一種輔助篩選低脂肉雞的血清生化標(biāo)記及應(yīng)用
【技術(shù)領(lǐng)域】
[0001] 本發(fā)明涉及一種輔助篩選低脂肉雞的血清生化標(biāo)記及應(yīng)用，屬于禽類遺傳育種技 術(shù)領(lǐng)域。
【背景技術(shù)】
[0002] 在過去半個(gè)多世紀(jì)，肉雞育種者們致力于對(duì)肉雞生長(zhǎng)速度和飼料轉(zhuǎn)化率的選擇， 并取得了顯著的遺傳進(jìn)展。然而，肉雞生長(zhǎng)速度的過快增加帶來(lái)了腹部脂肪沉積和代謝綜 合癥等負(fù)面因素。腹脂沉積過多有諸多不利，它不僅影響飼料效率，同時(shí)影響肉雞胴體品質(zhì) 等。因此，控制脂肪在雞體內(nèi)的過多蓄積，進(jìn)一步提高肉雞的飼料轉(zhuǎn)化效率和胴體質(zhì)量是我 國(guó)急需研宄解決的重大問題。選育低脂肉雞配套系是世界范圍內(nèi)肉雞育種的重要奮斗目標(biāo) 之一。在肉雞育種上，通常采用的傳統(tǒng)的育種技術(shù)主要是依據(jù)表型進(jìn)行選擇，因此需要將肉 雞屠宰以后測(cè)定腹部脂肪量，進(jìn)而根據(jù)全同胞或半同胞關(guān)系進(jìn)行選育。這種選擇方法時(shí)間 較長(zhǎng)，另外選擇效果也不是很好。因此，在低脂肉雞配套系培育方面急需一種新的育種技 術(shù)，即可縮短世代間隔，又能獲得較好的育種效果，大大提高育種進(jìn)程。雞的脂肪代謝包含 許多復(fù)雜的生物學(xué)過程，包括脂類的消化吸收、脂肪酸的合成、脂肪轉(zhuǎn)運(yùn)、脂肪的降解和貯 存、及脂肪動(dòng)員等。脂肪即甘油三酯，由甘油和脂肪酸組成，并且主要儲(chǔ)存在脂肪細(xì)胞內(nèi)。在 這些復(fù)雜的生物學(xué)過程中，有很多血液生化物質(zhì)的參與。這些血液生化物質(zhì)可能對(duì)肉雞的 腹部脂肪沉積非常重要，因此檢測(cè)這些血液生化指標(biāo)的水平對(duì)理解肉雞的脂肪代謝有很大 的幫助。如果篩選出與肉雞腹部脂肪量相關(guān)較大的血清生化標(biāo)記，根據(jù)該血清生化指標(biāo)的 水平進(jìn)行早期選種，將大大提高育種進(jìn)程，從而選育低脂肉雞配套系。

【發(fā)明內(nèi)容】

[0003] 為解決上述問題，本發(fā)明提供了一種輔助篩選低脂肉雞的血清生化標(biāo)記及應(yīng)用， 所采取的技術(shù)方案如下：
[0004] 本發(fā)明的目的在于提供一種輔助篩選低脂系肉雞的血清生化標(biāo)記，該標(biāo)記是雞血 清中HDL-C/LDL-C的水平。
[0005] 所述血清生化標(biāo)記用于肉雞腹部脂肪量的鑒定和低脂系肉雞選育。
[0006] 本發(fā)明的另一目的在于提供一種應(yīng)用所述血清生化標(biāo)記的方法，該方法的步驟如 下：
[0007] 1)檢測(cè)待測(cè)肉雞血清中的HDL-C/LDL-C水平；
[0008] 2)比較分析步驟1)所得的待測(cè)肉雞之間的HDL-C/LDL-C水平確定低脂系肉雞。
[0009] 本發(fā)明的另一目的在于提供一種所述血清生化標(biāo)記的篩選方法，該方法的步驟如 下：
[0010] 1)根據(jù)腹部脂肪量確定待篩選肉雞種群中的高脂系肉雞和低脂系肉雞；
[0011] 2)確定并檢測(cè)不同世代待篩選高脂系肉雞和低脂系肉雞中的血清生化指標(biāo)，確定 血清生化指標(biāo)在高脂系肉雞和低脂系肉雞中差異的顯著性，篩選出差異顯著的血清生化指 標(biāo)，獲得第一次篩選指標(biāo)；
