專利名稱：水果或蔬菜提取物的制備方法以及由該方法制備的提取物的制作方法
技術領域：
本發(fā)明涉及一種水果或蔬菜提取物，具體來說是一種提取物的制 備方法，該方法提取得到的提取物大多能保留原來水果、蔬菜所具有 的營養(yǎng)物質，根據(jù)其營養(yǎng)物質的效用，大多數(shù)水果、蔬菜提取物都可 以作為飲料來用，比如椰子提取物、香蕉提取物、木瓜提取物、蕃石 榴提取物等等，也可以作為保健品、藥品、日用品、食品添加劑、飼 料添加劑等原料。
背景技術：
水果、蔬菜主要含有多糖、淀粉、纖維素、半纖維素和果膠等。
蛋白質含量在1.0%左右，碳水化合物在8% 20%。含有豐富的胡 蘿卜素、維生素C和鈣、鋅、鐵、硒等人體所需的各種無機鹽和微量 元素，含有少量膳食纖維。水果和蔬菜所含的熱量很少，是纖維素和 維生素的主要食物來源；特別是維生素C和3胡蘿卜素(維生素A 原)。水果和蔬菜中富含纖維素(每100克中的含量約為10克和30 克)，這有利于腸運輸功能的正常運行。因此將會對預防結腸癌可能 起到一定作用。此外，水果和蔬菜提供給人體礦物鹽(鉀鹽、鈣質、 鎂質、磷、鐵質等)和其他微量營養(yǎng)元素，它們有利于水果和蔬菜發(fā) 揮抗氧化劑(polyph6nols、類蘇蘿卜素等)的功能。這些抗氧化劑物 質同樣也屬于維生素A、 C、 E，能夠捕捉到自由基(人體在遇到外界
侵擾、作出反應時，不斷產(chǎn)生的有毒物質)。這樣它們(抗氧化劑物質) 能夠延緩細胞的衰老、減少某些癌癥和心血管疾病的發(fā)病幾率。通常， 由于水果和蔬菜中富含鉀鹽，而含有的鈉鹽不多，因此它們也被列入 一些低鹽的飲食食譜中。
水果、蔬菜所含熱量并不高，大都屬于中等偏低的產(chǎn)熱量，屬于 現(xiàn)在人們所追求的綠色健康食品。但是水果、蔬菜有很多的營養(yǎng)成分 并不能直接或很難被人體吸收，而傳統(tǒng)的機械榨汁提取方法得到的提 取物則生物利用度偏低，所以有必要利用現(xiàn)代生物技術對水果、蔬菜 進行深加工，利用生物技術加工水果、蔬菜既能保持其綠色食品的原 生態(tài)，又能使水果、蔬菜的營養(yǎng)釋放出來被人體吸收。對水果、蔬菜 進行深加工也能解決水果、蔬菜運輸和儲存問題。
水果、蔬菜提取物大多能保留原來水果、蔬菜所具有的營養(yǎng)物質， 水果、蔬菜是我們日常所必須的，水果、蔬菜提取物能升級其營養(yǎng)價 值，根據(jù)其營養(yǎng)物質的效用，大多數(shù)水果、蔬菜提取物都可以作為飲 料原料來用，比如椰子提取物、香蕉提取物、木瓜提取物、蕃石榴提 取物等等，可以快速補充人體所需要的營養(yǎng)物質；而香菇提取物、黃 精提取物等則可以作為保健品和藥品，可以起到降血壓、降血脂、抗
癌、抗病毒、增強免疫活性等；多糖提取物還能作為伺料添加劑，可
以起到增強免疫活性等功效，非常適合現(xiàn)在的綠色養(yǎng)殖。

發(fā)明內容
本發(fā)明的目的就在于提供一種水果或蔬菜提取物的制備方法，這 種方法采用生物酶解進行提取，能夠將果蔬中含有的不易吸收的營養(yǎng)
成份轉化為小分子量易吸收的成份，因此這種提取物含有多糖、多肽、 水溶性淀粉、纖維素、豐富的維生素和礦物質及微量元素等活性物質。 本發(fā)明采用如下方案， 一種水果或蔬菜提取物的制備方法，依次 包括如下過程
