專利名稱：一種蟲草菌絲體及制備方法
技術(shù)領(lǐng)域：
本發(fā)明涉及蟲草菌絲體及其制備方法，屬于食品加工領(lǐng)域。
背景技術(shù)：
冬蟲夏草是我國傳統(tǒng)名貴的強(qiáng)壯滋補(bǔ)藥材，由于天然蟲草有其嚴(yán)格的寄生性及特殊的生長(zhǎng)環(huán)境，加之近年來生態(tài)環(huán)境的嚴(yán)重破壞，天然蟲草資源銳減，價(jià)格猛漲。隨著人民生活水平的不斷提高，對(duì)蟲草的需求量正日益增大，因此，人工培養(yǎng)蟲草菌絲體替代天然蟲草成為當(dāng)務(wù)之急。現(xiàn)代科學(xué)研究表明，蟲草菌絲體中富含蟲草酸、蟲草素、SOD酶、蟲草多糖等功效成分，其含量基本與天然冬蟲夏草相同，蟲草菌絲體同樣具有提高人體免疫力、抗疲勞、預(yù)防心腦血管疾病及抗腫瘤等多種促進(jìn)人體健康的功能，產(chǎn)品保健功效顯著，是天然冬蟲夏草理想的替代品，有廣闊的發(fā)展前景。鈣元素是人體中含量最多的無機(jī)鹽，占人體體重的2%，具有多種重要的生理功能，享有“生命元素”之稱。鎂是人體必需的重要元素之一，體內(nèi)鎂的總量約為21-28g。鎂元素在調(diào)節(jié)免疫系統(tǒng)方面起重要作用:參與免疫球蛋白的合成、參與激活補(bǔ)體、調(diào)節(jié)吞噬細(xì)胞的吞噬功能、調(diào)節(jié)T淋巴細(xì)胞的成熟和功能，低鎂可致血免疫球蛋白降低。鐵是人體含量最多的必需微量元素，人體總含量為3-5克。在人體所必需的十多種微量元素中，鐵無論在重要性上還是在數(shù)量上都居首位，堪稱“微量元素中的老大”。鋅是人體不可缺少的微量元素之一，人體內(nèi)含鋅量約為2-3g。鋅元素參與體內(nèi)多種生理活動(dòng)，具有重要的生理功能:其能直接作用于脾臟、扁桃體及胸腺等免疫器官，并作用于多種免疫物質(zhì)與免疫細(xì)胞，促進(jìn)生長(zhǎng)，提高機(jī)體免疫力；維持機(jī)體的正常生長(zhǎng)發(fā)育；維持正常的味覺功能及食欲；促進(jìn)正常的性發(fā)育等。蟲草酸、蟲草素、SOD酶是蟲草菌絲體本身含有的特征性功效成分。國內(nèi)外目前關(guān)于富含鈣、鎂、鐵、鋅的蟲 草菌絲體產(chǎn)品及其制備方法還沒有相應(yīng)的報(bào)道。

發(fā)明內(nèi)容
本發(fā)明的目的在于提供一種新的蟲草菌絲體及其制備方法，所述產(chǎn)品較現(xiàn)有技術(shù)生產(chǎn)出的蟲草菌絲體含有更高的鈣、鎂、鐵、鋅等元素，并且蟲草酸、蟲草素、SOD酶等特征性功效成分含量更高，產(chǎn)品的保健功效更為顯著；本發(fā)明所述的蟲草菌絲體的培養(yǎng)周期短、產(chǎn)品得率聞，易于規(guī)|旲化生廣。為達(dá)到上述目的，本發(fā)明采用下列技術(shù)方案實(shí)現(xiàn)。菌種接種恒溫培養(yǎng)的培養(yǎng)基配方組成及重量比為:麥芽糖1% -3% ;雞蛋蛋白粉2% -8% ；KH2PO40.1% -0.5% ;硫酸鎂 0.1% -3% ;水余量。為進(jìn)一步實(shí)現(xiàn)本發(fā)明的目的，其配方組成及重量比為:麥芽糖2% ;雞蛋蛋白粉5% ；ΚΗ2Ρ040.3% ;硫酸鎂 0.2% ;水余量。種子罐發(fā)酵培養(yǎng)的培養(yǎng)基配方組成及重量比為:馬鈴薯粉15% -30% ;葡萄糖1% -4% ;乳清濃縮蛋白 2% -5% ；KH2PO40.1% -0.5% ;硫酸鎂 0.1% -3% ;水余量。
