專利名稱：中藥青葙殺蟲活性物質(zhì)的提取方法及應(yīng)用的制作方法
技術(shù)領(lǐng)域：
本發(fā)明涉及一種植物活性成分的提取方法及應(yīng)用，特別涉及一種中藥青葙殺蟲活 性物質(zhì)的提取方法及應(yīng)用。
背景技術(shù)：
20世紀(jì)50年代開始，大量使用有機(jī)合成殺蟲劑，對(duì)害蟲防治起重大作用。然而， 長(zhǎng)期大量使用化學(xué)殺蟲劑會(huì)帶來種種弊端，抗藥性的產(chǎn)生、毒性殘留以及環(huán)境污染等已成 為危及人類健康、生態(tài)平衡和社會(huì)發(fā)展的危險(xiǎn)因素。與化學(xué)殺蟲劑相比，植物源殺蟲劑對(duì)人 和動(dòng)物的毒性低、對(duì)生態(tài)環(huán)境的影響小，具有很大的開發(fā)價(jià)值和應(yīng)用前景。從植物中篩選和 發(fā)現(xiàn)新的殺蟲活性物質(zhì)，進(jìn)而開發(fā)出具有一定作用特點(diǎn)的植物源農(nóng)藥是新農(nóng)藥開發(fā)研究的 一個(gè)重要方面。據(jù)《本草綱目》記載，中藥植物百部、藜蘆、狼毒、苦參等都有很好的殺蟲作 用。近年來研究較多的殺蟲植物印楝、苦皮藤、黃杜鵑、菖蒲、雷公藤等展現(xiàn)出了良好的應(yīng)用 價(jià)值，從植物中尋找殺蟲活性物質(zhì)，是開發(fā)、研制新型殺蟲劑的熱點(diǎn)之一。青葙(Celosia argentea)是莧科(Amaranthcea) —年生草本植物，分布遍及全 國(guó)，生于田野、路旁和荒地，為旱地常見雜草，也是一種著名的中草藥。目前國(guó)內(nèi)外對(duì)其研究 主要集中在醫(yī)藥方面。青葙具有很強(qiáng)的抗菌消炎作用，對(duì)青葙子的研究發(fā)現(xiàn)，其種子含有 豐富的脂肪油、不飽和脂肪酸和礦物質(zhì)，已經(jīng)從青葙子水提液中分離出來的一種酸性多糖 Celosian,該物質(zhì)具有保肝作用，可抑制ALT活性的升高，可能是一種治療急性肝炎，保護(hù) 肝細(xì)胞的有效物質(zhì)，另外研究還發(fā)現(xiàn)青葙子水提取物對(duì)四氧嘧啶糖尿病小鼠具有降血糖作 用，青葙子乙醇提取物具有抗糖尿病活性，然而目前對(duì)其在農(nóng)林病蟲害防治方面的作用很 少研究。不同植物體內(nèi)所含有的活性物質(zhì)存在很大的差異，即便是存在的同一種物質(zhì)，其 含量也有所不同，這就造成了它們?cè)谔崛》椒ㄉ蠒?huì)多有不同。對(duì)植物活性物質(zhì)的提取工藝 中，提取效能的高低通常與提取溶劑的種類、溶劑的比例、提取時(shí)間、提取溫度等因素有關(guān)。 不同的提取溶劑、不同的提取設(shè)備以及不同的提取時(shí)間等，都會(huì)造成所提取的活性物質(zhì)的 種類差異和提取量的差異。

發(fā)明內(nèi)容
本發(fā)明的目的是提供一種中藥青葙殺蟲活性物質(zhì)的提取方法，所得青葙活性物質(zhì) 提取物用于農(nóng)業(yè)害蟲防治具有防治效果好、防治成本低、無污染、無殘留的特點(diǎn)，具有良好 的社會(huì)效益和生態(tài)效益。本發(fā)明的另一目的是提供一種青葙殺蟲活性物質(zhì)提取物在農(nóng)業(yè)害蟲防治上的應(yīng)用。本發(fā)明所采用的技術(shù)方案一種中藥青葙殺蟲活性物質(zhì)的提取方法，其具體步驟如下1、采集青葙全部植物組織，用清水洗凈，置于室內(nèi)陰干，于45 55°C烘干至恒重
