一種用于生豬輔助防疫的復(fù)合微生態(tài)制劑的制作方法
【專利摘要】本發(fā)明提供一種用于生豬輔助防疫的復(fù)合微生態(tài)制劑，其制備方法的具體步驟：將冷凍保藏管中的嗜酸乳桿菌、醋酸桿菌、沼澤紅假單胞菌、釀酒酵母分別在斜面中活化，之后純化得各斜面菌種，備用；利用各斜面菌種制備相應(yīng)的原菌液；將各原菌液按1：1：1：1的菌量比接種于已滅菌的發(fā)酵培養(yǎng)基Ⅰ中進(jìn)行培養(yǎng)，得復(fù)合微生態(tài)制劑的一級(jí)種子；將一級(jí)種子按5%的接種量接種于已滅菌的發(fā)酵培養(yǎng)基Ⅱ中培養(yǎng)得復(fù)合微生態(tài)制劑的二級(jí)種子；最后將二級(jí)種子按5%的接種量接種至已滅菌的發(fā)酵培養(yǎng)基Ⅲ培養(yǎng)以獲得復(fù)合微生態(tài)制劑的成品。利用本發(fā)明復(fù)合微生態(tài)制劑能夠在生豬養(yǎng)殖場(chǎng)起到阻隔病菌傳播的作用，從而提高了生豬養(yǎng)殖抗病能力。
【專利說明】—種用于生豬輔助防疫的復(fù)合微生態(tài)制劑
【【技術(shù)領(lǐng)域】】
[0001]本發(fā)明涉及一種養(yǎng)殖領(lǐng)域用的復(fù)合微生態(tài)制劑，尤其涉及一種用于生豬輔助防疫的復(fù)合微生態(tài)制劑。
【【背景技術(shù)】】
[0002]隨著生豬養(yǎng)殖的日益集中化、規(guī)?；l(fā)展，對(duì)生豬的疫病防治控制的要求日益提高。目前，養(yǎng)豬場(chǎng)的疫病防治主要還是使用疫苗和抗生素等傳統(tǒng)手段，而長期的抗生素使用也帶來明顯的弊端，不僅養(yǎng)殖成本提高，而且?guī)砩i耐藥性問題、以及因豬肉抗生素殘留帶來的對(duì)人們健康威脅問題。因此，研究無抗生素型的生豬防疫技術(shù)成為當(dāng)前養(yǎng)殖行業(yè)最熱點(diǎn)的話題之一。
【
【發(fā)明內(nèi)容】
】
[0003]本發(fā)明所要解決的技術(shù)問題在于提供一種用于生豬輔助防疫的復(fù)合微生態(tài)制劑，利用其能夠在生豬養(yǎng)殖場(chǎng)起到阻隔病菌傳的作用，從而提高了生豬養(yǎng)殖的抗病能力。
[0004]本發(fā)明是通過以下技術(shù)方案解決上述技術(shù)問題的:一種用于生豬輔助防疫的復(fù)合微生態(tài)制劑，其制備方法的具體步驟如下:
[0005](I)原菌種斜面培養(yǎng):將冷凍保藏管中的嗜酸乳桿菌、醋酸桿菌、沼澤紅假單胞菌、釀酒酵母分別在斜面中活化，之后分別置于90_培養(yǎng)皿中進(jìn)行純化，得嗜酸乳桿菌斜面菌種、醋酸桿菌斜面菌種、沼澤紅假單胞菌斜面菌種、及釀酒酵母斜面菌種，備用；
[0006](2)原菌種液體培養(yǎng):將嗜`酸乳桿菌斜面菌種接種于已滅菌的液體培養(yǎng)基I中，之后置于37°C下厭氧培養(yǎng)1-2天得嗜酸乳桿菌原菌液；將醋酸桿菌斜面菌種接種于已滅菌的液體培養(yǎng)基II中，接著于30°C下好氧培養(yǎng)1-2天得醋酸桿菌原菌液；將沼澤紅假單胞菌斜面菌種接種于已滅菌的液體培養(yǎng)基III中，接著于28°C -30°C厭氧鎢絲燈光照培養(yǎng)5-7天得沼澤紅假單胞菌原菌液；將釀酒酵母斜面菌種接種于已滅菌的液體培養(yǎng)基IV中，之后于280C -30°C下好氧培養(yǎng)3天得釀酒酵母原菌液；
