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鹵蟲孢囊的處理方法

文檔序號:337426閱讀:313來源:國知局

專利名稱::鹵蟲孢囊的處理方法卣蟲孢嚢的處理方法本發(fā)明涉及一種處理孢囊(cysts),特別是鹵蟲孢嚢(Artemiacysts)的方法,在液體^f誠養(yǎng)基中孵育所述孢嚢來生產(chǎn)活食用生物,特別是卣蟲無節(jié)幼體(Artemianauplii)。生產(chǎn)作為魚和甲殼類幼蟲(crustaceanlarvae)的活食的卣蟲無節(jié)幼體#皮認為是海洋粉匕場的J^作業(yè)。面蟲無節(jié)幼體的生產(chǎn)步常包括粉匕、分離、富集、沖洗和,其中收獲和沖洗鹵蟲無節(jié)幼體逸常需要篩子或濃縮器/沖洗器。棘器事實上是一種&慮器,其用^UUb節(jié)幼體中分離廢水,從而在l^f匕到適絲酉試^存的最^^Pv^就節(jié)幼體中除去多余的水,并JL^富絲洗去無節(jié)幼體上的油狀包衣。在孵化后,需務降卣蟲無節(jié)幼體與^J科匕的孢嚢和空孢嚢殼分離,因為這些孢嚢和殼在幼蟲槽中會引起大問題。事實上,當它們被食肉動物攝^,它們不肯W皮消化,并且可能會阻道,使#1子魚或^^肉動物可能死亡。在大多粉^f匕場中,通過將充氣管^m^ff中取出來實現(xiàn)分離,這使得^f^f中的不同物體(卣蟲無節(jié)幼體、完整的孢嚢和空孢嚢殼)得到分離。卣蟲無節(jié)幼體在^f^ft內(nèi)自由游動,其可通過^^I光(卣蟲無節(jié)幼^^ib原吸引)在^f匕錐頂端的底部收集。另一方面,空孢嚢殼易于漂浮,而完整的未醉化卣蟲孢嚢易于下沉。后面的這些物體可能會在Jlt^f匕無節(jié)幼體后干擾卣蟲無節(jié)幼體的質(zhì)量。當在孵化的卣蟲無節(jié)幼體中發(fā)現(xiàn)大量孢嚢(完整的或空的)時,需要額外的分離步驟來除去鹵蟲無節(jié)幼體中的這些孢嚢。通常^^I篩子,絲過收集篩上的孢嚢來除去鹵蟲無節(jié)幼體中的孢嚢。選擇歸子的方式是使無節(jié)幼體可以通過篩子,而比如孢嚢的物#恭在篩上。總體上,篩子的篩目尺寸為大約212Hm。接著,將無節(jié)幼體自身收集在更細的篩子上。通常4M雙篩'Wdoublesievemethod),第一次篩出殘留未醉化的孢嚢,第^L過篩出無節(jié)幼體。這種基于雙篩法的分離過程是細致而費時的過程。才^^#頂部濃縮的卣蟲中孢嚢/卣蟲無節(jié)幼體的比例,該過濾步驟可能有效,也可能無效。存在的孢絲多,濾網(wǎng)堵塞^f^快。堵塞不僅會減小i:腿,而且會增加傷害無節(jié)幼體的危險,因jty皮認為;Ulff匕/分離it^呈的一個主要問題。為了防止堵塞,必須有效除去^±>慮過程中濾網(wǎng)上的顆粒。在實施中,水噴射IW無節(jié)幼體噴射通it^慮器。事實上,i^慮步驟應該相當快^ii行,因為通常^f亭jtJ^粉贈充氣,使得空孢嚢殼在粉^t中上升,而無節(jié)幼絲底部濃集。為了避免因氧^1^致的死亡,無節(jié)幼體不能在圓錐容器的尖端4亭留太長時間。在孵化場中,用于UM^尋不分離^J^^抱嚢與無節(jié)幼體問題的一個方法是對卣蟲孢嚢進行(decapsulate)。孢嚢的(-從卣蟲胚胎去除孢嚢殼的夕卜層)是一種70^R開發(fā)的已知化學方法。標準艦過程包括用NaOCl(次氯酸鈉)溶,嚢殼(卵殼),并M限時期內(nèi)加入NaOH(用于##高pH)。通itlL^^夕卜面的孢紐。一^Si文熱A^終止,需要立即用Na2S203中和脫殼的孢嚢,以防jh^胎氧化。^it當iikitkai^亍皿it^呈,胚胎的生存能力不M到影響,它們可以^^f匕成無節(jié)幼M^M^W絲。孢嚢的消除了對分離空孢嚢殼和未^f匕孢嚢的需要。