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一種神經(jīng)氨酸酶檢測試劑盒的制作方法

文檔序號:11052065閱讀:900來源:國知局
一種神經(jīng)氨酸酶檢測試劑盒的制造方法與工藝

本實用新型涉及一種試劑盒,具體涉及一種神經(jīng)氨酸酶檢測試劑盒,屬于生物技術領域。



背景技術:

神經(jīng)氨酸酶又稱唾液酸酶是分布于流感病毒被膜上的一種糖蛋白,它具有抗原性,可以催化唾液酸水解,協(xié)助成熟流感病毒脫離宿主細胞感染新的細胞,在流感病毒的生活周期中扮演了重要的角色。在甲型流感病毒中,神經(jīng)氨酸酶的抗原性會發(fā)生變異,這成為劃分甲型流感病毒亞型的依據(jù),在目前已知的甲型流感病毒中共有9種不同的神經(jīng)氨酸酶抗原型,神經(jīng)氨酸酶檢測試劑盒(Neuraminidase Assay Kit)是一種用熒光法快速高靈敏檢測神經(jīng)氨酸酶活性的試劑盒,現(xiàn)有的檢測試劑盒只具有包裝試劑的功能,并不能為檢測實驗帶來幫助,但現(xiàn)有的很難克服上述問題。



技術實現(xiàn)要素:

本實用新型要解決的技術問題是克服的現(xiàn)有的現(xiàn)有的檢測試劑盒只具有包裝試劑的功能的問題,提供一種神經(jīng)氨酸酶檢測試劑盒。

為了解決上述技術問題,本實用新型提供了如下的技術方案:

本實用新型提供了一種神經(jīng)氨酸酶檢測試劑盒,包括試劑盒、盒蓋、96孔熒光酶標板、第一試管、第二試管、第三試管、第四試管、鉸鏈、鎖簧和鎖孔,所述試劑盒的頂部設置有所述盒蓋,所述盒蓋與所述試劑盒通過所述鉸鏈連接,所述試劑盒的底部設置有所述96孔熒光酶標板,所述96孔熒光酶標板的一側設置有所述第一試管,所述第一試管的一側設置有所述第二試管,所述第二試管的一側設置有所述第三試管,所述第三試管的一側設置有所述第四試管,所述盒蓋的表面設置有所述鎖簧,所述試劑盒的表面設置有所述鎖孔。

作為本實用新型的一種優(yōu)選技術方案,所述第一試管內(nèi)裝有神經(jīng)氨酸酶檢測緩沖液,所述第二試管內(nèi)裝有神經(jīng)氨酸酶,所述第三試管內(nèi)裝有神經(jīng)氨酸酶熒光底物,所述第四試管內(nèi)裝有Milli-Q水。

作為本實用新型的一種優(yōu)選技術方案,所述96孔熒光酶標板表面有96個同樣規(guī)格均勻大小的小孔。

本實用新型所達到的有益效果是:該裝置是一種神經(jīng)氨酸酶檢測試劑盒,本試劑盒可以檢測來源于不同物種的神經(jīng)氨酸酶的酶活力,包括禽流感病毒的神經(jīng)氨酸酶的酶活力。試劑盒中提供了純化的神經(jīng)氨酸酶作為陽性對照,便于檢測體系的建立。試劑盒中提供了可以被神經(jīng)氨酸酶催化產(chǎn)生熒光的底物,該底物被神經(jīng)氨酸酶催化后可以產(chǎn)生較強的熒光,從而實現(xiàn)了對神經(jīng)氨酸酶的快速高靈敏檢測。所產(chǎn)生的熒光物質的最大激發(fā)波長為322nm,最大發(fā)射波長為450nm。激發(fā)波長在310-335nm,發(fā)射波長在430-470nm有良好的檢測效果。用96孔板檢測時,一個包裝的本試劑盒可以檢測100個樣品或標準品,整個裝置設計合理,使用方便,提供了一種神經(jīng)氨酸酶檢測試劑盒。

附圖說明

附圖用來提供對本實用新型的進一步理解,并且構成說明書的一部分,與本實用新型的實施例一起用于解釋本實用新型,并不構成對本實用新型的限制。在附圖中:

