專利名稱：：一種耐低溫大黃魚選育的方法
技術(shù)領(lǐng)域：
：本發(fā)明屬于海水水產(chǎn)養(yǎng)殖領(lǐng)域，尤其涉及一種耐低溫大黃魚選育及鑒定的方法。
背景技術(shù)：
：大黃魚是中國近海主要經(jīng)濟(jì)魚類，大黃魚為暖溫性近海集群洄游魚類，主要棲息于80米以內(nèi)的沿岸和近海水域的中下層。因?yàn)榇簏S魚為暖溫性近海集群洄游魚類，海洋溫度的變化限制了近海人工養(yǎng)殖。大黃魚的培育、優(yōu)選方法一直是本領(lǐng)域的主要研究方向，如一篇中國專利號(hào)為CN200510060346.1的發(fā)明公開了一種人工培育的大黃魚及其培育方法，它包括以下步驟本發(fā)明公開了一種人工培育的大黃魚及其培育方法，在養(yǎng)殖的過程中增加黃魚親本選育，采用群體選育并結(jié)合分子標(biāo)記輔助選育的技術(shù)，快速選育出岱衢族大黃魚優(yōu)良品系，由此培育的大黃魚具有體型較好，生長(zhǎng)速度較快，品質(zhì)較佳，成活率較高的特點(diǎn)，所培育的大黃魚的體型參數(shù)為尾柄長(zhǎng)/尾柄高為3.6，體長(zhǎng)/體高為3.9，它的生化組份為蛋白質(zhì)含量18.34%，肌肉中總氨基酸含量為152.0mg/g，含脂量為2.89%,血液DNA分子具有871bp的特異性標(biāo)記，鰭條同工酶具有一個(gè)蘋果酸酶(ME)特異性標(biāo)記。但是，目前沒有任何文獻(xiàn)指出了關(guān)于大黃魚在較冷的海水溫度下養(yǎng)殖、選育和鑒定的方法。
發(fā)明內(nèi)容本發(fā)明主要是解決目前多數(shù)大黃魚不能適應(yīng)低溫養(yǎng)殖的現(xiàn)狀，選取自然能耐受低溫的大黃魚個(gè)體，通過優(yōu)選培育，得到耐低溫大黃魚選育方法，同時(shí)提供了耐低溫大黃魚的鑒定方法。本發(fā)明的上述技術(shù)問題主要是通過下述技術(shù)方案得以解決的耐低溫大黃魚選育的方法，其步驟包括(A)優(yōu)選耐低溫大黃魚選取普通海域成長(zhǎng)、體格健康的成年大黃魚50尾以上，在4。C8。C的低溫條件下進(jìn)行養(yǎng)殖，養(yǎng)殖時(shí)間為5天以上，直到少部分存活；當(dāng)只有雄性大黃魚存活或只有雌性大黃魚存活時(shí)，需重新進(jìn)行本步驟，直到雄性大黃魚與雌性大黃魚均有存活；(B)培育耐低溫大黃魚選取能夠耐受低溫存活的大黃魚進(jìn)行人工繁育，采用保溫催產(chǎn)的方法得到受精卵，然后對(duì)受精卵進(jìn)行人工孵化，魚種在固定場(chǎng)所人工養(yǎng)成，得到耐低溫大黃魚F1代；(C)將耐低溫大黃魚Fl代作為親魚再次進(jìn)行步驟(A)和步驟(B)，得到耐低溫大黃魚F2代；將耐低溫大黃魚F2代作為親魚再次進(jìn)行步驟(A)和步驟(B)，得到耐低溫大黃魚F3代；依此步驟重復(fù)得到耐低溫大黃魚Fn代，n》3，得到耐低溫大黃魚品種。上述耐低溫大黃魚選育的方法，作為優(yōu)選，所述的步驟(A)可分為以下三步(1)先將選取的普通大黃魚養(yǎng)殖在正常溫度狀態(tài)下，然后采用人工手段對(duì)養(yǎng)殖池水進(jìn)行降溫，降溫幅度為0.5'C/天2'C/天，直至溫度為4'C8。C時(shí)止；(2)將大黃魚養(yǎng)殖在4'C8'C的水溫狀態(tài)下，并且維持水溫在同一數(shù)值養(yǎng)殖大黃魚8天12天；(3)采用人工手段對(duì)養(yǎng)殖池水進(jìn)行升溫，升溫幅度為0.5TV天2'C/天，至正常養(yǎng)殖池水溫度恢復(fù)為正常養(yǎng)殖狀態(tài)時(shí)止，將存活的大黃魚作為7步驟(B)對(duì)象。