專利名稱：結(jié)球甘藍(lán)組織培養(yǎng)方法
技術(shù)領(lǐng)域：
本發(fā)明屬于組織培養(yǎng)，特別是指一種結(jié)球甘藍(lán)組織培養(yǎng)方法。
背景技術(shù)：
結(jié)球甘藍(lán)種子昂貴，又具有較長(zhǎng)的苗齡期，為提高土地利用率，實(shí)踐中多采用先育苗然后移栽定植的方法。由于結(jié)球甘藍(lán)的幼苗為直根系，須根較少，不利于根部對(duì)營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)和水分的吸收，移栽定植后生長(zhǎng)緩慢，不耐水澇及根部病害，產(chǎn)量也不高。近年來(lái)，隨著農(nóng)業(yè)機(jī)械化的快速發(fā)展，精量播種、穴盤育苗、移栽機(jī)定植已引入結(jié)球甘藍(lán)栽培，如何消除其上述的栽培缺陷、提高結(jié)球甘藍(lán)產(chǎn)量，成為人們亟待解決的技術(shù)難題。目前，結(jié)球甘藍(lán)的組織培養(yǎng)技術(shù)在甘藍(lán)雄性不育系無(wú)性快繁、優(yōu)異稀有種質(zhì)資源離體繁殖與保存、游離小孢子培養(yǎng)、細(xì)胞及原生質(zhì)體培養(yǎng)中發(fā)揮重要的作用，尤其在結(jié)球甘 藍(lán)組培苗快速繁殖過程中應(yīng)用居多。但利用目前結(jié)球甘藍(lán)組織培養(yǎng)常用技術(shù)及在現(xiàn)有的結(jié)球甘藍(lán)組織培養(yǎng)基上長(zhǎng)期培養(yǎng)組培苗，容易造成組培苗逐漸衰退、喪失形態(tài)發(fā)生能力，表現(xiàn)為植株弱小、生長(zhǎng)不良、增殖率下降。甚至部分組培苗出現(xiàn)玻璃化現(xiàn)象，嫩莖葉柄葉片出現(xiàn)半透明狀和水潰狀，使試管苗生長(zhǎng)緩慢，且因其嫩莖不易誘導(dǎo)生根，使繁殖系數(shù)大為降低，玻璃化組培苗莖葉表面無(wú)蠟質(zhì)，體內(nèi)的極性化合物水平較高，細(xì)胞持水力差，植株蒸騰作用強(qiáng)，無(wú)法進(jìn)行正常移栽。長(zhǎng)期以往不利于結(jié)球甘藍(lán)組培苗的繼代培養(yǎng)、長(zhǎng)期保存及生根移栽利用。

發(fā)明內(nèi)容
本發(fā)明的目的在于提供一種結(jié)球甘藍(lán)組織培養(yǎng)方法，以達(dá)到提高組培苗增殖率和生根率的目的。本發(fā)明的整體技術(shù)構(gòu)思是
結(jié)球甘藍(lán)組織培養(yǎng)方法，包括如下工藝步驟
A、無(wú)菌苗的培養(yǎng)將去雜后選出的優(yōu)質(zhì)結(jié)球甘藍(lán)種子消毒，將消毒后的種子接種于MS培養(yǎng)基中進(jìn)行暗培養(yǎng)后制成無(wú)菌苗，按照48ml-52ml培養(yǎng)基接種8_10顆種子的接種量接種，培養(yǎng)溫度22°C -26°C，培養(yǎng)濕度70%-80%，培養(yǎng)周期9_12天；
B、誘導(dǎo)培養(yǎng)將暗培養(yǎng)后的無(wú)菌苗子葉切成4mmX4mm的塊,將胚軸切成3.6-4. 2 mm,接種在誘導(dǎo)分化培養(yǎng)基上進(jìn)行誘導(dǎo)培養(yǎng)，觀察外植體在誘導(dǎo)培養(yǎng)過程中的變化和不定芽的誘導(dǎo)情況；誘導(dǎo)分化培養(yǎng)基的組成為
