專利名稱：一種皺紋盤鮑三倍體苗種的培育方法
技術(shù)領(lǐng)域：
本發(fā)明涉及鮑魚，特別涉及一種皺紋盤鮑三倍體苗種的培育方法。
背景技術(shù)：
鮑魚是一種珍貴海珍品，被譽(yù)為海產(chǎn)八珍之首。作為營(yíng)養(yǎng)價(jià)值高的滋補(bǔ)品和調(diào)節(jié) 人體生理機(jī)能的食療佳品，鮑魚素有“軟黃金”之稱。由于皺紋盤鮑天然資源的嚴(yán)重不足， 隨著國(guó)內(nèi)外市場(chǎng)對(duì)鮑魚需求的日益增長(zhǎng)，市場(chǎng)上皺紋盤鮑價(jià)格逐年攀升，具有較好的市場(chǎng) 前景。此外，皺紋盤鮑在日本、韓國(guó)、東南亞以及香港、臺(tái)灣等國(guó)家和地區(qū)擁有巨大的市場(chǎng)潛 力，是出口創(chuàng)匯的優(yōu)良品種。由于皺紋盤鮑生長(zhǎng)速度較慢，生長(zhǎng)周期較長(zhǎng)，通常需要2 3 年才能達(dá)到市場(chǎng)銷售規(guī)格，因此皺紋盤鮑的人工養(yǎng)殖遠(yuǎn)遠(yuǎn)不能滿足市場(chǎng)的需求。中國(guó)專利申請(qǐng)CN201010235604. 6公開了一種可提早育苗的皺紋盤鮑親鮑促熟方 法，挑選殼長(zhǎng)至少為9cm、性腺成熟度為3 4成，活力及吸著力強(qiáng)且無(wú)病害的皺紋盤鮑作 為親鮑，親鮑中雄鮑與雌鮑的數(shù)量比80 100 500 1000 ；分為前期、中間期及后期三 個(gè)時(shí)間段培育親鮑，前期培育時(shí)間為40 50天，水溫為15 18°C，飼喂鹽漬海帶；中間培 育時(shí)間為40 50天，水溫為17 22°C，飼喂鮮海帶；后期培育時(shí)間為20天，水溫為19 22 0C，飼喂干紫菜，從而可提早促熟皺紋盤鮑親鮑。三倍體水產(chǎn)動(dòng)物預(yù)期是不育的，其性腺不能發(fā)育成熟，也不能繁殖后代。因此沒(méi)有 性成熟階段性腺發(fā)育的能量損耗，用于性腺發(fā)育的能量可用于生長(zhǎng)，從而促進(jìn)個(gè)體的生長(zhǎng)， 避免了性腺發(fā)育階段的生長(zhǎng)停滯和高死亡率問(wèn)題。這在控制過(guò)度繁殖和加快生長(zhǎng)速度方面 都具有良好的應(yīng)用前景。染色體倍性操作是水生生物細(xì)胞工程育種的一個(gè)行之有效的途徑，目前進(jìn)行染色 體倍性操作的主要方法有以下幾種物理方法處理受精卵，包括冷、熱休克和靜水壓法。利 用化學(xué)試劑處理胚胎，包括使用細(xì)胞松弛素B (以下簡(jiǎn)稱CB)、咖啡因、6- 二甲基氨基嘌呤 (以下簡(jiǎn)稱6-DMAP)。雖然化學(xué)方法誘導(dǎo)率較高，但是化學(xué)試劑存在價(jià)格昂貴且具有較強(qiáng)毒 性，對(duì)人類健康存在威脅，因此在生產(chǎn)中的應(yīng)用受到限制。物理方法具有操作簡(jiǎn)單，無(wú)污染 等優(yōu)點(diǎn)，適合開展三倍體誘導(dǎo)工作，但現(xiàn)有報(bào)道的實(shí)驗(yàn)?zāi)康闹饕沁M(jìn)行科學(xué)研究，實(shí)驗(yàn)規(guī)模 較小，對(duì)生產(chǎn)性問(wèn)題沒(méi)有加以考慮，因此在生產(chǎn)中難以推廣應(yīng)用。

發(fā)明內(nèi)容
本發(fā)明針對(duì)現(xiàn)有養(yǎng)殖技術(shù)中皺紋盤鮑生長(zhǎng)速度慢，繁殖期成活率下降的問(wèn)題，提 供一種生長(zhǎng)快、個(gè)體大、成活率高的皺紋盤鮑三倍體苗種的培育方法。本發(fā)明包括以下步驟1)種鮑的促熟選取殼長(zhǎng)范圍在7 12cm，個(gè)體活力良好、肌肉無(wú)損傷的皺紋盤鮑 作為種鮑，對(duì)種鮑進(jìn)行人工飼育；2)皺紋盤鮑受精卵的同步發(fā)育采用人工催產(chǎn)的方法刺激種鮑，分別誘導(dǎo)種鮑排 精、產(chǎn)卵，收集精子和卵子，進(jìn)行人工授精，獲得皺紋盤鮑受精卵；
