專利名稱：微乳液中的酶反應的制作方法
技術(shù)領域：
本發(fā)明涉及制備光學活性的有機化合物的方法。待制備的光學活性的有機化合物的特征是它們是通過一或多種立體選擇性酶促轉(zhuǎn)化反應而不對稱地獲得的。這些反應是在所謂的微乳液(miniemulsions)中進行的。本發(fā)明還涉及可優(yōu)先發(fā)生這種反應的反應系統(tǒng)。
在制備有機化合物的工業(yè)方法中也逐漸增多使用酶促程序步驟。這是由于以下事實用作生物催化劑的酶已經(jīng)以較少的量呈現(xiàn)出適當?shù)墓I(yè)效應，催化作用原則上可以在溫和反應條件(溫度、壓力和pH)下發(fā)生，并且同時酶促轉(zhuǎn)化與高度的對映選擇性、區(qū)域選擇性或化學選擇性相關。為此，仍在嘗試改良這些轉(zhuǎn)化反應，并使其可用于工業(yè)生產(chǎn)過程，以在盡可能寬的范圍內(nèi)應用這些優(yōu)勢。
為此，詳細研究了通過不對稱酶促轉(zhuǎn)化工業(yè)制備有機化合物的可能性。為此，經(jīng)常發(fā)現(xiàn)在大規(guī)模工業(yè)生產(chǎn)中使用酶的缺點，所述缺點(例如溶劑使用過多以及溶解度或材料運輸問題)使得對于將酶用于這些目的而產(chǎn)生懷疑。為此，使用高底物濃度進行生物催化反應尤其具有挑戰(zhàn)性。
Landfester等描述了在呈現(xiàn)連續(xù)水相的系統(tǒng)中內(nèi)酯的酶促聚合，所述系統(tǒng)中分布著稱作微乳液液滴的不連續(xù)疏水相。這種微乳液通過對具有這兩種相的混合物進行超聲或高壓均質(zhì)處理獲得。另外，在所述混合物中存在疏水性輔助物質(zhì)和表面活性劑以使得液滴穩(wěn)定(Macromol.Rapid Commun.2003，24，512-516；DE10248455)。
本發(fā)明的目的是闡述利用不對稱酶促反應步驟制備光學活性的有機化合物的方法。特別地，該方法在效率方面優(yōu)于現(xiàn)有技術(shù)的方法，但仍存在前面所提及的酶促轉(zhuǎn)化的優(yōu)勢。
本發(fā)明實現(xiàn)了這一目的。權(quán)利要求1描述了本發(fā)明的方法。權(quán)利要求2-10意在保護本發(fā)明的方法的優(yōu)選實施方式。權(quán)利要求11涉及本發(fā)明的反應混合物。
所述目的通過在微乳液中進行光學活性有機化合物(尤其是低分子量、非聚合的、手性分子)的不對稱酶促制備方法而令人驚奇及非常方便地實現(xiàn)。使用微乳液還可以進行酶促轉(zhuǎn)化，所述轉(zhuǎn)化以優(yōu)于現(xiàn)有技術(shù)的、尤其是更有效的方式進行。因此，與先前已知的方法相比，有可能使用相同量的酶減少反應時間或者增加待轉(zhuǎn)化的有機化合物的可利用量，這兩種情況均有助于達到更高的空/時產(chǎn)量。
根據(jù)本發(fā)明，應理解微乳液是一種混合物，其中小的穩(wěn)定液滴優(yōu)選在反應期間以分散形式存在于第二種連續(xù)相中，所述的液滴是通過加強使用剪切力尤其是超聲、鋼制分散器或微型流化劑而獲得的。
優(yōu)選地，具有疏水性特征的液滴在水性介質(zhì)中產(chǎn)生。根據(jù)本發(fā)明，水性介質(zhì)應理解為其中水是主要成分的均相。然而，在該相中也可以混和可溶水的其它有機溶劑，例如醇(如甲醇、乙醇、正丙醇、異丙醇、仲異丁醇、叔異丁醇、甘油和乙二醇)或酮(尤其是丙酮和MIBK)、或DMSO、DMF、NMP或環(huán)丁砜。本領域技術(shù)人員為此目的所考慮到的任何液體均可用作疏水相。當選擇液體時，本領域技術(shù)人員首先要基于該液體與水在給定反應條件下是否形成兩相混合物，以及其對于酶促轉(zhuǎn)化是否是惰性反應。在適當情況下，當待使用的底物是液體時，可以無需加入這種疏水性液體，其自身可以呈現(xiàn)疏水相的功能。這在不同底物之間不同，必須由技術(shù)人員在個案中單獨驗證。如果除了底物之外還必需加入另外的疏水性液體(疏水相)，例如由于底物是固體，則技術(shù)人員為此優(yōu)選從醚、酯和烴中選擇一種液體。特別優(yōu)選的是使用MTBE、乙酸乙酯、正己烷、正庚烷、環(huán)己胺和甲苯。
