一種抗當(dāng)歸麻口病的中藥提取物及其應(yīng)用
【技術(shù)領(lǐng)域】
[0001]本發(fā)明涉及一種中藥提取物，具體涉及一種具有抗當(dāng)歸麻口病活性的中藥提取物及其應(yīng)用。
【背景技術(shù)】
[0002]當(dāng)歸(Angelica sinensis)為多年生草本植物，屬傘形科植物，以根入藥，藥用歷史悠久，為我國(guó)名貴中藥材，在中醫(yī)婦科臨床素有十方九歸之稱。當(dāng)歸性甘、辛、溫，歸肝、心、脾經(jīng)，具補(bǔ)血活血，調(diào)經(jīng)止痛，潤(rùn)腸通便之功效。主要含有揮發(fā)油及水溶性成分，臨床上主要用于血虛萎黃、眩暈心悸、月經(jīng)不調(diào)、經(jīng)閉痛經(jīng)、虛寒腹痛、腸燥便秘、風(fēng)濕痹痛等病癥的治療。當(dāng)歸主產(chǎn)于我國(guó)甘肅、云南、四川、山西、湖北等地，有岷歸(甘肅岷縣)，云歸(云南)，川歸(四川)之分。
[0003]在當(dāng)歸藥材的主產(chǎn)區(qū)，麻口病發(fā)病率較高，已成為當(dāng)歸藥材生產(chǎn)中的主要病害，導(dǎo)致當(dāng)歸藥材品質(zhì)低劣，大幅減產(chǎn)。往年的大田試驗(yàn)調(diào)查發(fā)現(xiàn)，當(dāng)歸麻口病田間發(fā)病率一般為84.8%，病指數(shù)為56.4%，嚴(yán)重的高達(dá)100%。當(dāng)歸麻口病主要發(fā)生在“成藥期”，癥狀在病株地上部分不明顯，主要表現(xiàn)在根部。根部變褐、變麻、裂口，其皮層呈現(xiàn)海綿糠腐狀。現(xiàn)代研究表明，麻口病是由腐爛莖線蟲所引起的一種蟲害。
[0004]目前當(dāng)歸麻口病的防治方法主要包括農(nóng)業(yè)防治、物理防治及化學(xué)防治等，然而在實(shí)際生產(chǎn)中主要采用化學(xué)農(nóng)藥進(jìn)行防治，其中有機(jī)磷類殺蟲劑，如神農(nóng)丹、滅線磷、克線丹等被廣泛用于麻口病的防治，結(jié)果導(dǎo)致藥材中農(nóng)藥殘留過高，環(huán)境污染嚴(yán)重。此外，這些藥劑的長(zhǎng)期大量使用導(dǎo)致線蟲對(duì)農(nóng)藥產(chǎn)生抗性，使之更加難于除治，防治效果欠佳。
[0005]因此，研制開發(fā)一種高效、低毒、低殘留、低成本而又方便使用的生物型殺線蟲劑成為當(dāng)前的迫切需要。本發(fā)明通過從一系列中藥材提取物中篩選抗線蟲的有效物質(zhì)，以期達(dá)到安全、有效防治當(dāng)歸麻口病的目的。

【發(fā)明內(nèi)容】

[0006]發(fā)明目的:本發(fā)明的目的在于充分利用中藥資源，通過大量實(shí)驗(yàn)篩選抗當(dāng)歸麻口病活性的中藥及其提取物，本發(fā)明以土槿皮、苦參、檳榔或花椒為中藥材原料，綠色環(huán)保，成本低，活性強(qiáng)，具有重要的環(huán)境保護(hù)意義。
[0007]技術(shù)方案:為了實(shí)現(xiàn)以上目的，本發(fā)明采取的技術(shù)方案為:
[0008]—種抗當(dāng)歸麻口病的中藥提取物，它為土槿皮、苦參、檳榔或花椒的提取物。
