一種吳茱萸堿衍生物的制備方法
【技術領域】
[0001] 本發(fā)明涉及吳茱萸堿衍生物，具體涉及一種吳茱萸堿衍生物的制備方法。
【背景技術】
[0002] 蕓香科植物吳茱萸，石虎或疏毛吳茱萸的干燥成熟果實提取的有效成分吳茱萸堿 (EVO)，可以阻滯多種腫瘤細胞（如人甲狀腺癌、宮頸癌、結腸癌、乳腺癌、前列腺癌等）的細 胞周期，誘導細胞凋亡以及抑制血管生成，從而發(fā)揮抗腫瘤活性。
[0003] 研究發(fā)現(xiàn)，吳茱萸堿衍生物式I化合物（10-氨基-14-甲基-8,13,13b，14-四 氫-7H-吲哚并[2' 3' ：3,4]吡啶并[2，l-b]喹唑啉-5-酮），具有比吳茱萸堿更好的抗癌 效果，其結構如下：
[0004]
[0005] CN102659782A公開了一種制備式I化合物（EVO-A)的方法，其采用濃硝酸為硝化 試劑，先將吳茱萸堿的10位硝化，再通過蘭尼鎳還原成式I化合物，制備過程副產(chǎn)物多，反 應時間長，后處理十分麻煩，而且收率較低（總收率低于25% )。

【發(fā)明內(nèi)容】

[0006] 針對現(xiàn)有技術存在的不足，本發(fā)明的目的在于提供一種吳茱萸堿衍生物式I化合 物的制備方法，該方法工藝簡單，成本低，適合工業(yè)化。
[0007] 本發(fā)明的目的是這樣實現(xiàn)的：
[0008] -種吳茱萸堿衍生物式I化合物的制備方法，其特征在于：
[0009] 所述式I化合物的結構為：
[0010]
[0011] 其采用如下路線制備：
[0012] 1)硝化：以吳茱萸堿（式II化合物）為原料，硝酸鉀為硝化試劑，濃硫酸為催化 劑，制備得到式III化合物，
[0013]
[0014] 2)還原：用鈀碳-氫氣還原的方式將式III化合物還原成式I化合物，
[0016] 本發(fā)明采用硝酸鉀作為硝化試劑，并采用鈀碳-氫氣還原式III化合物，反應時間 大大縮短，明顯促進工業(yè)化進程。
[0017] 發(fā)明人在研發(fā)過程中發(fā)現(xiàn)，上述步驟1)硝化步驟中，原料的用量，反應溫度以及 反應時間的配比十分重要，很容易出現(xiàn)收率偏低，目標化合物難以有效分離的情形。
[0018] 步驟1)中，優(yōu)選式II化合物、濃硫酸、硝酸鉀的物質(zhì)的量之比為1 : 50~62 : 1 ; 反應溫度為-l〇°C~_5°C;反應時間為0. 5~3h。
[0019] 同時，發(fā)明人在研發(fā)過程中也發(fā)現(xiàn)，上述步驟2)還原步驟中，反應時間對反應收 率有很大影響，反應時間稍長，收率明顯降低。
[0020] 步驟2)中，反應時間優(yōu)選3~9h。
[0021] 具體的說，
[0022] -種吳茱萸堿衍生物式I化合物的制備方法，其特征在于，采用以下步驟：
[0023] 1)硝化：將吳茱萸堿溶于濃硫酸中，再轉移至低溫反應器中，于-10~_5°C反應 0. 5~3h，將反應液倒入乙醇溶液中，析出沉淀，過濾得到黃色固體式III化合物；
[0024] 2)還原：將式III化合物溶于甲醇中，鈀碳做催化劑，于高壓反應釜中反應，氫氣 還原，溫度45~50°C，壓力1. 8~I. 9MPa，反應4~9h，過濾除去鈀碳后減壓濃縮濾液，得 到磚紅色固體粉末，用甲醇重結晶，即得式I化合物。
[0025] 更具體的說，
[0026] 上述吳茱萸堿衍生物式I化合物的制備方法，采用以下步驟：
[0027] 1)硝化：將濃硫酸在冰浴條件下加入圓底燒瓶中，再加入?yún)擒镙菈A使其充分溶 解，再將其轉移至低溫反應器中，-l〇°C條件下攪拌，反應0.5h左右，將反應液倒入乙醇溶 液中，析出沉淀，過濾得到黃色固體，真空干燥得到式III化合物粗品，用水和DMF的混合溶 劑重結晶純化；
[0028] 2)還原：將純化后的式III化合物溶于甲醇中，鈀碳做催化劑，于高壓反應釜中反 應，氫氣還原，溫度45~50°C，壓力1. 8~I. 9MPa，反應4~9h，過濾除去鈀碳后減壓濃縮 濾液，得到磚紅色固體粉末，用甲醇重結晶，即得式I化合物。
[0029] 上述步驟1)水和DMF的混合溶劑重結晶中，水與DMF的體積比為1 : 2~1 : 8。
[0030] 本發(fā)明具有以下有益效果：