MS+6-BA 2. 0-3. Omg/L, NAA O. 1-0. 2mg/L,蔗糖 25_30g/L，瓊脂 6. 5_7g/L，pH 值=5. 8 ；
誘導(dǎo)培養(yǎng)的培養(yǎng)條件為溫度24°C _26°C，光照強(qiáng)度1000-2000LX，光照時(shí)間12小時(shí)/天，培養(yǎng)濕度70%-80%，培養(yǎng)周期25-35天；
C、增殖培養(yǎng)將誘導(dǎo)的不定芽接種按照每瓶接種3-4個(gè)的接種量接種于體積為48ml-52ml增殖培養(yǎng)基上進(jìn)行增殖培養(yǎng)制成不定苗，25天繼代I次，連續(xù)繼代3次；增殖培養(yǎng)培養(yǎng)基的組成為
MS+6-BA I. 0-2. Omg/L, NAA O. 1-0. 2mg/L,蔗糖 25_30g/L,瓊脂 6. 5_7g/L，pH 值=5. 8 ； 增殖培養(yǎng)的培養(yǎng)條件為溫度24°C _26°C，光照強(qiáng)度1000-2000LX，光照時(shí)間12小時(shí)/天，培養(yǎng)濕度70%-80% ；
D、生根培養(yǎng)將不定苗分切后按照每瓶接種3-4個(gè)的接種量接種于體積為48ml-52ml生根培養(yǎng)基上進(jìn)行生根培養(yǎng)，14天后觀察生根情況；生根培養(yǎng)培養(yǎng)基的組成為
1/2MS+NAA O. 1-0. 2mg/L 或 1/2MS+IBA O. 2-0. 3mg/L,蔗糖 15_20g/L，瓊脂 5. 5_6g/L, pH 值=5. 8 ;
生根培養(yǎng)的培養(yǎng)條件為溫度24°C _26°C，光照強(qiáng)度2200-2500 Lx，光照時(shí)間10-12小時(shí)/天，培養(yǎng)濕度70%-80% ；
E、再生苗的移植
當(dāng)甘藍(lán)組培苗產(chǎn)生根系并形成完整植株后，置于溫室中煉苗，培養(yǎng)條件為溫度200C -25 V，3天后將三角瓶或組培瓶的瓶塞打開，7天后取出，洗去根部瓊脂，將其栽植于培養(yǎng)介質(zhì)中，濕度為80%-90%，溫度20°C -23°C, 14天后定植于土壤進(jìn)行正常管理。培養(yǎng)介質(zhì)選用選用無(wú)土材質(zhì)，一般選用蛭石，也可選用按一定比例復(fù)配的沙子、珍珠巖等材質(zhì)，因其屬于現(xiàn)有技術(shù)，申請(qǐng)人再次不再贅述。本發(fā)明的具體技術(shù)方案還有
步驟A中所述的去雜是將甘藍(lán)種子在流水下沖洗，去掉雜質(zhì)及灰塵。選種的方式可以采用多種技術(shù)方案，并不影響本發(fā)明的實(shí)施，其中優(yōu)選的技術(shù)方案是，步驟A中所述的選出優(yōu)質(zhì)結(jié)球甘藍(lán)種子的步驟為將去雜后的結(jié)球甘藍(lán)種子浸泡于水中，沉于水底的為優(yōu)質(zhì)結(jié)球甘藍(lán)種子。步驟A中所述的消毒是將選出的優(yōu)質(zhì)結(jié)球甘藍(lán)種子先用質(zhì)量百分比為70%的酒精浸泡30秒，再用質(zhì)量百分比為O. 1%的氯化汞消毒8分鐘，然后無(wú)菌水沖洗3-4次。