為進(jìn)一步實(shí)現(xiàn)本發(fā)明的目的，其配方組成及重量比為:馬鈴薯粉20%;葡萄糖3%;乳清濃縮蛋白4% ；KH2PO40.2% ;硫酸鎂0.1% ;水余量。發(fā)酵罐培養(yǎng)的培養(yǎng)基配方組成及重量比為:大豆分離蛋白4% -10% ;脫脂奶粉4% -10% ;酶解骨粉8% -12% ;葡萄糖1% -3% ;水余量。為進(jìn)一步實(shí)現(xiàn)本發(fā)明的目的，其配方組成及重量比為:大豆分離蛋白5% ;脫脂奶粉5% ;酶解骨粉10% ;葡萄糖3% ;水余量。本發(fā)明采用蝙蝠蛾擬青霉為菌種，通過菌種接種恒溫培養(yǎng)、種子罐培養(yǎng)、發(fā)酵罐培養(yǎng)、超低溫真空濃縮、冷凍干燥、粉碎等工藝制備而成。具體步驟為:步驟一:菌種接種恒溫培養(yǎng):配制培養(yǎng)基:其配方組成及重量比為:麥芽糖1% -3% ;雞蛋蛋白粉2% -8% ；KH2PO40.1% -0.5% ;硫酸鎂0.1% -3% ;水余量。將配制好的培養(yǎng)基分裝入錐形瓶中，封口后在120-130°C條件下滅菌18-30分鐘，取出培養(yǎng)基，自然冷卻至20_30°C，在無菌條件下接入蝙蝠蛾擬青霉菌種，15-30°C恒溫培養(yǎng)5-10天。步驟二:種子罐培養(yǎng):配制培養(yǎng)基:其配方組成及重量比為:馬鈴薯粉15% -30% ;葡萄糖1% -4% ;乳清濃縮蛋白2% -5% ；KH2PO40.1% -0.5% ;硫酸鎂0.1% -3% ;水余量。配制好的培養(yǎng)基進(jìn)行高溫高壓滅菌，滅菌條件為:滅菌壓力0.1MPa ;滅菌溫度121°C ;滅菌時(shí)間30分鐘。滅菌后接入步驟一培養(yǎng)好的菌種，接種量5%-10%，溫度15-30°C，通氣1: 0.5，攪拌速度200轉(zhuǎn)/分鐘，培養(yǎng)時(shí)間72 小時(shí)。步驟三:發(fā)酵罐培養(yǎng):配制培養(yǎng)基:其配方組成及重量比為:大豆分離蛋白4% -10% ;脫脂奶粉4% -10% ;酶解骨粉8% -12% ;葡萄糖1% -3% ;水余量。配制好的培養(yǎng)基進(jìn)行高溫高壓滅菌，滅菌條件為:滅菌壓力0.1MPa ;滅菌溫度121°C ;滅菌時(shí)間30分鐘。滅菌后接入步驟二培養(yǎng)好的菌種，接種量5%-10%，溫度15-30°C，通氣1: 0.5，攪拌速度200轉(zhuǎn)/分鐘，培養(yǎng)至培養(yǎng)基還原糖小于0.1 %時(shí)，放罐收獲。步驟四:超低溫真空濃縮將培養(yǎng)好的蟲草菌絲體放入超低溫真空濃縮設(shè)備，設(shè)定工作真空度為-0.0SMPa,蒸發(fā)溫度為30°C，濃縮至產(chǎn)品比重達(dá)到1.2-1.3g/cm3，結(jié)束濃縮。步驟五:冷凍干燥將濃縮后的蟲草菌絲體以-0.60C /分鐘的降溫速度快速冷凍到_30°C，維持2小時(shí)后，放入干燥室進(jìn)行干燥。加熱板升溫至45°C后，保持9小時(shí)，再降溫至35°C，保持5小時(shí)，全過程保持最高真空度。所得產(chǎn)物水分<5%。冷凍干燥后產(chǎn)品，用萬能粉碎機(jī)進(jìn)行粉碎，得到粉末狀蟲草菌絲體粉。本發(fā)明所述的菌種接種恒溫培養(yǎng)的培養(yǎng)基，其氮源采用雞蛋蛋白粉，雞蛋蛋白粉屬動(dòng)物源蛋白質(zhì)，含有90%以上的優(yōu)質(zhì)蛋白質(zhì)，氨基酸種類齊全且含量豐富，營(yíng)養(yǎng)價(jià)值高。經(jīng)過篩選對(duì)比試驗(yàn)后發(fā)現(xiàn)，以雞蛋蛋白粉做為氮源，可明顯的促進(jìn)接種恒溫培養(yǎng)階段的蟲草菌絲體的生長(zhǎng)，是此階段的最佳氮源。礦物質(zhì)鉀、磷、鎂對(duì)蟲草發(fā)酵具有重要影響，因此在培養(yǎng)基中加入適量的KH2PO4和硫酸鎂，以促進(jìn)蟲草菌絲體的生長(zhǎng)。
