專利名稱：蝮蛇活肝酶及其制備工藝的制作方法
技術(shù)領(lǐng)域：
本發(fā)明涉及一種蝮蛇活肝酶及其制備工藝。
背景技術(shù)：
蛇毒有液體黃金之稱，醫(yī)用價(jià)值早有報(bào)道，其醫(yī)用價(jià)值概括有四大功能即抗凝溶栓、抗癌鎮(zhèn)痛、促進(jìn)神經(jīng)生長(zhǎng)與止血、抗衰扶正。從事蛇毒研究的國(guó)內(nèi)外科研機(jī)構(gòu)較多，發(fā)表的論文也較多。由于蛇毒成份復(fù)雜，中國(guó)科學(xué)家從上世紀(jì)六十年代就開(kāi)始對(duì)蛇毒進(jìn)行了系統(tǒng)的研究，而蛇毒因含有對(duì)人體有害的神經(jīng)毒和出血毒，如不能充分去除，會(huì)給人體造成危害，并且由于其成分單一，也會(huì)影響療效，而且因其分子量太大，會(huì)給用藥者帶來(lái)不安全隱患。

發(fā)明內(nèi)容
本發(fā)明的目的是提供一種用藥安全，療效高的蝮蛇活肝酶及其制備工藝。
本發(fā)明的目的是這樣實(shí)現(xiàn)的蝮蛇活肝酶，其組成包括復(fù)合酶，所述的復(fù)合酶是從蝮蛇蛇毒中提取而成，所述的復(fù)合酶為溶血因子、克癌因子、神經(jīng)生長(zhǎng)因子的混合物。
上述的蝮蛇活肝酶的制備工藝，按上述所述的重量份數(shù)取凍干蝮蛇毒并按1∶4的比例加入PH值為7.5，摩爾濃度為0.005的三羥基甲基甲烷鹽酸緩沖液，充分溶解，經(jīng)10000轉(zhuǎn)高速離心30分鐘，取上清液，用陰離子交換柱純化，收集活性組份，透析凍干，過(guò)分子篩進(jìn)一步純化，去除一些大分子及小分子，最后再經(jīng)陽(yáng)離子交換純化，得到分子量為2.5～3.5萬(wàn)的溶血因子、克癌因子、神經(jīng)生長(zhǎng)因子三種復(fù)合酶，藥品每只含量為0.25μg，一日一次，每次0.5μg，靜脈滴注，每盒10支*0.25μg。
上述的蝮蛇活肝酶的制備工藝，所述的陰離子交換采用陰離子交換柱，洗脫液用檸檬酸鈉溶液，其PH值為6.5～6.8，摩爾濃度為0.05，分子篩為凝膠過(guò)濾柱，洗脫液用碳酸氫鈉溶液，摩爾濃度為0.05，采用的陽(yáng)離子交換柱，洗脫液用醋酸鈉溶液，其PH值為5.8，摩爾濃度為0.02。
本發(fā)明的優(yōu)點(diǎn)在于1.本發(fā)明的蝮蛇活肝酶，徹底去除了蝮蛇毒中所含有的大量有害有毒物質(zhì)，保留了有效組分，其分子量嚴(yán)格控制在2.5萬(wàn)～3.5萬(wàn)之間，從而達(dá)到了用藥即安全、療效又高的目的。
2.本產(chǎn)品是從蝮蛇毒中提取的一種復(fù)合酶，經(jīng)離子交換、分子篩透析、凍干等技術(shù)制備而成，主要含有三種復(fù)合酶，其中一種酶具有生物活性，本復(fù)合酶經(jīng)體外、體內(nèi)試驗(yàn)表明，具有較強(qiáng)的殺死肝炎病毒及肝癌細(xì)胞的作用，并能抑制再生，而且還具有疏通微循環(huán)，改善肝細(xì)胞血液供應(yīng)，保護(hù)肝細(xì)胞等功能。該產(chǎn)品的問(wèn)世，是治療各種肝病的首選藥物。
3.本產(chǎn)品的制備工藝先進(jìn)，科學(xué)合理，并易于掌握。