[0007](3) 一級(jí)種子培養(yǎng):將嗜酸乳桿菌原菌液、醋酸桿菌原菌液、沼澤紅假單胞菌原菌液、及釀酒酵母原菌液按1:1:1:1的菌量比接種于已滅菌的發(fā)酵培養(yǎng)基I中進(jìn)行培養(yǎng)，具體地:先接種醋酸桿菌原菌液與釀酒酵母原菌液，并于30°C下好氧培養(yǎng)3天，再接種嗜酸乳桿菌原菌液與沼澤紅假單胞菌原菌液，于30°C下厭氧培養(yǎng)3天，得復(fù)合微生態(tài)制劑的一級(jí)種子；
[0008](4)二級(jí)種子培養(yǎng):將所得的一級(jí)種子按5%的接種量接種于已滅菌的發(fā)酵培養(yǎng)基II中，并于30°C下先好氧培養(yǎng)3-5天再厭氧培養(yǎng)3-5天，得復(fù)合微生態(tài)制劑的二級(jí)種子；
[0009](5)成品培養(yǎng):將所得的二級(jí)種子按5%的接種量接種至已滅菌的發(fā)酵培養(yǎng)基III中，并于30°C下先好氧3-5天再厭氧培養(yǎng)3-5天，獲得復(fù)合微生態(tài)制劑的成品。
[0010]進(jìn)一步地，所述步驟(I)中嗜酸乳桿菌在斜面中活化的具體操作為:用接種環(huán)將嗜酸乳桿菌接種于已滅菌的斜面培養(yǎng)基I上，之后于37°c下厭氧培養(yǎng)1-2天；所述斜面培養(yǎng)基I的滅菌溫度為121°c、滅菌時(shí)間為20min ;且該斜面培養(yǎng)基I的組分:蛋白胨10克、牛肉膏10克、酵母粉5克、葡萄糖5克、乙酸鈉5克、檸檬酸二胺2克、吐溫801克、磷酸氫二鉀2克、硫酸鎂0.2克、硫酸錳0.05、碳酸鈣20克、瓊脂15克、水1000ml、PH6.8。
[0011]進(jìn)一步地，所述步驟(I)中醋酸桿菌在斜面中活化的具體操作為:制備斜面培養(yǎng)基II，并將斜面培養(yǎng)基II置于121°C下滅菌20min，接著冷卻至60°C以下加入無水乙醇，且每IOOOml斜面培養(yǎng)基II需加入IOOml無水乙醇，之后用接種環(huán)將醋酸桿菌接種于斜面培養(yǎng)基II上，然后于30°C下好氧培養(yǎng)1-2天；所述斜面培養(yǎng)基II的組分:酵母粉10克、葡萄糖
10、磷酸氫二鉀0.5克、硫酸鎂0.5克、瓊脂20克、水1000ml、PH5.5。
[0012]進(jìn)一步地，所述步驟(I)中沼澤紅假單胞菌在斜面中活化的具體操作為:用接種環(huán)將沼澤紅假單胞菌接種于已滅菌的斜面培養(yǎng)基III上，之后于28°C -30°c厭氧鎢絲燈光照培養(yǎng)5-7天；所述斜面培養(yǎng)基III的滅菌溫度為121°C、滅菌時(shí)間為15min ;且該斜面培養(yǎng)基III的組分:酵母粉10克、磷酸氫二鉀I克、硫酸鎂0.5克、瓊脂20克、水1000ml、PH7.0-7.2。
[0013]進(jìn)一步地，所述步驟(I)中釀酒酵母在斜面中活化的具體操作為:用接種環(huán)將釀酒酵母接種于已滅菌的斜面培養(yǎng)基IV上，之后于28-30°C下好氧培養(yǎng)3天；所述斜面培養(yǎng)基IV的滅菌溫度為121°C、滅菌時(shí)間為30min ;且該斜面培養(yǎng)基IV的組分:馬鈴薯200克、蔗糖20克、瓊脂15-20克、水1000ml、PH自然。
