一種骨髓液涂片的制備方法
【專利摘要】本發(fā)明屬于骨髓細(xì)胞學(xué)檢驗(yàn)領(lǐng)域,具體涉及一種骨髓液涂片的制備方法。本發(fā)明提供的骨髓液涂片的制備方法為抽取骨髓液,加入抗凝劑,將骨髓液涂片并染色,即得。本發(fā)明提供的骨髓液涂片的制備方法能有效維持骨髓細(xì)胞的形態(tài),使骨髓細(xì)胞分布更均勻,有利于骨髓細(xì)胞的分類,大大的提高了骨髓細(xì)胞學(xué)檢測(cè)的準(zhǔn)確性。同時(shí)本發(fā)明提供的骨髓液涂片的制備方法還具有操作簡(jiǎn)單、方便,質(zhì)量易于控制的優(yōu)點(diǎn),而且制備得到的涂片著色均勻,細(xì)胞著色后鮮艷、勻稱、結(jié)構(gòu)清晰,細(xì)胞漿顏色及透明度能反應(yīng)各類各期細(xì)胞的相應(yīng)特性,細(xì)胞漿與細(xì)胞核著色的對(duì)比度好,是一種較為理想的骨髓液涂片的制備方法。
【專利說(shuō)明】
_種骨髓液涂片的制備方法
技術(shù)領(lǐng)域
[0001] 本發(fā)明屬于骨髓細(xì)胞學(xué)檢驗(yàn)領(lǐng)域,具體涉及一種骨髓液涂片的制備方法。
【背景技術(shù)】
[0002] 隨著科學(xué)的不斷發(fā)展,學(xué)科間的相互滲透,血液學(xué)領(lǐng)域不斷擴(kuò)大,檢測(cè)手段愈來(lái)愈 豐富。細(xì)胞生物化學(xué)、免疫、遺傳、細(xì)胞動(dòng)力學(xué)及電鏡等檢查使形態(tài)學(xué)檢查達(dá)到了分子水平, 而且在日常臨床工作中,光鏡下的細(xì)胞形態(tài)學(xué)檢查是首選和必不可少的手段。骨髓檢查可 用于造血系統(tǒng)疾病的診斷,如對(duì)白血病的鑒別診斷、各種貧血的鑒別診斷、多發(fā)性骨髓瘤和 血小板增加或減少性疾病的診斷;骨髓檢查還可用于某些感染性疾病,如感染性心內(nèi)膜炎, 骨髓培養(yǎng)有助于提高該病診斷的陽(yáng)性率;骨髓檢查還可以用于骨髓干細(xì)胞培養(yǎng)、染色體核 型檢查、骨髓細(xì)胞免疫學(xué)分型試驗(yàn)等。
[0003] 通過(guò)骨髓細(xì)胞學(xué)檢驗(yàn)可了解骨髓造血功能及其病理變化,是血液病診斷、鑒別診 斷、療效觀察、判斷預(yù)后的主要檢測(cè)手段。在骨髓細(xì)胞學(xué)檢查過(guò)程中,骨髓的取材、涂片、染 色的質(zhì)量可直接影響細(xì)胞的形態(tài)觀察和分析,尤其是涂片染色失真會(huì)直接影響骨髓細(xì)胞的 誤判和誤診。因此,提高骨髓液涂片的質(zhì)量是骨髓細(xì)胞學(xué)檢查的關(guān)鍵。
[0004] 范洪等發(fā)表了一篇題目為"骨髓涂片常規(guī)檢驗(yàn)與應(yīng)用"的文章,該文章詳細(xì)的描述 了骨髓取材、涂片、染色的具體步驟,同時(shí)還寫明了骨髓涂片制備的注意事項(xiàng),可以有效的 提高骨髓細(xì)胞學(xué)檢查中骨髓取材、涂片、染色的質(zhì)量。但是,該方法的染色法是采用滴染法, 滴染時(shí)容易出現(xiàn)染料沉積在玻片上,有較多的染料顆粒存在,而且滴染法在操作時(shí)緩沖液 和染液滴加的比例難以控制,容易出現(xiàn)染色過(guò)深或過(guò)淺的現(xiàn)象,導(dǎo)致整個(gè)骨髓涂片著色不 均勻,細(xì)胞結(jié)構(gòu)模糊,有沉渣顆粒,不利于骨髓細(xì)胞的檢查。