(1) 取成熟的水果或蔬菜，洗凈、切片、加入水打漿，加熱至 60 100。C維持10 15分鐘，冷卻備用；
(2) 勻漿液溫度保持在45"士2。C，用酸調pH至3.0士0.2，加 入胃蛋白酶或果膠酶，攪勻后，維持pH至3.0土0.2，在酶解溫度為 45。C士2匸的條件下水解；
(3) 用堿將水解后的漿液調pH至9.5±0.2，加入胰酶，攪勻 后，維持pH至9. 5±0.2，在酶解溫度為45。C士2t:的條件水解，酶 解結束后加熱升溫進行酶滅活，降溫至室溫；
(4) 用酸調pH至7.0±0.2，進行固液分離，除去水果或蔬菜
殘渣，收集液體，備用；
(5) 將液體過DEAE層析柱進行吸附分離，用酸性磷酸鹽緩沖液
洗脫；
(6) 洗脫液用超濾膜進行超濾，進一步除去雜質，收集超濾后 的濾出液，即得水果或蔬菜提取物。
所述的調pH值用的堿可以為氫氧化鈉、氫氧化鈣、氫氧化鉀、
碳酸氫鈉或氨水。
所述的調pH值用的酸可以為鹽酸、磷酸、檸檬酸或硫酸。
用酶進行水解的過程，可以通過控制水解時間來掌握水解進程， 水解時間短，水解不充分造成收率低，但水解時間過程又會延長生產(chǎn) 周期，增加成本及增加受污染的機會。
一般步驟(2)中水解時間可
以為480±30分鐘。同樣，所述的步驟(3)中水解時間為180±30 分鐘。
所述步驟(3)中酶滅活溫度可以為IO(TC，此時保溫5 15分鐘。
所述的步驟(4)中固液分離過程可為先抽濾得上清液，殘渣 用離心機離心并收集上清液，合并抽濾和離心所得的上清液，再次進 行過濾，分離出清液。所述的磷酸鹽緩沖液為10 30mmol/L pH7. 0 士0.2磷酸鹽緩沖液。
所述的超濾采用分子截留為50 100KD的超濾膜。
本發(fā)明還提供了用上述方法制備的水果或蔬菜提取物，可以用于 飲料直接加調配加工后飲用，也可以作為保健品、藥品、日用品、食 品添加劑、飼料添加劑等原料。
本發(fā)明通過對水果、蔬菜進行雙酶水解，通過控制pH值和酶解 溫度、時間等酶解條件控制酶解程度，將水果、蔬菜的營養(yǎng)成分提取 出來并將不易吸收的大分子營養(yǎng)物質酶解為小分子易吸收的營養(yǎng)成 份，然后用DEAE層析柱吸附分離純化，用分子截留為50 100KD的 超濾膜進行超濾，可以分段收集得到小分子量多糖、多肽、水溶性淀 粉、纖維素、豐富的維生素和礦物質及微量元素等活性物質。這種方
法具有如下優(yōu)點
1、水果、蔬菜直接經(jīng)雙酶酶解等生產(chǎn)工藝提取水果、蔬菜提取
物，具安全無污染、快速、簡單等優(yōu)點。
2、 雙酶水解水果、蔬菜勻漿液，采用抽取、殘渣離心獲得上清
液，經(jīng)過濾、上EDAE層析柱吸附分離純化，超濾等生產(chǎn)工藝，水解 完全，可除去大分子雜質，得到營養(yǎng)豐富的提取液，其中含有多糖、 多肽、水溶性淀粉、纖維素、豐富的維生素和礦物質及微量元素等活 性物質。
3、 采用雙酶酶解，抽取、殘渣離心獲得上清液，經(jīng)過濾、上DEAE 層析柱吸附分離純化，超濾等生產(chǎn)工藝，優(yōu)點是收率高、生產(chǎn)成本低、 生產(chǎn)環(huán)境要求低，減少了產(chǎn)品受微生物污染、變質的機會。