在這方面，可通過例如超聲、鋼制分散器或者微型流化劑處理所述混合物而分散液滴(K.Landfester，M.Antonietti，“Miniemulsionsfor the convenient synthesis of organic and inorganic nanoparticles and“single molecule”applications in materials chemistry”inColloids andColloid Assemblies(Ed.F.Caruso)，Wiley VCH Verlag，Weinheim，Germany，2004，pp.175-215及其引用的文獻)。所述微乳液液滴優(yōu)選平均直徑為20-1000nm，特別優(yōu)選30-600nm，尤其優(yōu)選50-500nm。
為了制備微乳液，優(yōu)選在產(chǎn)生液滴之前向混合物中加入表面活性劑。所述表面活性劑基于乳液的量的用量以重量計優(yōu)選為1-20％，更優(yōu)選2-15％，特別優(yōu)選3-10％。原則上，本領域技術(shù)人員為此目的所考慮到的以及不失活待應用的酶的任何表面活性劑均適于所述應用。但是，優(yōu)選使用非離子表面活性劑，例如A.Taden，M.Antonietti，K.Landfester，Macromol.Rapid Commun.2003，24，512-516中所描述的非離子表面活性劑。特別優(yōu)選的是使用選自如下一組表面活性劑烷基聚乙二醇醚的乙氧基化物，優(yōu)選Lutensol AT，特別優(yōu)選Lutensol AT 50(C16/18-EO8-50)。
另外，形成的乳液液滴通過另外加入通常為疏水性的惰性物質(zhì)而穩(wěn)定。先決條件是這些物質(zhì)在水中與在疏水相中相比呈現(xiàn)更低的溶解度。這種性質(zhì)的合適物質(zhì)特別是脂肪烴或芳烴。優(yōu)選的脂肪烴特別是C6-C20烴類。這些物質(zhì)特別優(yōu)選選自烴，特別是十六烷。這些疏水性物質(zhì)基于所述微乳液優(yōu)選用量以重量計為0.001-70％，優(yōu)選0.1-3％，特別優(yōu)選0.5-2％。
用于不對稱制備光學活性的有機化合物的酶可以由本領域技術(shù)人員以適當方式選擇。原則上，本發(fā)明的方法可使用技術(shù)人員為此目的所考慮到的任何酶。已發(fā)現(xiàn)，可優(yōu)選應用選自氧化還原酶、水解酶、異構(gòu)酶、轉(zhuǎn)移酶和裂合酶的酶。特別優(yōu)選使用脂肪酶和氧化還原酶。極其優(yōu)選使用Amano公司的脂肪酶PS。
所述酶優(yōu)選取自以下生物體節(jié)桿菌屬(Arthobacter)菌株，尤其是石蠟節(jié)桿菌(Arthobacter paraffineus)；曲霉屬(Aspergillus)菌株，尤其是黑曲霉(Aspergillus niger)；芽孢桿菌屬(Bacillus)菌株，尤其是枯草芽孢桿菌(Bacillus subtilis)、蠟狀芽孢桿菌(Bacillus cereus)和嗜熱脂肪芽孢桿菌(Bacillusstearothermophilus)；伯克霍爾德屬(Burkholderia)菌株，尤其是洋蔥伯克霍爾德菌(Burkholderia cepacia)；假絲酵母屬(Candida)菌株，尤其是南極假絲酵母(Candida antarctica)、博伊丁氏假絲酵母(Candida boidinii)和皺褶假絲酵母(Candidarugosa)；乳芽孢桿菌屬(Lactobacillus)菌株，尤其是Lactobacillus kefir和短小乳芽孢桿菌(Lactobacillus brevis)；毛霉菌(Mucor)菌株，特別是爪哇毛霉(Mucor javanicus)；青霉屬(Penicillium)菌株，尤其是沙門氏柏干酪青霉(Penicilliumcamemberti)；假單胞菌屬(Pseudomonas)菌株，尤其是蔥頭假單胞菌(Pseudomonas cepacia)和熒光假單胞菌(Pseudomonasfluorescens)；根霉屬(Rhizopus)菌株，尤其是米根霉(Rhizopusoryzae)；紅球菌屬(Rhodococcus)菌株，尤其是紅平紅球菌(Rhodococcus erythropolis)、赤紅球菌(Rhodococcus ruber)和紫紅紅球菌(Rhodococcus rhodocrous)；及嗜酸熱原體(Thermoplasma acidophilum)。
