本發(fā)明屬于黃檀無性繁殖技術(shù)，涉及一種黃檀組培苗生根誘導(dǎo)方法。

背景技術(shù)：

黃檀（Dalbergia hupeana Hance），豆科，別名：不知春、望水檀、檀樹等，喬木，高10-20米，樹皮暗灰色，呈薄片狀剝落，產(chǎn)山東、江蘇、安徽、浙江、江西、福建、湖北、湖南、廣東、廣西、四川、貴州、云南，海拔600-1400米，平原及山區(qū)均可生長，喜光，耐干旱瘠薄，不擇土壤，但以在深厚濕潤排水良好的土壤生長較好，忌鹽堿地；深根性，萌芽力強(qiáng)，生于山地林中或灌叢中，山溝溪旁及有小樹林的坡地常見，其根皮，夏、秋季采挖，味辛、苦，行平，小毒，具有清熱解毒、止血消腫之功效，主治瘡疥療毒、毒蛇咬傷、細(xì)菌性痢疾、跌打損傷等，民間用于治療急慢性肝炎、肝硬化腹水。

目前，黃檀常見的種植方式為播種育苗。組織培養(yǎng)技術(shù)是一種快速無性繁殖技術(shù)，選擇黃檀優(yōu)良家系或者無性系為材料，通過組織培養(yǎng)方法繁殖苗木，既可以滿足生產(chǎn)上的數(shù)量要求，又可保持母本性狀。然而在組培過程中，常常出現(xiàn)生根率低、生根不統(tǒng)一、根系數(shù)量少以及根系不粗壯的問題。

技術(shù)實現(xiàn)要素：

本發(fā)明的目的在于提供一種能提高黃檀組培苗的生根率，根系數(shù)量以及根系萌發(fā)整齊度的黃檀組培苗生根誘導(dǎo)方法。

為了實現(xiàn)上述發(fā)明目的，本發(fā)明的技術(shù)方案如下：

一種黃檀組培苗生根誘導(dǎo)方法，選取增殖繼代黃檀小苗，先進(jìn)行預(yù)生根培養(yǎng)，然后再進(jìn)行生根培養(yǎng)，置于適宜環(huán)境中培養(yǎng)，獲得帶根組培苗，主要操作步驟如下：

（1）取材：選取經(jīng)常規(guī)組培中壯芽培養(yǎng)35～40d的黃檀繼代芽，消毒瓶子外表后，在超凈工作臺上的無菌空間內(nèi)，選取繼代芽叢中生長健壯、高度1～2cm的單芽，于節(jié)下2～3mm處剪切，清除基部葉片和葉柄，備用；

（2）預(yù)生根培養(yǎng)：將步驟（1）修剪后的單芽接種于預(yù)生根培養(yǎng)基中,在特定的光溫環(huán)境中進(jìn)行預(yù)生根培養(yǎng)；

（3）生根培養(yǎng)：待步驟（2）中的單芽經(jīng)過30～35d預(yù)生根培養(yǎng)后，將單芽轉(zhuǎn)接入生根培養(yǎng)基，在特定的光溫環(huán)境中進(jìn)行生根培養(yǎng)。

以上所述的預(yù)生根培養(yǎng)基其原料含量為：1/2改良ER培養(yǎng)基+NAA 1.0～2.0mg/L+維生素C 6g/L++VC 1.0～2.0mg/L +卡拉膠25g/L+瓊脂5.0g/L。

以上所述的生根培養(yǎng)基其原料含量為：1/2改良ER培養(yǎng)基+IAA 1.0～2.0mg/L+ABT1#0.5～2.0 mg/L+蔗糖25g/L+瓊脂5.0g/L。

以上所述的改良ER培養(yǎng)基的配方為：NH₄NO₃ 1150mg/L + KNO₃ 1600mg/L + CaCl₂.2H₂O 440mg/L + MgSO_4..7H₂O 370mg/L + KH₂PO₄ 340mg/L + H₃BO₃ 0.63mg/L + MnSO_4..4H₂O 22.3mg/L + ZnSO₄.4H₂O 8.64H₂Omg/L + Na₂MoO₄.H₂O 0.025mg/L + CuSO_4..5H₂O 0.0025mg/L + CoCl₂.6H₂O 0.0025mg/L + FeSO₄ 27.8mg/L + NaEDTA 37.3mg/L + 肌醇 50mg/L + 煙酸 0.5mg/L + 鹽酸吡哆醇 0.5mg/L + 甘氨酸 2mg/L。

