一種蝦子花組織培養(yǎng)的快速繁殖方法
【專利摘要】本發(fā)明研究了一種蝦子花組織培養(yǎng)的快速繁殖方法，包括莖段的消毒、芽的誘導(dǎo)和增殖、壯苗、生根誘導(dǎo)等步驟。本發(fā)明建立了蝦子花的無性快繁體系，擴大蝦子花的種苗資源及種植面積，實現(xiàn)人工栽培替代野生蝦子花原植物資源，緩解野生植物資源保護的壓力。
【專利說明】一種蝦子花組織培養(yǎng)的快速繁殖方法

【技術(shù)領(lǐng)域】
[0001]本發(fā)明涉及蝦子花的組織培養(yǎng)，屬于生物【技術(shù)領(lǐng)域】。

【背景技術(shù)】
[0002]奸子花，Woodfordiafruticosa (Linn.) Kurz,千屈菜科，灌木，高 1.5-4 米,枝條長而擴展，幼枝被短柔毛，后脫落，分布于熱帶非洲馬達加斯加至斯里蘭卡、印度、巴基斯坦、緬甸、老撾、中國、越南至印度尼西亞及帝汶島?；ê喾N可水解鞣質(zhì)，已分離得到:蝦子花鞣質(zhì)A、B、C、D、E、F、G、H、I，異蛾眉木荷鞣質(zhì)A，月見草鞣質(zhì)A，B,新嗩吶草素，路邊青鞣質(zhì)，1，2, 3,6-四O-沒食子酸-β -D葡萄糖，I, 2, 3,6-四O-沒食子酸_ β -D-葡萄糖，又含黃酮類化合物:寥屬甙，楊梅樹皮素-3-半乳糖甙，槲皮素-3-鼠李糖甙，柚皮素-7-葡萄糖甙，山柰酚-3-葡萄糖甙，啼紋天笙素_3，5- 二葡萄糖甙，矢車菊素_3，5- 二葡萄糖甙。還含并沒食子酸，大黃酚-8-0-13-D-吡喃葡萄糖甙，海柯皂甙元，二十八醇，β-谷留醇，內(nèi)消旋-肌醇，去甲巖白菜素。蝦子花具有調(diào)經(jīng)活血，止血，涼血之功效。治婦女血崩，月經(jīng)不調(diào)，鼻衄，咳血，目前蝦子花主要使用種子或扦插法繁殖。


【發(fā)明內(nèi)容】

[0003]本發(fā)明所要解決的技術(shù)問題是提供蝦子花組織培養(yǎng)的快速繁殖方法，本發(fā)明建立了蝦子花的無性快繁體系，擴大蝦子花的種苗資源及種植面積，實現(xiàn)人工栽培替代野生蝦子花原植物資源，緩解野生植物資源保護的壓力。
[0004]本發(fā)明所要解決的技術(shù)問題是通過以下方案來實現(xiàn)的:
選擇生長健壯的枝條，切取帶芽莖段，漂白粉浸泡5min，流水沖洗lh，超凈工作臺上70%酒精處理25s，30%過氧化氫處理23min，無菌水沖洗干凈，消毒處理過的無菌莖段接種到WS+6-BA2.0mg/L+IBA0.2mg/L+GA30.5mg/L的培養(yǎng)基中進行芽的誘導(dǎo)，附加蔗糖30g/L，瓊脂6.5g/L，培養(yǎng)溫度24±2°C，光照強度20001χ, ρΗ6.0，培養(yǎng)基經(jīng)1.1 kg/cm2高壓，121。。下滅菌20min，誘導(dǎo)出的芽苗接入培養(yǎng)基WS+IBA1.5mg/L中進行生根誘導(dǎo)，附加蔗糖30g/L,瓊脂6.5g/L，培養(yǎng)溫度24±2°C，光照強度60001χ, ρΗ6.0,培養(yǎng)基經(jīng)1.1 kg/cm2高壓，121°C 下滅菌 20min，生根后的試管苗接入培養(yǎng)基 3/2MS+PP3332.0-2.5mg/L+CCCl.0-1.5mg/L+ABA1.0-1.5mg/L中進行壯苗，附加蔗糖60g/L，瓊脂3.7g/L，培養(yǎng)溫度24±2°C，光照強度40001x, pH6.0,培養(yǎng)基經(jīng) 1.lkg/cm2 高壓，121°C下滅菌 20min。
[0005]采用本發(fā)明制備的蝦子花成活率高，周期短，產(chǎn)量大，能耗少，利于大規(guī)模種植。
[0006]下面將結(jié)合【具體實施方式】對本發(fā)明作進一步闡述，但本發(fā)明要求保護的范圍并不局限于下列實施方式。