然而,未孵化的脫膜孢嚢會在魚或蝦幼蟲槽中迅速下沉,并且會分解和使培養(yǎng)基^f,可能引起細菌感染和疾病。盡管大多IW匕場^^]這種方法,^1種^法的最大缺點狄水可能含有非常高水平的有毒產(chǎn)物,并因此非常難以純化,例如廢水可能含有高水平的COD、C1和A0X。目前,由于處Sii類化學物質(zhì)的床竟問題增多,大^Lt莫進行該方法是不可能的。另"H^:點AMM過程需要非常大的勞動,而且需M確否則孢嚢的生存能力可能會受到影響。由于A^放熱反應,必須^HP脫膜介質(zhì),并且應當在準確的時間停止過程,以i^J^胎自身的氧化(參見例如2000年10月,GranvilD.Treece的SRACPublication,No.702,"j"郎/aProductionforMarineLarvalFishCulture")。因此,本發(fā)明的目的是提^-種能夠從自由游動的活食用生物,特別是從鹵蟲無節(jié)幼體中有效分離^J4^抱嚢,以及佑&的空孢嚢殼的新方法,其具有較低的損害或殺死自由游動的活食用生物的危險。為此目的,才娥本發(fā)明的方法的特征在于其包括將磁寸頓粒應用到孢ILL的步驟,使##別#所述的液體^[膽?zhàn)B基中能夠>^及引所述孢嚢。借助于孢ILh^v^茲性顆粒,而由孢嚢^f匕出的自由游動的活食用生物上沒有磁頓粒,孢嚢可被^^及引并因此可與活食用生物有效分離,而不會損害這些生物。例如可以在^f說養(yǎng)基中^^)^^UNL引^f匕的孢嚢和空孢嚢殼,以從J^f煤養(yǎng)基中除去這些物質(zhì),其既可通iiA^f匕槽中移除其上附著了孢囊和孢嚢殼的》翁失來實現(xiàn),也可通itMJ^f匕槽中移除含自由游動的活食用生物的^f說養(yǎng)基,同時將^^失保留,內(nèi)來實現(xiàn)。在后一種',中,^^失還可以應用于槽的內(nèi)部或壁上,使得^J刷t的孢囊和空孢囊殼附著到槽壁上。可^f她或另外地,在^f匕步聯(lián)還可將^f說養(yǎng)基引;艦過分離器裝置,特別是;脅通it^置,其中含有保留了,^嚢和^|可空孢嚢殼的磁鐵。術(shù)語磁f頓粒是指能夠被》辦失吸引的顆粒。因此,顆粒可由鐵磁性的、亞4失》茲性的或甚至是(強)順磁性的材料制得。由鐵磁^il亞鐵磁I^^料制得的顆粒可以被磁化,即轉(zhuǎn)變成小不辦失。假使那樣,盡管仍然^^i^fM^4^NL引孢嚢或孢嚢殼,該^1失可以用非磁化的磁##料代替。在才M^本發(fā)明的方法的-HM^實施方案中,磁I"生顆粒以液體懸浮液的形式、特別是以水性懸浮液的形式應用于孢囊上,優(yōu)選當孢嚢具有干表面時,以使它們是自由流動的。在另一個實施方式中,磁性顆粒以粉末的形式應用于孢ILh。術(shù)語"自由流動"是指^^說明書中孢嚢不^^^在^^形成小塊,而是單^#在,它們可容易^v—粉氏上傾倒(pour)。已^^現(xiàn),即^i^茲性顆粒上沒有^f可^^'J或粘性包衣時,磁)"生顆粒也能充分附著到孢lLh,并雖粉膽?zhàn)B基中##附著在其上,使得在^f^孢囊和空孢嚢殼可通itf茲性吸引從自由游動的活食用生物中分離。不'義—^I津給劑的一似點^^容易防止孢嚢凝集在-^。然而,這并不排除^f鵬本發(fā)明的方法中使用津給劑的可能性。例如,可使用例如CMC(羧甲^維素)的粘合劑,其在將孢嚢引A^^f^養(yǎng)基中時溶解。擬本發(fā)明的方法的另一*選實施方案中,在應用到孢ILL之前,至少90wt。/。的磁I"頓粒具有的尺寸小于10nm,儲小于5|im,更艦小于1nm,并JljL^ii小于0.5pm。該實施方式的一^H^點是這種小顆豐M"孢嚢的附著比;^粒更好。一_5^皮包Wj孢ILb^,磁f生顆??稍阪逫Lh形艦大的^^物(結(jié)晶),特別J^il可能部分是因為磁f頓粒之間的艦引力絲的。