4、 水果、蔬菜直接經(jīng)雙酶酶解等生產(chǎn)工藝提取水果、蔬菜提取 物，最大限度地將水果、蔬菜營養(yǎng)物質提取出來，所得的水果、蔬菜 提取物濃縮液藥用價值高、營養(yǎng)物質更豐富、更易被人體所吸收，更 易被市場和消費者所接受。
5、 可于用此方法去加工各種各樣的水果和蔬菜，而得到的提取 液的營養(yǎng)物質和水果、蔬菜原本所具有的營養(yǎng)沒有太大的區(qū)別。
具體實施例方式
下面結合具體實施例對本發(fā)明作進一步說明，以助于理解本發(fā)明 的內容。
實施例1 (香蕉提取物)
取20.0Kg成熟的水果、蔬菜(已去皮香蕉)，洗凈、切片，加 熱至95。C維持10 15分鐘。快速冷卻備用，加入水打漿，稱重得 60.0kg。待漿液降溫至45°C±2°C，用4.5%(4，下同)鹽酸調pH至
3.0±0.2，按每kg漿液加入10萬國際單位(比活力)胃蛋白酶的比
例，加入600萬國際單位(比活力)胃蛋白酶，攪勻后，維持pH3.0 ±0.2、 45。C士2。C的條件水解8小時。用18% (w%，下同)的NaOH 將胃蛋白酶水解漿液調pH至9. 5±0. 2,按每kg漿液加入4萬國際 單位(比活力)胰酶的比例，加入240萬國際單位(比活力)胰酶， 攪勻后，維持在pH9. 5±0.2、 45。C士2。C水解3.0小時，酶解結束后 加熱升溫至100。C，保溫10分鐘進行酶滅活，降溫至3(TC以下。用 4. 5。/。鹽酸調pH7.0士0. 2，抽濾得上清液35. Okg，殘渣用離心機離心， 收集上清液得3.5kg，合并上清液，共38.5kg，進行粗過濾，收集濾 出液得37.0kg。用注射用水將DEAE調成糊狀，采用淤漿式法裝柱， 裝柱壓力0. 5Mpa。裝柱后先用400腿ol/L pH7. 0磷酸鹽緩沖液清洗， 再用20腿ol/L pH7. 0磷酸鹽緩沖液平衡，將上述濾出液上DEAE層析 柱進行吸附，用20mmol/L pH7. 0磷酸鹽緩沖液洗脫。收集目標物得 39.0kg，用對分子截留為100K的濾膜進行超濾，收集濾出液得 36. Okg，即得香蕉提取物精制液。
取樣進行多糖含量測定、多糖分子量測定、多肽檢測及酸度等檢 測，備用。檢驗結果如下
1. 多糖鑒別苯酚一硫酸試劑反應(陽性)
2. 多糖含量26.68mg/ml (用苯酚一硫酸法測定)
3. 多糖分子量測定所得水果、蔬菜提取物的多糖分子量為
40865道爾頓(參考2005年藥典二部附錄V H)
4. 多肽鑒別取本品lml，加茚三酮試液數(shù)滴，加熱，顯紫色，
說明本品為含多肽溶液。
5. 多肽含量1.26mg/ml (福林酚法)
6. pH值為6.94(中國藥典2005年版二部附錄VI H)
實施例2 (南瓜提取物)
取20.0Kg成熟的水果、蔬菜(南瓜)，洗凈、切片，加熱至95 °C 10 15分鐘?？焖倮鋮s備用，加入一定量的水打漿，稱重得 60.0kg。待漿液降溫至45。C士2。C，用4. 5。/。鹽酸調pH至3.0士0. 2， 按每kg漿液加入10萬國際單位(比活力)胃蛋白酶的比例，加入 600萬國際單位(比活力)胃蛋白酶，攪勻后，維持pH3.0士0.2、 45 。C士2。C的條件水解8小時。用18%NaOH將胃蛋白酶水解漿液調pH 至9. 5±0. 