為進(jìn)一步增強(qiáng)培養(yǎng)的效果，優(yōu)選的技術(shù)方案是，步驟A-D中所述的暗培養(yǎng)、誘導(dǎo)培養(yǎng)、增殖培養(yǎng)、生根培養(yǎng)過程中培養(yǎng)室每周在外界空氣質(zhì)量良好情況下進(jìn)行3-4小時(shí)短時(shí)通風(fēng)。上述短時(shí)通風(fēng)技術(shù)手段的采用并不影響本發(fā)明的實(shí)現(xiàn)。本發(fā)明所具備的實(shí)質(zhì)性特點(diǎn)和取得的顯著技術(shù)進(jìn)步在于
經(jīng)實(shí)驗(yàn)表明，采用本發(fā)明的方法在結(jié)球甘藍(lán)誘導(dǎo)培養(yǎng)基上子葉可長(zhǎng)出愈傷組織，胚軸可直接分化不定芽；組培苗增殖倍數(shù)3. 8-4. 6 ;組培苗生長(zhǎng)勢(shì)強(qiáng)，玻璃化苗數(shù)少，增殖率高；組培苗生根率可達(dá)100%。
具體實(shí)施例方式以下結(jié)合實(shí)施例對(duì)本發(fā)明做進(jìn)一步描述，但不作為對(duì)本發(fā)明的限定，本發(fā)明的保護(hù)范圍以權(quán)利要求記載的內(nèi)容為準(zhǔn)，任何依據(jù)本說(shuō)明書所作出的等效技術(shù)手段替換，均不脫離本發(fā)明的保護(hù)范圍。實(shí)施例I
結(jié)球甘藍(lán)組織培養(yǎng)方法，包括如下工藝步驟
A、無(wú)菌苗的培養(yǎng)將去雜后選出的優(yōu)質(zhì)結(jié)球甘藍(lán)種子消毒，將消毒后的種子接種于MS培養(yǎng)基中進(jìn)行暗培養(yǎng)后制成無(wú)菌苗，按照48ml培養(yǎng)基接種8顆種子的接種量接種，培養(yǎng)溫度22°C，培養(yǎng)濕度70%，培養(yǎng)周期9-12天；
B、誘導(dǎo)培養(yǎng)將暗培養(yǎng)后的無(wú)菌苗子葉切成4mmX4mm的塊,將胚軸切成3.6mm,接種在誘導(dǎo)分化培養(yǎng)基上進(jìn)行誘導(dǎo)培養(yǎng)，觀察外植體在誘導(dǎo)培養(yǎng)過程中的變化和不定芽的誘導(dǎo)情況；誘導(dǎo)分化培養(yǎng)基的組成為
MS+6-BA 2. Omg/L，NAA O. lmg/L，蔗糖 25g/L,瓊脂 6. 5g/L, pH 值=5. 8 ;
誘導(dǎo)培養(yǎng)的培養(yǎng)條件為溫度24°C，光照強(qiáng)度lOOOLx，光照時(shí)間12小時(shí)/天，培養(yǎng)濕度70%，培養(yǎng)周期25-35天；
C、增殖培養(yǎng)將誘導(dǎo)的不定芽接種按照每瓶接種3-4個(gè)的接種量接種于體積為48ml增殖培養(yǎng)基上進(jìn)行增殖培養(yǎng)制成不定苗，25天繼代I次，連續(xù)繼代3次；
增殖培養(yǎng)培養(yǎng)基的組成為
MS+6-BA I. Omg/L, NAA O. lmg/L，蔗糖 25g/L,瓊脂 6. 5g/L, pH 值=5. 8 ;
增殖培養(yǎng)的培養(yǎng)條件為溫度24°C，光照強(qiáng)度lOOOLx，光照時(shí)間12小時(shí)/天，培養(yǎng)濕度
70% ；