實(shí)施例1蝮蛇活肝酶及其制備工藝，其組成包括復(fù)合酶，所述的復(fù)合酶是從蝮蛇蛇毒中提取而成，所述的復(fù)合酶包括溶血因子、克癌因子、神經(jīng)生長(zhǎng)因子，其重量份數(shù)為蝮蛇毒100。其制備工藝是按上述所述的重量份數(shù)取凍干蝮蛇毒并按1∶4的比例加入PH值為7.5，摩爾濃度為0.005的三羥甲基氨基甲烷鹽酸(Tris-HCl)緩沖液，充分溶解，經(jīng)10000轉(zhuǎn)高速離心30分鐘，取上清液，用陰離子交換柱純化，收集活性組份，透析凍干，過(guò)分子篩進(jìn)一步純化，去除一些大分子及小分子，最后再經(jīng)陽(yáng)離子交換純化，得到分子量為2.5萬(wàn)的溶血因子、克癌因子、神經(jīng)生長(zhǎng)因子三種復(fù)合酶，藥品每只含量為0.25μg，一日一次，每次0.5μg，靜脈滴注，每盒10支*0.25μg。
實(shí)施例2蝮蛇活肝酶及其制備工藝，其組成包括復(fù)合酶，所述的復(fù)合酶是從蝮蛇蛇毒中提取而成，所述的復(fù)合酶包括溶血因子、克癌因子、神經(jīng)生長(zhǎng)因子，其重量份數(shù)為蝮蛇毒100。其制備工藝是按上述所述的重量份數(shù)取凍干蝮蛇毒并按1∶4的比例加入PH值為7.5，摩爾濃度為0.005的三羥甲基氨基甲烷鹽酸(Tris-HCl)緩沖液，充分溶解，經(jīng)10000轉(zhuǎn)高速離心30分鐘，取上清液，用陰離子交換柱純化，收集活性組份，透析凍干，過(guò)分子篩進(jìn)一步純化，去除一些大分子及小分子，最后再經(jīng)陽(yáng)離子交換純化，得到分子量為3.5萬(wàn)的溶血因子、克癌因子、神經(jīng)生長(zhǎng)因子三種復(fù)合酶，藥品每只含量為0.25μg，一日一次，每次0.5μg，靜脈滴注，每盒10支*0.25μg。
實(shí)施例3蝮蛇活肝酶及其制備工藝，其組成包括復(fù)合酶，所述的復(fù)合酶是從蝮蛇蛇毒中提取而成，所述的復(fù)合酶包括溶血因子、克癌因子、神經(jīng)生長(zhǎng)因子，其重量份數(shù)為蝮蛇毒100。其制備工藝是按上述所述的重量份數(shù)取凍干蝮蛇毒并按1∶4的比例加入PH值為7.5，摩爾濃度為0.005的三羥甲基氨基甲烷鹽酸(Tris-HCl)緩沖液，充分溶解，經(jīng)10000轉(zhuǎn)高速離心30分鐘，取上清液，用陰離子交換柱純化，收集活性組份，透析凍干，過(guò)分子篩進(jìn)一步純化，去除一些大分子及小分子，最后再經(jīng)陽(yáng)離子交換純化，得到分子量為3萬(wàn)的溶血因子、克癌因子、神經(jīng)生長(zhǎng)因子三種復(fù)合酶，藥品每只含量為0.25μg，一日一次，每次0.5μg，靜脈滴注，每盒10支*0.25μg。
實(shí)施例4上述的蝮蛇活肝酶的制備工藝，所述的陰離子交換采用陰離子交換柱(DEAE-52纖維素柱)，洗脫液用檸檬酸鈉溶液，其PH值為6.5，摩爾濃度為0.05，分子篩為凝膠過(guò)濾柱(sephadex-75)，洗脫液用碳酸氫鈉(NaHCO3)溶液，摩爾濃度為0.05，采用的陽(yáng)離子交換柱(CM Sepharose C1-6B)，洗脫液用醋酸鈉溶液，其PH值為5.8，摩爾濃度為0.02。
