專利名稱：苧麻莖尖脫毒成苗及快繁技術(shù)的制作方法
技術(shù)領(lǐng)域：
1、苧麻大田生產(chǎn)上，特別是對于苧麻產(chǎn)業(yè)化生產(chǎn)可以利用此技術(shù)，快速有效提供大量無病菌苗。
2、應(yīng)用此技術(shù)可培養(yǎng)出無毒苗，定期更新資源圃中的病毒感染材料，有利于苧麻資源圃保存和對外種質(zhì)的交流。因此能使苧麻種質(zhì)資源得到更好的保存和利用。

背景技術(shù)：
苧麻是我國的特產(chǎn)和傳統(tǒng)出口創(chuàng)匯紡織原料。由于苧麻屬于雜合體，遺傳基礎(chǔ)復(fù)雜，用種子繁殖必然會(huì)產(chǎn)生性狀分離，以致影響產(chǎn)量和品質(zhì)。因此，在生產(chǎn)和種質(zhì)資源保存利用上，長期采用無性繁殖以保持種質(zhì)純度。但在長期無性繁殖過程中，苧麻花葉病病毒可通過營養(yǎng)體進(jìn)行傳遞，逐代積累，而到目前為止，采用藥劑或農(nóng)業(yè)栽培等措施對此病均防效甚微。因此，苧麻花葉病的危害呈日漸嚴(yán)重的趨勢，對苧麻種質(zhì)資源保存構(gòu)成嚴(yán)重威脅，在生產(chǎn)上造成的損失也日益加重。據(jù)專家對資源和生產(chǎn)上調(diào)查情況表明目前，近2000份苧麻種質(zhì)資源中，真正表現(xiàn)抗病的種質(zhì)僅20余份，僅占資源總數(shù)的1％多，一些原來癥狀較輕的品種出現(xiàn)加重的勢頭。如任其繼續(xù)發(fā)展，后果將不堪設(shè)想，從苧麻大田生產(chǎn)看形勢也不容樂觀，90年代中期專家們的調(diào)查指出苧麻花葉病已由老麻區(qū)向新麻區(qū)發(fā)展，發(fā)病程度呈加重趨勢，一些丘塊發(fā)病率高達(dá)100％，造成減產(chǎn)30-60％，降低纖維支數(shù)300支以上，因此在生產(chǎn)上對纖維產(chǎn)量及品質(zhì)的影響也不容忽視。
目前，國內(nèi)外解除無性繁殖作物病毒危害見效最快的措施要數(shù)莖尖脫毒組培技術(shù)，該技術(shù)研究始于二十世紀(jì)80年代，到目前已有600多種植物能借助組織培養(yǎng)手段進(jìn)行脫毒快繁，成為農(nóng)業(yè)中應(yīng)用最為廣泛的生物技術(shù)之一。但苧麻莖尖脫毒組培及快繁技術(shù)研究，國內(nèi)外未見報(bào)道。鑒于苧麻生產(chǎn)和種質(zhì)資源保存面臨如此嚴(yán)峻的形勢，我們開展了苧麻莖尖成苗與快繁技術(shù)的研究，并取得成功。這項(xiàng)技術(shù)研究成功，將為苧麻莖尖脫毒組培打下基礎(chǔ)，使我國的苧麻種質(zhì)資源保存出現(xiàn)新的轉(zhuǎn)機(jī)，并可為種質(zhì)創(chuàng)新中轉(zhuǎn)基因受體系統(tǒng)的建立，以及實(shí)現(xiàn)苧麻脫毒苗產(chǎn)業(yè)化奠定良好的基礎(chǔ)。


發(fā)明內(nèi)容
1、莖尖的剝?nèi)∫允覂?nèi)無菌生根試管苗為對象，不是直接從大田取莖尖，有助于減少污染和解決培養(yǎng)過程中的褐化問題；同時(shí)，不受時(shí)間、季氣和氣候的影響。
2、莖尖培養(yǎng)方式以脫脂棉作支撐物采用液體培養(yǎng)方式，有利于營養(yǎng)成分的流動(dòng)，同時(shí)也可防褐化。
3、培養(yǎng)過程中，莖尖大小為3mm以下帶1-2個(gè)葉原基為宜。
4、5個(gè)培養(yǎng)基配方。