原則上，本領域技術(shù)人員考慮到的與酶反應的任何化合物均可用作底物。所述底物優(yōu)選是固體或液體，且不具有或者具有至少一個手性中心。在本發(fā)明的反應中所產(chǎn)生的產(chǎn)物是光學富集形式，即意味著優(yōu)先形成兩種可能的對映異構(gòu)體的混合物中的一種對映異構(gòu)體，或者得自前手性化合物。所述產(chǎn)物中產(chǎn)生的過量對映異構(gòu)體優(yōu)選＞80％，更優(yōu)選＞90％，更優(yōu)選＞95％，特別優(yōu)選＞98％。
在本發(fā)明反應中優(yōu)選應用的物質(zhì)種類可選自例如外消旋α-或β-氨基酸酯、α-或β-羥基羧酸酯和前手性酮。特別優(yōu)選使用外消旋β-氨基酸酯，尤其是正丙基外消旋-3-氨基-3-苯丙酸酯作為底物。
本發(fā)明的酶促反應可優(yōu)選在相對高的底物濃度下進行。在微乳液中進行酶促轉(zhuǎn)化時優(yōu)選使用底物起始量為＞300g/l，優(yōu)選＞450g/L，更優(yōu)選＞600g/L。
參與制備光學活性的有機化合物的一或多種酶可以以本身形式或者以展示一或多種這些酶的微生物的形式用于反應中。根據(jù)本發(fā)明，術(shù)語“本身形式”是指所述酶以天然的形式或如所需的高純度形式重組制備的蛋白質(zhì)的形式加入微乳液中。然而，原則上也可以使用作為微生物組分的一或多種酶。所述微生物因此是其中至少表達一種基因的細胞，也就是存在至少一種可以催化本發(fā)明的轉(zhuǎn)化的蛋白質(zhì)。如果所述基因以重組形式存在于微生物中，則該微生物之后被稱作宿主生物體。所述宿主生物體可含有以整合形式存在于染色體中或質(zhì)粒上的基因。如果一些酶參與酶促轉(zhuǎn)化并以重組形式由宿主生物體一起表達，則在本申請中將所述宿主生物體稱作全細胞催化劑。
當一些酶以本身形式或以全細胞催化劑形式使用時，例如在一反應級聯(lián)中，根據(jù)本發(fā)明，至少一種酶足以引起相應底物的不對稱轉(zhuǎn)化(EP1216304-在該文中是乙內(nèi)酰脲消旋酶/乙內(nèi)酰脲酶/立體選擇性氨基甲酰酶)。
在這方面可以提及的宿主生物體是這樣的生物體，例如酵母(如多形汗遜氏酵母(Hansenula polymorpha)、畢赤氏酵母(Pichia sp.)和啤酒糖酵母(Saccharomyces cerevisiae))、原核生物(如大腸桿菌(E.coli)和枯草芽孢桿菌(Bacillus subtilis))、或真核細胞(如哺乳動物細胞、昆蟲細胞或植物細胞)。克隆方法為本領域技術(shù)人員所熟知(Sambrook，J.；Fritsch，E.F.and Maniatis，T.(1989)，Molecular cloninga laboratory manual，2nded.，Cold Spring Harbor Laboratory Press，NewYork)。為此目的優(yōu)選使用大腸桿菌菌株。特別優(yōu)選的是E.coliXL1 Blue、NM 522、JM101、JM109、JM105、RR1、DH5α、TOP10-、HB101、BL21 codon plus、BL21(DE3)codon plus、BL21，BL21(DE3)和MM294。
