雞爪槭的組織培養(yǎng)快速繁殖方法
【專利摘要】本發(fā)明公開了一種雞爪槭組培快繁新方法，它包括以下步驟，制備無菌活氧水；滅菌；制備培養(yǎng)基；培養(yǎng)基殺菌；繁殖與移栽，雞爪槭莖段依次通過所述啟動培養(yǎng)基、增殖培養(yǎng)基、生根培養(yǎng)基的培養(yǎng)，建立起雞爪槭的快速繁殖體系，成功地培養(yǎng)出完整的生根的再生植株，移栽成活率達到90％左右。本發(fā)明克服雞爪槭常規(guī)育苗周期長，扦插繁殖系數(shù)低等缺點，實現(xiàn)了雞爪槭苗木的工廠化生產(chǎn)。
【專利說明】雞爪槭的組織培養(yǎng)快速繁殖方法

【技術領域】
[0001]本發(fā)明涉及槭樹繁殖【技術領域】，尤其是涉及雞爪槭的組織培養(yǎng)快速繁殖方法。

【背景技術】
[0002]雞爪槭0^6: ￠18111181:11111)別名雅楓，系槭樹科槭樹屬,是城市景觀中名貴的觀賞樹種。原產(chǎn)中國長江流域，日本、朝鮮半島也有分布。我國主要分布于長江流域各省，多生于海拔1200111以下山地、丘陵之林緣或疏林中。雞爪槭屬落葉小喬木，高約8111，樹皮深灰色，當年生枝紫色或淡紫綠色；多年生枝淡灰色、紫色或深紫色。雞爪槭葉對生，直徑7-10(3111，基部截形，掌狀深裂，裂片5-9個，通常7裂，裂片卵狀長圓形或披針性，頂端銳尖或長銳尖，邊緣有不整齊的重鋸齒，嫩葉密生柔毛。葉片在春天先紅后綠，到秋季變成紅色。傘房花序頂生，發(fā)葉后開花，花紫紅色。翅果初為紫紅色，成熟后為棕黃色，小堅果球形，直徑7皿，脈紋顯著；翅與小堅果共長2-2.5挪，寬1咖，張開成鈍角?；ㄆ?月，果期9月。
[0003]雞爪槭喜溫暖、濕潤氣候及半陰環(huán)境，不耐錯，較耐旱，在陽光直射處孤植夏季易遭日灼之害；適生于肥沃、濕潤而排水良好之土壤，耐寒性不強，酸性、中性及石灰質(zhì)土均能適應，是近年來競相培育的優(yōu)良觀賞樹種。
[0004]雞爪槭具有極高的觀賞價值，對城市景觀的表現(xiàn)具有相當重要的作用，高速公路綠化帶、公園、廣場、小區(qū)綠地等地方隨處可見到其優(yōu)美的身姿。我國著名的蘇州古典園林中的留園西部假山周圍遍植雞爪槭，春夏綠葉如蓋，秋季紅葉似火，與山水、亭臺構(gòu)成一副絕妙的美景；南京的植物園紅楓園極具特色，樹體高大，氣勢非凡的雞爪槭是其主體樹種。
[0005]雞爪槭不僅能給城市綠化增加了綠量，而且能給城市風景增添絢麗多姿的色彩，極大地豐富城市景觀，使城市景觀充滿活力與生機；同時，該植物具有較高的藥用價值，其枝條、葉片可熬制成藥，具有行氣止痛，去毒消腫等功效。因此栽雞爪槭具有很高的園林觀賞價值和良好的經(jīng)濟效益。對二氧化硫和煙塵抗性較強，較耐陰，在高大樹木庇蔭下長勢良好。雞爪槭屬于難生根的樹種，扦插成活率低。
[0006]目前國內(nèi)尚無雞爪槭組織培養(yǎng)。


【發(fā)明內(nèi)容】

[0007]本發(fā)明的目的即在于克服現(xiàn)有技術的不足，提供一種雞爪槭組培快繁新方法，該方法培養(yǎng)基簡單、培育時間短，操作方便，可以在較短的時間內(nèi)增大擴繁基數(shù)，為工廠化育苗提供了技術支持。
[0008]本發(fā)明所解決的技術問題采用以下技術方案來實現(xiàn):
[0009]雞爪槭的組織培養(yǎng)快速繁殖方法，該方法包括以下步驟:
