一種凍干粉針中的雜質(zhì)的氣相色譜檢測方法
【專利摘要】本發(fā)明公開了一種凍干粉針中的雜質(zhì)的氣相色譜檢測方法。該檢測方法包括以下步驟：采用頂空進樣，由載氣攜帶樣品通過氣相色譜法分離檢測，得到樣品的氣相色譜圖，再與對照品硅油的氣相色譜圖比照，即可；所述的樣品為注射用凍干粉針樣品；所述的氣相色譜法的色譜柱為6％氰丙基苯基?94％甲基聚硅氧烷極性色譜柱；所述的氣相色譜法的升溫程序如下：起始溫度38～42℃，保持2.5～3.5min，然后以4～6℃/min速率升溫至235～245℃，維持13～18min。本發(fā)明分析檢測方法能夠便捷有效地控制注射用凍干粉針的生產(chǎn)過程引入的非特異性生產(chǎn)雜質(zhì)，精密度和靈敏度高，為本類制劑雜質(zhì)的質(zhì)量標準制定提供了一個有效的方法。
【專利說明】
_種凍干粉針中的雜質(zhì)的氣相色譜檢測方法
技術(shù)領(lǐng)域
[0001]本發(fā)明涉及藥物分析化學技術(shù)領(lǐng)域，具體涉及一種凍干粉針中的雜質(zhì)的氣相色譜檢測方法。
【背景技術(shù)】
[0002]就最近幾年頻發(fā)的藥物損害事件來看，無菌產(chǎn)品有以下需要特別關(guān)注的生產(chǎn)過程質(zhì)量風險:
[0003]1、微生物污染導致的風險:由于無菌生產(chǎn)的過程控制或其他環(huán)節(jié)中的一些問題所導致的污染，可使病人在使用過程中產(chǎn)生嚴重反應甚至死亡。
[0004]2、熱源污染:也可導致病人嚴重的熱源反應并最終導致死亡。
[0005]3、異物污染:這包括一些不溶性微粒，交叉污染帶來的有害物質(zhì)等。這些雜質(zhì)可導致嚴重的致命事件，或機體慢性損傷。如見諸媒體報道的亮菌甲素事件、甲氨蝶呤事件等。
[0006]注射劑作為高風險產(chǎn)品，特別是非最終滅菌的無菌注射劑，生產(chǎn)過程的控制要求復雜且特殊，對廠房環(huán)境、設備運行和操作要求嚴格。確保生產(chǎn)過程的無菌、無異物污染控制，是一個很大的挑戰(zhàn)，十分值得研究。
[0007]凍干粉針作為藥物注射制劑的一種，具有貨架期穩(wěn)定、含水量極低不會被水解的特點。但因其直接靜脈給藥，除微生物、熱源污染外，一旦在其生產(chǎn)過程中發(fā)生非特異性生產(chǎn)性雜質(zhì)污染，同樣會對患者造成嚴重損害，將患者生命置于危險之中。
[0008]生產(chǎn)性雜質(zhì)一般認為即藥物生產(chǎn)過程中引入的非特異性雜質(zhì)。長期以來我們始終發(fā)現(xiàn)，往往有些生產(chǎn)批次的凍干粉針制劑盡管檢測符合國家藥典各項有關(guān)成分標準，但其澄清度或不溶性微粒卻不符合要求。
[0009]本領(lǐng)域技術(shù)人員長期以來始終無法發(fā)現(xiàn)導致凍干制劑澄清度或不溶性微粒不符合要求的原因，以及發(fā)現(xiàn)究竟是什么雜質(zhì)并建立一種能夠定量該類雜質(zhì)的檢測方法，以保證凍干制劑完全符合藥典標準。

【發(fā)明內(nèi)容】

[0010]本發(fā)明所要解決的技術(shù)問題是為了克服現(xiàn)有的注射用凍干粉針對生產(chǎn)過程引入的非特異性生產(chǎn)雜質(zhì)控制，以及現(xiàn)有的高效液相檢測和化學測試手段無法檢測其生產(chǎn)雜質(zhì)，來解釋部分溶液澄清度和不溶性微粒不合格但是含量和有關(guān)物質(zhì)等關(guān)鍵檢測項合格的現(xiàn)象，從而提供了一種凍干粉針中的雜質(zhì)的氣相色譜檢測方法。本發(fā)明的凍干粉針中的雜質(zhì)分析檢測方法能夠便捷有效地控制注射用凍干粉針的生產(chǎn)過程引入的非特異性生產(chǎn)雜質(zhì)，精密度和靈敏度高，為本類制劑雜質(zhì)的質(zhì)量標準制定和提高提供了一個有效的方法。[0011 ]本發(fā)明是通過以下技術(shù)方案解決上述技術(shù)問題的:
[0012]本發(fā)明提供了一種凍干粉針中的雜質(zhì)的氣相色譜檢測方法，包括以下步驟:采用頂空進樣，由載氣攜帶樣品通過氣相色譜法分離檢測，得到樣品的氣相色譜圖，再與對照品硅油的氣相色譜圖比照，即可;所述的樣品為注射用凍干粉針樣品；
[0013]所述的氣相色譜法的色譜柱為6%氰丙基苯基-94%甲基聚硅氧烷極性色譜柱;所述的氣相色譜法的柱溫程序升溫如下:起始溫度38?42°C，保持2.5?3.5min，然后以4?6°C/min速率升溫至235?245°C，維持13?18min。
[0014]其中，所述的氣相色譜法的柱溫程序升溫優(yōu)選如下:起始溫度40°C，保持3min，然后以5°C/min速率升溫至240°C，維持15min。
[0015]其中，所述的氣相色譜法的參數(shù)條件優(yōu)選如下:進樣口溫度為250°C，采用氫火焰離子化檢測器，檢測器溫度為250 V ;載氣為氮氣，流速為I?2ml/min。
[0016]其中，所述的頂空進樣中，優(yōu)選頂空進樣瓶保溫溫度為100°C，保溫時間為45min。
[0017]其中，所述的氣相色譜法的色譜儀優(yōu)選為Agilent 7890A氣相色譜儀，配備7697A頂空進樣器。
[0018]其中，所述的頂空進樣中，優(yōu)選所述的頂空進樣的進樣瓶為10ml，進樣瓶裝樣2ml。
[0019]其中，所述的注射用凍干粉針是指本領(lǐng)域常規(guī)的注射用凍干粉針制劑的制備方法制得的注射用凍干粉針，或者市售可得的注射用凍干粉針，本發(fā)明優(yōu)選上海第一生化藥業(yè)有限公司生產(chǎn)的注射用二丁酰環(huán)磷腺苷鈣凍干粉針作為具體案例進行說明，例如上海第一生化藥業(yè)有限公司生產(chǎn)，20mg/支，HPLC純度為93%?99%。但該發(fā)明不局限于這一種注射用凍干粉針，同樣適用于其他種類注射用凍干粉針。
[0020]所述的氣相色譜法中，所述的注射用凍干粉針較佳地以樣品溶液形式存在;本發(fā)明優(yōu)選為:注射用凍干粉針溶解于水后形成100g/L的樣品溶液;所述的水較佳地為二次重蒸水。
[0021 ]本發(fā)明中的百分比均為質(zhì)量百分比。
[0022]在符合本領(lǐng)域常識的基礎上，上述各優(yōu)選條件，可任意組合，即得本發(fā)明各較佳實例。
[0023]本發(fā)明所用試劑和原料均市售可得。
[0024]本發(fā)明的積極進步效果在于:本發(fā)明的氣相色譜分析方法程序簡易，可操作性強，靈敏度高，方便快捷，提供了現(xiàn)有技術(shù)未能解決的注射用凍干粉針生產(chǎn)雜質(zhì)分析方法，且該方法的色譜峰柱效高(以理論塔板數(shù)衡量，越高說明分離效率越好)、分離度良好(主峰與雜質(zhì)間的分離度越大于1.5，就表明分離效果越好)合適，可將注射用凍干粉針和有關(guān)雜質(zhì)硅油中各組分峰分離，實現(xiàn)科學、有效、便捷地控制注射用凍干粉針生產(chǎn)雜質(zhì)的目的，為注射用凍干粉針生產(chǎn)雜質(zhì)的質(zhì)量標準制定和提高提供了一個有效的方法。
【附圖說明】