原則上，可為本領域技術(shù)人員為此目的所利用的任何實施方式均適合用作質(zhì)?；蜉d體以克隆所述基因。這些質(zhì)粒和載體可見于例如Studier及其同事的描述(Studier，W.F.；Rosenberg A.H.；Dunn J.J.；Dubendroff J.W.；(1990)，Use of the T7 RNA polymerase to directexpression of cloned genes，Methods Enzymol.185，61-89)，或者由Novagen、Promega、New England Biolabs、Clontech或Gibco BRL、提供的手冊。其它優(yōu)選的質(zhì)粒和載體可見于Glover，D.M.(1985)，DNA cloninga practical approach，Vol.I-III，IRL Press Ltd.，Oxford；Rodriguez，R.L.und Denhardt，D.T(eds)(1988)，Vectorsa survey ofmolecular cloning vectors and their uses，179-204，Butterworth，Stoneham；Goeddel，D.V.(1990)，Systems for heterologous geneexpression，Methods Enzymol.185，3-7；Sambrook，J.；Fritsch，E.F.andManiatis，T.(1989)，Molecular cloninga laboratory manual，2nded.，Cold Spring Harbor Laboratory Press，New York。
可用于將含有所研究的核酸序列的基因構(gòu)建體以非常優(yōu)選的方式克隆進宿主生物體中的質(zhì)粒是或基于pUC18/19(RocheBiochemicals)、pKK-177-3H(Roche Biochemicals)、pBTac2(RocheBiochemicals)、pKK223-3(Amersham Pharmacia Biotech)、pKK-233-3(Stratagene)或pET(Novagen)。
已證明，當實施本發(fā)明的方法時，優(yōu)選對微生物或宿主生物體進行預處理，優(yōu)選在使用之前進行預處理，由此使得其細胞膜對底物和產(chǎn)物的通透性與未經(jīng)處理的系統(tǒng)相比得以增加。在這方面，特別優(yōu)選的是其中微生物或宿主生物體通過例如冷凍預處理和/或用有機溶劑尤其是甲苯進行處理的方法。
在另一個實施方式中，本發(fā)明涉及一種呈微乳液形式的反應混合物，其包含連續(xù)水相和不連續(xù)疏水相、參與有機化合物的不對稱制備的立體選擇性酶或含這種酶的微生物、表面活性劑、使乳液液滴穩(wěn)定的疏水性物質(zhì)及待被所述酶轉(zhuǎn)化的前手性或外消旋或?qū)τ钞悩?gòu)體富集的有機化合物和/或該化合物的反應產(chǎn)物。本發(fā)明方法的優(yōu)選實施方式依此類推是有效的。
參見在本申請開始所引用關于產(chǎn)生微乳液形式的本發(fā)明的反應混合物的現(xiàn)有技術(shù)。在該現(xiàn)有技術(shù)中闡述的不同制備方法可以相應的方式用于本發(fā)明。
因此，微乳液可以例如通過將由有機溶劑和水相組成的混合物進行超聲處理而形成。這種處理產(chǎn)生均質(zhì)的乳狀液體，其在給定條件下及添加所述添加劑的條件下，在酶促轉(zhuǎn)化期間不再分層，因此在本發(fā)明中被認為是穩(wěn)定的。其它反應參數(shù)如pH或溫度的設置取決于酶促轉(zhuǎn)化，并可以由本領域技術(shù)人員通過常規(guī)實驗確定。
因此，例如可以通過超聲將含有表面活性劑和含有十六烷的水性混合物(其包含正丙基-3-氨基-3-苯丙酸酯)的轉(zhuǎn)化為微乳液。當使用脂肪酶時獲得的液滴如