以上步驟（2）和步驟（3）所述的光溫環(huán)境為：溫度20±1℃，濕度55～70%，光照強(qiáng)度2000～2500lux，光照15～16h/d。

本發(fā)明具有的優(yōu)點及有益效果如下：

1、本發(fā)明采用1/2改良ER培養(yǎng)基作為基本培養(yǎng)基，同時重點調(diào)整了與黃檀生根的相關(guān)的微量元素和有機(jī)成分，使得培養(yǎng)基更科學(xué)，更有針對性，更易促使黃檀繼代芽生根，效果顯著。

2、本發(fā)明在生根誘導(dǎo)前采用低濃度NAA和抗壞血酸（VC）對繼代單芽進(jìn)行預(yù)生根培養(yǎng)，然后再進(jìn)行生根培養(yǎng)，可使組培苗發(fā)根統(tǒng)一，發(fā)根速度快，根系粗壯且數(shù)量較多。

3、本發(fā)明在增殖繼代單芽經(jīng)過30～35d時間預(yù)生根培養(yǎng)后轉(zhuǎn)入生根培養(yǎng)，即可達(dá)到預(yù)生根培養(yǎng)效果，又避免了小苗在預(yù)生根培養(yǎng)階段長出根系而使后期生根培養(yǎng)發(fā)根不整齊。

4、本發(fā)明的在特定的光溫條件下進(jìn)行預(yù)生根和生根培養(yǎng)，適應(yīng)黃檀組培苗的生長特性，促進(jìn)苗木的生長。

5、本發(fā)明縮短了黃檀繼代芽生根周期，生根率高，根系多，質(zhì)量好，生根組培苗移栽成活率高，可實現(xiàn)黃檀組培產(chǎn)業(yè)化育苗，為人工無性系林的建設(shè)提供優(yōu)質(zhì)種苗，具有較好的經(jīng)濟(jì)效益、社會效益和生態(tài)效益。

具體實施方式

下面結(jié)合實施例對本發(fā)明作進(jìn)一步說明。

實施例1：

選取經(jīng)常規(guī)組培中壯芽培養(yǎng)35～40d的黃檀繼代芽，消毒瓶子外表后，在超凈工作臺上的無菌空間內(nèi)，選取繼代芽叢中生長健壯、高度1～2cm的單芽，于節(jié)下2～3mm處剪切，清除基部葉片和葉柄。將修剪后的單芽接種于預(yù)生根培養(yǎng)基中, 所述的預(yù)生根培養(yǎng)基其原料含量為：1/2改良ER培養(yǎng)基+NAA 1.0mg/L+維生素C 6g/L++VC 2.0mg/L +卡拉膠25g/L+瓊脂5.0g/L，在溫度20±1℃，濕度55～60%，光照強(qiáng)度2000lux，光照16h/d的環(huán)境中進(jìn)行預(yù)生根培養(yǎng)。待單芽經(jīng)過30～35d預(yù)生根培養(yǎng)后，將單芽轉(zhuǎn)接入生根培養(yǎng)基，所述的生根培養(yǎng)基其原料含量為：1/2改良ER培養(yǎng)基+IAA 1.0mg/L+ABT1#0.5 mg/L+蔗糖25g/L+瓊脂5.0g/L，在溫度20±1℃，濕度55～60%，光照強(qiáng)度2000lux，光照16h/d環(huán)境中進(jìn)行生根培養(yǎng)。培養(yǎng)15-20d，90%以上的單芽長出根系。

以上所述的改良ER培養(yǎng)基的配方為：NH₄NO₃ 1150mg/L + KNO₃ 1600mg/L + CaCl₂.2H₂O 440mg/L + MgSO_4..7H₂O 370mg/L + KH₂PO₄ 340mg/L + H₃BO₃ 0.63mg/L + MnSO_4..4H₂O 22.3mg/L + ZnSO₄.4H₂O 8.64H₂Omg/L + Na₂MoO₄.H₂O 0.025mg/L + CuSO_4..5H₂O 0.0025mg/L + CoCl₂.6H₂O 0.0025mg/L + FeSO₄ 27.8mg/L + NaEDTA 37.3mg/L + 肌醇 50mg/L + 煙酸 0.5mg/L + 鹽酸吡哆醇 0.5mg/L + 甘氨酸 2mg/L。