[0010]步驟￡1、制備無菌活氧水
[0011]取自來水放于第一容器中，啟動活氧發(fā)生裝置，并將所述活氧發(fā)生裝置所產(chǎn)生的活氧輸入所述第一容器中，間隙攪拌使得活氧充分溶于水，制得無菌活氧水若干；
[0012]步驟6、滅菌
[0013]將初代培養(yǎng)雞爪槭莖段整齊放入第二容器中，并將第一容器中所制得的無菌活氧水注入第二容器內(nèi)，以漫過初代培養(yǎng)雞爪槭莖段為準，先進行浸泡殺菌，然后通入活氧，再利用活氧對第二容器中的初代培養(yǎng)雞爪槭莖段進行滅菌；
[0014]步驟制備培養(yǎng)基
[0015]在啟動培養(yǎng)基內(nèi)加入瓊脂的同時還加入硅藻粉；
[0016]在增殖培養(yǎng)基內(nèi)加入瓊脂的同時還加入紅藻淀粉；
[0017]在生根培養(yǎng)基內(nèi)加入瓊脂的同時加入金藻淀粉；
[0018]步驟4、培養(yǎng)基殺菌
[0019]將啟動培養(yǎng)基、增殖培養(yǎng)基、生根培養(yǎng)基均放入一密閉箱體內(nèi)，并向該箱體內(nèi)通入活氧對上述各培養(yǎng)基進行殺菌；
[0020]步驟0、繁殖與移栽
[0021]啟動培養(yǎng)基培養(yǎng):取出第二容器中滅菌后的初代培養(yǎng)雞爪槭莖段，有序置于經(jīng)過步驟0與(1的啟動培養(yǎng)基進行誘導腋芽萌發(fā)；
[0022]增殖培養(yǎng)基培養(yǎng):將萌發(fā)的腋芽在經(jīng)過步驟0與(1的增殖培養(yǎng)基上進行繼代增殖；
[0023]生根培養(yǎng)基培養(yǎng):繼代增殖的小苗在經(jīng)過步驟0與(1的生根培養(yǎng)基上進行生根培養(yǎng)；
[0024]移栽:生根幼苗經(jīng)煉苗后移栽至草炭、硅藻粉、珍珠巖體積比為1: 0.6: 0.9的基質(zhì)中進行正常栽培管理；
[0025]其中，步驟13中所述的初代培養(yǎng)雞爪槭莖段浸泡殺菌時間不低于5分鐘，活氧滅菌時間不少于30分鐘。
[0026]步驟。中所述的啟動培養(yǎng)基為剛69+^40.1^/1+1020.31^/1+蔗糖308/1+硅藻粉 0.4^/1 ；
[0027]所述的增殖培養(yǎng)基為剛69+^40.1^/1+0-300.81^/1+蔗糖308/1+紅藻淀粉0.211^/1 ；
[0028]所述的生根培養(yǎng)基為剛69+^40.21^/1+蔗糖208/1+紅藻淀粉0.21^/1+活性炭0.3^/1+金藻淀粉0.28呢凡。
[0029]步驟(1中所述的啟動培養(yǎng)基、增殖培養(yǎng)基、生根培養(yǎng)基在所述箱體內(nèi)進行活氧殺菌的時間不少于5分鐘。
[0030]所述啟動培養(yǎng)基、增殖培養(yǎng)基、生根培養(yǎng)基的邱5.5-5.80
[0031]步驟6中所述啟動培養(yǎng)基培養(yǎng)的培養(yǎng)室溫度為(24^1) I，光照時間12-1411從光照強度為2000-30000 ；
[0032]所述增殖培養(yǎng)基培養(yǎng)的培養(yǎng)室溫度為(24^1) I，光照時間14-161^，光照強度為 2000-3000^ ；
[0033]所述生根培養(yǎng)基培養(yǎng)的培養(yǎng)室溫度為(24^1)，光照時間14-1611/山光照強度為 2500-3000^ ；