本發(fā)明所述的種子罐培養(yǎng)基，其氮源采用乳清濃縮蛋白，乳清濃縮蛋白來源于牛乳，含有80%以上的優(yōu)質(zhì)蛋白質(zhì)，氨基酸種類齊全且含量豐富，營(yíng)養(yǎng)價(jià)值高。經(jīng)過篩選對(duì)比試驗(yàn)后發(fā)現(xiàn)，以乳清濃縮蛋白做為氮源，可明顯的促進(jìn)種子罐培養(yǎng)階段的蟲草菌絲體的生長(zhǎng)，是此階段的最佳氮源。礦物質(zhì)鉀、磷、鎂對(duì)蟲草發(fā)酵具有重要影響，因此在培養(yǎng)基中加入適量的KH2PO4和硫酸鎂，以促進(jìn)蟲草菌絲體的生長(zhǎng)。本發(fā)明所述的發(fā)酵罐培養(yǎng)基，以大豆分離蛋白、脫脂奶粉為氮源，大豆分離蛋白含有90%以上的優(yōu)質(zhì)蛋白質(zhì)，屬于植物性蛋白，脫脂奶粉含有34%的優(yōu)質(zhì)蛋白質(zhì)，屬于動(dòng)物性蛋白，兩者復(fù)配使用，可實(shí)現(xiàn)氨基酸的互補(bǔ)，彌補(bǔ)兩種蛋白質(zhì)中限制性氨基酸的不足，顯著提高營(yíng)養(yǎng)價(jià)值。經(jīng)過篩選對(duì)比試驗(yàn)后發(fā)現(xiàn)，以大豆分離蛋白和脫脂奶粉做為氮源，可明顯的促進(jìn)發(fā)酵罐培養(yǎng)階段的蟲草菌絲體的生長(zhǎng)，是此階段的最佳氮源。酶解骨粉來源于天然牛骨，富含鈣、鎂、鐵、鋅等多種礦物元素，是純天然的礦物質(zhì)集合體，與無機(jī)礦物質(zhì)相比，安全性高，生物利用率高，營(yíng)養(yǎng)價(jià)值高，并可以明顯促進(jìn)蟲草菌絲體的生長(zhǎng)。蟲草酸是蟲草菌絲體的主要活性成分之一，其屬于弱酸，對(duì)溫度敏感，遇熱易揮發(fā)；蟲草素是蟲草菌絲體的主要活性成分之一，屬于腺苷類似物，其熱穩(wěn)定性也較差；S0D酶是蟲草菌絲體的主要活性成分之一，屬于生物酶類，遇高溫容易變性從而失去生物活性。本發(fā)明所述的超低溫真空濃縮和冷凍干燥工藝，是在較低的加工溫度條件下，實(shí)現(xiàn)了蟲草菌絲體的濃縮和干燥過程，與現(xiàn)有技術(shù)相比，更好的保留了蟲草菌絲體中的對(duì)熱敏感的活性物質(zhì)。發(fā)明人通過大量的實(shí)驗(yàn)研究，發(fā)現(xiàn)蟲草菌絲體對(duì)礦物質(zhì)元素富集能力高。本發(fā)明采用特定的培養(yǎng)基及制備方法，生產(chǎn)出富含鈣、鎂、鐵、鋅的蟲草菌絲體，同時(shí)明顯提高了蟲草菌絲體中蟲草酸、蟲草素、SOD酶等活性成分的含量。藥理實(shí)驗(yàn)和臨床實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù)表明，蟲草菌絲體具有顯著的免疫調(diào)節(jié)的功能；鈣、鎂、鋅、鐵元素均是人體必需的礦物元素，與人體免疫系統(tǒng)關(guān)系密切，具有提高機(jī)體免疫力的功效。兩者相輔相成，協(xié)同增效，可以明顯增加產(chǎn)品此方面的保健功效。