[0025]圖1為注射用二丁酰環(huán)磷腺苷鈣(未被污染批次)有關(guān)物質(zhì)的液相色譜圖。
[0026]圖2為注射用二丁酰環(huán)磷腺苷鈣(被污染批次)有關(guān)物質(zhì)的液相色譜圖。
[0027]圖3為實施例1中的注射用二丁酰環(huán)磷腺苷鈣凍干粉針的氣相色譜圖。
[0028]圖4為實施例1中的硅油的氣相色譜圖。
[0029]圖5為實施例1中的二丁酰環(huán)磷腺苷鈣的氣相色譜圖。
【具體實施方式】
[0030]下面通過實施例的方式進一步說明本發(fā)明，但并不因此將本發(fā)明限制在所述的實施例范圍之中。下列實施例中未注明具體條件的實驗方法，按照常規(guī)方法和條件，或按照商品說明書選擇。
[0031]本發(fā)明分別選擇了澄清度檢項合格(未被污染)和不合格(被硅油污染)的注射用二丁酰環(huán)磷腺苷各一批進行常規(guī)有關(guān)物質(zhì)檢測，注射用二丁酰環(huán)磷腺苷鈣的有關(guān)物質(zhì)的液相檢測方法可參見專利CN103954709B “一種二丁酰環(huán)磷腺苷鈣或其制劑的有關(guān)物質(zhì)分析方法”。得到如圖1、圖2所示，從圖中可看出注射用二丁酰環(huán)磷腺苷鈣未被污染批次和被污染批次有關(guān)物質(zhì)的液相色譜圖沒有顯著性差異，即通過常規(guī)有關(guān)物質(zhì)檢測方法(高效液相色譜法)并不能檢測出被污染的樣品。
[0032]實施例1
[0033]采用AgiIent 7890A氣相色譜儀，7697A頂空進樣器，配氫火焰離子化檢測器;色譜柱為6%氰丙基苯基-94%甲基聚硅氧烷極性色譜柱。
[0034I水為二次重蒸水。
[0035]二丁酰環(huán)磷腺苷鈣:上海第一生化藥業(yè)有限公司自制，批號為c-150797。
[0036]注射用二丁酰環(huán)磷腺苷鈣凍干粉針:上海第一生化藥業(yè)有限公司自制，批號為1510903ο
[0037]硅油從上海上藥第一生化藥業(yè)有限公司注射用粉針生產(chǎn)線凍干機內(nèi)取樣。
[0038]將上述二丁酰環(huán)磷腺苷鈣以及注射用二丁酰環(huán)磷腺苷鈣凍干粉針分別溶解于二次重蒸水中配制成100g/L的溶液。
[0039]頂空進樣器中，頂空進樣瓶保溫溫度為100°C，保溫時間為45min。
[0040]頂空進樣瓶為1ml，進樣瓶裝樣2ml。
[0041 ]氣相色譜法的程序升溫條件如下:起始溫度40°C，保持3min，然后以5°C/min速率升溫至240°C，維持15min。
[0042]進樣口溫度250°C，柱流速lml/min，檢測器溫度250°C，氮氣為載氣。
[0043]硅油通過頂空進樣器然后進行氣相色譜檢測，結(jié)果如圖4所示，即硅油的氣相色譜圖。
[0044]圖3為實施例1中的注射用二丁酰環(huán)磷腺苷鈣凍干粉針的氣相色譜圖，圖5為實施例I中的二丁酰環(huán)磷腺苷鈣的氣相色譜圖。
[0045]結(jié)果顯示，二丁酰環(huán)磷腺苷鈣原料及其制劑和硅油各雜質(zhì)峰理論塔板數(shù)均大于5000，分離度大于1.5均符合要求。由此可見，本方法對于注射用二丁酰環(huán)磷腺苷鈣凍干粉針中的生產(chǎn)雜質(zhì)具有良好的分離性能。
[0046]由氣相圖譜對比可以看出:圖5中的二丁酰環(huán)磷腺苷鈣圖譜中表明有溶劑殘留。圖3中的注射用二丁酰環(huán)磷腺苷鈣凍干粉針的圖譜在30min后的色譜峰不是原料帶入的；而且圖3中的注射用二丁酰環(huán)磷腺苷鈣凍干粉針的圖譜30min后的色譜峰與硅油(圖4)的色譜峰基本完全重合，由此表明注射用二丁酰環(huán)磷腺苷鈣凍干粉針中雜質(zhì)為硅油，在凍干過程中引入，被凍干粉針吸附富集，而硅油幾乎不溶于水，所以造成注射用二丁酰環(huán)磷腺苷鈣凍干粉針在復溶后澄清度和不溶性微粒檢測項不合格。