本發(fā)明還涉及才本發(fā)明的方法可得到的孢嚢,特別是卣蟲孢嚢。這些孢嚢的特征在于^^有應用到它們的外表面上的>^'^^粒。最后,本發(fā)明還涉及一種由才娥本發(fā)明的孢嚢開始生產(chǎn)自由游動的活食用生物的方法,其中孢^fe^f說養(yǎng)基中孵育,使#^分孢嚢^(匕^#^出自由游動的活食用生物,其中自由游動的活食用生物與未孵化的孢嚢和空孢嚢殼分離開來。才娥本發(fā)明,在=賻育步驟^,通it^^及引將磁l"頓粒應用到在其^"用生物分離。通過才娥本發(fā)明的方法和孢嚢的一些具體實施方式的描述,本發(fā)明其它特別^t和優(yōu)點將變得顯而易見。在該說明中使用的參照數(shù)字與附圖有關(guān),其中圖1顯示了^f匕槽的示意圖,其中帶有>^1失的孢嚢移除裝置用;^^(^&it^M產(chǎn)的無節(jié)幼體中分離;^f匕的孢嚢;和圖2顯示了流Mit^置較;U^模的實施方案,其在^f匕步,通過將孵^^養(yǎng)基引^it過該裝置,負^UL節(jié)幼體中磁性分離^Wf匕的孢嚢。本發(fā)明旨在提^""種從孢嚢^f匕的自由游動的活食用生物中分離^f^嚢,以及^i&的空孢嚢殼的新的有益方法。所述孢嚢特別是卣蟲孢嚢,但是本發(fā)明還可以應用于其它類型的孢嚢上。而且,術(shù)語孢嚢意味著不僅包^f皮包含在夕卜殼內(nèi)且肯^1快(在一天或兩天內(nèi))^f匕的胚胎,同時還包括^f匕前胚胎還M育的卵。因此,本發(fā)明還可用于如其它7K生動物的孢嚢(卵),例如輪蟲、淡水鹵蟲等。然而,本發(fā)明的主要應用是鹵蟲孢嚢,因此,進一步的描述僅參照這類卣蟲孢嚢和由卣蟲孢囊!^f匕出的自由游動的無節(jié)幼*出。卣蟲孢i^EX大洲散布的高itl(hypersaline)湖泊、沿海iipt湖和太陽鹽場(solarsaltworks)的沿海岸線一帶可大量獲得。在^后,清洗孢嚢并將其置于鹽溶液中係存數(shù)月。接著,在將它們處理(用淡水清'3t/沖洗)后,干駭含水量低于15wt%。當在海水中孵育時,這些孢囊樹出可直辦為營養(yǎng)活食來源喂養(yǎng)多種海生和淡水生物的幼蟲的自由游動的無節(jié)幼體,4吏得它們成為水生^SJ^更利、勞動密集性最少的活食??蒦UU于^ff匕卣蟲孢嚢的絲l的實例參見圖L在實施中肯將到絲^f匕結(jié)果的容器1具有形成圓錐形底部3的壁2,并JL^1部充氣。圓筒形或正方形底的槽具有盲點,卣蟲孢嚢和無節(jié)幼體聚集^E,并JLii受氧^C^。透明或半透明的^H有利于檢查粉匕懸浮液,尤其是當時。iH^卜,絲1可裝配至少一個光源4,其位于圓錐底部分,以在M無節(jié)幼體前將它們吸引到底部。1中跑U^t^,停止充氣,使得大多WJ^(匕的孢嚢能沉降到底部3,并且大多數(shù)空孢嚢殼能漂浮到^f說養(yǎng)基的表面。M1在底部有出口5,這#^有自由游動的無節(jié)幼體的孵^^養(yǎng)基能流出到if爭子上。為了避免必須從^f^養(yǎng)基中篩除,化的孢嚢,或者為了減小必須^f憐養(yǎng)基中篩除的未Hff^&嚢的量,此時^^^茲分離法。才緣本發(fā)明,向引AJiJ^f膽?zhàn)B基中的孢嚢的夕卜表面^f^J磁f^^立。這樣,通it^^及引可將^J^匕的孢嚢和空孢嚢殼從自孢囊H^匕出的、不含磁頓粒的自由游動的無節(jié)幼體中分離出來。這種分離可采用不同的方式進行。在^f匕步聯(lián),可將包括一個或多個^l失7的孢嚢除去裝置6放^J'J^fft培養(yǎng)基中,這樣^J^f匕的孢嚢和空孢嚢殼被該裝置6吸引并粘附到^^失7上。為了還能除去位于容器底部的未^f匕孢嚢,孵^^養(yǎng)基可自容器底部向^頂部循環(huán)。