本發(fā)明涉及一種中藥制劑的檢測方法,特別是涉及一種治療感冒的中藥制劑的檢測方法。
背景技術(shù):
感冒是四季常見的外感病,尤以冬春兩季多見,許多家庭都備有治療感冒的中成藥,有的人患感冒后吃了不少藥,但病癥并沒減輕,關(guān)鍵是沒有辨證用藥,中醫(yī)認為感冒一般可分為風寒感冒與風熱感冒兩大類,這兩種感冒病因病機、癥狀、治療原則及用藥差別很大。
少陽感冒顆粒是《衛(wèi)生部藥品標準》中藥成方制劑第一冊收載的品種,處方為柴胡、黃芩、生曬參、甘草、半夏、干姜、大棗、青蒿,是純中藥制劑,具有扶正解表,清熱和中的作用,是目前市場上用于治療寒熱往來,口苦咽干,頭暈?zāi)垦?,不思飲食,心煩惡心的常用藥品,但是,由于當時的條件限制,該配方的檢測方法是上世紀90年代的檢測標準,到如今仍然沒有一套完善的檢測方法來監(jiān)測質(zhì)量,致使藥品的療效明顯下降,影響藥品的安全有效,嚴重損害患者的利益,其中,處方中用量最大的是柴胡,由于柴胡屬于常用藥且使用量較大,而柴胡的產(chǎn)量有限,所以其偽品野棉花根也被有意或者無意混入使用,野棉花根為毛茛科植物野棉花的根,《滇南本草》:“性微寒,味苦,有毒。”《湖南藥物志》:“溫,苦,有大毒?!彼裕瑢ふ乙环N好的辦法來檢測藥品中是否含有野棉花根已是當務(wù)之急。
另一種用量較大的藥材是青蒿,但是青蒿藥材容易與茵陳混淆入藥,給藥品質(zhì)量和療效造成不良影響,青蒿為菊科一年生草本植物青蒿和黃花蒿的全草,而以黃花蒿為最多見、最普遍,性味苦、辛、寒,歸肝、膽、腎經(jīng),主要的功效為清退虛熱,涼血截瘧,解暑解熱等,用于瘧疾寒熱,陰虛發(fā)熱,骨蒸勞瘵,日晡潮熱,手足心熱,暑熱外感,發(fā)熱無汗或有汗,頭昏頭痛,口渴脈洪數(shù),或溫熱病后期,溫熱之邪入陰分,夜熱早涼,熱退無汗之證或溫熱病后低熱不退等等,而茵陳為菊科多年生草本植物茵陳蒿或濱蒿的幼苗,性味苦寒,歸脾、胃、肝、膽經(jīng),主要的功效就是清利濕熱,消退黃疸,亦可用于濕瘡瘙癢、浸流黃水等癥,兩者的作用不同,必須要有相應(yīng)的檢測方法來進行區(qū)分。
技術(shù)實現(xiàn)要素:
本發(fā)明的目的,是提供一種治療感冒的中藥制劑的檢測方法,一方面,檢測偽品野棉花根和茵陳的混入,防止了服用后中毒的藥害事件的發(fā)生,從而保證該藥品安全有效,另一方面,可有效的監(jiān)測不法廠商少投或不投相應(yīng)原料,致使藥品的療效下降的問題。
本發(fā)明的技術(shù)方案是這樣的:
一種治療感冒的中藥制劑,該中藥制劑是以柴胡100重量份、黃芩149.4重量份、生曬參50重量份、甘草100重量份、半夏149.4重量份、干姜100重量份、大棗100重量份、青蒿149.4重量份為原料藥制成的。
該檢測方法包括:
(1)野棉花根的成分鑒別是:以野棉花根對照藥材為對照品,以體積比計的正已烷∶乙酸乙酯=7~11∶0.5~2為展開劑,用薄層色譜法鑒別;
(2)黃芩的成分鑒別是:以黃芩苷為對照品,以體積比計的乙酸乙酯∶丁酮∶甲酸∶水=3~7∶1~5∶0.5~2∶0.5~2為展開劑,用薄層色譜法鑒別;
(3)生曬參的成分鑒別是:以人參對照藥材為對照品,以體積比計的甲苯∶乙酸乙酯∶水=13~17∶2~6∶0.5~2為展開劑,用薄層色譜法鑒別;
(4)甘草的成分鑒別是:以甘草對照藥材為對照品,以體積比計的三氯甲烷∶甲醇∶水=35~45∶7~13∶0.5~2為展開劑,用薄層色譜法鑒別;
(5)茵陳和青蒿的成分鑒別是:分別以濱蒿內(nèi)酯、青蒿素為對照品,以體積比計的石油醚∶乙酸乙酯∶丙酮=5~9∶2~6∶1~3為展開劑,用薄層色譜法鑒別。
該治療感冒的中藥制劑更具體的檢測方法是:
(1)所述的野棉花根的成分鑒別是:取本品8g,加石油醚30~50ml,浸泡10~30分鐘,超聲處理20~40分鐘,濾過,濾液揮發(fā)至2ml,作為供試品溶液;另取野棉花根,粉碎,加石油醚30~50ml,浸泡10~30分鐘,超聲處理20~40分鐘,濾過,濾液揮發(fā)至2ml,作為對照藥材溶液;照薄層色譜法試驗,吸取上述兩種溶液各5μl,分別點于同一硅膠g薄層板上,以體積比計的正已烷∶乙酸乙酯=8~10∶0.8~1.5為展開劑,展開,取出,晾干,噴以10%磷鉬酸乙醇溶液,在105℃加熱至斑點顯色清晰,供試品色譜中,在與對照藥材色譜相應(yīng)的位置上,不得顯相同顏色的斑點;