[0005] 因此,研究和開(kāi)發(fā)出一種可以使骨髓涂片著色均勻,視野清晰,細(xì)胞鮮艷、勻稱、結(jié) 構(gòu)清晰,無(wú)沉渣顆粒,便于觀察的骨髓涂片仍是當(dāng)前研究的重點(diǎn)。
【發(fā)明內(nèi)容】
[0006] 為了克服現(xiàn)有技術(shù)中的不足,本發(fā)明的目的在于提供一種可以使骨髓涂片著色均 勻,視野清晰,細(xì)胞鮮艷、勻稱、結(jié)構(gòu)清晰,無(wú)沉渣顆粒,便于觀察的骨髓液涂片的制備方法, 以解決上述缺陷。
[0007] 本發(fā)明提供了一種骨髓液涂片的制備方法,包括以下步驟:
[0008] S1抽取骨髓液,加入骨髓液體積的0.2-0.3 %的抗凝劑反應(yīng)30-60s,得抗凝骨髓 液;
[0009] S2將步驟S1得到抗凝骨髓液滴到載玻片的一端,用推玻片將骨髓液涂成薄片,得 涂片;
[0010] S3將步驟S2得到的涂片排列在玻片架上,將玻片架放入染色缸I內(nèi)固定l-3min,所 述染色缸I內(nèi)為染色液,所述染色液的高度為恰好淹沒(méi)血膜;
[0011] S4將步驟S3處理過(guò)的玻片架轉(zhuǎn)入染色缸II內(nèi)染色25-35min;所述染色缸II內(nèi)為染 色液與緩沖液的混合液,所述染色液與緩沖液的混合液高度為恰好淹沒(méi)血膜;
[0012] S5將步驟S4處理后的玻片沖洗5-15S,以沖洗后的水無(wú)顏色殘留為宜,干燥,即得。 所述干燥方式為自然晾干或冷風(fēng)吹干等。
[0013 ]進(jìn)一步地,所述步驟S1中的抗凝劑的濃度為2-4mg/ml。
[0014] 進(jìn)一步地,所述步驟S1中的抗凝劑由肝素和乙二胺四乙酸二鉀按重量比1:2-4組 成。
[0015] 進(jìn)一步地,所述步驟S1中的抗凝劑由肝素和乙二胺四乙酸二鉀按重量比1:3組成。
[0016] 進(jìn)一步地,所述步驟S2中的抗凝骨髓液的添加量為5-7yL,所述推玻片與載玻片的 角度為35°。
[0017] 進(jìn)一步地,所述步驟S3中的染色液的制備方法為:取瑞氏染粉lg,姬姆薩染粉 0.3g,加入500ml甲醇中,再加入10ml甘油混勻,將配置好的染色液放置37°C水浴箱內(nèi)孵育 1-2天,并在常溫下存放6-8天,即得。
[0018]進(jìn)一步地,所述步驟S4中的染色液與緩沖液的混合液的制備方法:將30ml質(zhì)量濃 度為1 %的磷酸二氫鉀溶液與20ml質(zhì)量濃度為1 %的磷酸氫二鈉溶液混勻,并加入950ml的 蒸餾水混勻,得緩沖液;將緩沖液與權(quán)利要求6制備得到的染色液混合均勻,得染色液與緩 沖液的混合液。
[0019] 進(jìn)一步地,所述染色液與緩沖液的混合液由染色液和緩沖液按體積1:3-3.5組成。
[0020] 進(jìn)一步地,所述染色液與緩沖液的混合液由染色液和緩沖液按體積1:3.3組成。
[0021] 本發(fā)明提供的由肝素和乙二胺四乙酸二鉀按一定重量比組成的抗凝劑可以有效 的防止骨髓細(xì)胞出現(xiàn)凝塊,能有效維持骨髓細(xì)胞的形態(tài),使骨髓細(xì)胞分布更均勻,有利于骨 髓細(xì)胞的分類,大大的提高了骨髓細(xì)胞學(xué)檢測(cè)的準(zhǔn)確性。
[0022] 進(jìn)一步地,本發(fā)明提供的浸染色法具有操作簡(jiǎn)單、方便,質(zhì)量易于控制的優(yōu)點(diǎn),而 且制備得到的涂片著色均勻,細(xì)胞著色后鮮艷、勻稱、結(jié)構(gòu)清晰,細(xì)胞漿顏色及透明度能反 應(yīng)各類各期細(xì)胞的相應(yīng)特性,細(xì)胞漿與細(xì)胞核著色的對(duì)比度好,是一種較為理想的骨髓液 涂片的制備方法。