本發(fā)明所述 的蟲草菌絲體可與任何一種或一種以上藥劑學(xué)上輔料如淀粉、糊精、乳糖、微晶纖維素、羥丙甲基纖維素、聚乙二醇、硬脂酸鎂、微粉硅膠、木糖醇、葡萄糖、甘露醇等混合制成的各種劑型，例如，可制成片劑、緩釋片、粉劑、滴丸、顆粒劑、膠囊劑、微粒劑。優(yōu)選劑型為膠囊劑或粉劑。經(jīng)檢測(cè)，本發(fā)明所述的蟲草菌絲體較現(xiàn)有技術(shù)相比，產(chǎn)品中鈣含量提高90 120倍，鎂含量提高I 2倍，鐵、鋅、蟲草酸、蟲草素含量提高20 50%，SOD酶活力提高20 30%，顯著提高了產(chǎn)品的功效。
具體實(shí)施例方式實(shí)施例1步驟一:菌種接種恒溫培養(yǎng):配制培養(yǎng)基:其配方組成及重量比為:麥芽糖2% ;雞蛋蛋白粉5% ；KH2PO40.3% ；硫酸鎂0.2%;水余量。將配制好的培養(yǎng)基分裝入錐形瓶中，封口后在120°C條件下滅菌20分鐘，取出培養(yǎng)基，自然冷卻至25°C，在無菌條件下接入蝙蝠蛾擬青霉菌種，27°C恒溫培養(yǎng)8天。
步驟二:種子罐培養(yǎng):配制培養(yǎng)基:其配方組成及重量比為:馬鈴薯粉20% ;葡萄糖3% ;乳清濃縮蛋白4% ；KH2PO40.2% ;硫酸鎂0.1 % ;水余量。配制好的培養(yǎng)基進(jìn)行高溫高壓滅菌，滅菌條件為:滅菌壓力0.1MPa ;滅菌溫度121°C;滅菌時(shí)間30分鐘。滅菌后接入步驟一培養(yǎng)好的菌種，接種量10%，溫度18°C，通氣1: 0.5，攪拌速度200轉(zhuǎn)/分鐘，培養(yǎng)時(shí)間72小時(shí)。步驟三:發(fā)酵罐培養(yǎng):配制培養(yǎng)基:其配方組成及重量比為:大豆分離蛋白5% ;脫脂奶粉5% ;酶解骨粉10% ;葡萄糖3% ;水余量。配制好的培養(yǎng)基進(jìn)行高溫高壓滅菌，滅菌條件為:滅菌壓力0.1MPa ;滅菌溫度121°C;滅菌時(shí)間30分鐘。滅菌后接入步驟二培養(yǎng)好的菌種，接種量8%，溫度25°C，通氣1: 0.5，攪拌速度200轉(zhuǎn)/分鐘，培養(yǎng)至培養(yǎng)基還原糖小于0.1%時(shí)，放罐收獲。步驟四:超低溫真空濃縮將培養(yǎng)好的蟲草菌絲體放入超低溫真空濃縮設(shè)備，設(shè)定工作真空度為-0.0SMPa,蒸發(fā)溫度為30°C，濃縮至產(chǎn)品比重達(dá)到1.2g/cm3，結(jié)束濃縮。步驟五:冷凍干燥將濃縮后的蟲草菌絲體以-0.60C /分鐘的降溫速度快速冷凍到_30°C，維持2小時(shí)后，放入干燥室進(jìn)行干燥。加熱板升溫至45°C后，保持9小時(shí)，再降溫至35°C，保持5小時(shí)，全過程保持最高真空度。所得產(chǎn)物水分<5%。冷凍干燥后產(chǎn)品，用萬能粉碎機(jī)進(jìn)行粉碎，得到粉末狀蟲草菌絲體。實(shí)施例2 步驟一:菌種接種恒溫培養(yǎng):配制培養(yǎng)基:其配方組成及重量比為:麥芽糖1.5%;X|蛋蛋白粉4%;KH2P040.2%；硫酸鎂0.5%;水余量。將配制好的培養(yǎng)基分裝入錐形瓶中，封口后在128°C條件下滅菌25分鐘，取出培養(yǎng)基，自然冷卻至27°C，在無菌條件下接入蝙蝠蛾擬青霉菌種，30°C恒溫培養(yǎng)6天。步驟_■:種子iiS培養(yǎng):配制培養(yǎng)基:其配方組成及重量比為:馬鈴薯粉25% ;葡萄糖2% ;乳清濃縮蛋白3% ；KH2PO40.4% ;硫酸鎂0.6% ;水余量。配制好的培養(yǎng)基進(jìn)行高溫高壓滅菌，滅菌條件為:滅菌壓力0.1MPa ;滅菌溫度121°C;滅菌時(shí)間30分鐘。