液，接入到準(zhǔn)備好的需要添加菌液的潤滑油生物降解培養(yǎng)基礦物營養(yǎng)液中，置于37℃，轉(zhuǎn)速為200r/min的恒溫振蕩器中，暗室內(nèi)進(jìn)行生物降解培養(yǎng)7天；生物降解試驗(yàn)包括中性瓶100mL礦物基營養(yǎng)液+1mL種子菌液；測試瓶100mL礦物基營養(yǎng)液+1mL種子菌液+2g合成油和植物基潤滑油；參比測試瓶100mL礦物基營養(yǎng)液+1mL種子菌液+2g參比油；毒化瓶100mL礦物基營養(yǎng)液+2g合成油植物基潤滑油；參比毒化瓶100mL礦物基營養(yǎng)液+2g參比油；4)接入混合菌液的生物培養(yǎng)基，在經(jīng)過7天培養(yǎng)后，用1％的鹽酸水溶液和20gNaCl溶解，采用超聲波細(xì)胞破碎儀將培養(yǎng)基中的微生物細(xì)胞壁破碎；對預(yù)處理后的樣品分別進(jìn)行TC(總碳)和IC(無機(jī)碳)的測定，依據(jù)TOC(總有機(jī)碳)計(jì)算公式(TOC＝TC-IC)求得TOC值。根據(jù)培養(yǎng)前后TOC值的變化情況，求得待測樣品和參比樣品的TOC降解率，分析樣品的生物可降解性。5)、生物降解率測定用顯微鏡觀察水質(zhì)潤滑油生物降解培養(yǎng)基中的微生物菌群生物量變化率，可作為評定其潤滑油被微生物利用的一個(gè)定性指標(biāo)；采用總有機(jī)碳分析方法，檢測水質(zhì)培養(yǎng)基中的有機(jī)物變化率作為其生物降解的定量指標(biāo)，計(jì)算公式如下P毒化瓶中殘余油含量，％(平均值)T測試瓶中殘余油含量，％(平均值)。F2009102452375C00011.tif2.根據(jù)權(quán)利要求1所述的方法，其特征在于所述的馴化培養(yǎng)基為KH2P043.4g;Na2HP041.5g;(NH4)2S044.0g;MgS040.7g;酵母粉0.Olg;蓖麻基潤滑油2g;自來水1000mL;pH為7.2-7.6。3.根據(jù)權(quán)利要求1所述的方法，其特征在于所述的種子培養(yǎng)基為蛋白胨1.4%，NaCl0.6%，葡萄糖0.3%，牛肉膏0.5%，KH2P040.5%，K2HP040.4%;pH值為7.5。4.根據(jù)權(quán)利要求1所述的方法，其特征在于所述的參比油為降解率達(dá)到96%的蓖麻油。5.根據(jù)權(quán)利要求l所述的方法，其特征在于所述的生物降解培養(yǎng)基礦物營養(yǎng)液為KH2P043.4g;Na2HP041.5g;(NH4)2S044.0g;MgS040.7g;酵母粉0.Olg;自來水lOOOmL調(diào)節(jié)pH為7.2-7.6。6.根據(jù)權(quán)利要求1所述的方法，其特征在于所述的超聲波破碎條件采用間歇的方式200W，2min，工作2s，停止ls，該步驟結(jié)束后，超聲波可使容器中的物質(zhì)變熱，此時(shí)的溫度要保持在2025t:的范圍內(nèi)。全文摘要本發(fā)明涉及一種合成油和植物油基潤滑油產(chǎn)品的生物降解測試方法。采集獲得的活性污泥，經(jīng)過馴化后接入到合成油和植物基潤滑油降解培養(yǎng)基中，經(jīng)過7天連續(xù)恒溫?fù)u床培養(yǎng)，測定降解培養(yǎng)基中的微生物菌液生物量和液相培養(yǎng)基中的潤滑油有機(jī)物殘留量作為評定合成油和植物基潤滑油生物降解率的評定方法和標(biāo)準(zhǔn)。本發(fā)明是一種操作簡便、數(shù)據(jù)再現(xiàn)性和重復(fù)性穩(wěn)定的合成油和植物基潤滑油生物降解評定方法，適用于各種規(guī)格和粘度級別的可生物降解潤滑油。該方法應(yīng)用到蓖麻基全合成高性能潤滑油產(chǎn)品的生物降解測試試驗(yàn)中，并以文獻(xiàn)報(bào)道中生物降解率在96％左右的蓖麻油作為參比油，測得的蓖麻油生物降解率為97％，蓖麻基全合成高性能潤滑油的生物降解率達(dá)到了85％。文檔編號C12Q1/02GK101748184SQ20091024523公開日2010年6月23日申請日期2009年12月31日優(yōu)先權(quán)日2009年12月31日發(fā)明者吳新世,孟祥云,張盈申請人:天津南開大學(xué)蓖麻工程科技有限公司