(2)所述的黃芩的成分鑒別是:取本品6g,研細,加乙醇10~30ml,超聲處理10~30分鐘,濾過,濾液蒸干,殘渣加水10~30ml溶解,用鹽酸調(diào)ph值至2~3,用乙酸乙酯振搖提取1~3次,每次10~30ml,合并乙酸乙酯提取液,蒸干,殘渣加甲醇1ml使溶解,作為供試品溶液;另取黃芩苷對照品,加甲醇制成每1ml含1mg的溶液,作為對照品溶液;照薄層色譜法試驗,吸取上述兩種溶液各10μl,分別點于同一以含4%醋酸鈉的羧甲基纖維素鈉溶液為黏合劑的硅膠g薄層板上,以體積比計的乙酸乙酯∶丁酮∶甲酸∶水=4~6∶2~4∶0.8~1.5∶0.8~1.5為展開劑,展開,取出,晾干,噴以1%三氯化鐵乙醇溶液,供試品色譜中,在與對照品色譜相應(yīng)的位置上,顯相同顏色的斑點;
(3)所述的生曬參的成分鑒別是:取本品8g,研細,再加正丁醇40~60ml,超聲處理20~40分鐘,濾過,濾液用10~30ml正丁醇飽和的水溶液洗滌,棄去水液,將正丁醇液濃縮至干,殘渣加甲醇1ml使溶解,作為供試品溶液;另取人參對照藥材1g,加水煎煮0.5~2小時,放冷,濾過,濾液置分液漏斗中,加正丁醇40~60ml,超聲處理20~40分鐘,濾過,濾液用10~30ml正丁醇飽和的水溶液洗滌,棄去水液,將正丁醇液濃縮至干,殘渣加甲醇1ml使溶解,作為對照藥材溶液;照薄層色譜法試驗,吸取上述兩種溶液各6μl,分別點于同一硅膠g薄層板上,以體積比計的甲苯∶乙酸乙酯∶水=14~16∶3~5∶0.8~1.5為展開劑,展開,取出,晾干,噴以20%磷鉬酸乙醇溶液,在105℃加熱至斑點顯色清晰,供試品色譜中,在與對照藥材色譜相應(yīng)的位置上,顯相同顏色的斑點;
(4)所述的甘草的成分鑒別是:取本品6g,研細,加乙醇10~30ml,超聲處理10~30分鐘,濾過,濾液蒸干,殘渣加水10~30ml溶解,用鹽酸調(diào)ph值至2~3,用乙酸乙酯振搖提取1~3次,每次10~30ml,合并乙酸乙酯提取液,蒸干,殘渣加甲醇1ml使溶解,作為供試品溶液;取甘草對照藥材1g,加水煎煮20~40分鐘,放冷,濾過,濾液濃縮至10~30ml,用水飽和的正丁醇振搖提取1~3次,每次10~30ml,合并正丁醇提取液,用正丁醇飽和的水洗滌1~3次,每次8~12ml,正丁醇液蒸干,殘渣加甲醇1ml使溶解,作為對照藥材溶液;照薄層色譜法吸取供試品溶液10μl與對照藥材溶液5~10μl,分別點于同一硅膠g薄層板上,以體積比計的三氯甲烷∶甲醇∶水=38~42∶9~11∶0.8~1.5為展開劑,展開,取出,晾干,噴以5%香草醛硫酸溶液,在105℃加熱至斑點顯色清晰,供試品色譜中,在與對照藥材色譜相應(yīng)的位置上,顯相同顏色的斑點;
(5)所述的茵陳和青蒿的成分鑒別是:取本品1g,加甲醇8~12ml,超聲處理20~40分鐘,濾過,濾液蒸干,殘渣加甲醇2ml使溶解,作為供試品溶液;取濱蒿內(nèi)酯對照品,加甲醇制成每1ml含0.4mg的溶液,作為濱蒿內(nèi)酯對照品溶液;取青蒿素對照品,加甲醇制成每1ml含0.2mg的溶液,作為青蒿素對照品溶液;照薄層色譜法試驗,吸取上述三種溶液各5μl,分別點于同一硅膠g薄層板上,以體積比計的60~90℃石油醚∶乙酸乙酯∶丙酮=6~8∶3~5∶1.5~2.5為展開劑,展開,取出,晾干,置365nm紫外光燈下檢視,供試品色譜中,在與青蒿素對照品色譜相應(yīng)的位置上,顯相同顏色的斑點,在與濱蒿內(nèi)酯對照品色譜相應(yīng)的位置上,不得顯相同顏色的熒光斑點。
該治療感冒的中藥制劑的檢測方法優(yōu)選:
(1)所述的野棉花根的成分鑒別是:取本品8g,加石油醚40ml,浸泡20分鐘,超聲處理30分鐘,濾過,濾液揮發(fā)至2ml,作為供試品溶液;另取野棉花根,粉碎,加石油醚40ml,浸泡20分鐘,超聲處理30分鐘,濾過,濾液揮發(fā)至2ml,作為對照藥材溶液;照薄層色譜法試驗,吸取上述兩種溶液各5μl,分別點于同一硅膠g薄層板上,以體積比計的正已烷∶乙酸乙酯=9∶1為展開劑,展開,取出,晾干,噴以10%磷鉬酸乙醇溶液,在105℃加熱至斑點顯色清晰,供試品色譜中,在與對照藥材色譜相應(yīng)的位置上,不得顯相同顏色的斑點;