上述耐低溫大黃魚選育的方法，作為優(yōu)選，所述的步驟(A)在選育耐低溫大黃魚時(shí)，需要及時(shí)去除死亡的大黃魚，保持養(yǎng)殖水域的清潔。上述耐低溫大黃魚選育的方法，作為優(yōu)選，所述的步驟(A)的降溫方法為在養(yǎng)殖池中加入冰塊或干冰。上述耐低溫大黃魚選育的方法，作為優(yōu)選，所述的步驟(A)中選取的大黃魚為普通海域人工養(yǎng)殖的大黃魚，經(jīng)過步驟(A)的優(yōu)選，當(dāng)存活的大黃魚少于10條時(shí)，需重新進(jìn)行步驟(A)，直到存活的大黃魚數(shù)量大于30條。上述耐低溫大黃魚選育的方法，作為優(yōu)選，所述的步驟(B)可分為以下四步(1)將步驟(A)結(jié)束后存活的大黃魚作為親魚，控制親魚培育水溫在2(TC-2rC;然后用促黃體素釋放激素LRH-A3對(duì)親魚進(jìn)行催產(chǎn)；(2)進(jìn)行受精卵的人工孵化，收集的受精卵在孵化之前進(jìn)行分離，即讓其在塑料桶中靜置十幾分鐘，上浮卵一般為好卵,沉底的都是次卵，，魚卵放入孵化桶中孵化，水溫控制20.521'C，連續(xù)充氣，充氣量盒大，以呈翻滾狀為好，光照控制在5001x之內(nèi)，要特別注意孵化桶的水質(zhì)，一般經(jīng)過2931h孵化，魚卵破膜孵出仔魚，一旦仔魚孵出，應(yīng)及時(shí)通過虹吸把仔魚移送到育苗池進(jìn)行培育；(3)仔魚培育利用對(duì)蝦育苗池育苗室進(jìn)行大黃魚育苗，單口水泥池規(guī)格為3040m2，水池深1.4m，長(zhǎng)方形，經(jīng)漂白粉消毒，加海水至L2m，育苗用水經(jīng)砂濾池過濾，再經(jīng)黑暗沉淀進(jìn)人預(yù)熱池，仔魚培育密度控制在l萬2萬尾/m3，仔魚進(jìn)入培養(yǎng)階段時(shí)，剛開始換水，每日換2次，一般為上午7:00和下午6:00，換水量根據(jù)分布密度等具體情況而定，一般前期換水量為1/102/5，后期加大換水量為1/24/5，根據(jù)需要測(cè)量鹽度、氨氮，以換水調(diào)節(jié)水質(zhì)，仔魚培育期間，用1500W的電熱棒調(diào)控水溫，使水溫保持在2224'C之間，每天定時(shí)測(cè)量水溫，使水溫保持在最佳適溫范圍內(nèi)，在出苗前23d逐漸利用自然降溫，將水溫降至與自然水溫相同；鹽度為20%。25%。；散氣石布設(shè)O.20.3個(gè)/m2，連續(xù)充氣，仔魚培育前期，充氣量以水面呈微波為好，隨仔魚發(fā)育逐漸增大充氣量；仔魚5日齡開始第一次吸污，以后仔魚期保持每3d吸污一次，稚魚期每2d—次，幼魚期每日一次，仔魚期培育每隔15d左右翻池一次，餌料投喂仔魚出膜2日齡時(shí)開始投喂輪蟲，以后池內(nèi)輪蟲保持一定的密度27日齡，輪蟲密度為l3個(gè)/mL;710日齡后，改投喂鹵蟲無節(jié)幼體為主，水體中鹵蟲密度保持在35個(gè)/mL，15日齡后，開始改投橈足類，投喂量為l個(gè)/mL,25日齡后加投少量魚糜，用量根據(jù)魚苗的攝食及殘餌多少而定；(4)苗種養(yǎng)成采用深水網(wǎng)箱進(jìn)行大黃魚的苗種養(yǎng)成，選擇水質(zhì)肥沃，鹽度范圍為24.834.5;pH為7.858.35;D0在4mg/L以上的海區(qū)，選擇尾重50g以上的大黃魚進(jìn)行網(wǎng)箱養(yǎng)殖，放養(yǎng)密度20尾/m3，每天上午7:00和下午6:00投喂2次，日投喂量占魚體重的6%8%(以鮮嵙計(jì)算)，加強(qiáng)魚病和網(wǎng)箱的管理，得到存活的健康的大黃魚即為耐低溫大黃魚。