一種含有石榴葡聚糖與咪鮮胺錳鹽的殺細菌組合物及其應(yīng)用的制作方法
【專利摘要】本發(fā)明涉及一種殺細菌組合物，其特征在于，所述組合物含有活性成分石榴葡聚糖和咪鮮胺錳鹽，其中二者的重量比為30:1-1:30。所述殺細菌組合物不但可以有效的用于水果保鮮，而且具有環(huán)境相容性好、不易產(chǎn)生抗性、物理化學(xué)穩(wěn)定性好、藥效時間長、低毒、低殘留等優(yōu)點，是一種新型的保鮮劑。該藥劑相比單劑具有良好的增效作用，且能延緩單劑的抗藥性，同時安全無毒、環(huán)境友好。
【專利說明】-種含有石摺葡聚糖與咪鮮胺猛鹽的殺細菌組合物及其應(yīng) 用

【技術(shù)領(lǐng)域】
[0001] 本發(fā)明涉及農(nóng)藥領(lǐng)域，特別是農(nóng)用保鮮領(lǐng)域；具體而言，涉及一種農(nóng)用保鮮殺細菌 組合物及其制備方法和應(yīng)用，特別是涉及一種含有石惱葡聚糖與咪鮮胺猛鹽的保鮮殺細菌 組合物及其保鮮應(yīng)用。 技術(shù)背景
[0002] 石惱為石惱科石惱屬植物，在我國栽培廣泛，栽植面積達6466她m2,居世界首位， 產(chǎn)量達38萬多噸，主要分布于陜西、山東、安徽、四川和云南五省。石惱是一種藥食兩用植 物，石惱果實不僅營養(yǎng)豐富，而且是歷代藥典中的重要中藥?，F(xiàn)代科學(xué)研究也證實，石惱果 實在預(yù)防和治療也腦血管疾病、癌癥等方面有特效，而該些功效很可能來自于果實中的多 酷類物質(zhì)。石惱果實的各部位，包括果皮、果肉、種子內(nèi)都含有一定量的多酷類物質(zhì)，其中W 果皮中含量最為豐富。石惱皮為石惱加工廢料，目前除少數(shù)藥用外，大多未加W利用，探尋 石惱皮加工利用的途徑和方法，具有重要的社會、經(jīng)濟價值。
[0003] 報道的石惱皮的用途為；石惱皮是中藥：（石惱皮、石惱根皮）石惱皮；（收澀藥： 止瀉藥）酸、澀，溫。歸大腸經(jīng)。功效：止瀉，殺蟲。應(yīng)用；1、用于久瀉久癡及便血，脫化。可 炒炭研末服。久瀉脫化，脾胃虛弱，可與黃茂、白術(shù)、升麻等配伍。久癡而濕熱未盡者，應(yīng)與 黃連、黃柏等配伍。2、用于蝴蟲、緣蟲、燒蟲等寄生蟲病?？膳c濱柳配伍。
[0004] 咪鮮胺猛鹽；咪鮮胺猛鹽具有內(nèi)吸、傳導(dǎo)、預(yù)防、保護、治療等多重作用，屬于咪哇 類殺細菌劑，對子囊菌引起的多種作物病害有特效。通過抑制留醇的生物合成而起作用的。 主要用于番茄、西葫蘆、梨樹、蘋果、火龍果、巧橘、水稻、小麥、大白菜、生菜、玻菜等防治腐 爛病、晚疫病、黑星病等。
[0005] 農(nóng)業(yè)生產(chǎn)上，除了作物生長期的病蟲害防治外，在果子、蔬菜等鮮活農(nóng)產(chǎn)品采收后 常常需要對庫存產(chǎn)品做防腐保鮮處理，既利于長途運輸也延長了農(nóng)產(chǎn)品新鮮程度。
[0006] 目前，農(nóng)產(chǎn)品果子保鮮主要為北方的蘋果、梨、縣猴桃、葡萄、冬巧，南方的巧橘、廝 澄、香蕉等。果品類農(nóng)產(chǎn)品保鮮主要解決的問題是產(chǎn)品膽藏期的病害，如蘋果炭痘病、紅黑 點病，霉星病及各種生理性病害，葡萄炭痘病、褐斑病，冬巧的炭痘病、紅斑病等，巧枯膽藏 期的病害主要有青（綠）霉病、炭痘病、蒂腐病、黑腐病、褐腐病、酸腐病、干瘤病等。據(jù)不完 全統(tǒng)計如果果子采收入庫前不進行正常的保鮮處理，由于W上病害常常會造成20-30%的 爛果，嚴重地可達60%，損失很大。如我們在陜西最大的蘋果經(jīng)銷商陜西華圣果業(yè)公司調(diào) 研，庫存蘋果每年發(fā)生浸染性病害的損耗占55. 8%;生理性病害的損耗占15. 2%;病果損失 率一般在4 %左右，個別年份病果損失率高達8 %左右。