圖1中所示。在這方面，脂肪酶可以在進行超聲處理之前加入或者在超聲處理之后攪拌入微乳液中。在這種情況中，酶促轉(zhuǎn)化的產(chǎn)物(S)-3-氨基-3-苯基-正丙酸在反應期間從該微乳液中沉淀出來，并可以通過簡單過濾從反應混合物的殘余物中分離出。當使用微乳液時，發(fā)現(xiàn)反應速度與先前的程序相比增加(見實施例1(對比實施例)和實施例2)。令人驚奇地，在反應期間固體的形成不會使微乳液變得不穩(wěn)定，即使固體可以使微乳液去穩(wěn)定也如此。因此，所述微乳液即使在第三相(即固相)正在形成時也保持穩(wěn)定，這有些未曾預料到。更令人驚奇地，所形成的固體的顆粒直徑適于(工業(yè)化)過濾。這是未曾預料到的，因為根據(jù)定義微乳液是由非常小的在空間上分離的液滴組成，所述液滴隨后由于結(jié)晶核的數(shù)目的增加(與標準沉淀方法相比)而產(chǎn)生具有小顆粒直徑的細碎粒狀固體，這反過來導致相應的過濾上的難度。
再令人驚奇的是，由于使用微乳液，可能增加底物濃度同時保留攪拌特性并實現(xiàn)高周轉(zhuǎn)率。使用幾百克/升(例如482g/L)的底物濃度進行實驗(見實施例3)。這是迄今為止已報道的酶促對映異構(gòu)體選擇性反應的最高底物濃度之一。長久以來，已知將超聲用于羧酸酯的水解(Yim et al.，Chemistry Letters 2001，p.938；Moon et al.Tetrahedron Letters 1979，41，3917)。據(jù)報道，利用超聲可提高對酯的水解。在這種情況下，令人驚奇的是，在剛剛描述的反應中由于利用超聲而未發(fā)生所述酯的對稱裂解，并形成不需要的外消旋物而非所需的光學活性產(chǎn)物；事實上只有酶促不對稱水解是顯著的，這從產(chǎn)物的極佳ee值清楚可見。實際上，不需要的對稱水解最多只發(fā)揮從屬作用，即當利用超聲時在微乳液中作為背景反應。
再令人驚奇的是，所使用的酶不受超聲脈沖或所應用的其它剪切力的影響，由此不過分喪失其功能性。鑒于超聲在被超聲處理的介質(zhì)中產(chǎn)生微氣泡這一事實，該氣泡連同崩解產(chǎn)生達5000K的溫度和達1000bar的壓力，應用如酶那樣易碎的化合物的優(yōu)勢肯定是非常令人驚喜的。
使用微乳液酶促制備光學活性的低分子量的分子的觀念目前還未知。從前只是在微乳液中進行了內(nèi)酯的酶促聚合作用(參見上述)。在本發(fā)明的用于制備光學活性的有機化合物的酶促轉(zhuǎn)化中，可以實現(xiàn)與常規(guī)方法相比反應時間更短和/或應用的底物量更高。這相對于本發(fā)明之前的現(xiàn)有技術(shù)的背景而言絕非是顯而易見的。
實施例實施例1(對比實施例)脂肪酶催化的外消旋β-氨基酸酯在底物濃度為242g/L的兩相系統(tǒng)中的對映異構(gòu)體選擇性水解最初先導入80ml水，向其中加入1.45g的Amano脂肪酶PS(Pseudomas cepacia；得自Amano Enzymes公司)。然后過濾出未溶解的固體。向所述酶的水溶液中加入80ml甲基叔丁基醚(MTBE)作為有機溶劑成分，這樣產(chǎn)生濾過物。使用自動pH stat調(diào)節(jié)所述兩相系統(tǒng)至pH8.2，并通過加入1M氫氧化鈉溶液(得自Merck)使其恒定在該pH。一達到20℃溫度，加入39g外消旋化合物正丙基外消旋-3-氨基-3-苯丙酸酯，開始反應。反應時間為18小時，在此期間產(chǎn)生包含所需產(chǎn)物(S)-3-氨基-3-苯丙酸的白色沉淀。加入160ml丙酮以完成沉淀，隨后將混合物攪拌45分鐘。過濾出固體并用少量丙酮洗滌。
1小時后，首先觀察到13.9％的轉(zhuǎn)化率。在15小時反應時間后，觀察到大約50％的轉(zhuǎn)化率。經(jīng)后處理后分離的產(chǎn)物的ee值＞99％，產(chǎn)率為41％。
實施例2脂肪酶催化的外消旋β-氨基酸酯在底物濃度為242g/L的微乳液中的對映異構(gòu)體選擇性水解最初先導入40ml表面活性劑溶液，向其中加入1.45g的Amano脂肪酶PS(Pseudomas cepacia，得自Amano Enzymes公司)。然后過濾出未溶解的固體。
在每種情況中，將1/3待使用的丙酯(共39g)和1/3的十六烷(共1.638g)及每種情況中各40ml的1％表面活性劑溶液混和，使用磁力攪拌器進行攪拌。將每種情況中的這三種乳液使用超聲探頭在200W處理4分鐘。