[0034]所述小苗培養(yǎng)的培養(yǎng)室溫度為(24^1) I，光照時間14-181^，光照強度為2500-30001^。
[0035]本發(fā)明具有的有益效果是:配方簡單、成本低；雞爪槭外植體莖段只需經(jīng)啟動培養(yǎng)、生根培養(yǎng)就能快速繁殖出雞爪槭無菌苗，顯著縮短了繁殖時間。本發(fā)明方法操作方便，可以在較短的時間內(nèi)增大擴繁基數(shù)，為工廠化育苗提供了技術支持。

【專利附圖】

【附圖說明】
[0036]為了更清楚地說明本發(fā)明實施方案或現(xiàn)有技術中的技術方案，下面將對實施方案或現(xiàn)有技術描述中所需要使用的附圖作簡單地介紹，顯而易見地，下面描述中的附圖僅僅是本發(fā)明的一些實施方案，對于本領域普通技術人員來講，在不付出創(chuàng)造性勞動性的前提下，還可以根據(jù)這些附圖獲得其他的附圖。
[0037]圖1為本發(fā)明:雞爪槭的組織培養(yǎng)快速繁殖方法的流程示意圖。

【具體實施方式】
[0038]為了使本發(fā)明實現(xiàn)的技術手段、創(chuàng)作特征、達成目的與功效易于明白了解，下面結(jié)合具體實施例，進一步闡述本發(fā)明。
[0039]參照圖1所示，雞爪槭的組織培養(yǎng)快速繁殖方法，該方法包括以下步驟:
[0040]步驟￡1、制備無菌活氧水
[0041]取自來水放于第一容器中，啟動活氧發(fā)生裝置，并將所述活氧發(fā)生裝置所產(chǎn)生的活氧輸入所述第一容器中，間隙攪拌使得活氧充分溶于水，制得無菌活氧水若干。
[0042]步驟6、滅菌
[0043]將初代培養(yǎng)雞爪槭莖段整齊放入第二容器中，并將第一容器中所制得的無菌活氧水注入第二容器內(nèi)，以漫過初代培養(yǎng)雞爪槭莖段為準，先進行浸泡殺菌，然后通入活氧，再利用活氧對第二容器中的初代培養(yǎng)雞爪槭莖段進行滅菌；其中，所述的初代培養(yǎng)雞爪槭莖段浸泡殺菌時間不低于5分鐘，活氧滅菌時間不少于30分鐘。
[0044]步驟制備培養(yǎng)基
[0045]在啟動培養(yǎng)基內(nèi)加入瓊脂的同時還加入娃藻粉，所述啟動培養(yǎng)基的組成為^69+^0.1^/1+1020.31^/1+ 蔗糖 308/1+ 硅藻粉 0.4呢5-5.8。硅藻粉的作用是借助細胞分裂進行營養(yǎng)繁殖，為腋芽萌發(fā)提供足夠的營養(yǎng)的同時，提供豐富的葉色素基因，因為娃藻細胞內(nèi)具有一至數(shù)個金褐色的色素體。色素體中含有葉綠素3、。和多量的胡蘿卜素和葉黃素。
[0046]在增殖培養(yǎng)基內(nèi)加入瓊脂的同時還加入紅藻淀粉，其中，增殖培養(yǎng)基的組成為剛69+嫩八0.1^/1+0-300.8^/1+蔗糖308/1+紅藻淀粉0.2^/1,邱5.5-5.8。紅藻淀粉的作用是為雞爪槭提供更為豐富的色素基因，其色素體多呈紅色或紫紅色，其中除含有葉綠素、胡蘿卜素和葉黃素外，還含有大量的藻紅素和藻藍素。
[0047]在生根培養(yǎng)基內(nèi)加入瓊脂的同時加入金藻淀粉，其中，生根培養(yǎng)基的組成為剛69+^40.2^/1+鹿糖208/1+紅藻淀粉0.2^/1+活性炭0.3^/1+金藻淀粉0.28呢凡，邱5.5-5.8。金藻淀粉的作用是為雞爪槭的生根提供必要的多糖的同時，提供不可多得的金黃色或金褐色色素基因。