按這種方式,會有更少的^f挑嚢到達孢嚢篩中,使得當磁力分離^^夠有效時,不再需要^Jl^膽?zhàn)B基中篩去^f可,f匕的孢嚢。除了將孢嚢除去裝置6;^f^'J^f^H內(nèi),還可以在^R^1的壁上,特別是其圓錐底3上提[個或多個^l失8。按這種方式,當通過出口5排空容器1時,未^ft的孢嚢和空孢嚢殼將粘附到位于》翁失8的容器1的壁上。在^f膽?zhàn)B基內(nèi)孵育孢嚢的過程中,^^失8^t^J^去,這樣通過t的空氣能夠?qū)㈡邍案鶆虻姆植荚诜壅f養(yǎng)基中。當磁鐵8不是永久》翁失而是替代為電磁石8時,中斷電流也可代替移除電磁石8。被itf^'J^f說養(yǎng)基中的孢嚢除去裝置6的f翁失7也可以是電磁石,但為了減少電氣事故,伏i^jc久^^失。除了在^f膝器自身中磁分離^f戰(zhàn)嚢外,還可以在-^itit^置內(nèi)從無節(jié)幼體中分離^ft^嚢和空孢囊殼,其中^f膽?zhàn)BJ^皮引j;純ii^少一個^4失,這樣;^lff^嚢和^f可空孢囊殼被粘附到^l5Ui,而無節(jié)幼體不被吸引而通過磁鐵。這種i^iiit^置的實例參見圖2。其包括具有入口IO和出口11的延伸室(elongatedchamber)9。延伸室9用具有磁力^f辦岡的鋼棉12(或其它抗腐蝕的鐵磁'船帛)填滿,并且用電圏13包圍,這樣可^1伸室9中產(chǎn)生磁場?!陡讲?2因此可被磁化,這樣就形成了吸引絲磁小頓粒的^f^嚢或空孢嚢殼的^l失。由于4賄12的表面積大,化面積能保留iMff匕的孢嚢或空孢囊殼,從而iift^i戰(zhàn)置肯M皮制造的非常致密。關(guān)于這類磁分離裝置的進一步詳細描迷可參見US3676337,其&Mt為參都她入。8t點是提供在其外表面上具有有磁l^粒的孢嚢。本發(fā)明人已發(fā)現(xiàn),通過將磁,粒應用到孢嚢上,未^f匕的孢嚢和空孢嚢殼不僅育沐^kA生產(chǎn)的無節(jié)幼體中分離,而且重要的是孢嚢還能以成本效率的方弍月所需量的磁4^la&^皮。磁性顆粒能以粉末的形^用于孢ILh。^tit種情況下,當在孢IUi應用粉末時,^^*有濕潤表面(不能自由流動),以便磁性顆粒更好地附著到孢lth。所ii^末特別是可以在已經(jīng)將孢嚢M溶液中取出后、#干燥前應用到孢ith,使得它們?nèi)匀痪哂袧駶櫟谋砻?。^fe這種方式,孢嚢必須^5l干燥一次,特別是含水量低于25wt.%,>^^含水量低于20wt.%,更^it含水量低于15wt.%。因為液體懸浮、_容易應用,磁性顆粒M以液體懸浮液的形式應用到孢ILh。磁性顆粒可懸浮絲才A^劑中,例如懸浮到植物油或乙醇中,但它們優(yōu)選懸浮到水溶液介質(zhì)中形成水懸浮液。如前所述,該懸浮液特別地在干燥到上述含水量前噴霧到濕潤孢IUi,或者噴霧到干燥的自由流動的孢ILh。當4^]水懸浮液時,干孢嚢的表面變得濕潤,^a^會很快被干孢嚢吸收,這樣當,孢嚢時,它們很f夬又能自由流動。當孢狄夠干燥,并JW^]了用量足夠少的水懸浮液時,已處理的孢嚢的(內(nèi))含水量可##在25wt.%以下,M20wt.%以下,或者甚至是15wt.。/。以下。然而,當應用了水懸浮g,孢嚢可再次被干^ii^這樣的低含7JC量。這種低含水量的一扭點是在應用磁I"頓fe^,孢嚢負^皮^^并在^^前常規(guī)^^數(shù)月。將孢嚢再次干燥的另一^L點是磁小頓粒對所述孢嚢的附著明顯更強,因為當在將孢嚢引Wj^f膽?zhàn)B基之前,第一次干燥可使磁力分離更有效。除了,先成型的磁性顆粒應用于孢IUi外,磁f頓津iii可以例如以包衣的形^孢ILb^位形成。^^說明書和權(quán)利要求書中財慮了磁^#料的包衣作為應用到孢ILh的磁I^粒,因為包衣時,甚至是連續(xù)的包衣,^tM目當易碎,并且能輕易^^可^f說嚢的磁t"頓粒。