具體實(shí)施例方式 室外取材(帶腋芽的莖段)→起始培養(yǎng)基(MS+6BA0.5-3.0+GA30.2)進(jìn)行起始培養(yǎng)成苗→繁殖培養(yǎng)基(MS+6BA0.5-1.0或1/2MS+NAA0.001-0.05)進(jìn)行擴(kuò)大培養(yǎng)成一定數(shù)量的試管苗→生根培養(yǎng)基培育成一定數(shù)量的生根苗→取生根苗莖尖(0.3mm以下帶1-2個(gè)葉原基)置于液體培養(yǎng)基(脫脂棉+1/2MS+6BA0.3-0.5+CH300)上培養(yǎng)莖尖成苗→成苗半個(gè)月左右(或3片真葉)轉(zhuǎn)接壯苗培養(yǎng)基(MS+6BA0.3-0.5+IAA0.1+CH300)進(jìn)行壯苗培養(yǎng)→將莖尖苗轉(zhuǎn)入快繁培養(yǎng)基上培養(yǎng)(MS+6BA0.3-0.5腋芽增殖法最多達(dá)1∶9-10的繁殖系數(shù)，每1個(gè)月轉(zhuǎn)接一次)。從一株苗起始開始，一年下來最多繁殖到912或1012株，最少也能獲得512株苗。與田間無性扦插相比，繁殖系數(shù)大，且不受外界條件影響，同時(shí)即可減少成本，又可去除病毒達(dá)到增產(chǎn)增收的目的。
權(quán)利要求
苧麻莖尖脫毒成苗及快速繁殖技術(shù)是苧麻的一種工廠化無性繁殖方式，該技術(shù)通過腋芽增殖培養(yǎng)出無菌試管苗，從試管苗剝?nèi)∏o尖的這一創(chuàng)新點(diǎn)解決了取材受時(shí)間、季節(jié)、氣候限制以及消毒和褐變等技術(shù)難題。其培養(yǎng)過程中以光強(qiáng)2000～3000lux，光照時(shí)間12hrs/天；莖尖成苗培養(yǎng)以22℃±1，繁殖和生根培養(yǎng)以25℃±1為適宜條件。對此培養(yǎng)方式提出以下權(quán)利要求。
1、苧麻無菌試管苗培養(yǎng)的適宜培養(yǎng)基(1)起始苗適宜培養(yǎng)基MS+6BA0.5-3.0+GA30.2；(2)腋芽增殖適宜培養(yǎng)基MS+6BA0.5-1.0；(3)生根適宜培養(yǎng)基1/2MS+NAA0.01～0.05。
2、培養(yǎng)程序起始苗——腋芽增殖培養(yǎng)——無菌試管苗——?jiǎng)兦o尖——莖尖成苗培養(yǎng)——繁殖和生根培養(yǎng)。
3、莖尖成苗適宜培養(yǎng)基；1/2MS+6BA0.3-0.5+CH300
4、莖尖苗快繁適宜培養(yǎng)基MS+6BA0.3-0.5
5、莖尖大小0.3mm以下帶1-2個(gè)葉原基。
6、莖尖成苗培養(yǎng)方式以脫脂棉作支撐物的液體培養(yǎng)。
全文摘要
苧麻莖尖脫毒成苗及快速繁殖技術(shù)在苧麻大田生產(chǎn)，特別是在苧麻產(chǎn)業(yè)化生產(chǎn)中快速有效地提供大批量的無病菌苗，在感病苧麻種質(zhì)資源的保存和利用上可以發(fā)揮拯救和保證的作用。在生產(chǎn)和科研上都有十分重要的意義。該技術(shù)專利可以解決苧麻從室外取材到室內(nèi)培養(yǎng)過程中，難以成苗的技術(shù)難關(guān)。通過腋芽增殖培養(yǎng)出無菌試管苗，從試管苗剝?nèi)∏o尖的這一創(chuàng)新點(diǎn)解決了取材受時(shí)間、季節(jié)、氣候限制以及消毒和褐變等技術(shù)難題。同時(shí)，利用培育的試管苗剝?nèi)∏o尖的脫毒培養(yǎng)產(chǎn)生了該發(fā)明技術(shù)專利中的一系列關(guān)鍵技術(shù)和培養(yǎng)基配方，即從起始苗培養(yǎng)到腋芽增殖培養(yǎng)生根培養(yǎng)，以及莖尖成苗培養(yǎng)和莖尖苗快繁培養(yǎng)的適宜培養(yǎng)基，培養(yǎng)方式、培養(yǎng)調(diào)控及培養(yǎng)程序等關(guān)鍵技術(shù)和培養(yǎng)基配方。該技術(shù)專利可以快速有效地為苧麻生產(chǎn)和資源保存利用提供無毒苗。該技術(shù)的成功可以為下一步苧麻花葉病的分子生物學(xué)研究打下基礎(chǔ)，從而為解決花葉病降低對苧麻產(chǎn)量和品質(zhì)這一問題提供技術(shù)保障。
文檔編號A01H4/00GK1965642SQ20051012550
公開日2007年5月23日 申請日期2005年11月16日 優(yōu)先權(quán)日2005年11月16日
發(fā)明者熊和平, 郭運(yùn)玲, 喻春明, 王延周, 朱愛國, 唐守偉, 高力 申請人:中國農(nóng)業(yè)科學(xué)院麻類研究所