[0009]作為優(yōu)選方案，以上所述的抗當(dāng)歸麻口病的中藥提取物，它由土槿皮、苦參、檳榔或花椒為原藥材，采用石油醚、乙酸乙酯、正丁醇、乙醇或水的提取得到。
[0010]作為更加優(yōu)選方案，以上所述的抗當(dāng)歸麻口病的中藥提取物，提取方法為回流提取法，超聲提取法，連續(xù)回流提取法，提取次數(shù)為1?3次，每次0.5?2小時(shí)。
[0011 ] 本發(fā)明所述的抗當(dāng)歸麻口病的中藥提取物在制備抗當(dāng)歸麻口病農(nóng)藥制劑中的應(yīng)用。
[0012]抗腐爛莖線蟲活性篩選實(shí)驗(yàn)
[0013]一、抗腐爛莖線蟲活性的中藥篩選實(shí)驗(yàn)
[0014]1、實(shí)驗(yàn)方法
[0015]采用不同中藥材提取物的二甲基亞砜(DMS0)溶液與線蟲溶液共培養(yǎng)直接觸殺法。
[0016]精確稱取各藥材乙醇回流提取物10mg，分別溶于DMS0中制成樣品母液。試驗(yàn)時(shí)以DMS0稀釋成終濃度為500 μ g/mL的試液進(jìn)行觸殺活性測(cè)定。吸取適量線蟲懸浮液分別注入96孔細(xì)胞培養(yǎng)板的樣品孔內(nèi)，每孔含線蟲約20?40條，補(bǔ)充無菌水至總體積300 μ L，每處理設(shè)3組重復(fù)，分別以加入相應(yīng)濃度的DMS0和無菌水作為對(duì)照。25°C分別培養(yǎng)3d、7d后進(jìn)行線蟲死亡與存活情況的統(tǒng)計(jì)。計(jì)算公式如下:
[0017]線蟲死亡率(％ )=(死亡線蟲數(shù)/供試線蟲數(shù))X 100%
[0018]線蟲校正死亡率(％ )=(處理組線蟲死亡率-對(duì)照組線蟲死亡率)/(1 -對(duì)照組死亡率)X 100%
[0019]2、實(shí)驗(yàn)結(jié)果
[0020]通過考察幾十種不同中藥材乙醇回流提取物對(duì)腐爛莖線蟲的觸殺情況，結(jié)果表明，共培養(yǎng)3d后，4種藥材提取物(土槿皮、苦參、檳榔、花椒)對(duì)線蟲的致死率超過80%，其中檳榔提取物對(duì)線蟲的致死效果最好，致死率高達(dá)85.8% ;共培養(yǎng)7天后，4種藥材提取物對(duì)線蟲的致死率及校正致死率均超過90%，對(duì)線蟲的觸殺作用效果顯著，如圖1所示。
[0021]二、檳榔不同提取部位抗腐爛莖線蟲活性篩選實(shí)驗(yàn)
[0022]基于上述研究結(jié)果，本發(fā)明采用石油醚、乙酸乙酯、正丁醇、水等不同溶劑進(jìn)行檳榔的提取，將各提取部位濃縮至干，分別溶于DMS0中制成終濃度為500 μ g/mL的試液進(jìn)行線蟲觸殺活性檢測(cè)，結(jié)果表明(如圖2)，檳榔水提取部位對(duì)線蟲的致死效果最強(qiáng)，在共培養(yǎng)第3天時(shí)，致死率就達(dá)到了 95.8 %。
[0023]此外，本發(fā)明還考察了不同濃度的檳榔水提物對(duì)當(dāng)歸麻口病線蟲的觸殺作用，如圖3實(shí)驗(yàn)結(jié)果表明，隨著檳榔水提物濃度的提高，其觸殺作用增強(qiáng)，當(dāng)檳榔水提物的濃度達(dá)到125 μ g/mL，與當(dāng)歸麻口病線蟲共培養(yǎng)5天時(shí)，其對(duì)當(dāng)歸麻口病線蟲的致死率可達(dá)到81.9%，共培養(yǎng)7天時(shí)其對(duì)當(dāng)歸麻口病線蟲的致死率可高達(dá)97.2%，顯示出了很好的抗當(dāng)歸麻口病的活性。