[0014]進(jìn)一步地，所述步驟(2)中液體培養(yǎng)基I的組分:蛋白胨10克、牛肉膏10克、酵母粉5克、葡萄糖5克、乙酸鈉5克、檸檬酸二胺2克、吐溫801克、磷酸氫二鉀2克、硫酸鎂0.2克、硫酸錳0.05、碳酸鈣20克、瓊脂15克、水1000ml、PH6.8 ;液體培養(yǎng)基II的組分:酵母粉10克、葡萄糖10、磷酸氫二鉀0.5克、硫酸鎂0.5克、水1000ml、PH5.5 ;液體培養(yǎng)基III的組分:酵母粉10克、磷酸氫二鉀I克、硫酸鎂0.5克、水1000ml、PH7.0-7.2 ;液體培養(yǎng)基IV的組分:馬鈴薯200克、蔗糖20克、水1000ml、PH自然。
[0015]進(jìn)一步地，所述步驟(3)中發(fā)酵培養(yǎng)基I的組分:桔水5%、酵母粉0.5%、蛋白胨1%、氯化銨0.1%、氯化鈉0.1%、磷酸二氫鉀0.05%、硫酸鎂0.05%、硫酸鋅0.025%、硫酸亞鐵0.025%，余量水。
[0016]進(jìn)一步地，所述步驟(4)中發(fā)酵培養(yǎng)基II的組分:桔水5%、酵母粉0.1%、蛋白胨0.1%、氯化銨0.1%、氯化鈉0.05%、磷酸二氫鉀0.1%、硫酸鎂0.05%、硫酸鋅0.025%、硫酸亞鐵0.025%，余量為水。
[0017]進(jìn)一步地，所述步驟(5)中發(fā)酵培養(yǎng)基III的組分:桔水5%、氯化銨0.2%、氯化鈉0.05%、磷酸二氫鉀0.1%、硫酸鎂0.05%、硫酸鋅0.025%、硫酸亞鐵0.025%，余量為水。
[0018]本發(fā)明一種用于生豬輔助防疫的復(fù)合微生態(tài)制劑的有益效果在于:采用本發(fā)明復(fù)合微生態(tài)制劑能夠在養(yǎng)殖場(chǎng)周邊形成一個(gè)以良性微生物為主的微環(huán)境，可起到阻隔病菌傳播，從而提高生豬抗病能力的效果，還具有使用方便，作用明顯的特點(diǎn)；而且該復(fù)合微生態(tài)制劑還具有工藝較為簡單、成本低的優(yōu)點(diǎn)，從而使得本發(fā)明復(fù)合微生態(tài)制劑能夠較為廣泛地應(yīng)用。
【【具體實(shí)施方式】】
[0019]本發(fā)明一種用于生豬輔助防疫的復(fù)合微生態(tài)制劑，其制備方法的具體步驟如下:
[0020](I)原菌種斜面培養(yǎng):將冷凍保藏管中的嗜酸乳桿菌、醋酸桿菌、沼澤紅假單胞菌、釀酒酵母分別在斜面中活化，之后分別置于90mm培養(yǎng)皿中進(jìn)行純化，得嗜酸乳桿菌斜面菌種、醋酸桿菌斜面菌種、沼澤紅假單胞菌斜面菌種、及釀酒酵母斜面菌種，備用；
[0021](2)原菌種液體培養(yǎng):將嗜酸乳桿菌斜面菌種接種于已滅菌的液體培養(yǎng)基I中，之后置于37°C下厭氧培養(yǎng)1-2天得嗜酸乳桿菌原菌液；將醋酸桿菌斜面菌種接種于已滅菌的液體培養(yǎng)基II中，接著于30°C下好氧培養(yǎng)1-2天得醋酸桿菌原菌液；將沼澤紅假單胞菌斜面菌種接種于已滅菌的液體培養(yǎng)基III中，接著于28°C -30°C厭氧鎢絲燈光照培養(yǎng)5-7天得沼澤紅假單胞菌原菌液；將釀酒酵母斜面菌種接種于已滅菌的液體培養(yǎng)基IV中，之后于280C -30°C下好氧培養(yǎng)3天得釀酒酵母原菌液；