3)對(duì)皺紋盤鮑受精卵進(jìn)行誘導(dǎo)以在光學(xué)顯微鏡下觀察到30% 50%皺紋盤鮑 受精卵出現(xiàn)第一極體為起始誘導(dǎo)時(shí)間，用2 3°C海水沖洗皺紋盤鮑受精卵，誘導(dǎo)后采用倍 性分析儀檢測(cè)所培育皺紋盤鮑苗種的三倍體率。在步驟1)中，所述人工飼育時(shí)的餌料組成按質(zhì)量比可為海帶30 55，江籬50 80，紫菜20 40，所述對(duì)種鮑進(jìn)行人工飼育，最好控制種鮑性腺發(fā)育同步成熟。在步驟幻中，所述人工授精最好在所述精子產(chǎn)出后30min內(nèi)，所述卵子產(chǎn)出后Ih 內(nèi)進(jìn)行；所述人工授精時(shí)種鮑雌雄比可為(30 50) 1 ；所述皺紋盤鮑受精卵可采用篩絹 網(wǎng)袋濃縮至受精卵密度為(500 800)萬(wàn)粒/L。在步驟3)中，所述沖洗的時(shí)間可為10 15min。本發(fā)明提出一種新的、利用低溫誘導(dǎo)產(chǎn)生皺紋盤鮑三倍體苗種的方法，可以在大 規(guī)模生產(chǎn)中培育出具有生長(zhǎng)快、個(gè)體大、成活率高等優(yōu)良品質(zhì)的皺紋盤鮑三倍體苗種。本發(fā) 明所采用的處理溫度、處理起始時(shí)間及持續(xù)時(shí)間可確保獲得較高的胚胎和幼蟲倍化率、孵 化率及成活率，經(jīng)倍性分析儀檢測(cè)，三倍體率達(dá)70 %，而且處理方式較為簡(jiǎn)便，適合在規(guī)模 化開展三倍體苗種生產(chǎn)。采用本發(fā)明所述方法培育的三倍體皺紋盤鮑普遍不育或繁殖力低 下，繁殖季節(jié)時(shí)性腺普遍不發(fā)育，因此具有生長(zhǎng)速度快、養(yǎng)殖成活率高、肉味鮮美等優(yōu)點(diǎn)，具 有良好的經(jīng)濟(jì)效益。
具體實(shí)施例方式實(shí)施例11)在皺紋盤鮑性腺成熟前選取殼長(zhǎng)范圍在7 12cm，個(gè)體活力良好、肌肉無(wú)損傷 的皺紋盤鮑做為種鮑，開展人工培育使所有種鮑性腺發(fā)育同時(shí)成熟。2)采用人工催產(chǎn)的方法刺激種鮑，分別誘導(dǎo)種鮑產(chǎn)卵或排精，并分別收集精子和 卵子。在精子產(chǎn)出后15min，卵子產(chǎn)出后40min內(nèi)，開展人工授精，參與授精的種鮑雌雄比為 30 1。受精后，迅速用300目篩絹網(wǎng)袋濃縮受精卵至500萬(wàn)粒/L。3)在光學(xué)顯微鏡下觀察到30% 50%受精卵出現(xiàn)第一極體時(shí)開始對(duì)受精卵進(jìn)行 三倍體誘導(dǎo)，誘導(dǎo)時(shí)采用溫度為3°C的海水沖洗帶濃縮受精卵的篩絹網(wǎng)袋，確保所有受精卵 均置于3°C的海水中，持續(xù)沖洗15min。采用本方法可以在在大規(guī)模生產(chǎn)中獲得皺紋盤鮑三倍體苗種，經(jīng)倍性分析儀檢 測(cè)，三倍體率可達(dá)70%，與化學(xué)方法相比，此方法操作簡(jiǎn)便，對(duì)操作者和環(huán)境均無(wú)毒性，適合 在大規(guī)模生產(chǎn)應(yīng)用中推廣。實(shí)施例21)在皺紋盤鮑性腺成熟前選取殼長(zhǎng)范圍在7 12cm，個(gè)體活力良好、肌肉無(wú)損傷 的皺紋盤鮑做為種鮑，開展人工培育使所有種鮑性腺發(fā)育同時(shí)成熟。2)采用人工催產(chǎn)的方法刺激種鮑，分別誘導(dǎo)種鮑產(chǎn)卵或排精，并分別收集精子和 卵子。在精子產(chǎn)出后20min，卵子產(chǎn)出后50min內(nèi)，開展人工授精，參與授精的種鮑雌雄比為 40 1。受精后，迅速用300目篩絹網(wǎng)袋濃縮受精卵至800萬(wàn)粒/L。3)在光學(xué)顯微鏡下觀察到30% 50%受精卵出現(xiàn)第一極體時(shí)開始對(duì)受精卵進(jìn)行 三倍體誘導(dǎo)，誘導(dǎo)時(shí)采用溫度為2°C的海水沖洗帶濃縮受精卵的篩絹網(wǎng)袋，確保所有受精卵 均置于2°C的海水中，持續(xù)沖洗12min。經(jīng)倍性分析儀檢測(cè)，三倍體率為63%。