[0048]步驟4、培養(yǎng)基殺菌
[0049]將啟動培養(yǎng)基、增殖培養(yǎng)基、生根培養(yǎng)基均放入一密閉箱體內(nèi)，并向該箱體內(nèi)通入活氧對上述各培養(yǎng)基進行殺菌；其中，啟動培養(yǎng)基、增殖培養(yǎng)基、生根培養(yǎng)基在所述箱體內(nèi)進行活氧殺菌的時間不少于5分鐘。
[0050]步驟6、繁殖與移栽
[0051]啟動培養(yǎng)基培養(yǎng):取出第二容器中滅菌后的初代培養(yǎng)雞爪槭莖段，有序置于經(jīng)過步驟0與(1的啟動培養(yǎng)基進行誘導腋芽萌發(fā)，其中培養(yǎng)室溫度為(24^1) I，光照時間12-1411/(1，光照強度為 2000-30000 ；
[0052]增殖培養(yǎng)基培養(yǎng):將萌發(fā)的腋芽在經(jīng)過步驟0與(1的增殖培養(yǎng)基上進行繼代增殖，其中培養(yǎng)室溫度為(24^1) I，光照時間14-1611/山光照強度為2000-30000 ；；
[0053]生根培養(yǎng)基培養(yǎng):繼代增殖的小苗在經(jīng)過步驟0與(1的生根培養(yǎng)基上進行生根培養(yǎng)，其中培養(yǎng)室溫度為(24^1) I，光照時間14-1611/山光照強度為2500-30000 ；；
[0054]小苗培養(yǎng):將生根幼苗移栽至草炭、硅藻粉、珍珠巖體積比為1: 0.6: 0.9配置的基質(zhì)中進行小苗培養(yǎng)，其中培養(yǎng)室溫度為(24^1)，光照時間14-1811/山光照強度為2500-3000^ ；
[0055]移栽:將上述成活的小苗移栽到大田中生長。
[0056]以上顯示和描述了本發(fā)明的基本原理和主要特征和本發(fā)明的優(yōu)點。本行業(yè)的技術人員應該了解，本發(fā)明不受上述實施例的限制，上述實施例和說明書中描述的只是說明本發(fā)明的原理，在不脫離本發(fā)明精神和范圍的前提下，本發(fā)明還會有各種變化和改進，這些變化和改進都落入要求保護的本發(fā)明范圍內(nèi)。本發(fā)明要求保護范圍由所附的權(quán)利要求書及其等效物界定。
【權(quán)利要求】
1.雞爪槭的組織培養(yǎng)快速繁殖方法，其特征在于，該方法包括以下步驟: 步驟a、制備無菌活氧水 取自來水放于第一容器中，啟動活氧發(fā)生裝置，并將所述活氧發(fā)生裝置所產(chǎn)生的活氧輸入所述第一容器中，間隙攪拌使得活氧充分溶于水，制得無菌活氧水若干； 步驟b、滅菌 將初代培養(yǎng)雞爪槭莖段整齊放入第二容器中，并將第一容器中所制得的無菌活氧水注入第二容器內(nèi)，以漫過初代培養(yǎng)雞爪槭莖段為準，先進行浸泡殺菌，然后通入活氧，再利用活氧對第二容器中的初代培養(yǎng)雞爪槭莖段進行滅菌； 步驟C、制備培養(yǎng)基 在啟動培養(yǎng)基內(nèi)加入瓊脂的同時還加入硅藻粉； 在增殖培養(yǎng)基內(nèi)加入瓊脂的同時還加入紅藻淀粉； 在生根培養(yǎng)基內(nèi)加入瓊脂的同時加入金藻淀粉； 步驟d、培養(yǎng)基殺菌 