本發(fā)明屬于中藥鑒別技術(shù)領(lǐng)域，尤其涉及一種赤芍配方顆粒和白芍配方顆粒的鑒別方法。
背景技術(shù)：
白芍、赤芍，常用的中藥材，均為毛茛科植物芍藥，其主要活性成分為以芍藥苷為代表的單萜苷類成分，五沒食子酰葡萄糖為代表的沒食子酸類成分等。芍藥苷主要有效成分具有許多重要性的藥理活性，如：抗炎、抗氧化、神經(jīng)保護、抗腫瘤、止痛等作用。
然而，以現(xiàn)代中藥藥理認識而論，白芍和赤芍是兩種截然不同的中藥材；從植物學的角度來看，白芍與赤芍又同屬一科植物即毛茛科，且?guī)缀跏峭N。白芍和赤芍從外觀上易于分辨，但赤芍配方顆粒和白芍配方顆粒從外觀特征上難于分辨。隨著中國中藥產(chǎn)業(yè)的不斷發(fā)展，中藥各種劑型也相應(yīng)得到廣泛推廣，中藥藥品質(zhì)量保證問題也愈來愈受到藥品生產(chǎn)企業(yè)的重視，中藥鑒別無疑是保證藥品質(zhì)量的一項重要手段，在顯微鑒別、紅外鑒別、指紋圖譜鑒別等多種中藥鑒別技術(shù)當中，薄層鑒別是一種重要的中藥鑒別手段，具有高效、快速、準確的突出優(yōu)點。
針對配方顆粒鑒別中，還沒有赤芍、白芍配方顆粒鑒別方法，本發(fā)明采用薄層色譜方法對赤芍、白芍配方顆粒的專屬性和差異性進行鑒別，解決了相近中藥配方顆粒的無法區(qū)分的難題，同時彌補了赤芍配方顆粒和白芍配方顆粒鑒別技術(shù)領(lǐng)域的一項空缺，可作為一種赤芍配方顆粒和白芍配方顆粒的專屬鑒別和差異性鑒別的方法。
技術(shù)實現(xiàn)要素：
本發(fā)明為了解決現(xiàn)階段僅使用芍藥苷無法鑒別赤芍配方顆粒和白芍配方顆粒的現(xiàn)狀，提供了一種赤芍配方顆粒和白芍配方顆粒的鑒別方法，同時使用對照品和對照藥材進行對照，其中對照藥材處理方法與配方顆粒制法中的藥材提取方法保持一致，即赤芍或白芍對照藥材，加水煎煮，過濾，濾液蒸干，殘渣加甲醇-乙醇和丙酮混合溶液超聲溶解。赤芍配方顆粒、白芍配方顆粒利用薄層色譜直接比對，進行二者區(qū)分。
所述藥材處理方法包括如下步驟：
1)隨行藥材經(jīng)加水煎煮，過濾，濾液蒸干后的殘渣，加甲醇-乙醇和丙酮的混合溶液超聲溶解；
2)赤芍配方顆粒和白芍配方顆粒經(jīng)特定濃度的乙醇超聲溶解處理。
具體的，所述赤芍配方顆粒和白芍配方顆粒的鑒別方法，包括如下步驟：
(1)對照藥材溶液的制備：分別取赤芍、白芍各2g，分別加水50ml，回流提取1小時，過濾，蒸干殘渣加2ml甲醇、乙醇和丙酮溶解；
(2)供試品溶液的制備：取赤芍配方顆粒、白芍配方顆粒各2g，分別用40ml的95％乙醇超聲20分鐘，過濾，濾液蒸干，殘渣加特殊溶劑2ml溶解,作為對照品；
(3)點樣、展開、顯色：吸取對照藥材溶液、供試品溶液、芍藥苷溶液10μl，分別點于同一薄層板上，以三氯甲烷-乙酸乙酯-甲醇-甲酸為展開劑，展開，取出，晾干，噴以顯色劑，在105℃下加熱至有色斑點顯色清晰。
優(yōu)選的，所述赤芍配方顆粒和白芍配方顆粒的鑒別方法，
(1)所述的甲醇-乙醇和丙酮的混合溶液，組分比例為【(0:1)～(1:0)】；
(2)所述的甲醇-乙醇中乙醇濃度(40％～100％)；
(3)所述的展開劑為三氯甲烷-乙酸乙酯-甲醇-甲酸，展開劑各組分比例為【(20～40):(5～10):(8～12)：(0.1～0.3)】，所述顯色劑為5％香草醛硫酸溶液；