3后冷卻，粉碎得到青葙粉末。所述青葙全部植物組織是指根、莖、葉、花、種子。2、將青葙粉末與甲醇按體積比為1 5 10的比例混合，反復(fù)提取12小時(shí)以上， 得到青葙提取液；將青葙提取液進(jìn)行減壓濃縮至提取液變成粘稠膏狀，即為青葙粗提物。3、將青葙粗提物用甲醇溶解后，按青葙粗提物硅藻土 = 1 3 10的重量比例 與硅藻土混合均勻，揮干溶劑甲醇，得到青葙粗提物-硅藻土混合物。4、將青葙粗提物_硅藻土混合物經(jīng)正己烷萃取后再進(jìn)行乙醚萃取，收集乙醚萃取 相并減壓濃縮至相對(duì)密度為0. 25 lg/cm3，得到青葙殺蟲活性物質(zhì)提取物。青葙殺蟲活性物質(zhì)提取物可直接用于植物害蟲的防治，或按體積比1 500 1000的比例加入表面活性劑和蒸餾水，使青葙活性物質(zhì)提取物溶解，定容后即可作為原藥 液，然后于4°C低溫避光保存。本發(fā)明的另一目的是提供一種青葙殺蟲活性物質(zhì)提取物的應(yīng)用，該提取物在防 治農(nóng)業(yè)害蟲藥物中的應(yīng)用。所述農(nóng)業(yè)害蟲為紅脈穗螟(Tirathaba rufivena Walker)、三 藥模榔扁蟲牙(Astegopteryxxinglongensis Zhang)、螺方寵粉風(fēng)(Aleurodicus dispersus Russell) ^Hl^l^^pygi^ (Cerataphis lataniae Boisduval)。本發(fā)明工藝簡(jiǎn)單，通過對(duì)青葙進(jìn)行化學(xué)提取，有效地保留中藥青葙的殺蟲活性物 質(zhì)，所得青葙殺蟲活性物質(zhì)提取物用于農(nóng)業(yè)害蟲防治具有防治效果好、防治成本低、無污 染、無殘留的特點(diǎn)，具有良好的社會(huì)效益和生態(tài)效益。
具體實(shí)施例方式下面用實(shí)施例對(duì)本發(fā)明作進(jìn)一步說明。實(shí)施例一1、中藥青葙殺蟲活性物質(zhì)的提取采集青葙全部植物組織，用清水洗凈，置于室內(nèi)陰干后放入鼓風(fēng)式烘干箱內(nèi)45°C， 烘干24小時(shí)，冷卻、粉碎得到青葙粉末；稱取青葙粉末2kg置于索氏提取器中，按體積比為 1 8的比例加入有機(jī)溶劑甲醇，溫度65°C反復(fù)提取18小時(shí)以上，得到青葙提取液；將青葙 提取液移至旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)儀上，45°C減壓濃縮至提取液變成粘稠膏狀，即為青葙粗提物；將青葙 粗提物用甲醇溶解后，按青葙粗提物硅藻土 =1 5的重量比例與硅藻土混合均勻，揮干 溶劑甲醇，得到青葙粗提物_硅藻土混合物；將青葙粗提物-硅藻土混合物經(jīng)正己烷萃取后 再進(jìn)行乙醚萃取，收集乙醚萃取相并減壓濃縮至相對(duì)密度為0. 5g/cm3，得到青葙殺蟲活性 物質(zhì)提取物。2、青葙殺蟲活性物質(zhì)提取物對(duì)紅脈穗螟生物活性測(cè)定將青葙殺蟲活性物質(zhì)提取物按體積比1 700的比例加入表面活性劑和蒸餾水得 到原藥液，將原藥液用蒸餾水稀釋成有效物質(zhì)50倍、100倍、200倍、500倍和1000倍，用噴 霧法處理紅脈穗螟3齡幼蟲，置于養(yǎng)蟲盒中正常飼養(yǎng)，飼以正常檳榔花穗，并放脫脂棉球保 濕，飼養(yǎng)條件為溫度26°C，相對(duì)濕度80%。每處理用蟲50頭，重復(fù)3次，藥后12小時(shí)、24 小時(shí)、48小時(shí)、72小時(shí)、100小時(shí)檢查死亡率，并計(jì)算校正死亡率。結(jié)果列表如下。表1中藥青葙殺蟲活性物質(zhì)對(duì)紅脈穗螟的殺蟲效果
