一種高效預(yù)防仔豬腹瀉的母豬反飼方法
【專利摘要】本發(fā)明公開了一種高效預(yù)防仔豬腹瀉的母豬反飼方法。首先采取腹瀉嚴重仔豬的腹瀉糞便100ml，或經(jīng)絞碎的腸管和內(nèi)容物的混合物100g，加入滅菌生理鹽水至500ml，加入治療劑量的抗生素，制備成反飼樣品；用注射器抽取20ml樣品，直接涂抹或注射到母豬的口腔和鼻腔。本發(fā)明具有反飼效果整齊可靠，母豬感染迅速，減少操作次數(shù)，母豬母源抗體水平高，哺乳仔豬被動免疫力增強，降低仔豬病毒性腹瀉發(fā)病率等特點，實施后，顯著提高產(chǎn)房母豬所產(chǎn)仔豬的成活率，且反飼方法操作簡便，容易控制樣品量，效果確實，成本低廉，以較低的投入獲取較高的經(jīng)濟效益，并為提高集約化養(yǎng)豬場生產(chǎn)效率提供有效途經(jīng)。
【專利說明】一種高效預(yù)防仔豬腹瀉的母豬反飼方法

【技術(shù)領(lǐng)域】
[0001] 本發(fā)明涉及一種畜牧生產(chǎn)領(lǐng)域的預(yù)防仔豬病毒性腹瀉的母豬反飼方法，具體是一 種能迅速有效地使母豬感染導(dǎo)致仔豬腹瀉的病毒、通過母源抗體有效防治初生仔豬腹瀉的 母豬反飼方法。

【背景技術(shù)】
[0002] 隨著養(yǎng)豬模式的改變，我國養(yǎng)豬業(yè)在取得巨大成績的同時，情況也在不斷發(fā)生變 化。集約化養(yǎng)豬場成數(shù)倍增長，不可避免地會面臨來自動物疫病的更大壓力，其中仔豬腹 瀉病就是其中之一。近年來，每到冬春交替之際，全國各地就會大規(guī)模流行豬腹瀉病，導(dǎo)致 豬只發(fā)育遲緩、體弱、發(fā)病乃至大批死亡，直接導(dǎo)致較高的死淘率。這些發(fā)育遲緩、體弱、發(fā) 病的豬只，不但影響豬場正常生產(chǎn)，而且增加了養(yǎng)殖成本。通過長期系統(tǒng)的調(diào)查研究后認 為，造成仔豬腹瀉病流行的原因是多方面的，其中以仔豬病毒性感染導(dǎo)致的病毒性腹瀉為 主要流行形式。我國目前流行的仔豬病毒性腹瀉病主要有傳染性胃腸炎豬傳染性胃腸炎 (transmissible gastroenteritis, TGE)和豬流行性腹瀉（Porcine epidemic diarrhea, PED)。其中TGE由冠狀病毒引起的豬的高度接觸性傳染病，其臨床癥狀以嘔吐、嚴重腹瀉和 脫水性腸炎為主要特征。不同年齡和品種的豬均易感，尤其對2周齡以內(nèi)的仔豬致死率高 達100%。TGE呈世界性分布，從20世紀60年代末期，我國就有關(guān)于該病的報道，近年來 疫區(qū)更為擴大，給養(yǎng)豬業(yè)造成巨大經(jīng)濟損失。TGE病毒屬于冠狀病毒科冠狀病毒屬；而同樣 由冠狀病毒引起的PED，臨床以水樣腹瀉、嘔吐、脫水為主要特征，病理變化主要表現(xiàn)在豬的 空腸和回腸部分的腸絨毛萎縮和脫落。自2010年下半年以來，中國華南、華東和華北部分 省份出現(xiàn)了嚴重的仔豬腹瀉流行，造成大量哺乳仔豬的死亡，給養(yǎng)豬業(yè)造成了巨大的經(jīng)濟 損失。因此，研究一種仔豬病毒性腹瀉的防治方法，是今后一段時間內(nèi)我國集約化養(yǎng)豬業(yè)面 臨的緊迫課題之一。
