本發(fā)明涉及生物醫(yī)藥。具體而言，本發(fā)明涉及一種脂蛋白（a）的檢測(cè)試劑盒及應(yīng)用。

背景技術(shù)：

1、在我國心血管領(lǐng)域患者基數(shù)較大，藥物市場(chǎng)潛力巨大。根據(jù)《中國心血管健康與疾病報(bào)告2023》，我國腦血管?。╟vd）現(xiàn)患人數(shù)3.3億，其中腦卒中1300萬，冠心病1139萬。降血脂藥物主要是通過降低血液中膽固醇和三酰甘油水平，用于預(yù)防和治療心血管疾病。根據(jù)相關(guān)數(shù)據(jù)，縱觀整個(gè)降脂藥賽道，我國降脂藥市場(chǎng)天花板隨著時(shí)間而持續(xù)抬升。2017-2022年，我國降脂藥市場(chǎng)規(guī)模從274.4億元上升至470億元，年復(fù)合增長率11.36%，2023年市場(chǎng)規(guī)模已經(jīng)超過500億元。這也顯示了降脂藥市場(chǎng)中創(chuàng)新藥物的快速增長和市場(chǎng)對(duì)新型降脂藥物的需求增加?。

2、脂蛋白（a）[lp(a)]已被發(fā)現(xiàn)是心血管疾病（cvd）的危險(xiǎn)因素。lp(a)與冠心病、缺血性中風(fēng)、主動(dòng)脈狹窄、心力衰竭、心房顫動(dòng)和外周動(dòng)脈疾病的風(fēng)險(xiǎn)升高有關(guān)。血漿中l(wèi)p(a)水平高時(shí)，心血管疾病的風(fēng)險(xiǎn)會(huì)增加，這其中有許多病理生理學(xué)途徑。lp(a)是1963年由挪威遺傳學(xué)家kare?berg在一項(xiàng)免疫化學(xué)研究中發(fā)現(xiàn)并命名的。lp(a)是ldl-c的一種亞型/變體，其區(qū)別在于載脂蛋白（a）pob100通過其二硫鍵與一種稱為apo(a)的獨(dú)特糖蛋白共價(jià)結(jié)合。lp(a)通過其低密度脂蛋白膽固醇（ldl-c）部分產(chǎn)生促動(dòng)脈粥樣硬化作用和通過其氧化磷脂含量產(chǎn)生促炎作用，以及通過載脂蛋白[apo(a)]組分產(chǎn)生抗纖溶作用（競(jìng)爭(zhēng)性阻斷纖溶酶原與纖維蛋白結(jié)合）。全球約有20%的人lp(a)水平升高，這主要是由遺傳因素決定的。lp(a)在動(dòng)脈粥樣硬化性心血管疾病（ascvd）介導(dǎo)中的作用機(jī)制包括通過脂蛋白部分對(duì)動(dòng)脈粥樣硬化的貢獻(xiàn)，以及通過與纖溶酶原具有結(jié)構(gòu)相似性的apo(a)部分對(duì)血栓形成的潛在貢獻(xiàn)。

3、然而，針對(duì)lp(a)的研究還需要進(jìn)一步來確定對(duì)心血管事件的潛在臨床益處以及其在長期治療中的效果。目前，已知的測(cè)定脂蛋白(a)的方法有放射免疫測(cè)定法、熒光免疫測(cè)定法、時(shí)間分辨熒光免疫測(cè)定法、酶聯(lián)免疫測(cè)定法。這些常規(guī)方法具有操作繁瑣、耗時(shí)長、檢測(cè)偏差較大，且容易干擾而造成檢測(cè)誤差，影響使用者對(duì)脂蛋白(a)的檢測(cè)效率、檢測(cè)精確性與檢測(cè)穩(wěn)定性。不適于常規(guī)檢驗(yàn)。