上述耐低溫大黃魚選育的方法，作為優(yōu)選，所述的步驟(C)中n的值為3，耐低溫大黃魚F3代在4'C8'C的低溫條件下養(yǎng)殖的存活率為70%90%。以上方法得到的耐低溫大黃魚鑒定的方法，主要是進(jìn)行RAPD研究和蛋白質(zhì)分析，區(qū)分出耐低溫大黃魚新品系，其步驟可分為以下四步1)觀察低溫環(huán)境下正常存活的新特征，如活動(dòng)、進(jìn)食、生殖情況，以區(qū)別原種大黃魚。2)分別提取耐低溫大黃魚和原種大黃魚的總DNA，并以10堿基隨機(jī)引物對(duì)這些總DNA進(jìn)行隨機(jī)擴(kuò)增多態(tài)DNA研究比較；10堿基隨機(jī)引物見表1。選取20條隨機(jī)引物對(duì)耐低溫大黃魚進(jìn)行RAPD分析，從中篩選出可得到穩(wěn)定擴(kuò)增產(chǎn)物的多態(tài)性引物。耐低溫的大黃魚RAPD分析結(jié)果顯示特異性條帶的產(chǎn)生，而普通大黃魚則不具備相應(yīng)條帶，顯示特異性的耐低溫分子標(biāo)記。3)提取耐低溫大黃魚和原種大黃魚的總蛋白質(zhì)進(jìn)行SDS-聚丙烯酰胺凝膠電泳，電泳結(jié)束后采用考馬斯亮藍(lán)染色法用考馬斯亮藍(lán)R250染色，掃描記錄結(jié)果。比較兩者的蛋白質(zhì)電泳圖譜，耐低溫大黃魚由于基因表達(dá)的差異，可表達(dá)出大量的耐低溫蛋白，而普通大黃魚則產(chǎn)生的耐低溫蛋白數(shù)量少，電泳圖譜的結(jié)果是耐低溫的大黃魚具備特異性的條帶或某些條帶顏色較普通大黃魚深。4)根據(jù)低溫環(huán)境下正常存活的新特征和RAPD研究及蛋白質(zhì)分析結(jié)果，確認(rèn)獲得耐低溫大黃魚新品系。新的耐低溫大黃魚可找到特異性的耐低溫分子標(biāo)記，用RAPD技術(shù)可明顯找到與普通大黃魚的差異，蛋白質(zhì)分析結(jié)果也能找到特異性表達(dá)的蛋白或表達(dá)量高的耐低溫蛋白。結(jié)果顯示可選育出耐低蕰的大黃魚并可通過分子生物學(xué)和蛋白質(zhì)分析羊段進(jìn)行驗(yàn)證。表lIO堿基隨機(jī)引物<table>tableseeoriginaldocumentpage10</column></row><table>10堿基隨機(jī)引物為上海生工的s系列隨機(jī)引物DNA研究比較結(jié)果是耐低溫大黃魚RAPD分析圖譜顯示特異性的條帶，蛋白質(zhì)電泳圖也顯示有特異性的蛋白表達(dá)。因此，本發(fā)明具有以下優(yōu)點(diǎn)用本方法選育的大黃魚能夠較好的耐受低溫環(huán)境，具有廣闊的產(chǎn)業(yè)化前景。具體實(shí)施例方式下面通過實(shí)施例，對(duì)本發(fā)明的技術(shù)方案作進(jìn)一步具體的說明。實(shí)施例1:耐低溫大黃魚選育的方法的主要步驟包括A、B、C三步(A)優(yōu)選耐低溫大黃魚選取普通海域成長(zhǎng)、體格健康的成年大黃魚50尾以上，在4。C8。C的低溫條件下進(jìn)行養(yǎng)殖，養(yǎng)殖時(shí)間為5天以上，直到少部分存活；當(dāng)只有雄性大黃魚存活或只有雌性大黃魚存活時(shí)，需重新進(jìn)行本步驟，直到雄性大黃魚與雌性大黃魚均有存活；在選育耐低溫大黃魚時(shí)，需要及時(shí)去除死亡的大黃魚，保持養(yǎng)殖水域的清潔。