實(shí)施例5上述的蝮蛇活肝酶的制備工藝，所述的陰離子交換采用陰離子交換柱(DEAE-52纖維素柱)，洗脫液用檸檬酸鈉溶液，其PH值為6.8，摩爾濃度為0.05，分子篩為凝膠過(guò)濾柱(sephadex-75)，洗脫液用碳酸氫鈉(NaHCO3)溶液，摩爾濃度為0.05，采用的陽(yáng)離子交換柱(CM Sepharose C1-6B)，洗脫液用醋酸鈉溶液，其PH值為5.8，摩爾濃度為0.02。
實(shí)施例6上述的蝮蛇活肝酶的制備工藝，所述的陰離子交換采用陰離子交換柱(DEAE-52纖維素柱)，洗脫液用檸檬酸鈉溶液，其PH值為6.6，摩爾濃度為0.05，分子篩為凝膠過(guò)濾柱(sephadex-75)，洗脫液用碳酸氫鈉(NaHCO3)溶液，摩爾濃度為0.05，采用的陽(yáng)離子交換柱(CM Sepharose C1-6B)，洗脫液用醋酸鈉溶液，其PH值為5.8，摩爾濃度為0.02。
權(quán)利要求
1.一種蝮蛇活肝酶，其組成包括復(fù)合酶，其特征是所述的復(fù)合酶是從蝮蛇蛇毒中提取而成，所述的復(fù)合酶為溶血因子、克癌因子、神經(jīng)生長(zhǎng)因子的混合物。
2.一種根據(jù)權(quán)利要求1所述的蝮蛇活肝酶的制備工藝，其特征是按上述所述的重量份數(shù)取凍干蝮蛇毒并按1∶4的比例加入PH值為7.5，摩爾濃度為0.005的三羥甲基氨基甲烷鹽酸緩沖液，充分溶解，經(jīng)10000轉(zhuǎn)高速離心30分鐘，取上清液，用陰離子交換柱純化，收集活性組份，透析凍干，過(guò)分子篩進(jìn)一步純化，去除一些大分子及小分子，最后再經(jīng)陽(yáng)離子交換純化，得到分子量為2.5～3.5萬(wàn)的溶血因子、克癌因子、神經(jīng)生長(zhǎng)因子三種復(fù)合酶的混合物。
3.根據(jù)權(quán)利要求2所述的蝮蛇活肝酶的制備工藝，其特征是所述的陰離子交換采用陰離子交換柱，洗脫液用檸檬酸鈉溶液，其PH值為6.5～6.8，摩爾濃度為0.05，分子篩為凝膠過(guò)濾柱，洗脫液用碳酸氫鈉溶液，摩爾濃度為0.05，采用的陽(yáng)離子交換柱，洗脫液用醋酸鈉溶液，其PH值為5.8，摩爾濃度為0.02。
全文摘要
蝮蛇活肝酶及其制備工藝。蛇毒有液體黃金之稱，醫(yī)用價(jià)值早有報(bào)道，從事蛇毒研究的國(guó)內(nèi)外科研機(jī)構(gòu)較多。由于蛇毒成分復(fù)雜，中國(guó)科學(xué)家從上世紀(jì)六十年代就開(kāi)始對(duì)蛇毒進(jìn)行了系統(tǒng)的研究，最近才發(fā)現(xiàn)對(duì)病毒性肝炎及肝硬化等有較好的療效，而蛇毒因含有對(duì)人體有害的神經(jīng)毒和出血毒，如不能充分去除，會(huì)給人體造成危害，并且由于其成分單一，也會(huì)影響療效，而且因其分子量太大，會(huì)給用藥者帶來(lái)不安全隱患。蝮蛇活肝酶，其組成包括復(fù)合酶，所述的復(fù)合酶是從蝮蛇蛇毒中提取而成，所述的復(fù)合酶為溶血因子、克癌因子、神經(jīng)生長(zhǎng)因子的混合物。本產(chǎn)品用于治療各種類(lèi)型肝炎及肝癌。
文檔編號(hào)C12N9/00GK1673363SQ20041001363
公開(kāi)日2005年9月28日 申請(qǐng)日期2004年3月23日 優(yōu)先權(quán)日2004年3月23日
發(fā)明者王旺新, 趙鳳和 申請(qǐng)人:郭秀華