將啟動培養(yǎng)基、增殖培養(yǎng)基、生根培養(yǎng)基均放入一密閉箱體內(nèi)，并向該箱體內(nèi)通入活氧對上述各培養(yǎng)基進行殺菌； 步驟e、繁殖與移栽 啟動培養(yǎng)基培養(yǎng):取出第二容器中滅菌后的初代培養(yǎng)雞爪槭莖段，有序置于經(jīng)過步驟c與d的啟動培養(yǎng)基進行誘導腋芽萌發(fā)； 增殖培養(yǎng)基培養(yǎng):將萌發(fā)的腋芽在經(jīng)過步驟C與d的增殖培養(yǎng)基上進行繼代增殖； 生根培養(yǎng)基培養(yǎng):繼代增殖的小苗在經(jīng)過步驟C與d的生根培養(yǎng)基上進行生根培養(yǎng)；小苗培養(yǎng):將生根幼苗移栽至草炭、硅藻粉、珍珠巖體積比為1: 0.6: 0.9配置的基質(zhì)中進行小苗培養(yǎng)； 移栽:將上述成活的小苗移栽到大田中生長。
2.根據(jù)權(quán)利要求1所述的雞爪槭的組織培養(yǎng)快速繁殖方法，其特征在于:步驟b中所述的初代培養(yǎng)雞爪槭莖段浸泡殺菌時間不低于5分鐘，活氧滅菌時間不少于30分鐘。
3.根據(jù)權(quán)利要求1所述的雞爪槭的組織培養(yǎng)快速繁殖方法，其特征在于:步驟c中所述的啟動培養(yǎng)基為 NN69+NAA0.lmg/L+TDZ0.3mg/L+ 蔗糖 30g/L+ 硅藻粉 0.4mg/L ； 所述的增殖培養(yǎng)基為NN69+NAA0.lmg/L+KT-30 0.8mg/L+蔗糖30g/L+紅藻淀粉0.2mg/L ； 所述的生根培養(yǎng)基為NN69+NAA0.2mg/L+蔗糖20g/L+紅藻淀粉0.2mg/L+活性炭0.3g/L+金藻淀粉0.28mg/L。
4.根據(jù)權(quán)利要求1所述的雞爪槭的組織培養(yǎng)快速繁殖方法，其特征在于:步驟d中所述的啟動培養(yǎng)基、增殖培養(yǎng)基、生根培養(yǎng)基在所述箱體內(nèi)進行活氧殺菌的時間不少于5分鐘。
5.根據(jù)權(quán)利要求3所述的雞爪槭的組織培養(yǎng)快速繁殖方法，其特征在于:所述啟動培養(yǎng)基、增殖培養(yǎng)基、生根培養(yǎng)基的pH 5.5-5.8。
6.根據(jù)權(quán)利要求1所述的雞爪槭的組織培養(yǎng)快速繁殖方法，其特征在于:步驟e中所述啟動培養(yǎng)基培養(yǎng)的培養(yǎng)室溫度為(24±1) °C,光照時間12-14h/d,光照強度為2000-3000LX ； 所述增殖培養(yǎng)基培養(yǎng)的培養(yǎng)室溫度為(24±1) *€，光照時間14-16h/d，光照強度為2000-3000LX ； 所述生根培養(yǎng)基培養(yǎng)的培養(yǎng)室溫度為(24±1) *€，光照時間14-16h/d，光照強度為2500-3000LX ； 所述小苗培養(yǎng)的培養(yǎng)室溫度為(24±1) °C，光照時間14-18h/d，光照強度為2500-3000LX。
【文檔編號】A01H4/00GK104285818SQ201410611945
【公開日】2015年1月21日 申請日期:2014年10月30日 優(yōu)先權(quán)日:2014年10月30日
【發(fā)明者】李倩中, 榮立蘋, 李淑順, 唐玲 申請人:江蘇省農(nóng)業(yè)科學院