專利名稱：微孔細胞培養(yǎng)載片的制作方法
技術領域：
本實用新型涉及一種醫(yī)學技術領域中的微孔細胞培養(yǎng)載片。
背景技術：
長期以來，傳統(tǒng)的細胞免疫化學、原位雜交、各種特殊染色等研究方法建立在常規(guī)細胞片基礎上。常規(guī)的細胞制片一般都為單種細胞片，一張玻片上只能載有限的一種細胞作一種測試。所以在進行大量細胞樣本分析時，必須反復重復同一操作，造成大量時間、人力以及材料的浪費。
實用新型內(nèi)容本實用新型的目的就是提供一種微孔細胞培養(yǎng)載片，可以由載玻片和凹孔構成，由所述載玻片的一側、向內(nèi)設置有所述的凹孔，該凹孔并不穿透所述載玻片的另一側。
所述載玻片采用玻璃或醫(yī)用無色塑料為材料制成。所述載玻片的長寬為25.4×76.2mm，厚度為1.8～5.0mm，還可以是1.8～2.2mm。
在所述載玻片上可以設置有從一面向內(nèi)凹陷的、若干個圓形的凹孔，所述凹孔可以為圓柱形、底平的凹孔。該凹孔的微孔直徑為1～10mm，孔深為0.8～4.0mm，各個凹孔之間的距離為2～10mm，所述凹孔的數(shù)目為10～1000個；所述凹孔的直徑還可以為1～6mm，凹孔深度為0.8～1.4mm。
所述載玻片消毒后來使用，方法如下各種細胞制成細胞懸液，可滴加到各凹孔中，使細胞懸液形成液體凸面，30min～1h后細胞貼壁，這種活細胞樣本陣列，用70％乙醇或4％多聚甲醛固定細胞，這種細胞片用于可進行免疫組化標記；或與已用核素、生物素或熒光染料標記的探針進行雜交，將放射自顯影或激光共聚焦顯微鏡檢測到的結果輸入計算機，用相應的軟件，對實驗所得的數(shù)據(jù)、信息進行分析，最后得出結論。這樣通過化學方法對細胞微陣列進行靶DNA、RNA或蛋白分子的原位檢測，通過一次化學染色或原位雜交，載玻片上所有標本的信號可以同時顯示出來。
因此，通過模具鑄造一種和普通病理切片大小、形狀相似的載玻片，不同之處在于載玻片上根據(jù)設計鑄造有數(shù)十個至上千個小圓柱形的底平的凹孔，然后將活的細胞懸液整齊滴加到凹孔中培養(yǎng)，通過與而制成。這樣，固定細胞后可用于靶DNA、RNA或蛋白分子的原位檢測，通過一次化學染色或原位雜交，載玻片上所有標本的信號可以同時顯示出來。與常規(guī)的細胞片相比，微孔細胞培養(yǎng)載片具有以下特點(1)常規(guī)的細胞制片一般都為單種細胞片，所以在進行大細胞樣本分析時，必須反復重復同一操作，造成大量時間、人力以及材料的浪費，而微孔細胞培養(yǎng)載片由于能夠同時對多個細胞樣品進行研究，不僅提高了工作效率，還節(jié)省了大量的材料和試劑。
(2)體積小、信息含量高，在一張載玻片上可同時培養(yǎng)上百近千種不同的細胞樣本，根據(jù)不同的需要進行組合和設計。
(3)由于在同一張微孔細胞培養(yǎng)載片上同時對不同的細胞標本進行檢測，因此可以避免因檢驗時間的先后而造成的誤差，極大地改善了實驗條件的同質性，從而提高檢測結果的可比性。
(4)最大限度地利用有限的細胞標本資源，尤其是原代培養(yǎng)的細胞標本。
(5)設計的靈活性大，既可以將不同細胞的標本列陣于同一塊微孔細胞培養(yǎng)載片上，也可以將同種細胞周期不同、處理方法不同的細胞標本列陣在同一塊微孔細胞培養(yǎng)載片上。
(6)不僅適用于形態(tài)學觀察，還能用于免疫組織化學染色、原位雜交和各種原位組織、細胞學的觀察和研究。
(7)高效、快速、低消耗、自身內(nèi)對照和可比性強。在醫(yī)學科學研究中用于基因及其產(chǎn)物表達水平的分析和基因功能的研究。
微孔細胞培養(yǎng)載片可根據(jù)實驗的要求和目的，設計出不同的排列組合，可以應用在細胞生物學研究領域，也可以用于在科研、試劑檢測、質量檢查和標準化等方面應用。其具有高效或高通量特點，并有節(jié)約經(jīng)費和試驗結果可比性強的優(yōu)點，還大大減少了勞動力和勞動強度，縮短研究時間，提高檢測效率，更重要的是減少實驗誤差。還使科研人員一次就有可能同時對幾百乃至近千種發(fā)展階段不同、周期不同的原代培養(yǎng)細胞或細胞株以及用不同物理、化學方法處理的活細胞樣本進行研究。而且將這些排列整齊的培養(yǎng)細胞通過化學方法固定制作成微縮的細胞片。這種微縮細胞片可以用各種酶、核素或熒光標記的不同基因、寡核苷酸、抗體進行雜交和標記染色，最后在顯微鏡(包括激光共聚焦顯微鏡等)下獲取圖像信息(或通過計算機處理所獲的信息)，以研究目的基因或基因產(chǎn)物在不同細胞之間的表達差異以及研究藥物的體外效應。