(2)所述的黃芩的成分鑒別是:取本品6g,研細,加乙醇20ml,超聲處理20分鐘,濾過,濾液蒸干,殘渣加水20ml溶解,用鹽酸調(diào)ph值至2~3,用乙酸乙酯振搖提取2次,每次20ml,合并乙酸乙酯提取液,蒸干,殘渣加甲醇1ml使溶解,作為供試品溶液;另取黃芩苷對照品,加甲醇制成每1ml含1mg的溶液,作為對照品溶液;照薄層色譜法試驗,吸取上述兩種溶液各10μl,分別點于同一以含4%醋酸鈉的羧甲基纖維素鈉溶液為黏合劑的硅膠g薄層板上,以體積比計的乙酸乙酯∶丁酮∶甲酸∶水=5∶3∶1∶1為展開劑,展開,取出,晾干,噴以1%三氯化鐵乙醇溶液,供試品色譜中,在與對照品色譜相應(yīng)的位置上,顯相同顏色的斑點;
(3)所述的生曬參的成分鑒別是:取本品8g,研細,再加正丁醇50ml,超聲處理30分鐘,濾過,濾液用20ml正丁醇飽和的水溶液洗滌,棄去水液,將正丁醇液濃縮至干,殘渣加甲醇1ml使溶解,作為供試品溶液;另取人參對照藥材1g,加水煎煮1小時,放冷,濾過,濾液置分液漏斗中,加正丁醇50ml,超聲處理30分鐘,濾過,濾液用20ml正丁醇飽和的水溶液洗滌,棄去水液,將正丁醇液濃縮至干,殘渣加甲醇1ml使溶解,作為對照藥材溶液;照薄層色譜法試驗,吸取上述兩種溶液各6μl,分別點于同一硅膠g薄層板上,以體積比計的甲苯∶乙酸乙酯∶水=15∶4∶1為展開劑,展開,取出,晾干,噴以20%磷鉬酸乙醇溶液,在105℃加熱至斑點顯色清晰,供試品色譜中,在與對照藥材色譜相應(yīng)的位置上,顯相同顏色的斑點;
(4)所述的甘草的成分鑒別是:取本品6g,研細,加乙醇20ml,超聲處理20分鐘,濾過,濾液蒸干,殘渣加水20ml溶解,用鹽酸調(diào)ph值至2~3,用乙酸乙酯振搖提取2次,每次20ml,合并乙酸乙酯提取液,蒸干,殘渣加甲醇1ml使溶解,作為供試品溶液;取甘草對照藥材1g,加水煎煮30分鐘,放冷,濾過,濾液濃縮至20ml,用水飽和的正丁醇振搖提取2次,每次20ml,合并正丁醇提取液,用正丁醇飽和的水洗滌2次,每次10ml,正丁醇液蒸干,殘渣加甲醇1ml使溶解,作為對照藥材溶液;照薄層色譜法吸取供試品溶液10μl與對照藥材溶液5~10μl,分別點于同一硅膠g薄層板上,以體積比計的三氯甲烷∶甲醇∶水=40∶10∶1為展開劑,展開,取出,晾干,噴以5%香草醛硫酸溶液,在105℃加熱至斑點顯色清晰,供試品色譜中,在與對照藥材色譜相應(yīng)的位置上,顯相同顏色的斑點;
(5)所述的茵陳和青蒿的成分鑒別是:取本品1g,加甲醇10ml,超聲處理30分鐘,濾過,濾液蒸干,殘渣加甲醇2ml使溶解,作為供試品溶液;取濱蒿內(nèi)酯對照品,加甲醇制成每1ml含0.4mg的溶液,作為濱蒿內(nèi)酯對照品溶液;取青蒿素對照品,加甲醇制成每1ml含0.2mg的溶液,作為青蒿素對照品溶液;照薄層色譜法試驗,吸取上述三種溶液各5μl,分別點于同一硅膠g薄層板上,以體積比計的60~90℃石油醚∶乙酸乙酯∶丙酮=7∶4∶2為展開劑,展開,取出,晾干,置365nm紫外光燈下檢視,供試品色譜中,在與青蒿素對照品色譜相應(yīng)的位置上,顯相同顏色的斑點,在與濱蒿內(nèi)酯對照品色譜相應(yīng)的位置上,不得顯相同顏色的熒光斑點。
本發(fā)明的有益效果:
本發(fā)明提供一種治療感冒的中藥制劑的檢測方法,通過對該治療感冒的中藥制劑(少陽感冒顆粒)中的黃芩、甘草、生曬參的成分鑒定,讓幾種原料藥材有了明確的質(zhì)量指標,確保了該治療感冒的中藥制劑中各味藥材的使用,避免了不法廠商不加或者少加原料藥材,從而保證了藥品的療效,另一方面,柴胡的偽品野棉花根和青蒿藥材的混淆品茵陳也能有效的檢測,從而避免了有毒成分危害患者的健康,本發(fā)明能更好更全面地監(jiān)測該治療感冒的中藥制劑的品質(zhì),而且能有效的控制不法廠商生產(chǎn)偽劣少陽感冒顆粒,從而保證了藥品的療效和安全,保證了患者的利益,本發(fā)明科學(xué)合理、切實可行。
具體實施方式
實施例1
處方:柴胡100g、黃芩149.4g、生曬參50g、甘草100g、半夏149.4g、干姜100g、大棗100g、青蒿149.4g。