[0022](3) 一級(jí)種子培養(yǎng):將嗜酸乳桿菌原菌液、醋酸桿菌原菌液、沼澤紅假單胞菌原菌液、及釀酒酵母原菌液按1:1:1:1的菌量比接種于已滅菌的發(fā)酵培養(yǎng)基I中進(jìn)行培養(yǎng)，具體地:先接種醋酸桿菌原菌液與釀酒酵母原菌液，并于30°c下好氧培養(yǎng)3天，再接種嗜酸乳桿菌原菌液與沼澤紅假單胞菌原菌液，于30°C下厭氧培養(yǎng)3天，得復(fù)合微生態(tài)制劑的一級(jí)種子；
[0023](4)二級(jí)種子培養(yǎng):將所得的一級(jí)種子按5%的接種量接種于已滅菌的發(fā)酵培養(yǎng)基II中，并于30°C下先好氧培養(yǎng)3-5天再厭氧培養(yǎng)3-5天，得復(fù)合微生態(tài)制劑的二級(jí)種子；
[0024](5)成品培養(yǎng): 將所得的二級(jí)種子按5%的接種量接種至已滅菌的發(fā)酵培養(yǎng)基III中，并于30°C下先好氧3-5天再厭氧培養(yǎng)3-5天，獲得復(fù)合微生態(tài)制劑的成品。
[0025]其中:步驟(I)中嗜酸乳桿菌在斜面中活化的具體操作為:用接種環(huán)將嗜酸乳桿菌接種于已滅菌的斜面培養(yǎng)基I上，之后于37°c下厭氧培養(yǎng)1-2天；所述斜面培養(yǎng)基I的滅菌溫度為121°C、滅菌時(shí)間為20min ;且該斜面培養(yǎng)基I的組分:蛋白胨10克、牛肉膏10克、酵母粉5克、葡萄糖5克、乙酸鈉5克、檸檬酸二胺2克、吐溫801克、磷酸氫二鉀2克、硫酸鎂0.2克、硫酸錳0.05、碳酸鈣20克、瓊脂15克、水1000ml、PH6.8。步驟(I)中醋酸桿菌在斜面中活化的具體操作為:制備斜面培養(yǎng)基II，并將斜面培養(yǎng)基II置于121°C下滅菌20min,接著冷卻至60°C以下加入無水乙醇，且每IOOOml斜面培養(yǎng)基II需加入IOOml無水乙醇，之后用接種環(huán)將醋酸桿菌接種于斜面培養(yǎng)基II上，然后于30°C下好氧培養(yǎng)1-2天；所述斜面培養(yǎng)基II的組分:酵母粉10克、葡萄糖10、磷酸氫二鉀0.5克、硫酸鎂0.5克、瓊脂20克、水1000ml、PH5.5。步驟(I)中沼澤紅假單胞菌在斜面中活化的具體操作為:用接種環(huán)將沼澤紅假單胞菌接種于已滅菌的斜面培養(yǎng)基III上，之后于28°C -30°C厭氧鎢絲燈光照培養(yǎng)5-7天；所述斜面培養(yǎng)基III的滅菌溫度為121°C、滅菌時(shí)間為15min ;且該斜面培養(yǎng)基III的組分:酵母粉10克、磷酸氫二鉀I克、硫酸鎂0.5克、瓊脂20克、水1000ml、PH7.0-7.2。步驟(I)中釀酒酵母在斜面中活化的具體操作為:用接種環(huán)將釀酒酵母接種于已滅菌的斜面培養(yǎng)基IV上，之后于28-30°C下好氧培養(yǎng)3天；所述斜面培養(yǎng)基IV的滅菌溫度為121°C、滅菌時(shí)間為30min ;且該斜面培養(yǎng)基IV的組分:馬鈴薯200克、蔗糖20克、瓊脂15-20克、水1000ml、PH 自然。