D、生根培養(yǎng)將不定苗分切后按照每瓶接種3-4個(gè)的接種量接種于體積為48ml-52ml生根培養(yǎng)基上進(jìn)行生根培養(yǎng)，14天后觀察生根情況；生根培養(yǎng)培養(yǎng)基的組成為
1/2MS+NAA O. lmg/L 或 1/2MS+IBA O. 2mg/L，蔗糖 15g/L,瓊脂 5. 5g/L, pH 值=5. 8 ;
生根培養(yǎng)的培養(yǎng)條件為溫度24°C，光照強(qiáng)度2200LX，光照時(shí)間10小時(shí)/天，培養(yǎng)濕度
70% ；
E、再生苗的移植
生根20天左右，當(dāng)甘藍(lán)組培苗產(chǎn)生根系并形成完整植株后，置于溫室中煉苗，培養(yǎng)條件為溫度20°C，3天后將三角瓶或組培瓶的瓶塞打開，7天后取出，洗去根部瓊脂，將其栽植于培養(yǎng)介質(zhì)中，培養(yǎng)介質(zhì)選用蛭石，濕度為80%，溫度20°C，14天后定植于土壤進(jìn)行正常管理。實(shí)施結(jié)果在結(jié)球甘藍(lán)誘導(dǎo)培養(yǎng)基上子葉可長(zhǎng)出愈傷組織，胚軸可直接分化不定芽；組培苗增殖倍數(shù)3.8 ;組培苗生長(zhǎng)勢(shì)強(qiáng)，玻璃化苗數(shù)少，增殖率高；組培苗生根率可達(dá)
100% O實(shí)施例2
結(jié)球甘藍(lán)組織培養(yǎng)方法，包括如下工藝步驟
A、無(wú)菌苗的培養(yǎng)將去雜后選出的優(yōu)質(zhì)結(jié)球甘藍(lán)種子消毒，將消毒后的種子接種于MS培養(yǎng)基中進(jìn)行暗培養(yǎng)后制成無(wú)菌苗，按照52ml培養(yǎng)基接種10顆種子的接種量接種，培養(yǎng)溫度26°C，培養(yǎng)濕度80%，培養(yǎng)周期9-12天；
B、誘導(dǎo)培養(yǎng)將無(wú)菌苗的子葉切成4mmX4mm的塊,將胚軸切成4.2 mm,接種在誘導(dǎo)分化培養(yǎng)基上進(jìn)行誘導(dǎo)培養(yǎng)，觀察外植體在誘導(dǎo)培養(yǎng)過程中的變化和不定芽的誘導(dǎo)情況；誘導(dǎo)分化培養(yǎng)基的組成為
MS+6-BA 3. 0mg/L, NAA 0. 2mg/L，蔗糖 30g/L,瓊脂 7g/L, pH 值=5. 8 ;
誘導(dǎo)培養(yǎng)的培養(yǎng)條件為溫度26°C，光照強(qiáng)度2000Lx，光照時(shí)間12小時(shí)/天，培養(yǎng)濕度80%，培養(yǎng)周期25-35天；
C、增殖培養(yǎng)將誘導(dǎo)的不定芽接種按照每瓶接種3-4個(gè)的接種量接種于體積為52ml增殖培養(yǎng)基上進(jìn)行增殖培養(yǎng)制成不定苗，25天繼代I次，連續(xù)繼代3次；
增殖培養(yǎng)培養(yǎng)基的組成為
MS+6-BA 2. Omg/L, NAA O. 2mg/L，蔗糖 30g/L,瓊脂 7g/L, pH 值=5. 8 ;
增殖培養(yǎng)的培養(yǎng)條件為溫度24-26°C，光照強(qiáng)度1000-2000LX，光照時(shí)間12小時(shí)/天，培養(yǎng)濕度70-80% ；
D、生根培養(yǎng)將不定苗分切后按照每瓶接種3-4個(gè)的接種量接種于體積為48ml-52ml生根培養(yǎng)基上進(jìn)行生根培養(yǎng)，14天后觀察生根情況；生根培養(yǎng)培養(yǎng)基的組成為