如在W004/057952中所述的,孢嚢的殼能與過m鹽(特別是與過錳酸鉀)反應,在孢ILh產(chǎn)生二氧^^層。在W004/057952中,這種二氧^l^g:I^^J^去以生產(chǎn)自的孢嚢,樹娥本發(fā)明,不必去除二氧^4^,而是可用^M^產(chǎn)的無節(jié)幼體中磁分離孢嚢和孢嚢殼。所i^^'^^立可以由《^^性、亞^^'l^il者甚至是順磁I^^l^得。然而,纟jy^W"種亞《^^^H"料是M的,因為它們獲得M節(jié)幼體中分離孢嚢和孢嚢殼所需磁力的磁場更小。磁^^粒^i^包括一種或多種i^度金屬的氧化物,特別是一種或多種選自下述的氧化物Cr02(氧4b^(IV))、CoFe必(鈷鐵氧體)、CuFe204(銅鐵氧體)、Dy3Fe5012(鏑鐵磁性石榴石(dysprosiumferrogarnet))、DyFe03(鏑正鐵氧體)、ErFe03(鉺正鐵氧體(erbiumorthoferrite))、Fe5Gd30i2(4L4失磁'I^榴石(gadoliniumferrogarnet))、Fe5Ho3012(4^4it5榴石(holmiumirongarnet))、FeMnNi04(4失4N^IL化物(ironnickelmanganeseoxide))、Fe203(磁赤4MH、Fe304(繊jM^(magnetite))、Fe203(赤4stf戶)、FeLa03(鑭鐵氧體)、MgFe204(鎂鐵氧體(magnesiumferrite))、Fe2Mn04(錳鐵氧體)、Mn02(二氧化錳)、Nd207Ti2(二鈥酸釹(neodymiumdititanate))、Al。.2Fei.8Ni04(鋁鎳鐵氧體)、Fe2Ni。.504Zn。.5(鎳-鋅鐵氧體(nickel-zincferrite))、Fe2Nio.AZn。.6(鎳辦失氧體(nickelzincferrite))、62^0.804211。.2(鎳#4失氧體(11仕1£61zincferrite))、Ni0(氧^嫩(11))、Fe2Ni04(鎳鐵氧似nieke1ferrite))、Fe50i2Sm3(sarnariurnferrogarnet)、Ag。.5Fe丄a。.50i9(銀鑭鐵氧體)、Fe5012Y3U^jt5榴石)和Fe03Y(^JE鐵氧體)。所i^茲'WKi^i^包括Fe203(赤l(xiāng)5tT或磁赤4^廣)、Mn02(二氧4m)或鐵喊,艦FeA(磁鐵礦)。鑒于其強磁性,磁牽&廣A^優(yōu)選的。在^^I于孢IUi之前,用樹孢囊包衣的磁I"頓粒艦小到至少90wt。/。具有小于IOpm的^^立尺寸,*小于5jam,更他逸小于1pm,最怖&小于0.5pm。顆津雄小,對孢嚢的附著^^雖,而無需^^1并給劑。itb^卜,較小的顆粒能產(chǎn)生更穩(wěn)定的混懸液,尤其是當制備混懸紀殳有^^)穩(wěn)定劑(表面活性劑)時。在將磁,粒應用到孢嚢上^,它們可以具有較大的顆粒尺寸。當顯微#膝包被的孢嚢時,事實上可以看iL^性顆凈碌孢lt4面聚絲""^形錄大的塊/結(jié)晶。這也許可以才,4懸液回)^7j^而形皿大結(jié)晶的事實來解釋,尤其還可以才N^磁f^^立可X4目磁性吸?1形M大團/塊的事實iM^釋??赏ㄟ^研磨磁^^^'J備磁'^H"料的粉末。然后可^#末與水^^得到水性懸浮液。這種研磨方法的缺點是需要很長時間得到精細粉末,并週粒尺寸非常不均勻。而且,其難以得到非常小的顆^^寸。在實踐中,存在鐵磁流體,其可定義為鐵磁^il亞4i^茲性顆粒的穩(wěn)^^體懸浮l如在US4329241中描述的,這種纟i^5緣可通it^煤油或油酸的存在下研^W!4^L數(shù)周,直到^^立小到(10nm的數(shù)量級)足以允許懸浮艦過布朗運動穩(wěn)定而得到。然而,這種方法非常昂貴。