[0012] 3)確定步驟2)所得的第一次篩選指標(biāo)的遺傳相關(guān)系數(shù)，根據(jù)所得遺傳相關(guān)系數(shù) 進(jìn)行第二次篩選，獲得第二次篩選指標(biāo)；
[0013] 4)確定步驟3)所得的第二次篩選指標(biāo)的遺傳力，根據(jù)所得的遺傳力進(jìn)行第三次 篩選，獲得血清生化標(biāo)記。
[0014] 步驟1)所述腹部脂肪量，是指腹脂重和腹脂率。
[0015] 步驟2)所述不同世代肉雞，是第16、17和18世代的肉雞。
[0016] 步驟3)所述第二次篩選，是剔除存在以下任意一種情況的第一次篩選指標(biāo)：
[0017] a)遺傳相關(guān)系數(shù)大于0. 30或小于-0. 30 ;
[0018] b)遺傳相關(guān)系數(shù)為正，高脂系的血清HDL-C/LDL-C水平低于低脂系；
[0019] c)遺傳相關(guān)系數(shù)為負(fù)，高脂系的血清HDL-C/LDL-C水平高于低脂系。
[0020] 步驟4)所述第三次篩選，是剔除遺傳力低于0. 5的第二次篩選指標(biāo)。
[0021] 本發(fā)明取得的有益效果如下：
[0022] 本發(fā)明所提供的血清生化指標(biāo)在低脂系肉雞和高脂系肉雞中存在顯著性差異。同 時(shí)，該血清生化指標(biāo)具有很高的遺傳相關(guān)系數(shù)。當(dāng)存在正遺傳相關(guān)系數(shù)時(shí)，該指標(biāo)在低脂系 肉雞中的水平低于高脂系肉雞相應(yīng)水平，而當(dāng)存在負(fù)遺傳相關(guān)系數(shù)時(shí)，該指標(biāo)在低脂系肉 雞的水平高于高脂系肉雞相應(yīng)水平。此外，該血清生化指標(biāo)具有較高的遺傳力，可在不同世 代中穩(wěn)定遺傳。
【具體實(shí)施方式】
[0023] 下面結(jié)合具體實(shí)施例對(duì)本發(fā)明做進(jìn)一步說明，但本發(fā)明不受實(shí)施例的限制。
[0024] 實(shí)施例1
[0025] 一、實(shí)驗(yàn)材料
[0026] 1.實(shí)驗(yàn)動(dòng)物和性狀測(cè)定
[0027] 以東北農(nóng)業(yè)大學(xué)選育的肉雞高、低脂雙向選擇系第十六、十七和十八世代公雞為 實(shí)驗(yàn)群體。7周齡時(shí)，肉仔雞禁食12小時(shí)后，屠宰前測(cè)定活重，屠宰后測(cè)定腹脂重，并除以7 周齡活重計(jì)算出腹脂率。采集頸動(dòng)脈血，于5ml離心管中（未添加抗凝劑），血樣以3000r/ min離心15min制得血清，放入EP管中，于-20°C冰箱保存?zhèn)溆谩?br>[0028]2?藥品和酶
[0029] 甘油三酯檢測(cè)試劑盒；總膽固醇檢測(cè)試劑盒；高密度脂蛋白膽固醇檢測(cè)試劑盒； 低密度脂蛋白膽固醇檢測(cè)試劑盒；總膽汁酸檢測(cè)試劑盒；總蛋白檢測(cè)試劑盒；白蛋白檢測(cè) 試劑盒；葡萄糖檢測(cè)試劑盒；尿酸檢測(cè)試劑盒；肌酐檢測(cè)試劑盒；谷丙轉(zhuǎn)氨酶檢測(cè)試劑盒； 谷草轉(zhuǎn)氨酶檢測(cè)試劑盒；y-谷氨酰轉(zhuǎn)肽酶檢測(cè)試劑盒；游離脂肪酸檢測(cè)試劑盒。
[0030] 3?主要儀器
[0031] 離心機(jī)、C8000全自動(dòng)生化分析儀。