制法:以上八味,將柴胡、干姜提取揮發(fā)以油,藥渣與其余黃芩等六味,加水煎煮三次,第一次3小時,第二次2小時,第三次1小時,合并煎液,濾過,濾液濃縮至相對密度為1.40的清膏,噴霧干燥,加蔗糖446g,糊精150g,混勻,以70%乙醇制粒,干燥噴入揮發(fā)油,混勻,即得,分裝,每袋重8g。
性狀:本品為棕褐色顆粒;氣芳香,味甘、微苦。
檢查:應(yīng)符合沖劑項下有關(guān)的各項規(guī)定(《中國藥典》2015年版)。
成分鑒別:
(1)野棉花根的成分鑒別是:取本品8g,加石油醚30ml,浸泡10分鐘,超聲處理20分鐘,濾過,濾液揮發(fā)至2ml,作為供試品溶液;另取野棉花根,粉碎,加石油醚30ml,浸泡10分鐘,超聲處理20分鐘,濾過,濾液揮發(fā)至2ml,作為對照藥材溶液;照薄層色譜法試驗,吸取上述兩種溶液各5μl,分別點于同一硅膠g薄層板上,以體積比計的正已烷∶乙酸乙酯=7∶0.5為展開劑,展開,取出,晾干,噴以10%磷鉬酸乙醇溶液,在105℃加熱至斑點顯色清晰,供試品色譜中,在與對照藥材色譜相應(yīng)的位置上,不顯相同顏色的斑點;
(2)黃芩的成分鑒別是:取本品6g,研細,加乙醇10ml,超聲處理10分鐘,濾過,濾液蒸干,殘渣加水10ml溶解,用鹽酸調(diào)ph值至2~3,用乙酸乙酯振搖提取1次,每次10ml,合并乙酸乙酯提取液,蒸干,殘渣加甲醇1ml使溶解,作為供試品溶液;另取黃芩苷對照品,加甲醇制成每1ml含1mg的溶液,作為對照品溶液;照薄層色譜法試驗,吸取上述兩種溶液各10μl,分別點于同一以含4%醋酸鈉的羧甲基纖維素鈉溶液為黏合劑的硅膠g薄層板上,以體積比計的乙酸乙酯∶丁酮∶甲酸∶水=3∶1∶0.5∶0.5為展開劑,展開,取出,晾干,噴以1%三氯化鐵乙醇溶液,供試品色譜中,在與對照品色譜相應(yīng)的位置上,顯相同顏色的斑點;
(3)生曬參的成分鑒別是:取本品8g,研細,再加正丁醇60ml,超聲處理40分鐘,濾過,濾液用30ml正丁醇飽和的水溶液洗滌,棄去水液,將正丁醇液濃縮至干,殘渣加甲醇1ml使溶解,作為供試品溶液;另取人參對照藥材1g,加水煎煮0.5小時,放冷,濾過,濾液置分液漏斗中,加正丁醇40ml,超聲處理20分鐘,濾過,濾液用10ml正丁醇飽和的水溶液洗滌,棄去水液,將正丁醇液濃縮至干,殘渣加甲醇1ml使溶解,作為對照藥材溶液;照薄層色譜法試驗,吸取上述兩種溶液各6μl,分別點于同一硅膠g薄層板上,以體積比計的甲苯∶乙酸乙酯∶水=13∶2∶0.5為展開劑,展開,取出,晾干,噴以20%磷鉬酸乙醇溶液,在105℃加熱至斑點顯色清晰,供試品色譜中,在與對照藥材色譜相應(yīng)的位置上,顯相同顏色的斑點;
(4)甘草的成分鑒別是:取本品6g,研細,加乙醇10ml,超聲處理10分鐘,濾過,濾液蒸干,殘渣加水10ml溶解,用鹽酸調(diào)ph值至2~3,用乙酸乙酯振搖提取1次,每次10ml,合并乙酸乙酯提取液,蒸干,殘渣加甲醇1ml使溶解,作為供試品溶液;取甘草對照藥材1g,加水煎煮20分鐘,放冷,濾過,濾液濃縮至10ml,用水飽和的正丁醇振搖提取1次,每次10ml,合并正丁醇提取液,用正丁醇飽和的水洗滌1次,每次8ml,正丁醇液蒸干,殘渣加甲醇1ml使溶解,作為對照藥材溶液;照薄層色譜法吸取供試品溶液10μl與對照藥材溶液5~10μl,分別點于同一硅膠g薄層板上,以體積比計的三氯甲烷∶甲醇∶水=35∶7∶0.5為展開劑,展開,取出,晾干,噴以5%香草醛硫酸溶液,在105℃加熱至斑點顯色清晰,供試品色譜中,在與對照藥材色譜相應(yīng)的位置上,顯相同顏色的斑點;
(5)茵陳和青蒿的成分鑒別是:取本品1g,加甲醇8ml,超聲處理20分鐘,濾過,濾液蒸干,殘渣加甲醇2ml使溶解,作為供試品溶液;取濱蒿內(nèi)酯對照品,加甲醇制成每1ml含0.4mg的溶液,作為濱蒿內(nèi)酯對照品溶液;取青蒿素對照品,加甲醇制成每1ml含0.2mg的溶液,作為青蒿素對照品溶液;照薄層色譜法試驗,吸取上述三種溶液各5μl,分別點于同一硅膠g薄層板上,以體積比計的60~90℃石油醚∶乙酸乙酯∶丙酮=5∶2∶1為展開劑,展開,取出,晾干,置365nm紫外光燈下檢視,供試品色譜中,在與青蒿素對照品色譜相應(yīng)的位置上,顯相同顏色的斑點,在與濱蒿內(nèi)酯對照品色譜相應(yīng)的位置上,不顯相同顏色的熒光斑點。