實施例2：

選取經(jīng)常規(guī)組培中壯芽培養(yǎng)35～40d的黃檀繼代芽，消毒瓶子外表后，在超凈工作臺上的無菌空間內(nèi)，選取繼代芽叢中生長健壯、高度1～2cm的單芽，于節(jié)下2～3mm處剪切，清除基部葉片和葉柄。將修剪后的單芽接種于預(yù)生根培養(yǎng)基中, 所述的預(yù)生根培養(yǎng)基其原料含量為：1/2改良ER培養(yǎng)基+NAA 1.5mg/L+維生素C 6g/L++VC 1.0mg/L +卡拉膠25g/L+瓊脂5.0g/L，在溫度20±1℃，濕度60～65%，光照強(qiáng)度2000lux，光照15h/d的環(huán)境中進(jìn)行預(yù)生根培養(yǎng)。待單芽經(jīng)過30～35d預(yù)生根培養(yǎng)后，將單芽轉(zhuǎn)接入生根培養(yǎng)基，所述的生根培養(yǎng)基其原料含量為：1/2改良ER培養(yǎng)基+IAA 1.5mg/L+ABT1#1.0 mg/L+蔗糖25g/L+瓊脂5.0g/L，在溫度20±1℃，濕度60～65%，光照強(qiáng)度2000lux，光照15h/d的環(huán)境中進(jìn)行生根培養(yǎng)。培養(yǎng)15-20d，90%以上的單芽長出根系。

以上所述的改良ER培養(yǎng)基的配方為：NH₄NO₃ 1150mg/L + KNO₃ 1600mg/L + CaCl₂.2H₂O 440mg/L + MgSO_4..7H₂O 370mg/L + KH₂PO₄ 340mg/L + H₃BO₃ 0.63mg/L + MnSO_4..4H₂O 22.3mg/L + ZnSO₄.4H₂O 8.64H₂Omg/L + Na₂MoO₄.H₂O 0.025mg/L + CuSO_4..5H₂O 0.0025mg/L + CoCl₂.6H₂O 0.0025mg/L + FeSO₄ 27.8mg/L + NaEDTA 37.3mg/L + 肌醇 50mg/L + 煙酸 0.5mg/L + 鹽酸吡哆醇 0.5mg/L + 甘氨酸 2mg/L。

實施例3：

選取經(jīng)常規(guī)組培中壯芽培養(yǎng)35～40d的黃檀繼代芽，消毒瓶子外表后，在超凈工作臺上的無菌空間內(nèi)，選取繼代芽叢中生長健壯、高度1～2cm的單芽，于節(jié)下2～3mm處剪切，清除基部葉片和葉柄。將修剪后的單芽接種于預(yù)生根培養(yǎng)基中, 所述的預(yù)生根培養(yǎng)基其原料含量為：1/2改良ER培養(yǎng)基+NAA 2.0mg/L+維生素C 6g/L++VC 1.5mg/L +卡拉膠25g/L+瓊脂5.0g/L，在溫度20±1℃，濕度65～70%，光照強(qiáng)度2500lux，光照15h/d的環(huán)境中進(jìn)行預(yù)生根培養(yǎng)。待單芽經(jīng)過30～35d預(yù)生根培養(yǎng)后，將單芽轉(zhuǎn)接入生根培養(yǎng)基，所述的生根培養(yǎng)基其原料含量為：1/2改良ER培養(yǎng)基+IAA 2.0mg/L+ABT1#2.0 mg/L+蔗糖25g/L+瓊脂5.0g/L，在溫度20±1℃，濕度65～70%，光照強(qiáng)度2500lux，光照15h/d的環(huán)境中進(jìn)行生根培養(yǎng)。培養(yǎng)15-20d，90%以上的單芽長出根系。

以上所述的改良ER培養(yǎng)基的配方為：NH₄NO₃ 1150mg/L + KNO₃ 1600mg/L + CaCl₂.2H₂O 440mg/L + MgSO_4..7H₂O 370mg/L + KH₂PO₄ 340mg/L + H₃BO₃ 0.63mg/L + MnSO_4..4H₂O 22.3mg/L + ZnSO₄.4H₂O 8.64H₂Omg/L + Na₂MoO₄.H₂O 0.025mg/L + CuSO_4..5H₂O 0.0025mg/L + CoCl₂.6H₂O 0.0025mg/L + FeSO₄ 27.8mg/L + NaEDTA 37.3mg/L + 肌醇 50mg/L + 煙酸 0.5mg/L + 鹽酸吡哆醇 0.5mg/L + 甘氨酸 2mg/L。