1.一種促進(jìn)筍蘭高效繁殖的組培方法,其特征在于包括以下步驟:
(1)預(yù)處理:將筍蘭剪成莖段,進(jìn)行消毒處理后,再用水沖洗,冷藏待用;
(2)殺菌:將預(yù)處理后的筍蘭莖段進(jìn)行殺菌,待用;
(3)刺激:將殺菌后的筍蘭莖段先進(jìn)行消毒處理,清洗后再用氯化汞和次氯酸鈉溶液浸泡一段時(shí)間,接著用水浸泡并沖洗,待用;
(4)培養(yǎng):將刺激處理后的筍蘭莖段放入裝有培養(yǎng)基的培養(yǎng)箱中培養(yǎng)一段時(shí)間,即得。
2.如權(quán)利要求1所述的促進(jìn)筍蘭高效繁殖的組培方法,其特征在于:所述步驟(1)中,將采集回來(lái)的筍蘭進(jìn)行預(yù)處理,剪成0.5~2cm長(zhǎng)的莖段,用水沖洗20~40min后,用濃度為70~80%的醫(yī)用酒精對(duì)筍蘭莖段進(jìn)行消毒處理,接著用無(wú)菌水沖洗3~4次,放入溫度為4℃以下的冰箱中冷藏待用。
3.如權(quán)利要求1所述的促進(jìn)筍蘭高效繁殖的組培方法,其特征在于:所述步驟(2)中,將預(yù)處理過(guò)的筍蘭莖段放入無(wú)菌燒杯中,再將無(wú)菌燒杯放到超凈臺(tái)里,將超凈臺(tái)紫外燈打開(kāi)殺菌25~35min。
4.如權(quán)利要求1所述的促進(jìn)筍蘭高效繁殖的組培方法,其特征在于:所述步驟(3)中,將濃度為70~80%的乙醇倒入裝有筍蘭莖段的無(wú)菌燒杯中,處理1~3min,然后倒出乙醇溶劑,用無(wú)菌水沖洗3~4次,再倒入氯化汞和次氯酸鈉的混合液浸泡3~10min,倒出溶液,再用無(wú)菌水浸泡1~3min,用無(wú)菌水沖洗3~4次。
5.如權(quán)利要求1或4所述的促進(jìn)筍蘭高效繁殖的組培方法,其特征在于:所述氯化汞與次氯酸鈉的體積比為(2~4):(0.5~1.5),且氯化汞的質(zhì)量濃度為0.05~0.2%,次氯酸鈉的質(zhì)量濃度為5~15%。
6.如權(quán)利要求1所述的促進(jìn)筍蘭高效繁殖的組培方法,其特征在于:所述步驟(4)中,筍蘭的培養(yǎng)分三個(gè)階段,依次為誘導(dǎo)愈傷組織、細(xì)胞分化和生根壯苗階段,先將筍蘭莖段放到誘導(dǎo)愈傷組織培養(yǎng)基中培養(yǎng),25d后將誘導(dǎo)出的疏松、呈淡綠色的愈傷組織轉(zhuǎn)移到細(xì)胞分化培養(yǎng)基中培養(yǎng);培養(yǎng)20d后,愈傷分化出長(zhǎng)1~2cm芽尖時(shí),再將其轉(zhuǎn)移到生根壯苗培養(yǎng)基中培養(yǎng),20d后長(zhǎng)出3~5條長(zhǎng)為2~3cm根,即獲得健壯筍蘭幼苗。
7.如權(quán)利要求6所述的促進(jìn)筍蘭高效繁殖的組培方法,其特征在于:所述誘導(dǎo)愈傷組織培養(yǎng)基為:MS+1.0mg/L 6-BA+0.5mg/L IBA+20g/L蔗糖+6g/L瓊脂,該培養(yǎng)基的pH值為5.5~6.5。
8.如權(quán)利要求6所述的促進(jìn)筍蘭高效繁殖的組培方法,其特征在于:所述細(xì)胞分化培養(yǎng)基為:MS+1.0mg/L 6-BA+0.2mg/L NAA+30g/L蔗糖+6g/L瓊脂,該培養(yǎng)基的pH值為5.5~6.5。
9.如權(quán)利要求6所述的促進(jìn)筍蘭高效繁殖的組培方法,其特征在于:所述生根壯苗培養(yǎng)基為:1/2MS+0.5mg/L NAA+0.1mg/L 6-BA+0.1mg/L IBA+30g/L蔗糖+6g/L瓊脂,該培養(yǎng)基的pH值為5.5~6.5。
10.如權(quán)利要求6所述的促進(jìn)筍蘭高效繁殖的組培方法,其特征在于:所述步驟(4)中,三個(gè)階段筍蘭的培養(yǎng)均是在光照培養(yǎng)和暗培養(yǎng)環(huán)境下交替進(jìn)行,具體培養(yǎng)條件為:光照培養(yǎng)時(shí)間10~15h、培養(yǎng)溫度為20~30℃、光照強(qiáng)度為2500~3000lx,暗培養(yǎng)時(shí)間10~15h、培養(yǎng)溫度為15~25℃。