圖1是本實用新型的結構示意圖;

圖中:1、試劑盒;2、盒蓋;3、96孔熒光酶標板;4、第一試管;5、第二試管;6、第三試管;7、第四試管;8、鉸鏈;9、鎖簧;10、鎖孔。

具體實施方式

以下結合附圖對本實用新型的優(yōu)選實施例進行說明,應當理解,此處所描述的優(yōu)選實施例僅用于說明和解釋本實用新型,并不用于限定本實用新型。

實施例1

如圖1所示,本實用新型提供一種神經(jīng)氨酸酶檢測試劑盒,包括試劑盒1、盒蓋2、96孔熒光酶標板3、第一試管4、第二試管5、第三試管6、第四試管7、鉸鏈8、鎖簧9和鎖孔10,試劑盒1的頂部設置有盒蓋2,盒蓋2與試劑盒1通過鉸鏈8連接,試劑盒1的底部設置有96孔熒光酶標板3,96孔熒光酶標板3的一側設置有第一試管4,第一試管4的一側設置有第二試管5,第二試管5的一側設置有第三試管6,第三試管6的一側設置有第四試管7,盒蓋2的表面設置有鎖簧9,試劑盒1的表面設置有鎖孔10。

第一試管4內(nèi)裝有神經(jīng)氨酸酶檢測緩沖液,第二試管5內(nèi)裝有神經(jīng)氨酸酶,第三試管6內(nèi)裝有神經(jīng)氨酸酶熒光底物,第四試管7內(nèi)裝有Milli-Q水,便于盛集本實驗所需的各種試劑。

96孔熒光酶標板3表面有96個同樣規(guī)格均勻大小的小孔,用96孔板檢測時,一個包裝的本試劑盒可以檢測100個樣品或標準品。

該裝置是一種神經(jīng)氨酸酶檢測試劑盒,當需要用該裝置時,1.陽性和陰性對照檢測的準備:

a.在96孔熒光酶標板內(nèi)每孔加入70微升神經(jīng)氨酸酶檢測緩沖液。

b.每孔再分別加入10或0微升神經(jīng)氨酸酶。

c.每孔再加入10微升溶解神經(jīng)氨酸酶的溶液。例如神經(jīng)氨酸酶在RIPA溶液中,則加10微升RIPA溶液。

d.每孔再加入0或10微升Milli-Q水使每孔總體積為90微升。

2.樣品檢測的準備:

a.在96孔熒光酶標板內(nèi)每孔加入70微升神經(jīng)氨酸酶檢測緩沖液。

b.每孔再加入10微升神經(jīng)氨酸酶樣品。

c.每孔再加入10微升Milli-Q水使每孔總體積為90微升。

3.檢測:

a.振動混勻約1分鐘。

b.每孔加入10微升神經(jīng)氨酸酶熒光底物。

c.再振動混勻約1分鐘。

d.37℃孵育30分鐘后進行熒光測定。激發(fā)波長為322nm,發(fā)射波長為450nm。

4.計算:

根據(jù)檢測出來的熒光強度可以計算出樣品間神經(jīng)氨酸酶的相對活力。

如果受儀器所限,不能設置前述波長,激發(fā)波長在310-335nm,發(fā)射波長在430-470nm也有良好的檢測效果。孵育時間可根據(jù)樣品中的酶活力適當調整。在酶活力低或樣品量少時,可以延長孵育時間(例如延長時間至1、2或4小時),以提高檢測靈敏度。但當酶活力很高時,孵育時間過長會使反應達到平臺期,此時宜縮短孵育時間。首次測定時,建議在孵育10、20、30、60、120分鐘后分別測定一次熒光強度,以確定比較理想的孵育時間。

最后應說明的是:以上所述僅為本實用新型的優(yōu)選實施例而已,并不用于限制本實用新型,盡管參照前述實施例對本實用新型進行了詳細的說明,對于本領域的技術人員來說,其依然可以對前述各實施例所記載的技術方案進行修改,或者對其中部分技術特征進行等同替換。凡在本實用新型的精神和原則之內(nèi),所作的任何修改、等同替換、改進等,均應包含在本實用新型的保護范圍之內(nèi)。

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