[0003] 綜上，引起仔豬腹瀉的兩種主要病毒TGEV和FDEV均屬冠狀病毒，屬于自然界中最 容易變異的病毒，這就決定了最有效的免疫方法應(yīng)該是用當?shù)噩F(xiàn)實流行的毒株進行免疫， 而不是現(xiàn)在使用的已經(jīng)商品化的疫苗；同時，按照免疫學理論，預(yù)防仔豬病毒性腹瀉最有效 的免疫途徑應(yīng)該是能夠刺激黏膜免疫系統(tǒng)的口服免疫，而不是現(xiàn)行的肌肉注射疫苗免疫。 所以近年來各地探索施行的母豬反飼預(yù)防仔豬病毒性腹瀉方法較為科學，而且已經(jīng)取得了 一定的效果。反飼是將感染流行性腹瀉病毒仔豬的腸道，經(jīng)過處理，通過口服感染懷孕母 豬及后備母豬（即將接種的母豬），使得母豬經(jīng)過自然感染后產(chǎn)生針對這種病毒的免疫力， 體內(nèi)有高水平的抗體，產(chǎn)仔后母豬可以通過初乳給予仔豬高滴度的母源抗體，以抵抗病毒 的感染；對于冠狀病毒及輪狀病毒的控制，反飼都是有效的。然而，各廠家在實施反飼方法 時，由于缺乏統(tǒng)一規(guī)范的方法，效果參差不齊，沒有充分發(fā)揮反飼在防治仔豬腹瀉方面的應(yīng) 有作用。


【發(fā)明內(nèi)容】

[0004] 本發(fā)明的目的在于針對仔豬病毒性腹瀉病發(fā)病率居高不下，現(xiàn)今生豬集約化養(yǎng)豬 場實施母豬反飼缺乏統(tǒng)一規(guī)范方法這一現(xiàn)狀，提供一種適合集約化養(yǎng)殖場實際的、能提高 母豬反飼成功率及有效降低仔豬病毒性腹瀉發(fā)病率的方法。較現(xiàn)行方法，本發(fā)明具有反飼 效果整齊可靠，操作可控性強，操作次數(shù)減少，母豬感染迅速，母豬母源抗體水平高，哺乳仔 豬被動免疫力增強，明顯降低仔豬病毒性腹瀉發(fā)病率等特點。
[0005] 為達到上述目的，本發(fā)明的一種高效預(yù)防仔豬腹瀉的母豬反飼方法，首先采取腹 瀉嚴重仔豬的腹瀉糞便l〇〇ml，或腹瀉嚴重仔豬的經(jīng)絞碎的腸管和內(nèi)容物的混合物100g， 加入滅菌生理鹽水至500ml，加入治療劑量的抗生素，制備成反飼樣品；用注射器抽取20ml 樣品，直接涂抹或注射到母豬的口腔和鼻腔。
[0006] 上述母豬包括產(chǎn)前3周以上的懷孕母豬和后備母豬。
[0007] 上述腹瀉由TGEV或TOEV病毒感染引起。
[0008] 上述滅菌生理鹽水中NaCl濃度為0· 9wt%。
[0009] 上述經(jīng)絞碎的腸管和內(nèi)容物的混合物在無菌操作臺上操作。
[0010] 上述抗生素中青霉素的含量為l〇kU/ml，鏈霉素的含量為10mg/ml。
[0011] 與現(xiàn)有技術(shù)相比，本發(fā)明有如下的有益效果：
[0012] 1.采用本發(fā)明的反飼方法可以保證讓每個母豬在盡可能短的時間內(nèi)獲得同樣確 實的病毒感染量，只需一次操作就可使反飼母豬迅速感染并出現(xiàn)腹瀉癥狀，2天后母豬開始 腹瀉，5天后腹瀉率達80%以上，7-10天內(nèi)腹瀉停止。該批母豬所產(chǎn)仔豬病毒性腹瀉發(fā)病率 平均為12%，較傳統(tǒng)免疫有顯著改善，達到了被反飼母豬哺乳所產(chǎn)仔豬被動免疫力增強，仔 豬病毒性腹瀉發(fā)病率明顯降低的目標。
[0013] 2.本發(fā)明具有反飼效果整齊可靠，母豬感染迅速，減少操作次數(shù)，母豬母源抗體水 平高，哺乳仔豬被動免疫力增強，降低仔豬病毒性腹瀉發(fā)病率等特點，實施后，顯著提高產(chǎn) 房母豬所產(chǎn)仔豬的成活率。