[0023]進(jìn)一步地,本發(fā)明提供的浸染法染色100張骨髓涂片用時(shí),耗時(shí)80min,消耗染液 40ml,而傳統(tǒng)的滴染染色100張骨髓涂片用時(shí),耗時(shí)155min,消耗染液160ml,與傳統(tǒng)的滴染 法相比,本發(fā)明的浸染法在染色100張骨髓涂片時(shí),可以節(jié)省48%的時(shí)間,節(jié)約75%的染液。 進(jìn)一步地,經(jīng)試驗(yàn)發(fā)現(xiàn),對(duì)兩種方法染色的100張骨髓涂片進(jìn)行嚴(yán)格的效果評(píng)估,滴染法涂 片的合格率為93%。浸染法涂片的合格率為97%,說(shuō)明本發(fā)明提供的浸染法是一種操作簡(jiǎn) 單、染色質(zhì)量高的染色方法。
[0024] 與現(xiàn)有技術(shù)相比,本發(fā)明提供的骨髓液涂片的制備方法具有以下優(yōu)勢(shì):
[0025] (1)本發(fā)明提供的骨髓液涂片的制備方法能有效維持骨髓細(xì)胞的形態(tài),使骨髓細(xì) 胞分布更均勻,有利于骨髓細(xì)胞的分類,大大的提高了骨髓細(xì)胞學(xué)檢測(cè)的準(zhǔn)確性;
[0026] (2)本發(fā)明提供的骨髓液涂片的制備方法具有操作簡(jiǎn)單、方便,質(zhì)量易于控制的優(yōu) 點(diǎn),而且涂片著色均勻,細(xì)胞著色后鮮艷、勻稱、結(jié)構(gòu)清晰,細(xì)胞漿顏色及透明度能反應(yīng)各類 各期細(xì)胞的相應(yīng)特性,細(xì)胞漿與細(xì)胞核著色的對(duì)比度好,是一種較為理想的骨髓液涂片的 制備方法。
[0027] (3)本發(fā)明提供的骨髓液涂片的制備方法的浸染法可以對(duì)染料、緩沖液進(jìn)行精確 定量,可以顯著的減少標(biāo)本染色質(zhì)量的批間差異及不同操作人員對(duì)染色結(jié)果的影響即提高 標(biāo)本染色的整體合格率。
【附圖說(shuō)明】 圖1為實(shí)施例2制備的骨髓涂片的顯微鏡圖; 圖2為對(duì)比例5制備的骨髓涂片的顯微鏡圖。
【具體實(shí)施方式】:
[0028] 以下通過(guò)【具體實(shí)施方式】的描述對(duì)本發(fā)明作進(jìn)一步說(shuō)明,但這并非是對(duì)本發(fā)明的限 制,本領(lǐng)域技術(shù)人員根據(jù)本發(fā)明的基本思想,可以做出各種修改或改進(jìn),但是只要不脫離本 發(fā)明的基本思想,均在本發(fā)明的范圍之內(nèi)。
[0029] 實(shí)施例1、一種骨髓液涂片的制備
[0030] S1抽取骨髓液,加入骨髓液體積的0.2%,濃度為濃度為2mg/ml的抗凝劑反應(yīng)35s, 所述抗凝劑由肝素和乙二胺四乙酸二鉀按重量比1:2組成,得抗凝骨髓液;
[0031] S2取5yL步驟S1得到抗凝骨髓液滴到載玻片的一端,用推玻片將骨髓液涂成薄片, 所述推玻片與載玻片的角度為35°,得涂片;
[0032] S3將步驟S2得到的涂片排列在玻片架上,將玻片架放入染色缸I內(nèi)固定lmin,所述 染色缸I內(nèi)為染色液,所述染色液是取瑞氏染粉lg,姬姆薩染粉0.3g,加入500ml甲醇中,再 加入10ml甘油混勻,將配置好的染色液放置37°C水浴箱內(nèi)孵育1天,并在常溫下存放6天制 備得到;