降溫方法為在養(yǎng)殖池中加入冰塊或干冰。選取的大黃魚為普通海域人工養(yǎng)殖的大黃魚，經(jīng)過步驟(A)的優(yōu)選，當(dāng)存活的大黃魚少于10條時(shí)，需重新進(jìn)行步驟(A)，直到存活的大黃魚數(shù)量大于30條。步驟(A)可分為以下三步(1)先將選取的普通大黃魚養(yǎng)殖在正常溫度狀態(tài)下，然后采用人工手段對(duì)養(yǎng)殖池水進(jìn)行降溫，降溫幅度為0.5。C/天2。C/天，直至溫度為4°C8'C時(shí)止；(2)將大黃魚養(yǎng)殖在4'C8'C的水溫狀態(tài)下，并且維持水溫在同一數(shù)值養(yǎng)殖大黃魚8天12天；(3)采用人工手段對(duì)養(yǎng)殖池水進(jìn)行升溫，升溫幅度為0.5TV天2'C/天，至正常養(yǎng)殖池水溫度恢復(fù)為正常養(yǎng)殖狀態(tài)時(shí)止，將存活的大黃魚作為步驟(B)對(duì)象。(B)培育耐低溫大黃魚選取能夠耐受低溫存活的大黃魚進(jìn)行人工繁育，采用保溫催產(chǎn)的方法得到受精卵，然后對(duì)受精卵進(jìn)行人工孵化，魚種在固定場(chǎng)所人工養(yǎng)成，得到耐低溫大黃魚F1代；步驟(B)可分為以下四步(1)將步驟(A)結(jié)束后存活的大黃魚作為親魚，控制親魚培育水溫在20°C-21°C;然后用促黃體素釋放激素LRH-A3對(duì)親魚進(jìn)行催產(chǎn)；(2)進(jìn)行受精卵的人工孵化，收集的受精卵在孵化之前進(jìn)行分離，即讓其在塑料桶中靜置十幾分鐘，上浮卵一般為好卵,沉底的都是次卵，，魚卵放入孵化桶中孵化，水溫控制20.521t:,連續(xù)充氣，充氣量宜大，以呈翻滾狀為好，光照控制在5001x之內(nèi)，要特別注意孵化桶的水質(zhì)，一般經(jīng)過2931h孵化，魚卵破膜孵出仔魚，一旦仔魚孵出，應(yīng)及時(shí)通過虹吸把仔魚移送到育苗池進(jìn)行培育；(3)仔魚培育利用對(duì)蝦育苗池育苗室進(jìn)行大黃魚育苗，單口水泥池規(guī)格為3040m2，水池深1.4ra，長(zhǎng)方形，經(jīng)漂白粉消毒，加海水至l.2m，育苗用水經(jīng)砂濾池過濾，再經(jīng)黑暗沉淀進(jìn)人預(yù)熱池，仔魚培育密度控制在l萬2萬尾/m3，仔魚進(jìn)入培養(yǎng)階段時(shí)，剛開始換水，每日換2次，一般為上午7:00和下午6:00，換水量根據(jù)分布密度等具體情況而定，一般前期換水量為1/102/5，后期加大換水量為1/24/5，根據(jù)需要測(cè)量鹽度、氨氮，以換水調(diào)節(jié)水質(zhì)，仔魚培育期間，用1500W的電熱棒調(diào)控水溫，使水溫保持在2224'C之間，每天定時(shí)測(cè)量水溫，使水溫保持在最佳適溫范圍內(nèi)，在出苗前23d逐漸利用自然降溫，將水溫降至與自然水溫相同；鹽度為20%。25%。；散氣石布設(shè)O.20.3個(gè)/m2，連續(xù)充氣，仔魚培育前期，充氣量以水面呈微波為好，隨仔魚發(fā)育逐漸增大充氣量；仔魚5日齡開始第一次吸污，以后仔魚期保持每3d吸污一次，稚魚期每2d—次，幼魚期每日一次，仔魚期培育每隔15d左右翻池一次，餌料投喂仔魚出膜2日齡時(shí)開始投喂輪蟲，以后池內(nèi)輪蟲保持一定的密度27日齡，輪蟲密度為l3個(gè)/mL;710日齡后，改投喂鹵蟲無節(jié)幼體為主，水體中鹵蟲密度保持在35個(gè)/mL，15日齡后，開始改投橈足類，投喂量為l個(gè)/mL，