[0007] 在四川廣安縣巧橘產(chǎn)區(qū)，我們調(diào)研，在運輸、膽藏過程中由于腐爛、霉變造成的巧 橘損失一般在10 % W上，溫度高、濕度大時損失在30 % W上。
[0008] 蔬菜保鮮主要為南菜北運地區(qū)產(chǎn)品，如每年春節(jié)海南、廣東等地的反季節(jié)蔬菜。由 于新鮮蔬菜在采收后，水分含量很高，在加上庫存和運輸過程中溫度變化，常常會發(fā)生腐爛 病、炭痘病、黑斑病等。據(jù)不完全統(tǒng)計僅此問題如果處理不好，就會造成蔬菜產(chǎn)品20-40% W 上的損失。
[0009] 目前市場上用于果蔬防腐保鮮的產(chǎn)品主要為化學(xué)農(nóng)藥為主，如咪鮮胺系列，百可 得、腐霉利、己霉哇等等，總體效果還不錯，但隨著該些藥劑的大量使用，效果越來越差。而 生物藥劑防腐保鮮的藥劑目前還不多。
[0010] 由于果蔬農(nóng)產(chǎn)品直接用于人們生活，涉及食品安全。保鮮產(chǎn)品就必須嚴格要求高 效、安全、低毒、無殘留。
[0011] 因此，開發(fā)合理、高效、低毒、環(huán)保的生物性或復(fù)配的防腐保鮮產(chǎn)品成為農(nóng)業(yè)生產(chǎn) 上的必須。


【發(fā)明內(nèi)容】

[0012] 本發(fā)明為解決上述技術(shù)背景中的不足，提供了一種用于巧橘、蘋果、香蕉等保鮮的 藥劑及其制備方法，該藥劑不但可W有效的用于水果保鮮，而且具有環(huán)境相容性好、不易產(chǎn) 生抗性、物理化學(xué)穩(wěn)定性好、藥效時間長、低毒、低殘留等優(yōu)點，是一種新型的保鮮劑。該藥 劑相比單劑具有良好的增效作用，且能延緩單劑的抗藥性，同時安全無毒、環(huán)境友好。
[0013] 為實現(xiàn)上述目的，本發(fā)明是通過W下技術(shù)方案實現(xiàn)的。
[0014] 本發(fā)明涉及一種殺細菌組合物，其特征在于，所述組合物含有活性成分石惱葡聚 糖和咪鮮胺猛鹽，其中二者的重量比為30:1-1:30。
[0015] 優(yōu)選地，該殺細菌組合物中石惱葡聚糖和咪鮮胺猛鹽的重量比為10:1?1:10。
[0016] 更優(yōu)選地，該殺細菌組合物中石惱葡聚糖和咪鮮胺猛鹽的重量比為5:1?1:5。
[0017] 本發(fā)明涉及一種殺細菌劑，其特征在于，該殺細菌劑含有1?90重量％的如上所 述的殺細菌組合物，余量為農(nóng)藥上可接受的載體和助劑。
[0018] 優(yōu)選地，該殺細菌劑含有3?80重量％的如上所述的殺細菌組合物。
[0019] 更優(yōu)選地，該殺細菌劑含有15?70重量％的如上所述的殺細菌組合物。
[0020] 所述石惱葡聚糖是采用如下方法制得的：
[0021] 石惱皮原料來源于陜西臨撞，提取工藝方法參考王巖--辟辟學(xué)院畢業(yè)論文《正交 法優(yōu)化懷遠石惱皮多糖提取工藝》及趙盈、張海生等人陜西師范大學(xué)食品工程與營養(yǎng)科學(xué) 院、陜西教育學(xué)院生命科學(xué)院《石惱皮多糖的水浸提取工藝優(yōu)化》論文中的方法。即本發(fā)明 的石惱葡聚糖采用水浸提取工藝，即提取溫度8(TC，提取時間化，料液比1:20,提取次數(shù)3 次，合并提取液，最后提取液經(jīng)真空濃縮，噴霧干燥，得到本發(fā)明的石惱葡聚糖。
[0022] 石惱葡聚糖采用高效液相色譜法測定含量。具體測定方法是；試樣用流動相溶解， W己膳+0. 1 %磯酸水溶液（體積比為5:佩為流動化使用W Ci8為填料的不鎊鋼柱和紫 外檢測器，在波長258nm下，對試樣中的石惱葡聚糖進行反相高效液相色譜分離和測定，外 標(biāo)法定量。石惱葡聚糖的保留時間為6. Imin和7. 8min)。實施工藝中提取物中的石惱葡聚 糖含量> 6.0%即為合格品。