滅菌后接入步驟一培養(yǎng)好的菌種，接種量8%，溫度20°C，通氣1: 0.5，攪拌速度200轉(zhuǎn)/分鐘，培養(yǎng)時(shí)間72小時(shí)。步驟三:發(fā)酵罐培養(yǎng):配制培養(yǎng)基:其配方組成及重量比為:大豆分離蛋白6% ;脫脂奶粉8% ;酶解骨粉9% ;葡萄糖2% ;水余量。配制好的培養(yǎng)基進(jìn)行高溫高壓滅菌，滅菌條件為:滅菌壓力0.1MPa ;滅菌溫度121°C;滅菌時(shí)間30分鐘。滅菌后接入步驟二培養(yǎng)好的菌種，接種量10%，溫度22°C，通氣1: 0.5，攪拌速度200轉(zhuǎn)/分鐘，培養(yǎng)至培養(yǎng)基還原糖小于0.1%時(shí)，放罐收獲。步驟四:超低溫真空濃縮將培養(yǎng)好的蟲草菌絲體放入超低溫真空濃縮設(shè)備，設(shè)定工作真空度為-0.0SMPa,蒸發(fā)溫度為30°C，濃縮至產(chǎn)品比重達(dá)到1.3g/cm3，結(jié)束濃縮。
步驟五:冷凍干燥將濃縮后的蟲草菌絲體以-0.60C /分鐘的降溫速度快速冷凍到_30°C，維持2小時(shí)后，放入干燥室進(jìn)行干燥。加熱板升溫至45°C后，保持9小時(shí)，再降溫至35°C，保持5小時(shí)，全過程保持最高真空度。所得產(chǎn)物水分<5%。冷凍干燥后產(chǎn)品，用 萬能粉碎機(jī)進(jìn)行粉碎，得到粉末狀蟲草菌絲體。實(shí)施例3步驟一:菌種接種恒溫培養(yǎng):配制培養(yǎng)基:其配方組成及重量比為:麥芽糖3% ;雞蛋蛋白粉7% ；KH2PO40.4% ；硫酸鎂1%;水余量。將配制好的培養(yǎng)基分裝入錐形瓶中，封口后在120°C條件下滅菌18分鐘，取出培養(yǎng)基，自然冷卻至21°C，在無菌條件下接入蝙蝠蛾擬青霉菌種，19°C恒溫培養(yǎng)10天。步驟_二:種子iiS培養(yǎng):配制培養(yǎng)基:其配方組成及重量比為:馬鈴薯粉15% ;葡萄糖4% ;乳清濃縮蛋白2% ；KH2PO40.5% ;硫酸鎂0.9% ;水余量。配制好的培養(yǎng)基進(jìn)行高溫高壓滅菌，滅菌條件為:滅菌壓力0.1MPa ;滅菌溫度121°C;滅菌時(shí)間30分鐘。滅菌后接入步驟一培養(yǎng)好的菌種，接種量7%，溫度22°C，通氣1: 0.5，攪拌速度200轉(zhuǎn)/分鐘，培養(yǎng)時(shí)間72小時(shí)。步驟三:發(fā)酵罐培養(yǎng):配制培養(yǎng)基:其配方組成及重量比為:大豆分離蛋白8% ;脫脂奶粉4% ;酶解骨粉8% ;葡萄糖1% ;水余量。配制好的培養(yǎng)基進(jìn)行高溫高壓滅菌，滅菌條件為:滅菌壓力0.1MPa ;滅菌溫度121°C;滅菌時(shí)間30分鐘。滅菌后接入步驟二培養(yǎng)好的菌種，接種量7%，溫度26°C，通氣1: 0.5，攪拌速度200轉(zhuǎn)/分鐘，培養(yǎng)至培養(yǎng)基還原糖小于0.1%時(shí)，放罐收獲。步驟四:超低溫真空濃縮將培養(yǎng)好的蟲草菌絲體放入超低溫真空濃縮設(shè)備，設(shè)定工作真空度為-0.0SMPa,蒸發(fā)溫度為30°C，濃縮至產(chǎn)品比重達(dá)到1.2g/cm3，結(jié)束濃縮。步驟五:冷凍干燥將濃縮后的蟲草菌絲體以-0.60C /分鐘的降溫速度快速冷凍到_30°C，維持2小時(shí)后，放入干燥室進(jìn)行干燥。