一種較便宜的方法在于通iii&4^或4組溶液與減性物質(zhì)(例如氫氧^#1或銨溶液)^定。顆粒尺寸可通過^控制。當^)^足夠有力時,顆粒尺寸甚至可以小于10nm。為了|^^穩(wěn)、定的4失》浙*,可^^'f^津立上應用包衣混懸劑。用于制備這類45^彰錄的方';^'hM苗絲US4329241、US4906382、US5240626、US6120856、US6277298、US6068785和WO91/02083中。在才娥本發(fā)明的方法中,可以^fM這種穩(wěn)定的鐵磁^##磁^^粒應用到孢ltb。然而,已發(fā)艦可以^^1更便宜的懸浮液,即不^JfH爿可^t劑制備的懸浮液,其不穩(wěn)定而在幾分鐘內(nèi)沉降。磁f生顆粒的懸浮液可以如前所述輕易地制備通iti^紐和4組在水溶液介質(zhì)的堿性^Hf下A^,從而形^^'I"頓粒,可通過,水溶液介質(zhì)控制其尺寸??梢詫⒃搼腋∫簢婌F到孢嚢上,特別是干孢ILh。已發(fā)5J^^管事實JL^'I"^1^殳有用表面活性劑或者如WO91/02083中^Hf的特歹^M^^質(zhì)包被,但它們足夠附著到孢ILb。因此,才本發(fā)明的方法可以用便宜的材料,以相對簡單的方法進行,從而使得其能將特別是質(zhì)量較低(通過下文描述的常用分離方法而不^J^翁失測定的高分離百分比)的孢嚢轉(zhuǎn)化為有價值的產(chǎn)品。##本發(fā)明的處理事實上能容易^用作活食用生物的無節(jié)幼體中除去^^的孢嚢。應用到孢iLh的磁^頓粒的量^te^為至少0.75,^_£少1.0,更微至少1.5和最M至少2.0mg/g孢囊干物質(zhì)。試驗表明,可利用^t失有^b^吸引該量的^f說嚢,從而與無節(jié)幼體分離。應用到孢ILL的磁性顆粒的量優(yōu)選低于200,更^i^f氐于100,并JL^^it低于50mg/g孢嚢干物質(zhì)。在實踐中,當磁頓粒的量低于20,特別是甚至低于15mg/g孢囊干物質(zhì)時,孢嚢也負^皮有效地吸引。通itftt/f匕亞鐵(FeCl2.4H20)和氯化鐵(FeCl3.6H20)在氬氧化鈉(NaOH)的存在下X^目^來制備磁頓粒水懸浮液,當^^]#溶液時,可得到含有約100g/l》翁jtr的懸浮液。當噴霧和/或》'^^t種懸浮';^ij干孢紅時,懸浮^iStit被孢嚢吸收。因此,孢嚢的含7K量升高,但僅僅到有限的程度,例如從10%至20%,這^囊##^止并因此可以^]^。為了延長]i!i存,^f^W次千燥孢嚢。通過使磁'頓銜冗#除^分上清液,可容易g縮制備的懸浮'l然而,磁^^T立的^L^iJ4為低于200g/1,更^i^低于150g/1,使懸浮液能輕易噴霧到孢嚢上。應用于孢嚢上的懸浮液中磁性顆粒的濃度M地高于5g/1,更M高于IOg/1,并JL^他&高于20g/1,以限制已處理孢嚢的含水l^t加。實施例這些實驗中使用的所有試劑和化學物質(zhì)均為分析級,來自SigmaAldrich(Belgium)。^IjtT懸浮液(MS)是通過^^比例為1:2:2:10的氯^J!2鐵四水M(FeCl2.4H20)、氯化鐵六水^(FeCl3.6H20)、氳氧^^(NaOH)和水并^W'J備的。該混^形成了混懸Fe3OJ/Mi*i。如此制得的制劑含-有約0.1g的Fe3a/ml。在&^C^孢^Ji之前,將》翁j5tr粉末(鐵(n,III)氧^^,SigmaAldrich,粉末<5/am)(MP)懸浮在水中。為了用本發(fā)明的方法包被磁f頓粒,將5ml等分的不同濃復的不同包;^H"料(MS和MP)與SOg不同的孢嚢類型(孢嚢的含水量±10%)〉V給。才娥對孢嚢的目視^r查,可明顯itk^現(xiàn)陽性包衣結(jié)果。^^""^的錐體,其中^Ait^水(25g/L)孵育2g的卣蟲孢嚢以m的(不限于)24小時。