黃芩苷的含量測定:
照高效液相色譜法測定
色譜條件與系統(tǒng)適用性試驗以十八烷基硅烷鍵合硅膠為填充劑;以體積比計的甲醇∶水∶磷酸=47∶53∶0.2為流動相,檢測波長為315nm,理論板數(shù)按黃芩苷峰計算應(yīng)不低于3000。
對照品溶液的制備取黃芩苷對照品適量,精密稱定,加70%乙醇制成每1ml含60μg溶液,即得。
供試品溶液的制備取裝量差異項下的本品,混勻,取適量,研細,取3g,精密稱定,置具塞錐形瓶中,精密加入70%乙醇50ml,密塞,稱定重量,超聲處理(功率250w,頻率50khz)30分鐘,放冷,再稱定重量,用70%乙醇補足減失的重量,搖勻,濾過,取續(xù)濾液,即得。
測定法分別精密吸取對照品溶液和供試品溶液各10μl,注入液相色譜儀,測定,即得。
本品每袋重8g,含黃芩以黃芩苷計,應(yīng)不少于20.0mg。
結(jié)論:本品每袋重8g,含黃芩以黃芩苷計為24.2mg。(本品每袋重8g,含黃芩以黃芩苷計,為24.4mg。本品中不含有野棉花根和青蒿。
實施例2
本實施例中,除成分鑒別方法中的步驟(1)至步驟(5)于實施例1不同之外,其余方法均與實施例1相同。
(1)野棉花根的成分鑒別是:取本品8g,加石油醚50ml,浸泡30分鐘,超聲處理40分鐘,濾過,濾液揮發(fā)至2ml,作為供試品溶液;另取野棉花根,粉碎,加石油醚50ml,浸泡30分鐘,超聲處理40分鐘,濾過,濾液揮發(fā)至2ml,作為對照藥材溶液;照薄層色譜法試驗,吸取上述兩種溶液各5μl,分別點于同一硅膠g薄層板上,以體積比計的正已烷∶乙酸乙酯=11∶2為展開劑,展開,取出,晾干,噴以10%磷鉬酸乙醇溶液,在105℃加熱至斑點顯色清晰,供試品色譜中,在與對照藥材色譜相應(yīng)的位置上,不顯相同顏色的斑點;
(2)黃芩的成分鑒別是:取本品6g,研細,加乙醇30ml,超聲處理30分鐘,濾過,濾液蒸干,殘渣加水30ml溶解,用鹽酸調(diào)ph值至2~3,用乙酸乙酯振搖提取3次,每次30ml,合并乙酸乙酯提取液,蒸干,殘渣加甲醇1ml使溶解,作為供試品溶液;另取黃芩苷對照品,加甲醇制成每1ml含1mg的溶液,作為對照品溶液;照薄層色譜法試驗,吸取上述兩種溶液各10μl,分別點于同一以含4%醋酸鈉的羧甲基纖維素鈉溶液為黏合劑的硅膠g薄層板上,以體積比計的乙酸乙酯∶丁酮∶甲酸∶水=7∶5∶2∶2為展開劑,展開,取出,晾干,噴以1%三氯化鐵乙醇溶液,供試品色譜中,在與對照品色譜相應(yīng)的位置上,顯相同顏色的斑點;
(3)生曬參的成分鑒別是:取本品8g,研細,再加正丁醇60ml,超聲處理40分鐘,濾過,濾液用30ml正丁醇飽和的水溶液洗滌,棄去水液,將正丁醇液濃縮至干,殘渣加甲醇1ml使溶解,作為供試品溶液;另取人參對照藥材1g,加水煎煮2小時,放冷,濾過,濾液置分液漏斗中,加正丁醇60ml,超聲處理40分鐘,濾過,濾液用30ml正丁醇飽和的水溶液洗滌,棄去水液,將正丁醇液濃縮至干,殘渣加甲醇1ml使溶解,作為對照藥材溶液;照薄層色譜法試驗,吸取上述兩種溶液各6μl,分別點于同一硅膠g薄層板上,以體積比計的甲苯∶乙酸乙酯∶水=17∶6∶2為展開劑,展開,取出,晾干,噴以20%磷鉬酸乙醇溶液,在105℃加熱至斑點顯色清晰,供試品色譜中,在與對照藥材色譜相應(yīng)的位置上,顯相同顏色的斑點;
(4)甘草的成分鑒別是:取本品6g,研細,加乙醇30ml,超聲處理30分鐘,濾過,濾液蒸干,殘渣加水30ml溶解,用鹽酸調(diào)ph值至2~3,用乙酸乙酯振搖提取3次,每次30ml,合并乙酸乙酯提取液,蒸干,殘渣加甲醇1ml使溶解,作為供試品溶液;取甘草對照藥材1g,加水煎煮40分鐘,放冷,濾過,濾液濃縮至30ml,用水飽和的正丁醇振搖提取3次,每次30ml,合并正丁醇提取液,用正丁醇飽和的水洗滌3次,每次12ml,正丁醇液蒸干,殘渣加甲醇1ml使溶解,作為對照藥材溶液;照薄層色譜法吸取供試品溶液10μl與對照藥材溶液5~10μl,分別點于同一硅膠g薄層板上,以體積比計的三氯甲烷∶甲醇∶水=45∶13∶2為展開劑,展開,取出,晾干,噴以5%香草醛硫酸溶液,在105℃加熱至斑點顯色清晰,供試品色譜中,在與對照藥材色譜相應(yīng)的位置上,顯相同顏色的斑點;