加熱板升溫至45°C后，保持9小時(shí)，再降溫至35°C，保持5小時(shí)，全過程保持最高真空度。所得產(chǎn)物水分<5%。冷凍干燥后產(chǎn)品，用萬能粉碎機(jī)進(jìn)行粉碎，得到粉末狀蟲草菌絲體。實(shí)施例4步驟一:菌種接種恒溫培養(yǎng):配制培養(yǎng)基:其配方組成及重量比為:麥芽糖1.8% ;雞蛋蛋白粉4.5% ;KH2PO40.4% ;硫酸鎂1.1% ;水余量。將配制好的培養(yǎng)基分裝入錐形瓶中，封口后在129°C條件下滅菌26分鐘，取出培養(yǎng)基，自然冷卻至23°C，在無菌條件下接入蝙蝠蛾擬青霉菌種，17°C恒溫培養(yǎng)9天。步驟二:種子罐培養(yǎng):配制培養(yǎng)基:其配方組成及重量比為:馬鈴薯粉24% ;葡萄糖2.2% ;乳清濃縮蛋白4.8% ；KH2PO40.2% ;硫酸鎂1.6% ;水余量。配制好的培養(yǎng)基進(jìn)行高溫高壓滅菌，滅菌條件為:滅菌壓力0.1MPa ;滅菌溫度121°C ;滅菌時(shí)間30分鐘。滅菌后接入步驟一培養(yǎng)好的菌種，接種量5%，溫度29°C，通氣1: 0.5，攪拌速度200轉(zhuǎn)/分鐘，培養(yǎng)時(shí)間72小時(shí)。步驟三:發(fā)酵罐培養(yǎng):配制培養(yǎng)基:其配方組成及重量比為:大豆分離蛋白9% ;脫脂奶粉4% ;酶解骨粉8% ;葡萄糖2.6% ;水余量。配制好的培養(yǎng)基進(jìn)行高溫高壓滅菌，滅菌條件為:滅菌壓力0.1MPa ;滅菌溫度121°C;滅菌時(shí)間30分鐘。滅菌后接入步驟二培養(yǎng)好的菌種，接種量7%，溫度23°C，通氣1: 0.5，攪拌速度200轉(zhuǎn)/分鐘，培養(yǎng)至培養(yǎng)基還原糖小于0.1%時(shí)，放罐收獲。步驟四:超低溫真空濃縮將培養(yǎng)好的蟲草菌絲體放入超低溫真空濃縮設(shè)備，設(shè)定工作真空度為-0.0SMPa,蒸發(fā)溫度為30°C，濃縮至產(chǎn)品比重達(dá)到1.3g/cm3，結(jié)束濃縮。步驟五:冷凍干燥將濃縮后的蟲草菌絲體以-0.60C /分鐘的降溫速度快速冷凍到-30°C，維持2小時(shí)后，放入干燥室進(jìn)行干燥。加熱板升溫至45°C后，保持9小時(shí)，再降溫至35°C，保持5小時(shí)，全過程保持最高真空度。所得產(chǎn)物水分<5%。冷凍干燥后產(chǎn)品，用萬能粉碎機(jī)進(jìn)行粉碎，得到粉末狀蟲草菌絲體。實(shí)施例5
步驟一:菌種接種恒溫培養(yǎng):配制培養(yǎng)基:其配方組成及重量比為:麥芽糖2.5%;X|蛋蛋白粉2%;KH2P040.1%；硫酸鎂1.2% ;水余量。將配制好的培養(yǎng)基分裝入錐形瓶中，封口后在130°C條件下滅菌19分鐘，取出培養(yǎng)基，自然冷卻至21°C，在無菌條件下接入蝙蝠蛾擬青霉菌種，30°C恒溫培養(yǎng)5天。步驟_■:種子iiS培養(yǎng):配制培養(yǎng)基:其配方組成及重量比為:馬鈴薯粉15% ;葡萄糖3.4% ;乳清濃縮蛋白4.1% ；KH2PO40.4% ;硫酸鎂0.7% ;水余量。配制好的培養(yǎng)基進(jìn)行高溫高壓滅菌，滅菌條件為:滅菌壓力0.1MPa ;滅菌溫度121°C ;滅菌時(shí)間30分鐘。滅菌后接入步驟一培養(yǎng)好的菌種，接種量10%，溫度19°C，通氣1: 0.5，攪拌速度200轉(zhuǎn)/分鐘，培養(yǎng)時(shí)間72小時(shí)。步驟三:發(fā)酵罐培養(yǎng):配制培養(yǎng)基:其配方組成及重量比為:大豆分離蛋白10% ;脫脂奶粉4% ;酶解骨粉12% ;葡萄糖1.5% ;水余量。