錐體內(nèi)的水溫##在30匸左右,對7橫續(xù)充氣并照明。用于測定孢tA否充^^皮包被的標準是測定孢嚢和孢嚢殼相對于孢嚢、孢嚢殼、傘膜(umbrella)和已孵化無節(jié)幼體總量的數(shù)量。在下文中,該數(shù)值用"分離百分比,,表示。為測定分離百分比,將^^夾懸浮在^ft^養(yǎng)基中,其在1L錐體的錐底部起約5cni處(-20-30ral刻度)。停止充氣##^^氣管。30秒后,用位于聘化錐體底部的吸管采集30ml含有鹵蟲無節(jié)幼體、傘膜、未lff^囊和空孢囊殼的粉戰(zhàn)養(yǎng)基,并l^多回,匕錐體中。^^性物質(zhì)被集中到^4夫上的時間2分鐘后,用吸管取出另夕卜200ml醉^^養(yǎng)基并橋眵到新的容器中。接著,向新錐體中加入800mlAii^水以加至^^^為1升。Wf測定分離百分比。MS和MP對分離百分比的劑量^參Ml和2。##>^發(fā)明的方法,以MS或MP溶tof糸b^Ll(表l)和糸敗2(表2)的孢嚢^^皮不同劑量的的^li^廣。一式三份,用三賴平均數(shù)作為處理結(jié)^MH^每種處理。錄1可看到,在12該實施例中,用4.5mgFe304/g孢嚢千重的MS^^皮^fc^1的孢嚢得到最低的分離百分比4%,狄理孢嚢的分離百分比為22%。更重要的是,當*^1.5mgFe304/g孢囊時,分離百分比已^^l^f氐到14%。當j!iy^73mgFeA/g孢嚢時,分離百分比低于7%,并且當引入的MS量更大時,其##低于7%。更重要的是,當以就高于4.5mgFe3(Vg孢嚢干重^^]MS包衣孢嚢時,分離百分比不再l^f氐。在MP的情形下,分離百分比有明顯的改善,由開始的22%到最小值8%。對于批次1,當用7.8mgFe3(Vg孢囊干重包被孢囊時,達到最小分離百分比8%。更重要的是,當^tit/4.4mgFeA/g孢嚢時,分離百分比已^^ff"f^^15%。對于批次2,開始的分離百分比由8%到10%。當加入了MS和MP時,分離百分比改善為最小值1%到0%。然而,加入MP后,許多磁J^粒不能完全附著到孢嚢上而在粉^^程中被#^^鄉(xiāng)斷魄養(yǎng)基內(nèi)。表3顯示了干燥包被的孢囊對用MS包被的孢嚢的分離百分比的影響。將根據(jù)本發(fā)明的方法學包被的種次l孢囊,干^^始含水量的10%。測定兩樣品,即干燥前(20。/。含7jc量)和干;^(10%含水量)的分離百分比。顯然,通過千燥孢嚢,有可能改善了用Fe304包被的孢嚢的分離百分比。值得注意的是,與未被干燥的包衣孢嚢相比,用FeA包被并接著干燥的孢嚢被懸M^f說養(yǎng)基中的^l失吸附得地更f夬。表l:在^^L^糸汰1的孢lt^,MS和MP對分離百分比的劑量影響<table>tableseeoriginaldocumentpage13</column></row><table>做lMS12.50mg6%做lMP0.00mg22%賦lMP4.40mg15%做lMP6.00mg10%做lMP7.80mg8%表2:在^^糸欣2的孢lt^,MS和MP對分離百分比的劑J^響孢嚢^^失礦懸浮液mgFe必/g孢囊干重分離百分比掀2MS0.00mg8%做2MS7.50mg1%做2MS10.00mg1%批次2MS12.50mg1%獄2MP0.00mg10%賦2MP5.80mg1%做2MP6,10mg1%糸汰2MP7.30mg0%做2MP7.60mg1%表3:干,用MS&^皮的批次1的孢嚢分離百分比的影響孢嚢》翁失礦懸浮液邁gFe3(X/g孢嚢分離含水量糸汰lMS0mg22%10%做lMS10mg6%20%糸議lMS10mg0.4%10%權(quán)利要求1、一種處理孢囊特別是鹵蟲孢囊的方法,在液體孵化培養(yǎng)基中孵育所述孢囊來生產(chǎn)活食用生物,特征在于所述方法包括將磁性顆粒應用到孢囊上的步驟,使得特別地在所述液體孵化培養(yǎng)基中能夠磁吸引所述孢囊。