[0023] 咪鮮胺猛鹽從市場購買，生產(chǎn)廠家為南京紅太陽化工股份有限公司。
[0024] 二者復(fù)配用已知的方法可W制備成適合農(nóng)業(yè)使用的任意一種劑型，比較好的劑型 為可濕性粉劑和水分散粒劑。
[00巧]進一步地，本申請涉及將上述殺細菌組合物或殺細菌劑用于防治細菌病害的用 途。
[002引本發(fā)明中使用的輔助成分包括；潤濕齊U、分散齊U、粘結(jié)齊U、穩(wěn)定劑、助息劑、崩解劑、 吸附劑和填充料等及其它有益于有效成分在制劑中穩(wěn)定和藥效發(fā)揮的已知物質(zhì)，都是農(nóng)藥 制劑中常用或允許使用的各種成分，并無特別的限定，具體成分和用量根據(jù)配方要求通過 簡單試驗確定。

【具體實施方式】
[0027] W下用具體實施例進行說明。所有配方中百分比均為重量百分比。本發(fā)明組合物 各種制劑的加工工藝均為現(xiàn)有技術(shù)，根據(jù)不同情況可W有所變化。
[0028] 本發(fā)明的石惱葡聚糖采用水浸提取工藝來進行提取，提取溫度8(TC，提取時間 2h，料液比1: 20 (重量比），提取次數(shù)3次，合并3次提取的提取液，提取液經(jīng)真空濃縮，噴霧 干燥，得到本發(fā)明的石惱葡聚糖。
[0029] 石惱葡聚糖采用高效液相色譜法測定含量。具體測定方法是；試樣用流動相溶解， W己膳+0. 1 %磯酸水溶液（體積比為5:佩為流動化使用W Ci8為填料的不鎊鋼柱和紫 外檢測器，在波長258nm下，對試樣中的石惱葡聚糖進行反相高效液相色譜分離和測定，外 標(biāo)法定量。石惱葡聚糖的保留時間為6. Imin和7. 8min)。實施工藝中提取物中的石惱葡聚 糖含量> 6.0%即為合格品。
[0030] 實施例1:35%石惱葡聚糖?咪鮮胺猛鹽可濕性粉劑（W 1000公斤為例）
[0031] 石撤傾聚擲巧巧 潮 50公斤 睞鮮胺M訊 ：泌％ :;〇{)公斤 潤濕劑權(quán)#粉 觸 郎公斤 分駿劑難） WI, 80公斤 勘M劑姑酸讀《! 1% 10公斤 啜附劑1'1炭呢 i纖 100公斤 巧化料扣嶺J補足100靖 .'1{的公斤
[003引生產(chǎn)工藝；依次將400公斤填充料高嶺±、100公斤防結(jié)塊劑白炭黑、10公斤助息 劑娃酸鎮(zhèn)鉛、50公斤石惱葡聚糖母藥、300公斤咪鮮胺猛鹽、80公斤分散劑NN0和60公斤潤 濕劑拉開粉投入1000升的前混合罐中，攬拌30分鐘，經(jīng)氣流粉碎到325目W上，粉碎后的 物料在1000升的后混合罐攬拌1小時，取樣分析，合格后包裝入庫。
[003引實施例2 ;80%石惱葡聚糖?咪鮮胺猛鹽可濕性粉劑（W 1000公斤為例）
[0034] 備補萊總 2(觀 200 &訂- 咪鮮較輸獻 60。;， 600公斤 潤濕劑I.汾1 31 30公巧 分敞劑1''1) 51 5()公斤
[00 巧] 啜附劑I彭澗.I-. 6黯 朗公斤 填充料輕攝碳酸巧 補化100% 抓公廳
[0036] 生產(chǎn)工藝同實施例1
[0037] 實施例3 ; 10. 1 %石惱葡聚糖?咪鮮胺猛鹽水分散粒劑（W 1000公斤為例）
[0038] ^5鑛葡簾? 0.1黯 1公斤 mmtm& i〇% i〇〇 公斤 澗靈麵LWET/P 3% 30公斤 勢散綱2500 4% .10公斤 tt鑛摘貧** 1% !()公斤 扁解麵30% 孤0公斤 漢變鱗湯5? 20% 200公斤 壞繁料玉米淀善 補兒1 ()? 319公斤