【具體實施方式】
[0007]實施例1
選擇生長健壯的枝條，切取帶芽莖段，漂白粉浸泡5min，流水沖洗lh，超凈工作臺上70%酒精處理25s，30%過氧化氫處理23min，無菌水沖洗干凈，消毒處理過的無菌莖段接種到WS+6-BA2.0mg/L+IBA0.2mg/L+GA30.5mg/L的培養(yǎng)基中進行芽的誘導(dǎo)，附加蔗糖30g/L，瓊脂6.5g/L，培養(yǎng)溫度24±2°C，光照強度20001χ, ρΗ6.0，培養(yǎng)基經(jīng)1.1 kg/cm2高壓，121。。下滅菌20min，誘導(dǎo)出的芽苗接入培養(yǎng)基WS+IBA1.5mg/L中進行生根誘導(dǎo)，附加蔗糖30g/L，瓊脂6.5g/L，培養(yǎng)溫度24±2°C，光照強度60001χ, ρΗ6.0，培養(yǎng)基經(jīng)1.1 kg/cm2高壓，121°C下滅菌 20min，生根后的試管苗接入培養(yǎng)基 3/2MS+PP3332.0mg/L+CCCl.0mg/L+ABAl.0mg/L 中進行壯苗，附加蔗糖60g/L，瓊脂3.7g/L，培養(yǎng)溫度24±2°C，光照強度40001x，pH6.0，培養(yǎng)基經(jīng)1.lkg/cm2高壓，121°C下滅菌20min,成活率87%。
[0008]實施例2
選擇生長健壯的枝條，切取帶芽莖段，漂白粉浸泡5min，流水沖洗lh，超凈工作臺上70%酒精處理25s，30%過氧化氫處理23min，無菌水沖洗干凈，消毒處理過的無菌莖段接種到WS+6-BA2.0mg/L+IBA0.2mg/L+GA30.5mg/L的培養(yǎng)基中進行芽的誘導(dǎo)，附加蔗糖30g/L，瓊脂6.5g/L，培養(yǎng)溫度24±2°C，光照強度20001χ, ρΗ6.0，培養(yǎng)基經(jīng)1.lkg/cm2高壓，121。。下滅菌20min，誘導(dǎo)出的芽苗接入培養(yǎng)基WS+IBA1.5mg/L中進行生根誘導(dǎo)，附加蔗糖30g/L，瓊脂6.5g/L，培養(yǎng)溫度24±2°C，光照強度60001χ, ρΗ6.0，培養(yǎng)基經(jīng)1.lkg/cm2高壓，121°C下滅菌 20min，生根后的試管苗接入培養(yǎng)基 3/2MS+PP3332.5mg/L+CCCl.5mg/L+ABAl.5mg/L 中進行壯苗，附加蔗糖60g/L，瓊脂3.7g/L，培養(yǎng)溫度24±2°C，光照強度40001x，pH6.0，培養(yǎng)基經(jīng)1.lkg/cm2高壓，121°C下滅菌20min,成活率92%。
[0009]實施例3
選擇生長健壯的枝條，切取帶芽莖段，漂白粉浸泡5min，流水沖洗lh，超凈工作臺上70%酒精處理25s，30%過氧化氫處理23min，無菌水沖洗干凈，消毒處理過的無菌莖段接種到WS+6-BA2.0mg/L+IBA0.2mg/L+GA30.5mg/L的培養(yǎng)基中進行芽的誘導(dǎo)，附加蔗糖30g/L，瓊脂6.5g/L，培養(yǎng)溫度24±2°C，光照強度20001χ, ρΗ6.0，培養(yǎng)基經(jīng)1.lkg/cm2高壓，121。。下滅菌20min，誘導(dǎo)出的芽苗接入培養(yǎng)基WS+IBA1.5mg/L中進行生根誘導(dǎo)，附加蔗糖30g/L，瓊脂6.5g/L，培養(yǎng)溫度24±2°C，光照強度60001χ, ρΗ6.0，培養(yǎng)基經(jīng)1.lkg/cm2高壓，121°C下滅菌 20min，生根后的試管苗接入培養(yǎng)基 3/2MS+PP3332.5mg/L+CCCl.0mg/L+ABAl.0mg/L 中進行壯苗，附加蔗糖60g/L，瓊脂3.7g/L，培養(yǎng)溫度24±2°C，光照強度40001x，pH6.0，培養(yǎng)基經(jīng)1.lkg/cm2高壓，121°C下滅菌20min,成活率94%。
【權(quán)利要求】
1.一種蝦子花組織培養(yǎng)的快速繁殖方法，包括莖段的消毒、芽的誘導(dǎo)和增殖、壯苗、生根誘導(dǎo)等，其主要步驟如下: (1)取蝦子花的莖段，進行消毒處理； (2)將步驟(I)消毒處理過的無菌莖段接種到WS+6-BA2.0mg/L+IBA0.2mg/L+GA30.5mg/L的培養(yǎng)基中進行芽的誘導(dǎo)，附加蔗糖30g/L，瓊脂6.5g/L，培養(yǎng)溫度24±2°C，光照強度20001χ, ρΗ6.0，培養(yǎng)基經(jīng) 1.1 kg/cm2 高壓，121°C 下滅菌 20min ； (3)將步驟(2)的誘導(dǎo)出的芽苗接入培養(yǎng)基WS+IBA1.5mg/L中進行生根誘導(dǎo)，附加蔗糖30g/L，瓊脂6.5g/L，培養(yǎng)溫度24±2°C，光照強度60001x，pH6.0，培養(yǎng)基經(jīng)1.1 kg/cm2高壓，121°C 下滅菌 20min ； (4)將步驟(3)生根后的試管苗接入培養(yǎng)基3/2MS+PP3332.0-2.5mg/L+CCCl.0-1.5mg/L+ABA1.0-1.5mg/L中進行壯苗，附加蔗糖60g/L，瓊脂3.7g/L，培養(yǎng)溫度24±2°C，光照強度40001x, pH6.0,培養(yǎng)基經(jīng) 1.lkg/cm2 高壓，121°C下滅菌 20min。
2.按照權(quán)利要求1所述的一種蝦子花組織培養(yǎng)的快速繁殖方法，其特征在于:步驟(I)中所述蝦子花無菌莖段的獲得為選擇生長健壯的枝條，切取帶芽莖段，漂白粉浸泡5min,流水沖洗lh，超凈工作臺上70%酒精處理25s，30%過氧化氫處理23min，無菌水沖洗干凈。
【文檔編號】A01H4/00GK104285800SQ201410550507
【公開日】2015年1月21日 申請日期:2014年10月17日 優(yōu)先權(quán)日:2014年10月17日
【發(fā)明者】劉東鋒, 楊成東 申請人:南京帝道農(nóng)業(yè)科技有限公司