1/2MS+NAA O. 2mg/L 或 1/2MS+IBA O. 3mg/L,蔗糖 20g/L,瓊脂 6g/L, pH 值=5. 8 ;
生根培養(yǎng)的培養(yǎng)條件為溫度26°C，光照強(qiáng)度2500 Lx，光照時(shí)間12 hr/d，培養(yǎng)濕度
80% ；
E、再生苗的移植
當(dāng)甘藍(lán)組培苗產(chǎn)生根系并形成完整植株后，置于溫室中煉苗，培養(yǎng)條件為溫度25V,3天后將三角瓶或組培瓶的瓶塞打開，7天后取出，洗去根部瓊脂，將其栽植于培養(yǎng)介質(zhì)中，培養(yǎng)介質(zhì)選用蛭石，濕度為90%，溫度23°C，14天后定植于土壤進(jìn)行正常管理。其余步驟同實(shí)施例I。實(shí)施結(jié)果在結(jié)球甘藍(lán)誘導(dǎo)培養(yǎng)基上子葉可長(zhǎng)出愈傷組織，胚軸可直接分化不定芽；組培苗增殖倍數(shù)4.6 ;組培苗生長(zhǎng)勢(shì)強(qiáng)，玻璃化苗數(shù)少，增殖率高；組培苗生根率可達(dá)
100% O實(shí)施例3
結(jié)球甘藍(lán)組織培養(yǎng)方法，包括如下工藝步驟
A、無(wú)菌苗的培養(yǎng)將去雜后選出的優(yōu)質(zhì)結(jié)球甘藍(lán)種子消毒，將消毒后的種子接種于MS培養(yǎng)基中進(jìn)行暗培養(yǎng)后制成無(wú)菌苗，按照50ml培養(yǎng)基接種8-10顆種子的接種量接種，培養(yǎng)溫度25°C，培養(yǎng)濕度70%-80%，培養(yǎng)周期9-12天；
B、誘導(dǎo)培養(yǎng)將暗培養(yǎng)后的無(wú)菌苗的子葉切成4mmX4mm的塊,將胚軸切成4mm,接種在誘導(dǎo)分化培養(yǎng)基上進(jìn)行誘導(dǎo)培養(yǎng)，觀察外植體在誘導(dǎo)培養(yǎng)過程中的變化和不定芽的誘導(dǎo)情況；誘導(dǎo)分化培養(yǎng)基的組成為
MS+6-BA 2. 5mg/L, NAA O. 15mg/L，蔗糖 28g/L,瓊脂 7g/L, pH 值=5. 8 ；
誘導(dǎo)培養(yǎng)的培養(yǎng)條件為溫度25°C，光照強(qiáng)度1000-2000LX，光照時(shí)間12小時(shí)/天，培養(yǎng)濕度70%-80%，培養(yǎng)周期30天；
C、增殖培養(yǎng)將誘導(dǎo)的不定芽接種按照每瓶接種3-4個(gè)的接種量接種于體積為50ml增殖培養(yǎng)基上進(jìn)行增殖培養(yǎng)制成不定苗，25天繼代I次，連續(xù)繼代3次；
增殖培養(yǎng)培養(yǎng)基的組成為
MS+6-BA I. 5mg/L, NAA O. 2mg/L,蔗糖 28g/L,瓊脂 7g/L, pH 值=5. 8 ;
增殖培養(yǎng)的培養(yǎng)條件為溫度24-26°C，光照強(qiáng)度1000-2000LX，光照時(shí)間12小時(shí)/天，培養(yǎng)濕度70%-80% ；
D、生根培養(yǎng)將不定苗分切后按照每瓶接種3-4個(gè)的接種量接種于體積為50ml生根培養(yǎng)基上進(jìn)行生根培養(yǎng)，14天后觀察生根情況；生根培養(yǎng)培養(yǎng)基的組成為