25日齡后加投少量魚糜，用量根據(jù)魚苗的攝食及殘餌多少而定；(4)苗種養(yǎng)成采用深水網(wǎng)箱進(jìn)行大黃魚的苗種養(yǎng)成，選擇水質(zhì)肥沃，鹽度范圍為24.834.5;pH為7.858.35;D0在4mg/L以上的海區(qū)，選擇尾重50g以上的大黃魚進(jìn)行網(wǎng)箱養(yǎng)殖，放養(yǎng)密度20尾/m3，每天上午7:00和下午6:00投喂2次，日投喂量占魚體重的6%8%(以鮮料計(jì)算)，加強(qiáng)魚病和網(wǎng)箱的管理，得到存活的健康的大黃魚即為耐低溫大黃魚。(C)將耐低溫大黃魚Fl代作為親魚再次進(jìn)行步驟(A)和步驟(B)，得到耐低溫大黃魚F2代；將耐低溫大黃魚F2代作為親魚再次進(jìn)行步驟(A)和步驟(B)，得到耐低溫大黃魚F3代。經(jīng)過飼養(yǎng)觀測(cè)，耐低溫大黃魚F3代在4'C8'C的低溫條件下養(yǎng)殖的存活率為70%90%。本發(fā)明中所描述的具體實(shí)施例僅僅是對(duì)本發(fā)明精神作舉例說明。本發(fā)明所屬
技術(shù)領(lǐng)域：
的技術(shù)人員可以對(duì)所描述的具體實(shí)施例做各種各樣的修改或補(bǔ)充或采用類似的方式替代，但并不會(huì)偏離本發(fā)明的精神或者超越所附權(quán)利要求書所定義的范圍。盡管對(duì)本發(fā)明已作出了詳細(xì)的說明并引證了一些具體實(shí)例，但是對(duì)本領(lǐng)域熟練技術(shù)人員來說，只要不離開本發(fā)明的精神和范圍可作各種變化或修正是顯然的。序列表<110>浙江海洋學(xué)院<120>—種耐低溫大黃魚選育的方法<130><140>CN200910095301.6<141>2009-01-05<160>20<170>Patentlnversion3.3<210>1<211>10<212>DNA<213>S421<400>1CTCACGTTGG10<210>2<211>10<212>DNA<213>S422<400>2ACCAGGGGCA10<210>3<211>10<212>DNA<213>S423<權(quán)>3GGTACTCCCC10<210>4<211>10<212>DNA<213>S424<400>4GACCGACCCA10<210>5<211>10<212>DNA<213>S425<400>5ACTGAACGCC10<210>6<211>10<212>DNA<213>S426<400>6GAGACGCACA10<210>7<211>10<212>DNA<213>S427<400>7CAGCCCAGAG10<210>8<211>10<212>DNA<213>S428<400>8ACCTCAGCTC10<210>9<211>10<212>DNA<213>S429<400>9TGCCGGCTTG10<210>10<211>10<212>DNA<213>S430<400>10ACAACTGGGG10<210>11<211>10<212>DNA<213>S431<400>11TCGCCGCAAA10<210>12<211>10<212>DNA<213>S432<400>12CACAGACACC10<210>13<211>10<212>DNA<213>S433<400>13AGCGTCACTC10<210>14<211>10<212>DNA<213>S434<400>14TCGTGCGGGT10<210>15<211>10<212>DNA<213>S435<400>15CAGCGACTGT10<210>16<211>10<212>DNA<213>S436<400>16AAGCGACCTG10<210>17<211>10<212>DNA<213>S437<400>17CATTGGGGAG10<210>18<211>10<212>DNA<213>S438<400>18GGTGAGGTCA10<210>19<211>10<212>DNA<213>S439<秦>19GTCCGTACTG10<210>20<211>10<212>DNA<213>S440<400>20GGTGCTCCGT10權(quán)利要求1.