[0033] S4將步驟S3處理過(guò)的玻片架轉(zhuǎn)入染色缸II內(nèi)染色25min;所述染色缸II內(nèi)為染色 液與緩沖液的混合液,所述染色液與緩沖液的混合液是將30ml質(zhì)量濃度為1 %的磷酸二氫 鉀溶液與20ml質(zhì)量濃度為1 %的磷酸氫二鈉溶液混勻,并加入950ml的蒸餾水混勻,得緩沖 液;將緩沖液與步驟S3制備得到的染色液按體積1:3混合均勻,得染色液與緩沖液的混合 液;
[0034] S5將步驟S4處理后的玻片沖洗8s,干燥,即得。
[0035]實(shí)施例2、一種骨髓液涂片的制備
[0036] S1抽取骨髓液,加入骨髓液體積的0.2%,濃度為濃度為3mg/ml的抗凝劑反應(yīng)45s, 所述抗凝劑由肝素和乙二胺四乙酸二鉀按重量比1:3組成,得抗凝骨髓液;
[0037] S2取6yL步驟S1得到抗凝骨髓液滴到載玻片的一端,用推玻片將骨髓液涂成薄片, 所述推玻片與載玻片的角度為35°,得涂片;
[0038] S3將步驟S2得到的涂片排列在玻片架上,將玻片架放入染色缸I內(nèi)固定2min,所述 染色缸I內(nèi)為染色液,所述染色液是取瑞氏染粉lg,姬姆薩染粉0.3g,加入500ml甲醇中,再 加入10ml甘油混勻,將配置好的染色液放置37°C水浴箱內(nèi)孵育1天,并在常溫下存放7天制 備得到;
[0039] S4將步驟S3處理過(guò)的玻片架轉(zhuǎn)入染色缸II內(nèi)染色30min;所述染色缸II內(nèi)為染色 液與緩沖液的混合液,所述染色液與緩沖液的混合液是將30ml質(zhì)量濃度為1 %的磷酸二氫 鉀溶液與20ml質(zhì)量濃度為1 %的磷酸氫二鈉溶液混勻,并加入950ml的蒸餾水混勻,得緩沖 液;將緩沖液與步驟S3制備得到的染色液按體積1:3.3混合均勻,得染色液與緩沖液的混合 液;
[0040] S5將步驟S4處理后的玻片沖洗10s,干燥,即得。
[0041] 實(shí)施例3、一種骨髓液涂片的制備
[0042] S1抽取骨髓液,加入骨髓液體積的0.3%,濃度為濃度為4mg/ml的抗凝劑反應(yīng)55s, 所述抗凝劑由肝素和乙二胺四乙酸二鉀按重量比1:4組成,得抗凝骨髓液;
[0043] S2取7yL步驟S1得到抗凝骨髓液滴到載玻片的一端,用推玻片將骨髓液涂成薄片, 所述推玻片與載玻片的角度為35°,得涂片;
[0044] S3將步驟S2得到的涂片排列在玻片架上,將玻片架放入染色缸I內(nèi)固定3min,所述 染色缸I內(nèi)為染色液,所述染色液是取瑞氏染粉lg,姬姆薩染粉0.3g,加入500ml甲醇中,再 加入10ml甘油混勻,將配置好的染色液放置37°C水浴箱內(nèi)孵育2天,并在常溫下存放8天制 備得到;
[0045] S4將步驟S3處理過(guò)的玻片架轉(zhuǎn)入染色缸II內(nèi)染色35min;所述染色缸II內(nèi)為染色 液與緩沖液的混合液,所述染色液與緩沖液的混合液是將30ml質(zhì)量濃度為1 %的磷酸二氫 鉀溶液與20ml質(zhì)量濃度為1 %的磷酸氫二鈉溶液混勻,并加入950ml的蒸餾水混勻,得緩沖 液;將緩沖液與步驟S3制備得到的染色液按體積1:3.5混合均勻,得染色液與緩沖液的混合 液;
[0046] S5將步驟S4處理后的玻片沖洗12s,干燥,即得。
[0047]對(duì)比例1、一種骨髓液涂片的制備
[0048]制備方法的不同:所述步驟S1中的抗凝劑為乙二胺四乙酸二鉀,其余步驟如實(shí)施 例2類似。
[0049] 對(duì)比例2、一種骨髓液涂片的制備