(5)茵陳和青蒿的成分鑒別是:取本品1g,加甲醇12ml,超聲處理40分鐘,濾過,濾液蒸干,殘渣加甲醇2ml使溶解,作為供試品溶液;取濱蒿內(nèi)酯對照品,加甲醇制成每1ml含0.4mg的溶液,作為濱蒿內(nèi)酯對照品溶液;取青蒿素對照品,加甲醇制成每1ml含0.2mg的溶液,作為青蒿素對照品溶液;照薄層色譜法試驗,吸取上述三種溶液各5μl,分別點于同一硅膠g薄層板上,以體積比計的60~90℃石油醚∶乙酸乙酯∶丙酮=9∶6∶3為展開劑,展開,取出,晾干,置365nm紫外光燈下檢視,供試品色譜中,在與青蒿素對照品色譜相應(yīng)的位置上,顯相同顏色的斑點,在與濱蒿內(nèi)酯對照品色譜相應(yīng)的位置上,不顯相同顏色的熒光斑點。
實施例3
本實施例中,除成分鑒別方法中的步驟(1)至步驟(5)于實施例1不同之外,其余方法均與實施例1相同。
(1)野棉花根的成分鑒別是:取本品8g,加石油醚30ml,浸泡10分鐘,超聲處理20分鐘,濾過,濾液揮發(fā)至2ml,作為供試品溶液;另取野棉花根,粉碎,加石油醚30ml,浸泡10分鐘,超聲處理20分鐘,濾過,濾液揮發(fā)至2ml,作為對照藥材溶液;照薄層色譜法試驗,吸取上述兩種溶液各5μl,分別點于同一硅膠g薄層板上,以體積比計的正已烷∶乙酸乙酯=8∶0.8為展開劑,展開,取出,晾干,噴以10%磷鉬酸乙醇溶液,在105℃加熱至斑點顯色清晰,供試品色譜中,在與對照藥材色譜相應(yīng)的位置上,不顯相同顏色的斑點;
(2)黃芩的成分鑒別是:取本品6g,研細,加乙醇10ml,超聲處理10分鐘,濾過,濾液蒸干,殘渣加水10ml溶解,用鹽酸調(diào)ph值至2~3,用乙酸乙酯振搖提取1次,每次10ml,合并乙酸乙酯提取液,蒸干,殘渣加甲醇1ml使溶解,作為供試品溶液;另取黃芩苷對照品,加甲醇制成每1ml含1mg的溶液,作為對照品溶液;照薄層色譜法試驗,吸取上述兩種溶液各10μl,分別點于同一以含4%醋酸鈉的羧甲基纖維素鈉溶液為黏合劑的硅膠g薄層板上,以體積比計的乙酸乙酯∶丁酮∶甲酸∶水=4∶2∶0.8∶0.8為展開劑,展開,取出,晾干,噴以1%三氯化鐵乙醇溶液,供試品色譜中,在與對照品色譜相應(yīng)的位置上,顯相同顏色的斑點;
(3)生曬參的成分鑒別是:取本品8g,研細,再加正丁醇60ml,超聲處理40分鐘,濾過,濾液用30ml正丁醇飽和的水溶液洗滌,棄去水液,將正丁醇液濃縮至干,殘渣加甲醇1ml使溶解,作為供試品溶液;另取人參對照藥材1g,加水煎煮0.5小時,放冷,濾過,濾液置分液漏斗中,加正丁醇40ml,超聲處理20分鐘,濾過,濾液用10ml正丁醇飽和的水溶液洗滌,棄去水液,將正丁醇液濃縮至干,殘渣加甲醇1ml使溶解,作為對照藥材溶液;照薄層色譜法試驗,吸取上述兩種溶液各6μl,分別點于同一硅膠g薄層板上,以體積比計的甲苯∶乙酸乙酯∶水=14∶3∶0.8為展開劑,展開,取出,晾干,噴以20%磷鉬酸乙醇溶液,在105℃加熱至斑點顯色清晰,供試品色譜中,在與對照藥材色譜相應(yīng)的位置上,顯相同顏色的斑點;
(4)甘草的成分鑒別是:取本品6g,研細,加乙醇10ml,超聲處理10分鐘,濾過,濾液蒸干,殘渣加水10ml溶解,用鹽酸調(diào)ph值至2~3,用乙酸乙酯振搖提取1次,每次10ml,合并乙酸乙酯提取液,蒸干,殘渣加甲醇1ml使溶解,作為供試品溶液;取甘草對照藥材1g,加水煎煮20分鐘,放冷,濾過,濾液濃縮至10ml,用水飽和的正丁醇振搖提取1次,每次10ml,合并正丁醇提取液,用正丁醇飽和的水洗滌1次,每次8ml,正丁醇液蒸干,殘渣加甲醇1ml使溶解,作為對照藥材溶液;照薄層色譜法吸取供試品溶液10μl與對照藥材溶液5~10μl,分別點于同一硅膠g薄層板上,以體積比計的三氯甲烷∶甲醇∶水=38∶9∶0.8為展開劑,展開,取出,晾干,噴以5%香草醛硫酸溶液,在105℃加熱至斑點顯色清晰,供試品色譜中,在與對照藥材色譜相應(yīng)的位置上,顯相同顏色的斑點;