(4)所述薄層板為硅膠g薄層板。
進一步，所述赤芍配方顆粒和白芍配方顆粒的鑒別方法：
(1)赤芍配方顆粒和白芍配方顆粒與芍藥苷溶液在薄層色譜rf值為0.5的對應(yīng)位置具有相同的紫色斑點；
(2)赤芍配方顆粒薄層色譜圖(1a)與赤芍藥材薄層色譜圖(1)相應(yīng)rf位置上斑點一一對應(yīng)，可用于赤芍配方顆粒的定性，所述的斑點個數(shù)均為8個，所述斑點的顏色從上往下依次為第1-3斑點為灰色，第4斑點為棕紅色，第5斑點為紫色，第6斑點為紫色，第7-8斑點為灰色；
(3)白芍配方顆粒薄層色譜圖(2a)相比于白芍藥材薄層色譜圖(2)、赤芍配方顆粒薄層色譜圖(1a)在rf值為0.5～0.7處多出一個紅色斑點；
(4)白芍配方顆粒薄層色譜圖(2a)與白芍藥材薄層色譜圖(2)在相應(yīng)rf位置有八個斑點能夠一一對應(yīng)。
本發(fā)明具有以下有益效果：
(1)本發(fā)明鑒別方法中包括對照藥材溶液的制備，即同時以芍藥苷、赤芍藥材和白芍藥材為對照品，且對照藥材的處理方法與配方顆粒制法中的提取方法保持高度一致，均用水煎煮提取，相比于使用乙醇提取制得的對照藥材溶液，采用水煎煮提取制得的對照藥材溶液,其薄層色譜與赤芍配方顆粒、白芍配方顆粒薄層色譜對比分析時更加準確，專屬性更強；
(2)本發(fā)明中對照藥材的處理方法與配方顆粒生產(chǎn)工藝保持高度一致，通過分析白芍配方顆粒供試品色譜相比于白芍藥材對照品色譜、赤芍配方顆粒供試品色譜在rf值為0.5～0.7處是否多出一個斑點，進而針對性地鑒別赤芍配方顆粒和白芍配方顆粒是否按照配方顆粒標準工藝生產(chǎn)；
(3)本發(fā)明同時以芍藥苷、赤芍藥材和白芍藥材為對照品，先對赤芍配方顆粒、白芍配方顆粒定性，然后對照赤芍配方顆粒、白芍配方顆粒的薄層色譜差異作進一步鑒別，彌補了赤芍配方顆粒和白芍配方顆粒鑒別技術(shù)領(lǐng)域的一項空缺，可作為赤芍配方顆粒和白芍配方顆粒的專屬鑒別方法；
(4)本發(fā)明操作簡便、高效，適用于同科近源藥材制劑的真?zhèn)舞b別。
附圖說明
下面結(jié)合附圖和實施例對本發(fā)明進一步說明：
圖1：實施例1中的薄層色譜圖(1為赤芍藥材薄層色譜圖、2為白芍藥材薄層色譜圖、1a赤芍配方顆粒薄層色譜圖、2a白芍配方顆粒薄層色譜圖、3為芍藥苷薄層色譜圖)。
具體實施方式
下面結(jié)合附圖和實施例對本發(fā)明作進一步的說明：
實施例1
(1)對照品溶液的制備：取芍藥苷對照品適量，加乙醇制成2mg/ml的溶液；
(2)對照藥材溶液的制備：取對照藥材2g，加水50ml，回流提取1小時，過濾，蒸干，殘渣加2ml甲醇-乙醇和丙酮(1:0)混合溶液溶解，其中乙醇在甲醇-乙醇中的百分比濃度為40％；
(3)供試品溶液的制備：取赤芍配方顆粒、白芍配方顆粒各2g，分別用40ml的95％乙醇超聲20分鐘，過濾，濾液蒸干，殘渣加甲醇-乙醇和丙酮(1:0)混合溶液2ml溶解；
(4)點樣、展開、顯色：吸取對照品溶液4μl，供試品溶液10μl，分別點于同一硅膠g薄層板上，以三氯甲烷-乙酸乙酯-甲醇-甲酸(20:8:10:0.3)為展開劑，展開，取出，晾干，噴以5％香草醛硫酸溶液，在105℃下加熱至斑點顯色清晰。