[0050] 制備方法的不同:所述步驟S1中的抗凝劑由肝素和乙二胺四乙酸二鉀按重量比1: 1組成,其余步驟如實(shí)施例2類似。
[00511對(duì)比例3、一種骨髓液涂片的制備
[0052]制備方法的不同:所述步驟S4中的染色液與緩沖液的混合液由緩沖液與染色液按 體積1:2.7混合均勻,其余步驟如實(shí)施例2類似。
[0053]對(duì)比例4、一種骨髓液涂片的制備
[0054]制備方法的不同:所述步驟S4中的染色液與緩沖液的混合液由緩沖液與染色液按 體積1:3.7混合均勻,其余步驟如實(shí)施例2類似。
[0055]對(duì)比例5、一種骨髓液涂片的制備
[0056] S1抽取骨髓液,加入骨髓液體積的0.2%,濃度為濃度為3mg/ml的抗凝劑反應(yīng)45s, 所述抗凝劑由肝素和乙二胺四乙酸二鉀按重量比1:3組成,得抗凝骨髓液;
[0057] S2取6yL步驟S1得到抗凝骨髓液滴到載玻片的一端,用推玻片將骨髓液涂成薄片, 所述推玻片與載玻片的角度為35°,得涂片;
[0058] S3將步驟S2得到的涂片放平,滴4滴染色液固定2min,所述染色液是取瑞氏染粉 lg,姬姆薩染粉〇. 3g,加入500ml甲醇中,再加入10ml甘油混勻,將配置好的染色液放置37°C 水浴箱內(nèi)孵育1天,并在常溫下存放7天制備得到;
[0059] S4將步驟S3處理過(guò)的涂片加入等量的緩沖液,混合均勻,染色30min,所述緩沖液 是將30ml質(zhì)量濃度為1 %的磷酸二氫鉀溶液與20ml質(zhì)量濃度為1 %的磷酸氫二鈉溶液混勻, 并加入950ml的蒸餾水混勻制備得到;
[0060] S5將步驟S4處理后的玻片沖洗10s,干燥,即得。
[0061]試驗(yàn)例一、骨髓液涂片的質(zhì)量檢測(cè)試驗(yàn)
[0062] 1、試驗(yàn)材料:實(shí)施例1、實(shí)施例2、實(shí)施例3、對(duì)比例1、對(duì)比例2、對(duì)比例3、對(duì)比例4和 對(duì)比例5制備得到的骨髓液涂片。
[0063] 2、試驗(yàn)方法:
[0064] 對(duì)實(shí)施例1、實(shí)施例2、實(shí)施例3、對(duì)比例1、對(duì)比例2、對(duì)比例3、對(duì)比例4和對(duì)比例5制 備得到的骨髓液涂片進(jìn)行顯微鏡觀察。
[0065] 3 ?試驗(yàn)結(jié)果:
[0066]試驗(yàn)結(jié)果如表1所示。
[0067]表1骨髓液涂片的質(zhì)量檢測(cè)試驗(yàn)
[0070]由表1可知,本發(fā)明實(shí)施例1 -3制備得到的骨髓液涂片細(xì)胞分布均勻,無(wú)重疊;細(xì)胞 著色均勻,涂片背景清晰;細(xì)胞結(jié)構(gòu)清晰,勻稱,細(xì)胞漿與細(xì)胞核著色的對(duì)比度好;無(wú)沉渣顆 粒,是一種較為理想的骨髓液涂片。而對(duì)比例1-5制備得到的骨髓液涂片質(zhì)量均比本發(fā)明實(shí) 施例1-3制備的骨髓液涂片質(zhì)量差,說(shuō)明本發(fā)明提供的骨髓液涂片制備方法制備的骨髓液 涂片效果好,大大的提高了骨髓細(xì)胞學(xué)檢查的準(zhǔn)確度。
[0071 ]試驗(yàn)例二、骨髓液涂片中的滴染法和浸染法的對(duì)比試驗(yàn) [0072 ] 1、試驗(yàn)材料:實(shí)施例2和對(duì)比例5制備的骨髓液涂片。
[0073] 2、試驗(yàn)方法:對(duì)實(shí)施例2和對(duì)比例5制備的骨髓液涂片進(jìn)行顯微鏡檢查,并進(jìn)行拍 照。