[0014] 3.本發(fā)明在進行反飼樣品接種母豬時創(chuàng)造性地采用注射器涂抹或口腔灌注，這樣 即可保證感染量的準確一致，更重要的是保證每個母豬都能接種樣品，確保反飼效果準確 一致，而且保證該方法的規(guī)范化操作和推廣。
[0015] 4.本發(fā)明所采用的反飼方法操作簡便，容易控制樣品量，效果確實，成本低廉，以 較低的投入獲取較高的經(jīng)濟效益，并為提高集約化養(yǎng)豬場生產(chǎn)效率提供有效途經(jīng)。

【具體實施方式】
[0016] 本實施例在以本發(fā)明的技術(shù)方案為前提下進行實施，但本發(fā)明的保護范圍不限于 下述的實施例。下列實施例中未注明具體條件的實驗方法，通常按照常規(guī)條件。
[0017] 本發(fā)明涉及提供一種對現(xiàn)行反飼方法改進了的、能提高母豬反飼成功率、降低產(chǎn) 房仔豬病毒性腹瀉發(fā)病率的方法。其基本依據(jù)是，引起仔豬腹瀉的兩種主要病毒TGEV和 FDEV均屬冠狀病毒，屬于自然界中最容易變異的病毒，采用當?shù)噩F(xiàn)實流行的毒株進行免疫 一定比已經(jīng)商品化的疫苗更有效；而根據(jù)免疫學理論采用直接刺激黏膜免疫系統(tǒng)的口服免 疫應(yīng)該比現(xiàn)行的肌肉注射疫苗免疫效果好。
[0018] 為了有效防治本場其他批次母豬所產(chǎn)仔豬出現(xiàn)病毒性腹瀉，本發(fā)明一改傳統(tǒng)免疫 方法，在經(jīng)PCR確診腹瀉是TGEV或（和）PDEV感染所致后，立即采用反飼方法使母豬迅速 感染二種病毒，這樣母豬體內(nèi)就會產(chǎn)生較高滴度的針對二種病毒的抗體，將抗體分泌到乳 汁，所產(chǎn)仔豬通過及時哺乳獲得高滴度母源抗體，從而起到抑制二種病毒感染、防治仔豬病 毒性腹瀉的效果。為了確保反飼效果整齊可靠，在操作方法上，本發(fā)明一改現(xiàn)行的讓母豬 自由采食反飼樣品而獲得感染的做法，首先采取腹瀉嚴重仔豬的腹瀉糞便l〇〇ml，或經(jīng)絞 碎的腹瀉嚴重仔豬的腸管和內(nèi)容物的混合物l〇〇g，加入滅菌生理鹽水至500ml，加入治療 劑量的抗生素，制備成反飼樣品；用注射器抽取20ml樣品，直接涂抹或注射到母豬口腔和 鼻腔。或是這樣就可以保證讓每個母豬在盡可能短的時間內(nèi)獲得同樣確實的病毒感染量， 只需一次操作就可使反飼母豬迅速感染并出現(xiàn)腹瀉癥狀，2天后母豬開始腹瀉，5天后腹瀉 率達80%以上，7-10天內(nèi)腹瀉停止。該批母豬所產(chǎn)仔豬病毒性腹瀉發(fā)病率平均為12%，較 傳統(tǒng)免疫有顯著改善，達到了被反飼母豬哺乳所產(chǎn)仔豬被動免疫力增強，仔豬病毒性腹瀉 發(fā)病率明顯降低的目標。
[0019] 有一個產(chǎn)房有310頭待產(chǎn)母豬，已經(jīng)按照常規(guī)免疫程序進行過TGEV和TOEV二聯(lián) 苗肌肉注射免疫，該批母豬總產(chǎn)仔3710頭，產(chǎn)后3天仔豬全部出現(xiàn)腹瀉癥狀，10天內(nèi)仔豬死 亡2656頭，死亡率達71. 6%。經(jīng)PCR檢測，該批次仔豬感染TGEV和TOEV，說明本場仔豬腹 瀉主要是由TGEV和TOEV感染引起的。
[0020] 實施例1
[0021] 有一個產(chǎn)房仔豬出生3天后發(fā)生大批出現(xiàn)腹瀉，病仔豬有噴射狀稀糞及嘔吐，同 時伴有食欲稍減退，精神沉郁，7日齡以內(nèi)的仔豬死亡率達到71. 6%。隨機采取如下措施：