配制好的培養(yǎng)基進(jìn)行高溫高壓滅菌，滅菌條件為:滅菌壓力0.1MPa ;滅菌溫度121°C ;滅菌時(shí)間30分鐘。滅菌后接入步驟二培養(yǎng)好的菌種，接種量5%，溫度16°C，通氣1: 0.5，攪拌速度200轉(zhuǎn)/分鐘，培養(yǎng)至培養(yǎng)基還原糖小于0.1 %時(shí)，放罐收獲。步驟四:超低溫真空濃縮將培養(yǎng)好的蟲草菌絲體放入超低溫真空濃縮設(shè)備，設(shè)定工作真空度為-0.0SMPa,蒸發(fā)溫度為30°C，濃縮至產(chǎn)品比重達(dá)到1.2g/cm3，結(jié)束濃縮。步驟五:冷凍干燥將濃縮后的蟲草菌絲體以-0.60C /分鐘的降溫速度快速冷凍到_30°C，維持2小時(shí)后，放入干燥室進(jìn)行干燥。加熱板升溫至45°C后，保持9小時(shí)，再降溫至35°C，保持5小時(shí)，全過程保持最高真空度。所得產(chǎn)物水分<5%。冷凍 干燥后產(chǎn)品，用萬能粉碎機(jī)進(jìn)行粉碎，得到粉末狀蟲草菌絲體。
權(quán)利要求
1.一種蟲草菌絲體，其特征在于，所述的蟲草菌絲體采用以下方法制備: (1)菌種接種恒溫培養(yǎng) 配制培養(yǎng)基，將配制好的培養(yǎng)基分裝入錐形瓶中，封口后在120-130°c條件下滅菌18-30min，冷卻至20-30°C，在無菌條件下接入蝙蝠蛾擬青霉菌種，15-30°C恒溫培養(yǎng)5-10天； (2)種子罐培養(yǎng) 配制培養(yǎng)基，在壓力0.1MPa，溫度121°C條件下滅菌30min，滅菌后接入步驟(I)中培養(yǎng)好的菌種，接種量5%-10%，溫度15-30°C，通氣I: 0.5，攪拌速度200r/min，培養(yǎng)72h ; (3)發(fā)酵罐培養(yǎng) 配制培養(yǎng)基，壓 力0.1MPa，溫度121°C條件下滅菌時(shí)間30min，滅菌后接入步驟(2)培養(yǎng)好的菌種，接種量5%-10%，溫度15-30°C，通氣1: 0.5，攪拌速度200r/min，培養(yǎng)至培養(yǎng)基還原糖小于0.1 %時(shí)，放罐收獲； (4)真空濃縮 -0.08MPa，30°C真空濃縮，濃縮至產(chǎn)品比重為1.2-1.3g/cm3 ； (5)冷凍干燥 將濃縮后的蟲草菌絲體以-0.6V /min的降溫速度快速冷凍到_30°C，維持2h后，放入干燥室進(jìn)行干燥，加熱板升溫至45°C后，保持9小時(shí)，再降溫至35°C，保持5小時(shí)，即得。
2.—種蟲草菌絲體制備方法，包括如下步驟: (1)菌種接種恒溫培養(yǎng) 將配制好的培養(yǎng)基分裝入錐形瓶中，封口后滅菌，接入蝙蝠蛾擬青霉菌種，15-30°C恒溫培養(yǎng)5-10天； (2)種子罐培養(yǎng) 將配制好的培養(yǎng)基高溫高壓滅菌，滅菌后接入步驟⑴培養(yǎng)好的菌種，接種量5% -10%，溫度 15-30°C，培養(yǎng)時(shí)間 72h ； (3)發(fā)酵罐培養(yǎng) 將配制好的培養(yǎng)基高溫高壓滅菌，滅菌后接入步驟⑵培養(yǎng)好的菌種，接種量5% -10%，溫度 15-30°C培養(yǎng)； (4)真空濃縮 -0.08MPa，溫度為30°C，真空濃縮至產(chǎn)品比重達(dá)到1.2-1.3g/cm3 ； (5)冷凍干燥。
