專利名稱：：一種新組分酵母菌培養(yǎng)基的研制方法
技術(shù)領(lǐng)域：
：本發(fā)明涉及一人工配制的微生物培養(yǎng)基，尤其是能夠快速準(zhǔn)確的測(cè)定各類食品、飲料中的酵母菌數(shù)，而研制一種良好的酵母菌培養(yǎng)基。
背景技術(shù)：
：配養(yǎng)基是人工配制的適合微生物生長(zhǎng)繁殖或積累代謝產(chǎn)物的營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)，用以分離、培養(yǎng)、鑒定、保存各種微生物或積累其代謝產(chǎn)物。在自然界中，微生物種類繁多，營(yíng)養(yǎng)類型多樣，加之研究目的的不同，所以培養(yǎng)基的配制方法和原理也就不同。一般情況下，不同種類的培養(yǎng)基中，都會(huì)含有水分、碳源、能源、無(wú)機(jī)鹽、生長(zhǎng)因子等，只是相對(duì)含量會(huì)有差異。不同微生物對(duì)PH的要求和滲透壓也不同。
發(fā)明內(nèi)容本發(fā)明的目的是公開了一種能夠快速準(zhǔn)確的測(cè)定各類食品、飲料中的酵母菌數(shù)，而研制一種良好的酵母菌培養(yǎng)基。本發(fā)明的目的是這樣實(shí)現(xiàn)的一種新組分酵母菌培養(yǎng)基的研制方法，其特征在于其重量配比為麥芽汁900--1100ml、酵母浸出粉5--8g、大豆蛋白胨11一13g、葡萄糖4—7g、可溶性淀粉7--12g、檸檬酸鐵0.5—1.5g、乙酸鋅0.3—0.8g、乙酸鈉0.3—0.8g、瓊脂粉18—22g。最佳重量配比為麥芽汁1000ml、酵母浸出粉7g、大豆蛋白胨12.5g、葡萄糖6g、可溶性淀粉10g、檸檬酸鐵1g、乙酸鋅0.5g、乙酸鈉0.5g、瓊脂粉20g。本發(fā)明的組分中麥芽汁本身就是酵母菌的天然培養(yǎng)基，含有較高的碳水化合物，其巿售替代產(chǎn)品有麥芽膏、麥芽粉、麥芽抽提物。酵母浸出粉是用酵母細(xì)胞水解制作的，它含有豐富的B族維生素，可想而知它最有利于酵母菌的生長(zhǎng)繁殖，其巿售替代產(chǎn)品有酵母膏；大豆蛋白胨含有蛋白質(zhì)、脂肪和促進(jìn)酵母菌生長(zhǎng)繁殖的大豆異黃酮；可溶性淀粉富含碳水化合物等。本發(fā)明的主要優(yōu)點(diǎn)是各元素易得、價(jià)格低、營(yíng)養(yǎng)豐富、易被酵母菌利用，所以酵母菌生長(zhǎng)繁殖迅速。具體實(shí)施例方式一種新組分酵母菌培養(yǎng)基的研制方法，其特征在于其重量配比為麥芽汁900—1100ml、酵母浸出粉5—8g、大豆蛋白胨11一13g、葡萄糖4一7g、可溶性淀粉7—12g、檸檬酸鐵0.5一1.5g、乙酸鋅0.3--0.8g、乙酸鈉0.3--0.8g、瓊脂粉18—22g。最佳重量配比為麥芽汁1000ml、酵母浸出粉7g、大豆蛋白胨12.5g、葡萄糖6g、可溶性淀粉10g、檸檬酸鐵1g、乙酸鋅0.5g、乙酸鈉0.5g、瓊脂粉20g。實(shí)施例菌種i式驗(yàn)用啤酒酵母菌(SaccharmycesCerevisiae)和假絲酵母菌(CandidaSpp)由山東大學(xué)生命科學(xué)學(xué)院菌種室提供；白假絲酵母菌(Candidaalbicans)是實(shí)驗(yàn)室自己分離的。試劑和培養(yǎng)基麥芽汁由東營(yíng)市信義集團(tuán)公司啤酒廠提供；大豆蛋白胨(BR)、酵母浸出粉(BR)系北京雙旋微生物培養(yǎng)基制品廠生產(chǎn)；葡萄糖(化學(xué)純)是上?；瘜W(xué)試劑采購(gòu)供應(yīng)站試劑廠生產(chǎn)；可溶性淀粉(化學(xué)純)是四川化工地質(zhì)隊(duì)五七化工廠生產(chǎn)；檸檬酸鐵(分析純)是山東萊陽(yáng)經(jīng)濟(jì)技術(shù)開發(fā)區(qū)精細(xì)化工廠生產(chǎn)；乙酸鋅(分析純)是北京化工廠生產(chǎn)；乙酸鈉(分析純)是溫州市試劑化工廠生產(chǎn)，北京化學(xué)試劑公司經(jīng)銷的；瓊脂粉由山東省疾病預(yù)防控制中心分裝。孟加拉紅培養(yǎng)基是山東省防疫站生產(chǎn)的；馬鈴薯葡萄糖培養(yǎng)基是實(shí)驗(yàn)室自制的。