[0026]步驟(2)中液體培養(yǎng)基I的組分:蛋白胨10克、牛肉膏10克、酵母粉5克、葡萄糖5克、乙酸鈉5克、檸檬酸二胺2克、吐溫801克、磷酸氫二鉀2克、硫酸鎂0.2克、硫酸錳0.05、碳酸鈣20克、水1000ml、PH6.8 ;液體培養(yǎng)基II的組分:酵母粉10克、葡萄糖10、磷酸氫二鉀0.5克、硫酸鎂0.5克、瓊脂2%、水1000ml、PH5.5 ;液體培養(yǎng)基III的組分:酵母粉10克、磷酸氫二鉀I克、硫酸鎂0.5克、水1000ml、PH7.0-7.2 ;液體培養(yǎng)基IV的組分:馬鈴薯200克、蔗糖20克、水1000ml、PH自然。
[0027]步驟(3)中發(fā)酵培養(yǎng)基I的組分:桔水5%、酵母粉0.5%、蛋白胨1%、氯化銨0.1%、氯化鈉0.1%、磷酸二氫鉀0.05%、硫酸鎂0.05%、硫酸鋅0.025%、硫酸亞鐵0.025%，余量為水。步驟(4)中發(fā)酵培養(yǎng)基II的組分:桔水5%、酵母粉0.1%、蛋白胨0.1%、氯化銨0.1%、氯化鈉0.05%、磷酸二氫鉀0.1%、硫酸鎂0.05%、硫酸鋅0.025%、硫酸亞鐵0.025%,余量為水。步驟
(5)中發(fā)酵培養(yǎng)基III的組分:桔水5%、氯化銨0.2%、氯化鈉0.05%、磷酸二氫鉀0.1%、硫酸鎂
0.05%、硫酸鋅0.025%、硫酸亞鐵0.025%，余量為水。
[0028]需要說明的是，本發(fā)明中各培養(yǎng)基的百分比均為質(zhì)量百分比。
[0029]本發(fā)明所述的復(fù)合微生態(tài)制劑用于對(duì)生豬進(jìn)行防疫， 申請(qǐng)人:以該復(fù)合微生態(tài)制劑應(yīng)用于生豬養(yǎng)殖場(chǎng)為例進(jìn)行闡述說明，具體地:
[0030]同時(shí)設(shè)置試驗(yàn)組和空白對(duì)照組:試驗(yàn)組中，養(yǎng)殖生豬67頭，將本發(fā)明制備獲得的復(fù)合微生態(tài)制劑與水按照1:100的體積比配制成水稀釋液，將該水稀釋液均勻地噴灑于養(yǎng)殖場(chǎng)和生豬欄舍的四周，且每平方米每次噴灑水稀釋液0.1公斤；開始每周噴灑2-3次，一個(gè)月后每周噴灑I次，然后逐步延長到10天一次、每月1-2次?？瞻讓?duì)照組未噴灑復(fù)合微生態(tài)制劑的稀釋液。實(shí)驗(yàn)結(jié)果為:試驗(yàn)組生豬全部正常飼養(yǎng)出欄，即淘汰率為0%;空白對(duì)照組中有兩頭生豬在飼養(yǎng)過程中因病退出實(shí)驗(yàn)，淘汰率5.9% ;且試驗(yàn)組生豬全過程治療36頭次，治療率為56.25% ;空白對(duì)照組生豬全過程治療30頭次，治療率88.24%。因此，從實(shí)驗(yàn)結(jié)果可知，試驗(yàn)組的防疫效果明顯。
[0031]綜上，采用本發(fā)明復(fù)合微生態(tài)制劑能夠在養(yǎng)殖場(chǎng)周邊形成一個(gè)以良性微生物為主的微環(huán)境，可起到阻隔病菌傳播，從而提高生豬養(yǎng)殖抗病能力的效果，還具有使用方便，作用明顯的特點(diǎn)；而且該復(fù)合微生態(tài)制劑還具有工藝較為簡單、成本低的優(yōu)點(diǎn)，從而使得本發(fā)明復(fù)合微生態(tài)制劑能夠 較為廣泛地應(yīng)用。
【權(quán)利要求】