[0031] 本發(fā)明以吳茱萸堿為原料，通過硝化、還原步驟，在10位成功引入氨基，制得抗腫 瘤活性更好的式I化合物；本發(fā)明以硝酸鉀替代現(xiàn)有技術中的硝酸對吳茱萸堿硝化，并使 用鈀碳-氫氣還原制得式I化合物，所用物料易得，反應時間短，終產(chǎn)物分離容易，雜質(zhì)含量 低，適合工業(yè)化生產(chǎn)。本發(fā)明通過物料的配比、溫度的控制、反應時間以及溶劑的控制，大大 提尚了收率，總收率最尚可達85%以上。
【具體實施方式】
[0032] 下面通過實施例對本發(fā)明進行具體描述，有必要在此指出的是，以下實施例只用 于對本發(fā)明進行進一步的說明，不能理解為對本發(fā)明保護范圍的限制，該領域的技術熟練 人員可以根據(jù)上述本
【發(fā)明內(nèi)容】
對本發(fā)明作出一些非本質(zhì)的改進和調(diào)整。本發(fā)明中：EVO-N 為吳菜英喊硝基衍生物，化學名為1〇_硝基_14_甲基_8,13,13b，14-四氛_7H_H引噪并 [2'3':3,4]吡啶并[2,1-b]喹唑啉-5-酮；EVO-A為吳茱萸堿氨基衍生物，化學名為10-氨 基-14-甲基-8,13,13b，14-四氫-7H-吲哚并[2'3':3,4]吡啶并[2,1-b]喹唑啉-5-酮。 [0033] 實施例1
[0034] 實施例1 :吳茱萸堿衍生物的制備
[0035] 步驟 1 :
[0036] 反應式如下：
[0038] 將IOmL濃硫酸加入50mL圓底燒瓶中，稱取吳茱萸堿（式II)I.Og在(TC條件下 加入濃硫酸中，磁力攪拌，約IOmin內(nèi)加完，使吳茱萸堿充分溶解后，加入硝酸鉀0. 33g，再 將該反應裝置轉移至-KTC低溫反應器中，磁力攪拌0. 5h后停止，將該反應液倒入冰水混 合物中，有黃色固體析出，過濾，濾餅用乙醇洗滌3次（每次IOmL)，得到粗品，干燥后經(jīng)DMF 和水混合溶劑重結晶（4 : 1)，過濾后得到黃色固體，經(jīng)減壓干燥得到純品，收率為86.4%。
[0039] EVO-N的MS圖譜結果為：MS(m/z) : [M+1]為 349. 27,分子式為C19H17N4O3,與目標 分子量一致。EVO-N的1HNMR圖譜解析結果如下,HNMR^OOMHz^MSO)，S:2. 91(s，3H)， 2. 93-2. 99(m，2H)，3. 24(ddd，J= 12. 8,11. 0,5. 3Hz，1H)，4. 60-4. 69(m，1H)，6. 20(s，1H)， 6. 98 (t，J= 7. 4Hz，1H)，7. 08 (d，J= 8. 1Hz，1H)，7. 47-7. 51 (m，1H)，7. 52 (d，J= 9. 0Hz， lH)，7.80(dd，J= 7.7，1.4Hz，lH)，8.02(dd，J= 9.0,2.3Hz，lH)，8.51(d，J= 2. 1Hz，1H)， 11. 8(s，1H) 〇
[0040] 步驟 2 :
[0041] 反應式如下：
[0042]
[0043] 取合成的EVO-N(式III)3g，甲醇600mL，鈀碳0. 15g分別加入高壓反應釜中，升高 溫度至45~50°C，控制壓力為1. 8~I. 9MPa，轉速170rpm，氫氣還原，反應6. 5h后停止，降 溫至室溫后抽出反應液，過濾除去鈀碳，再減壓濃縮濾液，得到粗品為磚紅色固體粉末，用 甲醇重結晶，得到純品，收率為93. 4%AVO-A的MS圖譜結果為：MS(m/z) : [M+1]為319. 27， 分子式為C19H19N4O,與目標分子量一致。
[0044]EVO-A的1HNMR圖譜解析結果如下,HNMR(600MHz，CD3OD)S:2. 64 (s，3H)， 2. 91-2. 82 (m，2H)，3. 26-3. 21 (m，1H)，4. 77-4. 70 (m，1H)，5. 92 (s，1H)，6. 74 (dd，J= 8. 5， 2.0Hz，lH)，6.93(d，J= 1.8Hz，lH)，7.10(t，J= 7.5Hz，lH)，7.16(d，J= 8.1Hz，lH)， 7. 19 (d，J= 8. 5Hz，1H)，7. 53-7. 47 (m，1H)，7. 93 (dd，J= 7. 8,1. 1Hz，1H)。
[0045] 本發(fā)明中，發(fā)明人發(fā)現(xiàn)，物料用量，反應時間與反應溫度