表1、酵母細(xì)胞養(yǎng)分含量Tab.1yeastcellnutrientcontent名稱含量(％)均含量(％)水分253，5真蛋白424644核酸687礦物質(zhì)787.5脂肪5.5碳水化合物303733.5合計(jì)100儀器控溫控濕培養(yǎng)箱、L型涂布棒；方法正交試驗(yàn)設(shè)計(jì)利用正交表L9(34)設(shè)計(jì)正交試驗(yàn)，正交試驗(yàn)因素與水平見(表2)，據(jù)此設(shè)計(jì)出的正交試驗(yàn)見(表3)。表2正交試驗(yàn)因素與水平Tab.2factorandleveloftheorthogonalexperiment<table>complextableseeoriginaldocumentpage5</column></row><table>表3正交試驗(yàn)表<table>complextableseeoriginaldocumentpage5</column></row><table>培養(yǎng)基的制備按照正交試驗(yàn)表應(yīng)制備9種培養(yǎng)基進(jìn)行試驗(yàn)，這9種培養(yǎng)基暫命名為M1、M2……M9。M1培養(yǎng)基的配制如下量取去除啤酒花的麥芽汁1000ml,加入酵母浸出粉3g、大豆蛋白胨10g、葡萄糖6g、可溶性淀粉6g、檸檬酸鐵1g、乙酸鋅0.5g、乙酸鈉0.5g、瓊脂粉20g加熱溶化，經(jīng)1210G高壓滅菌25分鐘，待冷卻至450C左右傾注成平板備用。M2至M9培養(yǎng)基的制作按正交試驗(yàn)表第310行里的組分(檸檬酸鐵、乙酸鋅、乙酸鈉的量不變)依此制成。培養(yǎng)基各組分的確定將已知一定數(shù)量的酵母菌(啤酒酵母菌制成6X105菌懸液、假絲酵母菌制成6X105菌懸液)，各取菌懸液0.4ml，以滅菌的L型玻璃涂布棒依次接種到M1M9培養(yǎng)基上，放置于溫度為280G，相對(duì)濕度為66%的控溫控濕培養(yǎng)箱內(nèi)，培養(yǎng)48h、72h，然后取出觀察結(jié)果，看以上酵母菌在哪個(gè)配方的培養(yǎng)基上生長(zhǎng)的最好。4MYSPA培養(yǎng)基的比較研究將已知一定數(shù)量酵母菌(同上)，以無(wú)菌操作取0.4ml接種到馬鈴薯葡萄糖培養(yǎng)基和孟加拉紅培養(yǎng)基上，放置于溫度為280C，相對(duì)濕度為66%的培養(yǎng)箱中，培養(yǎng)48h，取出觀察結(jié)果并與MYSPA培養(yǎng)基的結(jié)果相比較。結(jié)果與分析通過(guò)比較發(fā)現(xiàn)，啤酒酵母菌和假絲酵母菌在M8培養(yǎng)基上生長(zhǎng)旺盛，見(圖1)、(圖2)、(圖3)，經(jīng)查證M8培養(yǎng)基各組分為麥芽汁1000ml、酵母浸出粉7g、大豆蛋白胨12.5g、葡萄糖6g、可溶性淀粉10g、檸檬酸鐵1g、乙酸鋅0.5g、乙酸鈉0.5g、瓊脂粉20g，此培養(yǎng)基命名為MYSPA培養(yǎng)基。權(quán)利要求1.一種新組分酵母菌培養(yǎng)基的研制方法，其特征在于其重量配比為麥芽汁900--1100ml、酵母浸出粉5--8g、大豆蛋白胨11--13g、葡萄糖4--7g、可溶性淀粉7--12g、檸檬酸鐵0.5—1.5g、乙酸鋅0.3--0.8g、乙酸鈉0.3--0.8g、瓊脂粉18--22g。2、根據(jù)權(quán)利要求1所述的一種新組分酵母菌培養(yǎng)基的研制方法，其特征在于最佳重量配比為麥芽汁1000ml、酵母浸出粉7g、大豆蛋白胨12.5g、葡萄糖6g、可溶性淀粉10g、檸檬酸鐵1g、乙酸鋅0.5g、乙酸鈉0.5g、瓊脂粉20g。全文摘要本發(fā)明公開了一種新組分酵母菌培養(yǎng)基的研制方法，主要原料為麥芽汁1000ml、酵母浸出粉7g、大豆蛋白胨12.5g、葡萄糖6g、可溶性淀粉10g、檸檬酸鐵1g、乙酸鋅0.5g、乙酸鈉0.5g、瓊脂粉20g；各元素易得、價(jià)格低、營(yíng)養(yǎng)豐富、易被酵母菌利用，酵母菌生長(zhǎng)繁殖迅速的優(yōu)點(diǎn)。文檔編號(hào)C12R1/725GK101372675SQ20081013984公開日2009年2月25日申請(qǐng)日期2008年9月12日優(yōu)先權(quán)日2008年9月12日發(fā)明者王向東申請(qǐng)人:王向東