1.一種用于生豬輔助防疫的復(fù)合微生態(tài)制劑，其特征在于:其制備方法的具體步驟如下: (1)原菌種斜面培養(yǎng):將冷凍保藏管中的嗜酸乳桿菌、醋酸桿菌、沼澤紅假單胞菌、釀酒酵母分別在斜面中活化，之后分別置于90mm培養(yǎng)皿中進(jìn)行純化，得嗜酸乳桿菌斜面菌種、醋酸桿菌斜面菌種、沼澤紅假單胞菌斜面菌種、及釀酒酵母斜面菌種，備用； (2)原菌種液體培養(yǎng):將嗜酸乳桿菌斜面菌種接種于已滅菌的液體培養(yǎng)基I中，之后置于37°C下厭氧培養(yǎng)1-2天得嗜酸乳桿菌原菌液；將醋酸桿菌斜面菌種接種于已滅菌的液體培養(yǎng)基II中，接著于30°C下好氧培養(yǎng)1-2天得醋酸桿菌原菌液；將沼澤紅假單胞菌斜面菌種接種于已滅菌的液體培養(yǎng)基III中，接著于28°C -30°C厭氧鎢絲燈光照培養(yǎng)5-7天得沼澤紅假單胞菌原菌液；將釀酒酵母斜面菌種接種于已滅菌的液體培養(yǎng)基IV中，之后于280C -30°C下好氧培養(yǎng)3天得釀酒酵母原菌液； (3)—級(jí)種子培養(yǎng):將嗜酸乳桿菌原菌液、醋酸桿菌原菌液、沼澤紅假單胞菌原菌液、及釀酒酵母原菌液按1:1:1:1的菌量比接種于已滅菌的發(fā)酵培養(yǎng)基I中進(jìn)行培養(yǎng)，具體地:先接種醋酸桿菌原菌液與釀酒酵母原菌液，并于30°C下好氧培養(yǎng)3天，再接種嗜酸乳桿菌原菌液與沼澤紅假單胞菌原菌液，于30°C下厭氧培養(yǎng)3天，得復(fù)合微生態(tài)制劑的一級(jí)種子； (4)二級(jí)種子培養(yǎng):將所得的一級(jí)種子按5%的接種量接種于已滅菌的發(fā)酵培養(yǎng)基II中，并于30°C下先好氧培養(yǎng) 3-5天再厭氧培養(yǎng)3-5天，得復(fù)合微生態(tài)制劑的二級(jí)種子； (5)成品培養(yǎng):將所得的二級(jí)種子按5%的接種量接種至已滅菌的發(fā)酵培養(yǎng)基III中，并于30°C下先好氧3-5天再厭氧培養(yǎng)3-5天，獲得復(fù)合微生態(tài)制劑的成品。
2.根據(jù)權(quán)利要求1所述的一種用于生豬輔助防疫的復(fù)合微生態(tài)制劑，其特征在于:所述步驟(I)中嗜酸乳桿菌在斜面中活化的具體操作為:用接種環(huán)將嗜酸乳桿菌接種于已滅菌的斜面培養(yǎng)基I上，之后于37°C下厭氧培養(yǎng)1-2天；所述斜面培養(yǎng)基I的滅菌溫度為121°C、滅菌時(shí)間為20min ;且該斜面培養(yǎng)基I的組分:蛋白胨10克、牛肉膏10克、酵母粉5克、葡萄糖5克、乙酸鈉5克、檸檬酸二胺2克、吐溫801克、磷酸氫二鉀2克、硫酸鎂0.2克、硫酸錳0.05、碳酸鈣20克、瓊脂15克、水1000ml、PH6.8。
3.根據(jù)權(quán)利要求1所述的一種用于生豬輔助防疫的復(fù)合微生態(tài)制劑，其特征在于:所述步驟(I)中醋酸桿菌在斜面中活化的具體操作為:制備斜面培養(yǎng)基II，并將斜面培養(yǎng)基II置于121°C下滅菌20min，接著冷卻至60°C以下加入無水乙醇，且每IOOOml斜面培養(yǎng)基II需加入IOOml無水乙醇，之后用接種環(huán)將醋酸桿菌接種于斜面培養(yǎng)基II上，然后于30°C下好氧培養(yǎng)1-2天；所述斜面培養(yǎng)基II的組分:酵母粉10克、葡萄糖10克、磷酸氫二鉀0.5克、硫酸鎂0.5克、瓊脂20克、水1000ml、PH5.5。