2、^^似'J^求1的方法,特棘于將所ii^'l"^^立以液體懸浮液的形式,特別是以水性懸浮液的形式應用到孢嚢上,M地當孢嚢具有使其能自由流動的干表面時。3、才M^5U'J^"求1的方法,特征在于所ii^I^粒以粉末形式應用到孢嚢上。4、才M^5U']^求1-3中^-項的方法,特絲于在將所i^^斗頓粒應用到孢囊后,孢嚢的含水量為低于25wt.%,優(yōu)選低于20wt.W,或者將其干;^^^JC量為4氐于25wt.%,伏選低于20wt.%,并且更^^i^低于15wt.%。5、才N^5L利要求1-4中^-"項的方法,特絲于在應用到孢嚢上之前,至少90wt.。/。的所述/齒h^^立具有的;C寸小于10nm,優(yōu)&小于5jum,更M小于liam,并JJlM小于0.5iam。6、才N^5U'J要求1-5中任一項的方法,特征在于所i4^'^^la包:fe4^性、亞鐵磁^^順磁^N"料,磁f生顆粒im^包括一種或多種itJ度金屬的氧化物,特別是Fe203(赤^riU^U廣)、Mn02(二氧^^)或鐵縫,艦Fe3047、才前述^-項擬']要求的方法可得到的孢嚢,特別是鹵蟲孢囊,特征在于所述孢嚢具有應用到其外表面上的磁,粒。8、才Nt;M'J^求7的孢嚢,特;^于所述孢嚢包含所i4^'l"^^立的量為至少0.75,M至少1.0,更^it^少1.5,并Jj^!i^少2.0mg/g孢嚢干物質(zhì)。9、才N^權(quán)利要求7的孢嚢,特棘于所ii^'j^i^包^4失磁性、亞l5Ut性或順磁')±#料,磁'1"頓粒^^^包括一種或多種過渡金屬的氧化物,特別是Fe203(赤財i^^戶)、Mn02(二氧條)或鐵雖,艦FeA(繊妖)。10、一種由才^t權(quán)矛J^求7-9中^"^項的孢囊開始生產(chǎn)自由游動的活食用生物的方法,所述方法包括在^f戰(zhàn)養(yǎng)基中孵育孢嚢,使#^分孢嚢孵育^#放自由游動的活食用生物的步驟,以a^M^f^嚢中分離自由游動的活食用生物的步驟,特;^于在孵育步^,通it^及引將磁,粒應用到其夕卜表面離。11、才娥^^要求io的方法,特棘于在^ff^ll中孵育孢嚢,弄t"至少一個^^失以從自由游動的活食用生物中分離^Jiff匕的孢嚢。12、才^^U,J要求10或11的方法,特棘于在具有壁的^H^中觶育孢嚢,所述壁具有至少一個》翁失以》浙及引^f匕的孢嚢JJ^t。13、才^t;K^j要求10-12中^fP項的方法,特棘于在孵育步驟^,從^f^器中除去至少一^分含有自由游動的活食用生物和未^f^fe嚢的將^Jt養(yǎng)基,并且沿著至少一個^4失引導,使得^f匕的孢囊粘附到所i^4AJi,而自由游動的活食用生物通it/斤i^對失。全文摘要在孵化培養(yǎng)基中孵育孢囊,特別是鹵蟲孢囊,使得部分孢囊孵化并釋放自由游動的活食用生物。接著,將自由游動的活食用生物與未孵化的孢囊分離。在孵育孢囊之前,將磁性顆粒應用到孢囊上,使得這些孢囊特別是在液體孵化培養(yǎng)基中能夠被磁吸引。這樣可以將用磁性顆粒包衣的未孵化孢囊和空孢囊殼,與磁性顆粒沒有應用到其外表面上的自由游動的活食用生物有效分離。本發(fā)明還涉及包衣的孢囊。文檔編號A01K67/033GK101543195SQ200910138758公開日2009年9月30日申請日期2009年2月13日優(yōu)先權(quán)日2008年2月13日發(fā)明者E·M·J·納森斯-??錉柼?G·羅姆鮑特,紐溫豪弗L·A·J·萬申請人:Inve技術(shù)股份有限公司
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