2，按每kg漿液加入4萬國際單位(比活力)胰酶的比例， 加入240萬國際單位(比活力)胰酶，攪勻后，維持在pH9.5士0.2、 45。C士2。C水解3.0小時，酶解結束后加熱升溫至10(TC，保溫10分 鐘進行酶滅活，降溫至3(TC以下。用4.5%鹽酸調pH7.0士0.2，抽 濾得上清液35.0kg，殘渣用離心機離心，收集上清液得3.5kg，合并 上清液，共38.5kg，進行粗過濾，收集濾出液得37.0kg。用注射用 水將DEAE調成糊狀，采用淤漿式法裝柱，裝柱壓力O. 5Mpa。裝柱后 先用400mmol/L pH7. 0磷酸鹽緩沖液清洗，再用20mmol/L pH7. 0磷 酸鹽緩沖液平衡，將上述濾出液上DEAE層析柱進行吸附,用20ramol/L pH7.0磷酸鹽緩沖液洗脫。收集目標物得39.0kg，用對分子截留為 IOOK的濾膜進行超濾，收集濾出液得36.0kg，即得南瓜提取物精制 液。 取樣進行多糖含量測定、多糖分子量測定、多肽檢測及酸度等檢 測，備用。檢驗結果如下-
1. 多糖鑒別苯酚一硫酸試劑反應(陽性)
2. 多糖含量15.81mg/ml (用苯酚一硫酸法測定)
3. 多肽鑒別取本品lml，加茚三酮試液數(shù)滴，加熱，顯紫色，
說明本品為含多肽溶液。
4. 多糖分子量測定所得水果、蔬菜提取物的多糖分子量為9. 03 X10e道爾頓(參考2005年藥典二部附錄V H)
5. 多肽含量1. 12mg/ml (福林酚法)
6. pH值為7.02(中國藥典2005年版二部附錄VI H) 實施例3(香蕉飲品)
取實施例1中的香蕉提取物30.0Kg，加入適量的糖，再加入適 合的水使總重量達到300. OKg (此時糖度為6.7度)，充分攪拌，再 用20% (g/mL)的檸檬酸調節(jié)pH至5. 0±0. 02，罐入350mL的易拉罐 中，12rC 126匸高壓滅菌20分鐘，取出，降溫至室溫即為350mL 香蕉飲品的成品。取12罐樣品進行檢測，結果如下
1. 多糖鑒別苯酚一硫酸試劑反應(陽性)
2. 多糖含量2.52mg/ml (用苯酚一硫酸法測定)
4. 多肽鑒別取本品lml，加茚三酮試液數(shù)滴，加熱，顯紫色， 說明本品為含多肽溶液。
5. 多肽含量0. 12mg/ml (福林酚法)
6. pH值為5.01 (中國藥典2005年版二部附錄VI H)
7.檢驗報告
序號項目單位要 求檢測結 果單項判 定
組織形態(tài)-呈透明、澄清液體合格
色澤—無色或微黃色合格
1感官氣味、滋味-具有本品應有的氣 味和滋味，無異味合格合格
雜質-無肉眼可見外來雜 質合格
2凈含量mL/瓶標稱值345，允許 短缺量《10.4343短 缺量 0. 0合格
3可溶性固形物(折光計 法)%》3. 05. 4合格
4總酸(以檸檬酸計)g細ral《0. 20. 03合格
5總石申(以As計)mg/L《0. 20. 01合格
6錫'(Sn)mg/L《2002. 1合格
7鉛(以Pb計)mg/ L《0. 050. 004合格
8銅(以Cu計)mg/ L《5. 00. 01合格
9菌落總數(shù)cfu/亂《1000合格
10大腸菌群MPN/100mL《30合格
11霉菌cfu/tnL《100合格
12酵母菌cfu/raL《100合格
13致病菌(沙門氏菌、志賀 氏菌、金黃色葡萄球菌)—不得檢出0合格