3.根據(jù)權(quán)利要求2所述的蟲草菌絲體制備方法，其特征在于，步驟(I)所述的培養(yǎng)是120-130°C，滅菌18-30min，冷卻至20_3(TC，接入蝙蝠蛾擬青霉菌種，15_30°C恒溫培養(yǎng)5-10 天。
4.根據(jù)權(quán)利要求2或3所述的蟲草菌絲體制備方法，其特征在于，步驟(2)所述的培養(yǎng)條件是在壓力0.1MPa，溫度121°C條件下滅菌30min，滅菌后接入步驟(I)中培養(yǎng)好的菌種，接種量5%-10%，溫度15-30°C，通氣I: 0.5，攪拌速度200r/min，培養(yǎng)72h。
5.根據(jù)權(quán)利要求2-4所述的蟲草菌絲體制備方法，其特征在于，步驟(3)所述的培養(yǎng)條件是在壓力0.1MPa，溫度121°C條件下滅菌時(shí)間30min，滅菌后接入步驟(2)培養(yǎng)好的菌種，接種量5% -10%，溫度15-30°C，通氣1: 0.5，攪拌速度200r/min，培養(yǎng)至培養(yǎng)基還原糖小于0.1 %時(shí)，放罐收獲。
6.根據(jù)權(quán)利要求2-5所述的蟲草菌絲體制備方法，其特征在于，步驟(5)所述的冷凍干燥是將濃縮后的蟲草菌絲體以-0.6°C /min的降溫速度快速冷凍到_30°C，維持2h后，放入干燥室進(jìn)行干燥，加熱板升溫至45°C后，保持9小時(shí)，再降溫至35°C，保持5小時(shí)。
7.根據(jù)權(quán)利要求2-6所述的蟲草菌絲體制備方法，其特征在于，步驟(I)所述的菌種接種恒溫培養(yǎng)的培養(yǎng)基組分重量比為:麥芽糖1% _3%，雞蛋蛋白粉2% -8%，KH2PO40.1% -0.5%，硫酸鎂0.1% -3%，水余量；優(yōu)選的，配方組分重量比為:麥芽糖2%，雞蛋蛋白粉5 %，KH2PO40.3 %，硫酸鎂0.2 %，水余量。
8.根據(jù)權(quán)利要求2-7所述的蟲草菌絲體制備方法，其特征在于，步驟(2)所述的種子罐培養(yǎng)的培養(yǎng)基組成及重量比為:馬鈴薯粉15% _30%，葡萄糖1% _4%，乳清濃縮蛋白2% -5%, KH2PO40.1% -0.5%，硫酸鎂0.1% _3%，水余量；優(yōu)選的，配方組分重量比為:馬鈴薯粉20%，葡萄糖3%，乳清濃縮蛋白4% ,KH2PO40.2%，硫酸鎂0.1% ;水余量。
9.根據(jù)權(quán)利要求2-8所述的蟲草菌絲體制備方法，其特征在于，步驟(3)所述的發(fā)酵罐培養(yǎng)的培養(yǎng)基組分重量比為:大豆分離蛋白4% _10%，脫脂奶粉4% _10%，酶解骨粉8% -12%，葡萄糖1% -3%，水余量；優(yōu)選的，其配方組分重量比為:大豆分離蛋白5%，脫脂奶粉5 %，酶解骨粉1 0 %，葡萄糖3 %，水余量。
全文摘要
本發(fā)明公開了一種蟲草菌絲體及制備方法，包括如下步驟蝙蝠蛾擬青霉菌種接種恒溫培養(yǎng)、種子罐培養(yǎng)、發(fā)酵罐培養(yǎng)、超低溫真空濃縮、冷凍干燥、粉碎。本發(fā)明所述方法制得的蟲草菌絲體較現(xiàn)有技術(shù)生產(chǎn)的蟲草菌絲體，產(chǎn)品中鈣含量提高90～120倍；鎂含量提高1～2倍；鐵、鋅、蟲草酸、蟲草素含量提高20～50％；SOD酶活力提高20～30％。顯著提高了產(chǎn)品的保健功效。
文檔編號(hào)A01G1/04GK103211212SQ20131012405
公開日2013年7月24日 申請(qǐng)日期2013年4月11日 優(yōu)先權(quán)日2013年4月11日
發(fā)明者郁正剛, 黃永亮 申請(qǐng)人:天津天獅生物發(fā)展有限公司