一種耐低溫大黃魚選育的方法，其步驟包括(A)優(yōu)選耐低溫大黃魚選取普通海域成長(zhǎng)、體格健康的成年大黃魚50尾以上，在4℃～8℃的低溫條件下進(jìn)行養(yǎng)殖，養(yǎng)殖時(shí)間為5天以上，直到少部分存活；當(dāng)只有雄性大黃魚存活或只有雌性大黃魚存活時(shí)，需重新進(jìn)行本步驟，直到雄性大黃魚與雌性大黃魚均有存活；(B)培育耐低溫大黃魚選取能夠耐受低溫存活的大黃魚進(jìn)行人工繁育，采用保溫催產(chǎn)的方法得到受精卵，然后對(duì)受精卵進(jìn)行人工孵化，魚種在固定場(chǎng)所人工養(yǎng)成，得到耐低溫大黃魚F1代；(C)將耐低溫大黃魚F1代作為親魚再次進(jìn)行步驟(A)和步驟(B)，得到耐低溫大黃魚F2代；將耐低溫大黃魚F2代作為親魚再次進(jìn)行步驟(A)和步驟(B)，得到耐低溫大黃魚F3代；依此步驟重復(fù)得到耐低溫大黃魚Fn代，n≥3。2.根據(jù)權(quán)利要求1所述的耐低溫大黃魚選育的方法，其特征在于所述的步驟(A)可分為以下三步(1)先將選取的普通大黃魚養(yǎng)殖在正常溫度狀態(tài)下，然后采用人工手段對(duì)養(yǎng)殖池水進(jìn)行降溫，降溫幅度為0.5。C/天2'C/天，直至溫度為4°C8'C時(shí)止；(2)將大黃魚養(yǎng)殖在4t:8'C的水溫狀態(tài)下，并且維持水溫在同一數(shù)值養(yǎng)殖大黃魚8天12天；(3)采用人工手段對(duì)養(yǎng)殖池水進(jìn)行升溫，升溫幅度為0.5'C/天2'C/天，至正常養(yǎng)殖池水溫度恢復(fù)為正常養(yǎng)殖狀態(tài)時(shí)止，將存活的大黃魚作為步驟(B)對(duì)象。3.根據(jù)權(quán)利要求1或2所述的耐低溫大黃魚選育的方法，其特征在于所述的步驟(A)在選育耐低溫大黃魚時(shí)，需要及時(shí)去除死亡的大黃魚，保持養(yǎng)殖水域的清潔。4.根據(jù)權(quán)利要求1或2所述的耐低溫大黃魚選育的方法，其特征在于所述的步驟(A)的降溫方法為在養(yǎng)殖池中加入冰塊或干冰。5.根據(jù)權(quán)利要求1或2所述的耐低溫大黃魚選育的方法，其特征在于所述的步驟(A)中選取的大黃魚為普通海域人工養(yǎng)殖的大黃魚，經(jīng)過步驟(A)的優(yōu)選，當(dāng)存活的大黃魚少于10條時(shí)，需重新進(jìn)行步驟(A)，直到存活的大黃魚數(shù)量大于30條。6.