1/2MS+NAA O. 15 mg/L 或 1/2MS+IBA O. 25 mg/L，蔗糖 18g/L,瓊脂 6g/L，pH 值=5. 8 ;生根培養(yǎng)的培養(yǎng)條件為溫度25°C，光照強(qiáng)度2200-2500 Lx,光照時(shí)間10-12小時(shí)/天，培養(yǎng)濕度70%-80% ；
E、再生苗的移植
當(dāng)甘藍(lán)組培苗產(chǎn)生根系并形成完整植株后，置于溫室中煉苗，培養(yǎng)條件為溫度25°C，3天后將三角瓶或組培瓶的瓶塞打開，7天后取出，洗去根部瓊脂，將其栽植于培養(yǎng)介質(zhì)中，濕度為80%-90%，溫度20°C -23°C, 14天后定植于土壤進(jìn)行正常管理。
其余內(nèi)容同實(shí)施例I。實(shí)施結(jié)果在結(jié)球甘藍(lán)誘導(dǎo)培養(yǎng)基上子葉可長(zhǎng)出愈傷組織，胚軸可直接分化不定芽；組培苗增殖倍數(shù)4. 2 ;組培苗生長(zhǎng)勢(shì)強(qiáng)，玻璃化苗數(shù)少，增殖率高；組培苗生根率可達(dá)
100% O
權(quán)利要求
1.結(jié)球甘藍(lán)組織培養(yǎng)方法，其特征在于，包括如下工藝步驟 A、無(wú)菌苗的培養(yǎng)將去雜后選出的優(yōu)質(zhì)結(jié)球甘藍(lán)種子消毒，將消毒后的種子接種于MS培養(yǎng)基中進(jìn)行暗培養(yǎng)后制成無(wú)菌苗，按照48ml-52ml培養(yǎng)基接種8_10顆種子的接種量接種，培養(yǎng)溫度22°C -26°C，培養(yǎng)濕度70%-80%，培養(yǎng)周期9_12天； B、誘導(dǎo)培養(yǎng)將暗培養(yǎng)后的無(wú)菌苗子葉切成4mmX4mm的塊,將胚軸切成3.6-4. 2 mm,接種在誘導(dǎo)分化培養(yǎng)基上進(jìn)行誘導(dǎo)培養(yǎng)，觀察外植體在誘導(dǎo)培養(yǎng)過程中的變化和不定芽的誘導(dǎo)情況；誘導(dǎo)分化培養(yǎng)基的組成為MS+6-BA 2. 0-3. Omg/L, NAA O. 1-0. 2mg/L,蔗糖 25_30g/L，瓊脂 6. 5_7g/L，pH 值=5. 8 ； 誘導(dǎo)培養(yǎng)的培養(yǎng)條件為溫度24°C _26°C，光照強(qiáng)度1000-2000LX，光照時(shí)間12小時(shí)/天，培養(yǎng)濕度70%-80%，培養(yǎng)周期25-35天； C、增殖培養(yǎng)將誘導(dǎo)的不定芽接種按照每瓶接種3-4個(gè)的接種量接種于體積為48ml-52ml增殖培養(yǎng)基上進(jìn)行增殖培養(yǎng)制成不定苗，25天繼代I次，連續(xù)繼代3次； 增殖培養(yǎng)培養(yǎng)基的組成為MS+6-BA I. 0-2. Omg/L, NAA O. 1-0. 2mg/L,蔗糖 25_30g/L,瓊脂 6. 5_7g/L, pH 值=5. 8 ； 增殖培養(yǎng)的培養(yǎng)條件為溫度24V -26°C，光照強(qiáng)度1000-2000LX，光照時(shí)間12小時(shí)/天，培養(yǎng)濕度70%-80% ； D、生根培養(yǎng)將不定苗分切后按照每瓶接種3-4個(gè)的接種量接種于體積為48ml-52ml生根培養(yǎng)基上進(jìn)行生根培養(yǎng)，14天后觀察生根情況；生根培養(yǎng)培養(yǎng)基的組成為1/2MS+NAA O. 1-0. 