實施例2
(1)對照品溶液的制備：取芍藥苷對照品適量，加乙醇制成2mg/ml的溶液；
(2)對照藥材溶液的制備：取對照藥材2g，加水50ml，回流提取1小時，過濾，蒸干，殘渣加2ml甲醇-乙醇和丙酮(1:0.1)混合溶液溶解，其中乙醇在甲醇-乙醇中的百分比濃度為50％；
(3)供試品溶液的制備：取赤芍配方顆粒、白芍配方顆粒各2g，分別用40ml的95％乙醇超聲20分鐘，過濾，濾液蒸干，殘渣加甲醇-乙醇和丙酮(1:0.1)混合溶液2ml溶解；
(4)點樣、展開、顯色：吸取對照品溶液4μl，供試品溶液10μl，分別點于同一硅膠g薄層板上，以三氯甲烷-乙酸乙酯-甲醇-甲酸(40:5:10:0.2)為展開劑，展開，取出，晾干，噴以5％香草醛硫酸溶液，在105℃下加熱至斑點顯色清晰。
實施例3
(1)對照品溶液的制備：取芍藥苷對照品適量，加乙醇制成2mg/ml的溶液
(2)對照藥材溶液的制備：取對照藥材2g，加水50ml，回流提取1小時，過濾，蒸干，殘渣加2ml甲醇-乙醇和丙酮(1:0.5)混合溶液溶解，其中乙醇在甲醇-乙醇中的百分比濃度為60％；
(3)供試品溶液的制備：取赤芍配方顆粒、白芍配方顆粒各2g，分別用40ml的95％乙醇超聲20分鐘，過濾，濾液蒸干，殘渣加甲醇-乙醇和丙酮(1:0.5)混合溶液2ml溶解；
(4)點樣、展開、顯色：吸取對照品溶液4μl，供試品溶液10μl，分別點于同一硅膠g薄層板上，以三氯甲烷-乙酸乙酯-甲醇-甲酸(30:6:15:0.1)為展開劑，展開，取出，晾干，噴以5％香草醛硫酸溶液，在105℃下加熱至斑點顯色清晰。
實施例4
(1)對照品溶液的制備：取芍藥苷對照品適量，加乙醇制成2mg/ml的溶液
(2)對照藥材溶液的制備：取對照藥材2g，加水50ml，回流提取1小時，過濾，蒸干，殘渣加2ml甲醇-乙醇和丙酮(1:1)混合溶液溶解，其中乙醇在甲醇-乙醇中的百分比濃度為70％；
(3)供試品溶液的制備：取赤芍配方顆粒、白芍配方顆粒各2g，分別用40ml的95％乙醇超聲20分鐘，過濾，濾液蒸干，殘渣加甲醇-乙醇和丙酮(1:1)混合溶液2ml溶解；
(4)點樣、展開、顯色：吸取對照品溶液4μl，供試品溶液10μl，分別點于同一硅膠g薄層板上，以三氯甲烷-乙酸乙酯-甲醇-甲酸(30:8:5:0.1)為展開劑，展開，取出，晾干，噴以5％香草醛硫酸溶液，在105℃下加熱至斑點顯色清晰。
實施例5
(1)對照品溶液的制備：取芍藥苷對照品適量，加乙醇制成2mg/ml的溶液
(2)對照藥材溶液的制備：取對照藥材2g，加水50ml，回流提取1小時，過濾，蒸干，殘渣加2ml甲醇-乙醇和丙酮(0.5:1)混合溶液溶解，其中乙醇在甲醇-乙醇中的百分比濃度為80％；
(3)供試品溶液的制備：取赤芍配方顆粒、白芍配方顆粒各2g，分別用40ml的95％乙醇超聲20分鐘，過濾，濾液蒸干，殘渣加甲醇-乙醇和丙酮(0.5:1)混合溶液2ml溶解；
(4)點樣、展開、顯色：吸取對照品溶液4μl，供試品溶液10μl，分別點于同一硅膠g薄層板上，以三氯甲烷-乙酸乙酯-甲醇-甲酸(30:8:5:0.1)為展開劑，展開，取出，晾干，噴以5％香草醛硫酸溶液，在105℃下加熱至斑點顯色清晰。
實施例6
(1)對照品溶液的制備：取芍藥苷對照品適量，加乙醇制成2mg/ml的溶液