根據(jù)權(quán)利要求1所述的耐低溫大黃魚選育的方法，其特征在于所述的步驟(B)可分為以下四步(1)將步驟(A)結(jié)束后存活的大黃魚作為親魚，控制親魚培育水溫在2(TC-2rC;然后用促黃體素釋放激素LRH-A3對(duì)親魚進(jìn)行催產(chǎn)；(2)進(jìn)行受精卵的人工孵化，收集的受精卵在孵化之前進(jìn)行分離，即讓其在塑料桶中靜置十幾分鐘，上浮卵一般為好卵，沉底的都是次卵，，魚卵放入孵化桶中孵化，水溫控制20.521'C，連續(xù)充氣，充氣量宜大，以呈翻滾狀為好，光照控制在5001x之內(nèi)，要特別注意孵化桶的水質(zhì)，一般經(jīng)過2931h孵化，魚卵破膜孵出仔魚，一旦仔魚孵出，應(yīng)及時(shí)通過虹吸把仔魚移送到育苗池進(jìn)行培育；(3)仔魚培育利用對(duì)蝦育苗池育苗室進(jìn)行大黃魚育苗，單口水泥池規(guī)格為3040m2，水池深1.4m，長(zhǎng)方形，經(jīng)漂白粉消毒，加海水至l.2m,育苗用水經(jīng)砂濾池過濾，再經(jīng)黑暗沉淀進(jìn)人預(yù)熱池，仔魚培育密度控制在l萬2萬尾/m3，仔魚進(jìn)入培養(yǎng)階段時(shí)，剛開始換水，每日換2次，一般為上午7:00和下午6:00，換水量根據(jù)分布密度等具體情況而定，一般前期換水量為1/102/5，后期加大換水量為1/24/5，根據(jù)需要測(cè)量鹽度、氨氮，以換水調(diào)節(jié)水質(zhì)，仔魚培育期間，用1500W的電熱棒調(diào)控水溫，使水溫保持在2224'C之間，每天定時(shí)測(cè)量水溫，使水溫保持在最佳適溫范圍內(nèi)，在出苗前23d逐漸利用自然降溫，將水溫降至與自然水溫相同；鹽度為20%。25%。；散氣石布設(shè)O.20.3個(gè)/m2，連續(xù)充氣，仔魚培育前期，充氣量以水面呈微波為好，隨仔魚發(fā)育逐漸增大充氣量；仔魚5日齡開始第一次吸污，以后仔魚期保持每3d吸污一次，稚魚期每2d—次，幼魚期每日一次，仔魚期培育每隔15d左右翻池一次，餌料投喂仔魚出膜2日齡時(shí)開始投喂輪蟲，以后池內(nèi)輪蟲保持一定的密度27日齡，輪蟲密度為l3個(gè)/mL;710日齡后，改投喂鹵蟲無節(jié)幼體為主，水體中鹵蟲密度保持在35個(gè)/mL，15日齡后，開始改投撓足類，投喂量為l個(gè)/mL，25日齡后加投少量魚糜，用量根據(jù)魚苗的攝食及殘餌多少而定；(4)苗種養(yǎng)成采用深水網(wǎng)箱進(jìn)行大黃魚的苗種養(yǎng)成，選擇水質(zhì)肥沃，鹽度范圍為24.834.5;pH為7.858.35;D0在4mg/L以上的海區(qū)，選擇尾重50g以上的大黃魚進(jìn)行網(wǎng)箱養(yǎng)殖，放養(yǎng)密度20尾/m3，每天上午7:00和下午6:00投喂2次，日投喂量占魚體重的6%8%(以鮮料計(jì)算)，加強(qiáng)魚病和網(wǎng)箱的管理，得到存活的健康的大黃魚即為耐低溫大黃魚。7.根據(jù)權(quán)利要求1或2或6所述的耐低溫大黃魚選育的方法，其特征在于:所述的步驟(C)中n的值為3，耐低溫大黃魚F3代在4'C8'C的低溫條件下養(yǎng)殖的存活率為70%90%t全文摘要本發(fā)明屬于海水水產(chǎn)養(yǎng)殖領(lǐng)域，尤其涉及一種耐低溫大黃魚選育及鑒定的方法。本發(fā)明主要是解決目前多數(shù)大黃魚不能適應(yīng)低溫養(yǎng)殖的現(xiàn)狀，選取自然能耐受低溫的大黃魚個(gè)體，通過優(yōu)選培育，得到耐低溫大黃魚選育方法，同時(shí)提供了耐低溫大黃魚的鑒定方法。本發(fā)明采用多代選育和培養(yǎng)，并通過觀察鑒別與DNA鑒別，得到了一種耐低溫大黃魚。文檔編號(hào)A01K61/00GK101606502SQ20091009530公開日2009年12月23日申請(qǐng)日期2009年1月5日優(yōu)先權(quán)日2009年1月5日發(fā)明者吳常文,常抗美,張建設(shè),黃振遠(yuǎn)申請(qǐng)人:浙江海洋學(xué)院