4.根據(jù)權(quán)利要求1所述的一種用于生豬輔助防疫的復(fù)合微生態(tài)制劑，其特征在于:所述步驟(I)中沼澤紅假單胞菌在斜面中活化的具體操作為:用接種環(huán)將沼澤紅假單胞菌接種于已滅菌的斜面培養(yǎng)基III上，之后于28°C-30°C厭氧鎢絲燈光照培養(yǎng)5-7天；所述斜面培養(yǎng)基III的滅菌溫度為121°C、滅菌時(shí)間為15min ;且該斜面培養(yǎng)基III的組分:酵母粉10克、磷酸氫二鉀I克、硫酸鎂0.5克、瓊脂20克、水1000ml、PH7.0-7.2。
5.根據(jù)權(quán)利要求1所述的一種用于生豬輔助防疫的復(fù)合微生態(tài)制劑，其特征在于:所述步驟(I)中釀酒酵母在斜面中活化的具體操作為:用接種環(huán)將釀酒酵母接種于已滅菌的斜面培養(yǎng)基IV上，之后于28-30°C下好氧培養(yǎng)3天；所述斜面培養(yǎng)基IV的滅菌溫度為121°C、滅菌時(shí)間為30min ;且該斜面培養(yǎng)基IV的組分:馬鈴薯200克、蔗糖20克、瓊脂15-20克、水1000ml、PH 自然。
6.根據(jù)權(quán)利要求1所述的一種用于生豬輔助防疫的復(fù)合微生態(tài)制劑，其特征在于:所述步驟(2)中液體培養(yǎng)基I的組分:蛋白胨10克、牛肉膏10克、酵母粉5克、葡萄糖5克、乙酸鈉5克、檸檬酸二胺2克、吐溫801克、磷酸氫二鉀2克、硫酸鎂0.2克、硫酸錳0.05、碳酸鈣20克、瓊脂15克、水1000ml、PH6.8 ;液體培養(yǎng)基II的組分:酵母粉10克、葡萄糖10、磷酸氫二鉀0.5克、硫酸鎂0.5克、水1000ml、PH5.5 ;液體培養(yǎng)基III的組分:酵母粉10克、磷酸氫二鉀I克、硫酸鎂0.5克、水1000ml、PH7.0-7.2 ;液體培養(yǎng)基IV的組分:馬鈴薯200克、蔗糖20克、水1000ml、PH自然。
7.根據(jù)權(quán)利要求1所述的一種用于生豬輔助防疫的復(fù)合微生態(tài)制劑，其特征在于:所述步驟(3)中發(fā)酵培養(yǎng)基I的組分:桔水5%、酵母粉0.5%、蛋白胨1%、氯化銨0.1%、氯化鈉0.1%、磷酸二氫鉀0.05%、硫酸鎂0.05%、硫酸鋅0.025%、硫酸亞鐵0.025%，余量水。
8.根據(jù)權(quán)利要求1所述的一種用于生豬輔助防疫的復(fù)合微生態(tài)制劑，其特征在于:所述步驟(4)中發(fā)酵培養(yǎng)基II的組分:桔水5%、酵母粉0.1%、蛋白胨0.1%、氯化銨0.1%、氯化鈉0.05%、磷酸二氫鉀0.1%、硫酸鎂 0.05%、硫酸鋅0.025%、硫酸亞鐵0.025%，余量為水。
9.根據(jù)權(quán)利要求1所述的一種用于生豬輔助防疫的復(fù)合微生態(tài)制劑，其特征在于:所述步驟(5)中發(fā)酵培養(yǎng)基III的組分:桔水5%、氯化銨0.2%、氯化鈉0.05%、磷酸二氫鉀0.1%、硫酸鎂0.05%、硫酸鋅0.025%、硫酸亞鐵0.025%，余量為水。
【文檔編號(hào)】A01N63/02GK103444784SQ201310373237
【公開日】2013年12月18日 申請(qǐng)日期:2013年8月23日 優(yōu)先權(quán)日:2013年8月23日
【發(fā)明者】陳琳, 莫艷華, 秦火保, 周世須 申請(qǐng)人:福州大用生物應(yīng)用科技有限公司