2mg/L 或 1/2MS+IBA O. 2-0. 3mg/L，蔗糖 15_20g/L，瓊脂 5. 5_6g/L，pH 值=5. 8 ; 生根培養(yǎng)的培養(yǎng)條件為溫度24V -26°C，光照強(qiáng)度2200-2500LX，光照時(shí)間10-12小時(shí)/天，培養(yǎng)濕度70%-80% ； E、再生苗的移植 當(dāng)甘藍(lán)組培苗產(chǎn)生根系并形成完整植株后，置于溫室中煉苗，煉苗條件為溫度200C -25 V，3天后將三角瓶或組培瓶的瓶塞打開，7天后取出，洗去根部瓊脂，將其栽植于培養(yǎng)介質(zhì)中，濕度為80%-90%，溫度20°C -23°C, 14天后定植于土壤進(jìn)行正常管理。
2.根據(jù)權(quán)利要求I所述的結(jié)球甘藍(lán)組織培養(yǎng)方法，其特征在于，步驟A中所述的去雜是將甘藍(lán)種子在流水下沖洗，去掉雜質(zhì)及灰塵。
3.根據(jù)權(quán)利要求2所述的結(jié)球甘藍(lán)組織培養(yǎng)方法，其特征在于，步驟A中所述的選出優(yōu)質(zhì)結(jié)球甘藍(lán)種子的步驟為將去雜后的結(jié)球甘藍(lán)種子浸泡于水中，沉于水底的為優(yōu)質(zhì)結(jié)球甘藍(lán)種子。
4.根據(jù)權(quán)利要求2所述的結(jié)球甘藍(lán)組織培養(yǎng)方法，其特征在于，步驟A中所述的消毒是將選出的優(yōu)質(zhì)結(jié)球甘藍(lán)種子先用質(zhì)量百分比為70%的酒精浸泡30秒，再用質(zhì)量百分比為O.1%的氯化汞消毒8分鐘,然后無(wú)菌水沖洗3-4次。
5.根據(jù)權(quán)利要求I所述的結(jié)球甘藍(lán)組織培養(yǎng)方法，其特征在于，步驟A-D中所述的暗培養(yǎng)、誘導(dǎo)培養(yǎng)、增殖培養(yǎng)、生根培養(yǎng)過程中培養(yǎng)室每周在外界空氣質(zhì)量良好情況下進(jìn)行3-4小時(shí)短時(shí)通風(fēng)。
全文摘要
本發(fā)明屬于組織培養(yǎng)，特別是指一種結(jié)球甘藍(lán)組織培養(yǎng)方法。包括無(wú)菌苗的培養(yǎng)、誘導(dǎo)培養(yǎng)、增殖培養(yǎng)、生根培養(yǎng)、再生苗的移植等工藝步驟，本發(fā)明解決了現(xiàn)有技術(shù)存在的不利于結(jié)球甘藍(lán)組培苗的繼代培養(yǎng)、長(zhǎng)期保存及生根移栽利用等問題，具有采用本方法在結(jié)球甘藍(lán)誘導(dǎo)培養(yǎng)基上子葉可長(zhǎng)出愈傷組織，胚軸可直接分化不定芽；組培苗增殖倍數(shù)3.8-4.6；組培苗生長(zhǎng)勢(shì)強(qiáng)，玻璃化苗數(shù)少，增殖率高；組培苗生根率可達(dá)100%等優(yōu)點(diǎn)。
文檔編號(hào)A01H4/00GK102805035SQ20121030836
公開日2012年12月5日 申請(qǐng)日期2012年8月28日 優(yōu)先權(quán)日2012年8月28日
發(fā)明者申志彬, 申志恒, 王僧虎, 石曉云 申請(qǐng)人:邢臺(tái)市蔬菜種子公司