專利名稱：卡他摩拉氏菌選擇性培養(yǎng)基的制作方法
技術(shù)領(lǐng)域：
本發(fā)明涉及到檢測人類呼吸道感染常見致病菌之一的卡他摩拉氏菌的一種培養(yǎng)基。
當(dāng)前國內(nèi)通常采用血液瓊脂培養(yǎng)基檢測卡他摩拉氏菌?？ㄋ暇c呼吸道正常寄生的奈瑟氏菌特征很相似，在血液瓊脂培養(yǎng)基上不易辨認，檢出率很低。據(jù)國外報道，Soto Hernandez JL利用卡他摩拉氏菌DNA酶陽性的生化特性，用DNA酶試驗瓊脂、萬古霉素、TMP、兩性霉素B、甲苯胺蘭O配方制成選擇性培養(yǎng)基，獲得較好的分離卡他摩拉氏菌效果，但是標(biāo)本接種到該培養(yǎng)基后需要在5％CO2環(huán)境下培養(yǎng)48小時以后再加甲苯胺蘭O，15分鐘內(nèi)觀察菌落顏色，選擇出DNA酶陽性的卡他摩拉氏菌，這種培養(yǎng)基檢測時間長，方法較繁雜，檢出率高。Vaneechoutte--M以組織浸出液瓊脂加綿羊血為基礎(chǔ)瓊脂，加萬古霉素，TMP、兩性霉素B、乙酰唑胺，這種培養(yǎng)基能抑制大部分奈瑟氏菌和酵母桿菌及其他雜菌生長，但未被抑制的奈瑟氏菌與卡他摩拉氏菌沒有明顯區(qū)別特征，而且組織浸出液制備較繁，國內(nèi)僅科研單位實驗室應(yīng)用，在全國中小實驗室難以推廣。
本發(fā)明的目的在于研制出一種取材方便，配制簡單，成本低，適合國內(nèi)大中小實驗室應(yīng)用，卡他摩拉氏菌檢出率達到國外先進水平的培養(yǎng)基。
本發(fā)明通過以下方式實現(xiàn)卡他摩拉氏菌選擇性培養(yǎng)基，利用不同細菌對各種化學(xué)物質(zhì)的敏感性不同的特性，選用多種有利于卡他摩拉氏菌生長的材料，加入能抑制其他細菌生長，特別是抑制奈瑟氏菌生長的材料，經(jīng)過嚴(yán)格控制配方優(yōu)化組合而成。選用新鮮牛肉浸液瓊脂為基礎(chǔ)營養(yǎng)，加入碳酸酐酶抑制劑----乙酰唑胺，抑制大部分奈瑟氏菌生長，加入葡萄糖，中性紅指示劑，使未被抑制的奈瑟氏菌菌落呈現(xiàn)紅色，以便與卡他摩拉氏菌落相區(qū)別，加入可溶性淀粉，降低培養(yǎng)基的毒性，加入萬古霉素，抑制其他雜菌生長。
本發(fā)明的技術(shù)內(nèi)容是各種成份的含量分別為瓊脂1.5g～2.5g，新鮮牛肉浸液80ml～100ml，葡萄糖0.8g～1g，中性紅0.5ml～0.8ml，可溶性淀粉0.5g～0.7g，乙酰唑胺0.8mg～1mg，萬古霉素1mg～1.3mg。
本發(fā)明的優(yōu)點在于a．新鮮牛肉浸液取材容易，制備簡單；b．未被抑制的奈瑟氏菌與卡他摩拉氏菌有明顯的區(qū)別特征；c．卡他摩拉氏菌生長良好，檢出率高。
實施例首先放入新鮮牛肉浸液100ml，加瓊脂2g，再依次加入葡萄糖1g，中性紅0.6ml，可溶性淀粉0.5g，經(jīng)過充分攪拌勻之后組成基礎(chǔ)培養(yǎng)基，然后再加入乙酰唑胺0.8mg，萬古霉素1.2mg攪拌勻，將PH值調(diào)至7.2，這樣卡他摩拉氏菌選擇性培養(yǎng)基就制成了。
權(quán)利要求
1．一種主要由瓊脂、乙酰唑胺、萬古霉素組成的卡他摩拉氏菌選擇性培養(yǎng)基，其特征在于在其中加入了作為基礎(chǔ)營養(yǎng)的新鮮牛肉浸液，還加入了使奈瑟氏菌菌落呈紅色的葡萄糖和中性紅指示劑以及降低培養(yǎng)基毒性的可溶性淀粉，各種成份的含量分別為瓊酯1.5g～2.5g，新鮮牛肉浸液80ml～100ml，葡萄糖0.8g～1g，中性紅0.5ml～0.8ml，可溶性淀粉0.5g～0.7g，乙酰唑胺0.8mg～1mg，萬古霉素1mg～1.3mg。
2．根據(jù)權(quán)利要求1所述的培養(yǎng)基，其特征在于各種成份的優(yōu)化含量分別為瓊脂2g，新鮮牛肉浸液100ml，葡萄糖1g，中性紅指示劑0.6ml，可溶性淀粉0.5g，乙酰唑胺0.8mg，萬古霉素1.2mg。
全文摘要
一種用于檢測呼吸道感染的卡他摩拉氏菌選擇性培養(yǎng)基,選用新鮮牛肉浸液瓊脂、葡萄糖、中性紅、可溶性淀粉為基礎(chǔ)培養(yǎng)基,加入乙酰唑胺抑制奈瑟氏菌生長,加入萬古霉素抑制其他雜菌生長。其特點是卡他摩拉氏菌檢出率高,原材料來源廣,取材方便,制作簡單,成本低,適合于國內(nèi)外大中小型實驗室應(yīng)用。
文檔編號C12Q1/04GK1298950SQ0011354
公開日2001年6月13日 申請日期2000年7月14日 優(yōu)先權(quán)日2000年7月14日
發(fā)明者劉友生, 嚴(yán)基寬, 吳真祥, 劉登元 申請人:湖南省邵陽市中心醫(yī)院