(5)茵陳和青蒿的成分鑒別是:取本品1g,加甲醇8ml,超聲處理20分鐘,濾過,濾液蒸干,殘渣加甲醇2ml使溶解,作為供試品溶液;取濱蒿內(nèi)酯對照品,加甲醇制成每1ml含0.4mg的溶液,作為濱蒿內(nèi)酯對照品溶液;取青蒿素對照品,加甲醇制成每1ml含0.2mg的溶液,作為青蒿素對照品溶液;照薄層色譜法試驗,吸取上述三種溶液各5μl,分別點于同一硅膠g薄層板上,以體積比計的60~90℃石油醚∶乙酸乙酯∶丙酮=6∶3∶1.5為展開劑,展開,取出,晾干,置365nm紫外光燈下檢視,供試品色譜中,在與青蒿素對照品色譜相應(yīng)的位置上,顯相同顏色的斑點,在與濱蒿內(nèi)酯對照品色譜相應(yīng)的位置上,不顯相同顏色的熒光斑點。
實施例4
本實施例中,除成分鑒別方法中的步驟(1)至步驟(5)于實施例1不同之外,其余方法均與實施例1相同。
(1)野棉花根的成分鑒別是:取本品8g,加石油醚50ml,浸泡30分鐘,超聲處理40分鐘,濾過,濾液揮發(fā)至2ml,作為供試品溶液;另取野棉花根,粉碎,加石油醚50ml,浸泡30分鐘,超聲處理40分鐘,濾過,濾液揮發(fā)至2ml,作為對照藥材溶液;照薄層色譜法試驗,吸取上述兩種溶液各5μl,分別點于同一硅膠g薄層板上,以體積比計的正已烷∶乙酸乙酯=10∶1.5為展開劑,展開,取出,晾干,噴以10%磷鉬酸乙醇溶液,在105℃加熱至斑點顯色清晰,供試品色譜中,在與對照藥材色譜相應(yīng)的位置上,不顯相同顏色的斑點;
(2)黃芩的成分鑒別是:取本品6g,研細,加乙醇30ml,超聲處理30分鐘,濾過,濾液蒸干,殘渣加水30ml溶解,用鹽酸調(diào)ph值至2~3,用乙酸乙酯振搖提取3次,每次30ml,合并乙酸乙酯提取液,蒸干,殘渣加甲醇1ml使溶解,作為供試品溶液;另取黃芩苷對照品,加甲醇制成每1ml含1mg的溶液,作為對照品溶液;照薄層色譜法試驗,吸取上述兩種溶液各10μl,分別點于同一以含4%醋酸鈉的羧甲基纖維素鈉溶液為黏合劑的硅膠g薄層板上,以體積比計的乙酸乙酯∶丁酮∶甲酸∶水=6∶4∶1.5∶1.5為展開劑,展開,取出,晾干,噴以1%三氯化鐵乙醇溶液,供試品色譜中,在與對照品色譜相應(yīng)的位置上,顯相同顏色的斑點;
(3)生曬參的成分鑒別是:取本品8g,研細,再加正丁醇60ml,超聲處理40分鐘,濾過,濾液用30ml正丁醇飽和的水溶液洗滌,棄去水液,將正丁醇液濃縮至干,殘渣加甲醇1ml使溶解,作為供試品溶液;另取人參對照藥材1g,加水煎煮2小時,放冷,濾過,濾液置分液漏斗中,加正丁醇60ml,超聲處理40分鐘,濾過,濾液用30ml正丁醇飽和的水溶液洗滌,棄去水液,將正丁醇液濃縮至干,殘渣加甲醇1ml使溶解,作為對照藥材溶液;照薄層色譜法試驗,吸取上述兩種溶液各6μl,分別點于同一硅膠g薄層板上,以體積比計的甲苯∶乙酸乙酯∶水=16∶5∶1.5為展開劑,展開,取出,晾干,噴以20%磷鉬酸乙醇溶液,在105℃加熱至斑點顯色清晰,供試品色譜中,在與對照藥材色譜相應(yīng)的位置上,顯相同顏色的斑點;
(4)甘草的成分鑒別是:取本品6g,研細,加乙醇30ml,超聲處理30分鐘,濾過,濾液蒸干,殘渣加水30ml溶解,用鹽酸調(diào)ph值至2~3,用乙酸乙酯振搖提取3次,每次30ml,合并乙酸乙酯提取液,蒸干,殘渣加甲醇1ml使溶解,作為供試品溶液;取甘草對照藥材1g,加水煎煮40分鐘,放冷,濾過,濾液濃縮至30ml,用水飽和的正丁醇振搖提取3次,每次30ml,合并正丁醇提取液,用正丁醇飽和的水洗滌3次,每次12ml,正丁醇液蒸干,殘渣加甲醇1ml使溶解,作為對照藥材溶液;照薄層色譜法吸取供試品溶液10μl與對照藥材溶液5~10μl,分別點于同一硅膠g薄層板上,以體積比計的三氯甲烷∶甲醇∶水=42∶11∶1.5為展開劑,展開,取出,晾干,噴以5%香草醛硫酸溶液,在105℃加熱至斑點顯色清晰,供試品色譜中,在與對照藥材色譜相應(yīng)的位置上,顯相同顏色的斑點;
(5)茵陳和青蒿的成分鑒別是:取本品1g,加甲醇12ml,超聲處理40分鐘,濾過,濾液蒸干,殘渣加甲醇2ml使溶解,作為供試品溶液;取濱蒿內(nèi)酯對照品,加甲醇制成每1ml含0.4mg的溶液,作為濱蒿內(nèi)酯對照品溶液;取青蒿素對照品,加甲醇制成每1ml含0.2mg的溶液,作為青蒿素對照品溶液;照薄層色譜法試驗,吸取上述三種溶液各5μl,分別點于同一硅膠g薄層板上,以體積比計的60~90℃石油醚∶乙酸乙酯∶丙酮=8∶5∶2.5為展開劑,展開,取出,晾干,置365nm紫外光燈下檢視,供試品色譜中,在與青蒿素對照品色譜相應(yīng)的位置上,顯相同顏色的斑點,在與濱蒿內(nèi)酯對照品色譜相應(yīng)的位置上,不顯相同顏色的熒光斑點。