[0022] 1立即收集由于急性腹瀉新死或瀕臨死亡的仔豬消化道（胃）內(nèi)容物和內(nèi)臟，每 頭豬的樣品存放于一個樣品袋內(nèi)，將大部分樣品冷凍保存（_20°C )，并在同一天送三至五 頭豬樣品至相關(guān)實驗室，經(jīng)PCR檢測，該批次仔豬感染TGEV和TOEV，說明本場仔豬腹瀉主 要是由TGEV和TOEV感染引起的。
[0023] 2在無菌操作臺，一頭仔豬取100克腸管及內(nèi)容物，將樣品置于冰上，無菌操作將 內(nèi)臟絞碎，放入滅菌生理鹽水（0.9% NaCl)中至500ml，加入常規(guī)治療劑量的抗生素，制備 成反飼樣品；
[0024] 3. -頭仔豬腸管及內(nèi)容物所制備的樣品作為25頭母豬（即產(chǎn)前3周以上的懷孕 母豬和后備母豬）的反飼劑量；
[0025] 4取50ml的滅菌注射器，接上15cm的軟橡皮管，每頭母豬抽取20ml上述反飼樣 品，直接涂抹或注射到健康母豬鼻腔或口腔里。
[0026] 5注意事項：（1)樣品要現(xiàn)配現(xiàn)用；(2)本場樣品只能用于本場反飼，且嚴禁引用 其他場的樣品對本場母豬進行反飼；（3)反飼的所有母豬必須表現(xiàn)出明顯的臨床癥狀（即 明顯的腹瀉癥狀）；（4)人工感染后第二天就有母豬只出現(xiàn)腹瀉，到第五天人工感染的母豬 80%以上出現(xiàn)腹瀉，7-10內(nèi)人工感染腹瀉的母豬全部康復(fù)；（5)反飼只能用于產(chǎn)前三周以 上的懷孕母豬及所有的后備母豬，產(chǎn)前三周內(nèi)的母豬禁用。
[0027] 表1不同豬舍母豬反飼感染及產(chǎn)后仔豬腹瀉情況
[0028]

【權(quán)利要求】
1. 一種高效預(yù)防仔豬腹瀉的母豬反飼方法，其特征在于，首先采取腹瀉嚴重仔豬的腹 瀉糞便100ml，或經(jīng)絞碎的腸管和內(nèi)容物的混合物100g，加入滅菌生理鹽水至500ml，加入 治療劑量的抗生素，制備成反飼樣品；用注射器抽取20ml樣品，直接涂抹或注射到母豬的 口腔和鼻腔。
2. 根據(jù)權(quán)利要求1所述的高效預(yù)防仔豬腹瀉的母豬反飼方法，其特征在于，所述的母 豬包括產(chǎn)前3周以上的懷孕母豬和后備母豬。
3. 根據(jù)權(quán)利要求1所述的高效預(yù)防仔豬腹瀉的母豬反飼方法，其特征在于，所述的腹 瀉由TGEV或TOEV病毒感染引起。
4. 根據(jù)權(quán)利要求1所述的高效預(yù)防仔豬腹瀉的母豬反飼方法，其特征在于，所述的滅 菌生理鹽水中NaCl濃度為0. 9wt%。
5. 根據(jù)權(quán)利要求1所述的高效預(yù)防仔豬腹瀉的母豬反飼方法，其特征在于，所述的經(jīng) 絞碎的腸管和內(nèi)容物的混合物在無菌操作臺上操作。
6. 根據(jù)權(quán)利要求1所述的高效預(yù)防仔豬腹瀉的母豬反飼方法，其特征在于，所述的抗 生素中，青霉素的含量為10kU/ml,鏈霉素的含量為10mg/ml。
【文檔編號】A01K67/02GK104186401SQ201410274485
【公開日】2014年12月10日 申請日期:2014年6月18日 優(yōu)先權(quán)日:2014年6月18日
【發(fā)明者】陳方林, 朱建國, 錢明春, 賈亞偉, 廖忠江, 蔡學海, 武軍 申請人:江蘇天兆實業(yè)有限公司, 上海交通大學