(2)對照藥材溶液的制備：取對照藥材2g，加水50ml，回流提取1小時，過濾，蒸干，殘渣加2ml甲醇-乙醇和丙酮(0.1:1)混合溶液溶解，其中乙醇在甲醇-乙醇中的百分比濃度為90％；
(3)供試品溶液的制備：取赤芍配方顆粒、白芍配方顆粒各2g，分別用40ml的95％乙醇超聲20分鐘，過濾，濾液蒸干，殘渣加甲醇-乙醇和丙酮(0.1:1)混合溶液2ml溶解；
(4)點樣、展開、顯色：吸取對照品溶液4μl，供試品溶液10μl，分別點于同一硅膠g薄層板上，以三氯甲烷-乙酸乙酯-甲醇-甲酸(30:8:5:0.1)為展開劑，展開，取出，晾干，噴以5％香草醛硫酸溶液，在105℃下加熱至斑點顯色清晰。
實施例7
(1)對照品溶液的制備：取芍藥苷對照品適量，加乙醇制成2mg/ml的溶液
(2)對照藥材溶液的制備：取對照藥材2g，加水50ml，回流提取1小時，過濾，蒸干，殘渣加2ml甲醇-乙醇和丙酮(0:1)混合溶液溶解；
(3)供試品溶液的制備：取赤芍配方顆粒、白芍配方顆粒各2g，分別用40ml的95％乙醇超聲20分鐘，過濾，濾液蒸干，殘渣加甲醇-乙醇和丙酮(0:1)混合溶液2ml溶解；
(4)點樣、展開、顯色：吸取對照品溶液4μl，供試品溶液10μl，分別點于同一硅膠g薄層板上，以三氯甲烷-乙酸乙酯-甲醇-甲酸(30:8:5:0.1)為展開劑，展開，取出，晾干，噴以5％香草醛硫酸溶液，在105℃下加熱至斑點顯色清晰。
實施例8
(1)對照品溶液的制備：取芍藥苷對照品適量，加乙醇制成2mg/ml的溶液
(2)對照藥材溶液的制備：取對照藥材2g，加水50ml，回流提取1小時，過濾，蒸干，殘渣加2ml乙醇和丙酮(1:1)混合溶液溶解，其中乙醇在甲醇-乙醇中的百分比濃度為100％；
(3)供試品溶液的制備：取赤芍配方顆粒、白芍配方顆粒各2g，分別用40ml的95％乙醇超聲20分鐘，過濾，濾液蒸干，殘渣加乙醇和丙酮(1:1)混合溶液2ml溶解；
(4)點樣、展開、顯色：吸取對照品溶液4μl，供試品溶液10μl，分別點于同一硅膠g薄層板上，以三氯甲烷-乙酸乙酯-甲醇-甲酸(30:8:5:0.1)為展開劑，展開，取出，晾干，噴以5％香草醛硫酸溶液，在105℃下加熱至斑點顯色清晰。
本發(fā)明通過實施例中的薄層色譜方法，可以鑒別赤芍配方顆粒和白芍配方顆粒的差別，如圖1所示，1為赤芍藥材薄層色譜圖、2為白芍藥材薄層色譜圖、1a為赤芍配方顆粒薄層色譜圖、2a為白芍配方顆粒薄層色譜圖、3為芍藥苷薄層色譜圖。
分析對比圖1中各色譜圖：(1)赤芍藥材薄層色譜圖1與白芍藥材薄層色譜圖2、赤芍配方顆粒薄層色譜圖1a、白芍配方顆粒薄層色譜圖2a、芍藥苷薄層色譜圖3相應(yīng)的位置上顯相同顏色的斑點，故供試品中都含有芍藥苷成分；(2)赤芍配方顆粒薄層色譜圖1a與赤芍藥材薄層色譜圖1相應(yīng)位置上斑點一一對應(yīng)，可用于赤芍配方顆粒的定性；(3)白芍配方顆粒供試品色譜相比于白芍藥材對照品色譜、赤芍配方顆粒供試品色譜在在rf值為0.5～0.7處多出一個斑點上，即在虛線位置出現(xiàn)未知a點，明顯不同于赤芍配方顆粒，故通過硅膠g板可以快速鑒別赤芍和白芍配方顆粒。
以上實施例并非僅限于本發(fā)明的保護范圍，所有基于本發(fā)明的基本思想而進行的修改或變動都屬于本發(fā)明的保護范圍。