[0032] 二、實(shí)驗(yàn)方法
[0033] 1.實(shí)驗(yàn)個(gè)體的選擇
[0034] 在十六世代，所有家系的腹脂率均值被計(jì)算，并將家系根據(jù)腹脂率均值排序，在高 脂系中，從腹脂率由高到低的家系中選出103只個(gè)體；在低脂系中，從腹脂率由低到高的家 系中選出103只個(gè)體。在十七世代，所有雞只的腹脂率均值被計(jì)算，并將雞只根據(jù)腹脂率均 值排序，在高脂系中，從腹脂率由高到低的雞只中選出88只個(gè)體；在低脂系中，從腹脂率由 低到高的雞只中選出88只個(gè)體。在十八世代，個(gè)體選擇方法同十七世代，高、低脂系各選出 88只個(gè)體。三個(gè)世代共選出558只個(gè)體。
[0035] 2.血清生化指標(biāo)的測(cè)定
[0036] 以下14項(xiàng)血清生化指標(biāo)，采用全自動(dòng)生化分析儀檢測(cè)：甘油三酯：酶比色法；總膽 固醇：酶比色法；高密度脂蛋白膽固醇：均相酶比色法；低密度脂蛋白膽固醇：均相酶比色 法；總膽汁酸：循環(huán)酶法；總蛋白：雙縮脲法；白蛋白：溴甲酚綠法；葡萄糖：己糖激酶法；尿 酸：酶比色法；肌酐：酶比色法；谷丙轉(zhuǎn)氨酶：連續(xù)監(jiān)測(cè)法；谷草轉(zhuǎn)氨酶：連續(xù)監(jiān)測(cè)法；y-谷 氨酰轉(zhuǎn)肽酶：連續(xù)監(jiān)測(cè)法；游離脂肪酸：酶比色法。
[0037] 以下4項(xiàng)血清生化指標(biāo)通過計(jì)算得到：球蛋白（總蛋白一白蛋白）、高密度脂蛋白 膽固醇/低密度脂蛋白膽固醇（HDL-C/LDL-C)、白蛋白/球蛋白、谷草轉(zhuǎn)氨酶/谷丙轉(zhuǎn)氨酶。
[0038] 3.統(tǒng)計(jì)模型建立
[0039] 根據(jù)東北農(nóng)業(yè)大學(xué)肉雞高、低脂雙向選擇系群體的特點(diǎn)，構(gòu)建統(tǒng)計(jì)模型如下：
[0040] Y=y+L+F(L)+D(F，L) +BW7+e①
[0041] Y=y+G+L+Animal+e②
[0042] Y為性狀觀察值，y為群體均值，G為世代固定效應(yīng)，L為品系固定效應(yīng)，F(xiàn)(L)為品 系內(nèi)家系的隨機(jī)效應(yīng)，D(F，L)為家系與品系內(nèi)母雞的隨機(jī)效應(yīng)，BW7為7周齡體重作協(xié)變 量（分析腹脂率時(shí)BW7不作為協(xié)變量），Animal為動(dòng)物個(gè)體效應(yīng)，e為剩余值。
[0043] 使用模型①通過統(tǒng)計(jì)軟件JMP4.0(SASInstitute，2000)，對(duì)高、低脂系肉雞之間 的血清生化指標(biāo)和腹脂性狀進(jìn)行比較，并估計(jì)性狀的最小二乘均值。
[0044] 使用模型②通過統(tǒng)計(jì)軟件MTDFREML，對(duì)血清生化指標(biāo)的遺傳參數(shù)進(jìn)行估計(jì)，包括 血清生化指標(biāo)的遺傳力、血清生化指標(biāo)與腹脂性狀的遺傳相關(guān)和表性相關(guān)。
[0045] 實(shí)施例2雞血清生化指標(biāo)在高、低脂雙向選擇系肉雞之間的比較
[0046] 以東北農(nóng)業(yè)大學(xué)選育的肉雞高、低脂雙向選擇系第十六、十七和十八世代雞只為 實(shí)驗(yàn)材料，對(duì)每個(gè)世代內(nèi)高、低脂系肉雞之間的體脂性狀進(jìn)行比較分析。結(jié)果顯示，在三個(gè) 世代中，高脂系肉雞的腹脂重和腹脂率均極顯著高于低脂系肉雞（p〈0.01)(表1)。