[0047]經(jīng)檢測，本發(fā)明的檢測方法可以檢測到凍干粉針中硅油的含量為lOppm。(硅油占樣品的質(zhì)量百分比)
[0048]實施例2
[0049]改變實施例1中的程序升溫條件:
[0050]氣相色譜法的程序升溫條件如下:起始溫度42°C，保持3.5min，然后以6°C/min速率升溫至245 °C，維持18min。
[0051]其他條件均不變，得到的注射用二丁酰環(huán)磷腺苷鈣凍干粉針的圖譜30min后的色譜峰與硅油的色譜峰基本完全重合，由此也表明注射用二丁酰環(huán)磷腺苷鈣凍干粉針中雜質(zhì)為硅油，與實施例1的結(jié)論一致。
[0052]實施例3
[0053]改變實施例1中的程序升溫條件:
[0054]氣相色譜法的程序升溫條件如下:起始溫度38°C，保持2.5min，然后以4°C/min速率升溫至235 °C，維持13min。
[0055]其他條件均不變，得到的注射用二丁酰環(huán)磷腺苷鈣凍干粉針的圖譜30min后的色譜峰與硅油的色譜峰基本完全重合，由此也表明注射用二丁酰環(huán)磷腺苷鈣凍干粉針中雜質(zhì)為硅油，與實施例1的結(jié)論一致。
【主權(quán)項】
1.一種凍干粉針中的雜質(zhì)的氣相色譜檢測方法，包括以下步驟:采用頂空進樣，由載氣攜帶樣品通過氣相色譜法分離檢測，得到樣品的氣相色譜圖，再與對照品硅油的氣相色譜圖比照，即可;所述的樣品為注射用凍干粉針樣品； 所述的氣相色譜法的色譜柱為6%氰丙基苯基-94%甲基聚硅氧烷極性色譜柱;所述的氣相色譜法的柱溫程序升溫如下:起始溫度38?42°C，保持2.5?3.5min，然后以4?6°C/min速率升溫至235?245°C，維持13?18min。2.如權(quán)利要求1所述的氣相色譜檢測方法，其特征在于，所述的氣相色譜法的柱溫程序升溫為:起始溫度40 °C，保持3min，然后以5°C/min速率升溫至240°C，維持15min。3.如權(quán)利要求1所述的氣相色譜檢測方法，其特征在于，所述的氣相色譜法的參數(shù)條件如下:進樣口溫度為250°C，采用氫火焰離子化檢測器，檢測器溫度為250°C ;載氣為氮氣，流速為I?2ml/min04.如權(quán)利要求1所述的氣相色譜檢測方法，其特征在于，所述的頂空進樣中，頂空進樣瓶保溫溫度為100 0C，保溫時間為45min。5.如權(quán)利要求1所述的氣相色譜檢測方法，其特征在于，所述的頂空進樣的進樣瓶為1ml，進樣瓶裝樣2ml。6.如權(quán)利要求1所述的氣相色譜檢測方法，其特征在于，所述的注射用凍干粉針為注射用二丁酰環(huán)磷腺苷鈣凍干粉針。7.如權(quán)利要求1所述的氣相色譜檢測方法，其特征在于，所述的氣相色譜法中，所述的注射用凍干粉針以樣品溶液形式存在。8.如權(quán)利要求7所述的氣相色譜檢測方法，其特征在于，所述的樣品溶液為注射用凍干粉針溶解于水后形成100g/L的樣品溶液。9.如權(quán)利要求8所述的氣相色譜檢測方法，其特征在于，所述的水為二次重蒸水。
【文檔編號】G01N30/02GK105954421SQ201610408766
【公開日】2016年9月21日
【申請日】2016年6月12日
【發(fā)明人】王晶, 黃臻輝, 崔東琦
【申請人】上海上藥第生化藥業(yè)有限公司, 上海上藥第一生化藥業(yè)有限公司