實施例5
本實施例中,除成分鑒別方法中的步驟(1)至步驟(5)于實施例1不同之外,其余方法均與實施例1相同。
成分鑒別方法:
(1)野棉花根的成分鑒別是:取本品8g,加石油醚40ml,浸泡20分鐘,超聲處理30分鐘,濾過,濾液揮發(fā)至2ml,作為供試品溶液;另取野棉花根,粉碎,加石油醚40ml,浸泡20分鐘,超聲處理30分鐘,濾過,濾液揮發(fā)至2ml,作為對照藥材溶液;照薄層色譜法試驗,吸取上述兩種溶液各5μl,分別點于同一硅膠g薄層板上,以體積比計的正已烷∶乙酸乙酯=9∶1為展開劑,展開,取出,晾干,噴以10%磷鉬酸乙醇溶液,在105℃加熱至斑點顯色清晰,供試品色譜中,在與對照藥材色譜相應(yīng)的位置上,不顯相同顏色的斑點;
(2)黃芩的成分鑒別是:取本品6g,研細,加乙醇20ml,超聲處理20分鐘,濾過,濾液蒸干,殘渣加水20ml溶解,用鹽酸調(diào)ph值至2~3,用乙酸乙酯振搖提取2次,每次20ml,合并乙酸乙酯提取液,蒸干,殘渣加甲醇1ml使溶解,作為供試品溶液;另取黃芩苷對照品,加甲醇制成每1ml含1mg的溶液,作為對照品溶液;照薄層色譜法試驗,吸取上述兩種溶液各10μl,分別點于同一以含4%醋酸鈉的羧甲基纖維素鈉溶液為黏合劑的硅膠g薄層板上,以體積比計的乙酸乙酯∶丁酮∶甲酸∶水=5∶3∶1∶1為展開劑,展開,取出,晾干,噴以1%三氯化鐵乙醇溶液,供試品色譜中,在與對照品色譜相應(yīng)的位置上,顯相同顏色的斑點;
(3)生曬參的成分鑒別是:取本品8g,研細,再加正丁醇50ml,超聲處理30分鐘,濾過,濾液用20ml正丁醇飽和的水溶液洗滌,棄去水液,將正丁醇液濃縮至干,殘渣加甲醇1ml使溶解,作為供試品溶液;另取人參對照藥材1g,加水煎煮1小時,放冷,濾過,濾液置分液漏斗中,加正丁醇50ml,超聲處理30分鐘,濾過,濾液用20ml正丁醇飽和的水溶液洗滌,棄去水液,將正丁醇液濃縮至干,殘渣加甲醇1ml使溶解,作為對照藥材溶液;照薄層色譜法試驗,吸取上述兩種溶液各6μl,分別點于同一硅膠g薄層板上,以體積比計的甲苯∶乙酸乙酯∶水=15∶4∶1為展開劑,展開,取出,晾干,噴以20%磷鉬酸乙醇溶液,在105℃加熱至斑點顯色清晰,供試品色譜中,在與對照藥材色譜相應(yīng)的位置上,顯相同顏色的斑點;
(4)甘草的成分鑒別是:取本品6g,研細,加乙醇20ml,超聲處理20分鐘,濾過,濾液蒸干,殘渣加水20ml溶解,用鹽酸調(diào)ph值至2~3,用乙酸乙酯振搖提取2次,每次20ml,合并乙酸乙酯提取液,蒸干,殘渣加甲醇1ml使溶解,作為供試品溶液;取甘草對照藥材1g,加水煎煮30分鐘,放冷,濾過,濾液濃縮至20ml,用水飽和的正丁醇振搖提取2次,每次20ml,合并正丁醇提取液,用正丁醇飽和的水洗滌2次,每次10ml,正丁醇液蒸干,殘渣加甲醇1ml使溶解,作為對照藥材溶液;照薄層色譜法吸取供試品溶液10μl與對照藥材溶液5~10μl,分別點于同一硅膠g薄層板上,以體積比計的三氯甲烷∶甲醇∶水=40∶10∶1為展開劑,展開,取出,晾干,噴以5%香草醛硫酸溶液,在105℃加熱至斑點顯色清晰,供試品色譜中,在與對照藥材色譜相應(yīng)的位置上,顯相同顏色的斑點;
(5)茵陳和青蒿的成分鑒別是:取本品1g,加甲醇10ml,超聲處理30分鐘,濾過,濾液蒸干,殘渣加甲醇2ml使溶解,作為供試品溶液;取濱蒿內(nèi)酯對照品,加甲醇制成每1ml含0.4mg的溶液,作為濱蒿內(nèi)酯對照品溶液;取青蒿素對照品,加甲醇制成每1ml含0.2mg的溶液,作為青蒿素對照品溶液;照薄層色譜法試驗,吸取上述三種溶液各5μl,分別點于同一硅膠g薄層板上,以體積比計的60~90℃石油醚∶乙酸乙酯∶丙酮=7∶4∶2為展開劑,展開,取出,晾干,置365nm紫外光燈下檢視,供試品色譜中,在與青蒿素對照品色譜相應(yīng)的位置上,顯相同顏色的斑點,在與濱蒿內(nèi)酯對照品色譜相應(yīng)的位置上,不顯相同顏色的熒光斑點。