[0024]有益效果:本發(fā)明提供的抗當(dāng)歸麻口病的中藥提取物具有以下優(yōu)點(diǎn):
[0025]本發(fā)明通過大量實(shí)驗(yàn)篩選幾十種中藥材抗當(dāng)歸麻口病的活性，優(yōu)選出具有明顯抗當(dāng)歸麻口病活性的4味中藥材(土槿皮、苦參、檳榔或花椒)，同時(shí)本發(fā)明篩選了不同溶劑檳榔提取物的抗當(dāng)歸麻口病的活性，結(jié)果表明，檳榔水提取物具有最好的抗當(dāng)歸麻口病的活性。本發(fā)明充分利用中藥資源，優(yōu)選土槿皮、苦參、檳榔或花椒為原料，制備得到的提取物可以用于制備綠色環(huán)保、高效、低毒的抗當(dāng)歸麻口病的生物農(nóng)藥，具有重要的環(huán)境保護(hù)意義和經(jīng)濟(jì)價(jià)值，值得推廣和應(yīng)用。
【附圖說明】
[0026]圖1是四種藥材乙醇提取物對(duì)腐爛莖線蟲觸殺作用的柱狀圖。
[0027]圖2是檳榔不同提取部位對(duì)腐爛莖線蟲觸殺作用的柱狀圖。
[0028]圖3是檳榔不同濃度的水提物對(duì)腐爛莖線蟲觸殺作用的柱狀圖。
【具體實(shí)施方式】
[0029]下面結(jié)合具體實(shí)施例進(jìn)一步闡明本發(fā)明，應(yīng)理解這些實(shí)施例僅用于說明本發(fā)明而不用于限制本發(fā)明的范圍，在閱讀了本發(fā)明之后，本領(lǐng)域技術(shù)人員對(duì)本發(fā)明的各種等價(jià)形式的修改均落于本申請(qǐng)所附權(quán)利要求所限定的范圍。
[0030]實(shí)施例1
[0031]—種抗當(dāng)歸麻口病的中藥提取物，取檳榔原藥材，加入檳榔藥材重量10倍體積的水，回流提取3次，每次1小時(shí)，濃縮得到抗當(dāng)歸麻口病活性的檳榔提取物。
[0032]實(shí)施例2
[0033]—種抗當(dāng)歸麻口病的中藥提取物，取檳榔原藥材，加入檳榔藥材重量8倍體積的乙酸乙酯，回流提取2次，每次2小時(shí)，濃縮得到抗當(dāng)歸麻口病活性的檳榔提取物。
[0034]實(shí)施例3
[0035]—種抗當(dāng)歸麻口病的中藥提取物，取檳榔原藥材，加入檳榔藥材重量12倍體積的正丁醇，連續(xù)回流提取3次，每次1小時(shí)，濃縮得到抗當(dāng)歸麻口病活性的檳榔提取物。
[0036]實(shí)施例4
[0037]—種抗當(dāng)歸麻口病的中藥提取物，取檳榔原藥材，加入檳榔藥材重量8倍體積的石油醚，連續(xù)回流提取2次，每次2小時(shí)，濃縮得到抗當(dāng)歸麻口病活性的檳榔提取物。
[0038]實(shí)施例5
[0039]—種抗當(dāng)歸麻口病的中藥提取物，取土槿皮原藥材，加入土槿皮藥材重量10倍體積的水，回流提取3次，每次1小時(shí)，濃縮得到抗當(dāng)歸麻口病活性的土槿皮提取物。
[0040]實(shí)施例6