檢測結果顯示香蕉飲品的各項指標均合格，其口感獨特，營養(yǎng)豐
富，是一種綠色健康飲品。
權利要求
1、一種水果或蔬菜提取物的制備方法，依次包括如下過程(1)取成熟的水果或蔬菜，洗凈、切片、加入水打漿后，加熱至60～100℃維持10～15分鐘，冷卻備用；(2)勻漿液溫度保持在45℃±2℃，用酸調pH至3.0±0.2，加入胃蛋白酶或果膠酶，攪勻后，維持pH至3.0±0.2，在酶解溫度為45℃±2℃的條件下水解；(3)用堿將水解后的漿液調pH至9.5±0.2，加入胰酶，攪勻后，維持pH至9.5±0.2，在酶解溫度為45℃±2℃的條件水解，酶解結束后加熱升溫進行酶滅活，降溫至室溫；(4)用酸調pH至7.0±0.2，進行固液分離，除去水果或蔬菜殘渣，收集液體，備用；(5)將液體過DEAE層析柱進行吸附分離，用酸性磷酸鹽緩沖液洗脫；(6)洗脫液用超濾膜進行超濾，進一步除去雜質，收集超濾后的濾出液，即得水果或蔬菜提取物。
2、 如權利要求1所述的水果或蔬菜提取物的制備方法，其特征 在于所述調pH值用的堿為氫氧化鈉、氫氧化鈣、氫氧化鉀、碳酸 氫鈉或氨水。
3、 如權利要求1所述的水果或蔬菜提取物的制備方法，其特征 在于所述調pH值用的酸為鹽酸、磷酸、檸檬酸或硫酸。
4、 如權利要求1所述的水果或蔬菜提取物的制備方法，其特征在于所述步驟(2)中水解時間為480士30分鐘。
5、 如權利要求1所述的水果或蔬菜提取物的制備方法，其特征 在于所述的步驟(3)中水解時間為180土30分鐘。
6、 如權利要求1所述的水果或蔬菜提取物的制備方法，其特征 在于所述步驟(3)中酶滅活溫度為IO(TC，保溫5 15分鐘。
7、 如權利要求1所述的水果或蔬菜提取物的制備方法，其特征在于所述的步驟(4)中固液分離過程為先抽濾得上清液，殘渣用離心機離心并收集上清液，合并抽濾和離心所得的上清液，再次進 行過濾，分離出清液。
8、 如權利要求1所述的水果或蔬菜提取物的制備方法，其特征 在于所述的磷酸鹽緩沖液為10 30mmol/L、 pH7. 0±0. 2磷酸鹽緩 沖液。
9、 如權利要求1所述的水果或蔬菜提取物的制備方法，其特征 在于所述超濾膜為分子截留為50 100KD的超濾膜。
10、 一種根據(jù)權利要求1至9中之一所述的制備方法提取得到的 水果或蔬菜提取物。
全文摘要
一種水果或蔬菜提取物的制備方法和制備的提取物，采用下述方法提取(1)將水果或蔬菜加水打漿后，加熱至60～100℃維持10～15分鐘；(2)勻漿液加入胃蛋白酶或果膠酶，在pH 3.0±0.2、溫度為45℃±2℃的條件下水解；(3)將水解后的漿液調pH至9.5±0.2，加入胰酶水解，酶解結束后進行酶滅活；(4)調pH至7.0±0.2，進行固液分離，除去水果或蔬菜殘渣，收集液體；(5)將液體過DEAE層析柱進行吸附分離，用酸性磷酸鹽緩沖液洗脫；(6)洗脫液用超濾膜進行超濾，收集超濾后的濾出液，即得水果或蔬菜提取物。這種提取方法簡單、快速、安全、無污染，而且收率高、生產(chǎn)成本低。適合大規(guī)模工業(yè)化生產(chǎn)。
文檔編號A23L1/30GK101347217SQ20081021438
公開日2009年1月21日 申請日期2008年9月5日 優(yōu)先權日2008年9月5日
發(fā)明者伍曾利, 吳家強, 王海生 申請人:伍曾利