[0047] 表1第十六、十七和十八世代高、低脂系肉雞之間體脂性狀的比較
[0048]
【主權(quán)項(xiàng)】
1. 一種輔助篩選低脂系肉雞的血清生化標(biāo)記，其特征在于，是雞血清中HDL-C/LDL-C 的水平。
2. 權(quán)利要求1所述血清生化標(biāo)記，其特征在于，用于肉雞腹部脂肪量的鑒定和低脂系 肉雞選育。
3. 權(quán)利要求2所述應(yīng)用，其特征在于，步驟如下： 1) 檢測(cè)待測(cè)肉雞血清中的HDL-C/LDL-C水平； 2) 比較分析步驟1)所得的待測(cè)肉雞之間的HDL-C/LDL-C水平確定低脂系肉雞。
4. 一種權(quán)利要求1所述血清生化標(biāo)記的篩選方法，其特征在于，步驟如下： 1) 根據(jù)腹部脂肪量確定待篩選肉雞種群中的高脂系肉雞和低脂系肉雞； 2) 確定并檢測(cè)不同世代待篩選高脂系肉雞和低脂系肉雞中的血清生化指標(biāo)，確定血清 生化指標(biāo)在高脂系肉雞和低脂系肉雞中差異的顯著性，篩選出差異顯著的血清生化指標(biāo)， 獲得第一次篩選指標(biāo)； 3) 確定步驟2)所得的第一次篩選指標(biāo)的遺傳相關(guān)系數(shù)，根據(jù)所得遺傳相關(guān)系數(shù)進(jìn)行 第二次篩選，獲得第二次篩選指標(biāo)； 4) 確定步驟3)所得的第二次篩選指標(biāo)的遺傳力，根據(jù)所得的遺傳力進(jìn)行第三次篩選， 獲得血清生化標(biāo)記。
5. 權(quán)利要求4所述方法，其特征在于，步驟1)所述腹部脂肪量，是指腹脂重和腹脂率。
6. 權(quán)利要求4所述方法，其特征在于，步驟2)所述不同世代肉雞，是第16、17和18世 代的肉雞。
7. 權(quán)利要求4所述方法，其特征在于，步驟3)所述第二次篩選，是剔除存在以下任意一 種情況的第一次篩選指標(biāo)： 1) 遺傳相關(guān)系數(shù)大于〇. 30或小于-0. 30 ; 2) 遺傳相關(guān)系數(shù)為正，高脂系的血清HDL-C/LDL-C水平低于低脂系； 3) 遺傳相關(guān)系數(shù)為負(fù)，高脂系的血清HDL-C/LDL-C水平高于低脂系。
8. 權(quán)利要求4所述方法，其特征在于，步驟4)所述第三次篩選，是剔除遺傳力低于0. 5 的第二次篩選指標(biāo)。
【專利摘要】本發(fā)明公開了一種輔助篩選低脂肉雞的血清生化標(biāo)記及應(yīng)用，屬于禽類遺傳育種技術(shù)領(lǐng)域。本發(fā)明所提供的血清生化標(biāo)記是雞血清中HDL-C/LDL-C的水平。該指標(biāo)在低脂系肉雞和高脂系肉雞中存在顯著性差異，同時(shí)具有很高的遺傳相關(guān)系數(shù)和遺傳力，可用于肉雞腹部脂肪量的鑒定和低脂系肉雞的育種。另外，本發(fā)明還提供了該血清生化標(biāo)記的應(yīng)用和篩選方法。
【IPC分類】G01N33-92
【公開號(hào)】CN104714038
【申請(qǐng)?zhí)枴緾N201510154893
【發(fā)明人】李輝, 張慧, 董佳強(qiáng)
【申請(qǐng)人】東北農(nóng)業(yè)大學(xué)
【公開日】2015年6月17日
【申請(qǐng)日】2015年4月2日
【公告號(hào)】CN104502615A