技術(shù)實(shí)現(xiàn)思路

1、本發(fā)明提供一種脂蛋白（a）的檢測(cè)試劑盒及應(yīng)用；

2、本發(fā)明的另一個(gè)目的是提供脂蛋白（a）的檢測(cè)試劑盒的使用方法；

3、本發(fā)明的又一個(gè)目的是提脂蛋白（a）的檢測(cè)在檢測(cè)人血漿中脂蛋白（a）含量中的應(yīng)用。

4、本發(fā)明的上述目的通過以下技術(shù)方式實(shí)現(xiàn)：

5、提供一種脂蛋白（a）的檢測(cè)試劑盒，其組成包括包括試劑r1、試劑r2及標(biāo)準(zhǔn)品。

6、所述試劑r1，由商業(yè)購買獲得；

7、所述試劑r2，由商業(yè)購買獲得；

8、所述標(biāo)準(zhǔn)品，由商業(yè)購買獲得。

9、發(fā)明還提供了一種采用脂蛋白（a）的檢測(cè)測(cè)定人血清、血漿、或體外組裝的細(xì)胞上清中的脂蛋白（a）含量，包括如下步驟：

10、?在避光環(huán)境下，用去離子水稀釋好相應(yīng)濃度的標(biāo)準(zhǔn)品，在酶標(biāo)96孔板中加試劑r1（100μl），標(biāo)準(zhǔn)品/樣本（3μl），37℃保溫4-5?min。取出后，向混合液中加試劑r2（25μl）在37℃保溫5-10min。在700nm波長下測(cè)定各孔o(hù)d值。繪制脂蛋白（a）標(biāo)準(zhǔn)曲線，通過標(biāo)準(zhǔn)曲線計(jì)算待測(cè)樣品中脂蛋白（a）的濃度。

11、本發(fā)明提供的脂蛋白（a）檢測(cè)試劑盒，測(cè)定人血清或血漿中脂蛋白（a）線性范圍為22.89?mg/ml-586.67?mg/l。

12、本發(fā)明提供的定量脂蛋白（a）檢測(cè)試劑盒，為臨床前階段提供快速、穩(wěn)定、可靠的脂蛋白（a）檢測(cè)的有效工具。

技術(shù)特征：

1.一種脂蛋白(a)檢測(cè)試劑盒，其組成為：試劑r1、試劑r2、標(biāo)準(zhǔn)品，其中：

2.如權(quán)利要求1所述的脂蛋白(a)檢測(cè)試劑盒，在脂蛋白(a)體外檢測(cè)中的應(yīng)用，其特征在于，包括以下步驟：

3.如權(quán)利要求2所述的應(yīng)用，其特征在于，被測(cè)樣品與試劑r1比例應(yīng)控制在為(1.5～3)：100。

4.如權(quán)利要求2所述的應(yīng)用，其特征在于，試劑r1與待測(cè)樣本的混合比例應(yīng)控制在1：4。

5.?權(quán)利要求2的方法，其特征在于，所述溫度為?37（±1）℃。

6.權(quán)利要求2的方法，其特征在于，所述反應(yīng)的反應(yīng)時(shí)間為5-10分鐘。

7.?權(quán)利要求2的方法，其特征在于，用酶標(biāo)儀檢測(cè)的主波長為500-800?nm。

技術(shù)總結(jié)
本發(fā)明屬于生物檢測(cè)技術(shù)領(lǐng)域，具體涉及一種脂蛋白(a)檢測(cè)試劑盒。本發(fā)明提供的脂蛋白(a)檢測(cè)試劑盒，包括試劑R1、試劑R2及標(biāo)準(zhǔn)品，其中試劑R1包括：三羥甲基氨基甲烷（Tris?Ultra?Pure）、鹽酸、1?氧代?2?羥基吡啶（HPO）、氯化鈉、聚乙醇酯（Thesit）、牛血清白蛋白（BSA?firv）、馬血清（碳吸附）；試劑R2包括三羥甲基氨基甲烷（Tris?Ultra?Pure）、鹽酸、1?氧代?2?羥基吡啶（HPO）、氯化鈉、聚乙醇酯（Thesit）、牛血清白蛋白（BSA?firv）、馬血清（碳吸附）、LPa膠乳抗體。標(biāo)準(zhǔn)品為添加人重組載脂蛋白(a)的人血清或者類似血清基質(zhì)的液體。通過將樣品與試劑按一定的體積比混合，使之發(fā)生一系列反應(yīng)，再將反應(yīng)物置于酶標(biāo)儀下，檢測(cè)主波長700nm處吸光度變化的速度，從而測(cè)算出脂蛋白(a)的濃度大小。精密度好，檢測(cè)范圍內(nèi)線性好，穩(wěn)定性好，生產(chǎn)成本低，空白吸光度低且具有抗干擾性能。

技術(shù)研發(fā)人員：孔云華
受保護(hù)的技術(shù)使用者：蘇州聞泰醫(yī)藥科技有限公司
技術(shù)研發(fā)日：
技術(shù)公布日：2025/1/9