[0074] 2、試驗(yàn)結(jié)果
[0075]試驗(yàn)結(jié)果如圖1和圖2所示,其中圖1為實(shí)施例2制備的骨髓涂片,圖2為對(duì)比例5制 備的骨髓涂片。從涂片可知,圖片1中的骨髓液細(xì)胞分布均勻,無(wú)重疊;細(xì)胞著色均勻,涂片 背景清晰;細(xì)胞結(jié)構(gòu)清晰,勻稱,細(xì)胞漿與細(xì)胞核著色的對(duì)比度好;無(wú)沉渣顆粒。與圖2相比, 圖1中的細(xì)胞分布更均勻,無(wú)重疊,細(xì)胞核染色質(zhì)更加清晰,細(xì)胞著色更加鮮艷,更有利于骨 髓細(xì)胞學(xué)的檢查,可以大大提高骨髓細(xì)胞學(xué)檢查的準(zhǔn)確度。
【主權(quán)項(xiàng)】
1. 一種骨髓液涂片的制備方法,其特征在于,包括以下步驟: S1抽取骨髓液,加入骨髓液體積的0.2-0.3 %的抗凝劑反應(yīng)30-60S,得抗凝骨髓液; S2將步驟S1得到抗凝骨髓液滴到載玻片的一端,用推玻片將骨髓液涂成薄片,得涂片; S3將步驟S2得到的涂片排列在玻片架上,將玻片架放入染色缸I內(nèi)固定l-3min,所述染 色缸I內(nèi)為染色液; S4將步驟S3處理過(guò)的玻片架轉(zhuǎn)入染色缸II內(nèi)染色25-35min;所述染色缸II內(nèi)為染色液 與緩沖液的混合液; S5將步驟S4處理后的玻片沖洗5-15s,干燥,即得。2. 如權(quán)利要求1所述的骨髓液涂片的制備方法,其特征在于,所述步驟S1中的抗凝劑的 濃度為2_4mg/ml。3. 如權(quán)利要求1所述的骨髓液涂片的制備方法,其特征在于,所述步驟S1中的抗凝劑由 肝素和乙二胺四乙酸二鉀按重量比1:2-4組成。4. 如權(quán)利要求3所述的骨髓液涂片的制備方法,其特征在于,所述步驟S1中的抗凝劑由 肝素和乙二胺四乙酸二鉀按重量比1:3組成。5. 如權(quán)利要求1所述的骨髓液涂片的制備方法,其特征在于,所述步驟S2中的抗凝骨髓 液的添加量為5-7yL,所述推玻片與載玻片的角度為35°。6. 如權(quán)利要求1所述的骨髓液涂片的制備方法,其特征在于,所述步驟S3中的染色液的 制備方法為: 取瑞氏染粉lg,姬姆薩染粉〇.3g,加入500ml甲醇中,再加入10ml甘油混勻,將配置好的 染色液放置37°C水浴箱內(nèi)孵育1-2天,并在常溫下存放6-8天,即得。7. 如權(quán)利要求1所述的骨髓液涂片的制備方法,其特征在于,所述步驟S4中的染色液與 緩沖液的混合液的制備方法: 將30ml質(zhì)量濃度為1 %的磷酸二氫鉀溶液與20ml質(zhì)量濃度為1 %的磷酸氫二鈉溶液混 勻,并加入950ml的蒸餾水混勻,得緩沖液;將緩沖液與權(quán)利要求6制備得到的染色液混合均 勻,得染色液與緩沖液混合液。8. 如權(quán)利要求7所述的骨髓液涂片的制備方法,其特征在于,所述染色液與緩沖液的混 合液由染色液和緩沖液按體積1:3-3.5組成。9. 如權(quán)利要求8所述的骨髓液涂片的制備方法,其特征在于,所述染色液與緩沖液的混 合液由染色液和緩沖液按體積1:3.3組成。
【文檔編號(hào)】G01N1/30GK106053167SQ201610333190
【公開(kāi)日】2016年10月26日
【申請(qǐng)日】2016年5月19日
【發(fā)明人】王茂書, 歐陽(yáng)小峰, 彭宇
【申請(qǐng)人】四川金域醫(yī)學(xué)檢驗(yàn)中心有限公司