[0041]—種抗當(dāng)歸麻口病的中藥提取物，取苦參原藥材，加入苦參藥材重量10倍體積的水，回流提取2次，每次2小時(shí)，濃縮得到抗當(dāng)歸麻口病活性的苦參提取物。
[0042]實(shí)施例7
[0043]—種抗當(dāng)歸麻口病的中藥提取物，取花椒原藥材，加入花椒藥材重量10倍體積的石油醚，回流提取3次，每次1小時(shí)，濃縮得到抗當(dāng)歸麻口病活性的花椒提取物。
[0044]采用本發(fā)明實(shí)施例1?7制備得到的抗當(dāng)歸麻口病的中藥提取物，加入助劑制成乳油、懸浮劑、可濕性粉劑、粉劑、粒劑、水劑、母液或母粉等農(nóng)業(yè)制劑。
[0045]以上所述僅是本發(fā)明的優(yōu)選實(shí)施方式，應(yīng)當(dāng)指出，對(duì)于本技術(shù)領(lǐng)域的普通技術(shù)人員來說，在不脫離本發(fā)明原理的前提下，還可以做出若干改進(jìn)和潤(rùn)飾，這些改進(jìn)和潤(rùn)飾也應(yīng)視為本發(fā)明的保護(hù)范圍。
【主權(quán)項(xiàng)】
1.一種抗當(dāng)歸麻口病的中藥提取物，其特征在于，它為土槿皮、苦參、檳榔或花椒的提取物。2.根據(jù)權(quán)利要求1所述的抗當(dāng)歸麻口病的中藥提取物，其特征在于，它由土槿皮、苦參、檳榔或花椒為原藥材，采用石油醚、乙酸乙酯、正丁醇、乙醇或水的提取得到。3.根據(jù)權(quán)利要求2所述的抗當(dāng)歸麻口病的中藥提取物，其特征在于，提取方法為回流提取法，超聲提取法，連續(xù)回流提取法，提取次數(shù)為1?3次，每次0.5?2小時(shí)。4.權(quán)利要求1至3任一項(xiàng)所述的抗當(dāng)歸麻口病的中藥提取物在制備抗當(dāng)歸麻口病農(nóng)藥制劑中的應(yīng)用。5.—種農(nóng)藥制劑，其特征在于，它由權(quán)利要求1至3任一項(xiàng)所述的抗當(dāng)歸麻口病的中藥提取物和助劑制成乳油、懸浮劑、粉劑、粒劑、水劑、母液或母粉農(nóng)業(yè)制劑。
【專利摘要】本發(fā)明公開了一種抗當(dāng)歸麻口病的中藥提取物，它為土槿皮、苦參、檳榔或花椒的提取物。本發(fā)明通過大量實(shí)驗(yàn)篩選幾十種中藥材抗當(dāng)歸麻口病的活性，優(yōu)選出具有明顯抗當(dāng)歸麻口病活性的4味中藥材(土槿皮、苦參、檳榔或花椒)，同時(shí)本發(fā)明篩選了不同溶劑檳榔提取物的抗當(dāng)歸麻口病的活性，結(jié)果表明，檳榔水提取物具有最好的抗當(dāng)歸麻口病的活性。本發(fā)明充分利用中藥資源，優(yōu)選土槿皮、苦參、檳榔或花椒為原料，制備得到的提取物可以用于制備綠色環(huán)保、高效、低毒的抗當(dāng)歸麻口病的生物農(nóng)藥，具有重要的環(huán)境保護(hù)意義和經(jīng)濟(jì)價(jià)值，值得推廣和應(yīng)用。
【IPC分類】A01P5/00, A01N65/40
【公開號(hào)】CN105284937
【申請(qǐng)?zhí)枴緾N201510860153
【發(fā)明人】江曙, 段金廒, 錢大瑋, 楊念云, 嚴(yán)輝
【申請(qǐng)人】南京中醫(yī)藥大學(xué)
【公開日】2016年2月3日
【申請(qǐng)日】2015年11月30日