3、青葙殺蟲活性物質(zhì)提取物對(duì)螺旋粉虱生物活性測(cè)定采用浸漬法進(jìn)行測(cè)定。將青葙殺蟲活性物質(zhì)提取物按體積比1 600的比例加 入表面活性劑和蒸餾水得到原藥液，將原藥液用蒸餾水稀釋成有效成分200倍、400倍、800 倍、1600倍和3200倍。取田間采集的新鮮印度紫檀感蟲葉片，剔除成蟲及其他齡若蟲，僅留 取3齡若蟲供試，放在藥液中浸泡5s后取出，置于室內(nèi)自然晾干后放入培養(yǎng)皿中培養(yǎng)，用濕 棉球包住葉柄保濕，以蒸餾水處理的葉片作為對(duì)照，用保鮮膜為培養(yǎng)皿封口，并在保鮮膜上 扎若干個(gè)小孔以利于透氣，處理后24小時(shí)、36小時(shí)、48小時(shí)、60小時(shí)、72小時(shí)后在雙目顯微 鏡下檢查螺旋粉虱若蟲死亡情況，用解剖針將蟲體翻轉(zhuǎn)，輕輕觸動(dòng)蟲體及觸角，完全不動(dòng)者 為死亡。每個(gè)處理重復(fù)3次，每重復(fù)至少50頭。結(jié)果列表如下。表2中藥青葙殺蟲活性物質(zhì)對(duì)螺旋粉虱的殺蟲效果 實(shí)施例二1、中藥青葙殺蟲活性物質(zhì)的提取采集青葙全部植物組織，用清水洗凈，置于室內(nèi)陰干后放入鼓風(fēng)式烘干箱內(nèi)50°C， 烘干18小時(shí)，冷卻、粉碎得到青葙粉末；稱取青葙粉末2kg置于索氏提取器中，按體積比為 1 10的比例加入有機(jī)溶劑甲醇，溫度65°C反復(fù)提取18小時(shí)以上，得到青葙提取液；將青 葙提取液移至旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)儀上，50°C減壓濃縮至提取液變成粘稠膏狀，即為青葙粗提物；將青 葙粗提物用甲醇溶解后，按青葙粗提物硅藻土 = 1 8的重量比例與硅藻土混合均勻，揮 干溶劑甲醇，得到青葙粗提物-硅藻土混合物；將青葙粗提物-硅藻土混合物經(jīng)正己烷萃取后再進(jìn)行乙醚萃取，收集乙醚萃取相并減壓濃縮至相對(duì)密度為0. 75g/cm3，得到青葙殺蟲活 性物質(zhì)提取物。2、青葙殺蟲活性物質(zhì)提取物對(duì)三藥檳榔扁蚜生物活性測(cè)定采用浸漬法進(jìn)行測(cè)定。將青葙殺蟲活性物質(zhì)提取物按體積比1 800的比例加 入表面活性劑和蒸餾水得到原藥液，將原藥液用蒸餾水稀釋成有效成分200倍、400倍、800 倍、1600倍和3200倍，對(duì)照為蒸餾水。將田間采回的染蟲檳榔花絮，用小毛筆挑去花絮上其 它蚜蟲、剔除若蚜，保留個(gè)體一致，健康活潑的無翅成蚜浸入上述溶液中，5s后取出，吸干多 余的藥液，調(diào)查蚜蟲基數(shù)，然后將枝條插到帶水的玻璃瓶中，每日定時(shí)換水，24小時(shí)、36小 時(shí)、48小時(shí)、60小時(shí)、72小時(shí)在雙目顯微鏡下檢查枝條上的活蚜蟲數(shù)。正常爬行的為活蟲， 其它個(gè)體(不能爬行、仰翻或完全死亡等)屬于死蟲。每處理用蟲50頭，重復(fù)3次。結(jié)果 列表如下。表3中藥青葙殺蟲活性物質(zhì)對(duì)三藥檳榔扁蚜的殺蟲效果 3、青葙殺蟲活性物質(zhì)提取物對(duì)三藥檳榔堅(jiān)蚜生物活性測(cè)定采用浸漬法進(jìn)行測(cè)定。