將濾過物與這三種微乳液合并，使用自動pH stat調(diào)節(jié)混合物至pH 8.2，并通過加入1M氫氧化鈉溶液(得自Merck)使其恒定在該pH。反應溫度為20℃，反應時間為17小時，在此期間產(chǎn)生包含所需產(chǎn)物(S)-3-氨基-3-苯丙酸的白色沉淀。加入160ml丙酮以完成沉淀，隨后將該混合物攪拌45分鐘。過濾出固體并用少量丙酮洗滌。
1小時后，首先觀察到17.5％的轉(zhuǎn)化率。在6小時反應時間后獲得大約49％的轉(zhuǎn)化率。經(jīng)后處理后分離的產(chǎn)物的ee值＞99％，產(chǎn)率為41％。
實施例3脂肪酶催化的外消旋β-氨基酸酯在底物濃度為484g/L的微乳液中的對映異構(gòu)體選擇性水解最初先導入40ml表面活性劑溶液，向其中加入1.21g的Amano脂肪酶PS(Pseudomas cepacia，得自Amano Enzymes公司)。然后過濾出未溶解的固體。
在每種情況中，將1/3待使用的丙酯(共65.21g)和1/3的十六烷(共1.369g)及每種情況中各32ml的1％表面活性劑溶液混和，使用磁力攪拌器進行攪拌。將每種情況中的這三種乳液使用超聲探頭在200W處理4分鐘。
將濾過物與這三種微乳液合并，使用自動pH stat調(diào)節(jié)混合物至pH 8.2，并通過加入1M氫氧化鈉溶液(得自Merck)使其恒定在該pH。反應溫度為20℃，反應時間為18小時，在此期間產(chǎn)生包含所需產(chǎn)物(S)-3-氨基-3-苯丙酸的白色沉淀。加入160ml丙酮以完成沉淀，隨后將該混合物攪拌45分鐘。過濾出固體并用少量丙酮和100ml MTBE洗滌。
1小時后，首先觀察到10.2％的轉(zhuǎn)化率。在18小時反應時間后達到大約45％的轉(zhuǎn)化率。經(jīng)后處理后分離的產(chǎn)物的ee值＞99％，產(chǎn)率為37％。
權(quán)利要求
1.用于在微乳液中制備光學活性的有機化合物的不對稱酶促制備方法。
2.權(quán)利要求1的方法，其特征在于在水性介質(zhì)中產(chǎn)生疏水性液滴的微乳液。
3.權(quán)利要求1和/或2的方法，其特征在于產(chǎn)生平均液滴直徑為20-1000nm的乳液液滴的微乳液。
4.前述一或多項權(quán)利要求的方法，其特征在于所述微乳液含有表面活性劑。
5.前述一或多項權(quán)利要求的方法，其特征在于所述微乳液含有非離子表面活性劑，優(yōu)選Lutensol AT 50。
6.前述一或多項權(quán)利要求的方法，其特征在于乳液液滴另外通過加入惰性疏水性物質(zhì)而穩(wěn)定，優(yōu)選加入正十六烷。
7.前述一或多項權(quán)利要求的方法，其特征在于所應用的酶選自如下一組氧化還原酶、水解酶、異構(gòu)酶、轉(zhuǎn)移酶和裂合酶。
8.前述一或多項權(quán)利要求的方法，其特征在于所應用的底物是外消旋氨基酸酯，優(yōu)選β-氨基酸酯，特別優(yōu)選正丙基-外消旋-3-氨基-3-苯丙酸酯。
9.前述一或多項權(quán)利要求的方法，其特征在于酶促反應在底物濃度＞300g/L、特別是＞450g/L的條件下進行。
10.前述一或多項權(quán)利要求的方法，其特征在于參與有機化合物的制備的一或多種酶以其本身形式或以包含一或多種所述酶的微生物的形式應用。
11.呈微乳液的反應混合物，其包含連續(xù)水相和不連續(xù)疏水相、參與有機化合物的不對稱制備的立體選擇性酶或包含這種酶的微生物、表面活性劑、使乳液液滴穩(wěn)定的疏水性物質(zhì)及待通過所述酶轉(zhuǎn)化的前手性或外消旋或?qū)τ钞悩?gòu)體富集的有機化合物和/或該化合物的反應產(chǎn)物。
全文摘要
本發(fā)明涉及制備光學活性的有機化合物的不對稱酶促方法。本發(fā)明的方法在所謂的微乳液中進行。本發(fā)明還涉及呈微乳液的酶促反應混合物。
文檔編號C12P41/00GK101065494SQ200580040820
公開日2007年10月31日 申請日期2005年11月4日 優(yōu)先權(quán)日2004年11月30日
發(fā)明者H·格勒格爾, K·德拉茲, H·許斯肯, K·蘭德費斯特爾 申請人:德古薩有限責任公司