[0039] 生產(chǎn)工藝；依次將填充料319公斤玉米淀粉和200公斤滑石粉、10公斤粘結(jié)劑黃 糊精、300公斤崩解劑氯化饋、1公斤石惱葡聚糖母藥、100公斤咪鮮胺猛鹽、40公斤分散劑 2500和30公斤潤濕劑LWET/F投入1000升的前混合罐中，攬拌30分鐘，經(jīng)氣流粉碎到500 目W上，粉碎后的物料在1000升的后混合罐攬拌1小時，取樣分析，合格后將物料投入捏合 機，加適量水捏合，經(jīng)造粒機造粒后干燥，用篩分篩出需要顆粒大小，不合適的顆粒重新捏 合造粒，合適的顆粒分析合格后包裝入庫。
[0040] 實施例4 ;50%石惱葡聚糖?咪鮮胺猛鹽水分散粒劑（W 1000公斤為例）
[0041] 片權(quán)鑛聚鶴 10% 100公斤 咪鮮駭猛鹽 40% 400公斤 潤濕劑故M0 沉 訊公斤 分鼓劑2700 2% 20公斤 分教劑NOW 8% 撕公廳 粘結(jié)劑聚乙---:解 1% 10公斤 崩瞬劑硫酸按 15% 巧0公斤 填宛料巧峰上 補足100。。 190公斤
[0042] 生產(chǎn)工藝同實施例3。
[0043] 生測試驗如下：
[0044] 石惱葡聚糖與咪鮮胺猛鹽組合對巧橘青霉菌、巧橘綠霉菌的毒力測定
[004引 1.試驗條件
[0046] 1. 1供試病原菌：
[0047] 巧橘青霉菌（PeniciIlium italicum Wehmer)巧橘綠霉菌（PeniciIlium digitatum Sacc)在西北農(nóng)林科技大學(xué)植保學(xué)院植物病理研究室提純、保存并提供。1.2培 養(yǎng)條件：
[0048] 供試菌種及試驗后病菌的培養(yǎng)條件為溫度為18?27C，相對濕度90% W上。
[004引 2.試驗設(shè)計
[0050] 2. 1供試藥劑：
[0051] 石惱葡聚糖（口11]1；[03肖拘]131：111]11(16義付3]1)含量6%母粉，由陜西恒田化工有限公 司研發(fā)室提供。
[0052] 咪鮮胺猛鹽（prochloraz-manganese chloride complex) 98 %原藥，由江蘇輝豐 公司提供。
[0053] 2. 2藥劑濃度和配比設(shè)計及溶液配制：
[0054] 石惱葡聚糖溶液；稱取0. Olg石惱葡聚糖母粉，用0. 2血甲醇溶解，加入含0. 1% TweenSO乳化劑的無菌水98. 3ml，攬拌均勻，配制成lOOmg/L母液，再用含0. 1 % TweenSO乳 化劑的無菌水稀釋成1〇、5、2. 5、1. 25、0. 625、0. 3125mg/L濃度備用；
[00巧]咪鮮胺猛鹽溶液；稱取0. 01g98 %咪鮮胺猛鹽原藥，用0. 2ml甲醇溶解，加入含 0. 1 % TweenSO乳化劑的無菌水96. 8ml配制成lOOmg/L母液，再用含0. 1 % TweenSO乳化劑 的無菌水稀釋成10、5、1、0. 5、0. 1、0. 05mg/L濃度備用；
[0056] 各混配溶液；分別取5、5、5、50、150ml lOmg/L石惱葡聚糖溶液分別加入到5、50、 150、5、5ml lOmg/L咪鮮胺猛鹽溶液中制成lOmg/L石惱葡聚糖?咪鮮胺猛鹽 1:30、10:1和30:1溶液，再用含0. 1% TweenSO乳化劑的無菌水稀釋成各試驗濃度。
[0057] 對照溶液；0. 2ml甲醇加95ml含0. 1 % TweenSO乳化劑的無菌水。
[00則 3.測J定方法：
[0059] 參照生測標(biāo)準(zhǔn)方法NY/T1156. 3-2006,采用平皿葉片法。
[0060] 抱子囊息浮液配制；選取培養(yǎng)好的巧橘青霉菌、巧橘綠霉菌抱子囊，用4C蒸觸水 稀釋，濃度控制在每毫升1 X 1〇5個--1 X 1〇7個抱子囊，4C下存放備用。