將青葙殺蟲活性物質(zhì)提取物按體積比1 900的比例加 入表面活性劑和蒸餾水得到原藥液，將原藥液用蒸餾水稀釋成有效成分200倍、400倍、800 倍、1600倍和3200倍，對(duì)照為蒸餾水。將田間采回的染蟲葉片，用小毛筆挑去葉片上其它有 害生物、剔除若蚜，保留個(gè)體一致，健康活潑的無翅成蚜浸入上述溶液中，5s后取出，吸干多 余的藥液，調(diào)查蚜蟲基數(shù)，然后將其置于養(yǎng)蟲盒中，保濕培養(yǎng)，于處理后24小時(shí)、36小時(shí)、48 小時(shí)、60小時(shí)、72小時(shí)在雙目顯微鏡下檢查枝條上的活蚜蟲數(shù)。正常爬行的為活蟲，其它個(gè) 體(不能爬行、仰翻或完全死亡等)屬于死蟲。每處理用蟲50頭，重復(fù)3次。結(jié)果列表如 下。表4中藥青葙殺蟲活性物質(zhì)對(duì)三藥檳榔堅(jiān)蚜的殺蟲效果
權(quán)利要求
一種中藥青葙殺蟲活性物質(zhì)的提取方法，其特征在于，其具體步驟如下1)、采集青葙全部植物組織，用清水洗凈，置于室內(nèi)陰干，于45～55℃烘干至恒重后冷卻，粉碎得到青葙粉末；所述青葙全部植物組織是指根、莖、葉、花、種子；2)、將青葙粉末與甲醇按體積比為1∶5～10的比例混合，反復(fù)提取12小時(shí)以上，得到青葙提取液；將青葙提取液進(jìn)行減壓濃縮至提取液變成粘稠膏狀，即為青葙粗提物；3)、將青葙粗提物用甲醇溶解后，按青葙粗提物∶硅藻土＝1∶3～10的重量比例與硅藻土混合均勻，揮干溶劑甲醇，得到青葙粗提物 硅藻土混合物；4)、將青葙粗提物 硅藻土混合物經(jīng)正己烷萃取后再進(jìn)行乙醚萃取，收集乙醚萃取相并減壓濃縮至相對(duì)密度為0.25～1g/cm3，得到青葙殺蟲活性物質(zhì)提取物。
2.—種權(quán)利要求1所述的提取方法得到的青葙殺蟲活性物質(zhì)提取物，其特征在于該提 取物在防治農(nóng)業(yè)害蟲藥物中的應(yīng)用；所述農(nóng)業(yè)害蟲為紅脈穗螟、三藥檳榔扁蚜、螺旋粉虱和 三藥檳榔堅(jiān)蚜。
全文摘要
本發(fā)明涉及一種中藥青葙殺蟲活性物質(zhì)的提取方法及應(yīng)用，是將青葙全部植物組織經(jīng)洗凈、烘干、冷卻、粉碎得到青葙粉末；用甲醇進(jìn)行提取得到青葙提取液；將青葙提取液減壓濃縮至粘稠膏狀得到青葙粗提物；將青葙粗提物用甲醇溶解后，與硅藻土混合均勻，揮干溶劑甲醇，得到青葙粗提物-硅藻土混合物；將青葙粗提物-硅藻土混合物經(jīng)正己烷萃取后再進(jìn)行乙醚萃取，收集乙醚萃取相并減壓濃縮得到青葙殺蟲活性物質(zhì)提取物。本發(fā)明工藝簡(jiǎn)單，通過對(duì)青葙進(jìn)行化學(xué)提取，有效地保留中藥青葙的殺蟲活性物質(zhì)，所得提取物用于農(nóng)業(yè)害蟲防治具有防治效果好、防治成本低、無污染、無殘留等特點(diǎn)，具有良好的社會(huì)效益和生態(tài)效益。
文檔編號(hào)A01P7/04GK101919416SQ20101026474
公開日2010年12月22日 申請(qǐng)日期2010年8月17日 優(yōu)先權(quán)日2010年8月17日
發(fā)明者呂朝軍, 孫曉東, 李朝緒, 李洪, 覃偉權(quán), 鐘寶珠, 馬子龍 申請(qǐng)人:中國(guó)熱帶農(nóng)業(yè)科學(xué)院椰子研究所