主要用于科研領域中利用細胞進行藥物研究篩選、基因表達分析、基因突變的確認、基因分型以及新基因的發(fā)現(xiàn)等，能夠對數(shù)十、數(shù)百種不同生物細胞同時進行形態(tài)結構比較、基因和蛋白表達水平的定位檢測。并從根本上解決了細胞生物研究的難題，是細胞生物學等研究領域的一項重大技術產(chǎn)品，對某些基因和蛋白質與疾病關系的研究、疾病相關基因的驗證、新藥的開發(fā)與篩選、疾病的分子診斷、治療過程的動態(tài)觀察和預后的判斷等方面具有重要的實際意義和廣闊的市場前景。


圖1為本實用新型實施例的立體示意圖。
圖2為本實用新型實施例的平面示意圖。
圖3為本實用新型實施例的A-A剖面示意圖。
符號說明1載玻片或載片；2凹孔；具體實施方式
本實用新型解決其技術問題所采用的技術方案是通過模具鑄造一種和普通病理切片大小、形狀相似的載玻片1，不同之處在于載玻片1上根據(jù)設計鑄造有數(shù)十個至上千個小圓柱形的底平的凹孔2，然后將活的細胞樣本整齊滴加到凹孔2中培養(yǎng)而制成活細胞樣本陣列。
微孔細胞培養(yǎng)載片1采用玻璃或醫(yī)用無色塑料作為材料，通過模具鑄造成醫(yī)學病理用載玻片1長寬為25.4×76.2mm。微孔細胞培養(yǎng)載片1厚度為1.8～5.0mm，但為了細胞檢測和觀察的方便，一般設定為2.5mm。微孔細胞培養(yǎng)載片1上的微孔直徑從1～10mm不等，但為了方便，一般設定為5mm。在載片1上鑄造10～1000個凹型小孔2，小孔直徑在1～10mm，凹孔2的深度為0.8～4.0mm。在一個常規(guī)大小的載玻片1上最多可以檢測1000個樣本，由于樣本排列過于緊密，有可能導致培養(yǎng)細胞用微孔載玻片1制作和研究的失敗。對于大多數(shù)研究來說，10～100個樣本就已經(jīng)足夠了。微孔細胞培養(yǎng)載片1上兩個相鄰的細胞培養(yǎng)用圓柱形凹孔2之間的距離從2～10mm不等，但為了方便，一般設定為4mm。
權利要求1.一種微孔細胞培養(yǎng)載片，由載玻片和凹孔構成，其特征在于，由所述載玻片的一側、向內(nèi)設置有所述的凹孔，該凹孔并不穿透所述載玻片的另一側。
2.如權利要求1所述的微孔細胞培養(yǎng)載片，其特征在于，所述凹孔的微孔直徑為1～10mm，孔深為0.8～4.0mm，各個凹孔之間的距離為2～10mm，所述凹孔的數(shù)目為10～1000個。
3.如權利要求2所述的微孔細胞培養(yǎng)載片，其特征在于，所述凹孔的直徑為1～6mm，凹孔的深度為0.8～1.4mm。
4.如權利要求1～3任意一個所述的微孔細胞培養(yǎng)載片，其特征在于，所述凹孔為圓柱形、底平的凹孔。
5.如權利要求1所述的微孔細胞培養(yǎng)載片，其特征在于，所述載玻片的長寬為25.4×76.2mm，厚度為1.8～5.0mm。
6.如權利要求5所述的微孔細胞培養(yǎng)載片，其特征在于，所述載玻片的厚度為1.8～2.2mm。
7.如權利要求1所述的微孔細胞培養(yǎng)載片，其特征在于，所述載玻片采用玻璃或醫(yī)用無色塑料為材料制成。
專利摘要本實用新型提供一種微孔細胞培養(yǎng)載片，其是一種特殊的細胞片，由載玻片和凹孔構成，所述載玻片采用玻璃或醫(yī)用無色塑料為材料制成，該載玻片的長寬可以為25.4×76.2mm，厚度為1.8～5.0mm，由所述載玻片的一側、向內(nèi)設置有圓柱形、底平的凹孔，該凹孔并不穿透所述載玻片的另一側，該凹孔的微孔直徑為1～10mm，孔深為0.8～4.0mm，各個凹孔之間的距離為2～10mm，所述凹孔的數(shù)目為10～1000個，通過該細胞培養(yǎng)載片能夠同時對數(shù)十個、數(shù)百個、乃至近千個細胞樣本進行分析，其克服了傳統(tǒng)細胞片實驗時步驟繁瑣、試驗速度慢和效率低的缺點，具有小體積、多樣本、大信息、可同時分析數(shù)百種細胞樣本的優(yōu)點，且制造成本低、檢測時可節(jié)約時間、載片易拿取、操作安全性高。
文檔編號C12M3/00GK2801789SQ2005201077
公開日2006年8月2日 申請日期2005年5月31日 優(yōu)先權日2005年5月31日
發(fā)明者楊世昕, 卞修武, 姜軍, 吳軍, 楊新華, 陳顯春 申請人:中國人民解放軍第三軍醫(yī)大學第一附屬醫(yī)院