[0061] 選取成熟較好無病害的巧橘果實300個，每10個一組，用消毒過的刀片在巧橘果 實表皮輕輕劃開少許傷口，將配制好的藥液均勻噴施于果子上，待藥液自然風(fēng)干后，按處理 標(biāo)記后排放在保濕盒中。在藥劑處理24小時后，將準(zhǔn)備好的抱子囊息浮液點滴10 y L接種 于果子表皮上。每果子接種4滴，每處理10個果子，試驗設(shè)不含藥劑處理的空白對照。接 種后蓋上皿蓋，置于人工氣候培養(yǎng)箱內(nèi)，在沒有光照，溫度18?27C，相對濕度控制在90 % W上條件下培養(yǎng)。
[0062] 4.數(shù)據(jù)調(diào)查與統(tǒng)計分析
[006引 4. 1調(diào)查方法：
[0064] 每天觀察果子霉菌的發(fā)病情況，3天后待空白對照發(fā)病時調(diào)查防治效果，7天、15 天后分別再調(diào)查果子發(fā)病情況，統(tǒng)計果子發(fā)病率和病情指數(shù)，計算防效。
[0065] 4. 2增效作用評價方法
[0066] 參照生測標(biāo)準(zhǔn)方法NY/T1156. 6-2006,根據(jù)Sun&Johnson(1960)的共毒系數(shù)法 (CTC)來評價藥劑混配的增效作用，即CTC《80為枯抗作用，80 < CTC < 120為相加作用， CTC> 120為增效作用。
[0067] 所有數(shù)據(jù)均采用SAS6. 12系統(tǒng)軟件進行分析，求出毒力回歸方程式、相關(guān)系數(shù)（r) 和EC50(95%置信度）。
[006引 5.結(jié)果與分析：
[0069] 采取5點法取5個代表性的配比，并將該5個配比和標(biāo)準(zhǔn)藥劑進行毒力測定。石 惱葡聚糖和咪鮮胺猛鹽復(fù)配對巧橘青、綠霉菌的毒力測定結(jié)果見表1。由表1可見，石惱葡 聚糖與咪鮮胺猛鹽W 1:1、1:10、1:30、10:1和30:1的比例混配對巧橘青、綠霉菌均表現(xiàn)出 增效作用，其ECs。值分別為2. 67、3. 17、3. 07、3. 29和3. 43mg/L，共毒系數(shù)分別為137. 80、 143. 82U59. 40、145. 54和138. 00,其中W 1:30的比例混配增效作用最好。
[0070] 表1甲基營養(yǎng)型芽抱桿菌和葉枯哇復(fù)配對煙草青枯病的毒力測定結(jié)果
[0071]

【權(quán)利要求】
1. 一種殺細菌組合物，其特征在于，所述組合物含有活性成分石榴葡聚糖和咪鮮胺錳 鹽，其中二者的重量比為30:1-1:30。
2. 根據(jù)權(quán)利要求1所述的殺細菌組合物，其特征在于，二者的重量比為10:1?1:10。
3. 根據(jù)權(quán)利要求2所述的殺細菌組合物，其特征在于，二者的重量比為5:1?1:5。
4. 一種殺細菌劑，其特征在于，該殺細菌劑含有1?90重量％的權(quán)利要求1至3任一 所述的殺細菌組合物，余量為農(nóng)藥上可接受的載體和助劑。
5. 根據(jù)權(quán)利要求4所述的殺細菌劑，其特征在于，該殺細菌劑含有3?80重量％的如 上所述的殺細菌組合物。
6. 根據(jù)權(quán)利要求5所述的殺細菌劑，其特征在于，該殺細菌劑含有15?70重量％的如 上所述的殺細菌組合物。
7. 將權(quán)利要求1至3任一所述的殺細菌組合物或權(quán)利要求4至6任一所述的殺細菌劑 用于防治細菌病害的用途。
【文檔編號】A01N59/16GK104397025SQ201410653919
【公開日】2015年3月11日 申請日期:2014年11月17日 優(yōu)先權(quán)日:2014年11月17日
【發(fā)明者】唐滿倉, 馬玉明, 葉龍江, 李林強 申請人:陜西恒田化工有限公司