采用本方法可以在在大規(guī)模生產(chǎn)中獲得皺紋盤鮑三倍體苗種，與化學(xué)方法相比， 此方法操作簡(jiǎn)便，對(duì)操作者和環(huán)境均無(wú)毒性，所培育出的三倍體皺紋盤鮑具有生長(zhǎng)快、抗病 力強(qiáng)的特點(diǎn)。
權(quán)利要求
1.一種皺紋盤鮑三倍體苗種的培育方法，其特征在于其包括以下步驟1)種鮑的促熟選取殼長(zhǎng)范圍在7 12cm，個(gè)體活力良好、肌肉無(wú)損傷的皺紋盤鮑作為 種鮑，對(duì)種鮑進(jìn)行人工飼育；2)皺紋盤鮑受精卵的同步發(fā)育采用人工催產(chǎn)的方法刺激種鮑，分別誘導(dǎo)種鮑排精、 產(chǎn)卵，收集精子和卵子，進(jìn)行人工授精，獲得皺紋盤鮑受精卵；3)對(duì)皺紋盤鮑受精卵進(jìn)行誘導(dǎo)以在光學(xué)顯微鏡下觀察到30% 50%皺紋盤鮑受精 卵出現(xiàn)第一極體為起始誘導(dǎo)時(shí)間，用2 3°C海水沖洗皺紋盤鮑受精卵，誘導(dǎo)后采用倍性分 析儀檢測(cè)所培育皺紋盤鮑苗種的三倍體率。
2.如權(quán)利要求1所述的一種皺紋盤鮑三倍體苗種的培育方法，其特征在于在步驟1) 中，所述人工飼育時(shí)的餌料組成按質(zhì)量比為海帶30 55份，江籬50 80份，紫菜20 40 份。
3.如權(quán)利要求1所述的一種皺紋盤鮑三倍體苗種的培育方法，其特征在于在步驟1) 中，所述對(duì)種鮑進(jìn)行人工飼育，是控制種鮑性腺發(fā)育同步成熟。
4.如權(quán)利要求1所述的一種皺紋盤鮑三倍體苗種的培育方法，其特征在于在步驟2) 中，所述人工授精是在所述精子產(chǎn)出后30min內(nèi)，所述卵子產(chǎn)出后Ih內(nèi)進(jìn)行。
5.如權(quán)利要求1所述的一種皺紋盤鮑三倍體苗種的培育方法，其特征在于在步驟2)所 述人工授精時(shí)種鮑雌雄比為30 50 1。
6.如權(quán)利要求1所述的一種皺紋盤鮑三倍體苗種的培育方法，其特征在于在步驟2)所 述皺紋盤鮑受精卵采用篩絹網(wǎng)袋濃縮至受精卵密度為(500 800)萬(wàn)粒/L。
7.如權(quán)利要求1所述的一種皺紋盤鮑三倍體苗種的培育方法，其特征在于在步驟3)， 所述沖洗的時(shí)間為10 15min。
全文摘要
一種皺紋盤鮑三倍體苗種的培育方法。涉及鮑魚，提供一種皺紋盤鮑三倍體苗種的培育方法。選取殼長(zhǎng)范圍在7～12cm，個(gè)體活力良好、肌肉無(wú)損傷的皺紋盤鮑作為種鮑，對(duì)種鮑開展人工飼育，通過(guò)人工飼育確保種鮑性腺發(fā)育同步成熟；采用人工催產(chǎn)的方法刺激種鮑，分別誘導(dǎo)種鮑排精、產(chǎn)卵，收集精子和卵子，進(jìn)行人工授精，獲得皺紋盤鮑受精卵；以在光學(xué)顯微鏡下觀察到30％～50％皺紋盤鮑受精卵出現(xiàn)第一極體為起始時(shí)間，在2～3℃海水沖洗皺紋盤鮑受精卵10～15min。低溫誘導(dǎo)后采用倍性分析儀檢測(cè)所培育皺紋盤鮑苗種的三倍體率?？梢源笠?guī)模培育出具有生長(zhǎng)快、個(gè)體大、成活率高等優(yōu)良品質(zhì)的皺紋盤鮑三倍體苗種，具有良好的經(jīng)濟(jì)效益。
文檔編號(hào)A01K61/00GK102132678SQ201110052878
公開日2011年7月27日 申請(qǐng)日期2011年3月4日 優(yōu)先權(quán)日2011年3月4日
發(fā)明者郭炳堅(jiān) 申請(qǐng)人:郭炳堅(jiān)